新型磺化糖化合物及其医药应用的制作方法

专利名称：新型磺化糖化合物及其医药应用的制作方法
技术领域：
本发明涉及新型磺化糖化合物以及包含它的药物。
背景技术：
目前，在日本，恶性肿瘤、心脏病和脑血管疾病占据约60%的死亡原 因。其中，恶性肿瘤是头号致死原因，并且有不断增加的趋势。已知外科手 术、化疗和放疗是治疗恶性肿瘤的三种主要疗法。
近年来，越来越强调患者生活质量(QOL)，因而放疗受到更多的关注。 在普通放疗中，已知卣代嘧啶和低氧细胞增敏剂作为化学物质或药物可 与放疗同时给予，从而提高其治疗效果，更具体说作为可临床应用的放射增 敏齐U(例如，Radiobiology for the Radiologist(参见放射科医师的放射生物学)第 4版)，Eric J. Hall等，JB林考特公司(J. B. Lippincott Company) ("Houshasennkainotameno Hoshasenseibutsugaku" ， Muneyasu Urano 译， Shinoharashinsha. Inc.)。已知的卣代嘧啶的例子包括5-碘代脱氧尿苷。已知低 氧细胞增敏剂的例子包括米索硝唑。然而，这些已知的放射增敏剂很少实际 使用，因为它们可能导致胃肠道紊乱、外周神经毒性等副作用并涉及其他突 出的问题。
另一方面，为了提供新型放射增敏剂，申请由磺基吡喃糖基酰基甘油或 其盐组成的放射增敏剂的专利(日本专利申请KOKAI公开第2004-374445 号)。然而，在磺基吡喃糖基酰基甘油中，甘油部分2-位碳原子是不对称碳原 子，日本专利申请KOKAI公开第2004-374445号所述相对廉价而简单的合成 方法不能控制其立体结构，其中，烯丙基的末端双键经双羟基化而形成甘油 骨架。因此，产生比率约1:1的R/S非对映异构体。为了解决该问题，单独合 成各个非对映异构体，但该过程需要具有确定立体结构的甘油化合物在合成期间与糖化合物结合，导致合成过程复杂及成本大量增加等其他问题。
此外，磺基吡喃糖基酰基甘油化合物在甘油部分的2位产生R/S非对映 异构体，以及一定百分比的结构异构体(2-酰基异构体)，其中甘油1位的酰基 转移至分子间和/或分子内的2位。合成期间产生这些2-酰基异构体，保留在 溶液中。因此，即使单独制备各个非对映异构体，也非常难以提供高纯度的 磺基吡喃糖基酰基甘油化合物。
虽然磺基吡喃糖基酰基甘油化合物具有显著的放射增敏效果，但因为合 成和物理性质等问题，将其开发成为药物遇到了非常大的困难。
发明概述
本发明解决了上述问题。本发明的目的之一是提供实用的新型磺化糖化 合物和包含该化合物的药物，具体是提供可通过简单合成方法获得的高纯度 实用的新型磺化糖化合物以及包含该化合物的药物。
本发明者通过大量研究发现了解决上述问题的方法。更具体说，
(l)式(I)表示的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物或其药学上可接受的盐<formula>formula see original document page 4</formula>
其中，R,是脂肪酸的酰基残基，M代表氢或金属离子。
(2) 包含至少一种选自下组的化合物作为活性成分的药物根据(l)所述式
m的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的盐；和
(3) 根据(2)所述的药物，所述药物是放射增敏剂。
本发明提供了实用的新型磺化糖化合物和包含它的药物。具体说，本发 明提供了可通过简单合成方法获得的高纯度新型磺化糖化合物和包含它的药下面将描述本发明的效果，部分地受到本发明说明书和实施方式的限 定。通过附图和下面描述的内容将理解和实现本发明的效果。
附图简要说明
图l是aSQAPC18:0分析结果的色谱图。 图2是ccSQMG C18:0分析结果的色谱图。 图3显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图4显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图5显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图6显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图7显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图8显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图9显示了测试物质对肿瘤体积增加的影响。 图IO显示了测试物质对血管形成的影响。
本发明的最佳实施方式
根据本发明的一方面，提供了式(I)的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及 其药学上可接受的盐； [化学式3]
^~^l H H H HO t)H
式中，R^是脂肪酸的酰基残基，M代表氢离子或金属离子。 在本发明中，如果"R广是脂肪酸的酰基残基，则包含的碳原子数目为26 以下1以上，优选22以下。根据本发明提供脂肪酸酰基残基的脂肪酸可以是
S03M直链或支链、饱和或不饱和的脂肪酸。
本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物中包含的奎诺糖环可以是船形、 椅形、或混合形式，但通常是椅形，因为椅形通常较稳定。奎诺糖环中丙二
醇位点的立体构型可以是a端基异构体、p端基异构体或它们的混合物。
下文中本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物可称为"SQAF'或"SQAP化 合物"。术语"aSQAP Cm:n"中，"a"代表a端基异构体，"Cm:n"代表SQAP 的Ri基团中包含的碳原子数目为"m"，双键数目为"n"，其中"m"是1以上的 整数，"n"是0以上的整数。因此，例如，"aSQAP C18:0"代表磺基奎诺糖基 酰基丙二醇的a端基异构体，其中脂肪酸酰基残基中包含的碳原子数目为18， 双键数目为O。
制备本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物的方法可以是但不限于以下 方法。因为本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物不会在合成过程中产生新 的不对称碳原子，所以该化合物的制备容易、简单且纯度高。此外，化合物 可以结构稳定状态储存，因为Ri基团附近不存在容易导致转移的羟基。
"Ph，，代表苯基，"Bn，，代表苄基，"Ts"代表甲苯磺酰基，"SAc，，代表硫代乙 酰基，"M"代表氢离子或金属离子。<formula>formula see original document page 7</formula>
A) A-1.烯丙醇，三氟甲磺酸，80°C， 48小时；
A-2.苯甲醛二甲基縮醛，对甲苯磺酸一水合物，乙腈，40。C， 4小时；
B) 苄基溴，氢氧化钠，N，N-二甲基甲酰胺，室温，24小时；
C) 氢化锂铝，氯化铝，二氯甲垸，乙醚，回流加热，4小时；
D) 对甲苯磺酰氯，4-二甲基氨基吡啶，吡啶，室温；
E) 9-硼二环壬烷，四氢呋喃，室温，10小时；水，氢氧化钠，过氧化氢 水，室温，12小时；
F) 硫代乙酸钾，N,N-二甲基甲酰胺，90°C， 3小时；
G) 脂肪酸衍生物，吡啶，二氯甲垸，室温，2小时；
H) 过硫酸氢钾(Oxon),乙酸，乙酸钾，室温，48小时；和
I) 钯活性碳，氢气，乙醇，二氯甲垸，室温，48小时。
或者，经步骤A-F的途径制备化合物(7)之后，可通过以下步骤获得指定的化合物(10): [式1]
J)过硫酸氢钾，乙酸，乙酸钾，室温，48小时；
K)钯活性碳，氢气，甲醇，二氯甲垸，室温，16小时；和
L)脂肪酸，l-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐，4-二甲基氨基
吡啶，N，N-二甲基甲酰胺，从0'C到室温，18小时。
制备本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物的方法并不限于上述具体例
子，也可采用下面的其他方法。
"Ac"代表乙酰基，"MP"代表对甲氧基苯基，"PMB"代表对甲氧基节基，
"Ts"代表甲苯磺酰基，"SAc"代表硫代乙酰基，"M"代表氢离子或金属离子。 [化学式5]A'
B'
C'
-0
AcCf t)Ac
D'-1
D'-2
HO' OH H (7)
如
PMB(J t)PM已 PTs (8')
PMBC3
H'
力PM日 SQ3M (10〕
PMBC5 bPMB
S03M (12，
H
J'
PMBO
PMB《 '0PMB
A，)乙酸酐，乙酸钠，加热和煮沸； B，)氢溴酸-乙酸溶液，二氯甲垸，室温，6小时; C')烯丙醇，氰化汞，二氯甲垸，室温，16小时;
时;
D，)D，-1.甲醇钠，甲醇，室温，4小时；
D，-2.对茴香醛二甲基縮醛，对甲苯磺酸一水合物，乙腈，4(TC， 16小
E，)对甲氧基苄基氯，氢氧化钠，N,N-二甲基甲酰胺，室温，16小时； F)氢化锂铝，氯化铝，二氯甲烷，乙醚，(TC， l小时； G')对甲苯磺酰氯，4-二甲基氨基吡啶，吡啶，室温，16小时；H，)9-硼二环壬垸，四氢呋喃，室温，16小时；水，氢氧化钠，过氧化氢 水，室温，4小时；
I，)亚硫酸钠，乙醇，水，回流加热，72小时；
J，)脂肪酸衍生物，4-二甲基氨基吡啶，吡啶，二氯甲烷，回流加热，16
小时；和
K，) 2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌，二氯甲烷，甲醇，水，室温，4小时。
或者，根据本发明的一方面，可组合本领域技术人员已知的任何方法来 制备磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的盐。这些制备方法 也包括在本发明的范围内。
本发明式(I)表示的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的
盐的例子包括但不限于单价阳离子如钠和钾的盐，和二价阳离子如鈣和镁 的盐。
本发明的盐可通过上述合成方法，或者该合成方法的改良形式制备。或 者，可对上述方法合成的产物进行已知的离子交换处理以获得所需的盐。这 些合成本发明的盐的方法也包括在本发明范围内。
