一种免疫原性组合物及其制备方法
【专利摘要】本发明提供了一种免疫原性组合物，属于生物制品制备技术领域，该免疫原性组合物含有灭活的脊髓灰质炎抗原和b型流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物。其还可包含乙肝抗原和生理可接受的载体。本发明还提供了所述免疫原性组合物的制备方法。本发明的免疫原性组合物可以同时预防多种病原体的侵染，并且这些抗原之间不存在相互干扰的现象，相应的免疫原性较单独抗原激发的免疫原性不会降低；且使用本发明的免疫原性组合物可以明显简化疫苗接种程序，提高接种效率并降低成本。
【专利说明】
一种免疫原性组合物及其制备方法
技术领域
[0001] 本发明涉及生物制品制备技术领域，具体地，涉及一种免疫原性组合物及其制备 方法。
【背景技术】
[0002] 脊髓灰质炎是由病毒感染人引起的高传染性疾病。脊髓灰质炎病毒可以侵染人体 神经系统，并可在数小时内导致病人肢体麻痹，造成终身残疾。脊髓灰质炎可在所有年龄段 人群中发生，但好发于小于5岁的婴幼儿，因此该病又称为"小儿麻痹症"。脊髓灰质炎病毒 属于小核糖核酸病毒科的肠道病毒属，按照血清型分类可以分为I、Π 和III型，均可以致 病。到目前为止医学界还没有治疗脊髓灰质炎的特效药，但是脊髓灰质炎可以通过注射疫 苗来达到良好的预防效果。
[0003] 灭活的脊髓灰质炎疫苗（IPV)最先由Salk博士在上世纪50年代开发成功。1954年 在美国进行了大规模临床试验，次年临床试验结果证明疫苗具有良好的安全性和保护性， 随后在美国开展了大规模接种活动。另外一种减毒口服的脊髓灰质炎疫苗(OPV)由Sabin博 士在上世纪60年代开发成功，并迅速在世界范围内使用，为防治脊髓灰质炎疫情贡献了坚 实力量，但是，由于OPV为减毒疫苗，在服用过程中存在一定的安全隐患，因此，OPV逐步被灭 活的脊髓灰质炎疫苗IPV取代。世界卫生组织(WHO)启动了全球脊髓灰质炎消灭行动，鼓励 发展中国家在计划免疫中使用多价或单价的IPV，从而彻底阻断脊髓灰质炎病毒在人群中 的传染。灭活的脊髓灰质炎疫苗可分为两类：由野毒株制备的灭活疫苗和由减毒株制备的 灭活疫苗(sabin-IPV)。由于前者生产IPV使用野毒株极大的限制了在发展中国家的推广使 用，尤其是在消灭脊髓灰质炎病毒后时代，WHO会更严格限制野毒株的使用，因此sabin-IPV 疫苗就成为代替OPV疫苗在发展中国家推广使用的一种新产品。
[0004] HiMb型流感嗜血杆菌）是儿童鼻咽部常见的共生细菌，可引起儿童肺炎和脑膜 炎，在尚未开展大规模Hib疫苗接种的地区，Hib疾病是一个主要的公共卫生问题。每年至少 有300万严重病例发生，约38.6万死亡。Hib发病与死亡多见于发展中国家，疾病负担在4-18 月龄儿童最为严重，但小于3月龄和大于5岁儿童也偶有发病。在未免疫人群，Hib是1岁以内 儿童非流行性细菌性脑膜炎的主要病因。即便及时给予足量的抗生素治疗，3-20 %的Hib脑 膜炎患者仍会死亡。
[0005] 对Hib感染最有效的预防措施是肌肉注射Hib偶联菌苗，可大大降低肺炎及脑膜炎 的发病几率。Hib荚膜多糖虽然有一定的免疫原性，但由于儿童免疫系统发育不健全，对多 糖的免疫应答较弱，因此，需将Hib荚膜多糖与载体蛋白进行缀合后免疫，激发婴幼儿体内 的TD免疫途径，以增强婴幼儿对多糖的免疫应答。
[0006] 脊髓灰质炎疫苗与Hib结合疫苗同做为针对婴幼儿计划免疫的疫苗，有广泛的受 种人群，且接种群的年龄较相似。该两种疫苗均为多剂免疫，受种人群需要多次接种，费时 费力。因此，亟待需要一种联合疫苗，在不降低二者免疫效果的同时节省受种次数，节约时 间和人力资源。
【发明内容】
[0007] 为了解决现有技术中存在的问题，本发明的目的是提供一种含有灭活脊髓灰质炎 病毒和Hib多糖蛋白缀合物的免疫原性组合物。
[0008] 为了实现本发明目的，本发明提供了一种免疫原性组合物，所述免疫原性组合物 包括灭活的脊髓灰质炎病毒抗原和Hib多糖蛋白缀合物。
