一种采用sfc提纯奥利司他的方法
【专利摘要】本发明涉及一种有机化合物的提纯方法，具体来说，本发明涉及一种制备高质量奥利司他的方法和工艺。经过本发明公开的半制备SFC分离系统制备高质量奥利司他工艺后，采用高效液相色谱测定奥利司他含量，奥利司他的色谱含量可达99.5%以上，已知杂质的含量小于等于0.15%。未知杂质的含量在0.10%以下。
【专利说明】一种采用SFC提纯奥利司他的方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种有机化合物的提纯方法，具体来说，本发明涉及一种SFC制备高质量奥利司他的方法及其工艺。
【背景技术】
[0002]奥利司他(Orlistat)是链霉菌属的天然产物Lipstatin (利普斯他汀)经氢化后的衍生物，化学名为S-2-甲酰胺基-4-甲基戊酸(S) -1-{[(2S，3S)_3-己基-4-氧-2-乙氧基]甲基}十二烷酯。奥利司他为瑞士巴塞尔豪夫迈.罗氏有限公司研发的减肥药，它是长效和强效的特异性胃肠道脂肪抑制剂，通过与胃和小肠腔内胃脂肪酶和胰脂肪酶的活性丝氨酸部分形成共价键使酶失活而发挥治疗作用，失活的酶不能将食物中的脂肪，主要是甘油三酯水解为可吸收的游离脂肪酸和单酰基甘油。未消化的甘油三酯不能被身体吸收，从而减少热量摄入，控制体重。
[0003]国内外对奥利司他的制备和提纯的研究已经比较多。在发酵方面，早在1986年美国专利就公开了用色谱法浓缩和纯化得到奥利司他的方法，即将发酵物Lipstatin用溶媒浸泡后浓缩，再上柱洗脱、浓缩，之后经氢化后用庚烷结晶；中国专利公开的提纯方法包括先用中等极性的溶媒溶解样品，过滤去杂质、结晶，再用非极性溶媒进行重溶解、重结晶，以达到提纯的目的；还有专利公开了一种使用动态柱制备高质量奥利司他的方法。虽然这些公开的纯化奥利司他的方法比较简单，但是势必会带来溶解用量增加、收率偏低、环境污染等问题，从而造成成本大大增加，失去发酵的成本竞争优势。
[0004]本发明提供了一种SFC提纯奥利司他的方法和工艺，采用超临界CO2作为主要流动相，添加少量有机溶剂作为改性剂，有机溶剂用量少，超临界CO2经减压后变为气态挥发，大量制备时可回收利用，绿色环保，成本低，后续处理简单。·
【发明内容】
[0005]本发明的目的是通过筛选SFC的各项色谱分离条件，包括CO2流速、改性剂种类和流速、温度、压力、色谱柱型号和规格等技术参数，获得快速、准确、高效、经济的纯化奥利司他的SFC制备方法，该方法包括以下步骤:
(1)将奥利司他样品用有机溶剂或有机溶剂和水的混合溶液溶解，如果需要，加入活性炭搅拌脱色，过滤除去微小的固体不溶物，得到滤液作为待纯化样品；
(2)将过滤产物通过进样泵或者进样阀注入半制备SFC分离系统；
(3)采用CO2和改性剂做流动相，调节系统温度、压力、改变色谱柱类型等条件，收集奥利司他馏分，挥干溶剂后得到奥利司他产品。
[0006]在进一步的实施方案中，本发明的奥利司他样品为干料。
[0007]在进一步的实施方案中，步骤(1)中的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇或它们的混合物。最佳的溶样选择是有机溶剂与奥利司他样品的体积重量比为1:1。
[0008]步骤(3)中采用的色谱柱规格:内径l(Tl00mm、长度15(T300mm，填充固定相为C18、C8，系统中压力范围为9MPa~40MPa，温度范围为30°C~70°C。
[0009]步骤(3)中，采用CO2和改性剂作为流动相，改性剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇、正己烷或它们的混合物，流动相中CO2与改性剂的体积比(V/V)范围为100/0-80/20。
【具体实施方式】
[0010]实施例1
奥利司他原料20mg，lml甲醇溶解，过滤后由自动进样器注入半制备SFC分离系统中；色谱柱尺寸为Φ 10 X 250mm，C18填料，粒径为3~50um，CO2流速为0.8^10.0ml/min，温度为40°C，背压为lOMPa。采用的紫外光度检测器的检测波长为210nm，收集奥利司他出谱峰馏分，经HPLC分析纯度≥99.8%。
[0011]实施例2
奥利司他原料50mg，lml甲醇溶解，过滤后由自动进样器注入半制备SFC分离系统中；色谱柱尺寸为Φ 10 X 250mm，C18填料，粒径为3~50um，CO2流速为5.0-20.0ml/min，温度为40°C，背压为15MPa。采用的紫外光度检测器的检测波长为210nm，收集奥利司他出谱峰馏分，经HPLC分析纯度≥99.6%。
[0012]实施例3
奥利司他原料50mg，lml甲醇溶解，过滤后由自动进样器注入半制备SFC分离系统中；色谱柱尺寸为Φ 30 X 250mm，C8填料，粒径为3~50um，CO2流速为5.0~40.0ml/min，温度为40°C，背压为20MPa。采用的紫外光度检测器的检测波长为210nm，收集奥利司他出谱峰馏分，经HPLC分析纯度≥ 99.3%。
【权利要求】
1.一种用半制备SFC分离系统提纯奥利司他的方法，其特征在于包括以下步骤: (1)将奥利司他样品用有机溶剂或有机溶剂和水的混合溶液溶解，如果需要，加入活性炭搅拌脱色，过滤除去微小的固体不溶物，得到滤液作为待纯化样品； (2)将过滤产物通过进样泵或者进样阀注入半制备SFC分离系统； (3)采用CO2和改性剂做流动相，调节系统温度、压力、改变色谱柱类型等条件，收集奥利司他馏分，挥干溶剂后得到奥利司他产品。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征是:所述步骤(I冲的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇或它们的混合物。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征是:所述步骤(3)中，在半制备SFC分离系统中，采用色谱柱的规格:内径l(Tl00mm、长度15(T300mm，填充固定相为C18、C8。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征是:所述步骤(3)中，系统中压力范围为9MPa~40MPa。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征是:所述步骤(3)中，系统温度范围为300C ~70O。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征是:所述步骤(3)中，采用CO2和改性剂作为流动相，改性剂为甲醇、乙醇、乙腈、丙酮、异丙醇、正己烷或它们的混合物，流动相中CO2与改性剂的体积比(V/V)范围为100Α 80/20。
【文档编号】C07D305/12GK103788029SQ201210429832
【公开日】2014年5月14日 申请日期:2012年11月1日 优先权日:2012年11月1日
【发明者】王冰冰, 朱雨庭, 盛晓宇 申请人:江苏汉邦科技有限公司