使用pi3k和mek调控剂的方法
【专利说明】使用Pl 3K和MEK调控剂的方法
[0001] 本案是申请号为200780038496. Χ(国际申请号为PCT/US2007018057)、申请日为 2007-8-16、题目为"使用ΡΙ3Κ和MEK调控剂的方法"的申请的分案。 发明领域
[0002] 本发明涉及利用调控蛋白激酶酶活性及得到的细胞活性调节（诸如增殖、分化、 程序性细胞死亡、迀移、化学侵袭和代谢）的化合物组合来治疗癌症的方法。具体而言，本 发明涉及抑制促分裂原活化蛋白激酶（MEK)的化合物与抑制磷脂酰肌醇3-激酶（ΡΙ3Κ)信 号传导途径的化合物的联合使用。
【背景技术】
[0003] 用于治疗癌症的试剂的特异性的改进是非常令人感兴趣的，这是因为如果与这些 试剂的施用相关的副作用被降低则能实现治疗益处。传统上，癌症治疗的显著进步与鉴别 出通过新型机制发挥作用的治疗试剂相关。
[0004] 蛋白激酶是能催化蛋白的磷酰化，特别是蛋白的酪氨酸、丝氨酸和苏氨酸残基上 的羟基的磷酰化的酶。这一看似简单的行为的结果是令人惊奇的；细胞分化和增殖，即事实 上一种方式或另一种方式的细胞生命的所有方面均取决于蛋白激酶活性。此外，异常的蛋 白激酶活性与从诸如牛皮癣等非危及生命的疾病至诸如神经胶母细胞瘤（脑癌）等极其致 命的疾病的大量疾病相关。
[0005] 蛋白激酶可分为受体型或非受体型。受体型酪氨酸激酶具有细胞外部分、跨膜部 分和细胞内部分，而非受体型酪氨酸激酶则整体在细胞内。它们由具有不同生物活性的大 量跨膜受体组成。实际上，已鉴别出大约20个不同的受体型酪氨酸激酶亚族。被称之为HER 亚族的一个酪氨酸激酶亚族由EGFR(HERl)、HER2、HER3和HER4组成。迄今为止已鉴别出 的该受体亚族的配体包括表皮生长因子、TGF-α、双调蛋白（ amphiregulin)、HB-EGF、|3细 胞素蛋白（betacellulin)和调蛋白。这些受体型酪氨酸激酶的另一亚族是胰岛素亚族，其 包括1呢-1?、16?-11?和11?-1?。？〇6?亚族包括1 3〇6?-(1和0受体、〇5?11?、(3;行和？1^-11。 此外，还有FLK家族，由激酶插入区受体（KDR)、胎肝激酶、胎肝激酶-I (FLK-I)、胎肝激 酶-4 (FLK-4)和类fms酪氨酸激酶-l(f It-Ι)组成。TOGF和FLK家族因两类的相似性而通 常被同时考虑。受体型酪氨酸激酶的详细讨论参见Plowman等，DN&P 7(6) :334-339, 1994， 该文献在此以引用的方式引入。
[0006] 非受体型酪氨酸激酶也由大量亚族构成，包括Src、Frk、Btk、Csk、Abl、Zap70、Fes/ ??8、？ &1允14〇1^和1^頂1(。这些亚族进一步细分为不同的受体。例如，51^亚族是最大的 亚族之一并包括Src、Yes、Fyn、Lyn、Lck、Blk、Hck、Fgr和Yrk。Src亚族的酶与癌变相关。 非受体型酪氨酸激酶的更详细的讨论参见Bolen，Oncogene，8:2025-2031 (1993)，其在此以 引用的方式引入。
[0007] 由于蛋白激酶及其配体在各种细胞活性中起着至关重要的作用，蛋白激酶活性的 失调可导致被改变的细胞性质，诸如与癌相关的失控细胞生长。除肿瘤学指示之外，在许多 其它病理疾病中也牵涉到被改变的激酶信号。这些疾病包括但不限于：免疫疾病、心血管疾 病、发炎疾病和变性疾病。因此，受体和非受体蛋白激酶均是有吸引力的小分子药物研发的 目标。