[0009] 所述灭活的脊髓灰质炎病毒选自sabin株，包含sabinl型、sabinll型和sabinin 型。
[0010] 所述免疫原性组合物含有sabin I型抗原2.5-20D单位/人份，sabin II型抗原5-40D单位/人份，sabin III型抗原5-70D单位/人份，Hib多糖蛋白缀合物l-15yg/人份。
[0011] 优选地，所述免疫原性组合物含有sabin I型抗原5-15D单位/人份，sabin II型抗 原10-30D单位/人份，sabin III型抗原10-40D单位/人份，Hib多糖蛋白缀合物5-10yg/人 份。
[0012] 进一步地，所述免疫原性组合物还可以含有纯化后的乙肝抗原。优选地，含有纯化 后的乙肝抗原为5-40yg/人份。
[0013] 更优选地，所述免疫原性组合物包含乙肝抗原15-30yg/人份。
[0014]进一步地，前述免疫原性组合物还可以包含生理可接受的载体，包含可与b型流感 嗜血杆菌多糖抗原缀合的生理可接受的载体蛋白，如10-50yg/人份的破伤风类毒素载体， 也可选自白喉类毒素、白喉CRM197蛋白和脑膜炎外膜蛋白或任何已知的其它载体。
[0015] 细菌多糖与载体蛋白的偶联方法使用公知技术，包括使用1-氰基-4-二甲氨基吡 啶四氟硼酸盐(CDAP)活化多糖抗原后与载体蛋白共价连接，也包括使用还原胺化法处理多 糖和载体蛋白的偶联，或者使用溴化氰活化多糖后与载体蛋白偶联的方法。
[0016] 进一步地，所述免疫原性组合物还可以包含佐剂。
[0017] 优选地，所述佐剂为铝盐。
[0018] 更优选地，所述铝盐为磷酸铝或氢氧化铝，最优选为氢氧化铝。
[0019] 进一步地，前述免疫原性组合物的剂型为注射剂、冻干剂、注射剂、胶囊剂、片剂或 丸剂。
[0020] 本发明还提供了所述免疫原性组合物在制备预防或治疗脊髓灰质炎或脑膜炎药 物中的应用。
[0021] 本发明还提供了上述免疫原性组合物在制备疫苗中的应用。
[0022] 前述免疫原性组合物中脊灰抗原的制备方法是通过行业内成熟的工艺技术制造 的，包括三种血清型脊灰病毒的培养、收获、纯化和灭活，其中脊灰病毒培养的细胞基质可 以选择人二倍体细胞如2BS细胞或者传代细胞如Vero细胞，培养方式可以选择细胞工厂或 者生物反应器;脊灰抗原的纯化可包括多级澄清过滤、浓缩、分子筛层析和离子交换层析； 脊灰抗原的灭活使用甲醛，方法符合WHO对灭活脊灰疫苗指导原则中对灭活步骤的要求。 [0023]前述免疫原性组合物中Hib多糖蛋白缀合物的制备方法是通过行业内成熟的工艺 技术制造的，通过对Hib菌的培养和纯化获得，包括Hib菌在发酵罐中的培养，对菌体进行福 尔马林处理、离心浓缩和一系列化学方法的处理获得纯化后的荚膜多糖，然后通过一种生 理可接受载体蛋白，基于一种上述的多糖和载体蛋白的偶联方法获得Hib荚膜多糖结合物。 制备方法符合中国药典2010版对Hib抗原结合物制备的相关要求。本发明采用的Hib多糖蛋 白缀合物中，Hib多糖抗原与载体蛋白的质量比为1:2-2:1。
[0024]前述免疫原性组合物中乙肝抗原的制备方法是通过行业内成熟的工艺技术制造 的，包括重组乙肝抗原的表达和纯化，其中重组乙肝表达载体可以是汉逊酵母或者啤酒酵 母，通过细菌发酵罐培养并表达乙肝抗原；乙肝抗原的收获和纯化可包括研磨破菌、PEG沉 淀、超滤浓缩、分子筛层析、离子交换层析和离心脱盐。制备方法符合中国药典2010版对乙 肝抗原制备的相关要求。
[0025] 免疫原性组合物的制备:将灭活的脊髓灰质炎病毒抗原原液与Hib多糖蛋白缀合 物、纯化的乙肝抗原进行搅拌混合，并控制混合液的PH值在6-7之间。如果抗原混合物包含 佐剂，则把抗原与佐剂进行吸附后进行混合搅拌，并控制混合液的PH值在6-7之间；所述灭 活的脊髓灰质炎病毒抗原原液含有sabin I型抗原2.5-20D单位/人份，sabin II型抗原5-40D单位/人份，sabin III型抗原5-70D单位/人份，b型流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物1-15μ g/人份；乙肝抗原5-40yg/人份。
