置于70-90 %乙醇中浸泡1-2小时，在水浴锅 内加热到60°C-70°C，浸提化，每IOmin揽拌一次，用纱布过滤，残渣中加入50-60%乙醇， 60°C-70°C继续浸提化，每IOmin揽拌一次，纱布过滤，合并浸提液，浓缩成糊状滤液，
[0078] 将上述两种提取液合并置入双效真空浓缩器中，浓缩至90°C时相对密度为1. 25 的浓缩液，置0~5°C低溫冷藏24小时；将冷藏液加0. 3%的助滤剂娃藻±，过滤，滤液再置 入双效真空浓缩器中，浓缩至每Iml含0.Ig生药量，然后加糊精，紫外线杀菌后装瓶。
[0079] 具体实施例3 :
[0080] 6-8月中旬夏枯草果穗呈栋红色时采收，除去杂质，晒干，生用，大概4500g。用粉 碎机粉碎过80-100目筛；将过筛的颗粒物浸泡水中12小时，然后放入提取罐加热煮沸1小 时，过滤，滤液备用；滤渣加水，第二次加热，煮沸45分钟，过滤，滤液备用；滤渣再加水，第 =次加热煮沸半小时，过滤，加热浓缩至膏状，静置备用。将膏状提取物置于70-90 %乙醇 中浸泡1-2小时，在水浴锅内加热到60°C-70°C，浸提化，每IOmin揽拌一次，用纱布过滤， 残渣中加入50-60%乙醇，60°C-70°C继续浸提化，每IOmin揽拌一次，纱布过滤，合并浸提 液，浓缩成糊状滤液，待用。
[0081] 再取其他原料再将其余原料玉米须llOOg，紫背天葵1200g，桑寄生llOOg，决明子 1200g，绞股蓝llOOg，桑叶1200g，马齿宽llOOg，昆布1200g，制首乌llOOg，虎杖llOOg，山 植1100邑，黄琴1100邑，半枝莲1100邑，泽泻1100邑，茵陈1100邑，檐子1200邑，紫花地下1100邑， 取其他原料洗净去杂，泡入5-10倍量的乙醇中，将药粉置有盖不诱钢桶内，加70 %乙醇液， 质量为粗粉的0. 8-1倍，揽拌均匀，湿润密闭放置1小时W上，使充分膨胀；将渗漉筒底部 滤板用纱布袋包裹铺平后再将湿润膨胀后的药物样品拌松弄散，然后用不诱钢勺盛粉，均 匀的装入渗漉筒，装10-12厘米厚，用T型棒压匀，再按上述操作，一层一层的装入，适当加 压，药粉填装不得超过渗漉筒的2/3高处；药粉面上盖不诱钢孔板压牢，打开渗漉筒下面的 放料阀，并放一容器，然后缓缓加入70%乙醇液；待排出药粉粉粒之间的空气，并有乙醇流 出约20L左右，关闭放料阀，盖上漉筒、浸溃24小时，然后开放料阀进行渗漉，控制渗漉速度 一般为1000 g药材每分钟流出2~3ml，滤液放入胆液缸内，并将排空时的乙醇液倒入胆液 缸；将渗滤液合并静置。
[0082] 将上述步骤得到的两种置入双效真空浓缩器中，浓缩至90°C时相对密度为1. 05 的浓缩液，置0~5°C低溫冷藏24小时；将冷藏液加0. 3%的助滤剂娃藻±，过滤，滤液再置 入双效真空浓缩器中，浓缩至每Iml含0.Ig生药量；然后加糊精，紫外线杀菌后装瓶。
[0083] 药理学毒性试验
[0084] 实验例1:本发明急性毒性试验
[00化]一、试验材料：动物：昆明种小鼠，体重18-25g，雌雄各半，山东大学生物试验室育 种。药物：本发明（所有原材料混合煎煮2次，合并过滤，取药液）含0. 0365mg/ml。
[0086]二、方法：
[0087] 1、LD50计算：采用改良寇氏法，将小鼠随机分成5组，每组10只，雌雄各半，将本 发明加蒸馈水溶解，配成最大浓度，按小鼠最大允许容量给药，所给剂量按生药量依次为 18,14. 4,11. 5,9. 2, 7. 4 (g.kg-1)，在动物禁食（不禁水）18小时后，一日内分两次给药（间 隔半小时），每次0. 5ml，观察动物死亡情况。
[0088] 2、最大耐受剂量测定（M1D值）：取小鼠20只，雌雄各10只。将本发明加蒸馈水 溶解，配成最高浓度，按动物的最大耐受量，W注射灌喂器能抽动为准。在动物禁食（不禁 水）18小时后，一日内分两次给药（间隔半小时），每次0. 5ml(每ml含生药0. 36g)，总药 量为18g生药Ag.d，相当临床成人50Kg体重用量的300倍。给药后连续观察7天。
[0089] S、试验结果：
[0090] 在LD50计算中当用最大允许浓度和最大允许容量给予小鼠时（18g/Kg.d)，未见 小鼠死亡，即未测出LD50,只可求最大耐受剂量，在7天观察期中，动物其食欲、活动、毛色、 精神状态等皆正常，发育正常，未见有死亡。即选用相当于临床剂量的300倍药量，并无不 良反应发生，表明急性毒性极小，MTD> 18g/Kg.d。
[0091] 实验例2 :急性毒性及长期毒性的试验结果 阳092] 急性毒性试验：通过小白鼠一次性灌胃给予本发明，最高浓度35%，最大灌胃容 量0. 4ml/10g，剂量14g/kg(每g药粉相当于IOg生药），连续观察7天，未发现任何毒性反 应，因浓度和剂量无法增加，故未能测出该药的LD50。最大耐受量测定：W最高浓度，最大 灌胃容量，小白鼠灌胃给药3次，间隔5小时，然后连续观察7天，无一例死亡。药粉剂量为 >42g/kg.日（每g药粉相当于IOg生药），按公斤体重计算相当于成人临床日用量的420 倍。