本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的盐具有显著 的药理学作用，如放射增敏作用和抗肿瘤作用。
因此，根据本发明的另一方面，磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药 学上可接受的盐可以是利用其药理学作用的药物。
根据本发明的另一方面，磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可 接受的盐具有增敏效果作为其第一药理学作用。因此，磺基奎诺糖基酰基丙 二醇化合物及其药学上可接受的盐可以是放射增敏剂。
本发明放射增敏剂可用于治疗恶性肿瘤。恶性肿瘤的例子包括但不限 于神经源性肿瘤，例如脑肿瘤；鳞状细胞癌和腺癌，例如头颈癌、皮肤 癌、食道癌、甲状腺癌、胃癌、肺癌、胆囊癌、胆道癌、胰腺癌、肝癌、前 列腺癌、子宫癌、卵巢癌、乳腺癌、肾癌、膀胱癌和结肠癌；以及黑色素 瘤，骨瘤，软组织肿瘤和淋巴瘤，白血病，骨髓瘤。本文所用术语"治疗" 表示减少、破坏和/或抑制上述恶性肿瘤的增殖。
10本发明放射增敏剂可包含有效量的至少一种选自下组的化合物作为活性 成分式(I)代表的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的盐。 放射增敏剂可包含具有式(I)中取代基Ri不同的一种以上的化合物。此外，放 射增敏剂可与其他放射增敏剂、抗肿瘤药、或具有药理学活性和/或药学活性 的其他物质联用而不影响其活性。
下文中，由本发明式(I)的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可 接受的盐构成的化合物可称为"本发明放射增敏物质"。
本发明放射增敏物质可口服给药或胃肠外给药。根据这些给药途径，本 发明放射增敏物质可与适当的药学上可接受的药物添加剂如赋形剂或稀释剂 组合物混合来制备药物制剂。本发明放射增敏剂可包含有效量的本发明放射 增敏物质，或者可以是如上所述药物制剂的形式。
适用于口服给药的剂型的例子包括固体、半固体、液体和气体剂型， 具体例子包括但不限于片剂、胶囊、粉末剂、颗粒剂、溶液剂、混悬剂、
糖浆剂、酏剂和气雾剂。
当本发明放射增敏物质胃肠外给药时，可通过例如注射、透皮给予、直 肠给予或眼内给予等途径给药。
注射给药可通过例如皮下、皮内、静脉内、肌内注射进行。
可根据以下因素适当建立和调节给予本发明放射增敏物质的条件(例如， 剂量、给药频率和给药间隔)剂型，给药途径，需治疗的疾病，例如恶性肿 瘤状态(例如类型、位置和阶段)，诸如联合用药等条件(例如，有或没有联合 用药，联合用药的类型、剂量、给药频率和时机，联合用药与本发明放射增 敏物质的给药顺序)，与放疗联用的方式(例如，联用时机以及本发明放射增敏 物质的给药顺序)，需治疗的对象的状况(例如，体重、性别和年龄)。
例如，放射增敏物质的剂量可以是但不限于口服给药0.001-100毫克/ 千克体重/天，注射给药0.001-50毫克/千克体重/天，透皮给药0.001-100毫克/ 千克体重/天，直肠给药0.001-50毫克/千克体重/天，或眼内给药每天多次滴 加约0.001-0.3重量％的溶液。
在放射治疗中，放射类型、剂量和频率可遵循常规放疗条件。具体说， 通过照射医疗辐射进行人体常规放射治疗，所述医疗辐射包括x射线、y射线、电子射线、|3射线、或其他粒子束如7t-介子、中子或重粒子束，每次照射
剂量约为0.1-100 Gy，持续时间一周到6个月以实现总照射剂量约10-500 Gy。人体放疗的典型例子包括但不限于每次用剂量2Gy的X射线照射，共 5次，持续约6周，总剂量60Gy。例如，可降低照射剂量和频率。放疗方法 的其他例子包括适形放疗，立体定向照射(其中，用定点精度射向恶性肿瘤 病灶)或强度调节的放疗。此外，也可利用密封放射源的照射，？射线远程放 疗，或用粒子束照射。可提高每次照射剂量，采用内照射可降低照射持续时 间。
放射疗法和给予本发明放射增敏剂可同时进行或相继进行。在这种情况 下，预计本发明放射增敏剂用作与放射疗法联用的抗肿瘤药。因此，根据本 发明的另一方面，本发明新型磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物或其药学上可 接受的盐可以是与放射疗法联用的抗肿瘤药。
如放射治疗领域的技术人员所知，健康从业人员或其他专家可根据以下 因素适当选择放射疗法以及给予本发明放射增敏剂的条件，这些因素包括例 如放射源的类型、照射方法、照射位置和持续时间；增敏剂的类型、给药 途径和时机；需治疗的疾病的类型和严重性；以及接受照射的对象的年龄、 体重、健康状况和病史。
此外，根据本发明另一方面，提供了治疗放射疗法能够有效对抗的疾病 的疗法，包括给予需要这种物质的对象有效量的放射增敏物质。术语"放射 疗法能够有效对抗的疾病"表示对上述恶性肿瘤进行的放射疗法能够有效治 疗的疾病。关于放射增敏物质及其给药方法和条件的详细内容如上所述。
本发明疗法可包括在放射疗法之前或之后，或与放射疗法同时给予需要 这种物质的对象有效量的放射增敏物质。
根据本发明另一方面，磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接 受的盐具有抗肿瘤效果作为其第二药理学作用。更具体说，它能协同地提高 放疗效果，单独使用时可抑制恶性肿瘤。因此，磺基奎诺糖基酰基丙二醇化 合物及其药学上可接受的盐可以是抗肿瘤药。
如果磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的盐用作抗肿瘤 药，它们可以上述放射增敏剂相同的方式使用，只是不与放射疗法联用。
12在这种情况下，可根据以下因素适当建立和调节给予磺基奎诺糖基酰基 丙二醇化合物的条件(例如，剂量、给药频率和给药间隔)，这些因素包括剂 型，给药途径，需治疗的疾病，例如恶性肿瘤状态(例如类型、位置和阶段)， 诸如联合用药等条件(例如，有或没有联合用药，联合用药的类型、剂量、给 药频率和时机，联合用药与本发明放射增敏物质的给药顺序)，需治疗的对象 的状况(例如，体重、性别和年龄)。
实施例
下面描述本发明的实施例，但本发明并不限于此。
<合成实施例>
下面以a-磺基奎诺糖基硬脂酰丙二醇的钠盐为例，描述了制备本发明磺 基奎诺糖基酰基丙二醇化合物的过程。HO"''
A-1
HO， 一&H
C
BnO OBnOTs (5)
D
BnO 0已n〇Ts
(6)
BnO'、
BnO 0已nSAc
G
(8)
BnO OBnS03N3
BnO OBn
(10)
A) A-1.烯丙醇，三氟甲磺酸，80°C， 48小时；
A-2.苯甲醛二甲基縮醛，对甲苯磺酸一水合物，乙腈，40。C， 4小时，20.2%;
B) 苄基溴，氢氧化钠，N,N-二甲基甲酰胺，室温，24小时，84.4%;
C) 氢化锂铝，氯化铝，二氯甲垸，乙醚，回流加热，4小时，90.2%;
D) 对甲苯磺酰氯，4-二甲基氨基吡啶，吡啶，室温，16小时，87.9%;
E) 9-硼二环壬烷，四氢呋喃，室温，10小时；水，氢氧化钠，过氧化氢水，室温，12小时，94.4%;
F) 硫代乙酸钾，N,N-二甲基甲酰胺，90°C， 3小时，90.8%;
G) 硬脂酰氯，吡啶，二氯甲烷，室温，2小时，97.4%;
H) 过硫酸氢钾，乙酸，乙酸钾，室温，48小时，88.6%;和
I) 钯活性碳，氢气，乙醇，二氯甲烷，室温，48小时，79.4%。根据本发明的一方面，采用上述方案由步骤A-I获得最终产物Ct-磺基奎诺糖基硬脂酰丙二醇的钠盐。
实施例1-1
步骤A: l-0-烯丙基-4，6-0-苯亚甲基-a-D-P比喃葡糖苷(2)将原料化合物(l) (100 g， 555 mmol)悬浮在烯丙醇(500 ml)中，加入(TC的三氟甲磺酸(l.OO ml)，将反应液在80。C剧烈搅拌48小时。证实反应充分进行后，加入三乙胺(3 ml)终止反应，将反应液减压浓縮。然后，将残留物悬浮在无水乙腈(500ml)中，加入苯甲醛二甲基縮醛(127g， 1.5当量)和对甲苯磺酸一水合物(5.28 g， 0.05当量)。反应液在40。C搅拌4小时，加入三乙胺(10 ml)终止反应，并将反应液减压浓縮。残留物倒入己烷(2000 ml)和水(500 ml)中，剧烈搅拌该混合液。过滤收集产生的沉淀物，用水和己烷洗涤。沉淀物在加热乙醇中结晶2次，得到无色针状结晶形式的标题化合物(2) {34.5 g (112謹ol)， 20.2%}。23D +97.5。 (cl.00 CH3OH)， LRMS 331m/z (M+Na)+，熔点139-141°CiHNMR(400画z， CD3OD); 5 7.51-7.47 (m， 2H， ArH)， 7.37-7.32 (m，3H， ArH)， 5.99(dddd， 1H， J=17.2， 10.5， 6.08， 5.32 Hz， H2)， 5.56 (s， 1H，PhCH)， 5.36 (dq， 1H， J=17.3， 1.68 Hz， H3a)， 5.20 (ddt， 1H， J=10.4， 1.80，1.28 Hz， H3b)， 4.88 (d， 1H， J=3.86 Hz， Hl，)， 4.25-4.18 (m， 2H， Hla和H6，a)， 4.07(ddt, 1H， J=13.0， 6.10， 1.36 Hz， Hlb)， 3.85 (t， 1H， J=9.38 Hz，H3，)， 3.81-3.71 (m， 2H， H5，和H6，b)， 3.52 (dd， 1H， J=9.38， 3.86 Hz， H2')，
3.45 (t， 1H， J=9.24Hz， H4，)。
13c NMR (100 MHz， CD3OD); 5 139.1 (Ar-本位)，135.4 (C2), 129.9
(Ar)， 129.0 (Ar), 127.5 (Ar)， 117.8 (C3)， l(B.O (PhCH)， 100.0 (Cl，)， 82.9(C4,)， 74,0 (C2,)， 72.0 (C3，)， 69.9(C6')， 69.7 (Cl)， 64.1 (C5)。[化学式7]HO— t)H实施例1-2
