专利名称：一种从萝芙木废液中提取阿义马林的方法
技术领域：
本发明属于天然药物分离纯化领域，特别涉及一种从萝芙木废液中提取阿义马林
的方法。
背景技术：
萝芙木中含有多种有药理活性的生物碱，已分离出的达百种以上。含量较多的生 物碱是利血平、阿义马林、蛇根碱以及育亨宾等，其中利血平的主要临床作用是降血压，利 血平在萝芙木中的含量一般在1. 2%左右，占萝芙木总碱的30%左右，因此，人们通常从萝 芙木中提取利血平。 阿义马林的主要临床作用是抗心律失常，其含量一般占萝芙木总碱的15%左右， 因萝芙木中存在与阿义马林结构类似的生物碱，从萝芙木中分离阿义马林较为困难。现有 的分离纯化阿义马林的方法主要有(l)将萝芙木根皮粉碎后用苯、乙酸乙酯、酸性甲醇、 酸性乙醇等溶剂反复浸泡提取，浓縮提取液后用酸性溶液萃取，调剩余的水溶液的pH到 8. 5至9后用苯或氯仿等溶剂提取，纯化结晶，得到阿义马林；(2)将萝芙木根皮粉碎后，用 苯、乙酸乙酯等溶剂提取得到浓縮液后，用醋酸或磷酸溶解，用氨水、碳酸钠或氢氧化钠调 节溶液的酸碱度分部萃取，得到pH 9-10部分的萃取液后纯化结晶得到阿义马林；(3)将萝 芙木根皮粉碎后用苯、乙酸乙酯、酸性甲醇、酸性乙醇等溶剂反复浸泡提取，浓縮提取液后 用酸性溶液萃取，调剩余的水溶液的PH到8. 5至9后，萃取出来上制备液相柱，分离纯化出 阿义马林。这些分离纯化方法的主要不足在于(l)萝芙木总提取液调至酸性萃取后的水 溶液部分再调到碱性萃取得到的萃取液中杂质较多，后续纯化困难，难以得到达到合格纯 度的阿义马林；(2)用酸溶解后的分部萃取时，萃取液的盐浓度过大，对分离纯化的收率有 较大的影响，不利于生产放大；(3)制备液相法可用于研究但不能用于放大生产；(4)从萝 芙木中直接提取阿义马林，将浪费利血平，不能有效利用萝芙木资源。
发明内容
为了解决上述现有分离技术的不足之处，实现萝芙木药材的充分利用，本发明的 目的在于提供一种从萝芙木废液中提取阿义马林的方法。 本发明的目的通过下述技术方案实现一种从萝芙木废液中提取阿义马林的方 法，包括以下步骤 (1)萃取浓縮将萝芙木废液的pH值调节为6 7，用有机溶剂萃取，重复2 3 次；再将萃取液的PH值调节为9 IO，用有机溶剂萃取，直至水相中无生物碱反应，合并有 机相浓縮至瓶壁上刚好有一层固体物析出时停止，放置到室温使固体物析出完全，过滤出 固体物干燥，滤液回收利用； (2)纯化用质量百分比3 6%的稀盐酸使步骤(1)得到的固体物恰好完全溶 解，接着加入活性炭，于60 7(TC脱色15 20min，过滤，接着将滤液的pH值调节为9 IO，再用有机溶剂萃取，用水洗涤萃取液，用干燥剂干燥，得到的固体物用丙酮结晶得到白色固体物，白色固体物再用甲醇结晶，过滤，将得到的结晶于60 7(TC干燥，得到阿义马 林； 所述的萝芙木废液为从萝芙木中提取利血平后的萃余液； 所述的萃余液优选通过以下步骤获得将萝芙木根皮粉碎后，用4 6倍重量的甲 醇/冰醋酸溶液在室温下浸泡，反复渗滤提取至利血平提取完全，提取液经减压浓縮后得 到萝芙木浸膏，减压浓縮温度控制在6(TC以下；接着用浓度为质量百分比5 20%的盐酸 把萝芙木浸膏溶解，调节溶液的pH值为4 5，然后用有机溶剂萃取至萃取利血平完全，剩 余的水相部分为提取利血平后的萃余液； 所述萝芙木根皮粉碎的程度优选为粉碎至30 60目； 所述甲醇/冰醋酸溶液中冰醋酸的浓度按质量百分比计为0. 5 1% ; 所述pH值的调节用酸或碱调节；酸为盐酸、硫酸或磷酸；碱为氨水、碳酸钠、氢氧
化钠或氢氧化钾； 所述的酸的浓度优选为质量百分比3 6% ;
所述的碱的浓度优选为质量百分比10 20% ; 所述的有机溶剂包括二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯和乙酸乙酯等； 所述干燥包括干燥箱中干燥、真空干燥或沸腾干燥等干燥方法； 步骤(2)中所述活性炭的用量相当于所述固体物质量的1 6% ; 步骤(2)中所述用水洗涤萃取液优选为用相当于萃取液体积1/4 1/3的水洗涤
