专利名称：一种对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法
技术领域：
本发明涉及一种油茶籽毛油精炼的方法，尤其涉及一种利用固定化磷脂酶Al对油茶籽毛油进行精炼的方法。
背景技术：
油茶籽(camellia Oleifera Ahel)是我国特有的木本油料，主要分布在我国南方的14个省(区)的山区和丘陵，目前全国有油茶林约为400万公顷。年产油茶籽超过60 万吨。从油茶种子中提取的茶油具有很高的营养价值和保健功能，其脂肪酸组成与橄榄油相似，有“东方橄榄油”之称。茶油中含有茶多酚和山茶甙，丰富的VE、VD、VK和胡萝卜素以及角鲨烯，长期食用，能增强血管弹性和韧性，延缓动脉粥样硬化，增加肠胃吸收功能，促进内分泌腺体激素分泌，防治神经功能下降，提高人体免疫力等。茶油已被联合国粮农组织列为重点推广的健康食用植物油。油茶籽油俗称茶油，又名山茶油、山茶籽油，是从山茶科山茶属植物的普通油茶 (Camellia oleifera Abel)成熟种子中提取的纯天然高级食用植物油。油茶俗称山茶、野茶、白花茶，是中国特有的一种优质食用油料植物。茶油(camellia Oil)是从油茶籽中提取的优质保健食用植物油脂，是一种天然、 卫生、保健的天然绿色食品，有“长寿油”、“油中之王”等美誉。茶油，是由脂肪酸、山茶苷、磷脂质、皂苷、维生素E、鞣质等成分组成。山茶油的不饱和脂肪酸含量丰富，高达93%。其中单不饱和脂肪酸含量超过了 75%以上，有的甚至高达90%。其余才是亚油酸、亚麻酸等多种不饱和脂肪酸。脱胶是植物油精炼过程中的一个重要环节，是保证物理精炼顺利进行的必要条件，对提高精炼率和油品质量至关重要。胶质脱除不彻底，既影响油品的深加工和油品的稳定性，也影响油品的烹调食用性。脱胶的主要目的是脱除油中的磷脂，而磷脂又分水化磷脂和非水化磷脂，在脱胶工艺中，水化磷脂可以通过简单的水化脱胶的方法除去，非水化磷脂具有明显的疏水性，在水化脱胶中较难与水结合，去除较为困难。茶油中不饱和脂肪酸含量较高，占80%左右，用化学法脱胶，所需温度较高，易氧化茶油所含不饱和脂肪酸，致使茶籽油原有的一些功效受到影响。因温度过高而形成的色素类物质会加深茶油的颜色，此类物质在后面脱色过程难于除去，这就影响了成品油的质量。经过几十年的发展，特别是物理精炼成功实施，人们已经推出了多种脱胶方法，如利用传统水化脱胶、简单酸法脱胶、Special脱胶和酶脱胶法等，应用固定化磷脂酶Al (所有的下标都应变成正常数字1)脱胶是油脂精炼的一项高新技术，该技术在提高油脂工业的经济效益和环保性能方面具有巨大的应用价值。
发明内容
本发明的目的首先是保证了精炼过程中茶籽油中不饱和脂肪酸不被破坏，尤其是亚油酸与亚麻酸，而这两种不饱和脂肪酸的比例直接影响着茶籽油的功效。
本发明的技术方案为提供一种对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，包括以下步骤a、将磷脂酶Al加入到PH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中，得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为l-:3mg/ml;将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为6-9 1 的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以150-180转/分钟的转速反应2-4小时，然后加入浓度为0. 03-0. M %的戊二醛交联1-6小时，交联温度控制在 3-15°C，真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在0-5°C 中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的0. 1-2%，并以1000-1500转/分钟的速度搅拌10-30分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为2-4%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为6. 0-7. 5 ；c、在40-60°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0. 05-0. 5%的固定化磷脂酶Al ；d、对加入固定化磷脂酶Al的油茶籽毛油以50-120转/分钟的速度搅拌3-8小时， 再以8000-10000转/分钟的速度离心3-5分钟，去除重相中的杂质，即得到精炼油茶籽毛油。优选的，上述方法中所述步骤a中将20-50mg磷脂酶Al加入到200_500mL、pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中。优选的，上述方法中所述步骤b中预处理大孔树脂的步骤为将大孔树脂浸泡于无水乙醇中备用。优选的，上述方法中所述步骤c中向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为 3%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为6. 5-7. 2。优选的，上述方法中所述步骤c中在55-58°C条件下向所述步骤d中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的0. 25-0. 48%的固定化酶。优选的，上述方法中所述步骤c中在56°C条件下向所述步骤d中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的0. 25%的固定化酶。优选的，上述方法中所述步骤d中对加入固定化酶的油茶籽毛油以100-120转/ 分钟的速度搅拌3-8小时，且以9000转/分钟的速度离心4分钟。优选的，上述方法中包括以下步骤a、将25mg磷脂酶Al加入到250mL、pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中， 得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为lmg/ml ；将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为7 1的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以160转/分钟的转速反应3小时，然后加入浓度为0. 2%的戊二醛交联3小时，交联温度控制在9°C，真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在2°C中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的1%，并以1200转/分钟的速度搅拌20分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为3%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为7 ；
