酪酸梭菌培养液的制备：称取酪酸梭菌用无菌水配制成质量体积比为5%的菌液， 然后量取菌液0. 1ml接种于TPY液体培养基上于37°C培养2地，芽抱率达到75%W上时，使 发酵液降溫至20°C，即得酪酸梭菌培养液； b. 嗜酸乳杆菌培养液的制备：称取嗜酸乳杆菌用无菌水配制成质量体积比为5%的菌 液，然后量取菌液0. 1ml接种于DMRS液体培养基上于37°C培养2地，芽抱率达到75%W上 时，使发酵液降溫至20°C，即得嗜酸乳杆菌培养液； c. 啤酒酵母菌培养液的制备：称取啤酒酵母菌用无菌水配制成质量体积比为5%的菌 液，然后量取菌液0. 1ml接种于马铃馨葡萄糖液体培养基上于37Γ培养2地，芽抱率达到 75%W上时，使发酵液降溫至20°C，即得啤酒酵母菌培养液； d. 枯草芽抱杆菌培养液的制备：称取枯草芽抱杆菌用无菌水配制成质量体积比为5% 的菌液，然后量取菌液0. 1ml接种于LBG液体培养基上于37°C培养2地，芽抱率达到75%W 上时，使发酵液降溫至20°C，即得啤酒酵母菌培养液； 第二步混合菌液的制备 取上述步骤制得的酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养液和枯草芽 抱杆菌培养液，制成混合菌液，其中酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养 液和枯草芽抱杆菌培养液的体积比为1 : (0.5~0.8) : (1~1.5) : (1.2~1.8); 第Ξ步禽用微生态制剂的制备 e. 取第二步得到的混合菌液，加入混合菌液总质量100~300倍的无菌辅料，混合均匀， 30~35°C培养24h制得益生菌培养剂；其中无菌辅料为啤酒酒糟与麦教的混合物，啤酒酒糟 与麦教的质量比为（1.5~4) :1 ; f. 揽拌下，向益生菌培养剂中加入β-环糊精于溫度35°C下进行包合，β-环糊精的 添加量与益生菌培养剂的质量比为1 : 3,揽拌地后停止揽拌，干燥即得禽用微生态制剂。
[0014] 实施例3 本实施例与实施例2相同之处不再重述，不同之处在于第二步混合菌液的制备过程中 酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养液和枯草芽抱杆菌培养液的体积比 为1 : 0.8 : 1 : 1.2;第Ξ步禽用微生态制剂的制备过程中加入混合菌液总质量200倍 的无菌辅料，混合均匀，35°C培养24h制得益生菌培养剂；步骤e中无菌辅料为啤酒酒糟与 麦教的混合物，啤酒酒糟与麦教的质量比为1. 5 :1。
[0015] 实施例4 本实施例与实施例2相同之处不再重述，不同之处在于第二步混合菌液的制备过程中 酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养液和枯草芽抱杆菌培养液的体积比 为1 : 0.8 : 1.5 : 1.8;第Ξ步禽用微生态制剂的制备过程中加入混合菌液总质量100倍 的无菌辅料，混合均匀，35°C培养24h制得益生菌培养剂；步骤e中无菌辅料为啤酒酒糟与 麦教的混合物，啤酒酒糟与麦教的质量比为4 :1。
[001引实施例5 本实施例与实施例2相同之处不再重述，不同之处在于第二步混合菌液的制备过程中 酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养液和枯草芽抱杆菌培养液的体积比 为1 : 0.8 : 1.2 : 1.5;第Ξ步禽用微生态制剂的制备过程中加入混合菌液总质量300倍 的无菌辅料，混合均匀，35°C培养24h制得益生菌培养剂；步骤e中无菌辅料为啤酒酒糟与 麦教的混合物，啤酒酒糟与麦教的质量比为2 :1。
[0017] 试验例 禽用微生态制剂对鸡生产性能和鸡舍中氨含量的影响。
[001引 1.实验材料 微生态制剂A、B、C:由W上实施例3、4、5制得。
[0019] 实验用鸡：郑州某养殖场提供40周龄海兰褐壳蛋鸡。
[0020] 实验用基础饲料配方质量百分比计， 玉米57. 9%，麦教4%，豆巧28%，憐酸氨巧1. 3%，菜巧4%，鱼粉2%，石粉8%，食盐0. 3%，其 他添加剂1%。
[0021] 2.实验动物分组及饲料配方 实验分五个组，即为空白组、对照组、实验组A、实验组B、实验组C。每组100只体重大 体相等的40周龄海兰褐壳蛋鸡，分舍单独饲养。各组喂养日粮组分如表1，其余养殖条件保 持一致。
[0022] 实验持续时间为3周。每日记录数据为每组产蛋量、次蛋（蛋壳色素沉着不均匀 及崎形蛋、薄壳蛋、沙皮蛋、软壳蛋等）数、蛋重和每日鸡舍氨浓度。实验结束计算总平均采 食量、产蛋率、料蛋比、次蛋率、死淘率、腹泻发生率和呼吸道疾病发病率。其结果如表2.