1 2次； 步骤(2)中所述干燥剂优选无水碳酸钾、无水硫酸钠或无水硫酸镁。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果 ①本发明通过从萝芙木中提取利血平后的萃余液进行提取，通过浓縮萃取后直接 精制的方法，获得阿义马林，即是利用萝芙木药材生产利血平的同时分离出阿义马林，实现 了植物资源的有效利用，意味着解决了利用萝芙木同时生产利血平和阿义马林的问题，提 高了资源的利用效率，增加了产品类型，产生了新的利润增长点。 ②本发明采用简易的萃取方法和精制方法，能方便、快速地得到合乎药典规定的 阿义马林，适合放大生产。
具体实施例方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1 (1)萃取浓縮取100升提取完利血平后的剩余水溶液，用氨水(浓度为质量百分 比25 28% )调剩余水溶液的pH值至6.5，接着用90升的甲苯萃取(30升/次，3次)， 再用氨水调剩余水溶液的pH值至9. 5后，用甲苯萃取至无生物碱反应(用生物碱特征性 显色剂-碘化铋钾溶液显色定性确定)，合并甲苯相，浓縮至瓶中刚好析出一层固体物时停 止，放置到室温使固体物析出完全，过滤出固体物，于60 65t:干燥3小时，得到粗品291 克，滤出液回收利用。 (2)纯化用浓度为质量百分比5%的稀盐酸1550毫升溶解粗品，加入10克活性 炭粉末于65t:脱色20分钟，过滤后的滤液用氨水调节pH值为9. 5后，用1200毫升甲苯萃取(300毫升/次，4次)，合并甲苯相，用400毫升水洗涤(200毫升/次，2次)甲苯相，浓 縮甲苯相，得到固体物，用850毫升丙酮加热溶解固体物，结晶得到白色固体物，再用甲醇 结晶，过滤，将得到的结晶放入干燥箱中6(TC干燥3小时，即得阿义马林140克(折算后按 萝芙木树皮计算，阿义马林的收率为千分之一点四五)，熔点为158 160°C (将阿义马林 标准品与本实验样品混合后，混合样品的熔点与标准品相同)。本样品为白色粉末状晶体， 无嗅，微苦，易溶于乙酸酐和氯仿，微溶于甲醇、乙醇(95)、丙酮和乙醚，难溶于水，溶于稀盐 酸水溶液与日本药典的性状描述吻合。按日本药典2007年版的高氯酸滴定定量方法检测， 纯度为98. 6%，符合药典规定的标准。
实施例2 (1)萃取浓縮取200升提取完利血平后的剩余水溶液，用氨水(浓度为质量百分 比25 28% )调剩余水溶液的pH值至7，接着用160升的氯仿萃取(40升/次，4次)，再 用氨水调剩余水溶液的pH值至IO后，用氯仿萃取至无生物碱反应(用生物碱特征性显色 剂_碘化铋钾溶液显色定性确定)，合并氯仿相，浓縮至瓶中刚好析出一层固体物时停止， 放置到室温使固体物析出完全，过滤出固体物，于65 7(TC干燥3小时，，得到粗品623克， 滤出液回收利用。 (2)纯化用浓度为质量百分比5%的稀盐酸2700毫升溶解粗品，加入15克活性 炭粉末于7(TC脱色20分钟，过滤后的滤液用氨水调节pH值为9. 0后，用2000毫升氯仿萃 取(500毫升/次，4次)，合并氯仿相，用600毫升水洗涤(300毫升/次，2次)氯仿相，浓 縮氯仿相，得到固体物，用1350毫升丙酮加热溶解固体物，结晶得到白色固体物，再用甲醇 结晶，过滤，将得到的结晶放入干燥箱中65t:干燥3小时，即得阿义马林310克(折算后按
萝芙木树皮计算，阿义马林的收率为千分之一点五)，熔点为159 ierc (将阿义马林标
准品与本实验样品混合后，混合样品的熔点与标准品相同)。本样品为白色粉末状晶体，无 嗅，微苦，易溶于乙酸酐和氯仿，微溶于甲醇、乙醇(95)、丙酮和乙醚，难溶于水，溶于稀盐酸 水溶液与日本药典的性状描述吻合。按日本药典2007年版的高氯酸滴定定量方法检测，纯 度为98. 2%，符合药典规定的标准。
