可用作抗肿瘤剂的肉桂酸、苯丙炔酸和苯丙酸衍生物的制作方法

专利名称：：可用作抗肿瘤剂的肉桂酸、苯丙炔酸和苯丙酸衍生物的制作方法可用作抗肿瘤剂的肉桂酸、苯丙炔酸和苯丙酸衍生物发明领域本发明涉及具有抗肿瘤活性的肉桂酸和苯丙炔酸和苯丙酸衍生物。
背景技术：
：目前，肿瘤的治疗通过外科手术干预、放射治疗和化疗来实现。后者的缺点主要是由于细胞毒性药物的毒性(它通常不限于癌细胞)和癌细胞获得的对有些最广泛使用的药物的抗性(这会降低治疗的长期功效)。通过手术消除原发肿瘤并不总是可能的，并且在任何情况下都不会阻止转移性最强的肿瘤(例如乳腺癌或黑素瘤)侵入其它靶器官。已经证实，转移性肿瘤的治疗不可能完全治愈患者；因此，现在将细胞毒性药物治疗视作姑息性的和延长生命的方法，而不是治愈方法。使用具有低毒性的药物的慢性治疗是优选的，同时靶向对疾病进展的控制。在最近几年中，癌症药物开发已经从常规的细胞毒性化疗剂转移至更为基于机理的靶向阻止肿瘤生长的共同目标的方案。染色质研究的快速发展和对外遗传调控的理解，已经提供了癌症干预的许多潜在扭物。组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)已经广泛地涉入生长和转录控制，使用小分子抑制HDAC活性，会造成肿瘤细胞的细胞凋亡。现在，已知组蛋白脱乙酰基酶抑制剂是培养的多种转化细胞和携带肿瘤的动物中生长停滞、分化、或程序性细胞死亡的有效诱导物(Marks，P.A.，CurrentOpinionsinOncology,2001，Nov.13(6):477-83;Marks,P.，Nat.Rev.Cancer2001Dec.1(3):194-202)。另一方面，如之前所预期的，另一个非常重要的且敏锐地感知的肿瘤治疗的方面是，治疗的肿瘤细胞对使用的药物发生抗性。形成抗药性的细胞通常能抗许多其它抗肿瘤药物的作用，甚至这些药物是化学上不相关的或以不同的作用机理起作用。这类抗性称作多药抗性(MDR)(A腿.Rev.Med1991,42:277-286;DrugsoftheFuture1997,22:653-660)。多种肿瘤，例如肾上腺皮质、结肠、肾和空肠的肿瘤和肝癌，在刚开始抗肺瘤药物治疗时，就表现出抗药性(Barrows，L.R.Anti-neoplasticandImmunoactiveDrugs,1995;75;1236-1262)。在其它情况下，肿瘤细胞以与细菌获得对抗生素的抗性相类似的方式获得抗性。这类抗性具有遗传的或外遗传的改变；这些改变使得子代细胞能在存在抗肿瘤剂的环境中增殖。无论抗性的原因是什么，都会导致抗肿瘤治疗长期使用时无效。多项研究提示，人肿瘤中一种常见形式的抗药性源自糖蛋白P的存在(Ann.Med.Interna1997Mar;14(3):145-53;ActaScientVenez.2000;51(1):45-52)。该糖蛋白起能量依赖型膜泵的作用，其将抗肿瘤药物从细胞内部排出，从而降低药物的细胞浓度。化学敏化剂是51起肿瘤细胞或机体的变化的化合物，且有利于增强所使用的抗肿瘤剂的治疗功效。已知能调控糖蛋白P的功能的化学敏化剂包括钙通道阻滞剂(维拉帕米)，钙调蛋白抑制剂(三氟拉嗪)，吲哚生物碱(利舍平)，向溶酶体剂(chloroquin)，类固醇(孕酮)，曲帕拉醇类似物(他莫昔芬)，去污剂(聚氧乙烯蓖麻油)，和环肽抗生素(环孢菌素)(Cancer,Principles&PracticeofOncology,1993;4thed.，J.B.Uppi扁ttCo.，Philadephia，Pa.，2661-2664)。
发明内容我们已经发现，一类肉桂酸、苯丙炔酸和苯丙酸衍生物具有这样的抗肿瘤、抗转移和化学敏化活性所需的必要条件。因此，本发明的主要目的是，下面式(I)化合物，它们是可以用作抗肿瘤剂,抗转移剂和化学敏化剂的试剂.本发明涉及式(I)化合物:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>[式I]其中n是0或1;-当n是O时，A是单价基团，且选自0H，NH-0G，基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中G和G'是相同的或不同的，是H，糖基或乙酰基；-当n是1时，A是选自下述的二价基团NH-S-S-NH和CH2-S-S-CH2;Y是选自下述的基团HC=CH,FC=CF，FC=CH，CH-CF，CH广CH2和R是基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>其中X是0，NH;R是基团Z选自:>(C广Cu)芳基或被硝基、g素、(d-Cj烷氧基羰基、羟基或氨基取代的(C6-C12)芳基；Xd-。烷基，(C广C4)链烯基，(C广C4)炔基；XC6-d2)芳基-(CH丄,，其中芳基被硝基、卣素、(d-C4)烷氧基羰基、羟基或氨基取代；其中n、0-3;XC广d2)芳基-C0，其中芳基被硝基、囟素、(d-。)烷氧基羰基、羟基、氨基取代；和XC广C6)杂环基-(C「CJ烷基，其中杂环的至少一个CH2被0、S、NH替代；Ri选自>H;>NH2;Xd-")烷基，(C广C4)链烯基，(C广C4)炔基；>NH-(C2-C4)炔基；>N02;>(C2-C4)炔基；>卤素；>(C6-C12)芳基；XC6-d2)芳基-(C广C4)亚炔基；和>(C3-C6)杂环基-(C2-C4)亚炔基，其中杂环的至少一个C&被0、S、NH替代；或R和与芳族基团一起形成具有下式的多环基团<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>R2选自>(c6-c12)芳基或被硝基、卣素、(d-。烷氧基羰基、羟基或氨基取代的(C6-C12)芳基；XG广。)坑基，(G2-")链彿基，((:2一(:4:)块基；XC6-d2)芳基-(CH上,，其中芳基被硝基、面素、(d-C4)烷氧基羰基、羟基或氨基取代，其中n"=0-3;XC广d2)芳基-C0，其中芳基被硝基、卣素、(d-a烷氧基羰基、羟基、氨基取代；和XC广C6)杂环基-(C「C》亚烷基，其中杂环的至少一个CH2被0、S、NH替代；&选自>H;>(G广G4)坑基，(G2—GO链彿基；C4)烷基-NH;>(d-C4)-烷基-(C3-C6)-亚杂环基，其中杂环的至少一个CH2被0、S、NH替代;>("2)芳基；和XC广C6)杂芳基，其中杂环的至少一个CH被O、S、NH替代；>H;>(d-C4)烷基；>(C6-C12)芳基；>(C6-C12)芳基-(d-C4)亚炔基；XC广C4)烷酰基；和>-(C6-C12)芳基-CO;Rs选自>H;>线性或分支的(d-G)烷基；>线性或分支的(C厂C4)链烯基；和X)R6，其中R6是H，(CrCJ烷基，曱磺酰基，曱苯磺酰基，(C「C4)本发明也包含式(I)化合物的互变异构体，几何异构体，旋光形式如对映体、非对映体和外消旋形式，以及药学可接受的盐。优选的式(I)的药学可接受的盐是与药学可接受的酸形成的酸加成盐，如盐酸盐，氢溴酸盐，硫酸盐或重硫酸盐，磷酸盐或磷酸氢盐乙酸盐，苯甲酸盐，琥珀酸盐，延胡索酸盐，马来酸盐，乳酸盐，柠檬酸盐，酒石酸盐，葡萄糖酸盐，曱磺酸盐，苯磺酸盐，和对曱苯磺酸盐。在本发明的框架内，线性或分支的(C「C4)烷基的实例，应当理解为包含甲基，乙基，丙基和丁基和它们的可能的异构体，例如，异丙基异丁基，和叔丁基。线性或分支的(C广C4)链烯基的实例是亚曱基，亚乙基，乙烯基，烯丙基，炔丙基，和丁烯基，其中碳-碳双键可以位于亚烷基链的多种可能的位置，所述链也可以在允许的异构现象的背景下是分支的。(C6-C12)芳基或(C6-C12)芳基-(C「C4)烷基的实例是苯基，1-或2-萘基，蒽基，节基，2-苯基乙基，1-苯基乙基，3-苯基丙基，2-蒽基丙基，1-蒽基丙基，萘基甲基，2-萘基乙基，l-萘基乙基，3-萘基丙基，2-萘基丙基，l-萘基丙基。本文使用的术语"(C3-C6)杂环"或术语"(C3-C6)杂环基"指单价3-6元非芳族环，其含有一个或多个独立地选自S、0、或N的杂原子取代，且具有0-5不饱和度。本文使用的"杂环"的实例包括、但不限于，四氢呋喃基，吡喃基，1，4-二喁烷基，1，3-二噁烷基，哌啶基，吡咯烷基，四氢硫代吡喃基，四氢噻吩基，等。本文使用的术语"(C3-。亚杂环基"指二价3-6元非芳族杂环基团，其含有一个或多个独立地选自S、0、或N的杂原子，且具有0-5不饱和度。本文使用的"亚杂环基"的实例包括、但不限于，四氢呋喃-2，5-二基，吡喃-2，4-二基，1，4-二喁烷-2，3-二基，1，3-二喁烷-2，4-二基，哌啶-2，4-二基，哌啶-1，4-二基，吡咯烷-l，3-二基，等。卤素是指氟、氯、溴和碘。糖基残基的实例是6-D-半乳糖基和6-D-葡萄糖基。根据独立优选的本发明实施方案，A是OH或NH-0G，其中G是H;Y是基团HC-CH;Ri，R3，R4和Rs是H;112选自H;C广Cu芳基；(V"Cu芳基(CH丄，其中芳基被硝基、g素、d-C4烷氧基羰基取代；CV"Cn芳基-C0，C2-。