通过表2可W看出，实验组的料蛋比比空白对照低0. 06-0. 1，比对照组低0. 14~0. 18， 说明微生态制剂可W提高饲料中营养物质的转化率。腹泻率比空白组低约4个百分点，比 对照组低1个百分点，说明微生态制剂与抗生素相比，有更好的预付作用。呼吸疾病发病率 实验组比空白组对照组低3个百分点，说明微生态制剂的使用，导致鸡舍空气环境改善，降 低了呼吸道疾病的发病率。
[0023] 最后应说明的是：W上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明， 尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可 W对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换。 凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的 保护范围之内。
【主权项】
1. 一种禽用微生态制剂的制备方法，其特征在于包括如下步骤： 第一步培养液的制备 a. 酪酸梭菌培养液的制备：称取酪酸梭菌用无菌水配制成质量体积比为3~5%的菌 液，然后量取菌液〇.lml接种于TPY液体培养基上于37°C培养24h，芽孢率达到75%以上 时，使发酵液降温至20°C，即得酪酸梭菌培养液； b. 嗜酸乳杆菌培养液的制备：称取嗜酸乳杆菌用无菌水配制成质量体积比为3~5%的 菌液，然后量取菌液〇.lml接种于DMRS液体培养基上于37°C培养24h，芽孢率达到75%以 上时，使发酵液降温至20°C，即得嗜酸乳杆菌培养液； c. 啤酒酵母菌培养液的制备：称取啤酒酵母菌用无菌水配制成质量体积比为3~5%的 菌液，然后量取菌液〇.lml接种于马铃薯葡萄糖液体培养基上于37°C培养24h，芽孢率达到 75%以上时，使发酵液降温至20°C，即得啤酒酵母菌培养液； d. 枯草芽孢杆菌培养液的制备：称取枯草芽孢杆菌用无菌水配制成质量体积比为 3~5%的菌液，然后量取菌液0.lml接种于LBG液体培养基上于37°C培养24h，芽孢率达到 75%以上时，使发酵液降温至20°C，即得啤酒酵母菌培养液； 第二步混合菌液的制备 取上述步骤制得的酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养液和枯草芽 孢杆菌培养液，制成混合菌液，其中酪酸梭菌培养液、嗜酸乳杆菌培养液、啤酒酵母菌培养 液和枯草芽孢杆菌培养液的体积比为1 : (〇. 5~0. 8) : (1~1.5) : (1.2~1.8); 第三步禽用微生态制剂的制备 e. 取第二步得到的混合菌液，加入混合菌液总质量100~300倍的无菌辅料，混合均匀， 30~35°C培养24h制得益生菌培养剂； f. 搅拌下，向益生菌培养剂中加入β-环糊精于温度30~40°C下进行包合，β-环糊精 的添加量与益生菌培养剂的质量比为1 : 3,搅拌4h后停止搅拌，干燥即得禽用微生态制 剂。2. 根据权利要求1所述的禽用微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤e中无 菌辅料为啤酒酒糟与麦麸的混合物，啤酒酒糟与麦麸的质量比为（1. 5~4) :1。3. 根据权利要求1所述的禽用微生态制剂的制备方法，其特征在于：所述步骤f中向 益生菌培养剂中加入β-环糊精于温度35°C下进行包合。
【专利摘要】本发明涉及一种禽用微生态制剂，属于兽药领域。该微生态制剂包括酪酸梭菌、嗜酸乳杆菌、啤酒酵母、枯草芽孢杆菌等益生菌，添加辅料，再由包合物包合而成。该微生态制剂可调节肉蛋禽类的肠胃菌群微环境，降低其腹泻等肠胃疾病发病率。并加强机体吸收转化能力，增加饲料利用率，降低粪便中的氨含量，改善鸡舍条件，进而降低其呼吸道疾病的发病率。
【IPC分类】A61K36/064, A61K35/742, A61P11/00, A61P1/00, A61P31/04, A61K35/747
【公开号】CN105412156
【申请号】CN201510765590
【发明人】张听盼, 陈建晖
【申请人】郑州后羿制药有限公司
【公开日】2016年3月23日
【申请日】2015年11月11日