一种治疗膝骨性关节炎的中药复方及其制备方法
【专利摘要】本发明公开了一种治疗膝骨性关节炎的中药复方及其制备方法，由如下重量份比例的生药制备而成：五加皮，40～60份；三七，50～70份；杜仲，40～60份；过山龙，20～30份；木香，20～30份；红花，20～30份；竹根七，15～25份；牛膝，20～30份；伸筋草，5～15份；当归，60～80份；丹参和珠子参共40～60份，二者重量份之比为3～5:1。本发明提供的中药复方经药理实验证明对膝骨性关节炎具有显著的治疗作用；本发明提供的中药活性成分浸膏通过本发明提供的中药复方经提取、浓缩制备而成，对膝骨性关节炎具有显著的治疗作用；本发明提供的中药复方制剂含有本发明提供的中药活性成分浸膏和药学上可以接受的辅料载体，可以用于治疗膝骨性关节炎。
【专利说明】
一种治疗膝骨性关节炎的中药复方及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明属于中药领域，涉及一种中药复方，具体涉及一种治疗膝骨性关节炎的中 药复方及其制备方法。
【背景技术】
[0002] 膝骨性关节炎是一种以退行性病理改变为基础的疾患，多患于中老年人群，主要 病理特征是关节软骨的退变，其症状多表现为膝盖红肿痛、上下楼梯痛、坐起立行时膝部酸 痛不适等。也会有患者表现肿胀、弹响、积液等，如不及时治疗，则会引起关节畸形，残废。在 膝关节部位还常患有膝关节滑膜炎、韧带损伤、半月板损伤、膝关节游离体、胭窝囊肿、髌骨 软化、鹅足滑囊炎、膝内/外翻等关节疾病。
[0003] 膝骨性关节炎的发生一般由膝关节退行性病变、外伤、过度劳累等因素引起。膝骨 性关节炎多发于中老年人，是引起老年人腿疼的主要原因。另外，体重过重、不正确的走路 姿势、长时间下蹲、膝关节的受凉受寒也是导致膝骨性关节炎的原因。
[0004] 研究者通过对关节软骨生化成份的研究表明：年幼者关节软骨硫酸软骨素含量较 高，软骨的刚性与弹性较高;而年长者硫酸角质素和蛋白质的含量及纤维化程度增高;硫酸 软骨素减少可能是软骨退变的重要原因之一。
[0005] 目前的治疗方案包括：
[0006] 1、防止软骨进一步磨损。软骨保护剂如硫酸氨基葡萄糖能促进软骨的合成、抑制 关节软骨的分解，同时还具有抗炎作用。硫酸氨基葡萄糖中富含的硫酸根也是合成软骨基 质的必需成分之一。此类药物能够缓解疼痛症状，改善关节功能，长期服用还能够迟滞关节 结构的破坏。硫酸氨基葡萄糖起效较慢，但药物安全性佳，适合作为基础治疗用药长期服 用。
[0007] 2、关节镜治疗膝骨性关节炎。将直径5_的棒状光学内窥镜，通过关节间隙置入关 节腔内，并将病变部位和组织放大4~6倍显示在监控器上，利用细小的工具修复关节软骨， 并对关节腔进行清理。
[0008] 临床上还缺少对膝骨性关节炎治疗显著的中药复方。
【发明内容】
[0009] 本发明的第一目的在于提供一种中药复方，用于治疗膝骨性关节炎；
[0010] 本发明的第二目的在于提供一种利用上述中药复方制备的中药活性成分浸膏，用 于治疗膝骨性关节炎；
[0011] 本发明的第三目的在于提供一种治疗膝骨性关节炎的中药复方制剂，含有上述的 中药活性成分浸膏和药学上可以接受的辅料。
[0012] 本发明的上述目的是通过下面的技术方案得以实现的：
[0013] -种治疗膝骨性关节炎的中药复方，由如下重量份比例的生药制备而成:五加皮， 40~60份；三七，50~70份;杜仲，40~60份;过山龙，20~30份;木香，20~30份；红花，20~ 30份;竹根七，15~25份；牛膝，20~30份;伸筋草，5~15份；当归，60~80份;丹参和珠子参 共40~60份，二者重量份之比为3~5:1。
[0014]进一步地，所述中药复方由如下重量份比例的生药制备而成:五加皮，50份;三七， 60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花，25份;竹根七，20份;牛膝，25份;伸筋草， 10份;当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量份之比为4:1。