杂环-烷基，其中杂环的至少一个CH2被NH替代；且n是2。更具体地，式(I)化合物可以作为相对于R3位置的顺式-(Z-)或反式(^-)异构体存在。所有这些化合物都包含在本发明中。此外，根据基团Y的含义，本发明的化合物可以作为非对映异构体(顺式或反式，E或Z)或其混合物存在。所有这些化合物都包含在本发明中。下面是一些最优选的根据本发明的化合物羟基-3-(4-U(烯丙氧基)亚氨基]甲基}苯基)丙烯酰胺(ST2984);(2力-N-羟基-3-(4-[(苯氧基亚氨基)曱基]苯基}丙烯酰胺(ST2985);(2劢-N-羟基-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙烯酰胺(ST2987);(2^)-N-羟基-3-(4-[(將基)甲基]苯基}丙烯酰胺(ST2983);(2^)-N-羟基-3-[4-({[(五氟节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]-丙烯酰胺(ST2986);(2^-N-羟基-3-[4-({[(4-甲氧羰基节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]-丙烯酰胺(ST3049);(2^)-N-羟基-3-{4-[(2-吗啉-4-基乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}—丙烯酰胺(ST3050);(2^)-3-(4-{[(节氧基)亚氨基]甲基}苯基)-萨羟基丙烯酰胺(ST2840);(23-^羟基-3-(4-{[(4-氯苯甲酰基)亚联氨基]-甲基}苯基)丙烯酰胺(ST2888);(2E)-N-(2-氨基苯基)-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]-丙烯酰胺(ST3070);(2￡)-A^羟基-3-(1H-吲咮-5-基)丙烯酰胺(ST2880);(2》-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}甲基)苯基]丙烯酸(ST3075);(2i)-3-(4-{[(千氧基)亚氨基]曱基}苯基)丙烯酸(ST3076);(2^)-N-羟基-3-{3-[(2-吗啉-4-基乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}—丙烯酰胺盐酸盐(ST3576);N-羟基-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙酰胺(ST3330);N-羟基-3-{4-[(E)-{[(4-硝基爷基)氧]亚氨基}曱基]苯基}丙-2-炔酰胺(ST3618);(2历-N-(2-氨基-苯基)-3-{4-[(2-吗啉-4-基-乙氧基'亚氨基)甲基]-苯基}-丙烯酰胺盐酸盐(ST3573)和(2^)-N-巯基-3-{4-[(4-硝基-节氧基亚氨基)-甲基]-苯基}-丙烯酰胺(ST3605)。得到的实验结果(记载在标题为"实施例"的部分中)证实，单独的和与其它已知的抗肿瘤药物相组合的式(I)化合物，是可用于治疗肿瘤的试剂。本文所述的本发明的另一个目的是，通式(I)的化合物和它们在医药领域的应用。本文所述的本发明的另一个目的是，药物组合物，其含有作为活性成分的式(I)化合物和至少一种药学可接受的赋形剂和/或稀释剂。本文所述的本发明的另一个目的是，通式(I)的化合物和它们的制备方法。本文所述的本发明的另一个目的是，含有式(I)化合物作为活性成分的用于治疗肿瘤病状的药物组合物，其中所述肿瘤选自肉瘤，癌，类癌，骨肿瘤，神经内分泌肿瘤，淋巴系白血病，急性早幼粒细胞白血病，髓细胞性白血病，单核细胞白血病，巨核细胞白血病和霍奇金病。本文所述的本发明的另一个目的是，含有式(I)化合物作为活性成分的用于治疗肿瘤病状的药物组合物，其中所述肿瘤已经表现出对先前用于其治疗的抗生素的抗药性，其中所述式(I)化合物会对所述抗药肿瘤产生化学敏化作用。本文所述的本发明的另一个目的是药物组合物，其含有作为活性成分的式(I)化合物，与一种或多种已知的抗肺瘤剂相组合，其中所述抗肿瘤化合物选自烷化剂，拓朴异构酶抑制剂，抗微管蛋白剂，嵌入化合物，抗代谢物，天然产物例如长春花生物碱，鬼臼乙叉甙，抗生素，酶，紫杉烷类，和细胞分化化合物。在细胞分化抗肿瘤剂中，优选的试剂是全反式维甲酸。本发明的另一个目的是，制备任一种上述药物组合物的方法，其包括混合式(I)化合物和合适的赋形剂和/或稀释剂。本文所述的本发明的另一个目的是，式(I)化合物在制备用于治疗肺瘤病状的药物中的应用。本文所述的本发明的另一个目的是，式(I)化合物在制备用于治疗肿瘤病状的药物中的应用，其中所述肿瘤已经表现出对先前用于其治疗的抗肿瘤药物的抗药性，其中所述式(I)化合物会对所述抗药肿瘤产生化学敏化作用。本文所述的本发明的另一个目的是，式(I)化合物与一种或多种已知的抗肿瘤剂相组合在制备用于治疗肿瘤病状的药物中的应用。本文所述的本发明的另一个目的是，式(I)化合物与全反式维甲酸相组合在制备用于治疗急性早幼粒细胞白血病的药物中的应用。本发明的另一个目的是，治疗遭受肿瘤病状的哺乳动物的方法，其包括施用治疗有效量的式(I)化合物。"治疗有效量"是能在治疗对象中有效地达到医学上希望的结果的量。药物组合物可以含有合适的药学上可接受的载体、适合施用给动物的生物相容的介质(例如，生理盐水)，可选地包含有助于将活性化合物加工成可以药用的制剂的辅料(如赋形剂，稳定剂或稀释剂)。可以以任何可接受的方式配制药物组合物，以满足给药模式的需要。在文献中公开了用于药物递送的生物材料和其它聚合物的使用，以及验证特定给药模式的不同技术和模型。修饰本发明的化合物来提高血脑屏障的穿透也是有用的。本领域技术人员可以使用和确定任何被接受的给药模式。例如，给药可以是通过多种肠胃外途径，例如皮下的、静脉内的、真皮内的、肌肉内的、腹膜内的、鼻内的、透过皮肤的、经口的、或含服的途径。肠胃外给药可以是通过快速推注或通过随时间逐渐灌注。肠胃外给药制剂包括无菌的含水或不含水溶液、悬浮液、和乳状液，其可以含有本领域已知的助剂或赋形剂，且可以根据常规方法制备。另外，可以施用作为适当的油性注射悬浮液的活性化合物悬浮液。合适的亲脂溶剂或介质包括脂肪油，例如，芝麻油，或合成的脂肪酸酯，例如，油酸乙酯或甘油三酯。可以含有增加悬浮液粘度的物质的含水注射悬浮液包括，例如，羧曱基纤维素钠，山梨醇，和/或葡聚糖。任选地，悬浮液也可以含有稳定剂。药物组合物包括适合注射给药的溶液，且含有约0.01-99%、优选约20-75%的活性化合物以及赋形剂。可以直肠给药的组合物包括栓剂。应当理解，给药剂量取决于受体的年龄、性别、健康和体重，并行治疗(如果存在的话)的类型，治疗频率，和希望的效果的性质。剂量可以为单个受试者定制，如本领域技术人员所理解的和可确定的。可以通过多次剂量或单次剂量，施用每次治疗所需的总剂量。本发明的药物组合物可以单独施用，或与针对该病症或针对该病症的其它症状的其它治疗剂联合施用。通常，活性成分的日剂量是0.01-100毫克/千克体重。本发明的化合物可以在药学上可接受的载体(例如生理盐水)中静脉内地施用给患者。可以使用细胞内递送肽的标准方法，例如通过脂质体递送。这样的方法是本领域普通技术人员众所周知的。本发明的制剂可用于肠胃外给药，例如静脉内的、皮下的、肌肉内的、和腹膜内的给药。如医学领域众所周知的，任一位患者的剂量取决于许多因素，包括患者的大小，体表面积，年龄，待施用的特定化合物，性别，给药时间和途径，一般健康，和同时施用的其它药物。在本文引用的所有文献整个通过参考并入本文，包括引用的文献中所述的所有数据、表格、图和文本。另外，在本文引用的文献内引用的文献的所有内容，也全部通过参考并入本文。对已知方法步骤、常规方法步骤、已知方法或常规方法的提及，决不是承认本发明的任何方面、描述或实施方案在相关领域中已经公开、教导或暗示。理解了本申请公开的方法和产物的特征后，通过查阅现有技术以及下面的非限制性附图和描述本发明的基本细节和一些应用的实施例，可以容易地推导出其它步骤的必要性和类型。使用下面的一般方法和操作，可以从容易得到的原料制备出式(I)化合物。应当理解，当给出典型的或优选的实验条件(即反应温度，时间，试剂摩尔量，溶剂，等)时，也可以使用其它实验条件，除非另有说明。最佳反应条件可以随使用的特定反应物或溶剂而变化，但是这样的条件可以由本领域技术人员通过常规优化操作来确定。制备本发明化合物的方法包括，使4-曱酰基-肉桂酸或3-(4-甲酰基苯基)丙酸衍生物与羟胺衍生物反应。可以制备本发明化合物，例如根据下面的一般方案。一般方案Io<formula>formulaseeoriginaldocumentpage18</formula>进行步骤1，将A(即4-曱酰基-肉桂酸或R!