包含帕洛诺司琼的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明涉及一种包含帕洛诺司琼并具有提高的稳定性的药物组合物、该药物组合物的生产方法以及包含该药物组合物的药物包装。
【专利说明】
包含帕洛诺司琼的药物组合物
技术领域
[0001 ]本发明设及包含帕洛诺司琼(palonosetron)的具有提高的稳定性的药物组合物、 该药物组合物的制备方法W及包括该药物组合物的药物包装。
【背景技术】
[0002] 包括顺销的癌症化疗药物的给药几乎在所有病例中都引起恶屯、和呕吐。在顺销给 药后1~2小时开始出现呕吐，运属于急性呕吐，而到18~24小时呕吐开始平息。那么，在48 ~71小时开始出现呕吐并达到高峰，运属于延迟性呕吐。
[0003] 此外，恶屯、和呕吐是麻醉和手术后出现的最常见的并发症。术后呕吐可造成严重 的并发症，如脱水、电解质失衡、胃突出（gastric herniation)、伤口破裂、食管破裂 (esophageal tear)、肌肉疲劳等，并且其可能增加患者对再次手术的焦虑。通常，25~40% 的手术患者在手术后24小时内出现术后呕吐。
[0004] 其间，可W通过5-HT3(5-^色胺)受体括抗剂在与5-HT3受体有关的脑功能中的括 抗作用来治疗呕吐。
[0005] 第一代5-HT3受体括抗剂昂丹司琼（ondansetron)或格拉司琼（granisetron)对于 急性呕吐非常有效，但是在预防延迟性呕吐方面不太有效。因此，昂丹司琼或格拉司琼必须 在开始化疗或放射疗法之前静脉内给予一次或多次。之后，它们必须W片剂或馳剂的形式 口服给予，W预防延迟性呕吐。由于有些抗癌化疗药物可能甚至在仅给药一次时就引发呕 吐预定时间或更长时间，因此必须每天给予5-HT3括抗剂直到呕吐的风险基本平息。
[0006] 美国专利号5,202,333公开了包含桥连双环胺取代基的Ξ环5-HT3受体括抗剂(如 帕洛诺司琼）的静脉内制剂。该文献公开了 Ξ环5-HT3受体括抗剂的给药剂量通常为Ing~ Img/kg体重，优选为10~100，00化g/kg体重。该文献公开了由帕洛诺司琼盐酸盐、一水右旋 糖、一水巧樣酸、氨氧化钢和注射用水组成的组合物，但是存在无法保证药学上可接受的储 存稳定性的问题。
[0007] 帕洛诺司琼盐酸盐W商标名称ALOXi'i销售。该产品为用于单次静脉内给药的 液体制剂，现有5mL的一次性小瓶或1.5mL的一次性小瓶。每个5mL小瓶含有0.25mg的帕洛诺 司琼、207.5mg的甘露醇、巧樣酸盐缓冲剂和乙二胺四乙酸二钢。每个1.5mL瓶含有0.075mg 的帕洛诺司琼、83mg的甘露醇、巧樣酸盐缓冲剂和乙二胺四乙酸二钢。
[000引韩国专利号10-1113084和10-1113087公开一种在抑为4~6下药学上稳定的组合 物，包含帕洛诺司琼、甘露醇、巧樣酸盐缓冲剂和作为馨合剂的0.005~1. Omg/ml的抓TA(乙 二胺四乙酸）。在运些文献中，为了保证包含帕洛诺司琼的药物组合物的稳定性，使用乙二 胺四乙酸二钢或抓TA作为馨合剂。抓TA被用于通过除去血流中的有毒元素(包括重金属如 铅、儒和隶）来治疗急性和慢性铅中毒(馨合疗法）。抓TA馨合疗法被美国FDA批准了用在治 疗铅和重金属中毒，而且还用于高巧血症的应急处理和对与洋地黄毒性有关的室性屯、律失 常的控制。然而，邸TA最常见的副作用为注射部位的灼烧感，并且有些人可能会出现对邸TA 的过敏反应。其它已经报导的严重副作用包括低血糖、巧水平减低、头痛、恶屯、、低血压、肾 衰竭、器官损伤、屯、律不齐、抽摇或甚至死亡。
[0009]为了在药学上有效应用包含帕洛诺司琼的组合物，必须提高帕洛诺司琼的稳定性 W保证药学上的有效期。因此，对具有药学上有效储存稳定性的帕洛诺司琼制剂的需求仍 然存在。
【发明内容】
[001日]技术问题
[0011] 因此，本发明的一个目的是提供一种具有提高的帕洛诺司琼稳定性的药物组合 物。
[0012] 本发明的另一个目的是提供一种帕洛诺司琼的药物组合物，通过保证该药物组合 物在药学上的充分稳定性，该药物组合物可W长期存储且允许最后灭菌。
[0013] 本发明的再一个目的是提供一种液体药物组合物W及该液体药物组合物的制备 方法，其中所述液体药物组合物包含帕洛诺司琼和/或其药学上可接受的盐W及水性介质， 不存在馨合剂(例如乙二胺四乙酸二钢等），且具有提高的帕洛诺司琼稳定性。