[0015]进一步地，所述中药复方由如下重量份比例的生药制备而成:五加皮，40份;三七， 50份;杜仲，40份;过山龙，20份;木香，20份;红花，20份;竹根七，15份;牛膝，20份;伸筋草，5 份;当归，60份;丹参和珠子参共40份，二者重量份之比为3:1。
[0016]进一步地，所述中药复方由如下重量份比例的生药制备而成:五加皮，60份;三七， 70份;杜仲，60份;过山龙，30份;木香，30份;红花，30份;竹根七，25份;牛膝，30份;伸筋草， 15份;当归，80份;丹参和珠子参共60份，二者重量份之比为5:1。
[0017] -种治疗膝骨性关节炎的中药活性成分浸膏，由上述中药复方制备而成，包括如 下步骤：取配方量的生药用50~90%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密度为 1.03~1.30，喷雾干燥得浸膏粉。
[0018] 进一步地，取配方量的生药用70%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液。
[0019] 进一步地，浓缩至密度为1.10~1.20。
[0020]进一步地，每克浸膏粉相当于生药3~6g。
[0021] 一种治疗膝骨性关节炎的中药复方制剂，含有上述中药活性成分浸膏和药学上可 以接受的辅料，按照常规方法制备成制剂。
[0022 ]进一步地，所述制剂包括颗粒剂、片剂、胶囊剂、注射液、口服液。
[0023]本发明的优点：
[0024] 1、本发明提供的中药复方经药理实验证明对膝骨性关节炎具有显著的治疗作用；
[0025] 2、本发明提供的中药活性成分浸膏通过本发明提供的中药复方经提取、浓缩制备 而成，对膝骨性关节炎具有显著的治疗作用；
[0026] 3、本发明提供的中药复方制剂含有本发明提供的中药活性成分浸膏和药学上可 以接受的辅料载体，可以用于治疗膝骨性关节炎。
【具体实施方式】
[0027]下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。
[0028]实施例1:活性成分浸膏的制备
[0029] 生药配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量 份之比为4:1。
[0030] 制备方法:取配方量的生药用70%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.15,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药4.5g。
[0031] 实施例2:活性成分浸膏的制备
[0032] 生药配方：五加皮，40份;三七，50份;杜仲，40份;过山龙，20份;木香，20份;红花， 20份;竹根七，15份;牛膝，20份;伸筋草，5份；当归，60份;丹参和珠子参共40份，二者重量份 之比为3:1。
[0033] 制备方法:取配方量的生药用50%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.10,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药3g。
[0034]实施例3:活性成分浸膏的制备
[0035] 生药配方：五加皮，60份;三七，70份;杜仲，60份;过山龙，30份;木香，30份;红花， 30份;竹根七，25份；牛膝，30份;伸筋草，15份；当归，80份;丹参和珠子参共60份，二者重量 份之比为5:1。
[0036] 制备方法:取配方量的生药用90%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.20，喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药6g。
[0037]实施例4:活性成分浸膏的制备
[0038] 生药配方：五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量 份之比为3:1。
