一种草炭生物有机肥及其制备方法和应用与流程

本发明属于生物有机肥领域，涉及一种草炭生物有机肥及其制备方法和应用。
背景技术：
：草炭又称泥炭，泥煤，是沼泽发育过程的产物，含有大量的未被分解的植物残体、腐殖质、纤维素、木质素以及一部分矿物质，富含氮磷钾等养分。此外，草炭中还含有一些生理活性物质，是一种无菌、无毒、无公害、无污染、无残留的绿色物质。我国草炭资源丰富，除少数干旱地区尚未发现草炭资源外，全国各省市地区几乎均有草炭资源。在农业生产中，草炭可采用以下利用方式：1、直接用作肥料来改良土壤；2、与化肥掺混成有机无机肥混合肥料；3、用碱处理研制腐殖酸钠或者提取草炭里面的腐殖酸来研制腐殖酸肥；4、用草炭作为介质来吸附微生物来生产菌肥等；5、与岩棉、椰壳发酵物、蛭石等复混研制育苗基质等。现有的利用方式中，在充分发挥其组分功能方面还有待加强。如草炭中的主要成分是碳，这种高分子量的碳无论是施入土壤，还是作为微生物的吸附剂，都很难在短时间内被微生物所利用。如果能采用一定工艺，利用微生物来活化草炭中的碳，将会有很好的应用前景。技术实现要素：本发明的目的是针对现有技术的上述不足，提供一种草炭生物有机肥的制备方法。本发明的另一目的是提供该方法制备的草炭生物有机肥。本发明的又一目的是提供该草炭有机肥的应用。本发明的目的可通过以下技术方案实现：一种草炭生物有机肥的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括：向草炭中加入适量水和碱性物质调剂草炭ph至6.5～7.5，待ph稳定后向其中加入碳源，加入氨基酸稀释液调节含水量至40％～50％，混匀，静置20～24小时，加入保藏号为cgmccno.5808的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)sqr9或保藏号为cgmccno.3183的枯草芽孢杆菌njn-6种子液，充分混匀后堆放成条垛进行好氧堆肥，发酵7～20天获得草炭生物有机肥；其中所述的碳源的加入量为调节ph后的草炭质量的5％～10％；sqr9种子液或njn-6种子液中有效菌数量达到109cfu·ml-1，sqr9种子液或njn-6种子液的添加量为调节ph后的草炭重量的5％～15％。所述的碱性物质选自草木灰；草木灰的添加量优选草炭质量的12％～20％，以将草炭的ph调节至6.5～7.5，便于后面能加入较多的酸解氨基酸溶液，有利于微生物生长，有利于草炭中的碳活化所述的制备方法优选调节ph时加入水至草炭堆体含水量为30％～40％，含水量高点有利于缩短酸碱中和时间，尽早稳定ph值。所述的碳源优选米糠或稻壳粉。最初给所加的功能菌提供少量的可利用的碳源，让微生物繁殖，微生物在繁殖的过程中，逐步利用草炭中的碳，将草炭中的碳活化出来。所述的氨基酸稀释液优选用水稀释的全价氨基酸液，全价氨基酸液的加入量为调节ph后的草炭重量的3％～8％。所述的全价氨基酸液可以按照以下方法制备而成：(1)在密闭容器中先将病死畜禽动物经自动化粉碎、所有固形物和液体自动转入密闭的水解罐后，在初始酸浓度c(1/2h2so4)为2.5-5moll-1、80-100℃和1-2个大气压下水解2-5小时；(2)水解结束待水解罐内溶液冷却至80℃以下时，静置分层，收集中层的氨基酸溶液即得。氨基酸水解液含氨基酸和各种肽类物质约10％(g/100ml)及以上；含17种氨基酸、小肽和少量多肽，溶液呈强酸性，其游离氨基酸含量≥100g·l-1。也可以直接购买江苏省江阴市联业生物科技有限公司生产的动物蛋白氨基酸水溶肥。所述的制备方法优选，进行好氧堆肥时当堆温升至50℃进行第一次翻堆；堆制过程中，当堆温不再上升时进行翻堆。