[0026] 优选地，所述灭活的脊髓灰质炎病毒抗原原液含有sabin I型抗原5-15D单位/人 份，sabin II型抗原10-30D单位/人份，sabin III型抗原10-40D单位/人份，b型流感嗜血杆 菌多糖蛋白缀合物5-lOyg/人份;乙肝抗原15-30yg/人份。
[0027]前述抗原的免疫原性：
[0028]免疫原性组合物中脊灰抗原的免疫原性通过大鼠效价实验进行评价，同时与灭活 脊灰单价疫苗进行对比。选用SD大鼠或者Wistar大鼠按照10只每组的规格进行肌肉注射免 疫，抗原混合物按照人用剂量进行3倍倍比稀释，共配成5组抗原混合物。大鼠免疫后第3周 加强一次，免疫后第2周进行采血，用病毒回滴实验检测中和抗体效价。此类中和实验按照 中国药典2010版要求进行。
[0029]免疫原性组合物中b型流感嗜血杆菌抗原的免疫原性通过BALB/c小鼠或者NIH小 鼠效价实验进行评价，同时与b型流感嗜血杆菌结合疫苗进行对比。小鼠按照20只每组的规 格进行注射免疫。抗原混合物按照每次2.5yg多糖的抗原混合物的注射量进行免疫。小鼠首 先进行0.85 %氯化钠溶液注射，于第1、14天注射两次，与第21~28天经眼眶静脉采血，用 ELISA法测定Hib的IgG抗体。效价实验按照中国药典2010版要求进行。
[0030] 免疫原性组合物中乙肝抗原的免疫原性通过BALB/c小鼠效价实验进行评价，同时 与单价重组乙肝疫苗进行对比。小鼠按照20只每组的规格进行注射免疫，4-6周后采血，采 用ELISA法测定乙肝抗体，计算半数有效剂量ED50AD50实验按照中国药典2010版要求进 行。
[0031] 本发明的免疫原性组合物是将脊髓灰质炎病毒抗原与b型流感嗜血杆菌多糖抗原 结合起来，以二联苗或更多联合疫苗的形式免疫受种人群，在不降低二者免疫效果的同时 节省受种次数，节约时间和人力资源。且本发明所述脊髓灰质炎病毒抗原的生产毒株为灭 活的减毒株，和OPV相比能够避免毒株毒力返祖的风险，对受种者和环境均具有很好的安全 性。本发明的免疫原性组合物制备的联合疫苗包含脊髓灰质炎病毒抗原和HIB多糖抗原，能 够很好的预防由脊髓灰质炎病毒和HIB引起的小儿麻痹症及脑膜炎的发生。且本发明研究 表明，上述各抗原在免疫受种者后互相不干扰抗原性和免疫效果，具有很好的免疫原性和 安全性。
【具体实施方式】
[0032]以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神 和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。如 下我们所采纳的实施例使用了标准的技术，除非另有详细描述，为本领域技术人员众所周 知且为常规技术。实施例是例证性的，但并不限制本发明。
[0033]实施例1Sabin脊髓灰质炎病毒的培养
[0034] 由美国ATCC提供的脊灰毒株sabin I型、sabin II型、sabin III型，分别在10层细 胞工厂Vero细胞中适应生长并连续传代，使用MEM培养基加8 %小牛血清(v/v)，置37 °C培养 箱中培养4天后换无血清M199培养基，按照MOI = 0.01分别接sabin株I型、II型和III型病 毒，在33°C培养3天后收获病毒液，经澄清过滤后用CCID5q法检测病毒滴度值。以上三型脊灰 病毒收获液可在7-8LgCCID 5Q/ml范围内。病毒收获液同时通过D抗原ELISA双抗夹心检测法 检测D抗原值。以上三型脊灰病毒收获液的D抗原含量在40-1 lODU/ml范围内。
[0035]实施例2Sabin脊髓灰质炎病毒的纯化和灭活