步骤B; l-0-烯丙基-2,3-二-0-节基-4,6-0-苯亚甲基-a-D-吡喃葡糖苷(3)向化合物(2) (30.0 g， 97.3 mmol)在无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF， 300 ml)的溶液中加入苄基溴(41.6g， 2.5当量)和氢氧化钠(11.7 g， 3.0当量)，反应液在室温下剧烈搅拌24小时。证实反应充分进行后，将反应液倒入冷水(900ml)中，用乙酸乙酯萃取(3 x 300 ml)。合并有机层，用饱和盐水洗涤(2 x 100ml)，用硫酸钠干燥，过滤，减压浓縮。所得残留物在加热乙醇中结晶2次，得到无色针状结晶形式的标题化合物(3)(33.5g)。浓縮滤出液，用硅胶色谱纯化(己垸-乙酸乙酯，15:1 — 10:1 ~> 8:1)，由加热乙醇结晶得到化合物(3) (6.63g) {共40.1 g (82.1 mmol)， 84.4%}。26D -1.46°(cl.03 CHCl3)， LRMS m/z 511 (M+Na)+，熔点86-87°C 。lH NMR (400 MHz， CDCI3); 5 7.50-7.47 (m， 2H， ArH)， 7.40-7.24 (m，13H， ArH)， 5.94 (dddd， 1H， J=17.0， 10.4， 6.70， 5.24 Hz， H2)， 5.56 (s，
1H， PhCH)， 5.33 (dq， 1H， J=17.2， 1.56 Hz， H3a)， 5.24 (ddt， 1H， J=10.3，1,56, 1.12 Hz， H3b)， 4.92 (d， 1H， J=11.2 Hz， ArCH》，4.84 (d， 1H，
J=11.2Hz， ArCH2)， 4.83 (d， 1H， J=12.1 Hz， ArCH2)， 4.80 (d， 1H， J=3.76Hz， Hl，)， 4.68 (d， 1H， J=12.1 Hz， ArCH2)， 4.26 (dd， 1H， J=10.2， 4.84
Hz， H6，a)， 4.18 (ddt， 1H， J=12.9， 5.18， 1.40 Hz， Hla)， 4,79 (t， 1H，J=9.30Hz， H3')， 4.03(ddt， 1H， J=12.9， 6.68， 1.20 Hz， Hlb)， 3.89 (dt， 1H，J=9.96， 4.80 Hz， H5，)， 3.70 (t， 1H， J=10.3 Hz， H6，b)， 3.61 (t， 1H， J=9.44Hz， H4，)， 3.57 (dd， 1H， J=8.72， 3.80 Hz， H2，)。
13C NMR (100 MHz, CDCI3); 5 138.7 (Ar-本位)，138.1 (Ar-本位)，
137.3 (Ar-本位)，133.5 (C2)， 128.9-127.5 (m， Ar)， 126,0 (Ar)， 118.4 (C3)，101.2 (PhCH)， 96.7 (Cr)， 82.1 (C3')， 79.1 (C2，)， 78.6 (C4，)， 75.3 (ArCH》，
73.6(ArCH2)， 69.0 (C6')， 68.4 (Cl)， 62.5 (C5')。<formula>formula see original document page 17</formula> <formula>formula see original document page 17</formula>
实施例1-3
步骤C; l-0-烯丙基-2，3,4-三-0-苄基-a-D-吡喃葡糖苷(4)将氢化铝锂(2.02 g， 1.3当量)悬浮在无水二氯甲烷(100 ml)和无水乙醚(100 ml)的混合溶液中，加入化合物4 (20.0 g， 40.9 mmol)。然后，向反应液中加入200ml氯化铝(7.09g， 1.3当量)的无水乙醚溶液，将该混合液在回流加热下搅拌4小时。证实反应充分进行后，缓慢逐滴加入水(IOmI)，静置过夜后过滤收集沉淀物，然后用乙醚洗涤沉淀物。滤液用水洗涤(2 x 100 ml)，合并水层并用乙醚萃取(2 x 100 ml)。合并有机层并用饱和盐水洗涤(2 x 200 ml)，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓縮。所得残留物用硅胶色谱纯化(己烷-乙酸乙酯，5:1 — 4:1 — 3:1 ~> 2:1)，得到无色油状物形式的标题化合物4 {18.1 g(36.9mmo1), 90.2%}。22D +45.0° (cl.21 CHCl3)， LRMS m/z 513 (M+Na)+。lH NMR (400 MHz， CDCI3); 5 7.37-7.26 (m， 15H， ArH)， 5.92 (dddd，1H， J=17.1， 10.4， 6.66， 5.24 Hz, H2)， 5.31 (dq， 1H， J=17.2， 1.52 Hz，
H3a)， 5.22(ddt， 1H， J=10.3， 1.46， 1.10 Hz， H3b)， 5.00 (d， 1H， J=10.9 Hz,ArCH2)， 4.89 (d， 1H， J-11.0 Hz， ArCH2)， 4.84 (d， 1H， J=10.9 Hz，ArCH2)， 4.77 (d， 1H， J=12.0 Hz， ArCH2)， 4.77 (d， 1H， J=3.60 Hz， Hl，)，4.65 (d， 1H， J=12.1 Hz， ArCH2)， 4.64 (d， 1H， J=U.0Hz, ArCH2)， 4.14(ddt， 1H， J=12.9， 5.22， 1.34 Hz， Hla)， 4.04 (t， 1H， J=9.36 Hz， H3，)，3.99(ddt， 1H， J=12.9， 6.64， 1.08 Hz， Hlb)， 3.79-3.66 (m， 3H， H5，和H6，a和H6,b)， 3.54 (t， 1H， J=9.28 Hz， H4')， 3.51 (dd， 1H， J=9.60， 3.64 Hz，H2，)， 1.69 (t， 1H， J=12.0Hz， 6，-0H)。
13c NMR (100 MHz， CDCI3); 5 138.7 (Ar-本位)，138.1 (Ar-本位)，
138.1 (Ar-本位)，133.6 (C2)， 128.4-127,6 (m， Ar)， 118.3 (C3)， 95.6 (Cl，)，
1781.9 (C3')， 79.9 (C2'), 77.3 (C4，) ， 75.7 (ArCH2) ， 75.0 (ArCH2) ， 73.2(ArCH2)， 70.8(C5，)， 68.2 (Cl)， 61.7(C6')。25D +32.1°(cl.02 CHC13)， LRMS m/z 667 (M+Na)+，熔点86-87。C 。JH NMR (400顧z， CDCI3); S 7.76 (ddd， 2H， J=8.32， 1.96， 1.76 Hz，ArH)， 7,35-7.26 (m， 15H， ArH)， 7.17-7.12 (m， 2H， ArH)， 5.88 (dddd， 1H，J=17.2， 10,3， 6.62， 5.24 Hz， H2), 5.28 (dq， 1H， J=17.2， 1.56 Hz, H3a)，
5.20 Cddt， 1H， J=10,3， 1.60， 1.12 Hz， H3b)， 4.99 (d， 1H， J=10.9 Hz，ArCH力，4.82 (d， 1H， J-10.6 Hz， ArCH2)， 4.78 (d， 1H， J-10.8 Hz，ArCH2)， 4,74 (d， 1H， J-12.1 Hz， ArCH2)， 4.72 (d， 1H， J=3.58 Hz， Hl，)，4.62 (d, 1H， J=12.1 Hz， ArCH2)， 4.42 (d， 1H, J=10.6 Hz， ArCH2)， 4.22(dd， 1H， J=10.5， 4.20 Hz， H6，a)， 4.16 (dd， 1H， J=10.5， 2.12 Hz， H6，b)，4.07 (ddt， 1H， J=12.9， 5.24， 1.40 Hz， Hla)， 3.98 (t， 1H， J=9.24 Hz， H3')，3.93 (ddt， 1H， J=12.9， 6.64， 1.16 Hz， Hlb)， 3.81 (ddd， 1H， J=10.1， 4.12， 2.04 Hz， H5')， 3.48 (dd， 1H， J=9,62， 3.58 Hz， H2')， 3.45 (dd， 1H， J=10.0， 8.90 Hz， H4，)， 2.39 (s， 3H， Ts-Me)。
13C NMR (100 MHz， CDC13); S 144.8 (Ar-本位)，138.5 (Ar-本位)，
137.9 (Ar-本位)，137.7 (Ar-本位)，133.4 (C2)， 132.8 (Ar-本位)，129.8 (Ar)， 128.4-127.6 (m， Ar)， 118.4 (C3)， 95.4 (Cl，)， 81,8 (C3，)， 79.6 (C2，)， 76.9 (C4，)， 75.7 (ArCH2), 75.0 (ArCH2)， 73.2 (ArCH2)， 68.6 (C5')， 68.5 (C6')，
68.3 (Cl)， 21.6(Ts陽Me)。 [化学式10]
实施例1-5
步骤E; 1-0(2，3，4-三-0-节基-6-0-甲苯磺酰基-01-0-吡喃葡糖基)-丙-1，3-二醇(6)
0°C，在氩气气氛中，向化合物(5) (29.0 g， 45.0 mmol)的无水四氢呋喃 (THF， 150 ml)溶液中加入0.5 M 9-硼二环[3，3,l]壬烷(9-BBN)的四氢呋喃(180 ml， 90.0 mmol)溶液。经过1小时后，使反应液回到室温并继续搅拌10小 时。反应液再次冷却至O"C，先加水(20ml)，然后相继加入3M氢氧化钠溶液 (70 ml)和35%过氧化氢溶液(70 ml)。经过1小时后，反应液回到室温并搅拌 12小时。证实反应充分进行后，溶液用乙酸乙酯萃取(3 x 100 ml)，合并有机 层，用饱和盐水洗涤(2 x 100 ml)，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓縮。所得残 留物用硅胶色谱纯化(己烷-乙酸乙酯，3:2 ~> 1:1—2:3)，得到无色油状物形式 的标题化合物(6) {28.2 g (42.5 mmol)， 94.4%}。24D +26.6° (cl .02 CHC13)， LRMS m/z 685 (M+Na)+。