所述的方法优选春季或夏季的堆费时长为7～15天；秋季或冬季的堆肥时长为15～20天。按照本发明上述的方法制备的草炭生物有机肥。草炭生物有机肥符合ny884-2012标准，其主要指标如下：有效活菌数为0.20-1.2亿/克，有机质45-70％，腐殖酸总含量17-21％，活性腐殖酸含量9.7-15.3％，水分≤30％，ph值5.5-7.0，粪大肠菌群数未检出，无蛔虫卵，有效期≥6个月。砷≤0.02mg/kg，镉≤2mg/kg，铅≤16mg/kg，铬≤20mg/kg，汞≤0.07mg/kg。本发明所述的草炭生物有机肥在改善土壤微生物结构、增强土壤肥力和/或促进作物生长中的应用。所述的作物优选蔬菜，进一步优选黄瓜。有益效果：本发明以草炭为原料，加入解淀粉芽孢杆菌sqr9或枯草芽孢杆菌njn-6进行堆肥发酵制备生物有机肥，利用菌株sqr9充分活化了草炭中的碳，活性腐殖酸含量由3.6％提升到13.5％，使其由生物无法利用的“死碳”转变为生物能够利用的“活碳”；制备的草炭生物有机肥能显著促进黄瓜根系生长，有利于黄瓜吸收养分含量，增加其植株养分含量，从而促进黄瓜的生长。土壤中施用本发明草炭生物有机肥能改变黄瓜根际土微生物群落结构，提高土壤中速效磷和速效钾含量，增强土壤中的α-葡萄糖苷酶、硫酸酯酶、β木糖苷酶、β-葡萄糖苷酶磷酸酯酶、乙酰氨基葡糖苷酶、β-纤维二糖酶、蔗糖酶、过氧化氢酶、脲酶的酶活性。表1草炭主要成分含量(原始)表2草炭主要成分含量(活化后)附图说明图1不同草木灰配比对草炭ph的影响a：添加13％(v/w)5mol·l-1的koh溶液；b：添加10％(w/w)草木灰；c：添加12.5％(w/w)草木灰；d：添加15％(w/w)草木灰；e:添加17.5％(w/w)草木灰图2sqr9生物有机肥肥料货架期有效活菌数变化s1：sqr9生物有机肥(未调节ph值的草炭)；s2：sqr9生物有机肥(用草木灰调节ph后的草炭)图3盆栽条件下不同施肥处理对黄瓜植株的生长的影响(2018.09.18～2018.10.25)图4盆栽条件下不同施肥处理对黄瓜根系生长影响的扫描图a，第一茬黄瓜根系；b，第二茬黄瓜根系。cf：施用化肥；ct：施用草炭；sqr9：施用sqr9草炭生物有机肥图5盆栽条件下不同施肥处理对土壤酶活性的影响具体实施方式以下实施例中使用的材料：草炭由陕西华威肥业科技发展有限公司提供，其基本理化性状：有机质70.6％，ph3.8，全氮1.3％，全磷2.2％，全钾0.3％，水分16.4％。总腐殖酸20.2％(水不溶物0.2％，富里酸0.7％，胡敏酸2.7％，胡敏素16.6％)，活性腐殖酸3.6％。草木灰由小麦秸秆焚烧后所得，其ph值为8.90。全价氨基酸(aa)：由江苏省江阴市联业生物科技有限公司提供。全价氨基酸由废弃畜禽经酸解而成，含17种氨基酸、小肽和少量多肽，溶液呈强酸性，稀释250倍后ph值为2.5，其游离氨基酸含量≥100g·l-1。cgmccno.5808的解淀粉芽孢杆菌sqr9的菌株已在cn104130040a中公开；cgmccno.3183的枯草芽孢杆菌njn-6已在cn109867537a中公开。实施例1草木灰不同配比对草炭ph的影响烘干草炭，按不同配比处理将草木灰加入到草炭中，加适量水搅拌均匀至湿润状，使草木灰与草炭充分反应，监测7d各处理的ph值后摊开自然风干到含水量在20％以下，并测定其最终的ph值，重复三次。试验共设置五个处理，处理如下(1)koh：添加13％(v/w)5mol·l-1的koh溶液；(2)10％：添加10％(w/w)草木灰；(3)12.5％：添加12.5％(w/w)草木灰；(4)15％：添加15％(w/w)草木灰；(5)17.5％：添加17.5％(w/w)草木灰，上述添加量以草炭质量为基准，每个处理重复三次。