[0014]技术方案
[0015] 本发明的一方面提供一种药物组合物，其包含选自由帕洛诺司琼及其药学上可接 受的盐组成的组中的一种或多种作为活性成分，该药物组合物含有W帕洛诺司琼浓度计 0.01~0.5mg/ml的活性成分，并且不存在馨合剂，且在储存期间保持重金属的总含量小于 或等于50卵m。
[0016] 该药物组合物还可W包含药学上可接受的水性载体，并且还可W包含缓冲剂、等 渗剂或它们的混合物，其中该组合物的pH可优选为4~6。
[0017] 该药物组合物可W为液体制剂或者为冻干制剂，用于口服或非肠道给药，优选用 于非肠道给药。
[0018] 本发明的另一方面提供一种制备药物组合物的方法，所述药物组合物在储存期间 保持重金属的总含量小于或等于50ppm，所述方法包括W下步骤：
[0019] 制备包含缓冲剂、等渗剂或它们的混合物W及药学上可接受的水性载体的水溶 液；
[0020] 用馨合树脂处理所述水溶液W将所述重金属的含量控制为小于或等于50ppm;和
[0021] 向所述水溶液或重金属含量得到控制的所述水溶液中加入选自由帕洛诺司琼及 其药学上可接受的盐组成的组中的一种或多种作为活性成分。
[0022] 在制备该药物组合物的方法中，馨合树脂可W与药物组合物直接接触，或者使所 述药物组合物通过用所述馨合树脂填充的柱。根据本发明的实施方式的制备药物组合物的 方法还可W包括选自由灭菌和冻干步骤组成的组中的一个或多个步骤。
[0023] 本发明的再一个方面提供一种药物包装，包括药学上可接受的容器和含有帕洛诺 司琼及其药学上可接受的盐作为活性成分的药物组合物。
【具体实施方式】
[0024] 在下文中，将更详细地描述本发明。
[0025] 在本发明的一个方面，提供的是一种包含选自由帕洛诺司琼及其药学上可接受的 盐组成的组中的一种或多种作为活性成分的药物组合物。
[00%]帕洛诺司琼是用作止吐剂的Ξ环5-HT3受体括抗剂，对恶屯、和/或呕吐具有预防 和/或治疗效果。特别地，帕洛诺司琼用作对抗在手术、化疗和放射疗法后出现的呕吐的止 吐剂。帕洛诺司琼的化学名称为（3aS)-2-[(3S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,3,3曰，4， 5，6-六氨-1H-苯并[de]异哇嘟-1 -酬(Cl姐24N2O)，分子量为296.407g/mo 1，并具有W下结构。 [0027] 化学式1
[002引
[0029] 其中，帕洛诺司琼盐酸盐的化学名称为（3aS)-2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3- 基]-2,3,3a，4,5,6-六氨-1-氧代-lH-苯并[de]异哇嘟盐酸盐(C細24N20.HCl)，分子量为 332.87g/mol。
[0030] 帕洛诺司琼或其药学上可接受的盐被分类为第二代5-HT3受体括抗剂，半衰期为 40个小时或更长。由于帕洛诺司琼或其药学上可接受的盐与5-HT3受体长时间结合，W长时 间表现出作用，其对延迟性呕吐的抑制作用比其它第一代5-HT3受体括抗剂的抑制作用高 10倍，从而被有效地用于预防和/或治疗由化疗(例如细胞毒素抗癌剂等）、放射疗法和/或 手术引起的恶屯、和/或呕吐。
[0031] 然而，帕洛诺司琼的稳定性极差，因为它容易被光或液体介质中的氧氧化和降解。 因此，有必要保证该药物的稳定性。特别地，已知氧化作用被液体介质中存在的重金属(例 如，领、儘、锋、铜、铁、儀或铭)进一步加速。重金属可W混杂在帕洛诺司琼本身中，或由在制 备液体制剂的过程中加入的辅料(例如，缓冲剂或等渗剂)混入。重金属还可W在制备过程 (例如，溶解、填充、包装等）中混入。
[0032] 因此，为了有效防止活性成分帕洛诺司琼被氧化和/或由痕量重金属加速的氧化， 有必要去除痕量的重金属或防止重金属的混入。
[0033] 重金属的实例可W包括选自由领、儘、锋、铜、铁、铅、儀和铭组成的组中的一种或 多种。
[0034] 在本发明的实施方式的包含帕洛诺司琼的药物组合物中，用馨合树脂处理帕洛诺 司琼水溶液或不包含帕洛诺司琼的辅料水溶液W减少重金属的含量。因此，将重金属的含 量控制在适当的范围内，从而提高含有帕洛诺司琼的制剂的储存稳定性，而且还制备出了 对延迟性呕吐W及急性呕吐显示出稳定作用的止吐剂。
