维生素c和黄芩素组成的方剂在治疗宫颈癌中的应用
【技术领域】
[0001] 本发明涉及一种治疗肿瘤的药物，特别是一种维生素 C和黄芩素组成的方剂在治 疗宫颈癌中的应用，属于生物医药领域。
【背景技术】
[0002] 宫颈癌是严重威胁女性健康的常见妇科肿瘤，在发展中国家居于妇科恶性肿瘤的 首位。在全世界妇女中，每年大约有371000例侵袭性子宫颈癌新发生，约占女性恶性肿瘤 的10%。我国每年新增病例大约13. 5万人，占全世界发病人群综述的1/3,每年死于子宫 颈癌的患者约5万人，最近几年其发病有年轻化的趋势。虽然，在我国宫颈癌的发病率逐年 增高，近20年发病明显趋于年轻化，且宫颈腺癌比例增加。因为宫颈癌早期容易对化疗产 生耐药，对放疗的敏感性较差，因此治疗难度增大，预后不理想。因此，找寻无毒或低毒天然 产物抗肿瘤药物具有重要的意义。
[0003] 黄芩素（Baicalein，BAI)是黄芩的主要活性成分，也是是黄芩素的初级代谢产 物，二者的分子结构差别仅在于7位取代基，前者为酚羟基而后者为糖苷。研究证明，黄芩 素具有多种药理作用，如抗病毒、抗氧化、抗过敏、抗炎、抗凝、阻止钙离子通道、清除自由 基、调节免疫力等。近年来发现，黄芩素在大肠癌、肝癌、前列腺癌等肿瘤治疗中起着重要作 用，提示黄芩素具有广谱抗肿瘤作用。因此，作为一种天然的化合物，大量研究也已证实黄 芩素具有抗肿瘤活性，而且抗癌谱广，并且毒副作用小，价格低廉。
[0004] 维生素 C(Vitamin C，Vit C)，又名抗坏血酸，是具有多种生物学功能的水溶性己 糖衍生物，是一种强还原剂，在临床被广泛使用且无明显毒副作用。近年来研究显示，高浓 度维生素 C对肝癌、膀胱癌、前列腺癌、白血病等多种恶性肿瘤的生长有显著的抑制作用， 但对正常细胞无明显影响。
[0005] 现已有文献表明黄芩素和大剂量维生素 C均具有一定的抑瘤效果，但关于复方黄 芩素、维生素 C的抗肿瘤作用，却无相关报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种维生素C和黄芩素组成的方剂在治疗宫颈癌中的应 用。黄芩素具有很好的抗炎，抗氧化，抗病毒等作用且毒副作用很小，维生素 C作为一种强 还原剂，可清除体内自由基含量，增强机体抗氧化能力无明显毒副作用。因此维生素 C和黄 芩素组成的方剂可用于配制低毒副作用的抗肿瘤药物。
[0007] 本发明解决其技术问题所采用的的技术方案为：一种维生素C和黄芩素组成的方 剂在治疗宫颈癌中的应用，将黄芩素和维生素 C按照一定配比组合成为复方药物，所述复 方药物可制成散剂、片剂或丸剂。
[0008] 所述的黄芩素和维生素C组成的方剂由下列重量份的原料制成，黄芩素0. 5-2份， 维生素C 2-4份。优选地，黄芩素1份，维生素C 3份。
[0009] 本发明的有益效果是：该发明的动物试验结果表明：维生素 C和黄芩素组成的方 剂对小鼠移植性肉瘤有显著的抑制效果，与维生素 C混合的黄芩素可提高机体免疫能力和 抗氧化能力。该发明的细胞试验结果表明：维生素 C和黄芩素组成的方剂对HeLa细胞的生 长有显著的抑制作用，并诱导细胞凋亡。因此，维生素 C和黄芩素组成的方剂可用于制备肿 瘤药物以及与其他药物联合制备抗肿瘤药物。
【附图说明】
[0010] 图1是V-H方剂对HeLa细胞增殖的影响；
[0011] 图2是黄芩素和维生素对HeLa细胞增殖的影响。
【具体实施方式】
[0012] 下面结合实施例对本发明作进一步的详细说明，但它们并不是对本发明的限制。
[0013] 实施例1 :
