专利名称：对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法
技术领域：
本发明对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法涉及的是关于对存在于水或含水醇中的白首乌的皂甙类进行提取、精制、生产的方法。
有报告称白首乌具有各种优异的药理活性，例如抗衰老作用(郭启铮等《中国医药学报》1987年2月，32期)、免疫调节作用(顾立刚《中药近报》1986年11月，50期)、促进毛发生长作用(吴秉芹等《中国医药学报》1987年2月，29期)等都曾报道过。作为白首乌中含有的有效成分之一的皂甙类，在《中药志》(第二册，人民卫生出版社，33 1页，1979年)中已有记载。这些皂甙类是具有类似的化学结构的多种化合物的混合物。其中的七种已探明其化学结构(J.Chen，Z.Zhang and J.Zhou，Acta Bot.Yunnanica 1990年12月，197期)。它们是C21类固醇葡萄糖甙(C21类固醇糖甙，孕烷葡萄糖甙)，命名为Wilfoside C3N、C1N、C1G、K1N、Cynauricuricuoside A、B、C。众所周知，在朝鲜半岛当强壮药使用的CynanchunWilfordi Hemsly中也含有Wilfoside(H.Mitsuhashi and K.Hayashi，Shoyakugakuzasshi，1985年1月，39期)。大家知道，这些皂甙类是具有优异的抗肿瘤活性作用的非常重要的化合物(赵谨等《中国医药学报》1988年3月，29期)。而且近年曾有过报道萝摩科的其它类植物中也有优异的药理活性作用的多种孕烷葡萄糖甙，例如海南牛奶类中具有抗肥胖作用的新的孕烷葡萄糖甙(B.Ma et al.，J.Nat.Prod.，1997年60期，134-138页)、Leptadenia hastate Decne中具有抗肿瘤活性作用的孕烷莆萄糖甙(R.Aquino et al；J.Nat.Pord，1996年，59期，555-564页)等。这些都在暗示白首乌中所含有的皂甙类的重要性正日益凸现。
白首乌作为食品用的产品形态，现在市场上销售的是其根基部分原封不动切成片状的和对其根茎部加工、精制而成的(粉末、精制粉末、速熔品等)。也就是说，基本只有两种产品。还有将它的水提取物加以混合成的洗发液，市场上也有销售。在白首乌数百年的历史中，只有如此少量的产品被开发出来，令人惊讶！发挥白首乌的特点开发出各种产品是今后的发展要求。白首乌具有抗衰老作用、调节免疫力作用、促进毛发生长作用等优异的药理作用，因此作为保健食品与已有的制品相比，服用量很少，即可显现其优异的强药理作用，是非常重要的，是今后所追求的方向。另外，作为医药品的用途也是非常重要的，再有作为化妆品少量的添加即可发挥其优良作用，这也是今后追求的方向。要生产出用少量就能展示其非常优异药理作用的保健食品、医药品、化妆品必须研制出在工业上可以使用的提取方法来提取白首乌中含有的皂甙类但以往一直没有成功。因此，工业上可以使用的简便、廉价、省力、高效而无环境污染的皂甙类提取方法是今后所要求的。
白首乌作为食品的现在的制成品形态有二种，一种是将其根茎部原封不动切成片状的首乌片，另一种是对其根茎部加工精制而成的首乌粉。首乌粉现在的制造方法是将未加工的根茎部加入大量冷水混合粉碎，去掉纤维，再经离心分离后使水和固体部分分开，将固体部分收集起来进行干燥。这种方法与利用其根茎部制造淀粉的一般制造方法相同，基本方法是用冷水冲洗，将冷水中末溶解部分制成产品。这是利用白首乌的根茎部含有大量淀粉物质的特征，进行开发制造的方法。因此，这样制造出来的产品主要成分是淀粉。此制造方法的一个大问题点是在离心分离过程中，废弃掉水的部分，即由于将含水部分废弃掉，白首乌溶于水的成分和不溶解于水或溶解度很小的，比重比水轻的成分等，通过离心分离之后，在水中含有的成分就被排泄掉。这不仅限于离心分离法，用水冲洗制造时也是常见的问题。白首乌中含有的有效成分大部分可溶于水，随着水的废弃而被废弃掉了。