[0036]将实施例1中获得的脊灰病毒收获液进行三级澄清过滤，选用0.75μπι、0.45μπι和 0.22μπι的过滤膜包;将澄清过滤后的料液进行两级超滤浓缩，第一级选用100KD聚醚砜类膜 包浓缩40倍，第二级选用100KD聚醚砜类膜包再浓缩10倍;然后将浓缩后的料液通过分子筛 层析柱，柱子填料选用Sephadex CL-6B，用0.1Μ PBS(pH 7.0)缓冲液进行平衡，然后继续用 0.1M PBS(pH 7.0)洗脱，收集第1峰为病毒峰。将收集的病毒液加到用0.1M PBS(pH 7.0)平 衡好的装有DEAE Sepharose Fast Flow的层析柱中，用0.1 M PBS(pH 7.0)洗脱，收集第1洗 脱峰为病毒峰。该病毒收集液通过〇.22μπι过滤后用1:4000甲醛37°C灭活12天，最后经除菌 过滤后获得脊髓灰质炎病毒株sabin I型、sabin II型、sabin III型抗原原液。
[0037]实施例3B型流感嗜血杆菌的培养和多糖纯化
[0038]按照专利号为200810125160的中国专利中对b型流感嗜血杆菌培养方法的描述， 包括2次在固体培养基上的预培养和1次液体培养基的预培养，然后在发酵罐中培养并收 获。按照该专利中对b型流感嗜血杆菌多糖纯化方法的描述，包括将收获液进行福尔马林处 理、离心收集抗原上清液并浓缩，随后进行一系列化学方法的处理，获得纯化的b型流感嗜 血杆菌多糖，其中Hib多糖蛋白抗原与载体蛋白的质量比为1:2-2:1。
[0039] 实施例4流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物的制备
[0040] 按照公开专利200680023334.4中对b型流感嗜血杆菌多糖蛋白和白喉类毒素变种 CRM197蛋白的共价结合方法的描述，包括加入溴化氢对多糖进行活化处理，以及一系列化 学方法将b型流感嗜血杆菌多糖和CRM197进行偶联形成缀合物，再对缀合物进行层析纯化， 获得流感嗜血杆菌结合疫苗原液。
[0041 ]实施例5乙肝抗原原液的制备
[0042]采用培养汉逊酵母ATCC No. 26012制备重组乙肝抗原的方法，在摇瓶和细菌发酵 罐中三级级培养汉逊酵母后进行收获破菌，可采用匀质机研磨破碎，然后进行硫铵沉淀和 超滤浓缩，将浓缩液进行层析纯化，离子交换DEAE进行柱层析，获得乙肝原液。
[0043]实施例6脊灰和HIB免疫原性组合物的制备
[0044]将实施例2中制得的脊灰抗原原液与实施例4中制得的HIB原液按一定浓度搅拌混 合，获得免疫原性组合物，确定pH值在6-7的范围内。组合物抗原含量见表1。
[0045] 实施例7含佐剂的脊灰和HIB免疫原性组合物的制备
[0046] 将实施例2中制得的脊灰抗原原液和实施例4中所述的HIB多糖蛋白缀合物分别与 0.5mg/ml的氢氧化铝溶液等体积均匀混合，室温搅拌吸附30分钟，制成含铝佐剂的抗原半 成品，然后将含有佐剂的脊灰抗原和HIB抗原等体积混合搅拌，获得含铝佐剂的疫苗，确定 pH值在6-7的范围内。组合物抗原含量见表1。
[0047] 衷1脊灰和HTR钼合物抗原含量
L〇〇49」买施例8脊灰、HIB、乙肝抗原的免疫原性组合物的制备
[0050]将实施例2中制得的脊灰抗原原液、实施例4中制得的HIB多糖蛋白缀合物和实施 例5中制得的乙肝抗原原液按一定浓度搅拌混合，获得免疫原性组合物，确定pH值在6-7的 范围内。联合疫苗组合物中各抗原含量见表2。
[0051 ]实施例9含佐剂的脊灰、HIB、乙肝抗原的免疫原性组合物的制备 [0052]将实施例2中所述的脊灰抗原原液、实施例4中所述的HIB多糖蛋白缀合物和实施 例5中所述的乙肝抗原原液分别与0.5mg/ml的氢氧化铝溶液等体积均匀混合，室温搅拌吸 附30分钟，制成含铝佐剂的抗原半成品，然后将上述含佐剂的抗原等体积混合搅拌，获得含 铝佐剂的联合疫苗组合物，确定pH值在6-7的范围内。联合疫苗组合物中各抗原含量见表2。 [0053]表2脊灰、HIB、乙肝组合物中抗原含量
[0056]实施例10脊灰、HIB缀合物组合物的免疫原性