[0008] 对于抗血管形成和抗增殖活性，小分子调控的一个特别有吸引力的目标是MEK。 MEK-ERK信号传导级联是对生长因子、细胞因子和荷尔蒙发生应答从而调节细胞生长、增 殖、分化和凋亡的保守途径。该途径操作Ras下游，Ras在人类肿瘤中经常被上调或突变。 已证实MEK是Ras功能的关键效应子。大部分人类癌症，包括80%的胰腺癌、50 %的结直肠 癌和40%的肺癌中具有活动的Ras突变。已经显示，ERK路径的抑制、尤其是MEK激酶活性 的抑制将主要由于细胞细胞接触、运动力的减少以及血管内皮生长因子（VEGF)表达的下 调从而导致抗转移和抗血管形成活性。此外，在细胞培养和体内人类肿瘤异种移植的原发 和转移生长中所见到，显型负突变MEK或ERK降低了突变Ras的转化能力。因此，MEK-ERK 信号传导途径是合适的治疗介入的靶定途径。
[0009] 因此，需要鉴别特异性地抑制、调节和/或调控激酶（尤其是MEK)的信号传导的 小分子化合物以作为治疗或防治与癌相关的疾病状态的手段，而这也正是本发明的目的。
[0010] 磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K α )，一种双重特异性蛋白激酶，是由85kDa的调节亚单 元和IlOkDa的催化亚单元构成。由此基因编码的蛋白代表了下述催化亚单元，所述催化亚 单元使用ATP对Ptdlns、PtdIns4P和PtdIns (4, 5)P2进行磷酰化。在细胞骨架重组、细胞 凋亡、膜泡运输、增殖和分化过程的调节控制中牵涉到ΡΙ3Κα。PIK3CA增加的拷贝数和表 达与大量恶性肿瘤相关，诸如卵巢癌、宫颈癌、乳腺癌、大肠癌和胶质母细胞瘤等。肿瘤抑 制子PTEN通过多种机制抑制细胞生长。PTEN能使PIK3CA的主要产物ΡΙΡ3脱磷酰化。而 ΡΙΡ3对于蛋白激酶Β(ΑΚΤ1，ΡΚΒ)向细胞膜的迀移来说是必需的，在这里其被磷酰化并被上 游激酶所活化。PTEN对细胞死亡的作用经PIK3CA/AKT1途径进行介导。
[0011] 因此，本发明的一个目的是鉴别特异性地抑制、调节和/或调控激酶，尤其是磷脂 酰肌醇3-激酶的信号传导的小分子化合物从而治疗、防治和/或抑制与癌相关的疾病和病 症。
[0012] 通常采用组合疗法以克服药物耐受性。达沙替尼（dasatinib)或尼罗替尼 (nilotinib) (AMN-107)与当前标准CML疗法，即依马替尼（imatinib) (Gleevec?)联合的 临床试验正在进行当中（ClinicalTrials.gov)。在临床前研宄中，达沙替尼与Gleevec? 联合已显示出抗除T315I之外的各种Abl突变的提高功效（O'Hare T，Walters DK， Stoffregen EP等，"Combined Abl inhibitor therapy for minimizing drug resistance in chronic myeloid leukemia:Src/AbI inhibitors are compatible with imatinib''， Clin Cancer Res. 11,6987-6993(2005))。最近，B-RAF中的特别突变已显示出使得利用抑 制MEK的化合物进行的细胞和肿瘤的治疗的灵敏性降低（Solit等，Nature online，第1-5 页，2005年11月6日）。治疗多条激酶途径的组合疗法应当能消除该降低的灵敏性。
【发明内容】