lH NMR (400画z， CDCI3); S 7.76-7.74 (m， 2H， ArH)， 7.35-7.26 (m，15H， ArH)， 7.16-7.12 (m， 2H， ArH)， 4.94 (d, 1H， J=10.9 Hz， ArCH2)， 4.82 (d， 1H， J=10.7Hz， ArCH2)， 4.77 (d， 1H， J=10.9Hz， ArCH2)， 4.75 (d， 1H， J=12.0 Hz， ArCH2)， 4.61 (d， 1H， J=12.0 Hz， ArCH2)， 4.61 (d， 1H， J=3.64Hz， Hl，)， 4.43 (d， 1H， J=10.7Hz， ArCH2)， 4.20-4.13 (m， 2H， H6，a 和H6，b)， 3.92 (t， 1H， J=9.24 Hz， H3，)， 3.84-3.74 (m， 4H， Hla和H3a和 H3b和H5，)， 3.48-3.40 (m， 3H， Hlb和H2，和H4')， 2.52 (t， 1H， J=4.74 Hz， 3-OH)， 2,39 (s， 3H， Ts陽Me)， 1.88-1.75 (m， 2H， H2a和H2b)。
13C NMR (100 MHz， CDC13); 5 144.8 (Ar-本位)，138.4 (Ar國本位)，
137.9 (Ar陽本位)，137.6 (Ar-本位)，132.7 (Ar-本位)，129.8 (Ar)， 128.5-127.6 (m， Ar)， 97.1 (Cr)， 81.8 (C3')， 79.5 (C2')， 76.8 (C4，)， 75.6 (ArCH2)， 75.0 (ArCH2)， 73.4 (ArCH2)， 68.7 (C5')， 68.6 (C6，)， 67.5 (Cl)， 61.5 (C3)， 31.5 (C2)， 21.6(Ts-Me)。 [化学式ll]
实施例1-6
步骤F; 1-0-(2,3，4-三-0-苄基-6-硫代乙酰基-01-0-吡喃奎诺糖基)-丙-1,3-
二醇(7)
向化合物(6) (28.2 g， 42.5 mmol)的无水DMF (300 ml)溶液中加入硫代乙 酸钾(7.28 g， 1.5当量)，将混合物在9(TC搅拌3小时。证实反应充分进行 后，反应液倒入冷水中(900 ml)，用乙酸乙酯萃取(3 x 300 ml)。合并有机层， 用饱和盐水洗涤(2 x 200 ml)，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓縮。所得残留物 用硅胶色谱纯化(己垸-乙酸乙酯，2:1 — 3:2 — — 2:3)，得到淡棕色油状物 形式的标题化合物(7) {21.9 g (38.6 mmol)， 90.8%}。23D +33.0°(cl.02 CHCl3)， LRMS m/z 584 (M+Na)+。 !HNMR(400画z， CDCI3); 5 7.37-7.24 (m， 15H， ArH)， 4.95 (d， 1H,J=10.8 Hz， ArCH2)， 4,89 (d， 1H， J=10.6 Hz， ArCH2)， 4.80 (d， 1H， J=10.8 Hz， ArCH2)， 4.77 (d， 1H， J=12,l Hz， ArCH2)， 4.63 (d， 1H， J=12.0 Hz， ArCH力，4.63 (d， 1H， J=3.52 Hz， Hl，)， 4.61 (d， 1H， J=10.7Hz， ArCH2)，
3.94 (t， 1H， J=9.22 Hz， H3')， 3,88 (ddd， 1H， J=9.86， 6.10， 4.88 Hz， Hla)，
3.83-3.73 (m， 3H， H3a和H3b和H5')， 3.50 (dd， 1H， J=9.60， 3.64 Hz， H2')，
3.45 (ddd, 1H， J=9.92， 5.24， 2.28 Hz， Hlb)， 3.41 (dd， 1H， J=13.6， 3.00
Hz， H6，a)， 3.30 (dd， 1H， J=9.54， 9.06 Hz， H4')， 3.02 (dd， 1H， J=13.7，
7.64 Hz， H6，b)， 2.67 (br， 1H， 3-OH)， 2.32 (s， 3H， SAc-Me)， 1.92-1.78 (m，
2H， H2a和H2b)。
13c NMR (100 MHz， CDC13); 5 195.0 (SAC-C=0)， 138,5 (Ar-本位)，
137.9 (Ar-本位)，137.8 (Ar-本位)，128.5-127.6 (m， Ar)， 96.9 (Cl，)， 81.8 (C3')， 80.4 (C4，)， 79.8 (C2')， 75.7 (ArCH2)， 75.2 (ArCH2)， 73.4 (ArCH2)，
69.5(C5，)， 67.2 (Cl)， 61.5 (C3)， 31.5 (C2)， 30.8(C6')， 30.5 (SAc-Me)。
OTs (6) ,SAc (7)
实施例1-7
步骤G; 3-O-(2,3，4-三-O-节基-6-硫代乙酰基-0t-D-吡喃奎诺糖基)-l-O-硬 脂酰-丙-1,3-二醇(8)
向化合物(7) (21.9 g， 38.6 mmol)的无水二氯甲烷(200 ml)溶液中加入硬脂 酰氯(15.2 g， 1.3当量)和无水吡啶(5 ml)，将该混合物在室温下搅拌2小时。 证实反应充分进行后，加入甲醇(5 ml)终止反应，混合物减压浓縮。将残留物 悬浮在少量乙酸乙酯中，倒入水中(200m1),，用乙酸乙酯萃取(3 x 100ml)。合 并有机层，用饱和盐水洗涤(2 x 100 ml)，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓縮。 所得残留物用硅胶色谱纯化(己垸-乙酸乙酯，10:1 8:1 ■> 6:1)，得到无色油 状物形式的标题化合物(8){31.3 g (37.6 mmol)， 97.4%}。[a]23D +29.5° (cl.Ol CHCl3)， LRMS 855 m/z (M+Na)+。
醒R (400 MHz， CDCI3); 5 7.35-7.25 (m， 15H， ArH)， 4.98 (d， 1H， J=10.8Hz， ArCH2)， 4.89 (d， 1H， J=10.6 Hz， ArCH2)， 4.80 (d， 1H， J=10.8 Hz， ArCH2)， 4.76 (d， 1H， J=12.0 Hz, ArCH2)， 4.66 (d， 1H， J=3.60 Hz， Hl，)， 4.63 (d， 1H， J=12,l Hz， ArCH2)， 4,62 (d， 1H， J=10.7 Hz， ArCH2)， 4.23-4.14 (m， 2H， Hla和Hlb)， 3.96 (t， 1H， J=9.20 Hz， H3')， 3.78 (ddd， 1H， J=9.68， 7.56, 2.92 Hz， H5，)， 3.72 (dt， 1H， J=10.0， 6.40 Hz， H3a)， 3.50 (dd， 1H， J=9.64， 3.60 Hz， H2')， 3.43 (dt， 1H， J=9.72， 6.36 Hz, H3b), 3,41 (dd， 1H， J=13.6， 2.96 Hz， H6，a)， 3.31 (t， 1H， J=9.24 Hz， H4，)， 3.05 (dd， 1H， J=13,6， 7.56 Hz， H6，b)， 2.33 (s， 3H， SAc-Me), 2.29 (t， 2H， J-7.68 Hz， COCH2)， 1.95 (f， 2H， J=6.40 Hz， H2a和H2b)， 1.61 (f， 2H, J=7.24 Hz， COCH2CH2)， 1.25 (br， 28H，國CH2-)， 0.88 (t， 3H， J=6.84 Hz， Me)。
13c NMR (100丽z， CDC13); 5 194.8 (SAc-OO)， 173.8 (C=0)， 138,6
(Ar-本位)，138.1 (Ar-本位)，137.8 (Ar-本位)，128.4-127.6 (m， Ar)， 96.8(Cl')， 81.7 (C3，)， 80.4 (C4,)， 80.1 (C2，) ， 75.7 (ArCH2) ， 75.2 (ArCH2) ， 73.2 (ArCH2)， 69.4 (C5')， 64.6 (C3)， 61.2 (Cl)， 34.3 (COCH2)， 31.9 (-CH2-)， 30.9 (C6，) ， 30.5 (SAc-Me) ， 29.7-29.2 (m ， -CH2-) ， 28.7 (C2) ， 25.0 (COCH2CH2)， 22.7(-CH2-)， 14.1 (Me)。 [化学式13]
实施例1-8
步骤H; 3-0-(2,3,4-三-0-苄基-6-磺基-00-卩比喃奎诺糖基)-1-0-硬脂酰-丙-1,3-二醇钠盐(9)
向化合物(8) (31.3 g， 37.6 mmol)的乙酸(450 ml)溶液中加入过硫酸氢钾(46.2 g)和乙酸钾(11.3 g)，将该混合物在室温下剧烈搅拌48小时。证实反应 充分进行后，将反应液倒入冷却的7.5M氢氧化钠溶液(1000ml)中，用乙酸乙 酯萃取(4 x 200 m)。合并有机层，用饱和碳酸氢钠溶液(2 x 200 ml)和饱和盐 水(2 x 200 ml)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓縮。所得残留物用硅胶色 谱纯化(二氯甲垸-甲醇，15:1 — 10:1—8:1)，得到无色蜡状物形式的标题化合 物(9) {28,7 g (33.3 mmol)， 88.6%}。
〖a]23D +29.0°(cl.l6 CHCI3), LRMS m/z 837 (M-Na)-。 iHNMR(400顧z， DMS0-d6); S 7.36-7.22 (m， 15H， ArH)， 4.85 (d， 1H， J=U.2 Hz， ArCH2)， 4.81 (d， 1H， J=3.72 Hz， Hl,)， 4.79 (d， 1H， J=11.4Hz， ArCH2)， 4.69 (d， 1H， J=11.2Hz， ArCH2)， 4.65 (d， 1H， J=12.0 Hz， ArCH2)， 4.61 (d， 1H， J=12.0 Hz， ArCH2)， 4.58 (d， 1H， J=11.4 Hz， ArCH2)， 4.19-4.10 (m， 2H， Hla和Hlb)， 4.05-3.96 (m， 2H， H3a和H5')， 3.79 (t， 1H， J-9.14 Hz， H3，)， 3.47 (dd， 1H， J=9.56， 3.60 Hz， H2')， 3.38 (dt， 1H， J=10.1， 6.20 Hz ， H3b)， 3.20 (dd， 1H， J=9.80， 9.00 Hz， H4')， 2.94 (dd, 1H， J=13.9， 1.16 Hz， H6，a)， 2.63 (dd， 1H， J=14.0， 9.06 Hz， H6，b)， 2.29 (t， 2H， J=7.38 Hz， COCH2)， 1.86 (f， 2H， J=6.36 Hz， H2a和 H2b)， 1,52 (f， 2H， J=7.12 Hz， COCH2CH2)， 1.23 (br， 28H， -CH2-)， 0.85