[0093] 长期毒性试验：为观察长期用药是否产生毒性反应，分别给予大鼠本发明饲服，按 成人临床日用量的70倍和35倍（即7g/kg/日和3. 5g/kg/日），连续给喂8周，未见大鼠 的行为、进食、体重出现异常，与对照组比，血常规，肝肾功能，各种重要脏器均无异常改变， 在所用药剂量范围内，未曾发现本发明的任何毒副反应。通过动物的急慢性毒性试验证实， 本发明安全范围较大，是一种安全可靠的保健品。
[0094] 药理学实验：
[0095] 高血压是导致屯、脑血管疾病重要的危险因素，是全球人类最常见的慢性病，积 极防治高血压是广受关注的重要课题。高血压的发病机制复杂，迄今尚未完全阐明。近 年来，一种细胞膜上的非选择性阳离子通道，瞬时受体电位通道C亚家族（transient recepto;rpotentialcanonical,TRPC)与高血压的相互关系正成为研究的热点。TRPC通道 组织分布广泛，受多种因素调节，广泛参与屯、血管病理生理过程。研究发现，瞬时受体电位 通道C亚族3亚型灯RPC3)和6亚型灯RPC6)与原发性高血压关系密切，作用机制与高血压 传统发病机制存在区别。然而，目前有关降压药物对TRPC通道影响的研究才刚刚开始。本 研究旨在了解自发性高血压大鼠（spontaneouslyhype;rtensiverats,SHR)主动脉TRPC3 和TRPC6的表达，用本发明、鄉沙坦和氨氯地平治疗S皿大鼠后，观察药物对TRPC3和TRPC6 表达变化的影响，初步探讨TRPC3和TRPC6调控血压的可能机制，为临床防治高血压寻找更 好的治疗祀点提供实验依据。
[0096] 1材料与方法
[0097] 1. 1 材料
[0098] 1. 1. 1实验动物
[0099] 健康甜R和WKY大鼠，12周，雄性，体重240-280g，购自中国医学科学院中国协和 医科大学实验动物研究所，许可证编号SCXK(京）2009-0004,在山东医科大学实验动物中 屯、饲养。 阳100] 1. 1. 2主要试剂及其配制 阳1〇1] (1)主要试剂
[0102] 雷米普利（瑞泰）赛诺菲-安万特制药有限公司鄉沙坦（代文）诺华制药有限 公司苯横酸氨氯地平（络活喜）辉瑞制药有限公司TRPC3、TRPC6兔抗多克隆抗体美国 Qiemicon公司Trizol Reagent美国Invitrogen反转录试剂盒ReverTra Ace-a-日本 TOYOBO膜蛋白提取试剂盒贝博生物有限公司GAPDH兔抗单克隆抗体北京博奥森生物技术 有限公司辣根酶标记羊抗兔IgG北京博奥森生物技术有限公司BCA蛋白浓度测定试剂盒北 京博奥森生物技术有限公司SDS-PAGE凝胶制备试剂盒北京博奥森生物技术有限公司 阳1〇3] (2)主要试剂的配制 阳104] 4%多聚甲醒：多聚甲醒40g，用0.IMPBS缓冲液定容至IL?蛋白电泳缓冲液： Tris6.Og,甘氨酸28. 8g，SDSl.Og,用去离子水定容至IL?转膜缓冲液：Tris2. 375g，甘氨 酸 11. 25g，SDSO. 375g，甲醇 200ml，去离子水定容至IL.TBS缓冲液：化Cl8.Og，KCl0. 2g， Tris3.Og，双蒸水定容至IL?TBST缓冲液：TBS缓冲液700ml,20%吐溫-201. 65ml?封闭 液：脱脂奶粉 5g，TBST(0.Ol% )100mL。 阳105] 1. 1. 3主要仪器与设备
[0106] 大鼠尾动脉无创血压计RBP-I型，淮北正华生物仪器有限公司高速冷冻离屯、 机Al1egra64R型，美国Beckman倒置显微镜日本OLYMPUS凝胶/发光图像分析系统 ChemiDOC-X-RS型，美国Bio-Rad超纯水仪化IXlO型，美国Minipore梯度PCR仪SlOOO双 槽，美国Bio-Rad全波长酶标仪MSS型，芬兰雷勃超低溫冰箱MDF-382HT型，日本Sanyo微 型离屯、机Microl7型，美国Thermo,电子分析天平AUW120D型，日本岛津，S用电热恒溫水 箱KW-1000DA型，江苏金坛市金为实验仪器厂。高压灭菌器LAC-5060S型，韩国莱博提弛恒 溫摇床420型，美国化ermo电热恒溫鼓风干燥箱畑G-9140A型，上海齐欣科学仪器有限公 司。电泳仪DYY-IOC型，北京市六一仪器厂垂直电泳槽。美国Bio-Rad台式冷冻恒溫摇床 SHA-2型，江苏金坛市金为实验仪器厂。722紫外光分光光度计UV-265型，日本岛津
[0107] 1.2实验方法
[0108] 1.2. 1动物分组及给药
[0109] 24只12周