c、在40-60°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0.3%的固定化磷脂酶Al ；d、对加入固定化磷脂酶Al的油茶籽毛油以50-120转/分钟的速度搅拌5小时， 再以8000-10000转/分钟的速度离心3-5分钟，去除重相中的杂质，即得到精炼油茶籽毛油。本发明有益效果为本发明的精炼油茶籽毛油的方法中不饱和脂肪酸损失了 1-3%，比化学精炼油茶籽油减少了 15-20%。并且固定化磷脂Al脱胶可将油中磷含量降到 5mg/kg以下，固定化后的磷脂酶Al的耐热性得到提高，可以在较宽的pH范围内保持较高的活性，对反应环境的敏感性降低，使得操作条件更容易控制和实施。固定化后的磷脂酶Al 可连续反应20h以上，还可以进行回收重复利用，5次之后酶活性仍然保持50%以上，提高了脱胶效率，比现有方法提高了 10-30%，降低生产成本，成本比现有方法降低了 30-50%， 本发明稳定性高、可长时间连续操作，本发明可进行大规模工业操作。
具体实施例方式为详细说明本发明的技术内容、构造特征、所实现目的及效果，以下结合实施方式详予说明。实施例1本实施方式中用固定化磷脂酶Al精炼油茶籽毛油通过以下步骤实现a、将5mg磷脂酶Al加入到50ml，pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中，得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为lmg/ml ；将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为6 1的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以150转/分钟的转速反应2小时，然后加入浓度为0. 03%的戊二醛交联1小时，交联温度控制在3°C，真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在0°C中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的0. 1%，并以1000转/分钟的速度搅拌10分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为2%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为6. 0 ；C、在40°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0. 05%的固定化磷脂酶Al ；用本实施方式进行油茶籽毛油精炼处理后，油茶籽毛油的磷含量在:3mg/kg，磷含量比未脱胶时降低了 95%以上，经测定，本实施方式中固定化酶的酶活力在50 80%之间。本实施方式步骤a中将5 15g大孔树脂浸泡于500 600ml无水乙醇中备用。实施例2本实施方式中用固定化磷脂酶Al精炼油茶籽毛油通过以下步骤实现a、将20mg磷脂酶Al加入到100ml，pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中， 得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为lmg/ml ；将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为7 1的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以170转/分钟的转速反应3小时，然后加入浓度为0. 1 %的戊二醛交联3小时，交联温度控制在3°C，真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在3°C中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的0. 5%，并以1200转/分钟的速度搅拌20分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为3%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为7 ；C、在50°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0.3%的固定化磷脂酶Al ；用本实施方式进行油茶籽毛油精炼处理后，油茶籽毛油的磷含量在5mg/kg，磷含量比未脱胶时降低了 95%以上，经测定，本实施方式中固定化酶的酶活力在50 80%之间。实施例3本实施方式中用固定化磷脂酶Al精炼油茶籽毛油通过以下步骤实现a、将50mg磷脂酶Al加入到500ml，pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中， 得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为3mg/ml ；将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为9 1的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以180转/分钟的转速反应4小时，然后加入浓度为0. 的戊二醛交联6小时，交联温度控制在15°C，真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在5°C中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的2%，并以1500转/分钟的速度搅拌30分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为4%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为7. 5 ；c、在40-60°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0. 05-0. 5%的固定化磷脂酶Al ；d、对加入固定化磷脂酶Al的油茶籽毛油以120转/分钟的速度搅拌8小时，再以 10000转/分钟的速度离心5分钟，去除重相中的杂质，即得到精炼油茶籽毛油。用本实施方式进行油茶籽毛油精炼处理后，油茶籽毛油的磷含量在％ig/kg，磷含量比未脱胶时降低了 95%以上，经测定，本实施方式中颗粒状固定化酶的酶活力在50 80%之间。表1不同精炼方法对比情况