与本发明有关联的重要的有效成分皂甙类，对水的溶解性虽然不大，但是作为葡萄糖甙具有界面活性剂的性质，所以与水有混合性，由于水部分被废弃，因而皂甙类大部分被废弃掉。因此，现在的制造方法对水的使用量、使用方法等想了许多办法，设法制造尽可能使其含有大量的多种有效成分的产品。但是减少水的使用量等控制其有效成分流出的方法，却使最终的产品质量降低，也成为一个很大的问题。解决这些问题的有效方法之一就是在大量废弃的水中简单的通过工业规模来提取其中含有的皂甙类，如果提取可行的话，这些皂甙类的再利用也是可行的，例如和现在市场上的产品混合后，生产比以往产品效果更好的新产品或者生产新的保健食品还有医药品、化妆品等方面用途，可以从白首乌中提取的产品形态将会极其广泛。因此，迫切需要一种简便、廉价、高效且实现产业化的能够从水部分提取皂甙类的提取方法。
因提取对象是固体状态或液体状态(例如，水或含水醇的浸析液等)而异，固体状态时，包括制作医药品、化妆品等，一般情况下使用各种溶媒，例如氯仿、乙醇、甲醇、水及它们的混合溶媒等将皂甙类溶解后进行提取。在食品制造中，从安全性观点出发最好使用乙醇、水以及它们的混合溶液。将这些提取物中的溶媒除去，剩下的提取物可以作为产品。一般来说，这些提取物因为含有多种大量的异物，所以一般要进一步进行各种精加工，例如深层次提取溶媒，根据不同溶媒进行分配，利用离子交换树脂进行精制、活性炭处理、活性氧化铝处理等操作。为制造能达到医药类纯度的制品时往往还需要进行例如硅胶、凝胶、离子交换树脂等各种色谱法，以及进一步纯化用的高速液体色谱法，亲和力色谱法等操作。提取对象是液体状态时也有超临界提取等特殊提取方法，但一般来说，水浸析液情况下皂甙类溶解，使用与水分离的有机溶液，例如用已烷、三氯甲烷、醋酸盐、N-丁醇等提取皂甙类，除去溶媒之后，采用上述对象物，在固体状态时的各种精制方法将其提纯，达到其所需的纯度。用含水醇提纯时，在醇含量能够达到与其溶媒分离程度的状态下，同用水提取液采取相同的方法。这些制造方法，在医药品，化妆品的场合是可行的。但在食品的场合，用大豆制造食用油时往往使用己烷，但大多数场合下，从安全性的观点来看，不希望用这些有机溶媒。另外，在医药品、化妆品的场合，处理大量的白首乌水浸析液时，还需要大规模的提取装置、溶液回收装置、使用大量的有机溶媒，制造方法非常复杂，制造成本很高。从而，在工业上迫切需要简便、廉价省力、高效的、有利于环境保护的提取方法。
这样制造出来的皂甙类，含有白首乌中含有的多种皂甙化合物。如前面已记述的，现已验明有7种白首乌的皂甙类化学结构。但是，白首乌中还含有更多的皂甙类。我们认为它们是化学结构尚未确定的新型化合物。也就是说，本发明具有能将有用的白首乌的新型皂甙类制造出来的优秀的特征。
对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于将白首乌的水或含水醇浸析液通过甲基丙烯系合成吸附剂或芳香族(苯乙烯、二乙烯基苯)系合成吸附剂吸附，再用含水40％～100％的含水醇或醇或者丙酮加以解吸洗提处理，将洗提液中的溶媒除去，便能提取白首乌中的皂甙类。
对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法可将白首乌的水或含水率低于40％的含水醇浸析液，吸附在甲基丙烯系合成吸附剂上，用含水40％～100％的醇或醇加以解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法可将白首乌的水或含水率低于20％的含水醇浸析液，吸附在甲基丙烯系合成吸附剂上，用含水80％～100％的醇或醇加以解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法可将白首乌的水或含水率低于20％的含水醇浸析液，脱盐处理后，吸附在甲基丙烯系合成吸附剂上，用含水80％～100％的醇或醇加以解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法可将白首乌的水或含水率低于20％的含水醇浸析液，吸附在芳香族(苯乙烯、二乙烯基苯)系合成吸附剂上，用丙酮对其解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