[0013] 本发明提供了一种使用下述组合来治疗增殖性疾病如癌症的方法，所述组合由式 I、Ia、Ic、IcU II、III、IV或V的MEK抑制剂与式VI、Via、VIb或VII的PI3K抑制剂组成， 或者由式1、1&、1(：、1(1、11、111、1￥或￥的]\^1(抑制剂与式￥111、￥1113、￥11113、^、乂、乂1或 XI的PI3K抑制剂组成。
[0014] 在一个实施方式中，在节I中，式I的MEK抑制剂如下所示：
[0015]
【主权项】
1.由式Ia、Ic、Id、II或V的化合物或其可药用组合物W及选自式VIa、VIb、VII、VIIIa和VIHb的化合物或其可药用组合物组成的药物组合在制备治疗癌症的药物中的应用， 其中式la如下所示；
并且任选地为其可药用盐或溶剂化物，其中 A环表示亚芳基或杂亚芳基，并且A环任选地被选自RW、护、护和Rie的一个、 两个、S个或四个基团取代，其中RW、Ri2、RM和Rie独立地是氨、低级烷基、低级締基、 低级诀基、面素、面代姪氧基、哲基、低级姪氧基、氨基、姪基氨基、二姪基氨基、面代姪 基、-NHS(0) 2於、-CN、-C(0)R8、-C(0)OR8、-C(0)NRSR8' 或-NR8C(0)R8' ； X是低级姪基、面素、面代姪基或面代姪氧基； Ri、R2、R3、R4、R哺R6独立地是氨、面素、硝基、-NRSR8'、-OR8、-N服(0)2於、-CN、-S(0)mR8、-S(0)sNRSR8'、-C做R8、-C(0)OR8、-C(0)NRSR8'、-NR8C(0)OR8'、-NR8C(0)NR8'R8"、-NR8C(0) 0R8'、-nr8c(o)r8'、低级烷基、低级締基、低级诀基、环姪基、杂芳基或杂环姪基；其中所述低 级烷基、低级締基、低级诀基、环姪基、杂芳基和杂环姪基任选地被独立地选自面素、低级烧 基、面代姪基、硝基、任选地被取代的环姪基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的 芳基、任选地被取代的芳基姪基、任选地被取代的杂芳基、-OR8、-NRSR8'、-N服(0) 2於、-CN、-S 做mR9、-C做R8、-C做OR8、-C做NRSR8'、-NR8C做NR8'R8"、-NR8C做OR8' 和-NR8C做R8' 的一 个、两个、=个、四个、五个、六个或走个基团取代；或者 R哺R2与它们所连接的碳一起、R嘴R4与它们所连接的碳一起、W及R哺R6与它们 所连接的碳一起，W上选项中的一种形成C(0)或C( =N0H); m是1或2 ; R7是氨、面素或低级姪基；和 R8、R8'和R8"独立地是氨、哲基、姪氧基、取代姪氧基、低级烷基、面代姪基、低级締基、低 级诀基、芳基、环姪基、杂芳基或杂环姪基；其中所述低级烷基、低级締基、低级诀基、芳基、 环姪基、杂芳基和杂环姪基独立任选地被选自低级烷基、面素、哲基、哲基姪基、低级姪氧 基、取代姪氧基、姪氧基姪基、面代姪基、駿基、駿基醋、硝基、氯基、-S(0)占31 (其中n是0、1 或2,R3i是姪基、被取代的姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂环姪基或任选地 被取代的杂芳基）、-NRMsOsRMs(其中rM是氨或低级姪基，RMa是低级姪基、低级締基、任选 地被取代的芳基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的环姪基或任选地被取代的杂 芳基）、-S〇2NR35R35a(其中R35是氨或姪基，RSSa是低级姪基、低级締基、任选地被取代的芳基、 