%。
[0021]实施例2
称取1kg干燥管花肉灰蓉(多糖含量3.4%,松果菊苷含量5.0%,麦角留苷含量为
1.2%)，粉碎为直径约0.5cm的颗粒。以60%乙醇作为提取剂，对原料加热提取2次，每次加热2小时，提取温度70°C，原料与提取剂的质量比为1:5 ;将两次提取得到的提取液合并，加入浓缩器中真空浓缩至热比重为1.15,加入500ppm天然澄清剂II型ZTC1+1,过10 μ m的精密过滤器，得到滤液A ;滤液A以2BV/h的速度过层析柱，吸附剂为大孔树脂SP207，收集过柱流出液B ;用3倍于树脂体积的20%乙醇水溶液进行洗脱，流速2BV/h，得到低醇洗脱液C ;再用3倍于树脂体积的90%乙醇水溶液进行洗脱，流速3BV/h，得到高醇洗脱液D ；树脂吸附再生溶剂为5%氢氧化钠、纯化水；将过柱浓缩液浓缩至热比重1.39，进行真空干燥，得到肉苁蓉多糖含量为35.4%的产品I的质量为900g;将低醇洗脱液浓缩至热比重为
1.20，进行喷雾干燥，得到松果菊苷含量为36.5%的产品2的质量为620g ;将高醇洗脱液浓缩至热比重为1.20，进行喷雾干燥，得到松果菊苷含量为27.4%、麦角甾苷含量为12.0%的产品3的质量为920g ;总过程中，多糖收率93.7%，松果菊苷收率为95.68%，麦角留苷收率为 92.0%。
[0022]实施例3
本申请实施例1-2中得到的肉苁蓉多糖可采用苯酚硫酸法进行检测。多糖在硫酸的作用下，先水解成单糖，并迅速脱水生成糖醛衍生物，与苯酚反应生成橙黄色溶液，在490nm处有特征吸收，与标准系列比较定量；称取0.5g肉苁蓉多糖产品，置于50ml具塞离心管内，用5ml水浸润样品，缓慢加入20ml无水乙醇，同时使用涡旋振荡器振摇，使混合均匀，置超声提取器中超声提取30min,提取结束后，于4000r/min离心,离心1min,弃去上清液。不容物用1ml 80%的乙醇溶液洗涤、离心。用水将上述不溶物转入圆底烧瓶，加入50ml蒸馏水，装上磨口的空气冷凝管，于沸水中提取2h。冷却至室温，过滤，将上清液转移至10ml容量瓶中，残渣洗涤2-3次，洗涤液转至容量瓶中，加水定容，此溶液为测定液；制作标准曲线:称取0.1g在105°C烘干至恒重的葡萄糖，置于10ml烧杯中，加水溶解，用容量瓶定容至1000ml，制成标准葡萄糖工作溶液，置4°C冰箱中储存；称取80g重新蒸馏的苯酚于10ml烧杯中，加水溶解，定容至10ml后转至棕色瓶中，制成80%苯酚溶液，置4°C冰箱中避光保存；吸取5ml 80%苯酚溶液，溶于75ml水中，混匀，配成5%苯酚溶液，此溶液现配先用；分别吸取0、0.2ml、0.4ml、0.6ml、0.8ml、1.0ml标准葡萄糖工作溶液置20ml具塞玻璃试管中，用蒸懼水补至1.0ml,向试液中加入1.0ml 5%苯酹溶液，，然后快速加入5.0ml硫酸，静置lOmin。用涡旋振荡器使反应液充分混合，然后将试管放置于30°C水浴中反应20min，于200-600nm范围内测吸光度。以葡萄糖质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，制定标准曲线；结果计算:样品中多糖含量以W计，单位以克每百克(g/100g)表示，按下面公式计算 W=0.9 X KT4HI1 XV1AVv2
Hl1—从标准曲线上差的样品测定液中含糖量，单位为微克
Hl2一样品质量，单位为克
V1—样品定容体积，单位为毫升
V2—比色测定时所移取样品测定液的体积，单位为毫升
0.9一葡萄糖换算成葡聚糖的校正系数