由图1所示，第五天后所有处理中草炭的ph趋于稳定。其中添加5mol·l-1koh溶液的草炭第二天之后趋于稳定，保持在7.0左右。添加10％草木灰的草炭处理ph为6.0～6.5之间。往草炭里添加13％(v/w)5mol·l-1的koh溶液处理，12.50％(w/w)处理、15％(w/w)或17.50％(w/w)草木灰处理均能使草炭的ph控制在6.5～7.5的范围内；因此可以选择向草炭中添加草炭质量的12％～20％的草木灰调解ph至至6.5～7.5。实施例2不同配比氨基酸对调整过ph值草炭酸碱性影响向调整过ph值的草炭(其中草木灰加入量为草炭质量的17.5％)中加入不同比例米糠，然后加入用水稀释的全价氨基酸溶液调节含水量至40％，充分混匀，静止24小时，然后测定ph值。米糠加入量设置3个处理：ck-未加；5％：添加调整过ph值草炭质量5％(w/w)的米糠；10％：添加调整过ph值草炭质量10％(w/w)的米糠。每个处理3次重复。全价氨基酸加入量共设置10个处理，每个处理3个重复。其中各处理为(1)ck1：只加水；(2)1％：添加调整过ph值草炭质量1％(w/w)的全价氨基酸；(3)2％：添加调整过ph值草炭质量2％(w/w)的全价氨基酸；(4)3％：添加调整过ph值草炭质量3％(w/w)的全价氨基酸；(5)4％：添加调整过ph值草炭质量4％(w/w)的全价氨基酸；(6)5％：添加调整过ph值草炭质量5％(w/w)的全价氨基酸；(7)6％：添加调整过ph值草炭质量6％(w/w)的全价氨基酸；(8)7％：添加调整过ph值草炭质量7％(w/w)的全价氨基酸；(9)8％：添加调整过ph值草炭质量8％(w/w)的全价氨基酸；(10)9％：添加调整过ph值草炭质量9％(w/w)的全价氨基酸；结果表明(表3)：向调整ph后的草炭中加入不同质量比的米糠后，再添加不同配比全价氨基酸，充分混匀，静止24小时后，其ph值不同。从有利于功能菌株生长和尽可能增加产品中氨基酸的角度而言，建议比例为3％～8％。表3不同处理ph值平均值实施例3功能菌株sqr9生长向调整过ph值的草炭中加入米糠，然后加入用水稀释的全价氨基酸溶液调节含水量至40％～50％【全价氨基酸的加入量为调节ph后的草炭质量的5％(w/w)】，充分混匀，静止24小时。加入保藏号为cgmccno.5808的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)sqr9种子液5％，充分混匀后堆放成条垛进行好氧堆肥，发酵7～25天，定期检测菌株sqr9的数量。米糠加入量设置4个处理，每个处理重复3次。其中各处理为(1)ck：对照，未添加米糠；(2)5％米糠：添加调整过ph值草炭质量5％(w/w)的米糠；(3)10％米糠：添加调整过ph值草炭质量10％(w/w)的米糠(4)15％米糠：添加调整过ph值草炭质量15％(w/w)的米糠；结果表明(表4)：向调整ph后的草炭中加入质量比为5％～15％的米糠，菌株sqr9的有效菌数量均超过0.2亿/g，达到了0.6-3.7亿/g。从节约成本的角度而言，建议米糠添加比例为5％～10％。表4不同处理菌株sqr9数量实施例4生物有机肥货架期实验分别将功能菌株sqr9数量高于2×108cfu·g-1、含水量为27.5％的生物有机肥分装于自封袋(重量1公斤)，室温环境下密封保存，每个月用lb选择性培养基涂各处理中的有效菌，连续监测6个月。实验共设置2个处理(表5)，每个处理重复3次。表5不同类型sqr9草炭生物有机肥货架期处理编号类型处理方式s1sqr9生物有机肥1未调ph值s2sqr9生物有机肥2用草木灰调节ph注：s2先用15％(w/w)草木灰调节酸碱度，米糠的加入量(w/w)为调整过ph值草炭质量8％，全价氨基酸加入量(w/w)调整过ph值草炭质量的5％。