任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的环姪基或任选地被取代的杂芳基）、任选地被取 代的环姪基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的芳基姪基、 芳氧基、芳基姪氧基、任选地被取代的杂芳基、-NHC(0)R32(其中R32是低级烷基、低级締基、 姪氧基或环姪基）和-NRWrW(其中R3呀日Rw独立地是氨、低级姪基或哲基姪基）和-c(0)NHR33 (其中R33是低级烷基、低级締基、低级诀基或环姪基）的一个、两个、立个、四个或五个 基团取代； R9是低级烷基、低级締基、低级诀基、芳基、环姪基、杂芳基或杂环姪基；其中所述低级 烷基、低级締基、低级诀基、芳基、环姪基、杂芳基和杂环姪基独立任选地被选自低级烷基、 面素、哲基、面代姪氧基、面代姪基、氨基、姪基氨基和二姪基氨基的一个、两个、立个、四个 或五个基团取代； 其中式Ic如下所示；
并且任选地为其可药用盐或溶剂化物，其中RW、R12、R"和Rle独立地是氨、低级烷基、面 素、面代姪氧基、哲基、低级姪氧基或面代姪基； X是面素； R3是氨、面素、硝基、-NRSr8'、-OR8、-N服(0)2於、-CN、-S(0)mR8、-S(0)2NR8R8'、-c(0)R8、-C(0)OR8、-C(0)NRSR8'、-NR8C(0)OR8'、-NR8C(0)NR8'R8"、-NR8C(0)OR8'、-NR8C(0)R8'、低级 烷基、低级締基、低级诀基、环姪基、杂芳基或杂环姪基；其中所述低级烷基、低级締基、低级 诀基、环姪基、杂芳基和杂环姪基任选地被独立地选自面素、低级烷基、面代姪基、硝基、任 选地被取代的环姪基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的芳 基姪基、任选地被取代的杂芳基、-OR8、-NRSR8'、-NHS(0)2R9、-CN、-S(0)mR9、-C(0)R8、-C(0) OR8、-C做NRSR8'、-NR8C(0)NR8'R8"、-NR8C(0)OR8' 和-NR8C做R8' 的一个、两个、；个、四个、五 个、六个或走个基团取代； R7是氨、面素或低级姪基； R8、R8'和R8"独立地是氨、哲基、姪氧基、取代姪氧基、低级烷基、面代姪基、低级締基、低 级诀基、芳基、环姪基、杂芳基或杂环姪基；其中所述低级烷基、低级締基、低级诀基、芳基、 环姪基、杂芳基和杂环姪基独立任选地被独立地选自低级烷基、面素、哲基、哲基姪基、低 级姪氧基、取代姪氧基、姪氧基姪基、面代姪基、駿基、駿基醋、硝基、氯基、-S(0)占31 (其中n 是0、1或2,R3i是姪基、被取代的姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂环姪基或 任选地被取代的杂芳基）、-NR34S〇2RMa(其中RM是氨或低级姪基，RMa是低级姪基、低级締 基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的环姪基或任选地被取 代的杂芳基）、-S〇2NR35R35a(其中R35是氨或姪基，RSSa是低级姪基、低级締基、任选地被取代 的芳基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的环姪基或任选地被取代的杂芳基）、任 选地被取代的环姪基、任选地被取代的杂环姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的芳 