取代的4-甲酰基-肉桂酸(Y=CH=CH，R3-H)，3-(4-甲酰基苯基)丙-2-炔酸或K取代的3-(4-曱酰基苯基)丙-2-炔酸(Y=C=C，R3=H)，3-(4-甲酰基苯基)丙酸或K取代的3-(4-甲酰基苯基)丙酸(Y-CH广CH2，R产H))与B(即羟胺(X-O)或它们的盐酸盐或取代的肼(X-NH))—起溶于有机溶剂(即DMF，DMA，DMS0)中。在20*€-70C，搅拌混合物。得到化合物C作为粗产物。可以如下述文章之一所述，进行步骤2:Bauer,L.;Exner，0.Angew.Chem.Int.Edit.1974，13，376;Remiszewski，S.W.;Sambucetti，L.C;Atadja，P.;Bair，K.W.;Cornell,W.D.Green,M.A.;Howell,K.L.;Jung,M.;Kwon，P.;Trogani，N.;Walker,H.J.Med.Chem.2002，45，753;Mai，A.;Massa，S.;Ragno，R.;Cerbara，I.;Jesacher，F.;Loidl，P.;Brosch，G.J.Med.Chem.2003，46，512;Giacomelli，G.;Porcheddu，A.;Salaris，M.Org.Lett.2003，5，2715;Sakamoto,T.;Kikugawa，Y.J.Org.Chem.1994，59，929;和Barta，T.E.等Bioorg.Med.Chem.Lett.2000，10，2815.更具体地，在有机溶剂(即DMF，DMA,DMSO)中进行步骤2，混合化合物C和缩合剂[即EDC盐酸盐，HATU，PyB0P，HOBt]和碱(如DIEA，TEA)。在搅拌下、在20X:-601C，将亲核氮物质(如羟胺，邻苯二胺)加入混合物。通过结晶或通过色谱方法，纯化化合物D。在R和R,与芳族基团一起形成多环基团的情况下，可以根据下面的方案II制备本发明化合物一般方案II'丫0步骤'2j方案II的一般条件在有机溶剂(即DCM，DMF，DMA,DMS0或混合物)中进行反应，混合化合物E(Y-CH-CH，或C^C，或CH2-CH2，)和缩合剂[即EDC，HATUPyB0P，HOBt]和碱(如DBU，DIEA，TEA)。在搅拌下、在20C-60。C，将亲核氮物质(如羟胺，邻苯二胺)加入混合物。通过CH2Cl2结晶或通过色镨方法，纯化化合物F(Y-CH-CH，或C曰C或CH2-CH2，A-CON,。下面的实施例进一步解释了本发明，而不限制它的范围。一般方案in方案in的一般条件进行步骤l，将4-卣素-苯甲醛(即4-碘-苯甲醛)与NH20H—起溶于有机溶剂(即EtOH，MeOH，i-PrOH)中。在20匸-70。C，搅拌混合物。将得到的化合物粗产物加入有机溶剂(即DCM，DMF，DMA，DMSO或与NCS的混合物)，以得到期望的羟亚胺氯(hydroximinoylchloride)。步骤2在有机溶剂(即CH2C12)和碱(如DBU，DIEA，TEA)中，进行羟亚胺氯向对应的氧化腈的原位转化，然后与作为dipolarophile的烯丙基-衍生物Z-CH-CH-R2进行环加成，产生外消旋的异噁唑啉。步骤3通过在有机溶剂(即Et0H，Me0H，i-Pr0H)中碱性水解(Na0HK0H，Ca(0H)2)酯-衍生物，得到化合物G(Y=CH-CH，C^C或CHfCH2)即4-(外消旋的-异嚙唑啉)-肉桂酸，所述酯-衍生物通过在有适当碱(如DBU，DIEA，TEA)存在下，在适当的Pd-催化下，在有机溶剂(即THF，DMF，DMA,DMS0或混合物)中适当丙烯酸酯和卣代-苯基-异嚙唑啉的反应得到。步骤4在有机溶剂(即DCM，DMF，DMA,DMSO或混合物)中进行反应，混合化合物G(Y=CH=CH，CsC或CH广CH2)和缩合剂[即EDC，HATU，PyB0P，HOBt]和碱(如DBU，DIEA，TEA)。在搅拌下、在20X:-60X:，将亲核氮物质(如羟胺，邻苯二胺)加入混合物。通过CH2Cl2结晶或通过色谱方法，纯化化合物H(Y=CH-CH，CsC或CH2-CH2，A=C0N鹏。一般方案IV方案IV的一般条件进行步骤1，将4-囟素-苯甲醛(即4-碘-苯甲醛)与NH20H—起溶于有机溶剂(即EtOH，MeOH，i-PrOH)中。在20T,搅拌混合物。将得到的化合物粗产物加入有机溶剂(即DCM，DMF，DMA,DMSO或与NCS的混合物)，以得到期望的羟亚胺氯。步骤2在有机溶剂(即CH2C12)和碱(如DBU，DIEA，TEA)中，进行羟亚胺氯向对应的氧化腈的原位转化，然后与作为dipolarophile的炔丙基-衍生物Z-C^C-R2进行环加成，产生外消旋的异噍喳啉。步骤3通过在有机溶剂(即EtOH，MeOH，i-PrOH)中碱性水解(NaOHK0H，Ca(0H)2)酯-衍生物，得到化合物I(Y=CH-CH，CsC或CH广CH2)即4-(外消旋的-异喁唑啉)-肉桂酸，所述酯-衍生物通过在有适当碱(如DBU，DIEA，TEA)存在下，在适当的Pd-催化下，在有机溶剂(即THF，DMF，DMA,DMSO或混合物)中适当丙烯酸酯和卣代-苯基-异嚙唑啉的反应得到。步骤4在有机溶剂(即DCM，DMF，DMA,DMSO或混合物)中进行反应，混合化合物I(Y=CH-CH，C=C或CH2-CH2)和缩合剂[即EDC，HATU，PyBOP，HOBt]和碱(如DBU，DIEA，TEA)。在搅拌下、在20'C-60X:，将亲核氮物质(如羟胺，邻苯二胺)加入混合物。通过CH2C"结晶或通过色谱方法，纯化化合物L(Y=CH=CH，CsC或CH2-CH2，A=C0NH0H)。下面的实施例进一步解释了本发明，而不限制它的范围。实施例实施例1:制备(2^)-N-羟基-3-(4-{[(烯丙氧基)亚氨基]甲基}苯基)丙烯酰胺(ST2984)步骤l:在50n温热反式4-曱酰基-肉桂酸A(Y=CH-CH，R,=H，R3=H，0.346g，1.96mmol.)和B0-烯丙基羟胺盐酸盐(0.258g，2.37mmol.)溶于2mLDMF中的溶液，并搅拌5h。然后，用AcOEt稀释溶液，并用水洗涤。在Na2S04上干燥有机层，然后在减压下浓缩，得到0,421g中间体C(2劝-3-(4-{[(爷氧基)亚氨基]甲基}苯基)丙烯酸(93%产率)。MS(ESI)边々..[M-l]-=230.3步骤2:在烧瓶中，将从步骤1得到的中间体C(0.123g，0.53mmol)与HATU(0.222g，0.58mmol)和DIEA(185pL，1.06mmol)—起溶于1.5mLDMF。0.5h后，加入羟胺盐酸盐(0.055g，0.80mmol)和DIEA(139yL，0.80mmol)于1.5mLDMF中的溶液。在室温搅拌混合物24h，然后用HC1溶液(pH-3.5)稀释。过滤回收沉淀，然后CH2Cl2结晶，产生0.088gD(ST2984，40%产率)。MS(ESI)m/z:[M-1]=245.0[M+23〗+=269.0，H-NMR(200MHz,DMSO-d6)5(ppm):4.554.75(d，J=5Hz,2H,C〃2)，5.20-5.40(d0，J,rans=17.6Hz，Jc/S=10.6Hz，2xCH),5.9-6.1(m，1H，CH)，6.4-6.6(d,J=15.8Hz,1H,CH)，7.4-7.6(d，J=15.4Hz，1H，CH)，7.6(bs，4H,4xCWar),8.2(s,1H,CH),9'1(bs,1H，呵10.8(bs,1H，OW).13C-NMR(50MHz，DMSO"d6)S(ppm):75.3,118.6,120.7,128.1,128.7,133.5,135.1，137.0，138.3,149.3,163.3.实施例2:制备(2^)-N-羟基-3-{4-[(苯氧基亚氨基)曱基]苯基}丙烯酰胺(ST2985)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-曱酰基-肉桂酸A(0,342g，1.94mmol)和B0-苯基羟胺盐酸盐(0.339g，2.33mmol)开始，得到用于合成ST2985的中间体C(2历-3-{4-[(苯氧基亚氨基)曱基]苯基}丙烯酸(O.520g，99%产率)。MS(ESI)/z々；[M-l]—-266.4步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(0.201g，0.75mmol)开始得到化合物ST2985(0.100g，48%产率)。