一种栀子西红花苷类成分提取工艺技术的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种桅子西红花苷类成分提取方法，即用脉冲超声波进行醇提，以大孔树脂串联技术进行吸附分离，属于生物与新医药领域。
【背景技术】
[0002]桅子来源于茜草科植物桅子的成熟果实，是我国盛产的一种中药材，有泻火除烦、凉血解毒、清热利湿、消肿止痛的功效，其所含的环烯醚萜苷类成分之一西红花苷是其有效成分。西红花苷最早是从国家名贵药材藏红花中提取而来，其突出的祛瘀降脂疗效已得到了医学界的广泛认可，但由于藏红花价格昂贵、提取成本高，并不适宜扩大生产，现今用桅子果实代替藏红花提取西红花苷类成分已成为国内中药提取史上一大突破。
[0003]桅子化学成分复杂，有效成分主要为环烯醚萜苷类化合物，结构较相似，一般方法难以从中分离出西红花苷类成分，桅子西红花苷类成分中桅子西红花总苷约占50%，其中，西红花苷-1占25%，还包括苷-2、苷-3、苷-4等成分。研究显示，在桅子提取物提取工艺中，主要有以下影响因素:提取次数，提取时间、所用乙醇浓度、乙醇用量，其影响程度依次递减，除此之外西红花苷含量低，主要原因是在提取过程中并没有采用最佳的提取方案。目前从桅子干果或提取桅子黄色素后的废液中提取西红花苷，一般采用氯仿、无水乙醇等有机溶剂在索氏提取瓶中提取，得到桅子中总的活性成分桅子提取物，再用活性炭脱色，乙酸乙酯等有机溶剂脱脂，浓缩，然后再上硅胶柱分离，用一定比例的甲醇、氯仿混合液洗脱，洗脱液在丙酮中进行重结晶，过滤，得到西红花苷晶体，一般10g桅子果中可分离得到0.6g左右西红花苷。采用有机溶剂萃取、分离的方法提取天然产物中有效成分具有一定的局限性，其分离所得到的化合物产率较低，纯度不高，活性成分容易失效，且大量有机溶剂的使用易造成环境污染，增大了安全生产的投入，从而导致成本的提高。另外一些新技术被广泛用于天然产物的提取纯化中，主要包括超临界液体萃取技术、膜分离技术、分子印迹技术、大孔吸附树脂技术等，其中较适宜于工业化生产的是大孔吸附树脂技术。
[0004]利用了大孔吸附树脂技术进行吸附分离在许多文献中都报道过，但单独采用DlOl大孔树脂吸附分离使得西红花苷类成分产率较低。而本发明利用脉冲超声波技术进行醇提，节省提取时间，可提闻提取率，以大孔树脂串联技术进行吸附分尚，有效提闻了广物纯度。
【发明内容】
[0005]本发明在传统桅子西红花苷类成分提取工艺基础上进行改进创新，原工艺提取时间长，提取率低，产物纯度不理想，而采用脉冲超声波进行超声提取可大大节省提取时间，采用DlOl与AB-8型大孔树脂串联吸附分离技术有效提高了产物中西红花苷类成分含量，西红花总苷含量可提高至55%，西红花苷-1含量可提高至28%，生产工艺由原来五天缩短至二天完成。
[0006]本发明的解决方案是: 1.提取工艺流程为:
(1)粉碎:将桅子果实粉碎成粗粉；
(2)脉冲超声波式醇提:将粉碎后的桅子粗粉放入脉冲超声波清洗槽中，加入8倍量桅子粗粉的75%乙醇溶液一定温度下超声醇提Ih ；
(3)二次醇提:滤出提取液，于脉冲超声波清洗槽中加入6倍量桅子粗粉的75%乙醇一定温度下超声醇提lh，滤出提取液；
(4)浓缩:合并两次提取液，于旋转蒸发仪中60-7(TC下进行减压浓缩，至溶液相对密度为1.15-1.20，得到浓缩液；
(5)醇沉、浓缩:浓缩液中加入4倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，过滤，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20 ；
(6)二次醇沉、浓缩:浓缩液中加入8倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物；
(7)吸附分离:将上述沉淀物溶于适量水中，保持10-15ml/min流速打入DlOl与AB-8型串联大孔树脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近无色，然后用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，即得。
[0007]2.一种如权利I所述桅子西红花苷类成分提取方法，其特征在于:
所述步骤(2)、(3)中超声波醇提温度为70-80°C ；
所述步骤(4)中溶液浓缩至相对于水的密度为1.15-1.20 ；
所述步骤(5)、(6)中浓缩液中分别加入4倍量和8倍量80%乙醇，冷藏温度为0-4°C，时间为1h ；
所述步骤(7)中采用DlOl与AB-8型大孔树脂柱串联进行吸附，控制溶液流速为10_15ml/mino
[0008]3.本发明的积极效果在于:
(I)采用脉冲超声波提取法缩短了提取时间，原工艺由5天缩短至3天。
[0009](2)工艺中只涉及乙醇一种有机试剂，可有效减少环境污染。
[0010](3)有效成分含量明显提高，西红花苷类物质提取率达1.3%，其中，西红花总苷含量达到55%，西红花苷-1含量可达28%。
[0011](4)本工艺相对传统工艺简单易行，且提取介质乙醇可有效回收利用。
[0012]【具体实施方式】:
实施例1
(1)粉碎:称取300g桅子果实粉碎成粗粉；
(2)脉冲超声波式醇提:将粉碎后的桅子粗粉放入脉冲超声波清洗槽中，加入2400g75%乙醇溶液于75°C下超声醇提Ih ；
(3)二次醇提:滤出提取液，于脉冲超声波清洗槽中加入1800g75%乙醇于75°C下超声醇提lh，滤出提取液；
(4)浓缩:合并两次提取液，于旋转蒸发仪中65°C下进行减压浓缩，至溶液相对密度为1.15，得到浓缩液称重216g ；
(5)醇沉、浓缩:浓缩液中加入864g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，过滤，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.15，得到浓缩液62g ；
(6)二次醇沉、浓缩:浓缩液中加入496g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物称重8.4g ；