基姪基、芳氧基、芳基姪氧基、任选地被取代的杂芳基、-NHC(0)R32 (其中R32是低级烷基、低 级締基、姪氧基或环姪基）和-NRWrW(其中RW和Rw独立地是氨、低级姪基或哲基姪基） 和-C(0)NHR33(其中R33是低级烷基、低级締基、低级诀基或环姪基）中的一个、两个、S个、 四个或五个基团取代；W及 R9是低级烷基、低级締基、低级诀基、芳基、环姪基、杂芳基或杂环姪基；其中所述低级 烷基、低级締基、低级诀基、芳基、环姪基、杂芳基和杂环姪基独立任选地被选自低级烷基、 面素、哲基、面代姪氧基、面代姪基、氨基、姪基氨基和二姪基氨基的一个、两个、立个、四个 或五个基团取代； 其中式Id如下所示；
并且任选地为其可药用盐或溶剂化物，其中X、R7、RW、Ri2、Ri\Rie、R3、R8和R8'与W上式Ic中定义相同； 其中式II如下所示：
并且任选地为其可药用盐或溶剂化物，其中X、Ri、R2、R3、R4、R5、R6和R7与W上式la中 定义相同； 其中式V如下所示：
并且任选地为其可药用盐或溶剂化物，其中所述A环、R3、R4和R7与W上式la中定义 相同； 其中式Via如下所示；
并且任选地为其可药用盐或水合物，其中 Ri是氨、任选地被取代的C1-Ce姪基、任选地被取代的C3-C,环姪基、任选地被取代的芳 基、任选地被取代的杂脂环基、任选地被取代的杂脂环基姪基、任选地被取代的杂芳基或任 选地被取代的杂芳基姪基； X是-NR3-; R2是氨、任选地被取代的Ci-Ce姪基、C3-C7环姪基、芳基、芳基-Ci_e姪基、杂脂环基、杂 环基姪基、杂环基-芳基-或杂芳基；其中R2中的所述环姪基、芳基、芳基-C姪基、杂脂 环基、杂环基姪基、杂环基-芳基-和杂芳基任选地被1、2、3或4个r8基团取代； R3是氨； R4是任选地被取代的Ci-Ce姪基； R6是氨、酷基、苯基、杂脂环基或杂芳基；其中R6中的所述苯基、杂脂环基和杂芳基任选 地被1、2、3或4个R9基团取代； R8在每次出现时独立地是哲基、面素、面代姪基、Ci-Ce姪基、任选地被取代的Ci-Ce姪氧 基、Ci-Ce姪氧基姪基、Ci-Ce姪氧基姪基氨基姪基、Ci-Ce姪基駿基杂环基、-0-Ci-Ce姪基杂 环基、氨基姪基、任选地被取代的C3-C7环姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的芳基 Ci-Ce姪基、任选地被取代的杂脂环基、任选地被取代的杂脂环基姪基、任选地被取代的杂芳 基或任选地被取代的杂芳基姪基；W及 R9在每次出现时独立地是面素、面代姪基、面代姪氧基、Ci-Ce姪基、Ci-Ce姪氧基、Ci-Ce姪氧基姪基、Ci-Ce駿基姪基、烷氧基幾基、氨基姪基、任选地被取代的C3-C7环姪基、任选地 被取代的芳基、任选地被取代的芳基Ci-Ce姪基、任选地被取代的芳氧基、任选地被取代的 杂脂环基或任选地被取代的杂芳基； 其中式V扣如下所示：
并且任选地为其可药用盐或溶剂化物，其中 Ri是氨、任选地被取代的Ci-Ce姪基、任选地被取代的C3-C,环姪基、任选地被取代的芳 基、任选地被取代的杂脂环基、任选地被取代的杂脂环基姪基、任选地被取代的杂芳基或任 选地被取代的杂芳基姪基； R6是苯基、酷基或杂芳基，其中所述苯基和杂芳基任选地被1、2、3或4个R9基团取代； w及 R9在每次出现时独立地是面素、面代姪基、面代姪氧基、C1-Ce姪基、C1-Ce姪氧基、C1-Ce姪氧基姪基、Ci-Ce駿基姪基、烷氧基幾基、氨基姪基、任选地被取代的C3-C7环姪基、任选地 被取代的芳基、任选地被取代的芳基Ci-Ce姪基、芳氧基、任选地被取代的杂脂环基或任选 地被取代的杂芳基； 其中式VII如下所示；