所述白首乌的水是指制作白首乌的精制粉末时产生大量含有白首乌的皂甙类水浸析液，或者将新鲜的白首乌放在水中悬浊、搅拌、充分浸泡后进行离心分离产生的含有首乌的皂甙类离心分离液。
所述含水醇的浸析液是指采用含水醇对新鲜的白首乌或干燥的白首乌片、粉末进行浸析处理，提取出含有白首乌的皂甙类含水醇浸析液。
上述含水醇或醇包括甲醇、乙醇、丙醇。
食品、医疗、触媒、水处理等化学领域中使用的具有代表性的树脂是离子交换树脂。离子交换树脂中，有强酸性、弱酸性、强碱性、弱碱性、螯合物树脂等。这些离子交换树脂的代表性高分子载体为苯乙烯和二乙烯基苯的共重合体，根据交联度的不同有种类非常多的离子交换树脂，在工业上广泛地使用。而且根据特殊的聚合法，也有的把高分子载体做成多孔性。本发明中，离子交换树脂也可作为辅助性使用，但是有关发明的关键性树脂并不是离子交换树脂。
本发明所使用的合成吸附剂根据不同的高分子载体的化学结构，分为甲基丙烯系及芳香族(苯乙烯·二乙烯基苯)系两种。这些合成吸附剂的基本结构是具有不溶性三维交联结构的高分子化合物，一般来讲，具有多孔性。虽然不具有离子交换基，但具有很大的表面面积，具有主要通过范德瓦耳斯力吸附各种有机化合物的性质。其芳香族系吸附剂通常为X＝H，但为了增强疏水性，也有加入Br等成为芳香族系化合物的。甲基丙烯系合成吸附剂，不含芳香族系化合物，与芳香族系合成吸附剂相比，其高分子载体的极性很高，其性质适合吸附相对极性较高的有机化合物。其结构式为其代表性甲基丙烯系合成吸附剂甲醛系树脂HP2MG的化学结构。丙烯系合成吸附剂是甲基丙烯系的近缘化合物，有时也被称之为甲基丙烯系合成吸附剂。芳香族系合成吸附剂根据芳香环的置换基的有无，为增大表面积进行的特殊处理，细孔分布，粒子直径的不同等。甲基丙烯系合成吸附剂。根据细孔分布，交联度的不同等，市场上有许多种类的合成吸附剂在销售，广泛地被工业上所使用，这些商品根据不同制造厂家而不尽相同，有各种各样商品名称。现例示几个商品名供参考。日本三菱化学株式会社生产的合成吸附剂，作为甲基丙烯系商品，有甲醛系树脂HP10、HP2MG；作为芳香族系商品，有甲醛系树脂HP10、HP20、HP21、HP30、HP40、HP50、作为芳香族系加入疏水基的商品，有氨基粒皂SP205、SP206、SP207作为芳香族来经过高表面积处理的商品，有氨基粒皂SP800、SP825、SP850、SP875，作为粒子直径较小的精密分离用产品，有甲醛系树脂HP20SS氨基粒皂SP20SS等产品，中国杭州争光树脂有限公司生产的SD300、SD301、SD302等为芳香族系合成吸附剂。上海亚东核级树脂有限公司生产的HZ802、HZ803等为芳香族系合成吸附剂。
利用这些合成吸附剂提取、精制、制造白首乌中皂甙类时，含水醇的醇浓度和白首乌的皂甙类的吸附及解吸的关系非常重要。吸附及解吸受到多种因素的影响。例如合成吸附剂的种类不同制造公司的产品的差异、每一制造批次的品质差异、温度、使用溶媒量、吸附方法、吸附时间、解吸方法、解析时间、共存的离子的种类、以及浓度等。本发明者们锐意探讨的结果，已经明确在水中，白首乌的皂甙类可被甲基丙烯系及芳香族系合成吸附剂所吸附。
此外，在[传统的技术及发明打算解决的课题]一项中已作了阐述，但制作白首乌的精制粉末的场合，根据现在的制造方法，白首乌的皂甙在大量的水中含有状态下被废弃。从这种大量的水浸析液中提取皂甙类是本发明的主要成果之一。因此，水浸析液的吸附是十分重要的，这种场合，白首乌的皂甙类被合成吸附剂所吸附。但有时从新鲜的白首乌或干燥的白首乌片、粉末中提取皂甙类。在这种场合下，因为皂甙类对水的溶解度低，为了提高溶解度使用含水醇等进行提取，可以降低溶媒量，提高了提取效率。要进一步搞清楚用高浓度含水醇进行吸附和解吸的条件，就意味着要搞清用水或者低醇浓度来吸附皂甙类的提取条件，这对于在白首乌中抽取、精制、制造皂甙类是非常重要的。当然如我们从文献中获知的那样，用氯仿和甲醇的混合溶媒来进行提取是一般的方法。但这些溶媒在食品方面使用并非是理想的。在医药、化妆品方面，也往往出现残存溶媒的问题，为了完全除去残留溶媒，而且为了不产生公害(环境污染)，需要一些设备，需要各种类型的大规模装置从而造成工业上的不利因素。因而用含水醇，特别是含水乙醇进行提取，从环境的观点出发最为有利，加之从安全性、经济性等方面考虑，在工业化方面是理想的。