(t， 3H， J=6.84Hz， Me)。
13c NMR (1 00顧z， DMS0-d6); S 172.9 (C=0)， 138.9 (Ar-本位)，
138.6 (Ar-本位)，138.6 (Ar-本位)，128.2-127.3 (m， Ar)， 95.0 (Cl，)， 81.4 (C3，)， 80.5 (C4')， 80.0 (C2,)， 74.4 (ArCH2)， 73.7 (ArCH2)， 71.4 (ArCH2)， 67.3 (C5')， 63.4 (C3)， 61.5 (Cl)， 52.8 (C6')， 33.6 (COCH2)， 31.3 (-CH2-)， 29.0-28.4 (m， C2禾口-CH2-)， 24.5 (COCH2CH2)， 22.1 (-CH2-)， 13,9 (Me)。 [化学式14]
BnO ' ' 一
BnO bBn实施例1-9
步骤I; 3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-硬脂酰-丙-l,3-二醇钠盐(10) 向化合物(9) (28.7 g， 33.3 mmol)的乙醇(400 ml)和二氯甲烷(150 ml)溶液 中加入10%钯活性碳(7.00 g)，将该混合物在氢气气氛中室温搅拌48小时。 证实反应充分进行后，过滤去除钯活性碳，减压浓縮滤出液。所得残留物用 硅胶色谱纯化(二氯甲烷-甲醇，10:1 — 5:1 — 3:1—2:1 — 1:1)，由98%加热 乙醇沉淀，得到无色粉末形式的标题化合物(10){15.6 g (26.4 mmol)， 79.4%}。22D +49.6。 (cl.00 H20)， LRMS m/z 567 (M-Na)-' HRMS理论值 C27H5iOioS (M-Na)- 567.3208，测定值567.3210。
丄H NMR (400 MHz, DMSO-d6); 5 5.40 (d, 1H， J=3.48Hz， 4，-OH)， 4.58 (d， 1H， J=4.64 Hz， 3，-OH)， 4.56 (d， 1H， J=3.72 Hz， Hl，)， 4.45 (d， 1H， J=6.52 Hz， 2，-OH)， 4.15-4.06 (m， 2H， Hla和Hlb)， 3.84-3.78 (m， 2H， H3a和H5')， 3,42-3.34 (m， 2H， H3b和H3')， 3.19 (ddd， 1H， J=9,62， 6.50， 3.76 Hz， H2')， 2.98-2.91 (m， 2H， H4，和H6，a)， 2.63 (dd， 1H， J=14.0， 6.00 Hz， H6，b)， 2.28 (t， 2H， J=7.40 Hz， COCH2)， 1.86-1.80 (m， 2H， H2a和 H2b)， 1.55-1.48 (m， 2H， COCH2CH2)， 1.24 (br， 28H， -CH2_)， 0.86 (t， 3H，
J=6.84Hz， Me)。
13c NMR (100固z， DMSO-d6); S 172.8 (C=0)， 98.2 (Cl，)， 74.7 (C4')，
73.1 (C3')， 71.8 (C2')， 68.2 (C5')， 63.4 (C3)， 61.2 (Cl)， 55,1 (C6')， 33.4 (COCH2)， 31.2 (-CH2-)， 28.9-28.4 (m， C2和-CH2-)， 24.4 (COCH2CH2)，
22.0(-CH2-)， 13.8 (Me)。
BnO
(9)
HO"
(10)
"'i(X^^x^OC18:0
BnO OBn HO 将2.15 g 3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖萄-l-0-硬脂酰-丙-l,3-二醇钠盐溶
<formula>formula see original document page 24</formula>解在60 ml水中，吸附于WAKOGEL 100C18 (WP化学工业有限公司(Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)制造)柱，将500 ml 1%的氯化转溶液倒入柱中 进行取代，用500 ml蒸馏水洗涤。然后，分别用200ml 50%、 80%和100%的 甲醇进行洗脱，由98%加热乙醇再沉淀，得到1.47 g 3-0-(6-磺基-a-D-卩比喃奎 诺糖基)-l-0-硬脂酰-丙-l,3-二醇钙盐。
虽然未在实施例还示出，以相同的柱处理方式，通过用氯化镁或氯化钾 溶液代替而得到镁盐或钾盐。
作为a-磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物的其他例子，下面描述了脂肪酸 的酰基残基内具有22、 14、 10、 6、 2和l个碳原子的a端基异构体化合物。
实施例II-1
3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-癸酰基-l,3-二醇钠盐
以实施例1相同的方式合成标题化合物，只是在步骤G中用癸酰氯作为 脂肪酸衍生物。22D +57.9。 (c 0.76， H20)， LRMS m/z 455 (M-Na)-, HRMS理论值 C19H350ioS (M匿Na)' 455.1956，测定值455.1954。
iH NMR (400廳z， DMSO-d6) ; S 5.40 (d， 1H， J=3.1 Hz， 4'-OH)， 4.65 (d， 1H， J=4.7 Hz， 3，-OH)， 4.56 (d， 1H， J=3.7 Hz， Hl，)， 4.52 (d， 1H， J=6.48Hz， 2，-OH)， 4.14-4.08 (m， 2H， Hla和Hlb)， 3.84-3.78 (m， 2H， H3a 和H5，)， 3.41-3.33 (m， 2H， H3b和H3')， 3.21-3.16 (m， 1H， H2')， 2.97-2.92 (m， 2H， H4，和H6，a)， 2.61 (dd， 1H， J=14.0， 6.2 Hz， H6，b)， 2.29 (t， 2H， J=7.4 Hz， COCH2)， 1.84-1.81 (m， 2H， H2a和H2b)， 1.53-1.50 (m， 2H， COCH2CH2)， 1.25 (br， 12H， -CH -), 0.86 (t， 3H， J=6.8 Hz， Me)。
13c NMR (100顧z， DMSO-d6); S 173.1 (C=0)， 98.4 (Cl，)， 74.8 (C4')，
73.2 (C3，)， 71,9 (C2')， 68.4 (C5，)， 63.5 (C3)， 61.4 (Cl)， 55.2 (C6')， 33.6 (COCH2)， 31.4 (-CH2-)， 29.0-28.6 (m， C2和-CH2-)， 24.6 (COCH2CH2)， 22.2(-CH2-)， 14,1 (Me)实施例n-2
3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-肉豆蔻酰基-l,3-二醇钠盐
以实施例1相同的方式合成标题化合物，只是在步骤G中用肉豆蔻酰氯 作为脂肪酸衍生物。23D +49.7° (c 0.67， H2(D)， LRMS m/z 511 (M-Na)'， HRMS理论值 C23H43Oi0S (M-Na)- 511.2582，测定值511.2596。
iHNMR(400画z， DMSO-d6); S 5.41(br， 1H， 4,-OH)， 4.63-4.61(m，
1H， 3，-OH), 4.55 (d， 1H， J=3.7 Hz， Hl，)， 4.50-4.48 (m, 1H， 2，-OH)， 4.13-4.07 (m， 2H， Hla和Hlb)， 3.83-3.77 (m， 2H， H3a和H5')， 3.41-3.33 (m， 2H， H3b和H3')， 3.20-3.15 (m， 1H， H2')， 2.98-2.91 (m， 2H， H4，和 H6，a)， 2,64-2.59 (m， 1H， H6，b)， 2.28 (t， 2H， J=7.4 Hz， COCH2)， 1.86-1.79 (m， 2H， H2a和H2b)， 1.53-1.49 (m， 2H, COCH2CH2)， 1.24 (br， 20H， 誦CH2-)， 0.85 (t， 3H， J=6.8 Hz， Me)。
13c NMR (100 MHz， DMSO-d6); 5 173.0 (C=0)， 98.4 (Cl，)， 74.8 (C4,)，
73.2 (C3，)， 71.9 (C2')， 68.4 (C5')， 63.5 (C3)， 61.4 (Cl)， 55.3 (C6')， 33.6 (COCH2)， 31.4 (-CH2-)， 29.1-28.6 (m, C2和隱CH2-)， 24.6 (COCH2CH2)， 22.2(-CH2-)， 14.0 (Me)。 实施例II-3
3-0-(6-磺基-a-D-卩比喃奎诺糖基)-l-0-山嵛酰基-l,3-二醇钠盐 以实施例1相同的方式合成标题化合物，只是在步骤G中用山嵛酰氯作 为脂肪酸衍生物。23D +46.3° (c 0.51， CHCl3:MeOH:H2O-30:15:2)， LRMS m/z 623 (M-Na)'， HRMS理论值C2iH590丄oS(M-Na)'623.3834，测定值623.3835。