[0057]通过对SD大鼠分别免疫实施例6获得的含脊灰和HIB缀合物的免疫原性组合物和 实施例7获得的含脊灰和HIB缀合物抗原和氢氧化铝佐剂的免疫原性组合物来评估SD大鼠 对组合物中脊灰的免疫原性。大鼠按照10只每组的规格进行注射免疫。免疫原性组合物按 照人用剂量进行3倍倍比稀释，共配成5组。选择灭活脊灰疫苗作为对照组，大鼠免疫后第3 周加强一次，免疫后第2周进行采血，用病毒回滴实验检测中和抗体效价和血清阳转。中和 用病毒选用Sabin I、11和III型，各型的滴度为100CCID5Q。阳性对照细胞选择Vero细胞。中 和试验在36°C进行7天，并观察细胞病变。结果显示各组大鼠血清均有对sabin I、II和III 型病毒的中和作用和血清阳转，说明实施例6和实施例7制得的免疫原性组合物接种大鼠能 够获得良好的免疫原性，同时显示该免疫原性组合物的免疫原性和对照组中灭活脊灰疫苗 的免疫原性相当，实验结果见表3。
[0058]通过对NIH小鼠分别免疫实施例6制得的含脊灰和HIB缀合物抗原的免疫原性组合 物和实施例7制得的含脊灰和HIB结合物抗原和氢氧化铝佐剂的组合物来评估NIH小鼠对组 合物中HIB的免疫原性。选择HIB结合疫苗作为对照组，小鼠按照20只每组的规格进行注射 免疫(含10只对照/每组）。免疫原性组合物按照每次2.5yg注射量进行免疫。小鼠首先进行 0.85 %氯化钠溶液注射，于第1、14天注射两次，与第21~28天经眼眶静脉采血，用ELI SA法 测定HIB的IgG抗体。结果显示实施例6和实施例7制得的免疫原性组合物符合中国药典上对 HIB效价的相关规定，同时显示该抗组合物的免疫原性和对照组HIB结合疫苗的免疫原性相 当，实验结果见表3。
[0059]实施例11脊灰、HIB缀合物、乙肝组合物的免疫原性
[0060]通过对SD大鼠分别免疫实施例8制得的含脊灰抗原、HIB多糖蛋白缀合物、乙肝抗 原的组合物和实施例9制得的含脊灰抗原和HIB多糖蛋白缀合物、乙肝抗原和氢氧化铝佐剂 的组合物来评估SD大鼠对组合物中脊灰的免疫原性。大鼠按照10只每组的规格进行注射免 疫。免疫原性组合物按照人用剂量进行3倍倍比稀释，共配成5组。选择灭活脊灰疫苗作为对 照组，大鼠免疫后第3周加强一次，免疫后第2周进行采血，用病毒回滴实验检测中和抗体效 价和血清阳转。中和用病毒选用Sabin I、11和III型，各型的滴度为100CCID5Q。阳性对照细 胞选择Vero细胞。中和试验在36°C进行7天，并观察细胞病变。结果显示各组大鼠血清均有 对sabin I、11和III型病毒的中和作用和血清阳转，说明实施例8和实施例0制得的免疫原 则组合物在大鼠上具有良好的免疫原性，同时显示该抗原混合物的免疫原性和对照组中灭 活脊灰疫苗的免疫原性相当，实验结果见表3。
[0061 ]通过对NIH小鼠分别免疫实施例8制得的含脊灰、HIB多肽蛋白缀合物、乙肝抗原的 的免疫原性组合物和实施例9制得的含脊灰、HIB结合物、乙肝抗原和氢氧化铝佐剂的组合 物来评估NIH小鼠对组合物中HIB的免疫原性。选择HIB结合疫苗作为对照组，小鼠按照20只 每组的规格进行注射免疫(含10只对照/每组）。免疫原性组合物按照每次2.5yg注射量进行 免疫。小鼠首先进行〇. 85 %氯化钠溶液注射，于第1、14天注射两次，与第21~28天经眼眶静 脉采血，用ELISA法测定HIB的IgG抗体。结果显示实施例8和实施例9制得的免疫原则组合物 符合中国药典上对HIB效价的相关规定，同时显示该抗原混合物的免疫原性和对照组HIB结 合疫苗的免疫原性相，当实验结果见表3。
[0062]通过对BALB/c小鼠分别免疫实施例8制得的含脊灰、HIB多肽蛋白缀合物、乙肝抗 原的免疫原性组合物和实施例9制得的含脊灰、HIB结合物、乙肝抗原和氢氧化铝佐剂的组 合物来评估BALB/c小鼠对免疫原性组合物中乙肝病毒的免疫原性。选择重组乙肝疫苗作为 对照组，小鼠按照20只每组的规格进行注射免疫，4-6周后采血，采用ELISA法测定乙肝抗 体，计算半数有效剂量ED 5Q。结果显示实施例8、9制得的免疫原性组合物符合中国药典上对 重组乙肝疫苗效价的相关规定。同时显示该抗原混合物的免疫原性和对照组中重组乙肝疫 苗的免疫原性相当，实验结果见表3。
[0063]表3含脊灰、HIB缀合物、乙肝抗原的不同组合物的免疫原性实验结果(血清阳转 率％)
[0065]注:抗原的免疫原性中血清阳转率为各组分的平均值。