[0035] 在本发明的实施方式中，包含帕洛诺司琼的药物组合物在药学上重要的储存期间 可W包含50ppm或更少的重金属，更优选包含lOppm或更少的重金属。
[0036] 根据本发明的重金属含量得到控制的包含帕洛诺司琼的药物组合物可W在没有 馨合剂的情况下长时间稳定储存，例如，其可W在室溫下稳定保持2年或更长时间。具体地， 根据本发明的药物组合物可W具有保持帕洛诺司琼或其药学上可接受的盐的含量的储存 稳定性，例如，甚至在药物组合物在25°C下储存24小时的情况下，帕洛诺司琼盐酸盐的含量 为其初始含量的95重量％~100重量％。
[0037] 根据本发明的药物组合物可W包含选自由帕洛诺司琼及其药学上可接受的盐组 成的组中一种或多种作为活性成分，W及药学上可接受的水性载体和/或缓冲剂、等渗剂或 它们的混合物。
[0038] 在本发明的实施方式中，为了有效地获得需要的效果，活性成分帕洛诺司琼的浓 度可 W 为0.0Img/ml ~0.5mg/ml、0.03mg/ml ~0.2mg/ml、0.04mg/ml ~0.07mg/ml，或大约 0.05m邑/ml。
[0039] 帕洛诺司琼的药学上可接受的盐可W为药学上可接受的盐和具有希望的药学活 性的盐，所述盐可W包括与无机酸或有机酸形成的酸加成盐，所述无机酸例如为盐酸、漠 酸、硫酸、硝酸、憐酸等，有机酸例如为乙酸、丙酸、己酸、庚酸、环戊烧丙酸、径基乙酸、丙酬 酸、乳酸、丙二酸、班巧酸、苹果酸、马来酸、富马酸、酒石酸、巧樣酸、苯甲酸、邻-(4-径基苯 甲酯)苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲横酸、乙横酸、1，2-乙烧二横酸、2-径基乙横酸、苯横酸、对 氯苯横酸、2-糞横酸、对甲苯横酸、精脑横酸、4-甲基二环[2.2.2]辛-2-締-1-簇酸、葡庚糖 酸、4,4'-亚甲基双(3-径基-2-締-1-簇酸）、3-苯基丙酸、Ξ甲基乙酸、叔下基乙酸、月桂基 硫酸、葡萄糖酸、谷氨酸、径基糞甲酸、水杨酸、硬脂酸、黏康酸等。
[0040] 根据本发明的药物组合物的pH可W为4~6,优选为4.5~5.5,例如为5。为了更稳 定地保持组合物的pH范围，可W使用有机酸缓冲剂，例如巧樣酸和巧樣酸的盐。缓冲剂可W 是具有优异的缓冲能力的有机酸缓冲剂。基于总药物组合物，缓冲剂的含量(在巧樣酸盐缓 冲剂情况下)可W为lOmM~lOOmM。可W使用基于总药物组合物浓度优选为10~40mM的巧樣 酸盐缓冲剂，更优选为15~30mM的巧樣酸盐缓冲剂。
[0041] 等渗剂可W为选自由甘露醇、乳糖、右旋糖和海藻糖组成的组中的一种或多种，优 选为甘露醇。基于总药物组合物，甘露醇的量可W为10~80mg/ml，优选为20~60mg/ml，更 优选为40~45mg/ml。
[0042] 在本发明的实施方式中，所述组合物可W为液体注射制剂。如果根据本发明所述 的帕洛诺司琼制剂为液体注射制剂，那么其可W是通过对具有控制的重金属含量的制剂进 行灭菌和冻干中的一个或多个步骤获得的灭菌制剂或冻干制剂。运两种制剂都必须制备成 液体形式，用于静脉内给药，因此，该组合物的优势在于甚至在液体制剂制备后其稳定性也 保持足够长的时间。
[0043] 在本发明的另一方面，提供的是一种制备药物组合物的方法，其中，所述药物组合 物包含由帕洛诺司琼及其药学上可接受的盐组成的组中的一种或多种作为活性成分，所述 药物组合物含有W帕洛诺司琼浓度计0.01~〇.5mg/ml的活性成分，重金属的含量为50ppm 或更少，W减少重金属的含量来提高帕洛诺司琼制剂的稳定性。所述制备方法可W通过用 馨合树脂处理帕洛诺司琼水溶液或含有缓冲剂和等渗剂而不包含帕洛诺司琼的辅料水溶 液来进行。
[0044] 具体地，在本发明的实施方式中，提供的是一种制备重金属含量小于或等于50ppm 的药物组合物的方法，该方法包括W下步骤:制备包含缓冲剂、等渗剂或它们的混合物W及 药学上可接受的水性载体的辅料水溶液;用馨合树脂处理所述辅料水溶液W将重金属的含 量控制为小于或等于50ppm;向具有控制的重金属含量的所述辅料水溶液中加入选自由帕 洛诺司琼及其药学上可接受的盐组成的组中的一种或多种作为活性成分。
