1型大孔吸附树脂的体积比为1:0.6。
[0039]其中DA-201型大孔吸附树脂柱的高度和直径比为5:1。
[0040]所述牛膝提取物的提取方法为： (1)把牛膝粉碎，过10目筛，加2倍重量的95%乙醇浸泡30min，过滤，得提取液； (2 )把提取液减压回收乙醇至无醇味，得流浸膏； (3) 流浸膏加5倍体积的环己烷90°C加热回流30min，过滤，得提取液； (4) 将上步骤的提取液上D113型离子交换树脂柱，上柱流速为2.5mL/min，用2. OBV体积 的丙酮洗脱，洗脱流速为2.5mL/min，收集洗脱液； (5) 把洗脱液减压浓缩成相对密度为1.02的浸膏，即为牛膝提取物。
[0041 ]其中步骤(4)提取液和D113型离子交换树脂的体积比为1:1.8。
[0042]其中D113型离子交换树脂柱的高度和直径比为6:1。
[0043] 对比例2: 一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，所述杜仲提取物的提取方法为： 步骤(4)中：把水层上D101型大孔吸附树脂柱，其余同实施例1。
[0044] 对比例3: 一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，所述牛膝提取物的提取方法为： 步骤(4)中：将上步骤的提取液上D151型离子交换树脂柱，其余同实施例2。
[0045] 实施例4: 采用常规制备工艺，本发明混合提取物可制成任何一种药剂学上所说的口服剂型，如 片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂。
[0046]其余同实施例1-3中的任意一项。
[0047] 实施例5: 将由实施例1-3制得的混合均匀的提取物，按照常规片剂的操作方法，加入药用辅料， 将各组分混合均匀，湿法制粒，过筛，采用常规片剂制备法压片制成片剂，其中各组分的含 量如下： 成分 重量(份） 混合提取物 50 糊精 25 淀粉浆 20 羧甲基淀粉钠 10 滑石粉 12 聚乙二醇 8 其余同实施例卜3中的任意一项。
[0048] 实施例6: 将由实施例1-3制得的混合均匀的提取物，按照常规胶囊剂的操作方法，加入药用辅 料，将各组分混合均匀，制粒，采用常规胶囊剂制备法填充制成胶囊剂，其中各组分的含量 如下： 成分 重量(份） 混合提取物 100 可溶性淀粉 62 硬脂酸镁 21 低取代羟丙基纤维素 16 氯化钠 8 其余同实施例卜3中的任意一项。
[0049] 实施例7: 将由实施例1-3制得的混合均匀的提取物，按照常规糖浆剂的操作方法，乙醇沉淀1-2 次，过滤，浓缩，加水沉淀，过滤，加入药用辅料，过滤，分装灭菌，采用常规糖浆剂制备法制 备口服液，其中各组分的含量如下： 成分 重量(份） 混合提取物 100 乙醇 120 蔗糖 80 羧甲基纤维素钠 15 山梨酸 4 苯甲酸 3 其余同实施例卜3中的任意一项。
[0050] 疗效实验： 1实验材料： 昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半。
[0051] 2本发明镇痛作用的实验方法： 随机选用小鼠80只，每组10只。分为实施例1-3组、对比例1-3组、消炎痛组（山东省潍坊 制药二厂）、对照组(生理盐水）。实施例1-3组和对比例1-3组分别给实施例1-3组和对比例 1 -3组制得的中药组合物，每天1次，每次50mg/kg，消炎痛组给消炎痛药物每天1次，每次 〇. 5g/kg，对照组每天给0.5m/kg胜利盐水，连续灌胃给药3天，于末次给药后30分钟各鼠均 腹腔注射〇. 6 %醋酸0.2ml，记录注射后15分钟内各组出现扭体反应的次数。
[0052] 实施例1-3是在本发明工艺范围内，对比例1改变了工艺参数，对比例2改变了杜仲 提取物的提取工艺(采用不同大孔吸附树脂），对比例3改变了牛膝的提取工艺(采用不同离 子交换树脂）。
[0053] 从表1数据可以看出，本发明实施例1-3小鼠扭体次数明显低于对比例1-3组和消 炎痛组，潜伏时间高于对比例1-3组和消炎痛组，可见本发明对小鼠疼痛刺激的影响低于对 比例1-3组和消炎痛组。
[0054] 3本发明抗炎作用的实验方法:分2个实验进行。
[0055] 3.1对巴豆油致小鼠耳肿胀的影响： 将小鼠90只随机分为实施例1-3组、对比例1-3组、消炎痛组、对照组(生理盐水），每组 10只。每鼠左耳两面涂致炎液(2%巴豆油，20%无水乙醇，5%蒸馏水，73%乙醚)0. lml，右 耳作空白对照，同上步试验方法分别灌胃给药，4小时后处死小鼠，分别在同一部位打孔，分 析天平称重，计算结果。
[0056] 3.2对小鼠棉球肉芽肿的影响： 分组同上，无菌条件下于每鼠两侧腋下各植入消毒棉球，缝合切口。灌胃给药7天后处 死，取出棉球烘干，称重，减去棉球重量，即为肉芽干重。解剖胸腺、脾脏，称重，计算结果，测 定胸腺和脾脏指数。在处死小鼠前先称每只小鼠的重量，然后将小鼠处死后，立取其离体胸 腺和脾脏，用万分之一电子分析天平分别称其湿重。胸腺和脾脏指数的计算公式为:胸腺或 脾脏指数=湿重(mg)/体重(g)。
[0057] 4统计学分析:采用SPSS软件包计算，组间分析用方差分析，统计结果。