使用甲基丙烯系合成吸附剂的场合，用含水40％醇，虽然吸附不彻底但有相当数量的皂甙类被吸附，所以，宁可吸附得不彻底，但排除了杂质，提高了纯度，将主要视线着眼于这一点时，形成了我们所推荐的吸附条件。这种条件下，被吸附的皂甙类，在40～100％更高的醇浓度的含水醇或醇中，从合成吸附剂进行解吸，将这些洗提液收集起来，将溶媒除去，即可制造出白首乌的皂甙类。这里表达为用100％的醇进行洗提是为了叙述方便起见。换句话说，这种场合下使用的醇是无水醇，但实际上，在吸附皂甙类的合成吸附剂中，或多或少会含有水份，所以并非文字中所描述的100％。本说明书中的100％甲醇、丙醇等的表达也是同样的。
在使用芳香族(苯乙烯·二乙烯基苯)系合成吸附剂的场合，白首乌的皂甙类比用甲基丙烯系合成吸附剂更强的吸附力吸附在合成吸附剂上。在洗提时，需要浓度更高的醇，即让含水率低于20％的含水醇的浸析液，吸附在芳香族系合成吸附剂上，要用含水80～100％醇或者醇对其进行洗提，将这些洗提液收集起来，除去溶媒之后，即可制造出白首乌的皂甙类。使用这些高浓度含水醇可以使白首乌中的皂甙类在提取时使用的溶媒量大量的减少，也是工业上的一大长处所在。
本发明者们研讨的结果，在用芳香族系合成吸附剂时，已判明白首乌的皂甙类的吸附受到了共存的离子的影响。即为了使白首乌的皂甙类吸附在合成吸附剂上更加彻底，也就是为了在工业上更加有效的提取，在除去共存的离子的状态下，使其吸附在合成吸附剂上更为有利。脱盐时可以采用离子交换树脂处理。电透析等工业上常用的方法。
本发明者们研究的结果，在利用芳香族系合成吸附剂的场合，已判明用含水醇或醇，解吸白首乌的皂甙类的会产生很强的尾部延长作用。即从合成吸附剂中解吸出来会慢慢地延长时间，这种情况将使皂甙类的回收率减低，使用的溶媒量增加(其结果必然要使用更大规模的各种装置)，使合成吸附剂的寿命缩短等，派生出许多不利于工业化生产的问题。为解决这些问题，丙酮的效果是明显的，即通过使用丙酮使其能够迅速从合成吸附剂中解吸，从而解决了工业上的一个问题点。此时使用的丙酮，在没有障碍的范围内，当然容许含有水、乙醇等。
甲基丙烯系合成吸附剂和芳香族系合成吸附剂，对白首乌的皂甙类进行吸附、解吸的作用，以及对白首乌的皂甙类以外的化合物进行吸附及解吸的作用，两者之间有着很大的差异。因而将二者的合成吸附剂进行组合使用，便可以对更高纯度的皂甙类进行提取、精制、制造，这一点是显而易见的。
如上面所述，使用甲基丙稀系合成吸附剂或芳香族类合成吸附剂，从白首乌的水或含水醇的浸析液中提取、精制、制造白首乌的皂甙类，这是以前完全未报导过的新型制造法。
以下的实施例记述皂甙类所采用的定量法。
1.样品根据文献(J.Chen，Z.Zhang and J.Zhou，Acta Bot，Yunnanica 12，197，1990)中的方法，从新鲜的白首乌中单独分离出Wilfoside C1N，C3N，C1G，K1N。以下的实例中，主要将Wilfoside C1N当作标品用。
2.定量法使用高效液体色谱法(HPLC，high performance liquid chromatography；Waters公司，2487型)进行定量。吸附塔为Nova-Pack C18(3.9×150mm)色层分析溶媒为82.5％甲醇(甲醇∶水＝82.5∶17.5)，流速为1mL/min，测量用UV，免检物注入量为5mL，进行了分析。用Wilfoside C1N、K1N标品，制作了标品浓度和面积的标准曲线。两种皂甙的标准曲线没有太大差异。因此白首乌虽含有多种皂甙，但假定这些标准曲线相同，计算出皂甙类的总含量。每个实施例都进行了标准曲线的修改。