[0045] 进一步地，在本发明的实施方式中，提供的是一种制备重金属的含量小于或等于 5化pm的药物组合物的方法，所述方法包括W下步骤:制备包含缓冲剂、等渗剂或它们的混 合物W及药学上可接受的水性载体和选自由帕洛诺司琼及其药学上可接受的盐组成的组 中的一种或多种的组合物;用馨合树脂处理所述组合物W将重金属的含量控制为小于或等 于SOppmc
[0046] 在该制备方法中，馨合树脂的处理可W通过与馨合树脂直接接触或通过用馨合树 脂填充的柱来进行。馨合树脂可W包括亚氨基二乙酸醋（imidodiacetate)和多胺作为取代 基，W与重金属形成馨合键，从而有效地除去重金属。馨合树脂的实例可W包括可商购的 DIAI0N CRll(Mitsubishi，Co.)、DIAION CR20(Mitsubishi，Co.)、Eporous MX-8C (Samyang，Co巧.）等。DIAION CRll是用于通过交换基团与金属离子馨合来除去金属离子的 苯乙締基多孔馨合树脂，对诸如锋、铜、铁等二价离子表现出比强酸或弱酸阳离子交换树脂 更高的选择性。DIAI0N CR20是苯乙締基多孔馨合树脂，其对重金属具有高选择性，但不吸 附碱金属离子和碱±金属离子。Eporus MX8C是吸附诸如铅、锋、铜、儀、铭等一般重金属的 馨合树脂，具有优异的化学稳定性和耐久性，从而用在废水处理和其它各种领域中。如果有 必要，上述馨合树脂可它们中的两种或多种结合的方式使用。
[0047] 馨合树脂处理步骤可W通过使帕洛诺司琼水溶液或包含缓冲剂和等渗剂而不含 帕洛诺司琼的辅料水溶液与馨合树脂直接接触来进行，或通过使其通过用馨合树脂填充的 常规柱来进行。
[0048] 当使用用馨合树脂填充的柱时，柱的尺寸、进料量等可通过常规方法控制，W除去 水溶液中的重金属。因此，来源于包含帕洛诺司琼的原料的重金属可W被有效地除去。如果 来源于包含帕洛诺司琼的原料的重金属的总量小于本发明限制的量，那么可W省略馨合树 脂的处理。
[0049] 在制备具有控制的重金属含量的药物组合物后，可W额外进行选自由灭菌和冻干 步骤中组成的组中的一个或多个步骤。特别地，如果本发明的组合物被制成注射制剂，那么 可W进一步地进行灭菌步骤W制备液体注射制剂，或者可W进行灭菌和冻干步骤W制备冻 干产品。
[0050] 优选防止在根据本发明的具有控制的重金属含量的药物组合物中额外地混入重 金属。具体地，可W使用药学上可接受的主要包装容器。例如，优选使用限制储存期间从容 器浸出适量重金属的塑料容器、表面用娃处理过的玻璃容器等或限制储存期间从容器浸出 适量重金属的玻璃容器。如果需要用于密封的橡皮塞，那么优选满足运些条件。从整个容器 浸出的重金属的量优选为50ppm或更少。
[0051] 根据本发明的实施方式，可W使用玻璃管状瓶作为药学上可接受的主要包装容 器。
[0052] 玻璃是透明的棚娃酸盐玻璃，特别是低膨胀娃棚酸盐玻璃，满足W下标准的条件： ASTM读国材料与试验协会)1类A级、USP (美国药典）1类玻璃粉末、USP神盐检测、EP (欧洲药 典）1型玻璃颗粒(测试B)和EP神盐检测。
[0化3] 玻璃可W包含：Si〇2>80%，例如80~85% ;Al2〇3《5%，例如1~5% ;Na2〇+K2〇《 5%，例如 1 ~5% ;Ca0+Mg0<0.2%，例如超过0%而小于0.2% ;B203>10%，例如 10~15% ; Fe2〇3<0.1 %，例如超过0 %而小于0.1 %，并且可U不含BaO、ZnO、Mn〇2、Ti化、S〇3。例如，玻璃 可W包含Si〇2 81%、Al2〇3 2%、化2O+K2O 4%、CaO+MgO<0.2%、B2〇3 13%、尸62〇3<0.1%，并 且可 W 不包含 BaO、化0、Mn〇2、Ti〇2、S〇3。
[0054] 玻璃的应变点可W低于510°C，优选高于500°C而低于510°C，更优选为505°C;退火 点为550~570°C，优选为555~565°C，最优选为560°C ;软化点为800~900°C，优选为800~ 850°C，最优选为820°C ;线性膨胀系数(0-300°C)为30 X 1〇-7~40 X 10-Μ尤选为30 X 1〇-7~ 35 X 10-7，最优选为33 X 10-7;并且密度为2.2~2.3g/cmM尤选2.2~2.25g/cm3，最优选为 2.22g/cm\
[0055] 玻璃容器可具有下表1中的元素提取数据。
[0化6] 表1
[0化7]
[0化引（单位:ppm，在20mL的容器中在高纯度水中在120°C下高压灭菌60分钟后）