[0058]实施例1-3是在本发明工艺范围内，对比例1改变了工艺参数，对比例2改变了杜仲 提取物的提取工艺(采用不同大孔吸附树脂），对比例3改变了牛膝的提取工艺(采用不同离 子交换树脂）。
[0059]从表2数据可以看出，本发明实施例1-3小鼠耳肿胀、肉芽肿、胸腺指数、脾脏指数 明显低于对比例1-3组和消炎痛组，可见本发明对小鼠急性炎症及慢性炎症的抑制作用优 于对比例1-3组和消炎痛组。
[0060]综上所述，在本发明实施例1-3对于强直性脊柱炎的治疗和抑制效果都明显优于 对比例1组(工艺参数不同）、对比例2组(杜仲的提取工艺不同）、对比例3组（牛膝的提取工 艺不同）和消炎痛组，可见工艺参数、杜仲的提取工艺、牛膝的提取工艺均对制得的药物提 取的有效成分及疗效有影响，因此本发明采用了特定的工艺参数、杜仲和牛膝的提取工艺， 才能制得疗效显著的治疗类风湿关节炎的药物。
【主权项】
1. 一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:包括下列原料:杜仲、牛膝。2. -种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:包括下列质量份数的原料:杜仲提 取物6-10份，牛膝提取物9-13份，混合均匀。3. 如权利要求2所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:杜仲提取物的 提取方法为： (1) 杜仲粉碎，过10目筛，加6-10倍重量的甲醇，超声提取20-30min，过滤，得滤液； (2) 把滤液减压浓缩，得相对密度为1.03-1.05的浸膏，把浸膏溶解于1.5-2.0倍体积的 蒸馏水，得水溶液； (3 )把水溶液用1.0-2.0倍体积的氯仿萃取，分离出水层和氯仿层； (4) 把水层上DA-201型大孔吸附树脂柱，上柱流速为1.5-2.5mL/min，用2-4BV体积的 60%乙醇洗脱，洗脱流速为1.5-2.5mL/min，收集洗脱液； (5) 把步骤(3)的氯仿层和步骤(4)的洗脱液混合，减压浓缩成相对密度为1.08-1.10的 浸膏，即为杜仲提取物。4. 如权利要求3所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为：步骤(4)水层 和DA-201型大孔吸附树脂的体积比为1:0.8-1.2。5. 如权利要求3所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:DA-201型大孔 吸附树脂柱的高度和直径比为5:1。6. 如权利要求2所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为：其特征为：牛 膝提取物的提取方法为： (1)把牛膝粉碎，过10目筛，加3-7倍重量的95%乙醇浸泡40-60min，过滤，得提取液； (2 )把提取液减压回收乙醇至无醇味，得流浸膏； (3 )流浸膏加2-4倍体积的环己烷70-80 °C加热回流40-60min，过滤，得提取液； (4) 将上步骤的提取液上D113型离子交换树脂柱，上柱流速为1.0-2. OmL/min，用2.5-3.5BV体积的丙酮洗脱，洗脱流速为1.0-2. OmL/min，收集洗脱液； (5) 把洗脱液减压浓缩成相对密度为1.04-1.06的浸膏，即为牛膝提取物。7. 如权利要求6所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为：步骤(4)提取 液和D113型离子交换树脂的体积比为1:0.5-1.5。8. 如权利要求6所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:D113型离子交 换树脂柱的高度和直径比为6:1。9. 如权利要求2所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:原料混合均匀 后制成任何一种药剂学上所说的口服剂型。10. 如权利要求9所述的一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，其特征为:所述口服剂 型为:片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂。
【专利摘要】本发明公开了一种治疗强直性脊柱炎的中药组合物，是由分别从杜仲和牛膝中的提取物组成，可制成任何一种药剂学上所说的口服剂型，如片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、糖浆剂。本发明原料简单，与其他治疗强直性脊柱炎的组合物相比，降低了成本，同时采用了特定的中药提取方法，提高中药有效物的提取率，提高了治疗效果，并且毒副作用小。
【IPC分类】A61K36/21, A61K36/46, A61P19/00
【公开号】CN105582043
【申请号】CN201511010734
【发明人】吕爱平, 张戈, 吕诚, 赵宁, 王茂林, 姜淼, 张弛, 梁超
【申请人】中国中医科学院中医临床基础医学研究所, 香港浸会大学中医药学院
【公开日】2016年5月18日
【申请日】2015年12月30日