权利要求
1.一种对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，包括以下步骤a、将磷脂酶Al加入到pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中，得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为l-;3mg/ml ；将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为6-9 1的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以150-180转/分钟的转速反应 2-4小时，然后加入浓度为0. 03-0. 的戊二醛交联1-6小时，交联温度控制在3-15°C， 真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在0-5°C中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的 0. 1-2%，并以1000-1500转/分钟的速度搅拌10-30分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为2-4%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为6. 0-7. 5 ；C、在40-60°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0. 05-0. 5%的固定化磷脂酶Al ；d、对加入固定化磷脂酶Al的油茶籽毛油以50-120转/分钟的速度搅拌3-8小时，再以8000-10000转/分钟的速度离心3-5分钟，去除重相中的杂质，即得到精炼油茶籽毛油。
2.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，所述步骤a中将20-50mg磷脂酶Al加入到200_500mL、pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中。
3.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，所述步骤b中预处理大孔树脂的步骤为将大孔树脂浸泡于无水乙醇中备用。
4.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，所述步骤c中向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为3%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH 值为 6. 5-7. 2。
5.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于步骤c中在55-58°C条件下向所述步骤d中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0. 25-0. 48%的固定化酶。
6.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，所述步骤c中在56°C条件下向所述步骤d中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0. 25%的固定化酶。
7.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，所述步骤d中对加入固定化酶的油茶籽毛油以100-120转/分钟的速度搅拌3-8小时，且以9000 转/分钟的速度离心4分钟。
8.根据权利要求1所述的对三高人群有益的油茶籽毛油精炼方法，其特征在于，包括以下步骤a、将25mg磷脂酶Al加入到250mL、pH值为7的HAc-NaAc或柠檬酸缓冲溶液中，得到酶液，所述酶液的磷脂酶Al的浓度为lmg/ml ；将经过预处理的大孔树脂与酶液以体积比为 7 1的比例进行混合，得到混合液；将承装混合液的容器放在摇床上以160转/分钟的转速反应3小时，然后加入浓度为0. 2%的戊二醛交联3小时，交联温度控制在9°C，真空过滤收集滤饼，所得即为固定化磷脂酶Al，将滤饼分散后放入冰箱，在2°C中静置干燥；b、取油茶籽毛油经水化脱胶法去除油茶籽毛油中的水化磷脂，然后向经过处理的油茶籽毛油中加入质量浓度为40-50%的柠檬酸溶液，所述柠檬酸溶液的质量为油茶籽毛油的 1%，并以1200转/分钟的速度搅拌20分钟，再向经过处理的油茶籽毛油中添加质量浓度为3%的NaOH溶液使油茶籽毛油的pH值为7 ；C、在40-60°C条件下向所述步骤b中得到的油茶籽毛油中加入油茶籽毛油质量的 0.3%的固定化磷脂酶Al ；d、对加入固定化磷脂酶Al的油茶籽毛油以50-120转/分钟的速度搅拌5小时，再以 8000-10000转/分钟的速度离心3-5分钟，去除重相中的杂质，即得到精炼油茶籽毛油。
全文摘要
本发明涉及一种油茶籽毛油精炼的方法，尤其涉及一种利用固定化磷脂酶A1对油茶籽毛油进行精炼的方法。本发明的技术方案用固定化磷脂酶A1精炼油茶籽毛油通过以下步骤实现a、固定化磷脂酶；b、油茶籽毛油前期处理；c、向油茶籽毛油中添加固定化磷脂酶；d、搅拌后离心，即实现用固定化磷脂酶A，精炼油茶籽毛油。本发明有益效果为本发明的精炼油茶籽毛油的方法中不饱和脂肪酸损失了1-3％，比化学精炼油茶籽油减少了15-20％。并且固定化磷脂A1脱胶可将油中磷含量降到5mg/kg以下，固定化后的磷脂酶A1的耐热性得到提高，可以在较宽的pH范围内保持较高的活性，对反应环境的敏感性降低，使得操作条件更容易控制和实施。
文档编号C11B3/00GK102504946SQ20111034670
公开日2012年6月20日 申请日期2011年11月4日 优先权日2011年11月4日
发明者刘春雷, 周伯川, 彭彪, 李丹, 蔡春辉 申请人:福建春辉生物工程有限公司