[0059] 所述玻璃可W满足上述性质中的一种或多种，优选满足上述所有性质。
[0060] 根据本发明的药物组合物可W在使用前填充并密封于小瓶或安飯瓶中后储存和/ 或分销。储存可W在消毒(无菌)环境(例如，洁净室）中进行。为了防止在小瓶或安飯瓶中由 直射阳光造成光化学反应和/或由此造成的活性剂的降解和/或变性，可W使用褐色容器或 者将小瓶或安飯瓶储存在暗处。例如，在液体药物组合物制成无菌注射制剂的形式的情况 下，其可W填充并密封于由玻璃或塑料制成的小瓶或安飯瓶中，然后在消毒(无菌)环境(例 如，洁净室）中储存和/或分销。此外，为了防止由直射阳光造成光化学反应，可W使用褐色 容器，或将组合物储存在暗处。
[0061] 根据本发明的包含帕洛诺司琼的制剂可W配置成各种不同的形式，用于口服或非 肠道给药。在具体的实施方式中，液体药物组合物可W制成各种不同的制剂，用于口服、静 脉内、肌肉内、经皮、鼻内、皮下或局部给药。液体药物组合物可W制成冻干产品W及液体形 式。可W使用通常用在注射制剂的制备中的注射用水，调节最终体积，并进行最后的灭菌处 理W制备消毒(无菌)注射制剂，例如，用于静脉内给药的消毒注射制剂。在另一种实施方式 中，注射制剂可W是冻干制剂，也可W是液体注射制剂，但不限于它们。液体药物组合物的 冻干制剂可W通过除去液体药物组合物中的水性介质来制备，并且可W具有与上述包含帕 洛诺司琼的药物组合物类似或等同的组成。
[0062] 发明效果
[0063] 包含帕洛诺司琼和/或其药学上可接受的盐的本发明药物组合物具有药学上重要 的稳定性，因此其长期储存是可能的。进一步地，提供的是允许最后灭菌的帕洛诺司琼制 剂、不存在馨合剂(例如，乙二胺四乙酸二钢等)而具有提高的帕洛诺司琼稳定性的液体药 物组合物及其制备方法。
[0064] 实施方式的详细描述
[0065] 将参照W下实施例更详细地描述本发明。然而，运些实施例仅出于举例说明的目 的，并不意图限制本发明。
[0066] 实施例1:药物组合物的制备
[0067] 1.1.馨合树脂的预处理
[0068] 取50ml馨合树脂(DIAI0N CR11)，填充于柱中，用100倍体积的净化水清洗该柱。然 后，向其中加入50ml的IN盐酸，放置1小时。之后，通过用150ml的净化水清洗来制备该柱。
[00例 1.2.辅料水溶液的制备
[0070] 称量156mg巧樣酸、370mg巧樣酸钢和4.15g甘露醇，并加入到经处理W没有重金属 浸出之患的混合容器中，然后向其中加入注射用净化水至最终体积为100ml。最后，制备液 体混合物。使该液体混合物通过预处理的馨合树脂柱，W制备辅料水溶液。
[0071] 1.3.帕洛诺司琼水溶液的制备和填充
[0072] 将5.6mg帕洛诺司琼盐酸盐加入并溶解于实施例1.2中得到的100ml的辅料水溶液 中。将该溶液填充于内壁涂覆有娃的玻璃小瓶中，接着密封。使玻璃小瓶在12rC下经过蒸 汽灭菌30分钟，W完成最后灭菌。
[0073] 实施例2:药物组合物的组分分析
[0074] 将实施例1中制备的帕洛诺司琼注射水溶液在40°C下储存6个月，然后进行关于帕 洛诺司琼的含量及相关杂质的产生的变化的稳定性试验，W用肉眼观察不溶物质的产生和 颜色变化。通过HPLC分析帕洛诺司琼的含量及相关杂质的产生的变化，通过ICP分析重金属 量的增加。
[0075] (1)重金属含量的分析
[0076] 待分析的重金属为化、化、Mn、Pb和化。
[0077] 使用ICP/AES(电感禪合等离子体/原子发射光谱仪，型号名称:0PTIMA 5300DV， Perkin Elmer)在W下条件下进行分析：
[0078] 仪器条件
[0079] RF 功率:1300 瓦特
[0080] 喷雾器Ar流速:0.6化/min
[0081 ] 等离子体Ar流速：lf5L/min
[0082] 累流速：1.5mL/min
[0083] 观察距离：15mm
[0084] 读数延时:30秒 [00财样品预处理
[0086] 使用微波消解系统（型号：Multiwave 3000,制造商：Anton Paar)准确称量大约 lOOmg样品，使用硝酸(5mU和过氧化氨（ImL)的酸混合物经历完全酸消解约2小时。然后，将 样品进行过滤后，最后集中起来高达50ml。所有预处理程序都应该使用Teflon容器(无金 属)进行，而不是使用玻璃容器进行，W避免污染。