[0014] 本实施例为维生素和黄芩素组成的方剂对HeLa细胞的影响。将黄芩素和维生素 C按照半数稀释法从1500 μ g/ml稀释至1500/32 μ g/ml，两两组合组成方剂作用于HeLa细 胞，并设立维生素 C和黄芩素各个浓度的单剂量组与之对比，MTT检测法药物作用12h、24h、 36h、48h、72h时对HeLa的影响，结果表明维生素 C药物浓度低于1500/2 μ g/ml时，对HeLa 细胞的生长抑制作用具有药物浓度依赖性，当维生素 C药物浓度大于600 μ g/ml时，对HeLa 的抑制作用随药物浓度变化不大；黄芩素药物浓度在〇~1500/8 μ g/ml的范围内对HeLa 细胞的抑制作用具有浓度依赖性。
[0015] 由以上预实验，将维生素 C和黄芩素按照600+50，600+100，600+150，600+200， 600+250ug/ml作用于HeLa细胞，并设立维生素 C 600 μ g/ml，黄芩素50，100，150，200， 250ug/ml为对照，MTT法检测所组成方剂对HeLa细胞生长的抑制作用，结果见图1、图2。
[0016] 试验结果表明维生素 C和黄芩素组成的方剂中黄芩素浓度为250 μ g/ml、维生素 C 600 μ g/ml时，作用细胞12h，细胞开始萎缩、变形、数量减少，作用36h，细胞结构消失，多数 凋亡。由维生素 C和黄芩素组成的方剂对HeLa细胞增殖的抑制作用较维生素 C和黄芩素 单剂显著增加（P〈〇. 01)。
[0017] 实施例2:
[0018] 本实施例为维生素C和黄芩素组成的方剂对U14宫颈癌荷瘤小鼠移植瘤、免疫器 官指数及细胞因子的影响。
[0019] 小鼠为18-22周，雌性昆明小鼠。将造模成功的小鼠随即分为6组，每组10只。分 别为空白对照组、阳性对照组（环磷酰胺）、阴性对照组、维生素 C高剂量组、维生素 C低剂 量组、黄芩素高剂量组、黄芩素低剂量组、维生素 C+黄芩素高剂量组、维生素 C+黄芩素低剂 量组。阳性对照组腹腔注射0. 2ml，20mg/kg环磷酰胺，阴性对照组灌胃给蒸馏水0. 2ml，维 生素低、高剂量组分别灌胃〇. 2ml，60mg/kg、0. 2ml，120mg/kg维生素C，黄芩素低、高剂量组 分别灌服0. 2ml，20mg/kg、0. 2ml，40mg/kg黄芩素，维生素C+黄芩素低、高剂量组分别灌服 0· 2ml，60mg/kg 维生素 C+20mg/kg 黄苳素、0· 2ml，120mg/kg 维生素 C+40mg/kg 黄苳素。连 续给药15天，第16天处死，取肿瘤组织、脾脏、胸腺、肝脏、肾脏和血清，计算抑瘤率、胸腺指 数、脾脏指数并检测血清中IL-2、IL-4、IFN-γ含量以及血清和肝肾组织中SOD活力和MDA 含量。
[0020] 由表2可以看出，维生素 C和黄芩素组成的方剂对小鼠肉瘤的抑制作用显著 (P〈0. 01)，仅次于环磷酰胺阳性对照组。维生素 C和黄芩素组成的方剂对肿瘤生长的抑制 作用明显优于黄芩素和维生素 C分别单独使用时的效果。
[0021] 表2维生素 C和黄芩素对小鼠肿瘤的抑制作用(J 土 s J
[0022]
[0023] *P〈0. 05, #P〈0. 01与阴性对照组相比；#P〈0. 05, ##P〈0. 01与阳性对照组相比
[0024] 由表3可知，与阳性对照组相比，维生素 C和黄芩素组成的方剂的高剂量组和低剂 量组使小鼠胸腺指数提高（P〈〇. 05)，维生素 C和黄芩素组成的方剂的高级两组是小鼠脾脏 指数提高（P〈〇. 05)，低剂量组使小鼠脾脏指数显著提高（P〈0. 01)。因此，维生素 C和黄芩 素组成的方剂可提高小鼠免疫力。
[0025] 表3维生素 C和黄芩素对小鼠免疫器官的影响
[0026]
[0027]
[0028] *P〈0. 05, #P〈0. 01与阴性对照组相比；#P〈0. 05, ##P〈0. 01与阳性对照组相比
