中药组合物在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及中药组合物的新用途，尤其涉及中药组合物在制备抑制肝脏成纤维细 胞增殖药物中的应用。
【背景技术】
[0002] 肝纤维化是慢性肝损伤向肝硬化发展的动态过程，表现为细胞外基质（ECM)大量 合成、分泌，而降解绝对或相对不足，使ECM在肝脏内弥漫沉积。其起始于肝细胞（HC)坏死， 随之是炎症反应、纤维生成介质释放，肝星状细胞（FSC)激活，最终以肝脏结缔组织成分的 合成与降解明显失去平衡。肝纤维化是多种慢性肝病共同的病理过程，是影响预后的重要 因素。
[0003] 过去的20年间，肝纤维化的研宄取得了长足进展，证实肝纤维化与一定程度的肝 硬化都是可逆的。近年来陆续出现了一些抗肝纤维化治疗方法，包括化学药、生物制剂、中 药与基因疗法等，但是理想的临床治疗手段仍然缺乏（刘平.加强抗肝纤维化作用机制的 研宄.中华肝病杂志，2005, 8(13) :561)。目前防治肝纤维的关键是针对与肝星状细胞激活 相关的环节，主要是：减轻肝损伤；抑制星状细胞激活，减少细胞外基质产生；调节细胞因 子紊乱，促进活化肝星状细胞凋亡。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供了中药组合物在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的 应用。
[0005] 一种中药组合物在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用，所述中药组合物 由如下重量份数的原料制备得到：红对节子15份、南天竹根18份、倒吊蜡烛12份、一年蓬 20份、三月泡20份。
[0006] 所述中药组合物的制备方法为：取上述中药，加水煎煮2次，第一次加水量为药材 重量的10倍量，煎煮2小时，第二次加水量为药材重量的8倍量，煎煮1小时，合并煎液，浓 缩，干燥，粉碎得中药组合物颗粒。
[0007] 浓缩条件为：0. 07MPa、60-70°C下减压浓缩至65°C时相对密度为1. 30。喷雾干燥 条件为：进风温度为120°C，出风温度为80°C，物料温度为90°C，雾化压力为0. 4兆帕，喷雾 速度为l〇ml/s。
[0008] 红对节子为忍冬科植物卵叶荚莲的根。调经，涩精。治月经不调，梦遗虚滑，肺热 口臭及白池、带下。
[0009] 南天竹根为小檗科植物南天竹的根，祛风，清热，除湿，化痰。治风热头痛，肺热咳 嗽，湿热黄疸，风湿痹痛，火眼，疮疡，瘰疬。
[0010] 倒吊赌烛为夹竹桃科植物倒吊笔的根或莖枝。拉丁名：Wrightia pubescens R. Br.，全年均可采，洗净，切片，晒干。祛风通络；化痰散结；利湿。主风湿痹痛；腰膝疼痛； 跌打损伤；瘰疬；慢性支气管炎；黄疸型肝炎，肝硬化腹水。本发明以根入药。
[0011] 一年蓬为菊科飞蓬属植物一年蓬Erigeron annuus (L. )Pers.，以全草入药。夏、秋 采集。清热解毒，抗疟。急性胃肠炎，疟疾；外用治齿龈炎，蛇咬伤。
[0012] 三月泡，拉丁名为Rubus corchorifolius L. f.，叶：消炎，接骨。用于断指。根： 祛风活络，清热镇惊。用于小儿惊风，风湿筋骨痛。本发明使用的是叶。
[0013] 本发明对中药组合物抑制肝脏成纤维细胞增殖作用进行了药理试验。成纤维细胞 增殖并合成大量细胞外基质（ECM)，是肝纤维化发生的重要环节。活化的肝星状细胞（HSC) 具有成纤维细胞特征，NIH/3T3细胞是研宄药物抗肝纤维化活性常用的细胞模型。本研宄 以NIH/3T3成纤维细胞为靶细胞，观察发明药物对其增殖的影响。用MTT法检测的抑制细 胞增殖的试验结果表明，本发明药物对NIH/3T3的细胞增殖有显著的抑制活性。