实施例1将去皮后的新鲜白首乌(25g)放在水中(250mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)。将离心分离的上清液(230mL)分为6、50、85、85mL四份。6mL原样浓缩干燥用2mL的乙醇，对可溶部进行分析。50mL浓缩干燥后测定其重量时，为310mg。85mL原封不动地通过甲醛系树脂HP2MG(甲基丙烯系合成吸附剂、三菱化学株式会社制、10mL)的吸附塔进行冲洗，变成120mL，再将其中的6mL进行浓缩干燥，使用2mL的乙醇对可溶部进行HPLC分析。然后用30mL乙醇洗提2次。分别原封不动地进行HPLC分析。另外的85mL原封不动地通过甲醛系树脂HP2MG(10mL)吸附塔进行充分冲洗。将通过液和水洗液合并，浓缩干燥后用干燥机进行通宵干燥。其重量为490mg，然后用0.1m Nacl，30mL进行试洗提。然后充分水洗，继续用乙醇(30mL)进行洗提，对乙醇洗提划分进行HPLC分析，推算出0.1m，Nacl的洗提率。实施例1的结果如下。皂甙类，以Wilfoside C1N为基准根据HPLC分析的结果进行了计算。
白首乌的水浸析物大约37mg(吸附到甲醛系树脂HP2MG(10mL)上。
计算出白首乌的皂甙类吸附在HP2MG上的吸附率。其结果为85mL中含有Wilfoside C1N为2.1mg几乎100％被吸附。第一次乙醇洗提量为2.0mg。洗提率约为100％，第二次乙醇洗提率约为3％。
用0.1M，Nacl时几乎未洗提出。
甲醛系树脂HP2MG吸附的物质中，Wilfoside C1N的含量为5.7％左右。甲醛系树脂HP2MG吸附的物质中，总皂甙量推算为树脂吸附物约15.9％。
以Wilfoside C1N为基准推算了用甲醛系树脂HP2MG处理后，皂甙类的浓缩倍率，皂甙类以外物质的去除率。从新鲜白首乌干物重量浓缩了约250倍，从新鲜白首乌水样提取物浓缩了约14倍。新鲜白首乌水样提取物的皂甙类以外的物质约93％被去除掉。
实施例2将去皮后的新鲜白首乌(15g)放在水(150mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)，将离心分离的上清液(134mL)分成6mL、128mL两份。6mL原样浓缩干燥，用2mL的乙醇对可溶部进行HPLC分析。128mL原样通过甲醛系树脂HP2MG(10mL)吸附塔充分水洗后，使用含水50％、70％、90％乙醇以及100％乙醇(各30mL)进行洗提，而且分别进行HPLC分析。实施例2的结果如以下所记。皂甙类的洗提率以Wilfoside C1N为基准，根据HPLC分析结果计算，用含水50％乙醇的洗提率为37％，用含水70％乙醇洗提率为46％，用含水90％乙醇洗提率为15％，用100％乙醇洗提率为4％，合计为102％。
实施例3与实施例2一样使用含水50％、70％、90％的乙醇及100％乙醇进行了洗提，其结果，含水乙醇同乙醇时没有多大差别。同样可以采用甲醇、丙醇进行洗提，将洗提液浓缩、干燥、脱除溶媒，即可以从白首乌中获取皂甙类。
实施例4将去皮新鲜白首乌(10g)放在水(100mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)。将离心分离的上清液(88mL)通过强碱性离子交换树脂(三菱化学株式会社制甲醛系树脂SA-11A、OH-型10mL)吸附塔用20mL的水冲洗，将通过液和水洗液合并，再通过强酸性离子交换树脂(三菱化学株式会社制甲醛系树脂SK＝104H-型10mL)吸附塔，用20mL的水冲洗。再将通过溢和水洗液合并，通过HP20(芳香族系合成吸附剂、三菱株式会社、20mL)吸附塔进行水洗。将通过液和水洗液(200mL)合并，取其中6mL浓缩干燥后，用2mL的乙醇对可溶部进行了HPLC分析。再将50％的乙醇(60mL)通过甲醛系树脂HP20吸附塔原样进行HPLC分析。接下来用乙醇(60mL)进行洗提，原样进行HPLC分析。接下来用丙酮(40mL)洗提，除去溶媒后，用2mL的乙醇对可溶部进行HPLC分析。实施例4的HPLC分析结果可总结为甲醛树脂HP20吸附塔的通过液及水洗液中，没有检测出皂甙类，皂甙类几乎全部被HP20所吸附。