其ph值为6.75.如图2所示，s1处理(未调节ph的微生物有机肥)，sqr9菌在第一个月后就降为107cfu·g-1，四个月后开始下降并在6个月前一直保持在107cfu·g-1以上，第六个月就低于2×107cfu·g-1，不符合生物有机肥的保存标准。s2处理(用草木灰调节ph的微生物有机肥)，sqr9菌一直呈下降趋势，并在第四个月急剧下降后趋于稳定，货架期期间有效活菌数均在108cfu·g-1以上。s2处理有效活菌数高于s1处理，且都≥2×107cfu·g-1均符合生物有机肥的行业标准。实施例5sqr9草炭生物有机肥制备用接种环轻轻刮一下平板上的sqr9单菌落然后放进lb液体培养基上，然后置于30℃、170rpm摇床上摇12h，再按0.1％(v/v)接种到液体lb培养基后摇36h即获得sqr9发酵液。然后离心浓缩，用lb培养基重悬得到sqr9种子液，其有效菌数量达到109cfu·ml-1。向50kg草炭中加入适量水(15kg)，用草木灰(用量为草炭用量的14％)调剂草炭ph至6.92，待ph稳定后向其中加入5kg米糠，加入全价氨基酸(用量为调整ph值后的草炭用量的5％)的稀释液调节含水量至50％，充分混匀，静止24小时。加入相当于调节ph后的草炭重量的10％的保藏号为cgmccno.5808的解淀粉芽孢杆菌(bacillusamyloliquefaciens)sqr9种子液，充分混匀后堆放成条垛进行好氧堆肥，当堆温升至50℃进行第一次翻堆；堆制过程中，当堆温不再上升时进行翻堆，发酵15天获得草炭生物有机肥。草炭生物有机肥符合ny884-2012标准，其主要指标如下：有效活菌数为0.76亿/克，有机质56.9％，腐殖酸总含量18.1％，活性腐殖酸含量13.5％，水分26.8％，ph值6.2，粪大肠菌群数未检出，无蛔虫卵，有效期≥6个月。砷0.019mg/kg，镉1.95mg/kg，铅14.2mg/kg，铬15.6mg/kg，汞0.053mg/kg。实施例6njn-6草炭生物有机肥制备将菌株njn-6接种到pda培养液进行发酵生产，发酵生产条件为：ph为6.0～7.0，培养温度30～35℃，搅拌速度为180～300转/分钟，获得密度为1010cfu/ml的枯草芽孢杆菌njn-6种子液；其中，pda培养液配制：以配制1l的量为例：200g土豆削皮后切成小块放到水里煮，沸腾后煮30min，经过四层医用纱布过滤后向滤液中加20g蔗糖，定容至1000ml，ph值调至7.2～7.4，121℃灭菌20min。向50kg草炭中加入适量水(15kg)，用草木灰(用量为草炭用量的20％)调剂草炭ph至7.5，待ph稳定后向其中加入5kg米糠，加入全价氨基酸(用量为调整ph值后的草炭用量的10％)的稀释液调节含水量至50％，充分混匀，静止24小时。加入相当于调节ph后的草炭重量的10％的保藏号为cgmccno.3183的枯草芽孢杆菌njn-6种子液，充分混匀后堆放成条垛进行好氧堆肥，当堆温升至50℃进行第一次翻堆；堆制过程中，当堆温不再上升时进行翻堆，发酵17天获得草炭生物有机肥。草炭生物有机肥符合ny884-2012标准，其主要指标如下：有效活菌数为0.80亿/克，有机质55.0％，腐殖酸总含量18.5％，活性腐殖酸含量13.0％，水分29.3％，ph值6.5，粪大肠菌群数未检出，无蛔虫卵，有效期≥6个月。砷0.015mg/kg，镉1.76mg/kg，铅16.1mg/kg，铬17.1mg/kg，汞0.045mg/kg。实施例7草炭生物有机肥生物效应7.1供试作物黄瓜，品种为露丰。