[0087] 标准溶液的制备和测量
[0088] 将用于ICP(Merck，USA)的lOOOppm的无机元素标准样用作标准溶液，与样品同样 的方式预处理的酸混合物稀释（空白样品）。绘制相应浓度的校准曲线图，然后进行ICP试 验。试验结果在表1中给出。
[0089] (2)未知的相关杂质的HPLC分析
[0090] 详细地，在W下条件下进行HPLC分析。
[0091] 1)操作
[0092] a.检测器:UV吸收分光光度计(测量波长:210nm)
[0093] b.柱:Zorbax SB 5皿，C8,250X4.6mm，或等同的或更好的柱
[0094] c.柱溫:室溫
[00巧]d.流动相：向1000ml的水与乙腊(72:18)的混合物中加入0.671^的；氣乙酸后，混 合并过滤(0.46皿）
[0096] e.流速：1.0mL/min
[0097] f.注入体积:80μΙ [009引 2)计算
[0099] [数学等式1]
[0100] 每种相关杂质的含量（％ )=测试溶液中未知的相关杂质的峰面积/测试溶液中帕 洛诺司琼盐酸盐的峰面积X100
[0101] (3)已知的相关杂质的HPLC分析
[0102] 待分析的已知的相关杂质包括：（2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,4,5， 6，-四氨-1H-苯并[de]异哇嘟-1-酬盐酸盐和(3aR)-2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]- 2,3,3a，4,5,6-六氨-1-氧代-lH-苯并[de]异哇嘟盐酸盐。
[0103] 1)操作
[0104] a.检测器:UV吸收分光光度计(测量波长:238nm)
[0105] b.柱：Qiirobiotic V，5皿，4.6X250mm，Hewlett-Packard
[0106] c.流动相:20mM/L的乙酸锭(pH 6.0)与四氨巧喃(9:1)的混合物
[0107] d.柱溫:35°C
[010 引 e.流速：1.2mL/min
[0109] f.注入体积:200μΙ
[0110] 2)计算
[0111] 各相关杂质的含量通过W下等式计算。
[0112] 确定2-[(s)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,4,5,6，-四氨-lH-苯并[de]异哇嘟- l-酬盐酸盐的相对响应因子(RRF)，其它相关杂质的RRF视为l。
[0113] 1^尸=(2-[(5)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,4,5,6，-四氨-1护苯并[(16]异哇 嘟-1-酬盐酸盐的 RF/(3aR)-2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,3,3a，4,5,6-六氨-1- 氧代-lH-苯并[de]异哇嘟盐酸盐的RF
[0114] [数学等式2]
[0115] 校准曲线:As=MXCs
[0118] As:标准溶液的峰面积
[0119] Cp:标准溶液的浓度(mg/mU
[0120] Cs:实际浓度，考虑标准溶液的含量(mg/mU
[0121] P:非对映体标准的含量（％ )
[0122] X:测试溶液中相关杂质的浓度(mg/mL)
[0123] At:测试溶液中相关杂质的峰面积
[0124] RRF:相对响应因子
[0125] M:校准曲线的斜率
[0126] C:测试溶液中帕洛诺司琼盐酸盐的浓度
[0127] 相关杂质的总量（％)=a)的相关杂质（％)+b)的相关杂质（％)
[012引（4)含量测试
[0129] 根据(2)未知的相关杂质的HPLC分析来分析相关杂质，通过W下等式计算帕洛诺 司琼盐酸盐的含量。
[0130] [数学等式3]
[0131] 在约1ml中帕洛诺司琼(Cl姐24N20:296.40)的含量(mg)=标准的量(mg) X测试溶液 中帕洛诺司琼盐酸盐的峰面积/标准溶液中帕洛诺司琼盐酸盐的峰面积X C/240 X 0.8904
[0132] C:帕洛诺司琼盐酸盐标准样的纯度（％/100)