MS(ESI)/n/z:[M-1]-=2811+=305.01H-NMR(200MHz,DMSO-d6)S(ppm):6.5^6.7(d,J=15.7Hz,1H，CH)，7.0-7.1(t，J=6.9Hz,1H,CWar)，7.2-7.3(d，J=8.0Hz,2H，2xC〃ar)，7.3-7.4(t，J=7.3Hz,2H,2xC〃ar),7.4-7.6(d,J=16.1Hz,1H,CH)，7.6-7.7(d,J=7.7Hz，2H,2xC〃ar)，7.8-7,9(d,J=7.7Hz,2H,2xC〃ar),8.7(s，1H，CH)，9.1(bs,1H，NH)，10.8(bs,1H'OH).13C-NMR(50MHz,DMSOd6)S(ppm):115.0,121.3，123.2,128.8,128.9,130.3,132.6,137.9,138.2,152.8,159.6,163.2.实施例3:制备(2E)-N-羟基-3-[4-({[(4-硝基节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基〗丙烯酰胺(ST2987)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-甲酰基-肉桂酸A(0.348g，1.97mmol)和B0-(4-硝基千基)幾胺盐酸盐(0.485g，2.37mmol)开始，得到用于合成ST2987的中间体C(2^)-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基)-曱基)苯基]丙烯酸(ST3075)(0.610g，94%产率)。MS(ESI)/n/z:[M-1]-=325.31H-NMR(200MHz，DMSO"d6)S(ppm):5.34(s，2H,CW2),6.5-6.7(d,J=15.7Hz，1H，CH)，7.5-7.8(m,7H,6xC〃ar,CH),8.2-8.3(d,J=8.4Hz，2H,2xC〃ar)，8.41(s，1H，CH),12.4(bs，1H,OW)."C-NMR(50MHz,DMSO-d6，S):75.0，121.0，124.3，128.1,129.4,129.5，133.8，136.7,143.7,146.5,147.7,150.3，168.2.步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(O.262g，0.80mmo1)开始得到化合物ST2987(0.120g，44%产率)。MS(ESI)zn/z:[M-1『=340.2+=364.41H-NMR(200MHz,DMSO-d6)S(ppm):5.34(s，2H,CW2),6.4-6.6(d,J=15.6Hz,1H,CH)，7,4-7.6(d,J=15.8Hz,1H,CH),7.62(bs,4H,4xC〃ar),7.6-7.7(d,J=8.4Hz,2H，2xCHar),8.2-8.3(d，J=8.4Hz，2H,2xC〃ar),8.41(s,1H,CH),9.09(bs'1H'NH)，10.80(bs，1H,OH).13C-NMR(50MHz,DMSO^d6)S(ppm):74.9，120.9，124.3,128.2，128.7，129.5，133.1,137.3,138.2，146.5，147.8,150.4,163.2.实施例4:制备(2i)-N-羟基-3-{4-[(肟基)曱基]苯基}丙烯酰胺(ST2983)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-甲酰基-肉桂酸A(0.352g，2.00mmol)和B羟胺盐酸盐(0.167g,2.40ramol)开始，得到用于合成ST7983的中间体C(2i5)-3-{4-[(將基)甲基]苯基}丙烯酸(O.355g,93°/。)。MS(ESI)迈々,[M-l]画-190.2步骤2:如实施例l步骤2所述，从中间体C(O.075g，0.39mmo1)开始得到化合物ST2983(0.060g，40%),例外是，为了操作和纯化在减压下浓缩反应混合物，通过制备RP-HPLC(柱LichrosorbRP1825x2.5mmID，洗脱液H20/CH3CN=50/50+CH3COONH450mM，流速10mL/min)纯化粗产物。MS(ESI)in/z:[M-1]-=205.3+=229,21H-NMR(200MHz，DMSO画d6)S(ppm):6.4~6.6(d，J=15.8Hz,1H,CH),7.4-7.6(d，J=15.8Hz,1H，CH)，7.61(bs,4H,4xCWar)，8.15(s,1H，CH),9.09(bs，1H，NH),10.79(bs，1H，OH),11.37(bs,1H,OH).实施例5:制备(2^)1-羟基-3-[4-({[(五氟节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基-丙烯酰胺(ST2986)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-甲酰基-肉桂酸A(0.346g，1.96mmol)和B0-(2，3，4，5，6-五氟千基)羟胺盐酸盐(0.588.2g，2.35mmol)开始，得到用于合成ST2986的中间体C(2^-3-[4-({[(五氟节基)氧]亚氨基}-曱基)苯基]丙烯酸(Q.710g，97%产率)。MS(ESI)/z7々[M-ir=370.1步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(O.115g，0.31mmol)开始得到化合物ST2986(0.060g，50%产率)。MS(ESI)/n/z:[M-1]-=385.1+=409.01H-NMR(200MHz,DMSO"d6)S(ppm):5.27(s，2H,C〃2),6.4-6.6(d，J=15.7Hz，1H，CH),7.4-7.6(d,J=15.7Hz，1H，CH),7.60(bs，4H，4xC〃ar),8.90(s,1H,CH),9.08(bs,1H，NH)，10.80(bs,1H，OH).19F-NMR(188MHz，DMSO-d6)S(ppm):-138.3(d,^=230Hz),-149.2(t,J=21.3Hz)，-158.1(t,J=22.0Hz).实施例6:制备(2E)^-羟基-3-[4-({[(4-曱氧基羰基千基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]-丙烯酰胺(ST3049)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-曱酰基-肉桂酸A(0.197g，1.12mmol)和B0-(4-甲氧基羰基千基)幾胺盐酸盐(0.292g，1.34mmol)开始，得到用于合成ST3049的中间体C(2a-3-{4-[({[4-(甲氧基羰基)节基]氧}-亚氨基)甲基]苯基}丙烯酸(0.300g，80%产率)。MS(ESI)迈々.'[M-l]、338.2步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(O.124g，0.36mmol)开始得到化合物ST3049(75mg，58%产率)。MS(ESI)fn/z:[M-1]--353.21H-NMR(200MHz，DMSO-d6)5(ppm):3.85(s，3H，CH3)，5.28(s,2H,C〃2),6.5-6.7(d，J=15.8Hz，1H，CH),7.5-7.7(m,5H,4xCWar+CH)'7.7-7.8(d,J=8.0Hz，2H,2xC〃ar),7.9-8.0(d,J=8.1Hz，2H,2xC"ar),8.38(s,1H,CH)'9.10(bs，1H,NH),10.78(bs,1H,OH).13C-NMR(50MHz，DMSOk16)S(ppm):52.8,75.5，120.9，128.2,128.7,128.8,129.7，130.0,133.2,137.2,138.2,144.0,150.0,163.2,166.8.实施例7:制备(2E)-N-羟基-3-{4-[(2-吗啉-4-基乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}-丙烯酰胺(ST3050)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-曱酰基-肉桂酸A(0.089g，0.50mmol)和B2-(2-吗啉-4-基)-0-乙基羟胺二盐酸盐(0.081g，0.55mmol)开始，得到用于合成ST3050的中间体C(2^)-3-(4-{(a-[(2-吗啉-4-基乙氧基)亚氨基]甲基}-苯基)丙烯酸(0.140g，91%产率)。MS(ESI)边々[M+ir=305.2步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(0.HOg,0.46mmol)开始得到化合物ST3050(45mg，30%产率)；如实施例4所述，操作和纯化反应混合物。