7.2供试肥料sqr9草炭生物有机肥(实施例5制备)；njn-6草炭生物有机肥(实施例6制备)，化肥，由尿素和磷酸氢二钾，过磷酸钙。7.3供试土壤盆栽试验采用菜园土，其中土壤中的理化性质为ph为7.55，有机质为1.81％，铵态氮为7.07mg·kg-1，硝态氮为32.6mg·kg-1，速效磷为10.0mg·kg-1，速效钾为112.1mg·kg-1。大田试验采用水稻土，其基本理化性质为有机质21.5gkg-1，全氮2.30gkg-1，全磷2.13gkg-1，碱解氮140mgkg-1，速效磷39.0mgkg-1，速效钾74.3mgkg-1，ph7.60。7.4供试地点盆栽试验在江苏省固体有机废弃物资源化利用高技术研究重点实验室温室中进行。大田试验在南农大(常熟)新农村发展研究院有限公司的联栋试验大棚内进行。7.5试验设计盆栽试验共设计四个处理，每个处理五次重复。选取长势一致的两叶一心黄瓜幼苗移栽，种植33天后测定黄瓜的相关生长与生理指标、土壤的理化性质、酶活性等，试验重复两次。其中各处理为(1)cf：施用与生物有机肥等养分的化肥；(2)ct：施用与生物有机肥等养分的草炭；(3)sqr9：施用sqr9草炭生物有机肥；(4)n6：施用njn-6草炭生物有机肥。大田试验设置四个处理：处理1(ck1)：未施肥；处理2(ck2)：单施化肥(常规用量)；处理3(aof)：灭活后的生物有机肥+化肥(常规用量减去灭活后的生物有机肥所含养分)；处理4(bof)：生物有机肥+化肥(常规用量减去生物有机肥所含养分)。每个处理重复三次，每个处理小区面积21.0m2(长7.0m，宽3.0米)。数据处理与制作图表在office2016软件中进行，数据分析与差异显著性检验在spss25.0软件中进行。7.6盆栽试验测定项目及方法、结果7.6.1植株生长指标的测定测定各处理的株高、茎粗、spad值、叶片数、地上部干重和鲜重、根系活力、根系表面积和根系长度。株高使用皮尺测定；茎粗使用游标卡尺测定；spad值使用spad-502叶绿素仪测定；地上部干重先105℃杀青30min，经75℃烘干至恒重，测定。采用根系扫描仪扫描根系表面积和长度。由表6可见，施用sqr9草炭生物有机肥的黄瓜较其他处理好。根系形态扫描图见图3。其中，第一茬盆栽中黄瓜的根系生长差异较第二茬盆栽处理间效果显著。第一茬黄瓜盆栽中，sqr9处理的根系活力、根长、根表面积、根体积和根尖数分别是cf处理的2.63倍、2.95倍、2.51倍和2.76倍；分别是ct处理的2.54倍、1.76倍、1.69倍、1.62倍和1.54倍，分别是n6处理的1.47倍，1.44倍、1.36倍、1.29倍和1.37倍，差异显著。n6处理根系活力、根长、根表面积、根体积和根尖数相对于cf处理分别增加了79％、104％、102％、96％和102％，差异显著。ct处理与n6处理也有变化，处理间差异不显著。第二茬黄瓜中，sqr9处理的根系活力、根长、根表面积、根体积和根尖分别比cf处理增加了50.0％、29.1％、27.8％、24.4％和59.4％，处理间差异不显著。结果表明，施用生物有机肥能促进黄瓜根系的生长，其中，施用sqr9草炭生物有机肥的促进黄瓜根系生长效果最佳，其中第一茬盆栽的效果比第二茬盆栽的效果更显著。表6不同施肥处理对黄瓜根系的影响注：不同的字母代表在p<0.05水平有显著性差异(duncan’stest,p<0.05)。cf，施用化肥；ct，施用草炭；sqr9，施用sqr9草炭生物有机肥。7.6.2土壤可培养微生物的测定将收集的根际新鲜土壤取5g加45ml无菌水放入事先装有玻璃珠的无菌三角瓶中，再将三角瓶于170r/min，30℃摇床中摇30min，获得10-1的菌悬液，继续用无菌水将此菌悬液梯度稀释至合适浓度，取稀释后的菌悬液0.1ml涂布于特定的选择性培养基，测定细菌、真菌和放线菌数量。