一种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉及其制备方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于中药技术领域，具体涉及一种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉及其制 备方法。
【背景技术】
[0002] 中药大黄为寥科植物掌叶大黄Rheum Palmatum L、唐古特大黄Rheumtanguticum MaximexBalf或药用大黄Rheum Officinace Baill的干燥根及根莖，具有泻下攻积，清热泻 火，凉血解毒，逐瘀通便，利湿退黄的功效。大黄是中医临床应用最为广泛的中药之一。化学 成分主要含有：（1)游离蒽醌类衍生物：大黄酚、大黄素、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酸；
[2] 结合型二蒽酮类衍生物：为大黄的主要泻下成分，番泻叶甙A、B ; (3)没食子酸。其中游 离蒽醌类衍生物是主要的抗菌活性物质；没食子酸具有抗炎、抗突变、抗氧化、抗自由基等 多种生物活性，同时没食子酸具有抗肿瘤作用。只有结合型二蒽酮类衍生物具有很强的泻 下功效，因此增加游离蒽醌类衍生物和没食子酸的含量，减少结合型二蒽酮类衍生物的含 量成为炮制大黄的重点。
[0003] 目前临床应用有：大黄、酒大黄、熟大黄、大黄炭。不同炮炙方法对蒽醌类成份的 影响是比较大的，酒炒与醋炒由于受热程度较轻，一般为160-170°，酒大黄总蒽醌减少约 1/10,其中结合性蒽醌减少了 1/4。用蒸、炖、煮法炮炙大黄，受热温度在100°左右，但对 结合型与游离型蒽醌类衍生物均产生较大影响，含量全部明显下降。熟大黄总蒽醌量减 少1/4以上，其中结合性大黄酸减少近1/2,鞣酸含量也减少1/3。炒炭受热程度一般达到 250-300°，蒽醌类衍生物含量均剧烈下降，大黄炭总蒽醌只减少约1/10,而结合性蒽醌减 少约4/5,结合性大黄酸也减少2/3,鞣酸含量仅减少1/3。酒炒大黄与醋炒大黄总游离蒽醌 衍生物量下降1/7-1/5,游离大黄酸及结合型蒽醌类衍生物未受影响，大黄炭全部蒽醌类衍 生物量均剧烈下降，仅保留有1/3左右。仅游离蒽醌衍生物减量，结合型甙类受影响。，
【发明内容】
[0004] 本发明主要针对常规的大黄炮制品存在总蒽醌减少，其中结合性蒽醌减少了 1/4， 游离蒽醌类衍生物和没食子酸的含量少，结合型二蒽酮类衍生物的含量高的问题，提供一 种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。
[0005] 本发明的另一目的是提供exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉的制备方法。
[0006] 本发明为解决上述问题而采取的技术方案为：
[0007] 本发明exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉通过下述方法制成：
[0008] (1)、将大黄粉碎成大黄粗粉，灭菌；
[0009] (2)、按照体积比为1:30~50的比例取exigua酿酒酵母菌和30~40°C的蒸馏水 混合均勾制成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2500~3000mLexigua 酿酒酵母菌液的比例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在28~32°C温 度下发酵培养3~5天，然后将发酵后的大黄发酵混合物在50~80°C温度下烘干，粉碎成 细粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。
[0010] 所述的exigua酿酒酵母菌中含菌量为1. 5 X 106~1. 5 X 10 8个/mL。
[0011] 本发明exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉的制备方法，包括以下步骤：
[0012] (1)、将大黄粉碎成大黄粗粉，灭菌；
[0013] (2)、按照体积比为1:30~50的比例取exigua酿酒酵母菌和30~40°C的蒸馏水 混合均勾制成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2500~3000mLexigua 酿酒酵母菌液的比例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在28~32°C温 度下发酵培养3~5天，然后将发酵后的大黄发酵混合物在50~80°C温度下烘干，粉碎成 细粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。
[0014] 本发明采用上述技术方案，利用微生物产生的酶系发酵中药，使微生物作用于中 药底物或微生物直接转化中药底物，以共同产生新的活性成份，提高中药药效，降低中药不 良反应，去除中药中的大分子杂质，使中药化学成份进行调整，改变药物作用，应用微生物 exigua酿酒酵母菌（Kazachstania exigua)发酵中药大黄的生产工艺，使大黄中①游离 型蒽醌类衍生物：大黄酚增加了 20% -35%，大黄素增加了 50% -60%，大黄素甲醚增加了 30% -40 %，芦荟大黄素增加了 70% -80 %，大黄酸增加了 40% -50% ;②结合型二蒽酮类 衍生物：番泻叶甙A，减少了 50% -60%，番泻叶甙B减少了 30% -45%;③没食子酸增加了 200% -300%。没食子酸是具有抗炎、抗突变、抗氧化、抗自由基等多种生物活性，同时没食 子酸具有抗肿瘤作用，通过微生物发酵炮炙大黄，在药材组织内进行成份的调整，比用传统 炮炙方法和提取分离手段简便而稳定，且临床运用形式是发挥炮制品全成份的总体综合作 用，有利于工业化大生产，增加了新的大黄炮炙品种，能使中医传统用药的优势得以充分体 现，因此本发明exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉可有效增加大黄的逐瘀解毒作用，达到活血 逐瘀通便作用，缓解大黄的剧烈泻下对胃肠道的不良反应。
【具体实施方式】
[0015] 实施例1
[0016] -种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉，通过下述方法制成：
[0017] (1)、将大黄粉碎成大黄粗粉，钴60照射灭菌；
[0018] (2)、按照体积比为1:30的比例取exigua酿酒酵母菌和30°C的蒸馏水混合均匀制 成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2500mLexigua酿酒酵母菌液的比 例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在28°C温度下发酵培养3天，然后 将发酵后的大黄发酵混合物在50°C温度下烘干，粉碎成细粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大 黄粉，其中exigua酿酒酵母菌含菌量为1. 5 X 10s个/mL。