50％的乙醇洗提液中，没有检测出皂甙类，没有被洗提出。
乙醇的洗提液中，若以Wilfoside C1N为基准进行计算，约有50％的皂甙类被洗提回收。
用丙酮可以使皂甙类全部回收。
实施例5将去皮的新鲜白首乌(30g)放在水(300mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)。在离心分离的上清液中加入少量水后达到300mL。各取100mL，分别通过甲醛系树脂HP20(4mL)氨基粒皂SP825芳香族系合成吸附剂(三菱化学株式会社制4mL)、甲醛系树脂HP2MG(4mL)。将各自的通过液(约100mL)中取6mL经浓缩干燥后，用2mL乙醇对可溶部进行HPLC分析。然后，在各自的吸附塔用乙醇50mL进行洗提，原封不动进行HPLC分析。实施例5的结果如下皂甙类以WilfosideC1N为基准根据HPLC分析的结果计算如下白首乌的皂甙类在各种树脂上的吸附率分别为甲醛系树脂HP2MG(约93％)，甲醛系树脂HP20(约75％)，氨基粒皂SP825(约60％)，吸附能力的顺序分别为甲醛系树脂HP2MG)甲醛系树脂HP20)，氨基粒皂SP825。
乙醇的洗提图形显示甲醛系树脂HP2MG是几乎没有尾部延长，而甲醛系树脂HP20(约75％)、氨基粒皂SP825发现有很大程度的尾部延长。
实施例6将去皮的新鲜白首乌(22g)放在水(220mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)。将离心分离的上清液(205mL)分成25、90、90mL三份。25mL原样浓缩干燥成6mL后用2mL乙醇对可溶部进行HPLC分析。90mL原样通过甲醛系树脂HP20(芳香族系合成吸附剂、三菱化学株式会社制、10L)吸附塔水洗后变成150mL，将其中的10mL浓缩干燥，用2mL的乙醇对可溶部进行HPLC分析。另外的90mL通过强碱性离子交换树脂(三菱化学株式会社制、甲醛系树脂SA-11A、OH-型，10mL)吸附塔用90mL的水冲洗。将通过液和水洗液合并，通过强酸性离子交换树脂(三菱化学株式会社制甲醛系树脂SK-104、H+型、10mL)，吸附塔并用水冲洗。将通过液和水洗液合并变成200mL，将其中13mL浓缩干燥，用2mL的乙醇，对可溶部进行HPLC分析，洗提操作如下用离子交换树脂处理的场合，用1M Nacl(30mL)进行洗提，并充分用水冲洗(全部液量，200mL)接着，用乙醇(30mL)进行洗提。对乙醇洗提划分进行HPLC分析，推算出1M Nacl的洗提率。未进行离子交换树脂处理的场合，用乙醇(30mL)洗提2次，进行HPLC分析。实施例6的结果如下。皂甙类以Wilfoside C1N为基准根据HPLC分析的结果计算如下离子交换树脂未处理的场合甲醇系树脂HP20的吸附率为81.2％，第一次乙醇洗提率为75.3％，第二次乙醇洗提率为4.2％，合计为79.5％。
离子交换树脂处理的场合甲醛系树脂HP20的吸附率几乎为100％，1M，Nacl洗提率约为32％(推算)，乙醇的洗提率为48％。
实施例7将去皮后新鲜的白首乌(40g)放在水(400mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)。将离心分离的上清液(350mL)分成6mL，86mL×4份，6mL原样浓缩干燥，用2mL乙醇对可溶部进行HPLC分析，86mL×4分别通过甲醛系树脂HP2MG(10mL)吸附塔充分进行水洗后，也用含水20％、30％、40％、50％的乙醇各30mL进行洗提，而后分别浓缩干燥，用2mL的乙醇对可溶部进行HPLG分析。实施例7的结果如下，皂甙类以Wilfoside C1N为基准根据HPLC分析结果进行了计算。含水20％乙醇时，几乎没有被洗提出；含水30％乙醇时有百分之几洗提出；含水40％乙醇时约提洗出18％；含水50％乙醇时约洗提出40％。