[0014] 根据药理试验结果证明中药组合物具有抗肝纤维化作用。
[0015] 本发明涉及的中药组合物在制备抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的用途属于首 次公开，由于中药成分复杂，而且其对于肝脏成纤维细胞增殖抑制活性强得意想不到，不存 在由其他中药给出任何启示的可能，具备突出的实质性特点，同时用于抗肝脏成纤维细胞 增殖显然具有显著的进步。
【具体实施方式】
[0016] 以下通过实施例对本发明作进一步详细的说明，但本发明的保护范围不受具体实 施例的任何限制，而是由权利要求加以限定。
[0017] 实施例1 :取红对节子15g、南天竹根18g、倒吊蜡烛12g、一年蓬20g、三月泡 20g，加水煎煮2次，第一次加水量为药材重量的10倍量，煎煮2小时，第二次加水量为药 材重量的8倍量，煎煮1小时，合并煎液，浓缩，干燥，粉碎得中药组合物颗粒，浓缩条件 为：0. 07MPa、60-70°C下减压浓缩至65°C时相对密度为1. 30。喷雾干燥条件为：进风温度 为120°C，出风温度为80°C，物料温度为90°C，雾化压力为0. 4兆帕，喷雾速度为lOml/s。
[0018] 实施例2 :采用MTT法评价化合物中药组合物对肝纤维化的抑制作用
[0019] 1、试验药品：按照上述实施例1的方法制备试验药品。
[0020] 2、方法：NIH/3T3 细胞株购自引自 ATCC(American Type Culture Collection)的 中科院上海细胞所细胞库。将对数生长期的亚融合的NIH/3T3细胞用0. 25%胰酶消化，洗 涤，离心后，用DMEM培养液（含10% FCS)制成lX104cell/ml的细胞悬液，台盼蓝染色鉴 定存活率大于95%，按每孔IOOul加入96孔板中，在37°C、5% CO2培养24h同步处理后， 弃上清，加入含有不同稀释浓度药物的DMEM培养液（含10% FCS)200ul，培养48h，每孔加 入MTT溶液孵育4h。弃去培养液，加入150ulDMS0,振荡10分钟，使结晶溶解，酶标仪490nm 处读取OD值，结果以OD49tl表示。
[0021] 3.结果：
[0022] 3. 1形态学观察
[0023] NIH/3T3在用药前伸展良好，折光性较弱，有方向性，呈放射状，细胞增殖的速度 快；而加药物24h后，成纤维细胞数目减少，形状变得不规则，突起变短，细胞排列混乱，细 胞内代谢产物增多。
[0024] 表1 :MTT法检测本发明药物对NIH/3T3增殖的抑制作用
[0025]
【主权项】
1. 一种中药组合物在抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用，其特征在于所述中药组 合物由如下重量份数的原料制备得到：红对节子15份、南天竹根18份、倒吊蜡烛12份、一 年蓬20份、三月泡20份。
2. 如权利要求1所述中药组合物在抑制肝脏成纤维细胞增殖药物中的应用，其特征在 于所述中药组合物的制备方法为：取上述中药，加水煎煮2次，第一次加水量为药材重量的 10倍量，煎煮2小时，第二次加水量为药材重量的8倍量，煎煮1小时，合并煎液，浓缩，干 燥，粉碎得中药组合物颗粒。
【专利摘要】本发明公开了中药组合物在制备治疗肝纤维化药物的用途，中药组合物由红对节子15份、南天竹根18份、倒吊蜡烛12份、一年蓬20份、三月泡20份制备而成，药理试验证明，中药组合物可以明显抑制肝纤维化的发生和发展，可用于制备抗肝纤维化、防治肝硬化的药物。
【IPC分类】A61P1-16, A61K36-73
【公开号】CN104784278
【申请号】CN201510202353
【发明人】田丽华
【申请人】淄博齐鼎立专利信息咨询有限公司
【公开日】2015年7月22日
【申请日】2015年4月24日