一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于兽用药物领域，具体涉及一种含有厚朴提取物的制剂，此制剂为预防、 治疗奶牛乳房炎的中药灌注剂。
【背景技术】
[0002] 奶牛乳房炎是临床上最常见，同时也是对奶牛生产危害性最大的疾病。当前不论 是发达国家还是发展中国家，都把乳房炎的防治当作重大课题加以研究。奶牛乳房炎是奶 牛养殖业中发病率最高、流行最快、造成损失最大的疾病之一。目前，我国临床型奶牛乳房 炎的发病率在30%左右，隐性奶牛乳房炎的发病率高达50-70%，因此造成每年产奶量减 少约15%，每头牛每年损失1000元左右。全国奶牛每年因乳房炎造成的损失达100多亿 元。除了造成经济损失外，奶牛乳房炎对公众健康的重要影响也不容忽视，乳房炎是乳及乳 制品中有害细菌的主要来源，对人类造成的健康危害是无法估计的。因此奶牛乳房炎的预 防和治疗具有重要的的经济意义及公共卫生学意义。引起奶牛的乳房炎的细菌主要是金 黄色葡萄球菌、链球菌和大肠杆菌。目前，抗生素疗法仍然是国内外治疗乳房炎最常用的方 法。但在实际操作过程中，基层畜牧兽医工作者长期应用大剂量抗生素进行治疗，导致耐药 菌株增多，治疗效果变差。因此，开发应用新型中药制剂成为奶牛乳房炎防治的重要药物。
[0003] 厚朴为常用中药，始载于《神农本草经》，其后历代本草与药典均有记载。《中 华人民共和国兽药典》2010年版二部规定，厚朴为木兰科木兰属植物，为厚朴Magnolia officinalis Rehd et Wils?或凹叶厚朴Magnolia officinalis Rehd. et ffils. var. biloba Rehdet Wils.的干燥干皮、根皮及枝皮。其性温，味苦、辛，具燥湿消痰、下气除满之功效， 用于湿滞伤中、脱痞吐泻、食积气滞、腹胀便秘、痰饮喘咳。大量文献已经证明厚朴具有广谱 抗菌的作用，其抗菌性质比较稳定。
[0004] 厚朴具有较强的抗菌作用，并且抗菌性质稳定。王志强等探讨了厚朴的体外抑菌 作用。采用KB纸片扩散法，使用100%厚朴浸出液滤纸片对金黄色葡萄球菌、白色葡萄球 菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、伤寒杆菌、甲型链球菌、乙型链球菌抑菌作用进行研究。发现厚朴 对以上细菌均有明显抑制作用，说明厚朴在体外有明显的抑菌作用。林桂芸等以和厚朴酚 的标准品为试验材料，测定其对3种引起人类疾病的细菌（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、链 球菌）的抑菌活性。结果表明和厚朴酚对供试的3种致病细菌均有很强的抑菌作用，抑菌 浓度在10mg/L以内。厚朴发挥作用的主要结构为厚朴酚和厚朴酚与（和厚朴酚），两者的 结构式为附图1和附图2.
[0005] 目前，兽药典收录的厚朴均为散剂，散剂在应用中普遍存在药效慢、药物有效成分 不能充分利用的缺点，为了更好的使用厚朴，本发明使用厚朴提取物，通过添加抗氧化剂、 乳化剂、注射用水等，获得了稳定的临床用灌注液。此制剂相比于散剂，药效成分损失少，临 床使用效果好。本灌注液主要用于预防、治疗奶牛乳房炎。
【发明内容】
[0006] 本发明目的在于提供一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液制备方法，所获得的制剂 用于乳房灌注给药，用于奶牛泌乳期乳房炎疾病的预防、治疗。
[0007] 本发明一方面提供了用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液的组方，包括厚朴提取物、抗 氧化剂乳化剂和注射用水。
[0008] 本发明所述厚朴提取物可以通过冷冻-超微-酶解处理，水提、有机溶剂反复浸提 等方法获得，以厚朴酚、和厚朴酚两成份之和计，含量在70% (W/W)以上。
[0009] 本发明所述抗氧化剂选自丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯、特丁 基对苯二酚、维生素E油中的一种或一种以上组合。
[0010] 本发明所述乳化剂包括辛癸酸甘油酯、司盘-20、聚山梨酯-80、十二烷基磺酸钠、 油酸乙酯、大豆油、甘油、丙二醇、无水乙醇中的一种或一种以上组合。
[0011] 本发明每升混悬液包括2. 0-20. 0% (W/V)厚朴提取物、0. 1~5. 0% (W/V)抗氧化 剂、10-70 %乳化剂（V/V)，注射用水加至100%。
[0012] 本发明厚朴灌注液的制备方法包括以下步骤：
[0013] ⑴取厚朴提取物适量加入到乳化剂中，超声使其充分溶解，标记为混合液A ;
[0014] (2)把抗氧化剂加入到乳化剂：注射用水1:3-3:1(V/V)的混合液中，充分搅拌后， 得混合液B ;
[0015] (3)在60°C恒温搅拌下，将混合液A、混合液B、剩余注射用水、乳化剂混合，充分搅 拌后；用1800r/min高剪切乳化剂搅拌lOmin，即得用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液。
[0016] 本发明的技术优势
[0017] 厚朴提取物用于预防、治疗奶牛乳房炎方面效果确切，其乳房灌注给药方式比注 射给药刺激性小，比散剂给药发挥作用快，在临床应用上更具有优越性：