lH NMR (400 MHz, DMSO隱d6) ; S 5.38-5.37 (m， 1H， 4'-OH)， 4.78-4.77 (m， 1H， 3,-OH)， 4.63 (d， 1H， J=6.52 Hz， 2,-OH)， 4.56 (d， 1H， J=3.72Hz， Hl,)， 4.14-4.07 (m， 2H， Hla和Hlb)， 3.86-3.78 (m， 2H， H3a和 H5，)， 3.43-3.32 (m， 2H， H3b和H3')， 3.22-3.17 (m， 1H， H2，)， 2.98-2.90 (m， 2H， H4，和H6，a)， 2.60 (dd， 1H， J=14,0， 6.7 Hz， H6,b)， 2.28 (t， 2H， J=7.22 Hz， COCH2)， 1.86-1.79 (m， 2H， H2a和H2b), 1.52-1.49 (m, 2H，COCH2CH2)， 1.23 (br， 36H， -CH -), 0.85 (t， 3H， J=6.1 Hz， Me)。
13C NMR (100應z， DMSO-d6); 5 173.4 (C=0)， 98.5 (Cl，)， 74.7 (C4')，
73.4 (C3，)， 72.2 (C2,)， 68.6 (C5')， 63.6 (C3)， 61.8 (Cl)， 55.0 CC6')， 33.9 (COCH2)， 31.7 (-CH2-)， 29.4-28.8 (m， C2和-CH2-)， 24.9 (COCH2CH2)， 22.5(-CH2-)， 14.3 (Me)。 实施例II-4
3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-己酰基-丙-l，3-二醇钙盐(10)
以实施例1相同的方式合成钠盐，只是在步骤G中用己酰氯作为脂肪酸 衍生物。
LRMS m/z 399 (M-Na)'
lH NMR (400 MHz， DMSO-d6) ; S 5.34 (br， 1H， 4,-OH)， 4.56 (d， 1H， J=4.0 Hz， Hl，)， 4.53 (br， 1H， 3'-OH)， 4.41 (d， 1H， J=6.4 Hz， 2，-OH)， 4.10 (t， 2H， J=6.6Hz， Hla和Hlb)， 3.83-3.77 (m， 2H， H3a和H5，)， 3.41-3.33 (m， 2H， H3b和H3，)， 3.21-3.16 (m， 1H， H2，)， 2.98-2.92 (m， 2H， H4， 和H6，a)， 2.63 (dd， 1H， J=14.0， 6.0 Hz， H6，b)， 2.27 (t， 2H， J=7.2 Hz， COCH2)， 1.82 (tt， J=6.4， 6.4 Hz, 2H， H2a和H2b)， 1.52 (tt， J=7.2， 6.8 Hz, 2H， COCH2CH2)， 1,30-1.26 (m， 4H，画CH2陽)，0.85(t， 3H， J=6.6 Hz， Me)。
13c NMR (100 MHz, DMSO-d6); 5 173.0(00)， 98.3 (Cl，)， 74.7 (C4,)，
73.2 (C3')， 71.9 (C2')， 68.3 (C5,)， 63.5 (C3)， 61,3 (Cl)， 55,2 (C6，)， 33.5 (COCH2)， 30.7 (-CH2-)， 28.6 (C2)， 24.1 (COCH2CH2)， 21.7 (-CH2-)， 13.7
(Me)。
钠盐进一步进行离子交换处理而得到标题化合物。
实施例n-5
3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-乙酰基-丙-l,3-二醇钙盐 以实施例1相同的方式合成钠盐，只是在步骤G中用乙酰氯作为脂肪酸 衍生物。
LRMS m/z 343 (M-Na)-
lH NMR (400 MHz， DMSO-d6) ; 5 5.47-5.46 (m， 1H， 4，-OH)， 4.57 (d， 1H， J=3.6 Hz， Hl，)， 4.50-4.49 (br， 1H， 3'-OH)， 4.39-4.38(br， 1H， 2'-OH)，4.10 (t， 2H， J=6.8Hz， Hl)， 3.83-3.76 (m， 2H， H3a和H5')， 3.42-3.34 (m， 2H， H3b和H3')， 3.20-3.16 (m， 1H， H2')， 2,98 (ddd， 1H， J=9.0, 9.0， 3.2 Hz， H4')， 2.88 (dd， 1H， J=13.6， 5.6 Hz， H6，a)， 2.62 (dd， 1H， J=14.0， 5.6 Hz， H6，b)， 2,00 (s， 3H， Me)， 1.835 (tt， 1H， J=6.4， 6.4 Hz， H2)。
13c NMR (100 MHz， DMSO-d6); 5 170.4 (C=0)， 98.3(C1')， 74.6(C4，)，
73.2 (C3，)， 71.9 (C2')， 68.3(C5')， 63.5 (C3)， 61.5 (Cl)， 55.0 (C6，)， 28.5 (C2)， 20.7(Me)。
钠盐进一步进行离子交换处理而获得标题化合物。 实施例II-6
3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-甲酰氧基-丙-l,3-二醇钠盐(10)
通过实施例I的步骤A-1到F，然后是步骤J-L，获得标题化合物。
步骤J; 3-0-(2,3,4-三-0-节基-6-磺基-a-D-卩比喃奎诺糖基)-丙-l,3-二醇钠盐
(8")
向化合物(7) (542 mg， 956 1imol)的乙酸(5.5 g)溶液中加入过硫酸氢钾(1.8 g)和乙酸钾(68mg)，将该混合物在室温下剧烈搅拌48小时。证实反应充分进 行后，反应液倒入冷却的7.5M氢氧化钠(13ml)溶液中，用乙酸乙酯萃取(3x 10ml)。合并有机层，用碳酸氢钠饱和溶液(2 x 10ml)和饱和盐水(2 x 10 ml)洗 涤，用硫酸钠干燥，过滤并减压浓縮。浓縮的残留物用硅胶色谱纯化(氯仿-甲 醇，10:1 — 8:1 — 6:1 ~> 4:1 — 2:1 — 1:1)，得到无色蜡状物形式的标题化合 物8" [401 mg (675 mmol)， 70.7%〗。
LRMSm/z571 (M-Na)-
lH NMR (400 MHz, CD30D+CDC13) ; 5 7.37-7.26 (m， 15H， ArH)， 4.96(d， 1H, J=11.2Hz， ArCH2)， 4.89(d， 1H， J=11.2 Hz， ArCH2)， 4.80(d， 1H， J=3.6 Hz， Hl，)， 4.78(d， 1H， J=10.4 Hz， ArCH2)， 4.75(d， 1H， J-11.6 Hz， ArCH2)， 4.66(d， 1H， J=11.6 Hz， ArCH2)， 4.62(d， 1H， J=11.2 Hz， ArCH2)， 4.24-4.19 (m， 1H， 5，)， 4.09 (ddd， 1H， J=9.6， 8.4， 5.2 Hz， Hla)， 3.97 (dd， 1H， J=9,2， 9.2 Hz， H3，)， 3.80 (ddd， 1H， J=11.3， 8.0， 4.0 Hz， H3a),3.68-3.62 (m， 1H， H3b)， 3,56 (dd， 1H， J=9.6， 3.6 Hz， H2')， 3.46 (ddd， 1H， J=9.8， 5.4， 5.4 Hz， Hlb),3.32-3.23 (m， 2H， H6,a和H4')， 2.93 (dd，1H， J=14.0， 9.8Hz， H6，b)， 1.98-1,81 (m， 2H， H2a和H2b)。
NMR (100 MHz, CD3OD+CDCI3); S 139.0 (Ar-本位)，138.5 (Ar-本
位)，138.4 (Ar-本位)，128.9-128.1 (m， Ar)， 96.8 (Cl,)， 82.4 (C3')， 81.0 (C4')， 80.6 (C2，)， 76.1 (ArCH2)， 75.5 (ArCH2)， 73.6 (ArCH2)， 67.9 (C5，),
65.5 (Cl)， 59.6 (C3)， 52.8(C6，)， 32.6 (C2)。 [式2]
<formula>formula see original document page 29</formula>
步骤K; 3-0-(6-磺基-a-D-卩比喃奎诺糖基)-丙-l,3-二醇钠盐(9")
向化合物(8") (534 mg， 898 pmol)的甲醇(20 ml)和氯仿(5.0 ml)溶液中加 入10%钯活性碳(135 mg)，将该混合物在氢气气氛中室温搅拌16小时。证实 反应充分进行后，过滤收集钯活性碳，减压浓縮滤出液。向所得残留物中加 入甲醇(20ml)和甲苯(20ml)，剧烈搅拌该混合物，减压蒸发去除溶剂以获得 无色液体形式的混合物(320 mg)。 LRMS证实混合物中存在标题化合物。然后 对含有标题化合物(9")的混合物进行后续反应。
LRMSm/z301 (M-Na)
<formula>formula see original document page 29</formula>
步骤L; 3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-甲酰氧基-丙-l，3-二醇钠盐
(10)
将含有化合物(9，，)(70 mg)、 l-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐 (EDCI.HC1) (93 mg， 487 pmol)和4-二甲基氨基吡啶(12 mg， 97 pmol)的混合物溶解在无水N,N-二甲基甲酰胺(DMF， 10ml)中，冰浴条件下向该溶液中逐 滴加入甲酸(14mg， 259 nmo1)，室温下反应18小时。证实反应充分进行后， 将水(l.O ml)倒入反应液中以终止反应，然后减压浓縮该溶液。所得残留物用 硅胶色谱纯化(氯仿-甲醇-水，3:1:0.1—2:1:0.1 — 1:1:0.1)，得到无色油状物形 式的标题化合物10 [12 mg (33 pmol), 16.7%]。 LRMS m/z 329 (M-Na)'
iHNMR(400画z， DMSO-d6); 5 8.18(s， 1H， 0=CH)， 4,56 (d， 1H，
J=3.6Hz， Hl，)， 4.20 (t， 2H， J=6.8 Hz， Hla和Hlb)， 3.86-3.78 (m， 2H，
H3a和H5')， 3.41-3.31 (m， 2H， H3b禾卩H3')， 3.18 (dd, 1H， J=9.6， 4.0 Hz，