实施例8将去皮后新鲜白首乌(50g)放在水(500mL)中悬浊、搅拌、充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)，将离心分离的上清液(430Ml)通过强碱性离子交换树脂(三菱化学株式会社甲醛系树脂SA-11A、OH-型、50mL)吸附塔用100mL的水冲洗。将通过液和水洗液合并，通过强酸性离子交换树脂(三菱化学株式会社甲醛系树脂SK-104、H+型、50mL)吸附塔用100mL的水冲洗，将通过液和水洗液合并，加水至700mL，分成6mL、约139mL×4份。6mL原样浓缩干燥后用2mL的乙醇对可溶部进行HPLC分析；约139mL×4，分别通过甲醛系树脂HP20(10mL)吸附塔，充分经过水洗后，用含水50％、70％、80％、90％乙醇以及100％乙醇各30mL进行洗提，分别进行浓缩干燥，用2mL乙醇对可溶部进行HPLC分析。实施例8的结果如以下，皂甙类以Wilfoside C1N为基准根据HPLC分析的结果进行了计算。含水50％、70％乙醇时几乎未发现洗提出。含水80％乙醇时发现约33％被洗提出，含水90％乙醇时约洗提出75％，含水100％乙醇时约洗提出90％。
实施例9与实施例8相同，用含水70％、90％乙醇及100％乙醇进行洗提，其结果，含水乙醇及乙醇时的洗提率没有多大差别。
实施例10将去皮后新鲜白首乌(10g)放在含水70％乙醇(100mL)中进行悬浊、搅拌充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)。将离心分离后的上清液(90mL)通过强碱性离子交换树脂(三菱化学株式会社Diaion SA-11A、OH-型，10mL)吸附塔，用20mL水冲洗，将通过液和水洗液合并，通过强酸性离子交换树脂(三菱化学株式会社Diaion SK-104、H+型、10mL)吸附塔用20mL水冲洗，将通过液和水洗液合并，加水至200mL，分成6mL和140mL两分，6mL原样浓缩干燥用2mL乙醇，对可溶部进行HPLC分析。约140mL通过甲醛系树脂HP20(10mL)吸附塔，充分水洗，用30mL乙醇洗提，分别浓缩干固用2mL的乙醇进行洗提，对可溶部进行HPLC分析，皂甙类以Wilfoside C1N为基准根据HPLC分析的结果进行计算，约有78％的皂甙被提取出来。
实施例11将去皮后新鲜白首乌(100g)放在水(1000mL)中进行悬浊、搅拌和充分浸泡后，进行离心分离(3000rpm)，将离心分离后的上清液(900mL)分成6mL和894mL两份。6mL原样浓缩干燥后用2mL乙醇对可溶部进行了HPLC分析；894mL通过甲醛系树脂HP2MG(甲基丙烯系合成吸附剂、三菱化学株式会社制、30mL)吸附塔充分经过水洗后，再用含水20％乙醇充分冲洗。接着，用含水90％乙醇进行洗提，将洗提液浓缩，便产生不溶物质。将此不溶物用大量水边冲洗边过滤，加以收集，水冲洗后，用干燥机进行通宵干燥后，得到237.6mg，对本品进行了HPLC分析。皂甙类以Wilfoside C1N为基准根据HPLC分析的结果进行计算。结果，本品的皂甙类含量为85.3％。
实施例12将制作白首乌的精制粉末时产生的大量含有白首乌的皂甙类水浸析液(白首乌的水)通过装有甲基丙烯系合成吸附剂或芳香族(苯乙烯、二乙烯基苯)系合成吸附剂吸附塔吸附，再用含水40％～100％的含水醇或者丙酮加以解吸冲洗吸附塔，将洗提液经浓缩干燥除去溶媒，即可从白首乌的水中提取皂甙类。
实施例13采用含水醇对新鲜的白首乌或干燥的白首乌片、粉末进行浸析处理，提取出含有白首乌的皂甙类含水醇浸析液，将上述含有白首乌的皂甙类含水醇浸析液通过装有甲基丙烯系合成吸附剂或芳香族(苯乙烯、二乙烯基苯)系合成吸附剂吸附塔吸附，再用含水40％～100％的含水醇或者丙酮加以解吸冲洗吸附塔，将洗提液经浓缩干燥除去溶媒，即可从白首乌的水中提取皂甙类。