实施例3 (1)萃取浓縮取300升提取完利血平后的剩余水溶液，用氨水(浓度为质量百分 比25 28% )调剩余水溶液的pH值至6. O，接着用240升的乙酸乙酯萃取(60升/次，4 次)，再用氨水调剩余水溶液的pH值至9. 5后，用乙酸乙酯萃取至无生物碱反应(用生物碱 特征性显色剂_碘化铋钾溶液显色定性确定)，合并乙酸乙酯相，浓縮至瓶中刚好析出一层 固体物时停止，放置到室温使固体物析出完全，过滤出固体物，于6(TC干燥3小时，得到粗 品815克，滤出液回收利用。 (2)纯化用浓度为质量百分比5%的稀盐酸3260毫升溶解粗品，加入21克活性 炭粉末于7(TC脱色25分钟，过滤后的滤液用氨水调节pH值为9.0后，用2400毫升乙酸乙酯 萃取(600毫升/次，4次)，合并乙酸乙酯相，用800毫升水洗涤(400毫升/次，2次)乙酸 乙酯相，浓縮乙酸乙酯相，得到固体物，用1880毫升丙酮加热溶解固体物，结晶得到白色固 体物，再用甲醇结晶，过滤，将得到的结晶放入干燥箱中6(TC干燥3小时，即得阿义马林380 克(折算后按萝芙木树皮计算，阿义马林的收率为千分之一点三)，熔点为158 16(TC (将 阿义马林标准品与本实验样品混合后，混合样品的熔点与标准品相同)。本样品为白色粉末状晶体，无嗅，微苦，易溶于乙酸酐和氯仿，微溶于甲醇、乙醇(95)、丙酮和乙醚，难溶于水， 溶于稀盐酸水溶液与日本药典的性状描述吻合。按日本药典2007年版的高氯酸滴定定量 方法检测，纯度为98. 3%，符合药典规定的标准。
实施例4 (1)萃取浓縮取250升提取完利血平后的剩余水溶液，用氨水(浓度为质量百分 比25 28% )调剩余水溶液的pH值至6. 5，接着用200升的二氯乙烷萃取(50升/次，4 次)，再用氨水调剩余水溶液的PH值至9. 0后，用二氯乙烷萃取至无生物碱反应(用生物碱 特征性显色剂_碘化铋钾溶液显色定性确定)，合并二氯乙烷相，浓縮至瓶中刚好析出一层 固体物时停止，放置到室温使固体物析出完全，过滤出固体物，于65t:干燥3小时，得到粗 品742克，滤出液回收利用。 (2)纯化用浓度为质量百分比5%的稀盐酸3020毫升溶解粗品，加入18克活性 炭粉末于60 65t:脱色20分钟，过滤后的滤液用氨水调节pH值为9. 5后，用2400毫升 二氯乙烷萃取(600毫升/次，4次)，合并二氯乙烷相，用800毫升水洗涤(400毫升/次，2 次)二氯乙烷相，浓縮二氯乙烷相，得到固体物，用1600毫升丙酮加热溶解固体物，结晶得 到白色固体物，再用甲醇结晶，过滤，将得到的结晶放入干燥箱中65 6『C干燥3小时，即 得阿义马林353克(折算后按萝芙木树皮计算，阿义马林的收率为千分之一点四)，熔点为 159 160°C (将阿义马林标准品与本实验样品混合后，混合样品的熔点与标准品相同)。 本样品为白色粉末状晶体，无嗅，微苦，易溶于乙酸酐和氯仿，微溶于甲醇、乙醇(95)、丙酮 和乙醚，难溶于水，溶于稀盐酸水溶液与日本药典的性状描述吻合。按日本药典2007年版 的高氯酸滴定定量方法检测，纯度为98. 5%，符合药典规定的标准。
实施例5 (1)提取利血平将200kg萝芙木根皮粉碎粉碎至30 60目，然后用800kg甲醇/ 冰醋酸溶液(冰醋酸的浓度为质量百分比1% )于室温下浸泡，反复渗滤提取，经薄层色谱 检测至利血平提取完全为止，提取液经减压浓縮后得到萝芙木浸膏，减压浓縮温度控制在 6(TC以下；接着用浓度为质量百分比10X的盐酸把萝芙木浸膏溶解，调节溶液的pH值为4， 然后用乙酸乙酯萃取4次，薄层色谱检测利血平萃取完全，合并萃取液，将萃取液浓縮至胶 状，加入适量质量百分比95%乙醇，加热使胶状物完全溶解，放置析出固体物，得到利血平 粗晶。将析出的利血平粗晶过滤，用三氯甲烷溶解，滤除不溶物，浓縮后用质量百分比95% 乙醇溶解，放置析出结晶，用95^洗涤，于6(TC恒温干燥箱中干燥，得到利血平成品1.2kg。 通过薄层色谱分析和熔点测定与利血平标准样品比较，证实得到的利血平成品纯度高，达 到99%以上。 (2)提取阿义马林取步骤(1)得到的萃余液250升，提取步骤同实施例4步骤 (2)，区别仅在于用浓度为质量百分比10%的氢氧化钠溶液调碱，得到阿义马林302克(折 算后按萝芙木树皮计算，阿义马林的收率为千分之一点五)，熔点为158 160°C (将阿义 马林标准品与本实验样品混合后，混合样品的熔点与标准品相同)。本样品为白色粉末状晶 体，无嗅，微苦，易溶于乙酸酐和氯仿，微溶于甲醇、乙醇(95)、丙酮和乙醚，难溶于水，溶于 稀盐酸水溶液与日本药典的性状描述吻合。按日本药典2007年版的高氯酸滴定定量方法 检测，纯度为98. 5%，符合药典规定的标准。 上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化， 均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
