一种从茶叶籽油提取结合型酚类化合物的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及化合物提取方法，特别是涉及一种从茶叶籽油提取结合型酚类化合物的方法。
【背景技术】
[0002]茶叶籽是山茶科山茶属茶树(Camellia sinensis O’Ktze)的种子，其油脂含量达30%左右，茶叶籽油被国家卫生部批准为新资源食品，富含天然酚类化合物，这些酚类化合物具有很强的抗氧化作用。研究茶叶籽油中酚类化合物可以为茶叶籽油精炼工艺的改进和活性成分开发提供科学的指导作用。
[0003]酚类化合物在茶叶籽油中以易溶解的游离型酚类化合物和与其他基质紧密结合的结合型酚类化合物的形态存在，目前研究多集中在游离型酚类化合物，结合型由于不易溶解和提取，油脂相关研究极为有限，目前尚无高效可行的方法。研究表明植物中潜在大量结合型酚类化合物，若不考虑结合型酚类化合物不能客观评价油脂品质及作用机理。因而，寻求一种实用、高效的茶叶籽油中结合型酚类化合物的提取方法具有重要的意义。
【发明内容】
[0004]本发明提供了一种茶叶籽油结合型酚类化合物的提取方法，其克服了现有技术所存在的不足之处。
[0005]本发明解决其技术问题所采用的技术方案是:一种从茶叶籽油提取结合型酚类化合物的方法包括以下步骤:
[0006]I)按Ig茶叶籽油:2?5mL正已烷的比例将两者混合均勾，按Ig茶叶籽油:1.5?4mL 60%甲醇溶液的比例加入甲醇溶液并在黑暗中剧烈震荡2?5min，静置分层后，重复2?5次分离甲醇层以提取游离型酚类化合物，余下茶叶籽油与正已烷的混合液；
[0007]2)将上述茶叶籽油与正已烷的混合液旋转蒸发至只剩茶叶籽油，按料液比Ig:1?8mL加入浓度为0.1?0.5mol/L的氢氧化钠溶液，于常温下避光碱解6?40h，加入盐酸将水解液调至中性；
[0008]3)将上述混合液在3000?5000r/min下离心5?15min以分离油相和水相，分离出的油相按Ig茶叶籽油:2?5mL正已烷的比例将两者混合均匀，按Ig茶叶籽油:1.5?4mL 60%甲醇溶液的比例加入甲醇溶液并在黑暗中剧烈震荡2?5min，静置分层后，重复2?5次提取甲醇层，合并提取液并旋转蒸发至干，得到所述结合型酚类化合物。
[0009]优选的，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.15?0.3mol/Lo
[0010]优选的，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.2mol/Lo
[0011]优选的，所述碱解时间是18?30h。
[0012]优选的，所述碱解时间是24h。
[0013]优选的，所述茶叶籽油与氢氧化钠溶液的体积比为1:3?1: 5。
[0014]优选的，所述茶叶籽油与氢氧化钠溶液的体积比为1:4。
[0015]优选的，步骤3)中，所述茶叶籽油:正已烷:60%甲醇溶液的比例是lg:2.5?3.5mL: 2 ?3mL0
[0016]相较于现有技术，本发明具有以下有益效果:
[0017]本发明首先从茶叶籽油中提取游离型酚类化合物，然后通过碱降解的方法使茶叶籽油中结合型酚类化合物释放出来再进行提取，经过福林酚法测定，其结合型酚类化合物的得率可以达到28mg/kg左右，提取得率高，反应条件温和，适于实际应用，对后续茶叶籽油的研究及开发利用提供了指导。
[0018]以下实施例对本发明作进一步详细说明；但本发明的一种从茶叶籽油提取结合型酚类化合物的方法不局限于实施例。
【具体实施方式】
[0019]实施例1
[0020]准确称取4.0g茶叶籽油，加入12mL正己烧，混合均勾，然后加入1mL 60%甲醇溶液在黑暗中剧烈震荡3min，静置分层后，取甲醇层，重复3次，合并提取液，旋转蒸发至干，用60%甲醇溶液定容至10ml。
[0021]将上述取游离型酚类化合物后的茶叶籽油与正己烷的混合物置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至只剩茶叶籽油。按料液比1:4向茶叶籽油中加入0.2mol/L的氧氧化钠溶液，置于常温下避光碱解24h，所得水解液用浓盐酸调至中性。将茶叶籽油混合液在4000r/min下离心lOmin，分离油相与水相。分离出的茶叶籽油加入12mL正己烷，混合均匀，然后加入10mL60%甲醇溶液在黑暗中剧烈震荡3min，静置分层后，取甲醇层，重复3次，合并提取液，旋转蒸发至干，用60%甲醇溶液定容至5mL，采用福林酚法测定酚类化合物含量。
[0022]经检测，茶叶籽油结合型酚类化合物的得率为28.13mg/kgo
[0023]实施例2
[0024]准确称取4.0g茶叶籽油，加入12mL正己烧，混合均勾，然后加入1mL 60%甲醇溶液在黑暗中剧烈震荡3min，静置分层后，取甲醇层，重复3次，合并提取液，旋转蒸发至干，用60%甲醇溶液定容至10ml。
[0025]将上述取游离型酚类化合物后的茶叶籽油与正己烷的混合物置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至只剩茶叶籽油。按料液比1:3向茶叶籽油中加入0.15mol/L的氧氧化钠溶液，置于常温下避光碱解18h，所得水解液用浓盐酸调至中性。将茶叶籽油混合液在4000r/min下离心lOmin，分离油相与水相。分离出的茶叶籽油加入12mL正己烷，混合均匀，然后加入10mL60%甲醇溶液在黑暗中剧烈震荡3min，静置分层后，取甲醇层，重复3次，合并提取液，旋转蒸发至干，用60%甲醇溶液定容至5mL，采用福林酚法测定酚类化合物含量。
[0026]经检测，茶叶籽油结合型酚类化合物的得率为19mg/kg。
[0027]实施例3
[0028]准确称取4.0g茶叶籽油，加入12mL正己烧，混合均勾，然后加入1mL 60%甲醇溶液在黑暗中剧烈震荡3min，静置分层后，取甲醇层，重复3次，合并提取液，旋转蒸发至干，用60%甲醇溶液定容至10ml。
[0029]将上述取游离型酚类化合物后的茶叶籽油与正己烷的混合物置于旋转蒸发器中，旋转蒸发至只剩茶叶籽油。按料液比1:5向茶叶籽油中加入0.2mol/L的氧氧化钠溶液，置于常温下避光碱解24h，所得水解液用浓盐酸调至中性。将茶叶籽油混合液在4000r/min下离心lOmin，分离油相与水相。分离出的茶叶籽油加入12mL正己烷，混合均匀，然后加入10mL60%甲醇溶液在黑暗中剧烈震荡3min，静置分