Ri是氨、任选地被取代的Ci-Ce姪基、任选地被取代的C3-C,环姪基、任选地被取代的芳 基、任选地被取代的杂脂环基、任选地被取代的杂脂环基姪基、任选地被取代的杂芳基或任 选地被取代的杂芳基姪基； X是-NR3-; R3是氨； R4是任选地被取代的Ci-Ce姪基； R5是氨； R6是酷基且R2是任选地被1、2、3或4个R8基团取代的杂环基-芳基-;或者R6是面素且R2是任选地被取代的Ci-Ce姪基、C3-C7环姪基、苯基、芳基-Ci_e姪基、杂脂 环基姪基或杂环基-芳基-;其中R2中的所述C3-C7环姪基、苯基、苯基、芳基-Ci_e姪基、杂 脂环基姪基和杂环基-芳基-任选地被1、2、3或4个r8基团取代；或者 R6是任选地被1、2或3个面素取代的苯基；且R2是苯基或杂环基-芳基-;其中R2中 的所述苯基和杂环基-芳基-任选地被1、2、3或4个r8基团取代；或者 R6是任选地被1、2或3个面素取代的杂芳基；且R2是任选地被1、2、3、4或5个R8基团 取代的杂环基-芳基 在每种情况下每个R8独立地是哲基、面素、Ci-Ce姪基、面代姪基、任选地被取代的Ci-Ce姪氧基、Ci-Ce姪氧基姪基、Ci-Ce烷氧基幾基、Ci-Ce姪氧基姪基氨基姪基、-0-Ci-Ce姪基杂 环基、氨基姪基、任选地被取代的C3-C7环姪基、任选地被取代的芳基、任选地被取代的芳基 Ci-Ce姪基、任选地被取代的杂脂环基、任选地被取代的杂脂环基姪基、任选地被取代的杂芳 基或任选地被取代的杂芳基姪基； 其中式Villa如下所示；
或是其可药用盐或溶剂化物，其中 W\W2、W嘴W4是-c巧1)-，或者W嘴W3是-c巧1)-且W哺W4之一是-N-而另一个 是_c化)-; X是-N化)-; A是芳基、杂芳基或杂环姪基，其中所述芳基、杂芳基和杂环姪基任选地被巧2)。1取代； 或者 B是芳基、-Ci-Ce姪基芳基、杂芳基或杂环姪基，其中所述芳基、Ci-Ce-姪基、杂芳基和杂 环姪基独立任选地被巧3)。2取代； nl是0、1、2或3; n2是0或者是1至5的整数； 每个Ri独立地是氨、Ci-Ce-姪基、面代姪基、Ci-Ce-姪氧基、面代姪氧基或-N02; 当R2存在时，每个R2独立地是-CI-Ce-烷基、-Ci-Ce-締基、-〇Re、-N化)-c(0) -Re、-N化)-C(0)-C〇-Ce姪基-N巧J馬。、-0C的)-QrCe姪基-N巧7)馬。、-QrCe姪基-C的)R6、杂环姪基、 芳基、面素、-N02或-C〇-Ce-姪基-N化)馬。，其中单独或作为R2中其它基团的一部分的每个 姪基、芳基和杂环姪基独立任选地被选自Ci-Ce-姪基、Ci-Ce-姪氧基、面素、面代姪基和面代 姪氧基的一个、两个、=个、四个或五个基团取代； 当Rs存在时，每个R3独立地是哲基、-NO2、面素、-CN、Ci-Ce-烷基、C2-Ce-締基、Ci-Ce姪氧基、-Q)-Ce姪基-N(R7)C做-Cg-Cg-姪基-N(Ryb)馬。、姪基-N化)C做-Cg-Cg-姪 基-N(RJC做馬3、-C〇-Ce姪基-C(0)N巧 7)-〇)-〔6-姪基-N(R7)R7a、-Co-Ce-姪基-C做 N(R7)-Ci-Ce-姪基-0(0)0馬3、-C〇-Ce-姪基-N(R7)-C(0)-C〇-Ce-姪基-巧7)、-C〇-Ce-姪 基-N化)-QrCe-姪基-N化)R,a、-QrCe-姪基-N化)C(