专利名称：富贵草胺碱g的用途的制作方法
技术领域：
本发明涉及富贵草胺碱G的用途，具体涉及富贵草胺碱G作为こ酰胆碱酯酶抑制剂以及在制备预防或治疗老年性痴呆的药物中的应用。
背景技术：
阿尔茨海默病(Alzheimer’ s disease, AD)又称老年性痴呆，是ー种进行性神经退行性疾病，以隐匿起病，记忆カ逐渐减退，认知障碍、行为异常和社会障碍等为主要临床表现。以细胞外出现P -淀粉样肽(0-Amyloid protein, )聚集形成的老年斑(senile plaque, SP)、细胞内tau蛋白异常磷酸化形成的神经纤维缠结(neurofibrillarytangles, NFTs)及神经细胞和突触数量减少等为主要病理特征。据统计，全球老年痴呆患者已超过1700万，我国有500多万，占全世界的四分之一，65岁以上老年人痴呆患病率高达
10.1%，死亡率仅次于心脑血管疾病和癌症，且发病率随年龄的增长而増加。近年来，随着老龄化人口的不断増加，对老年性痴呆的研究也越来越受到更多的关注。因此，对AD治疗药 物的深入研究具有十分重要的意义并成为国内外的ー个研究热点。研究证实，老年性痴呆的发生与患者大脑内神经递质——こ酰胆碱的缺失密切相关，胆碱酯酶会催化こ酰胆碱的裂解反应，导致こ酰胆碱的缺失，神经信号传递失败，目前对老年痴呆的药物治疗主要是通过抑制胆碱酯酶来提高患者体内的こ酰胆碱水平。1907年，德国学者Alois Alzheimer首次报道AD的临床表现和病理改变后，经过无数科研人员不断深入的研究与探索，仍然没有找到ー种发病机制可以确切地解释AD,也没找到ー种特效的药物对AD进行治疗。苗药三两银为黄杨科野扇花属植物野扇花Sarcococca ruacifolia Stapf.的干燥根或全株，苗药名bub jid ngongx,又名清香桂、山豆根等，分布于我国西南及广西、湖南等地，是《贵州省中药材、民族药材质量标准》收载品种。主要用于治疗胃病、跌打劳伤、头晕心悸、喉咙肿痛、凉血化瘀、解毒敛疮。由于该药的分布广，产量较大，因此对三两银中的有效成分进行深入的药理研究具有特别的现实意义。申请人经过大量的实验，成功从苗药三两银中分离出富贵草胺碱G，并经过药理研究证实其对老年性痴呆具有治疗作用，且有望成为新的こ酰胆碱酯酶抑制剂。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供了富贵草胺碱G作为こ酰胆碱酯酶抑制剂的应用；本发明所要解决的另ー个技术问题是还提供了富贵草胺碱G在制备预防或治疗老年性痴呆的药物中的应用。为解决上述技术问题，本发明采用如下技术方案实现富贵草胺碱G作为こ酰胆碱酯酶抑制剂的应用。富贵草胺碱G在制备预防或治疗老年性痴呆的药物中的应用。ー种抗胆碱酯酶药，所述药物中包括富贵草胺碱G。具体地说，前述的抗胆碱酯酶药主要由富贵草胺碱G制备而成。
一种预防或治疗老年性痴呆的药物，所述药物中包括富贵草胺碱G。具体地说，前述预防或治疗老年性痴呆的药物主要由富贵草胺碱G制备而成。上述药物的给药途径为ロ服，皮下、静脉或肌肉注射。所述的富贵草胺碱G的分子式为C28H48N20，为无色结晶，结构式为
f I
CH3 H n所述的富贵草胺碱G可以这样制备取三两银，粉碎成粗粉，用95%的こ醇回流 提取三次，毎次3小吋，合并提取液，浓缩得浸膏，浸膏加蒸馏水溶解，用氯仿萃取5次，氯仿萃取液减压浓缩得到浸膏，浸膏用硅胶拌样进行柱层析分离，用石油醚-丙酮-ニこ氨100:1:1，100:5:1，100:10:1，100:20:1，100:50:1,100:100:1 梯度洗脱，得 6 个部分；取第2部分，上硅胶柱，用石油醚-ニこ氨100:1，100:3，100:5，100:10梯度洗脱，其中100:3流份用石油醚ニ乙氨100:1洗脱，洗脱液用甲醇重结晶，即得。阿尔茨海默病(Alzheimer，s disease, AD)(即老年性痴呆),是一种多发生在老年，以大脑3样淀粉变性、神经元缠结为主要病理改变的进行性神经变性疾病。1907年，德国学者Alois Alzheimer首次报道AD的临床表现和病理改变，其病理学特征是出现大量的老年斑(SPs)和神经原纤维缠结(NFTs)，生化上主要表现为胆碱こ酰基转移酶(ChAT)和こ酰胆碱(Ach)含量的減少和合成不足。老年性痴呆的发病机制十分复杂，其产生原因与胆喊能损伤、^样淀粉蛋白(A0 )异常沉积、tau蛋白异常憐酸化、炎症机制等因素密切相关。