(7)吸附分离:将上述沉淀物溶于20ml水中，保持10ml/min流速打入DlOl与AB-8型串联大孔树脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近无色，然后用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得干膏3.9g。
[0013]实施例2
(1)粉碎:称取400g桅子果实粉碎成粗粉；
(2)脉冲超声波式醇提:将粉碎后的桅子粗粉放入脉冲超声波清洗槽中，加入3200g75%乙醇溶液于75°C下超声醇提Ih ；
(3)二次醇提:滤出提取液，于脉冲超声波清洗槽中加入2400g75%乙醇于75°C下超声醇提lh，滤出提取液；
(4)浓缩:合并两次提取液，于旋转蒸发仪中65°C下进行减压浓缩，至溶液相对密度为1.16，得到浓缩液称重288g ；
(5)醇沉、浓缩:浓缩液中加入1152g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，过滤，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.17，得到浓缩液86g ；
(6)二次醇沉、浓缩:浓缩液中加入688g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物称重11.5g ；
(7)吸附分离:将上述沉淀物溶于24ml水中，保持10ml/min流速打入DlOl与AB-8型串联大孔树脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近无色，然后用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得干膏5.5g。
[0014]实施例3
(1)粉碎:称取450g桅子果实粉碎成粗粉；
(2)脉冲超声波式醇提:将粉碎后的桅子粗粉放入脉冲超声波清洗槽中，加入3600g75%乙醇溶液于75°C下超声醇提Ih ；
(3)二次醇提:滤出提取液，于脉冲超声波清洗槽中加入2700g75%乙醇于75°C下超声醇提lh，滤出提取液；
(4)浓缩:合并两次提取液，于旋转蒸发仪中65°C下进行减压浓缩，至溶液相对密度为
1.16，得到浓缩液称重324g ；
(5)醇沉、浓缩:浓缩液中加入1296g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，过滤，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.16，得到浓缩液98g ；
(6)二次醇沉、浓缩:浓缩液中加入784g80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物称重13.4g ；
(7)吸附分离:将上述沉淀物溶于25ml水中，保持10ml/min流速打入DlOl与AB-8型串联大孔树脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近无色，然后用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，得干膏6.lg。
【主权项】
1.一种桅子西红花苷类成分提取方法，具体工艺步骤如下: (1)粉碎:将桅子果实粉碎成粗粉； (2)脉冲超声波式醇提:将粉碎后的桅子粗粉放入脉冲超声波清洗槽中，加入8倍量桅子粗粉的75%乙醇溶液一定温度下超声醇提Ih ； (3)二次醇提:滤出提取液，于脉冲超声波清洗槽中加入6倍量桅子粗粉的75%乙醇一定温度下超声醇提lh，滤出提取液； (4)浓缩:合并两次提取液，于旋转蒸发仪中60-7(TC下进行减压浓缩，至溶液相对密度为1.15-1.20，得到浓缩液； (5)醇沉、浓缩:浓缩液中加入4倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，过滤，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20 ； (6)二次醇沉、浓缩:浓缩液中加入8倍量80%乙醇置0-4°C下冷藏10h，取沉淀物； (7)吸附分离:将上述沉淀物溶于适量水中，保持10-15ml/min流速打入DlOl与AB-8型串联大孔树脂柱中，充分吸附后，用15%乙醇洗至近无色，然后用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，即得。
2.一种如权利要求1所述桅子西红花苷类成分提取方法，其特征在于: 所述步骤(2)、(3)中超声波醇提温度为70-80°C ； 所述步骤(4)中溶液浓缩至相对于水的密度为1.15-1.20 ； 所述步骤(5)、(6)中浓缩液中分别加入4倍量和8倍量80%乙醇，冷藏温度为0-4°C，时间为1h ； 所述步骤(7)中采用DlOl与AB-8型大孔树脂柱串联进行吸附，控制溶液流速为10_15ml/mino
【专利摘要】本发明公开了一种栀子西红花苷类成分提取工艺技术，工艺流程为：将栀子果实粉碎成粗粉放入脉冲超声波清洗槽中，加入8倍量75%乙醇一定温度下超声醇提1h，滤出提取液，继续加入6倍量75%乙醇一定温度下超声醇提1h，滤出提取液，合并两次提取液，于旋转蒸发仪中减压浓缩至相对密度1.15-1.20，得到浓缩液，浓缩液中加入4倍量80%乙醇冷藏10h，过滤，滤去沉淀物，上清液减压浓缩至相对密度为1.15-1.20，加入8倍量80%乙醇冷藏10h，取沉淀物，将上述沉淀物溶于适量水中，保持一定流速打入D101与AB-8型串联大孔树脂柱中，用15%乙醇洗至近无色，用85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压干燥，即得。
【IPC分类】A61P25-20, A61P29-00, A61K131-00, A61K36-744
【公开号】CN104644808
【申请号】CN201310584903
【发明人】王河东, 张鸿飞
【申请人】威海东宝制药有限公司
【公开日】2015年5月27日
【申请日】2013年11月20日