酸水解(HC1于THF溶液中)通过中间体C(1.800g，5.29mmol)与氯^曱酸乙酯(607jiiL，6.35mmol)和TEA(959nL，6.88mmol)于5mL无水THF中反应(根据MaiA.，PezziR.等.J.Med.Chem.2005，48，3344和MaiA.，PezziR.等.J.Med.Chem.2003，46，4826所述的操作)得到的(2历-3-{4-[(2-吗啉-4-基-乙氧基亚氨基)-甲基]-苯基}-N-三苯甲基氧-丙烯酰胺(2.000g，3.56mmol，6冗产率)后，得到盐酸盐形式的化合物ST305(K1.241mg，98%产率)。MS(ESI)m/z:[M+1]+=320.3，H-NMR(200MHz,DMSO-d6)5(ppm):2.4-2.5(t,J=4.4Hz,4H,2xC〃2)，2.6-2.7(t，J=5.9Hz,2H,CH2)，3.5-3邻，J=4.4Hz'4H,2xCH2),4.2~4.3(t,J=5.9Hz,2H，CH2),6.4"6.6(d'J=15.8Hz，1H，CH)，7.4-7.6(d，J-16.1Hz,1H，CH)，7.62(bs,4H,4xC〃ar),8.27(s,1H，CH),9.09(bs,1H，NH),10.79(bs,1H,OH).13C-NMR(50MHz,DMSO-d6)S(ppm):54.4,57.7,66.9,72.2，120.8,128.1,128.7,133.6,137.0,138.3,149.0,163.2.实施例8。制备(2E)-3-(4-{[(千氧基)亚氨基]甲基}苯基)-萨羟基丙烯酰胺(ST2840)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式4-甲酰基-肉桂酸A(0.348g，1.97mmol)和B0-节基羟胺盐酸盐(0.378.2g，2.36mmol)开始，得到用于合成ST2840的中间体C(2^)-3-(4-{[(千氧基)亚氨基]甲基)苯基)丙烯酸(ST3076)(0.54g，98%)。MS(ESI)m/z:[M-1]-=280.31H-NMR(200MHz'DMSO<!6)S(ppm):5.19(s,2H，C〃2-0);6.58(d,1H，CW=C,J=16.1Hz);7.30-7.46(m,5H,5xCWar);7.59(d'1H,CW=C,J=15.7Hz);7.64(d,2H,2xCWar);7.74(d，2H，2xC〃ar);8.34(s,1H,C〃=N).13C-NMR(50MHz,DMSO-d6)5(ppm):76.4;121.0;128.0;128.6;129.0;129.1;129.4;134.1;136.4;138.2;143.7;149.5;168.2.步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(0.100g，0.36mmol)开始得到化合物ST2840(0.080mg，75%产率)。MS(ESI)m/z:[M-"-=295.2+=319.1.1H-NMR(300MHz,DMSO-d6)S(ppm):5.18(s'2H，C〃2-0);6.50(d，J=15.78Hz，1H,C〃=C，)；7.30-7.50(m,6H,5xO/ar+CH=C);7.61(m,4H，4xCHar);8.32(s,1H,C〃=N).13C-NMR(75.5MHz,DMSO-d6)S(ppm):76.3;120.8;128.1128.6;128.6;128,9;129.0;133.4;137.0;138.1;138.2;149.5;163丄实施例9:制备(2E)-^羟基-3-(4-{[(4-氟苯甲酰基)亚联氨基]-甲基}苯基)丙烯酰胺(ST2888)步骤1:如实施例1步骤1所述，从于2mLEtOH中与5%v/vHC1(37%)—起回流的反式4-甲酰基-肉桂酸A(0.176g，1.00mmol)和B4-氯苯甲酰肼(0.170g，1.00mmol)开始，得到用于合成ST2888的中间体C(2^-3-(4-{[(4-氯苯甲酰基)亚联氨基]-曱基}苯基)丙烯酸(O.255g，78%)。搅拌5小时后，将反应冷却至室温，过滤，用EtOH洗涤固体。MS(ESI)迈々..[M-1]—=327.2.步骤2:如实施例1步骤2所述，从中间体C(0.200g，0.61mmol)开始得到化合物ST2888(0.110g，53%产率)。MS(ESI)m/z:[M+23]+=366.3[M-1]-=342.11H-NMR(200MHz，DMSO-d6)S(ppm):6.51(d,J=15.9Hz,1H,CW=C);7.46(d，J=15.8Hz，1H,CW=C);7.61(t，4H,4xCWar);7.75(d,2H，2xC〃ar);7.92(d,2H,2xC〃ar);8.43(s,1H,C〃=N);".95(s,1H，呵"C隱NMR(50MHz,DMSO-d6)5(ppm):120.8;128.3;128.6;129.3;130.3;132.8;135.8;137.2;137.3;138.2;148.1;162.9;163.5-实施例10:制备(2E)-N-(2-氨基苯基)-3-[4-({[(4-硝基爷基)氧]亚氨基}-曱基)苯基]-丙烯酰胺(ST3070)步骤l:如实施例3步骤1所述，合成中间体C(2》-3-[4-({[(4-硝基苄基)氧]亚氨基)曱基)苯基]丙烯酸。步骤2:如下得到化合物ST3070(0.12g，60%产率)将中间体C(0.158g，0.48mmol)、PyB0P(0.276g，0.53mmol)、DIEA(252jliL，1.45mmol)溶于3mLDMF中，将该溶液緩慢加入邻苯二胺(0.261g，2.42mmol)于O.5mLDMF中的溶液中。当反应结束时，在减压下蒸馏DMF，通过硅胶快速色语纯化粗产物(洗脱液(^2"2/二喝烷=95/5)。MS(ESI)m/z:[M+1〗+=417.11H-NMR(200MHz,DMSO-d6)S(ppm):4.98(bs，2H，NW2),5.36(s,2H，C〃2),6.5-6.6(t,J=7.3Hz，1H,CWar),6.7-6.8(d,J=7.6Hz'1H,CHar)，6.9-7.0(m,2H,CH，CHar).7.3-7.4(d，1H，J=7.7Hz,CWar)，7.5-7.7(d,J=15.8Hz,1H，CH)7.67(m,6H，6xC〃ar),8.2-8.3(d,J=8.2Hz,2H，2xCAVar)，8.43(s，1H,CH)'9.43(bs，1H，NH).13C-NMR(50MHz'DMSO^d6)S(ppm):67.1,74.9,"6.7,"7.0，124.1，124.3，125.5,126.6,128.3,128.8,129.5，133.3,137.3，139.4,142.4,146.6，147.7,150.4,164.0.实施例11制备(2E)-A^羟基-3-(lH-吲咮-5-基)丙烯酰胺(ST2880)为了制备该化合物，遵循一般方案II(也参见Kato，K.;Ohkawa，S.;Terao，S.;Terashita，A.I.;Nishikawa，K.J.Med.Chem.1985，28,287和Pindur，U.;Pfeuffer，L.Monatsh.Chem.1989，120，157)。步骤l.在烧瓶中，在回流下搅拌1H-吲哚-5-甲醛(0.2l7g，1.5mmol)和(三苯基正膦基亚基)乙酸甲酯(methyl(triphenylphosphoranylidene)acetate)(0.535g.1-6mmol)于DCM(4niL)中的溶液过夜，然后在减压下去除溶剂。通过硅胶柱色谱进行纯化，DCM/己烷8:2的混合物作为洗脱液系统，产生Q.291g(2》-3-(1H"引咮-5-基)丙烯酸甲酯(97%产率)。MS(ES，)m/z:[M-1]-=200.2+=224.2.1H-NMR(200MHz,CDCI3)S(ppm):6.46(d，1H,CH=C，J=15.8Hz);6.62(m，1H,C〃ar);7.26(m,1H，C〃ar);7.43(m,2H,CWar);7.83-7.93(m,2H，CWar+C〃=C);8.41(s,1H，NH).13C-NMR(50MHz,CDCI3)S(ppm):51.63;103.61;111.68;114.73;121.70;122.50;125.41;126.64;128.27;137.14;146.84;168.24.步骤2.向从步骤1得到的中间体(2^)-3-(1H-吲咮-5-基)丙烯酸甲酯(255mg，1.27mmol)于MeOH/H205:1(10mL)中的溶液中，加入固体LiOH(532mg，12.7ramol)，在室温搅拌反应混合物过夜。用HClIN酸化溶液(pH约1)，然后用乙酸乙酯萃取。用H20洗涤有机层(x3),然后经硫酸钠干燥，过滤，在减压下蒸发，得到0.24g中间体E(2￡)-3-(1H-吲哚-5-基)丙烯酸(94%产率)。