[0029] 由表4, 5可知，与阳性对照组相比，维生素 C和黄芩素组成的方剂可显著提高小鼠 肝脏组织SOD活力（P〈0. 01)，降低血清和肝脏组织中MDA含量（P〈0. 05)，与阴性对照组相 比，维生素C和黄芩素组成的方剂可显著提高小鼠血清和肝脏组织SOD活力（P〈0. 01)，降低 血清和肝脏组织中MDA含量（P〈0. 05)。因此，维生素C和黄芩素组成的方剂可清除小鼠体 内脂质过氧化物，提高机体的抗氧化能力，保护脏器，延缓衰老。
[0030] 表4维生素C和黄芩素组成的方剂对小鼠SOD活力的影响
[0031]
[0032] *P〈0. 05, #P〈0. 01与阴性对照组相比；#P〈0. 05, ##P〈0. 01与阳性对照组相比
[0033] 表5维生素C和黄芩素组成的方剂对小鼠MDA含量的影响
[0034]
[0035]
[0036] *P〈0. 05, #P〈0. 01与阴性对照组相比；#P〈0. 05, ##P〈0. 01与阳性对照组相比
[0037] 由表6可知，与阳性对照相比，维生素C和黄芩素组成的方剂可提高小鼠血清肿 Il-2、IL-4、IFN-y含量。因此，维生素 C和黄芩素组成的方剂可增强机体的免疫应答反应， 促进细胞免疫和体液免疫的发展，增强免疫细胞的活性，提高机体免疫力。
[0038] 表6维生素C和黄芩素组成的方剂对小鼠血清中细胞因子的影响
[0039]
[0040] 动物试验结果显示：
[0041] 1.维生素C和黄芩素组成的方剂对宫颈癌有显著的抑制作用，且效果优于单剂药 物。
[0042] 2.维生素 C和黄芩素组成的方剂提高U14宫颈癌荷瘤小鼠的免疫器官胸腺和脾脏 的胸腺脾脏指数，并降低单剂黄芩素的毒副作用。
[0043] 3.维生素 C和黄芩素组成的方剂可提高机体SOD活力，减少机体MDA含量，增强机 体抗氧化能力，延缓脏器及组织衰老。
[0044] 4.维生素 C和黄芩素组成的方剂可提高小鼠体内细胞因子含量，增强机体免疫应 答反应，提高免疫细胞活性，增强免疫力。
【主权项】
1. 一种维生素C和黄芩素组成的方剂在治疗宫颈癌中的应用，其特征是：黄芩素和维 生素C按照一定配比组合成为复方药物，所述复方药物可制成散剂、片剂或丸剂。2. 根据权利要求1所述的维生素C和黄芩素组成的方剂在治疗宫颈癌中的应用，其特 征是：所述的黄芩素和维生素C组成的方剂由下列重量份的原料制成，黄芩素0. 5-2份，维 生素C 2-4份。3. 根据权利要求2所述的维生素C和黄芩素组成的方剂在治疗宫颈癌中的应用，其特 征是：所述的黄芩素和维生素C组成的方剂由下列重量分的原料制成，黄芩素1份，维生素 C 3份。
【专利摘要】本发明公开一种维生素C和黄芩素组成的方剂在治疗宫颈癌中的应用。该发明将多个剂量的黄芩素和维生素C组成不同方剂，与相应剂量黄芩素和维生素C单剂做对照，作用于U14宫颈癌荷瘤小鼠模型和HeLa细胞。动物试验表明黄芩素和维生素C组成的方剂较单剂维生素C和黄芩素具有更佳的抑瘤效果且毒副作用较小。细胞试验结果表明相同药物剂量，作用细胞12h，黄芩素和维生素C组成的方剂组中细胞开始萎缩、变形、数量减少；作用36h，细胞结构消失，多数凋亡，其抑制效果明显优于黄芩素和维生素C单剂量组。因此，由维生素C和黄芩素组成的方剂可用于宫颈癌的治疗。
【IPC分类】A61K31/375, A61P37/04, A61P35/00, A61K31/352, A61P15/00
【公开号】CN105012296
【申请号】CN201510417320
【发明人】栗坤, 王洁, 石明, 李建, 翟越
【申请人】燕山大学
【公开日】2015年11月4日
【申请日】2015年7月16日