其中，胆碱能损伤是由于胆碱能神经递质是脑组织中的重要化学物质，患AD吋，基底前脑区的胆碱能神经元減少，导致こ酰胆碱(ACh)合成、储存和释放減少，进而引起以记忆和识别功能障碍等一系列临床表现，还能选择性地损坏こ酰胆碱能神经，从而影响人的认识学习记忆等功能，所以AD的发生与患者大脑内神经递质——こ酰胆碱的缺失密切相关，目前对老年痴呆的药物治疗主要是通过抑制胆碱酯酶来提高患者体内的こ酰胆碱水平。AP是由淀粉样前体蛋白(APP)裂解而来，其异常沉积可引起神经元凋亡、损伤线粒体功能、诱导星形胶质细胞氧化损伤、致细胞内毒性作用，是老年痴呆症的重要病因。AD患者脑内标志性病理变化之一是神经细胞内神经原纤维缠结(neurofibrillary tangles,NFTs)，NFFs的主要成分是过度磷酸化的Tau蛋白，当tau蛋白被过度磷酸化，并在细胞内形成了聚积后，则会失去其自身的功能，导致微管功能的损害。炎症机制在AD的发病过程中具有一定的作用，其中，小胶质细胞和星形胶质细胞的活化是炎症反应的两个重要环节，研究发现，在AD患者脑内胞质磷脂酶A2 (cytosolic phosphor lipase A2, cPLA2)免疫活性的星形胶质细胞比对照组明显増加，其存在区域与AP沉积区域相一致，提示其脑内存在着急性炎症反应，同吋，还证实CPLA2对脑内炎症介质和第二信使的产生过程起着重要作用。鉴于此，申请人对富贵草胺碱G抗胆碱酯酶的活性、干预AP表达、降低Tau蛋白过磷酸化、改善局灶性炎症反应等抗AD的作用机制进行了实验研究。并通过以下实施来进ー步阐述本发明。实验例I :对大鼠血清胆碱酯酶的抑制作用I.材料与方法I. I药品与试剂富贵草胺碱G，来源于贵阳中医学院药学系；胆碱酯酶测定试剂盒(上海荣盛生物技术有限公司，许可证号20030955) ;ニ甲基亚砜(DMSO) ；pH7. 4磷酸缓冲液。I. 2 仪器全自动生化分析仪(魅力2000)，台式离心机I. 3血清中胆碱酯酶的制备SD大鼠I只，雄性，300g (购于贵阳医学院实验动物中心，许可证号SCXK (黔)2002—0001),短头取血8ml，在常温下静置6h以后以3000r/min离心15min，取上清液3ml，用磷酸缓冲液按I:9稀释备用。I. 4大鼠血清胆碱酯酶活性的测定共分为4组，每组10份，分别为对照组，富贵草胺碱G大、小剂量组。待测药品的大、小剂量组按生药量lg/lml、0. 5g/lml换算用等量DMSO溶解，检测操作按试剂盒说明进行，以胆碱酯酶活力(U/L)为指标评价受试药的抗胆碱酯酶活性。I. 5统计学处理数据用SPSS11. 0软件进行分析，以平均值土标准差し十S)表示，组间差异采
用方差分析，以P〈0. 05作为显著性差异的标准。2.结果表I对胆碱酯酶的影响(x ±S, n=10)
权利要求
1.富贵草胺碱G作为こ酰胆碱酯酶抑制剂的应用。
2.富贵草胺碱G在制备预防或治疗老年性痴呆的药物中的应用。
3.如权利要求I或2所述的应用，其特征在于所述富贵草胺碱G这样制备取三两银，粉碎成粗粉，用95%的こ醇回流提取三次，毎次3小时，合并提取液，浓缩得浸膏，浸膏加蒸馏水溶解，用氯仿萃取5次，氯仿萃取液减压浓缩得到浸膏，浸膏用硅胶拌样进行柱层析分离，用石油醚-丙酮-ニこ氨 100:1:1，100:5:1，100:10:1，100:20:1，100:50:1,100:100:1梯度洗脱，得6个部分；取第2部分，上硅胶柱，用石油醚-ニこ氨100:1，100:3,100:5,100:10梯度洗脱，其中100:3流份用石油醚ニ乙氨100:1洗脱，洗脱液用甲醇重結晶，SP得。
4.ー种抗胆碱酯酶药，其特征在于所述药物中包括富贵草胺碱G。
5.如权利要求4所述的抗胆碱酯酶药，其特征在于所述药物主要由富贵草胺碱G制备而成。
6.一种预防或治疗老年性痴呆的药物，其特征在于所述药物中包括富贵草胺碱G。
7.如权利要求6所述预防或治疗老年性痴呆的药物，其特征在于所述药物主要由富贵草胺碱G制备而成。
全文摘要
本发明提供了富贵草胺碱G的用途，具体地说，富贵草胺碱G可作为乙酰胆碱酯酶抑制剂的应用，亦可用于预防或治疗老年性痴呆，且效果明显，具有开发利用价值。
文档编号C07J41/00GK102772418SQ20121029718
公开日2012年11月14日 申请日期2012年8月21日 优先权日2012年8月21日
发明者何康, 刘冬, 杜江, 许建阳, 邹顺 申请人:贵阳中医学院