[0039] 制备方法:取配方量的生药用70%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.15,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药4.5g。
[0040]实施例5:活性成分浸膏的制备
[0041 ] 生药配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量 份之比为5:1。
[0042] 制备方法:取配方量的生药用70%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.15,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药4.5g。
[0043]实施例6:活性成分浸膏的制备
[0044] 生药配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量 份之比为2:1。
[0045] 制备方法:取配方量的生药用70%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.15,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药4.5g。
[0046]实施例7:活性成分浸膏的制备
[0047] 生药配方:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量 份之比为6:1。
[0048] 制备方法:取配方量的生药用70%乙醇热回流提取2~3次，合并提取液，浓缩至密 度为1.15,喷雾干燥得浸膏粉，每克浸膏粉相当于生药4.5g。
[0049] 实施例8:对膝骨性关节炎的治疗作用
[0050] 1、材料与方法
[0051 ] 1.1动物
[0052] 10月龄普通级日本大耳白兔84只，体重2.9~3. lkg，雌雄不限。由贵阳医学院实验 动物中心提供，饲料由该中心提供标准饲料。
[0053] 1.2试剂与样品
[0054] 分别按实施例1~7方法制备活性成分浸膏1~7。木瓜蛋白酶(Papain) :Merk公司 广品；硫酸软骨素标准品：Sigma公司广品；膜蛋白酶、胃蛋白酶、HC1、NaOH、尚岭土、活性炭、 95%乙醇、乙醚。
[0055] 1.3仪器
[0056] 骨科常用手术器械、温度计、滤纸、分液漏斗、离心机、干燥器、试管、恒温水浴箱、 冷冻库、紫外分光光度计、间苯三酚、冰醋酸、超声波清洗机、全自动电子分析天平。
[0057] 1.4白兔分组及模型制备
[0058]按照组间均衡一致的原则，将84只日本大耳白兔随机分成7组，分别为正常对照 组、模型对照组、活性成分浸膏1组(80mg · kg-1)、活性成分浸膏4组(80mg · kg-1)、活性成分 浸膏5组(80mg · kg-"、活性成分浸膏6组(80mg · kg-"、活性成分浸膏7组(80mg · kg-每 组12只。适应环境1周后，按照兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶造成骨关节炎病变模型方法， 将日本大耳白兔右膝关节腔内注入1.6 %木瓜蛋白酶生理盐水溶液0.5ml，隔2d后再注射第 2次，再隔2d后注射第3次，共注射3次。60只健康日本大耳白兔正常饲养1周后，模型组、活性 成分浸膏组按上述造模方法造模。于末次造模注射后的第28d开始，模型组给予 0.9NS8.4ml/(kg · d)灌胃每天一次，正常组按正常饲养4、8、12周后，正常组、模型组、活性 成分浸膏组每次4只取软骨后宰杀，留取标本。
[0059] 1.5硫酸软骨素的提取
[0060] (1)高温蒸煮与碱解:将软骨投入恒温蒸煮器内于80°C煮4~6h，蒸馏水洗净，放入 冷库于-25°(：速冻6~811后立即绞碎，称重后按原料与2%他0!1的比例为1 :6.25的量加入2% NaOH，室温提取1.5h，然后用2mol/LHCl调pH到6~6.5，定量滤纸、漏斗过滤。留下滤液。滤渣 再以1:0.12的比例加2 % NaOH，于40 °C下提取lh，再用定量滤纸过滤，弃滤渣，取滤液。合并 两次滤液，并测量体积待用。