[0019] 利用高效液相色谱法进行含量测定，其中用2010年版中华人民共和国药典（一 部）大黄含量测定项：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚高效液相色谱法测 定。再用《现代中药研究与实践》中《大黄酒炙前后8种成分的含量比较》中的含量测定测 定方法测定：没食子酸、番泻苷A、番泻苷B。
[0020] 对发酵前和发酵后的大黄粉进行检测，其中生大黄粉的检测结果见表1，制成的 exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉检测结果见表2 :
[0021] 表1生大黄粉的检测结果mg/g
[0023] 表2exigua酿酒酵母菌大黄粉的检测结果mg/g
[0025] 实施例2
[0026] -种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉，通过下述方法制成：
[0027] (1)、将大黄粉碎成大黄粗粉，钴60照射灭菌；
[0028] (2)、按照体积比为1:40的比例取exigua酿酒酵母菌和35°C的蒸馏水混合均勾制 成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2800mLexigua酿酒酵母菌液的比 例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在30°C温度下发酵培养4天，然后 将发酵后的大黄发酵混合物在65°C温度下烘干，粉碎成细粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大 黄粉，其中exigua酿酒酵母菌含菌量为1. 5 X 107个/mL。
[0029] 利用高效液相色谱法进行含量测定，其中用2010年版中华人民共和国药典（一 部）大黄含量测定项：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚高效液相色谱法测 定。再用《现代中药研究与实践》中《大黄酒炙前后8种成分的含量比较》中的含量测定测 定方法测定：没食子酸、番泻苷A、番泻苷B。
[0030] 对发酵前和发酵后的大黄粉进行检测，其中生大黄粉的检测结果见表3,制成的 exigua酿酒酵母菌大黄粉检测结果见表4 :
[0031] 表3生大黄粉的检测结果mg/g
[0033] 表4 exigua酿酒酵母菌大黄粉的检测结果mg/g
[0035] 实施例3
[0036] -种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉，通过下述方法制成：
[0037] (1)、将大黄粉碎成大黄粗粉，钴60照射灭菌；
[0038] (2)、按照体积比为1:50的比例取exigua酿酒酵母菌和40°C的蒸馏水混合均勾制 成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入3000mLexigua酿酒酵母菌液的比 例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在32°C温度下发酵培养5天，然后 将发酵后的大黄发酵混合物在80°C温度下烘干，粉碎成细粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大 黄粉，其中exigua酿酒酵母菌含菌量为1. 5 X 106个/mL。
[0039] 利用高效液相色谱法进行含量测定，其中用2010年版中华人民共和国药典（一 部）大黄含量测定项：芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚高效液相色谱法测 定。再用《现代中药研究与实践》中《大黄酒炙前后8种成分的含量比较》中的含量测定测 定方法测定：没食子酸、番泻苷A、番泻苷B。
[0040] 对发酵前和发酵后的大黄粉进行检测，其中生大黄粉的检测结果见表5,制成的 exigua酿酒酵母菌大黄粉检测结果见表6 :
[0041] 表5生大黄粉的检测结果mg/g
[0043] 表6 exigua酿酒酵母菌大黄粉的检测结果mg/g
【主权项】
1. 一种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉，其特征是通过下述方法制成： (1) 、将大黄粉碎成大黄粗粉，灭菌； (2) 、按照体积比为1:30~50的比例取exigua酿酒酵母菌和30~40°C的蒸馏水混合 均勾制成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2500~3000mLexigua酿 酒酵母菌液的比例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在28~32°C温度 下发酵培养3~5天，然后将发酵后的大黄发酵混合物在50~80°C温度下烘干，粉碎成细 粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。2. 根据权利要求1所述exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉，其特征是所述的exigua酿酒 酵母菌中含菌量为1. 5X106~1. 5X10 8个/mL。3.权利要求1所述exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉的制备方法，其特征是包括以下步 骤： (1) 、将大黄粉碎成大黄粗粉，灭菌； (2) 、按照体积比为1:30~50的比例取exigua酿酒酵母菌和30~40°C的蒸馏水混 合均勾制成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2500~3000mLexigua酿 酒酵母菌液的比例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在28~32°C温度 下发酵培养3~5天，然后将发酵后的大黄发酵混合物在50~80°C温度下烘干，粉碎成细 粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。
【专利摘要】本发明属于中药技术领域，具体涉及一种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉及其制备方法。本发明主要针对大黄炮制品存在总蒽醌减少，游离蒽醌类衍生物和没食子酸含量少，结合型二蒽酮类衍生物含量高的问题，提供一种exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。本发明exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉通过下述方法制成：(1)、将大黄粉碎成大黄粗粉，灭菌；(2)、按照体积比为1:30～50的比例取exigua酿酒酵母菌和蒸馏水混合均匀制成exigua酿酒酵母菌液，再按照1千克大黄粗粉中加入2500～3000mLexigua酿酒酵母菌液的比例，取exigua酿酒酵母菌液加入大黄粗粉中，混合均匀，在28～32℃温度下发酵培养3～5天，然后将发酵后的大黄发酵混合物在50～80℃温度下烘干，粉碎成细粉，即exigua酿酒酵母菌发酵大黄粉。
【IPC分类】A61K9/14, A61K36/708
【公开号】CN105287756
【申请号】CN201510747489
【发明人】侯锐钢, 张京平, 康建邦, 吴彦, 范丽霞, 赵培鸿, 邵云云
【申请人】山西医科大学第二医院
【公开日】2016年2月3日
【申请日】2015年11月5日