H2，)， 3.03-2.卯(m， 2H， H4，和H6，a)， 2.63-2.58 (m， 1H， H6，b)， 1.86 (tt，
J=6.4， 6.4 Hz， 2H， H2a和H2b)
13cNMR(100画z， DMSO-d6); S 162.2 (CK))， 98.4 (Cl，)， 74,7 (C4')，
73.2 (C3')， 71.9 (C2')， 68.4 (C5')， 63.3 (C3)， 61.2 (Cl)， 55.1 (C6')， 26.1 (C2)。
下面描述根据本发明制备P-磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物的方法的另 一个例子。
实施例III-l
3-0-(6-磺基-(3-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-油酰-丙-l,3-二醇钠盐
根据以下方案的过程合成标题化合物。
30<formula>formula see original document page 31</formula>
A，)乙酸酐，乙酸钠，加热和煮沸，55.3%; B，)氢溴酸-乙酸溶液，二氯甲烷，室温，6小时，58.5%; C，)烯丙醇，氰化汞，二氯甲烷，室温，16小时，64.4%; D，)D，-1.甲醇钠，甲醇，室温，4小时；
D，-2.对茴香醛二甲基縮醛，对甲苯磺酸一水合物，乙腈，40'C， 16小
时，95.3%;
E，)对甲氧基苄基氯，氢氧化钠，N,N-二甲基甲酰胺，室温，16小时， 92.0%;
F，)氢化铝锂，氯化铝，二氯甲烷，乙醚，0'C， l小时，73.3%;G')对甲苯磺酰氯，4-二甲基氨基吡啶，吡啶，室温，16小时，85.9%;
H，)9-硼二环壬烷，四氢呋喃，室温，16小时；水，氢氧化钠，过氧化氢水，室温，4小时，93.5%;
I，)亚硫酸钠，乙醇，水，回流加热，72小时，90.2%;
J')油酸酐，4-二甲基氨基吡啶，吡徒，二氯甲烷，回流加热，16小时，67.6%;和
K') 2,3-二氯-5,6-二氰基-1,4-苯醌，二氯甲烷，甲醇，水，室温，4小时，55.9%。22d —4.7° (cl.OO h20)， LRMS m/z 567 (M-Na)-， HRMS理论值C27H51OioS (M-Na)_ 567.3208，测定值567.3211 。
lH NMR (400 MHz, DMSO-d6); S 5.56 (d， 1H， J=3.16 Hz， 4，-OH)，
4.81 (d， 1H， J=4.92 Hz， 2，-OH)， 4.74 (d， 1H， J=4.64 Hz， 3，-OH)， 4.09 (d，
1H， J=7.76Hz， Hl，)， 4.07 (t， 2H， J=6.60 Hz， Hla和Hlb)， 3.77 (dt， 1H，
J=10.2， 6.27 Hz， H3a)， 3.54-3.45 (m， 2H， H3b和H5，)， 3.13 (dt， 1H，
J=8.80， 4.68 Hz， H3，)， 2.99 (dt, 1H， J=9.14， 3.08 Hz， H4，)， 2.97-2.91 (m，
2H， H2，和H6，a)， 2.68 (dd， 1H， J=13.9， 5.24 Hz， H6，b)， 2.27 (t， 2H，J-7.40 Hz， COCH2)， 1.86-1.78 (m， 2H， H2a和H2b)， 1.54-1.47 (m， 2H，
COCH2CH2)， 1.24 (br， 28H， -CH2-)， 0.86 (t， 3H， J=6.88 Hz， Me)。
13c NMR (100應z， DMSO-d6); S 172.9 (C-O)， 102.8 (Cl，)， 76.1
(C3，)， 74.6(C4')， 73.4 (C2，)， 72.5 (C5')， 65.2 (C3)， 61.2 (Cl)， 55.6 (C6')，33.6 (COCH2)， 31.3 (C2)， 29.0-28.5 (m， -CH2-)， 24.5 (COCH2CH2)， 22.1 (-CH2-)， 13.9 (Me)。
<分析>[实施例IV]
实施例IV-1:用高效液相色谱和质谱进行分析
由高效液相色谱和电喷射质谱分离和检测3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-硬脂酰-丙-l,3-二醇钠盐和3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-硬脂
酰-甘油钠盐。
测试物溶解在5 mmo1/1醋酸铵水溶液配制的5%乙腈溶液中，用溶剂稀释成指定浓度，然后用配备CapCdlPakC18MG(柱尺寸；2.0 x 50 mm，资生堂公司(Shiseido Co.， Ltd.)生产)的高效液相色谱进行分析。分离条件如下柱温40°C，流速0.2毫升/分钟，用线性梯度50%-70%的乙腈在20分钟的时间内进行洗脱。
洗脱的测试物用布鲁克先生(Bruker Esquire) 3000+离子质谱检测，检测离子模式为总离子色谱(TIC)，检出质量范围m/z=100-1000。图l和2显示了测试物的色谱图。
分析结果表明，如

图1所示，3-0-(6-磺基-oc-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-硬脂酰_丙_1,3_二醇钠盐表现为单峰，而图2所示3-0-(6-磺基-01-0-吡喃奎诺糖基)-
33l-O-硬脂酰-甘油钠盐表现为在6.8分钟(峰l)和7.3分钟(峰2)出现代表结构异构体的小峰，提示酰基从甘油部分的1位转移至2位，在7.6分钟(峰3)和7.8分钟(峰4)出现代表非对映异构体aSQMGC18:0的主峰。
这些结果表明，根据本发明的一方面，与已知化合物3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-O-硬脂酰-甘油钠盐相比，3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0誦硬脂酰-丙-l,3-二醇钠盐具有非常高的纯度。
实施例IV-2:溶解度测定
分别将1 g 3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-硬脂酰-丙-l,3-二醇的钠盐和钙盐置于5 ml注射用蒸馏水(大塚制药有限公司(Otsuka PharmaceuticalCo.， Ltd.)生产沖，25。C剧烈震摇；立即发生溶解。该现象表明，根据日本药典一般规定中所述标准，所述化合物"易溶"。
这些结果表明，aSQAP具有非常高的溶解度。此外，虽然本文未示出，但除3-0-(6-磺基-a-D-吡喃奎诺糖基)-l-0-硬脂酰-丙-l,3二醇的盐之外的本发明SQAP系列也具有非常高的溶解度。这种高溶解度有利于所需量的物质溶解在少量溶剂中。结果，例如，易于制备给予对象的注射剂。此外，这种高水溶性还有利于注射剂，以及其他制剂如口服制剂的制备。
<药理学试验>
检查本发明磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物的药理学活性。放射增敏效果试验
通过荷瘤小鼠实验检查放射增敏效果。实施例V-1:人食道鳞状细胞癌(试验1)
将人食道鳞状细胞癌细胞TE-8移植到KSN裸小鼠的右股区内，每只动物1><106个细胞。然后，饲养小鼠约14天以在每只小鼠中形成约150mm3的瘤块。然后进行分组(1>(4)，每组四只小鼠(1) 未给药、未照射组(在图3中，用白色方块表示)；
(2) 未给药、放疗治疗组(在图3中，用白色三角形表示)；
(3) otSQAPC18:0给药、未照射组(在图3中，用黑色圆圈表示)；和
(4) aSQAPC18:0给药、放疗治疗组(在图3中，用黑色菱形表示)。
第1天到第5天进行给药，每天一次2mg/kg。第1天和第4天，小鼠接受X射线发生器(HS-225，岛津有限公司(ShimadzuCo.， Ltd.)生产)发射的剂量2 Gy的照射。根据以下计算公式计算肿瘤体积(短轴x长轴x 0.5)。结果如图3所示。
在所有组中，从试验开始到结束肿瘤体积稳步增加。然而，大约第10天，组(2)-(4)中肿瘤体积的增量落在(l)未给药、未照射组之后。此外，(2)未给药、放疗治疗组和(3)aSQAP C18:0给药未照射组中肿瘤体积的增加受到相同水平的抑制。与其他组相比，(4)aSQMG C18:0给药放疗治疗组中肿瘤体积增加被抑制的程度最高。
实施例V-2:人食道鳞状细胞癌(试验2)
以实施例v-l相同的方式进行实验，只是第1天到第5天给予的药物剂量为每天一次1 mg/kg，照射剂量为4Gy，测定肿瘤体积。结果如图4所示。详细内容如下所述
(1) 未给药、未照射组(在图4中，用黑色菱形表示)；
(2) 未给药、放疗治疗组(在图4中，用黑色方块表示)；
(3) aSQAPC18:0给药、未照射组(在图4中，用白色菱形表示)；和
(4) aSQAPC18:0给药、放疗治疗组(在图4中，用白色方块表示)。结果表明，所有组中，肿瘤体积随时间流逝而增加。组(2)-(4)中肿瘤体积
的增量比(l)未给药、未照射组小。此外，与其他组相比，(4)aSQAP C18:0给药放疗组中肿瘤体积的增加受到最强抑制。
实施例V-3:人结肠腺癌
将人结肠腺癌细胞SW480移植到KSN裸小鼠的右股区内，每只动物1"06个细胞。然后，饲养小鼠约14天以在每只动物中形成约150mm3的肿瘤块。
然后进行分组(1)-(3)，每组四只小鼠
(1) 未给药、未照射组(在图5中，用白色菱形表示)；
(2) 未给药、放疗治疗组(在图5中，用黑色方块表示)；和
(3) ocSQAPC18:0给药、放疗治疗组(在图5中，用黑色三角形表示)。
第1天到第5天给予药物，每天一次2 mg/kg。第1天和第4天，小鼠接受X射线发生器(HS-225，岛津有限公司(ShimadzuCo.， Ltd.)生产)发射的剂量2 Gy的照射。根据以下计算公式计算肿瘤体积(短轴x长轴x 0.5)。结果如图5所示。
结果表明，所有组中肿瘤体积随时间流逝而增加。然而，(l)未给药、未照射组和(2)未给药、放疗治疗组中肿瘤体积的增加类似，但(3)otSQAP C18:0给药放疗治疗组中肿瘤体积的增加从实验最初阶段即受到抑制，总体来说肿瘤体积的增加受到显著抑制。
下面的实施例V-4、 5、 6和实施例VI-VIII采用经离子交换处理而被钙盐取代的SQAP化合物。
实施例V-4:人结肠腺癌