[0061 ] (2)酶解:滤液用2mol/L HC1调pH到8·0~9·0，按滤液与胰蛋白酶1000:0·5的比例 加入胰酶，于40~50°C水解lh后，再按1000:0.5的比例加入胃蛋白酶，40~50°C水解1.5h。 水解完毕后定量滤纸过滤并加入高岭土和活性炭(使其浓度为〇. 5% )进行吸附，同时慢速 间歇搅拌4h，置4 °C下自然澄清，取上清液，弃沉淀。
[0062] (3)反萃取:按体积比1:1向上清液中加入氯仿充分混合。
[0063] (4)沉淀：将上述水层，调pH到6.8~7.2，再加入2.5体积95%以上乙醇沉淀，待澄 清后，弃清液，以1500r/min离心7~lOmin，收集沉淀，其沉淀物即为硫酸软骨素。
[0064] (5)干燥:将上述沉淀于盛有五氧化二磷的干燥器中即得成品。
[0065] 1.6硫酸软骨素质量的测定
[0066] 原理:利用硫酸软骨素（CS)与含有间苯三酚的无机酸在100°C反应30min，生成有 色物质在波长558nm处有最大吸收，通过比色测定硫酸软骨素的含量。
[0067] (1)硫酸软骨素标准溶液的配制：准确称取已干燥至恒重的硫酸软骨素0.25g，于 25ml量瓶中，加蒸镏水使其溶解稀释至刻度并摇匀。
[0068] (2)间苯三酚溶液(反应试剂）的配制：取冰醋酸30ml，盐酸40ml和50mg/ml间苯三 酚乙醇溶液l〇ml混合(临用时配制）。
[0069] (3)吸收光谱的测定:准确吸取硫酸软骨素标准溶液0.4ml，置于10ml量瓶中，用蒸 馏水稀释至1.0ml，加入间苯三酚溶液3ml，盖塞后混匀。将量瓶置于沸水浴中加热30min后 取出，立即置于冰水浴中冷却5min，用冰醋酸稀释至刻度，混匀，以试剂空白为参比，在400 ~800nm波长范围内扫描。见在波长558nm处有最大吸收。选择波长558nm作为测定波长。
[0070] (4)绘制标准曲线:吸收硫酸软骨素标准溶液，分别配制浓度为0.1、0.2、0.3、0.4、 0.5、0.6、0.7、0.8、0.9、1.0011^/1111溶液，同（3)步操作，在波长55811111处测定吸收度，以吸收 度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。得其回归方程。
[0071] (5)硫酸软骨素(CS)的样品测定:取105°C干燥至恒重的硫酸软骨素(CS)的样品， 精密称定其质量，置l〇〇ml量瓶中，加蒸馏水适量溶解，并加蒸馏水至刻度，摇匀。取lml溶 液，按上述方法测定。
[0072] 1.7统计学方法
[0073]实验数据用均数土标准差(X土s)表示，应用SPSS18.0版统计软件进行单因素方差 分析和t检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
[0074] 2、实验结果
[0075]与正常对照组相比，模型对照组硫酸软骨素的含量4周有差异(P〈0.05)，8、12周时 有显著差异(P〈〇.01) ;4、8、12周，活性成分浸膏1组、活性成分浸膏4组、活性成分浸膏5组的 硫酸软骨素的含量呈上升趋势;与模型组相比，活性成分浸膏4组、活性成分浸膏5组硫酸软 骨素测定值8、12周时有差异(P〈0.05)，且随时间的推移差异逐渐明显。与模型组相比，活性 成分浸膏1组硫酸软骨素测定值4、8、12周时都有显著差异(P〈0.01)。活性成分浸膏6组、活 性成分浸膏7组与模型组差异不明显。试验结果见表1。
[0076]表1对膝骨性关节炎模型家兔硫酸软骨素含量(mg)的影响
[0078] 活性成分浸膏2、3的治疗效果分别与活性成分浸膏4、5相似。
[0079] 骨性关节炎的实质是软骨的退行性改变，其中包括软骨结构及成分的改变。一系 列的研究证明，无论是人还是动物模型的骨性关节炎病变软骨，软骨基质所含的蛋白多糖 渐进性减少，而胶原的含量则相对稳定不变。研究证明，随着年龄的增长软骨基质中蛋白多 糖的主要改变表现在:大分子降解成小分子，糖醛的含量减少，硫酸软骨素和半乳糖胺的比 例降低，而硫酸角质素和蛋白质的比例增高。本发明提供的活性成分浸膏可以升高膝骨性 关节炎模型家兔硫酸软骨素含量，对膝骨性关节炎具有治疗作用，可以开发成治疗膝骨性 关节炎的药物。