[0133] 检验帕洛诺司琼水溶液中的已知的相关杂质，（2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3- 基]-2,4,5,6-四氨-1护苯并[(16]异哇嘟-1-酬盐酸盐和(3曰1〇-2-[(5)-1-氮杂双环[2.2.2] 辛-3-基]-2，3，3a，4，5，6-六氨-1-氧代-1H-苯并[de]异哇嘟盐酸盐，W及未知的相关杂质 是否有增加。
[0134] (5)不溶粒子的产生和颜色变化的观察
[0135] 使用遮光自动粒子计数器(型号名称:PAMAS-SVSS)来检验不溶粒子的产生，用肉 眼观察颜色变化。
[0136] 比较例1
[0137] 将5.6mg帕洛诺司琼盐酸盐和24mg硫酸铜加入并溶解于实施例1.2中制备的100ml 辅料水溶液中。将该溶液填充于玻璃小瓶中后，密封。将玻璃小瓶在12rC下进行蒸汽灭菌 30分钟，W完成最后灭菌。
[0138] 对于制备的制剂，基本W与实施例2相同的方式，进行化PC分析来检验帕洛诺司琼 含量及相关杂质的产生的变化，W及进行ICP分析W检验重金属含量的增加。试验结果总结 在表1中。
[0139] 比较例2
[0140] 称量并加入156mg巧樣酸、370mg巧樣酸钢和4.15g甘露醇，然后向其中加入注射用 净化水至最终体积为100ml。最后，制备辅料水溶液。与实施例1不同，不使溶液通过馨合树 脂柱。
[0141] 将5.6mg帕洛诺司琼盐酸盐溶解于由此制备的100ml的辅料水溶液中。将溶液填充 于玻璃小瓶中后，密封。将该玻璃小瓶在12rC下进行蒸汽灭菌30分钟，W完成最后灭菌。
[0142] 对于制备的制剂，基本上W与实施例2相同的方式，进行化PC分析来检验帕洛诺司 琼含量及相关杂质的产生的变化，并进行ICP分析W检验重金属含量的增加。试验结果总结 在表2和表3中。
[0143] 表2
[0144]
[0147] 在表中，相关杂质为(2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,4,5,6-四氨-1护苯 并[de]异哇嘟-1-酬盐酸盐和(3aR)-2-[(S)-1-氮杂双环[2.2.2]辛-3-基]-2,3,3a，4,5,6- 六氨-1-氧代-lH-苯并[de]异哇嘟盐酸盐。
[0148] 实施例在储存6个月的含量的变化为初始含量的95重量％~110重量％，所有相关 杂质的含量小于1%，相关杂质的总含量小于2%。制备时没有检测到重金属，储存期间重金 属的总量小于1 Oppm。
[0149] 在比较例1和比较例2中，相关杂质随时间不断增加。特别地，在比较例1中，各相关 杂质增加到1%或更多，相关杂质的总量为2%或更多。在比较例1中，制备时，重金属的含量 为10化pm的铜离子。
[0150] 实施例3
[0151] (1)样品制备
[0152] 根据下表4的组合物制备样品。
[015；3]表 4
[0154] _
[0155] (2)储存条件和时间
[0156] 使用侣密封装置和橡胶隔膜密封样品，在挡光后将其在6(TC下放置2~3周。
[0157] (3)分析方法
[0158] 通过HPLC进行分析。
[0159] a)缓冲剂的制备
[0160] 准确称量3. Ig正憐酸二氨钢和2.5血Ξ乙胺，加入到体积为1000血的烧瓶中，并在 净化水中溶解至刻度线。使用憐酸盐将该溶液的P的周节至7.0±0.05。在抑测量前，通过1) 6.00和2)8.00的标准缓冲剂校正pH计。使用0.45WI1的滤纸进行过滤后，除气。
[0161] b)流动相A的制备
[0162] 将制备的缓冲剂用作流动相A。
[0163] C)流动相B的制备
[0164] 将乙腊用作流动相B。
[0165] *注意:流动相在制备后16小时内使用。
[0166] d)稀释剂
[0167] 通过均匀混合体积比为50:50的缓冲剂与乙腊来制备溶液。
[016引e)色谱条件
[0169] 柱：150mmX4.6mm，5皿，Intersil C8或其等同物
[0170] 柱流速：1.0mL/min
[0171] 检测器:UV波长:210nm
[0172] 进料量:20μ1 [017引柱溫:40°C
[0174] 分析时间:45分钟
[0175] 梯度洗脱程序:根据下表5
[0176] 表5
[0177]
[0178] f)未被识别的相关杂质的总量（％ )=测试样品的各未被识别的相关杂质的峰面 积的总和/测试样品的帕洛诺司琼的峰面积X100
[0179] (4)结果