将人结肠腺癌细胞SW480移植到KSN裸小鼠的右股区内，每只动物2xl()6个细胞。
每只小鼠中形成约50 mm3的肿瘤块后，将小鼠分成四组(1)-(4)，每组4只小鼠
(1) 未给药、未照射组(在图6中，用黑色圆圈表示)；
(2) 未给药、放疗治疗组(在图6中，用黑色方块表示)；
(3) aSQAPC18:0给药未照射组(在图6中，用白色三角形表示)；和
(4) aSQAP C18:0给药放疗治疗组(在图6中，用白色方块表示)。
第1天到第5天由小鼠尾静脉给予药物，每天一次1 mg/kg。第1天和第4天，小鼠接受X射线发生器(HS-225，岛津有限公司(Shimadzu Co.， Ltd.)生产)发射的剂量2Gy的照射。
结果如图6所示，显示所有组中肿瘤体积随时间增加。然而，与其他组相比，(4)aSQAP C18:0给药放疗治疗组中肿瘤体积的增加受到最大程度的抑
36制。
实施例V-5:人食道鳞状细胞癌
将人食道鳞状细胞癌TE-8移植到KSN裸小鼠的右股区内，每只动物 lxl()S个细胞。每只小鼠中形成约50 mm3的肿瘤块后，将小鼠分成四组(l)-(4)，每组4只小鼠
(1) 未给药、未照射组(在图7中，用黑色菱形表示)；
(2) 未给药、放疗治疗组(在图7中，用黑色圆圈表示)；
(3) aSQAPC10:0给药未照射组(在图7中，用白色三角形表示)；和
(4) aSQAPC10:0给药放疗治疗组(在图7中，用白色方块表示)。
第l天到第5天，小鼠腹膜内给予药物，每天一次1 mg^g。第l天和第 4天，小鼠接受X射线发生器(HS-225，岛津有限公司(Shimadzu Co.， Ltd.)生 产)发射的剂量4Gy的照射。
结果如图7所示，显示所有组中肿瘤体积随时间增加。然而，与其他组 相比，(4)aSQAP C10:0给药放疗治疗组中肿瘤体积的增加受到最大抑制。
实施例V-6:人食道鳞状细胞癌
将人食道鳞状细胞癌细胞TE-8移植到KSN裸小鼠的右股区内，每只动 物1"06个细胞。每只小鼠中形成约50 mm3的肿瘤块后，将小鼠分成四组 (1)-(4)，每组4只小鼠
(1) 未给药、未照射组(在图8中，用黑色菱形表示)；
(2) 未给药、放疗治疗组(在图8中，用黑色方块表示)；
(3) aSQAPC18:0给药未照射组依图8中，用白色方块表示)；和
(4) aSQAPC18:0给药放疗治疗组(在图8中，用白色圆圈表示)。
第1天到第5天，小鼠腹膜内给予药物，每天一次1 mg/kg。第1天和第 4天，小鼠接受X射线发生器(HS-225，岛津有限公司(Shimadzu Co.， Ltd.)生 产)发射的剂量4Gy的照射。
结果如图8所示，显示所有组中肿瘤体积随时间增加。然而，与其他组 相比，(4)aSQAPC18:0给药放疗治疗组中肿瘤体积的增加受到最大抑制。[实施例VI〗 抗肿瘤效果试验
将人结肠腺癌细胞SW480移植到KSN裸小鼠的右股区内，每只动物 2"06个细胞。每只小鼠中形成约50 mm3的肿瘤块后，将小鼠分成两组(l)-(4)，每组4只小鼠
(1) 未给药组(在图9中，用白色方块表示)；和
(2) aSQAPC18:0给药组(在图9中，用黑色方块表示)。 第1天到第14天，小鼠腹膜内给予药物，每天一次20mg/kg。 结果如图9所示，显示与未给药组相比，aSQAP C18:0给药组中肿瘤体
积的增加受到显著抑制。
采用血管内皮细胞-纤维细胞共培养系统进行血管形成抑制试验 采用库拉勃工业有限公司(Kurabo Industries Ltd.)生产的血管新生试剂盒 (KZ-1000)检查a SQAPC10:0、 a SQAPC14:0、 a SQAPC18:0、 a SQAPC22:0、 P SQAPC18:0和(3 SQAPC18:1对血管形成的作用，其中，所述试剂盒是人血 管内皮细胞和人纤维细胞的共培养系统。根据生产商的说明手册进行采用试 剂盒的血管形成培养。
使用含有终浓度10 ng/ml VEGF-A、特别指定用于血管新生的培养液， 制备各种指定浓度的SQAP化合物。细胞培养第1天，将含有各种浓度SQAP 化合物和DMSO(阴性对照)的特定培养液加入培养系统中。系统培养30分 钟，用2 Gy的钴60照射。然后，在培养的第4、第7和第10天，用新鲜制 备的含有SQAP或DMSO的特定培养液进行换液。培养的第11天去除培养 液，用70%乙醇固定，用抗人CD31抗体染色形成的血管。光学显微镜下拍 摄染色图片，由图像分析计算血管形成的量。根据生产商的说明手册计算血 管新生指数。
结果如图IO所示。与未用SQAP化合物和/或放疗处理的对照组相比， 单用照射(2 Gy)和/或SQAP化合物的组具有较低的血管新生指数。在图10中，"RT"是放射疗法的縮写。并且，SQAP化合物处理组的血管新生指数比 单用2 Gy照射组低。联用2 Gy照射时，终浓度5、 10和20 jiM的aSQAP C10:0，终浓度5、 10和20 |iM的aSQAP C14:0，终浓度5、 10和20 的 aSQAP C18:0，终浓度5、 10和20 pM的aSQAP C22:0，终浓度5和10 pM 的(3SQAPC18:0，终浓度5和10 |iM的pSQAP C18:l能够以浓度依赖性方式抑 制血管形成。
毒性试验
VIII-1:埃姆斯试验
用aSQAP C18:0进行回复突变试验(埃姆斯试验)。
使用由两株鼠伤寒沙门杆菌0^/附0^/& 0^Ww^wm)(碱基对取代突变株) 和一株大肠杆菌(Esc^n'c/n'。co/Z)和两株鼠伤寒沙门杆菌(即移码突变株)组成的 五株细菌作为指示菌株。将这些菌株在aSQAP C18:0的存在下预先进行培 养，转移至琼脂板并在琼脂板上培养48小时后，对板上回复菌落数目进行计 数。加入各个板中的aSQAP C18:0的量为2吗、7吗、21吗、62吗、185pg、 556吗、1667吗和5000吗。不论预培养期间是否加入S9混合物(其中S9混合 物是将辅因子-1加入用苯巴比妥和5,6-苯并黄酮预处理的雄性大鼠的肝脏制备 的肝脏匀浆上清液部分中制备的溶液)，对于所有菌株，回复菌落的数目不增 加。由此认为，物质的致突变性为阴性。
VIII-2:微核试验
用aSQAPC18:0钙盐通过大鼠静脉内给药进行微核试验。 将雄性SD大鼠分成六组(l)-(6)，每组5只大鼠
(1) 未给药组；
(2) 25 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(3) 50 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(4) 100 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(5) 200 mg/kg aSQAP C18:0给药组；和
(6) 阳性对照组(2 mg/kg丝裂霉素C给药组)。
39(1)-(5)的测试液包含含有10%克列莫佛EL的生理盐水作为溶剂，给予大 鼠上述剂量，连续两天总共两次。阳性对照组给予一次上述剂量。
给药后约24小时，制备骨髓涂片。每只大鼠计数2000个未成熟红细 胞，计算具有微核的未成熟红细胞的发生率。计算每1000个红细胞中包含的 未成熟红细胞的比例作为骨髓增殖抑制的指数。结果表明，与未给药组相 比，给药组中微核发生率无显著性增加。此外，给予测试物的组中骨髓增殖 抑制无影响。由此认为，测试物不会在骨髓细胞中诱导染色体畸变。
VIII-3:单剂量毒性试验
采用aSQAP C18:0，在大鼠中进行剂急性毒性试验。将5-6周龄的SD大 鼠分成7组(1)-(7)，每组5只雌性和5只雄性
(1) 未给药组；
(2) 25 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(3) 50 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(4) 100 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(5) 200 mg/kg aSQAP C18:0给药组；
(6) 400 mg/kg aSQAP C18:0给药组；和
(7) 800 mg/kg aSQAP C18:0给药组。
(1)和(4)-(7)的测试液包含含有10%克列莫佛EL的生理盐水溶液，(2)包 含含有2.5%克列莫佛EL的生理盐水溶液，(3)包含含有5%克列莫佛EL的生 理盐水溶液作为溶剂。
经大鼠尾静脉给予这些测试液，包括给药当天持续两天观察临床征兆。 试验期间无大鼠死亡，估计致死剂量高于800 mg/kg。
本领域技术人员容易理解其他益处和改进。因此，显然本发明在其较广 泛方面并不限于本文所示和所述的具体细节和各个实施方式。因此，可进行 各种改进而不背离所附权利要求书及其等价形式所限定的本发明的精神或范 围。
本发明化合物是一类新物质，如上所述，具有显著的放射增敏效果和抗 肿瘤效果。本发明化合物可通过简单的合成方法以高纯度获得。并且，本发明化合物结构稳定，且高度水溶。因此，用作药物时，该化合物在其制造和 配制过程中是有益的，作为化合物或药物储存后在使用中也是有益的。此 外，化合物毒性低。因此，非常适合作为药物短时间或长期给予人体和其他 动物。
本发明得到教育、文化、运动、科学技术部提供的振兴科学技术特殊协
调基金(Special Coordination Fund)的资助。
权利要求
1.一种式(I)的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物或其药学上可接受的盐[化学式1]式中，R1是脂肪酸的酰基残基，M代表氢离子或金属离子。
2. —种药物，其包含至少一种选自下组的物质作为活性成分如权利要 求1所述的式(I)表示的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物及其药学上可接受的
3. 如权利要求2所述的药物，其特征在于，所述药物是放射增敏剂。
4. 如权利要求2所述的药物，其特征在于，所述药物是抗肿瘤药。
全文摘要
式(I)的磺基奎诺糖基酰基丙二醇化合物或其药学上可接受的盐；(式中，R₁是脂肪酸的酰基残基，M代表氢离子或金属离子)。
文档编号C07H15/06GK101641365SQ20088000916
公开日2010年2月3日 申请日期2008年7月18日 优先权日2007年7月20日
发明者三浦雅彦, 佐原弘益, 佐藤昇志, 坂口谦吾, 太田庆祐, 山崎隆之, 村田宽, 森阳子, 正木和好, 菅原二三男, 高桥延昭 申请人:东洋水产株式会社