MS(ESI)范々..[M-l]-=186.0[M+23]+=210.1.步骤3.在烧瓶中，将羟胺盐酸盐(0.379gmg，5."mmol)和DBU(830mg，5.45mmol)溶于DMF(0.5mL)中，将得到的溶液加入中间体E(0.507g，2.726mmol)、HATU(1.04g，2.726mmol)和DIEA(1.19mL，6.81mmol)于DMF(2mL)中的悬浮液中。当反应结束时，在减压下浓缩混合物，通过制备RP-HPLC(柱LichrosorbRP-18，7Mm;洗脱液H20/CH3CN60:40;流速-10mL/min)纯化残余物，得到产物FST2880(0.165g，30%)。MS(ESI)m/z:[M-H].=200.9[M+23]+=224.91H-NMR(300MHz,DMSO-d6)S(ppm):6.35(d，1H，CH=C，J=15.7Hz);6.46(br,1H，C〃ar);7.28-7.44(m,3H,CWar);7.53(d,1H，C"=C，J=15.7Hz);7.72(s,1H,C〃ar);".25(s，1H,NH).13C-NMR(75.5MHz'DMSO-d6)S(ppm):102.52;112.66;115.93;120.68;121.67;126.61;127.09;128.58;137.33;141.02;164.27.实施例12制备(2a-N-羟基-3-{3-[(2-吗啉-4-基乙氧基亚氨基)曱基]-苯基}-丙烯酰胺盐酸盐(ST3576)步骤1:如实施例1步骤1所述，从反式3-曱酰基-肉桂酸A(Y=CH-CH，Id=H，R3=H，0.650g，3.69mmol)和B2-(2-吗啉-4-基)-0-乙基羟胺二盐酸盐(O.808g，3.69mmol)开始，得到用于合成ST3576的中间体C(2a-3-(3-K^)-[(2-吗啉-4-基乙氧基)亚氨基]甲基}-苯基)丙烯酸(l.232g，98%)。MS(ESI)/zz々.'[M+ir=305.1预先通过碱性水解(过量的NaOH于EtOH/水-1/1中)3-碘苯甲醛(1.000g，4.31mmol)与丙烯酸甲酯(775pL，8.62mmol)、NaHC03(0.905g，10.75mmol)、nBu4NCl(1.200g，4.31mmol)和Pd(0Ac)2(0.019，0.09mmol)于DMF(6mL)中反应得到的(2E)-3-(3-甲酰基苯基)丙烯酸甲酯，得到反式3-甲酰基-肉桂酸A(0.699g，3.97mmol，92%产率)。步骤2.酸水解中间体C(1.400g，4.12mmol)与氯代甲酸乙酯(472nL，4.94mmol)和TEA(746jaL，5.35mmol)于5mL无水THF中反应(根据MaiA.，PezziR,等.J,Med.Chem.2005，48，3344和MaiA.，PezziR.等.J.Med.Chem.2003，46，4826所述的操作)得到的(2^-3-{3-[(2-吗淋-4-基-乙氧基亚氨基)-甲基]-苯基)-N-三苯甲基氧-丙烯酰胺(l.500g，2.67mmol，65%产率)后，得到化合物ST3576(0.931mg，98%产率)。MS(ESI)/n/z:[M+1]-=320.1懇-318.11H-NMR(300MHz,CD3OD,S):3.30-3.22(m,2H，C〃2),3.54-3.64(m，4H,2xCAV2),3.85(t，J=11.4Hz,2H，C〃2)，4.034,10(m,2H，CW2)，4.544.90(m,2H,CW2);6.40-6.60(d,J=15.6Hz,1H,CW=C，)；7.40-7.50(t,J=7.5Hz'1H,CHar),7.50-7.70(m，4H,3xCWar+CH=C);7.79(s，1H,C〃ar);8.27(s，1H,C〃=N).13C-NMR(75.5MHz,CD3OD,S):52.6,56.2;63.7;67.6;118.3;126.6;128.2;129.0;129.3;132.6;135.7;139.6;150.6;164.7.实施例13:制备N-羟基-3-[4-({[(4-硝基节基)氧]亚氨基}甲基)苯基]丙酰胺(ST3330)步骤l:如实施例1步骤1所述，从3-(4-甲酰基苯基)丙酸A(Y=CH2-CH2，H，R3=H0,160g，0.90mmol)和B0-(4-硝基爷基)羟胺盐酸盐(O.202g，0.99mmol)开始，得到用于合成ST3330的中间体C3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙酸(0.230g，78%)。MS(ESI)/z/z;[M+23]—=351,1。碱性水解(过量的LiOH于1/1水/THF溶液中)通过4-溴苯甲醛(0.160mg，0.86mmol)与丙烯醛缩二乙醇(396jaL，2.60mmol)在有Bu3N(412juL，1.73mmol)、Bu4NCl(0.240g，0.86mmol)和Pd(0Ac)2(0.Q06g，0.03mmol)存在下于DMF中在90匸反应过夜(根据BattistuzziG.，CacchiS.，FabriziG.，BerniniR.Synlett,2003，8，1133所述的操作)得到的3-(4-甲酰基苯基)丙酸乙酯粗产物后，得到3-(4-曱酰基苯基)丙酸A(Y=CH2-CH2，、=H，R3=H0.160g，0.90mmol)。步骤2.酸水解中间体C3-[4-({[(4-硝基爷基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙酸(O.050g，0.15mmol)与HATU(0.064g，0.17mmol)、TEA(43|iL，0.31mmol)和o-三苯曱基羟胺(0.048g，0.17mmol)在DMF中在室温反应得到的3-{4-[(4-硝基-千氧基亚氨基)-甲基]-苯基)-N-三苯甲基氧-丙酰胺(0.054g，0.09mmol，60%产率)后，得到化合物ST3330(0.030g，95%产率)。MS(ESI)m/z:[M+23]+=366.2[M-1]=342.21H-NMR(300MHz,DMSO~d6)5(ppm):2.23(t,J=7.6Hz,2H,CH2)，2.80(t,J=7.6Hz，2H，CH2)，5.29(s,2H，CW2),7.20-7.24(d，J=7.94Hz,2H,2xC〃ar),7.47-7.50(d,J=8.1Hz，2H，2xCHar)，7.62-7.66(d，J=8-7Hz，2H，2xCWar)，8.20-8.24(d,J=8.8Hz，2H,2xCWar),8.32(s，1H，CH),8.70(bs，1H,,,10.30(bs,1H，OH).13C-NMR(75.5MHz，DMSOkJ6)8(ppm):168.7，150.6,147.6,146.6，144.2,130.1，129.4，129.3,127.7,124.2,74.6，34.2,31.4.实施例14:制备(2E)-N-(2-氨基-苯基)-3-{4-[(2-吗啉-4-基-乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}-丙烯酰胺盐酸盐(ST3573)步骤1:如实施例7步骤1所述，合成中间体C(2^5)-3-(4-{(a-[(2-吗啉-4-基乙氧基)亚氨基]曱基}-苯基)丙烯酸。步骤2:通过中间体C(1.000g，3.28mmol)、HATU(1.370g，3.61mmol)、TEA(550juL，3.90mmol)于9mLCH2Cl2中的反应，得到(2^)-N-(2-氨基-苯基)-3-{4-[(2-吗啉-4-基-乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}-丙烯酰胺(0.740g，57%产率)；将该溶液緩慢加入邻苯二胺(0.370g，3.45mmol)于1mLCH2Cl2中的溶液中。当反应结束时，在减压下蒸馏CH2C12，通过硅胶快速色镨纯化粗产物(洗脱液CH2Cl2/CH30H/正己烷/TEA=67/2/29/2)。MS(ESI)/n/z:[M+1]+=394.91H-NMR(500MHz，DMSO-d6，S):2.48(m,4H，2xC〃2),2.64(t,J=5.8Hz,2H，C〃2),3.58(t,J=5.0Hz,4H，2xCH2),4.26(t,J=5.7Hz,2H,C〃2),4.92(bs，2H,N〃2),6.5^6.6(t，弇8.1Hz,1H,C〃ar),6.7-6.8(d,J=7.6Hz，1H,CHar)，6.9-7.0(d,J=15.7Hz，1H,CH),6.9-7.0(t，J=8.1Hz,1H，OZar).7.3-7.4(d,1H,J=7.7Hz,CHar)，7.5-7.6(d,J=15.4Hz,1H,CH),7.6-7.7(m,4H,4xCWar)，8.29(s,1H,CH),9.41(s,1H,,13C-NMR(126MHz，DMSO-d6，S):54.3,57.6,66.9，72.2，"6.7,117.0，124.0'124.2,125.4,126.5,128.1,128.8,133.7，137.0,139.5,142.3,149.0,164.0.