权利要求
一种从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于包括以下步骤(1)萃取浓缩将萝芙木废液的pH值调节为6～7，用有机溶剂萃取，重复2～3次；再将萃取液的pH值调节为9～10，用有机溶剂萃取，直至水相中无生物碱反应，合并有机相浓缩至瓶壁上刚好有一层固体物析出时停止，放置到室温使固体物析出完全，过滤出固体物干燥，滤液回收利用；(2)纯化用质量百分比3～6％的稀盐酸使步骤(1)得到的固体物恰好完全溶解，接着加入活性炭，于60～70℃脱色15～20min，过滤，接着将滤液的pH值调节为9～10，再用有机溶剂萃取，用水洗涤萃取液，用干燥剂干燥，得到的固体物用丙酮结晶得到白色固体物，白色固体物再用甲醇结晶，过滤，将得到的结晶于60～70℃干燥，得到阿义马林；所述的萝芙木废液为从萝芙木中提取出利血平后的剩余水溶液。
2. 根据权利要求1所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于所述的萃 余液为通过以下步骤获得的萃余液将萝芙木根皮粉碎后，用4 6倍重量的甲醇/冰醋酸 溶液在室温下浸泡，反复渗滤提取至利血平提取完全，提取液经减压浓縮后得到萝芙木浸 膏，减压浓縮温度控制在6(TC以下；接着用浓度为质量百分比5 20%的盐酸把萝芙木浸 膏溶解，调节溶液的pH值为4 5，然后用有机溶剂萃取至萃取利血平完全，合并萃余液，得 到提取利血平后的萃余液。
3. 根据权利要求2所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于 所述萝芙木根皮粉碎的程度为粉碎至30 60目；所述甲醇/冰醋酸溶液中冰醋酸的浓度按质量百分比计为0. 5 1%。
4. 根据权利要求1或2所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于所述 pH值的调节用酸或碱调节；酸为盐酸、硫酸或磷酸；碱为氨水、碳酸钠、氢氧化钠或氢氧化钾。
5. 根据权利要求4所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于所述的酸的浓度为质量百分比3 6% ;所述的碱的浓度为质量百分比10 20%。
6. 根据权利要求1或2所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于所述的有机溶剂为二氯乙烷、氯仿、二氯甲烷、苯、甲苯或乙酸乙酯中的至少一种。
7. 根据权利要求1所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于所述干燥包括干燥箱中干燥、真空干燥或沸腾干燥。
8. 根据权利要求l所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于步步骤(2)中所述活性炭的用量相当于所述固体物质量的1 6%。
9. 根据权利要求1所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于步骤(2)中所述用水洗涤萃取液为用相当于萃取液体积1/4 1/3的水洗涤1 2次。
10. 根据权利要求1所述从萝芙木废液中提取阿义马林的方法，其特征在于步骤(2)中所述干燥剂为无水碳酸钾、无水硫酸钠或无水硫酸镁。
全文摘要
本发明公开了一种从萝芙木废液中提取阿义马林的方法。本发明通过对从萝芙木中提取利血平后的萃余液进行提取，采用分步萃取，脱色沉淀、洗涤结晶等办法，获得阿义马林，即是利用萝芙木药材生产利血平的同时分离出阿义马林，实现了植物资源的有效利用，这意味着解决了利用萝芙木同时生产利血平和阿义马林的问题，提高了资源的利用效率，增加了产品类型，产生了新的利润增长点。本发明采用简易的萃取方法和精制方法，能方便、快速地得到合乎药典规定的阿义马林，适合放大生产。
文档编号C07D459/00GK101735214SQ201010019520
公开日2010年6月16日 申请日期2010年1月20日 优先权日2010年1月20日
发明者冯锦东, 李秀峰, 蒲含林, 赖潜 申请人:海南制药厂有限公司