每个样品取2个梯度，每个梯度3个重复。细菌计数采用牛肉膏蛋白胨培养基，真菌计数采用马丁氏培养基，放线菌计数采用高氏1号培养基。收获后，挖取黄瓜根际土进行土壤可培养微生物数量的测定，结果如表7所示：第二茬黄瓜收获后sqr9处理根际土的微生物数量均显著高于其他处理，细菌数量分别是cf处理、ct处理的1.55和1.60倍，真菌数量分别是cf处理、ct处理和n6处理的3.16、1.88和1.31倍，放线菌数量分别是cf处理、ct处理和n6处理的1.98、2.02和1.47倍。可知sqr9处理能显著增加黄瓜根际土中的细菌，真菌和放线菌的数量，结果表明土壤中施用sqr9生物有机肥能改变黄瓜根际土微生物群落结构。表7施用不同肥料对黄瓜根际土可培养微生物数量的影响注：不同的字母代表在p<0.05水平有显著性差异(duncan’stest,p<0.05)。cf，施用化肥；ct，施用草炭；n6，施用njn-6生物有机肥；sqr9，施用sqr9草炭生物有机肥。7.6.3土壤理化性质的测定土壤ph利用混合电极ph计测定(pe-10，sartorious，germany)(水土比为2.5:1)；土壤有机质(soilorganicmatter，som)采用油浴加热-重铬酸钾容量法测定；土壤硝态氮(nitraten，no3-n)测定采用0.01m的cacl2浸提(1:10，w/v)土壤振荡1h后过滤，利用流动分析仪(autoanalyzer3，germany)测定滤液中no3-n含量；土壤速效磷(availablep，ap)含量采用钼锑抗比色法测定。土壤速效钾(availablek，ak)利用nh4oac浸提火焰光度法测定。土壤总氮(totaln，tn)采用半微量开氏法测定；som、tn、tp、tk、no3-n、ak和ap均参考《土壤农化分析》中的方法(鲍士旦，2000)。由表8可得，施用微生物有机肥影响土壤的理化性质。黄瓜盆栽试验中，两茬中土壤理化性质变化大。第一茬盆栽土壤中，各处理间的有机质变化不大，第二茬盆栽中，sqr9处理相比于ck处理增加了13％，与ct处理和n6处理差异不大。铵态氮在两茬盆栽中变化不大，所有处理间差异不显著。相对于铵态氮，硝态氮变化显著。第一茬盆栽中，土壤中硝态氮的含量从多到少的排序为：cf处理>ct处理>sqr9处理>n6处理，施用生物有机肥的处理中硝态氮显著少于cf处理，n6处理和sqr9处理分别下降了87％和76％，显著降低了土壤中的硝态氮含量。由于第二茬盆栽中，黄瓜生长期间施用了尿素，其硝态氮含量急剧增加。连续施用两次sqr9草炭生物有机肥后，土壤中的速效磷含量也显著高于cf处理，增加了14％，土壤中的速效钾增加了6％～28％。表8不同施肥处理对土壤理化性质的影响注：不同的字母代表在p<0.05水平有显著性差异(duncan’stest，p<0.05)。cf，施用化肥；ct，施用草炭；n6，施用njn-6生物有机肥；sqr9，施用sqr9生物有机肥。7.6.4植株理化性质的测定参照鲍士旦(2000)主编的《土壤农化分析》第三版测定植株总氮、总磷、总钾、有机质等基本理化指标。杀青烘干后粉碎植株，取样测定黄瓜植株的养分含量。由表9可得，施用不同肥料，黄瓜的植株中的养分不一样。第一茬黄瓜中，各处理间植株养分含量的差异不显著，第二茬盆栽中处理间差异显著。相对于cf处理，第二茬黄瓜中sqr9处理的植株中的全氮、全磷和全钾的累积量分别为0.2507克/株、0.0229克/株、0.1272克/株，显著高于cf处理，分别提高了26.6％、18.0％和29.7％，差异显著。ct处理和n6处理相对于cf处理，植株养分含量增加，处理间差异不显著。