用在二喁烷中的HC14.0M酸化(2i)-N-(2-氨基-苯基)-3-{4-[(2-吗啉-4-基-乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}-丙烯酰胺(0.740g，1.88fflmol)后，得到化合物ST3573(0.660g，1.69mmol，90%产率)。实施例15制备(2E)]-巯基-3-{4-[(4-硝基-千氧基亚氨基)-甲基]-苯基}-丙烯酰胺(ST3605)步骤l.如实施例3步骤1所述，合成中间体C(2力-3-[4-(U(4-硝基苄基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙烯酸(ST3075)。步骤2.通过中间体C(2历-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-曱基)苯基]丙烯酸(ST3075，0.100g，0.31mmol)与S0Cl2(34pL，0.46mmol)、DIEA(236pL，1.38迈mol)和三苯基甲烷次磺酰胺(0.098g，0.14mmol)于无水DCM中在室温反应，得到化合物(2i)-3-{4-[(4-硝基-节氧基亚氨基)-甲基]-苯基}-N-三苯甲基硫烷基-丙烯酰胺(0.050g，0.08mmol，26%产率)。MS(ESI)m/z:[M+1]+=600.7[M+23]+=622.1[2M+1]+=1199.41H-NMR(300MHz，DMSO-d6)S(ppm):5.32(s，2H,CW2),6.50"6.60(d,J=16.0Hz，1H'C〃=C,);7.20-7.40(m，18H,17xC〃ar+CH=C);7.55-7.65(d,J=7.7Hz，2H，2xCWar);7.60-7.70(d,J=8.7Hz，2H，2xCWar);8.20-8.30(d,J=8.7Hz，2H，2xC〃ar)8.38(s,1H，C〃ar);8.96(s，1H，呵13C-NMR(75.5MHz,DMSO-d6)S(ppm):57.8,74.9，124.2,127.8，128.1,128.6，128.9,129.2;129.4;130.2;133.4;136.8;140.5;143.6;146.5;147.7;150.3;154.4.非优化地对(2^)-3-{4-[(4-硝基-节氧基亚氨基)-甲基]-苯基卜N-三苯曱基硫烷基-丙烯酰胺去保护后，得到化合物ST3605(0.006g，20%产率)。MS(ESI)2Z々..[M-l]_=356.2实施例16:制备N-羟基-3-{4-[(幻-{[(4-硝基千基)氧]亚氨基}甲基]苯基}-丙-2-炔酰胺(ST3618)ST3618合成可以根据一般方案I来实现，从对甲酰基苯丙炔酸A开始，制备相应的中间体C(3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙炔酸)。该中间体可以通过4-碘苯甲醛与丙炔酸在有Pd-催化剂存在下的反应来得到。但是，因为低产率和随后从曱基酯形成氧肟酸基团，最好直接合成3-(4-甲酰基苯基)丙炔酸甲酯作为中间体(根据EckertT.和IpaktschiR.在Synt.Comm.1998，28，327中所述的操作)。步骤l.如实施例l步骤l所述，从3-(4-甲酰基苯基)丙炔酸曱酯(0.180g，1.00mmol)和B0-(4-硝基节基)羟胺盐酸盐(0.202g，1.OOmmol)开始，得到用于合成ST3618的3-[4-({[(4-硝基苄基)氧]亚氨基}-曱基)苯基]丙炔酸甲酯(0.325g，96%)。通过4-硤苯甲醛(0.700mg，3.02mmol)与丙炔酸甲酯(1.013g，12.06mmol)在有K2C03(0.846g，6.04mmol)、Cul(O.022g，0.12mmol)和Pd(PPh3)2Cl2(0.042g，0.06mmol)存在下于THF中在65X:反应,得到3-(4-甲酰基苯基)丙炔酸甲酯(0.460g，2.43mmol，80°/。产率)。然后，真空蒸发THF12h，用Et20/H20萃取残余物。通过硅胶柱色谱纯化粗产物。步骤2.酸水解3-[4-({[(4-硝基苄基)氧]亚氨基}-甲基)苯基〗丙炔酸甲酯(0.150g，0.44mmol)与在THF(1.0mL，0.44mmol)中的双(三甲珪基)-natriumamid1.0M、和O-四氢吡喃基羟胺(0.052g，0.44mmol)在THF中在-78。C反应2h得到的3-(4_[(4-硝基-千氧基亚氨基)-曱基]-苯基}-N-四氢吡喃基-丙炔酰胺(0.150g，0.44mmol，35%产率)后，得到化合物ST3618(0.007g，60%产率)。MS(ESI)m/z:[M+1]+=340,0[M-1]-=338.11H-NMR(500MHz,CD3OD)S(ppm):5.35(s,2H,C〃2),7.58-7,60(d，J=8,5Hz,2H，2xC〃ar),7.64-7.69(m，4H，4xC〃ar),8.24-8.27(d,J=8.5Hz,2H,2xC〃ar)，8.29(s,1H,CH)."C-NMR(125.7MHz,CD3OD)S(ppm):152.0,149.0'147.8，145.9,134.1,132.6，128.6,127.2,123.4,121.6,86.0，81.3,74.9.缩写列表AcCN乙腈AcOEt乙酸乙酯DBU1，8-二氮杂双环[5.4.0]十一碳-7-烯DCC二环己基碳二亚胺DCM二氯甲烷DIEAN，N，N-二异丙基乙胺腿p4-二甲氨基吡啶DMF二甲基甲酰胺DMSO二甲基亚砜HOBt羟基苯并三唑MeOH甲醇匪N-甲基吗啉RP-HPLC反相-HPLCTEA三乙胺TFA三氟乙酸THF四氢吹喃生物学结果细胞毒性研究为了测试化合物对细胞生长的影响，使用了NB4人早幼粒细胞白血病、NCI-H460非小细胞癌细胞和HCT-116人结肠癌细胞。NB4和NCI-H460肿瘤细胞生长在含有10。/n胎牛血清(GIBC0)的匿I1640中，而HCT-116肿瘤细胞生长在含有10。/。胎牛血清(GIBC0)的McCoy氏5A中。将肿瘤细胞以约10%汇合接种在96-孔组织培养板(Corning)中，使其贴壁和恢复至少24h。然后，将不同浓度的药物加入每个孔中，计算它们的IC50值(抑制50%细胞存活的浓度)。将平板在37"C温育24h。在处理结束时，对于悬浮的NB4肿瘤细胞，如下进行操作通过在1600xg离心平板10min除去培养基，去除上清液。加入250y1PBS，然后在1600xg离心平板IOmin，去除上清液。加入200n1/孔的含有10%FCS的培养基RPMI1640，在37匸温育平板另外48h。再次在1600xg离心平板10min,去除培养基，加入200p1PBS和50p1冷80VTCA。在水上温育平板至少lh。去除TCA，在蒸馏水中浸没洗涤平板3次，在纸上于40X:干燥5min。然后，加入200ja1于1%乙酸中的0.4%sulphorodamineB。在室温温育平板另外30min。去除SulphorodamineB，在1%乙酸中浸没洗涤平板3次，然后在纸上于40r干燥5min。然后加入200plTris10mM，保持搅拌平板20min。存活细胞测定是通过Multiskan荧光分光光度计测量在540nm的光密度。对于贴壁的肿瘤细胞(NCI-H460和HCT-116)，操作如上所述，例外是，在处理结束时，通过移动上清液并加入PBS3次而不离心来洗涤平板。另外，在测定的最后一天，不离心而去除上清液。将杀死的细胞的量计算为，与对照培养物相比，sulphorodamineB结合的降低百分比。用"ALLFIT"程序计算I"值(抑制50%细胞存活的浓度)。在表l中，对NB4肿瘤细胞评价的细胞毒性证实，一些化合物(ST2840,ST2986,ST2987,ST3049,ST2888)是最有效的，因为IC50值范围是0.6-0.8jaM。分子ST2984，ST3050，ST2880，ST3330，ST3576(之后是ST2985和ST2983)的效力略低(IC50值范围是1.4-2.9juM)。关于对NCI-H460肿瘤细胞存活的影响，所有化合物的效力都低于对NB4肿瘤细胞的效力(IC50值范围是1.6-7.7juM)。在该情况下，表现出较小细胞毒性作用的分子是ST2985，ST2983，ST3330,ST3576和ST2880。对于HCT-116，前述化合物的细胞毒性相当(IC50=1.2-4.0|iM)。