[0080] 实施例9:颗粒剂的制备
[0081] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按其与赋形剂重量比为1:10的比例加入赋 形剂，制成颗粒剂。
[0082] 实施例10:片剂的制备
[0083] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按其与赋形剂重量比为1:10的比例加入赋 形剂，制粒压片。
[0084]实施例11:注射液的制备
[0085]按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按常规加注射用水，精滤，灌封灭菌制成注 射液。
[0086]实施例12: 口服液的制备
[0087]按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按常规口服液制法制成口服液。
[0088]实施例13:胶囊剂的制备
[0089] 按实施例1方法先制得活性成分浸膏，按其与赋形剂重量比为1:10的比例加入赋 形剂，制成胶囊剂。
[0090] 上述实施例的作用在于说明本发明的实质性内容，但并不以此限定本发明的保护 范围。本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换， 而不脱离本发明技术方案的实质和保护范围。
【主权项】
1. 一种治疗膝骨性关节炎的中药复方，其特征在于，由如下重量份比例的生药制备而 成：五加皮，40~60份;三七，50~70份;杜仲，40~60份;过山龙，20~30份;木香，20~30份； 红花，20~30份;竹根七，15~25份;牛膝，20~30份;伸筋草，5~15份；当归，60~80份;丹参 和珠子参共40~60份，二者重量份之比为3~5:1。2. 根据权利要求1所述的治疗膝骨性关节炎的中药复方，其特征在于，由如下重量份比 例的生药制备而成:五加皮，50份;三七，60份;杜仲，50份;过山龙，25份;木香，25份;红花， 25份;竹根七，20份；牛膝，25份;伸筋草，10份；当归，70份;丹参和珠子参共50份，二者重量 份之比为4:1。3. 根据权利要求1所述的治疗膝骨性关节炎的中药复方，其特征在于，由如下重量份比 例的生药制备而成:五加皮，40份;三七，50份;杜仲，40份;过山龙，20份;木香，20份;红花， 20份;竹根七，15份;牛膝，20份;伸筋草，5份；当归，60份;丹参和珠子参共40份，二者重量份 之比为3:1。4. 根据权利要求1所述的治疗膝骨性关节炎的中药复方，其特征在于，由如下重量份比 例的生药制备而成:五加皮，60份;三七，70份;杜仲，60份;过山龙，30份;木香，30份;红花， 30份;竹根七，25份；牛膝，30份;伸筋草，15份；当归，80份;丹参和珠子参共60份，二者重量 份之比为5:1。5. -种治疗膝骨性关节炎的中药活性成分浸膏，由如权利要求1~4任一所述的中药复 方制备而成，其特征在于，包括如下步骤:取配方量的生药用50~90%乙醇热回流提取2~3 次，合并提取液，浓缩至密度为1.03~1.30，喷雾干燥得浸膏粉。6. 根据权利要求5所述的中药活性成分浸膏，其特征在于:取配方量的生药用70%乙醇 热回流提取2~3次，合并提取液。7. 根据权利要求5所述的中药活性成分浸膏，其特征在于:浓缩至密度为1.10~1.20。8. 根据权利要求5所述的中药活性成分浸膏，其特征在于:每克浸膏粉相当于生药3~ 6g〇9. 一种治疗膝骨性关节炎的中药复方制剂，其特征在于:含有如权利要求5~8任一所 述的中药活性成分浸膏和药学上可以接受的辅料，按照常规方法制备成制剂。10. 根据权利要求9所述的中药复方制剂，其特征在于:所述制剂包括颗粒剂、片剂、胶 囊剂、注射液、口服液。
【文档编号】A61K36/896GK105832962SQ201610194444
【公开日】2016年8月10日
【申请日】2016年3月31日
【发明人】丁震, 武爱玲, 孙实, 何建玲, 刘运涛, 张宏都
【申请人】河南省洛正制药厂