[0066]组合物I:HIB多糖蛋白缀合物+脊灰抗原原液
[0067]组合物2: HIB多糖蛋白缀合物+脊灰抗原原液+佐剂
[0068]组合物I:HIB多糖蛋白缀合物+脊灰抗原原液+乙肝抗原原液
[0069]组合物2: HIB多糖蛋白缀合物+脊灰抗原原液+乙肝抗原原液+佐剂
[0070]虽然，上文中已经用一般性说明、【具体实施方式】及试验，对本发明作了详尽的描 述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见 的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的 范围。
【主权项】
1. 一种免疫原性组合物，其特征在于，其含有:灭活的脊髓灰质炎病毒抗原和b型流感 嗜血杆菌多糖蛋白缀合物。2. 根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述灭活的脊髓灰质炎病毒抗 原为sabin I型、sabin II型和sabin III型。3. 根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述免疫原性组合物含有灭活 的脊髓灰质炎病毒sabin I型抗原2.5-20D单位/人份，sabin II型抗原5-40D单位/人份， sabin III型抗原5-70D单位/人份，b型流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物l-15yg/人份。4. 根据权利要求3所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述免疫原性组合物含有灭活 的脊髓灰质炎病毒sabin I型抗原5-15D单位/人份，sabin II型抗原10-30D单位/人份， sabin III型抗原10-40D单位/人份，b型流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物5-10yg/人份。5. 根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述免疫原性组合物还含有乙 肝抗原。6. 根据权利要求1-5任一所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述免疫原性组合物还 包括生理可接受的载体。7. 根据权利要求6所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述免疫原性组合物还含有一 种佐剂，所述佐剂为铝盐。8. 根据权利要求1所述的免疫原性组合物，其特征在于，所述免疫原性组合物的剂型为 喷雾剂、注射剂、冻干剂、胶囊剂、片剂或丸剂。9. 一种免疫原性组合物的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤： (1) 制备灭活的脊髓灰质炎病毒抗原原液； (2) 制备b型流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物； (3) 制备灭活的乙肝抗原原液； (4) 将灭活的脊髓灰质炎病毒抗原原液与b型流感嗜血杆菌多糖蛋白缀合物和乙肝抗 原原液进行混合搅拌，并控制混合液的pH值在6-7之间； 所述灭活的脊髓灰质炎病毒抗原原液含有sabin I型抗原2.5-20D单位/人份，sabin II型抗原5-40D单位/人份，sabin III型抗原5-70D单位/人份，b型流感嗜血杆菌多糖蛋白 缀合物1 -15yg/人份；乙肝抗原5-4〇yg/人份。10. 权利要求1-8任一项所述免疫原性组合物在制备用于预防或治疗脊髓灰质炎或脑 膜炎药物中的应用。
【文档编号】A61P31/14GK106075428SQ201610498219
【公开日】2016年11月9日
【申请日】2016年6月29日
【发明人】董高峰, 张星星, 高强, 尹卫东
【申请人】北京科兴中维生物技术有限公司