关于ST3070,ST3075和ST3076,ST3573,所迷化合物表现出对存活细胞较小的抑制作用，对NB4、NCI-H460和HCT-116计算出的IC50的范围是8.9|uM。表1.不同化合物对NB4、NCI-H460和HCT-116胂瘤细胞的细胞毒性<table>tableseeoriginaldocumentpage39</column></row><table>权利要求1.具有下式I的化合物[式I]其中n是0或1；-当n是0时，A是单价基团，且选自OH，NH-OG，基团其中G和G′是相同的或不同的，是H，糖基或乙酰基；-当n是1时，A是选自下述的二价基团NH-S-S-NH和CH2-S-S-CH2；Y是选自下述的基团HC＝CH，FC＝CF，FC＝CH，CH＝CF，CH2-CH2和C≡C；R是基团其中X是0，NH；R是基团Z选自H；(C6-C12)芳基或被硝基、卤素、(C1-C4)烷氧基羰基、羟基或氨基取代的(C6-C12)芳基；(C1-C4)烷基，(C2-C4)链烯基，(C2-C4)炔基；(C6-C12)芳基-(CH2)n′，其中芳基被硝基、卤素、(C1-C4)烷氧基羰基、羟基或氨基取代；其中n′＝0-3；(C6-C12)芳基-CO，其中芳基被硝基、卤素、(C1-C4)烷氧基羰基、羟基、氨基取代；和(C3-C6)杂环基-(C1-C4)烷基，其中杂环的至少一个CH2被O、S、NH替代；R1选自H；NH2；(C1-C4)烷基，(C2-C4)链烯基，(C2-C4)炔基；NH-(C2-C4)炔基；NO2；(C2-C4)炔基；卤素；(C6-C12)芳基；(C6-C12)芳基-(C2-C4)亚炔基；和(C3-C6)杂环基-(C2-C4)亚炔基，其中杂环的至少一个CH2被O、S、NH替代；或R和R1与芳族基团一起形成具有下式的多环基团R2选自H；(C6-C12)芳基或被硝基、卤素、(C1-C4)烷氧基羰基、羟基或氨基取代的(C6-C12)芳基；(C1-C4)烷基，(C2-C4)链烯基，(C2-C4)炔基；(C6-C12)芳基-(CH2)n″，其中芳基被硝基、卤素、(C1-C4)烷氧基羰基、羟基或氨基取代，其中n″＝0-3；(C6-C12)芳基-CO，其中芳基被硝基、卤素、(C1-C4)烷氧基羰基、羟基、氨基取代；和(C3-C6)杂环基-(C1-C3)亚烷基，其中杂环的至少一个CH2被O、S、NH替代；R3选自H；(C1-C4)烷基，(C2-C4)链烯基；(C1-C4)烷基-NH；(C1-C4)-烷基-(C3-C6)-亚杂环基，其中杂环的至少一个CH2被O、S、NH替代；(C6-C12)芳基；和(C3-C6)杂芳基，其中杂环的至少一个CH被O、S、NH替代；R4选自H；(C1-C4)烷基；(C6-C12)芳基；(C6-C12)芳基-(C1-C4)亚炔基；(C2-C4)烷酰基；和-(C6-C12)芳基-CO；R5选自H；线性或分支的(C1-C4)烷基；线性或分支的(C2＝-C4)链烯基；和OR6，其中R6是H，(C1-C4)烷基，甲磺酰基，甲苯磺酰基，(C1-C4)烷酰基。2.根据权利要求1的化合物，其中A是0H或NH0G，其中G是H。3.根据权利要求l的化合物，其中Y是基团HC-CH。4.根据权利要求l的化合物，其中R!，R3，l和R5是H。5.根据权利要求1的化合物，其中R2选自H;-(C6-CJ芳基；-(CrCu)芳基-(CH丄，其中芳基被硝基、卣素、(d-C4)烷氧基羰基取代；一(C6-C12)芳基-C0;和(C3-C6)杂环基-(C「C3)亚烷基，其中杂环的至少一个CH2被NH替代。6.根据权利要求l的化合物，其中n是2。7.权利要求1的式(I)化合物，选自(2E)""N-羟基-3-(4-{[(烯丙氧基)亚氨基]甲基}苯基)丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-{4-[(苯氧基亚氨基)甲基]苯基}丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-[4-({[(4-硝基节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-{4-[(肝基)甲基]苯基}丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-[4-({[(五氟节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]-丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-[4-({[(4-甲氧基羰基节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]-丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-{4-[(2-吗啉-4-基乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}—丙烯酰胺；(2E)-3-(4-{[(爷氧基)亚氨基]曱基}苯基)-N-羟基丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-(4-{[(4-氯苯甲酰基)亚联氨基]-曱基}苯基)丙烯酰胺；(2E)-N-(2-氨基苯基)-3-[4-({[(4-硝基千基)氧]亚氨基}-曱基)苯基]-丙烯酰胺；(2E)-N-羟基-3-(1H-吲咮-5-基)丙烯酰胺；(2E)-3-[4-((EH[(4-硝基节基)氧]亚氨基}甲基)苯基]丙烯酸；(2E)-3-(4-{[(爷氧基)亚氨基]甲基}苯基)丙烯酸；(2^)-N-羟基-3-{3-[(2-吗啉-4-基乙氧基亚氨基)甲基]-苯基}-丙烯酰胺盐酸盐；N-羟基-3-[4-({[(4-硝基节基)氧]亚氨基}-甲基)苯基]丙酰胺；(23-N-(2-氨基-苯基)-3-{4-[(2-吗啉-4-基-乙氧基亚氨基)甲基]_苯基}-丙烯酰胺盐酸盐；和(2i)-N-巯基-3-{4-[(4-硝基-爷氧基亚氨基)-甲基]-苯基}-丙烯酰胺。8.作为药物的权利要求1-19中任一项的化合物。9.制备根据权利要求l-7中任一项的化合物的方法，其包括，使4-甲酰基-肉桂酸或3-(4-甲酰基苯基)丙酸衍生物与羟胺衍生物反应。10.权利要求l-7中任一项的化合物在制备具有抗肿瘤活性的药物中的应用。11.权利要求l-7中任一项的化合物在制备用于治疗肿瘤病状的药物中的应用，其中所述肿瘤已经表现出对先前用于其治疗的抗肿瘤药物的抗药性，其中所述式(I)化合物会对所述抗药肿瘤产生化学敏化作用。12.根据权利要求10或11的应用，其中所述肿瘤选自肉瘤，癌，类癌，骨肿瘤，神经内分泌肿瘤，淋巴系白血病，急性早幼粒细胞白血病，髓细胞性白血病，单核细胞白血病，巨核细胞白血病和霍奇金病。13.根据权利要求10或11的应用，其中所述式(I)化合物与一种或多种已知的抗肿瘤剂相组合。14.根据权利要求13的应用，其中所述已知的抗肿瘤剂是全反式维甲酸。15.药物组合物，其含有作为活性成分的权利要求1_7中任一项的化合物，和至少一种药学可接受的赋形剂和/或稀释剂。16.用于治疗肿瘤病状的根据权利要求15的组合物。17.用于治疗肿瘤病状的根据权利要求15的组合物，其中所述肺瘤已经表现出对先前用于其治疗的抗肿瘤药物的抗药性，其中所述式(I)化合物会对所述抗药肺瘤产生化学敏化作用。18.根据权利要求16或17的组合物，其中所述肺瘤病状选自肉瘤，癌，类癌，骨胂瘤，神经内分泌肿瘤，淋巴系白血病，急性早幼粒细胞白血病，髓细胞性白血病，单核细胞白血病，巨核细胞白血病和霍奇金病。19.根据权利要求16或17的组合物，其中所述式(I)化合物与一种或多种已知的抗肿瘤剂组合施用。20.根据权利要求19的组合物，其中所述已知的抗肿瘤剂选自烷化剂，拓朴异构酶抑制剂，抗微管蛋白剂，嵌入化合物，抗代谢物，天然产物例如长春花生物碱，鬼臼乙叉甙，抗生素，酶，紫杉烷类，和细胞分化化合物。21.根据权利要求20的组合物，其中所述细胞分化抗肿瘤化合物是全反式维曱酸。22.制备前述权利要求15-21中的任何组合物的方法，其包括，混合权利要求l-7中任一项的化合物和合适的赋形剂和/或稀释剂。23.治疗遭受根据权利要求10-12中任一项的疾病的哺乳动物的方法，其包括，施用治疗有效量的权利要求1-7中任一项的化合物。全文摘要本发明描述了具有抗肿瘤和化学敏化活性的式(I)肉桂酸和苯丙炔酸衍生物。也描述了用于治疗肿瘤的含有上述化合物的药物组合物。文档编号C07C251/48GK101193854SQ200680020563公开日2008年6月4日申请日期2006年5月31日优先权日2005年6月10日发明者C·皮萨诺,F·祖尼诺,G·巴蒂斯图齐,G·詹尼尼,L·韦希,M·迪马尔佐,M·马尔齐,R·佩齐申请人:希格马托制药工业公司