[0180] 如下表6中所示，将不含抓TANa的溶液填充并密封于由制造商W和Y提供的透明的 玻璃小瓶和由化ikyo提供的塑料小瓶中作为主要填充物质。
[0181] 在60°C下储存2周后，检测未被识别的相关杂质的总量。当使用制造商W的包装材 料时，未被识别的相关杂质的总量为0.1~0.3%，表明该包装材料比其它包装材料更稳定。
[0182] 表6.本发明的组合物中未被识别的相关杂质根据包装材料的不同而不同的总量 (%)
[0183]
[0184] (*制造商W的包装材料:Wheaton棚娃酸盐管小瓶、透明
[01化]**制造商￥:化〇]1 Hap Glass有限公司（Yeon Hap Glass CoLtd)的白色药用小 瓶(脱碱处理）
[01 化]***Da;Lkyo:Daikyo Crys1:al Zenith小瓶）
【主权项】
1. 一种药物组合物，包含选自由帕洛诺司琼及其药学上可接受的盐组成的组中的一种 或多种作为活性成分，所述药物组合物含有以帕洛诺司琼浓度计0.01~〇.5mg/ml的活性成 分并且不含螯合剂，其中，在储存期间保持重金属的总含量小于或等于50ppm。2. 根据权利要求1所述的药物组合物，还包含药学上可接受的水性载体。3. 根据权利要求1所述的药物组合物，还包含缓冲剂、等渗剂或它们的混合物，其中所 述组合物的pH为4~6。4. 根据权利要求3所述的药物组合物，其中，所述缓冲剂为柠檬酸和柠檬酸钠，或者所 述等渗剂为选自由甘露醇、乳糖、右旋糖和海藻糖组成的组中的一种或多种。5. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述组合物为液体注射制剂或者为冻干注 射制剂。6. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中，重金属的总含量保持为小于或等于lOppm。7. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中，所述重金属为选自由钡、锰、锌、铜、铁、铅、 镍和铬组成的组中的一种或多种。8. -种制备药物组合物的方法，所述药物组合物在储存期间保持重金属的总含量小于 或等于50ppm，所述方法包括以下步骤： 制备包含缓冲剂、等渗剂或它们的混合物以及药学上可接受的水性载体的水溶液； 用螯合树脂处理所述水溶液以将所述重金属的含量控制为小于或等于50ppm;和 向所述水溶液或所述重金属含量被控制的所述水溶液中加入选自由帕洛诺司琼及其 药学上可接受的盐组成的组中的一种或多种作为活性成分。9. 根据权利要求8所述的方法，其中，用所述螯合树脂的处理是通过与所述螯合树脂直 接接触或流过填充有所述螯合树脂的柱来进行的。10. 根据权利要求8所述的方法，其中，所述螯合树脂为能够与所述重金属形成螯合键 的树脂。11. 根据权利要求10所述的方法，其中，所述螯合树脂包含亚氨基二乙酸酯或多胺作为 交换基团。12. 根据权利要求8所述的方法，还包括选自由灭菌和冻干步骤组成的组中的一个或多 个步骤。13. -种药物包装，包括： 药学上可接受的容器;和 在所述容器中的根据权利要求1至7中任一项所述的药物组合物。14. 根据权利要求13所述的药物包装，其中，所述药学上可接受的容器为玻璃容器。15. 根据权利要求14所述的药物包装，其中，所述药学上可接受的容器为玻璃管状瓶。16. 根据权利要求15所述的药物包装，其中，所述玻璃为透明的硼硅酸盐玻璃。17. 根据权利要求16所述的药物包装，其中，所述玻璃为低膨胀硼硅酸盐玻璃，满足以 下标准的条件:ASTM 1类A级、USP 1类玻璃粉末、USP砷盐检测、EP 1型玻璃颗粒(测试B)和 EP砷盐检测。18. 根据权利要求17所述的药物包装，其中，所述玻璃满足以下条件： 1) 应变点小于510°C， 2) 退火点为550~570 °C， 3) 软化点为800~900 °C， 4) 线性膨胀系数(0-300°C)为30 X 10-7至40 X 10-7,以及 5) 密度为2 · 2~2 · 3g/cm3。
【文档编号】A61K31/473GK105934247SQ201480074137
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2014年12月22日
【发明人】尹惠靖, 李相俊
【申请人】株式会社三养生物制药