发明的效果综上所述，根据本发明从白首乌的水或者含水醇的浸析液中提取白首乌的皂甙类可以简便、廉价、省力、高效率，而且能对环境无污染地进行提取和精制，能够提供在工业上最合适的白首乌皂甙类的制造方法。
附合成吸附剂的基本结构的化学构造式，即合成吸附剂是具有如下所示基本结构的有着三维交联结构的高分子化合物。
合成吸附剂化学结构如下1、芳香族系合成吸附剂 2、甲基丙烯系合成吸附剂
权利要求
1.一种对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于将白首乌的水或含水醇浸析液通过甲基丙烯系合成吸附剂或芳香族(苯乙烯、二乙烯基苯)系合成吸附剂吸附，再用含水40％～100％的含水醇或醇或者丙酮加以解吸洗提处理，将洗提液中的溶媒除去，便能提取白首乌中的皂甙类。
2.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于将白首乌的水或含水率低于40％的含水醇浸析液，吸附在甲基丙烯系合成吸附剂上，用含水40％～100％的醇或醇加以解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
3.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于将白首乌的水或含水率低于20％的含水醇浸析液，吸附在甲基丙烯系合成吸附剂上，用含水80％～100％的醇或醇加以解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
4.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于将白首乌的水或含水率低于20％的含水醇浸析液，脱盐处理后，吸附在甲基丙烯系合成吸附剂上，用含水80％～100％的醇或醇加以解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
5.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于将白首乌的水或含水率低于20％的含水醇浸析液，吸附在芳香族(苯乙烯、二乙烯基苯)系合成吸附剂上，用丙酮对其解吸洗提，去除溶媒，从白首乌中获取皂甙类。
6.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于所述白首乌的水是指制作白首乌的精制粉末时产生大量含有白首乌的皂甙类水浸析液，或者将新鲜的白首乌放在水中悬浊、搅拌、充分浸泡后进行离心分离产生的含有首乌的皂甙类离心分离液。
7.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于所述含水醇的浸析液是指采用含水醇对新鲜的白首乌或干燥的白首乌片、粉末进行浸析处理，提取出含有白首乌的皂甙类含水醇浸析液。
8.根据权利要求1所述的对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法，其特征在于含水醇或醇包括甲醇、乙醇、丙醇。
全文摘要
本发明对白首乌中含有的皂甙类进行提取生产的方法涉及的是关于对存在于水或含水醇中的白首乌的皂甙类进行提取、精制、生产的方法。其特征在于将白首乌的水或含水醇浸析液通过甲基丙烯系合成吸附剂或芳香族系合成吸附剂吸附，再用含水40％～100％的含水醇或醇或者丙酮加以解吸洗提处理，将洗提液中的溶媒除去，便能提取白首乌中的皂甙类。所述白首乌的水是指制作白首乌的精制粉末时产生大量含有白首乌的皂甙类水浸析液，或者将新鲜的白首乌放在水中悬浊、搅拌、充分浸泡后进行离心分离产生的含有首乌的皂甙类离心分离液。所述含水醇的浸析液是指采用含水醇对新鲜的白首乌或干燥的白首乌片、粉末进行浸析处理，提取出含有白首乌的皂甙类含水醇浸析液。含水醇或醇包括甲醇、乙醇、丙醇。
文档编号C07J7/00GK1458162SQ03131868
公开日2003年11月26日 申请日期2003年6月12日 优先权日2003年6月12日
发明者江连洋治, 吴洪生 申请人:盐城市金昉实业有限公司