在重复条件下，两次独立测定结果的绝对值不大于10%，以大于10%的情况不超过5%为ill提；样品中淀粉、糊精有无的判定:将3.6g鹏化钟溶于20ml水中，加入1.3g鹏,溶解后稀释至100ml，制成碘溶液；称取0.1g肉苁蓉多糖产品，置于20ml具塞试管中；加入1ml水，超声混合均匀，并离心；量取1ml上清液至20ml具塞试管中，加入一滴碘溶液，混合均匀，观察是否有淀粉或糊精与碘溶液反应后呈现的蓝色或红色；如果出现呈色反应，则判定样品中有淀粉和糊精，则此样品中多糖含量的检测不适于本方法；检测样品均在490nm处具有特征吸收，且吸光度最大。
【主权项】
1.一种提取管花肉苁蓉中有效成分的方法，其特征在于: (1)将干燥的管花肉苁蓉粉碎，以乙醇溶液加热提取2次，合并提取液； (2)将提取液浓缩至热比重为1.15，加入天然澄清剂并过滤，得到滤液A ; (3)滤液A过层析柱，吸附剂为大孔树脂SP207，过柱流出液收集B;用10-30%的乙醇水溶液进行洗脱，得到低醇洗脱液C，其用量为树脂体积的3倍，流速l-2BV/h ;再用60-95%的乙醇水溶液进行洗脱，得到高醇洗脱液D，其用量为树脂体积的3倍，流速2-3BV/h ;树脂吸附再生溶剂为5%氢氧化钠、纯化水； (4)将过柱流出液B浓缩至热比重1.39，进行真空干燥，得到含量在20%-40%的肉苁蓉多糖产品；将低醇洗脱液C浓缩至热比重为1.20，进行喷雾干燥，得到含量在35%以上的松果菊苷产品；将高醇洗脱液D浓缩至热比重为1.20，进行喷雾干燥，得到含量在20%-30%的松果菊苷与含量在10%-20%的麦角甾苷混合产品。
2.如权利要求1所述的一种提取管花肉苁蓉中有效成分的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中，提取溶剂为50%-95%的乙醇水溶液，加热提取温度为70°C，每次提取时间为2h。
3.如权利要求1或2所述的一种提取管花肉苁蓉中有效成分的方法，其特征在于:所述的步骤(2)中，天然澄清剂为II型ZTC1+1，加入量为500-600ppm ;使用1ym精密过滤器过滤。
4.如权利要求1-3中任一项所述的一种提取管花肉苁蓉中有效成分的方法，其特征在于:所述的步骤(3)中，使用30%的乙醇水溶液，以2BV/h的流速，洗脱得到低醇洗脱液C ；使用80%的乙醇水溶液，以3BV/h的流速，洗脱得到高醇洗脱液D。
5.如权利要求1所述的一种提取管花肉苁蓉中有效成分的方法，其特征在于:所述的步骤(I)中，提取溶剂为60%的乙醇水溶液。
【专利摘要】本发明涉及一种提取管花肉苁蓉中有效成分的方法，其特征在于：将管花肉苁蓉粉碎提取；浓缩至热比重为1.15过滤得滤液A；滤液A过层析柱得过柱流出液B、低醇洗脱液C和高醇洗脱液D；将过柱流出液B进行真空干燥,得到肉苁蓉多糖产品；将低醇洗脱液C喷雾干燥得到松果菊苷产品；将高醇洗脱液D喷雾干燥，得到松果菊苷与麦角甾苷混合产品；本发明所述方法可以同时得到三种规格的管花肉苁蓉提取物产品，操作较简便，产品纯度和收率均较高，最大限度地利用了原料，节约资源，以本发明所述的方法得到的全部产品总收率达90%以上。
【IPC分类】A61K36-64, C08B37-00
【公开号】CN104606297
【申请号】CN201510071356
【发明人】白易, 闫强, 万润丽, 梁玉强, 高瑞, 高旭光, 白莲婷, 赵永强, 张成亮
【申请人】白心亮
【公开日】2015年5月13日
【申请日】2015年2月11日