结果表明，施用sqr9草炭生物有机肥有利于黄瓜吸收养分含量，其植株养分含量增加。表9不同肥料处理对黄瓜植株养分的影响注：不同的字母代表在p<0.05水平有显著性差异(duncan’stest,p<0.05)。cf，施用化肥；ct，施用草炭；n6，施用njn-6生物有机肥；sqr9，施用sqr9生物有机肥。7.6.5土壤酶活性的测定脲酶活性测定采用苯酚钠-次氯酸钠比色法，以脲素为底物，酶活性以24h后1g土壤中nh4+-n的毫克数表示。土壤过氧化氢酶活性采用高锰酸钾滴定法测定，结果以1min后1g土壤消耗0.02mol·l-1高锰酸钾的用量(ml)表示(关松荫，1986)。其他酶活性测定均采用荧光微型板酶检测技术，酶活性(nmol·h-1·g-1)计算过程如下：通过采用荧光微型板酶检测技术、苯酚钠-次氯酸钠比色法等各种进行土壤活性酶的测定，结果如图5所示。相比于第一茬盆栽，所有处理的各种酶活性在第二茬中均增强了，其中每种酶活性在不同处理中的活性不同。脲酶活性在处理中，sqr9处理>n6处理>ct处理>cf处理，相比于cf处理，sqr9处理的脲酶、β纤维二糖酶、磷酸酯酶、β木糖苷酶、硫酸脂酶和α-葡萄糖苷酶均提高了，分别增加了4％～64％、10％～25％、3％～22％、14％～29％、10％～76％和7％～11％，其中增幅大的是硫酸脂酶。结果表明，施用生物有机肥的土壤中的酶活性比施用化肥或者草炭的酶活性强。7.7大田试验方法及结果育苗：选取颗粒饱满，大小均匀的种子，每穴播2-3粒，出苗后留健壮苗1株，常规水肥管理。大田施肥与管理：各施肥处理氮磷钾肥总用量相同，即尿素30kg/亩，过磷酸钙70kg/亩，硫酸钾14kg/亩，生物有机肥用量200公斤/亩，即每小区施用6.30kg肥料(合干基4.57公斤)，均做基肥施用，常规水肥和植保管理。待黄瓜幼苗长至1芽三叶时，选用长势基本一致的幼苗于2018年3月12日移栽到大田，2018年4月15日开始计产。不同处理对黄瓜果实产量影响结果如表10和表11所示。不论是施用sqr9草炭生物有机肥还是施用njn-6草炭生物有机肥料均能能显著提高黄瓜果实的产量。以施用sqr9草炭生物有机肥为例，比未施肥每亩增产1194.2公斤，增产率36.9％；比单施化肥每亩增产482.8公斤，增产率12.2％，比aof每亩增产403.4公斤，增产率10.0％。进一步对产量结果(以施用sqr9草炭生物有机肥为例)进行方差分析发现，处理间的f0.01(9.78)>f(6.03)>f0.05(4.76)；而重复间的f(0.10)<f0.05(5.14)<f0.01(10.92)，即处理间差异性显著(p＝0.05)，重复内在p＝0.05和p＝0.01下差异均不显著。同时，比较处理间与重复间的差异性发现，f处理(6.03)>f重复(0.10)，即处理间的差异显著大于重复间的变异，表明不同施肥处理对于黄瓜果实产量的影响存在显著差异。对产量进行处理间差异性显著性分析，结果表明：在p＝5％下，bof与其它处理比较均具有显著性差异。表10施用sqr9草炭生物有机肥对黄瓜果实产量的影响注：ck1：不施肥；ck2：单施化肥(常规用量)；aof1：灭活后的sqr9草炭生物有机肥+化肥(常规用量减去灭活后的生物有机肥所含养分)；bof1：sqr9草炭生物有机肥+化肥(常规用量减去生物有机肥所含养分)；表11施用njn-6草炭生物有机肥料对黄瓜果实产量的影响注：ck1：不施肥；ck2：单施化肥(常规用量)；aof2：灭活后的njn-6草炭生物有机肥+化肥(常规用量减去灭活后的生物有机肥所含养分)；bof2：njn-6草炭生物有机肥+化肥(常规用量减去生物有机肥所含养分)。当前第1页12