[0018] 首先，灌注液给药的使用剂量要显著低于注射给药剂量，灌注给药仅根据每头牛4 个乳房发病情况给药，实际临床养殖中，奶牛临床性乳房炎的发病情况基本为1~2个乳室 /头牛，此时的用量为两个乳室的给药；如果为注射给药，在每头牛每次至少按体重注射， 乳房灌注给药有效避免了药物在血液中的整体循环和浪费。
[0019] 其次，灌注给药的应激要小于注射给药的应激。
[0020] 第三，灌注给药的残留弃奶期要少于注射给药。乳房灌注给药的药代动力学和残 留及残留消除实验结果表明：厚朴提取物乳房灌注液灌注给药时，其主药成分基本不入血， 主药代谢途径是经随奶排除体外，既有靶向给药的作用，又缩短了弃奶期。其疗效和实用性 远远优于厚朴提取物注射液。
【具体实施方式】
[0021] 结合以下实施例可以观察到本发明的有益效果，这些实施例是说明性的，不会对 本发明构成限制。
[0022] 实施例1 : 一种厚朴提取物获得的方法
[0023] 按以下方法获得厚朴提取物：（1)称取IOOkg厚朴饮片，置于密闭包装袋中，_20°C 冷冻144小时后取出进行以下处理；
[0024] (2)取上述厚朴饮片置风悬粉碎机中，开启电机进行粉碎，取100目筛的筛下物；
[0025] (3)此次共获得筛下物90kg，加入1900L纯化水，搅拌获得混悬液；
[0026] (4)在上述混悬液中加入2. 5%纤维素酶（活性140万U/g，W/W)、2. 5% P -葡聚 糖酶（活性3000万"8，1/1)、0.251%木聚糖酶（活性6000万" 8，1/1)，371：加热搅拌，反 应6小时后静置1小时；
[0027] (5)取上述溶液，进行12000转离心，离心后的上清进行浓缩20倍，然后进行冷冻 干燥，得厚朴水提部分，标记为成分I ;
[0028] (6)醇提取：将沉淀物用浓度为90%的乙醇溶解，搅拌、回流提取4小时，回收溶 剂，合并滤液，滤液减压浓缩至固体，干燥后粉碎，标记为成分II。
[0029] (7)把上述成分I和成分II按1:1混合后进行含量测定，测定得厚朴酚、和厚朴酚 总量为89. 5%。密封好备用。
[0030] 实施例2 :-种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液的制备
[0031] 灌注液组方如下：
【主权项】
1. 一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液，包括厚朴提取物、抗氧化剂、乳化剂和注射用 水。
2. 根据权利要求1所述的一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液，其特征在于所述厚朴提 取物有效成分以厚朴酚、和厚朴酚两成份之和计，含量在70% (W/W)以上。
3. 根据权利要求1所述的一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液，其特征在于所述抗氧化 剂选自丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、没食子酸丙酯、特丁基对苯二酚、维生素E油中 的一种或一种以上组合。
4. 根据权利要求1所述的一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液，其特征在于所述乳化剂 包括辛癸酸甘油酯、司盘-20、聚山梨酯-80、十二烷基磺酸钠、油酸乙酯、大豆油、甘油、丙 二醇、无水乙醇中的一种或一种以上组合。
5. 根据权利要求1所述的一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液，其特征在于每升混悬液 包括2.0-20.0%(1/￥)厚朴提取物、0.1~5.0%(1/￥)抗氧化剂、10-70%乳化剂（￥/^)， 注射用水加至100%。
6. 根据权利要求1所述的一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液，其特征在于厚朴灌注液 的制备方法包括以下步骤： (1) 取厚朴提取物适量加入到乳化剂中，超声使其充分溶解，标记为混合液A ; (2) 把抗氧化剂加入到乳化剂：注射用水1:3-3:1的混合液中，充分搅拌后，得混合液 B ； (3) 在60°C恒温搅拌下，将混合液A、混合液B、剩余注射用水、乳化剂混合，充分搅拌 后，用1800r/min高剪切乳化剂搅拌lOmin，即得用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液。
【专利摘要】本发明公开了一种用于奶牛乳房炎的厚朴灌注液的制备方法，明确了其抗氧化剂、乳化剂的种类、范围和制剂的配制方法。本发明中的厚朴灌注液对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌和链球菌有较强的抑菌活性，给奶牛冲洗乳房时引起的应激小，弃奶期仅为10小时。
【IPC分类】A61K36-575, A61P15-14, A61K9-00
【公开号】CN104739932
【申请号】CN201410399642
【发明人】刘桂兰, 谢玲玲, 彭江宁
【申请人】瑞普（天津）生物药业有限公司
【公开日】2015年7月1日
【申请日】2014年8月14日