专利名称：从羊毛脂中分离提取甾醇的方法
技术领域：
本发明属于生化分离方向，用于从羊毛脂中分离提取留醇，具体是指经皂化一复分解一溶剂选择萃取一柱层析一重结晶等工艺，得到高质量胆固醇、羊毛留醇等留醇的方法。
背景技术：
胆固醇作为一种人们熟知的天然材料，由于具有多种特性，使其在化妆品、材料、生物医药领域得到了广泛的应用。①从生物学因素方面分析，胆固醇对细胞膜具有亲和作用，并且能改变细胞膜的性质，这对于聚合物在药物缓释材料和组织工程方面的应用具有重要意义。②重要的药物中间体，主要用于合成维生素D3、留体药物及相关性激素等。③胆固醇具有多个手性中心，它的衍生物(醚类、酯类、卤化物、碳酸酯等)能够形成各种独特的集合体，包括液晶、有机凝胶和单分子层、特别胆留基类液晶分子。④胆固醇对皮肤具有润滑性，且其独特的结构能够吸收自由基，因此胆固醇可作为化妆品及防晒霜的添加剂。
权利要求
1.从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征是包括如下步骤: ①皂化反应:以低级脂肪醇作为溶剂，称取碱，控制温度在5(T60°C，滴加入熔融状态的羊毛脂，任选地滴加少量水，升温至78 85°C，常压下搅拌反应3 8h得到深棕色混合物； ②皂化复分解:冷却上述反应液4(T55°C度，调节pH至8-9，加入钙盐，搅拌得到钙皂，离心或抽滤进行固液分离，同时再利用低级脂肪醇对滤渣进行2 3次回流萃取，然后抽滤并收集滤液，合并所有滤液并浓缩； ③滤渣在5(T60°C，经无机酸酸化后得到粗品羊毛酸，粗羊毛酸进行精制后得到精制羊毛酸； ④除去残留钙离子，降低羊毛醇粘度:将滤液浓缩液用低级烷烃、乙酸乙酯、甲醇或乙醚溶解，加入低级脂肪酸搅拌，得到白色固体，抽滤后对油相进行水洗，至水相PH呈中性，收集油相并进行浓缩； ⑤将上步的浓缩油相用石油醚溶解后加入少量硅胶粉，旋蒸至干燥，干法上样，以石油醚及乙酸乙酯为流动相，调整石油醚与乙酸乙酯比进行梯度洗脱，先以100%石油醚洗脱得到未皂化羊毛脂；用30:1体积比石油醚:乙酸乙酯进行洗脱得到脂肪醇组分；其次换用20:1体积比石油醚:乙酸乙酯流动相进行洗脱，得到羊毛留醇组分；然后换用10:1体积比石油醚:乙酸乙酯流动相进行洗脱，得到胆固醇组分； ⑥将上步得到的羊毛留醇组分和胆固醇组分利用低级脂肪醇进行重结晶精制，得到最终产品。
2.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于:步骤①②⑥所述的低级脂肪醇溶剂为无水乙醇、90-98%乙醇或甲醇。
3.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于:步骤②所述的钙盐为无水氯化钙和/或水合氯化钙。
4.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于:步骤③所述的无机酸为309Γ38%盐酸、硫酸或磷酸等。
5.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于:步骤④所述的低级脂肪酸为乙酸。
6.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于:在步骤④之后还包括柱层析的操作，其中柱层析所使用的流动相为石油醚、正己烷、正庚烷、辛烷、甲苯中的一种与乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、丙酮中的一种的混合物，其比例范围为体积比100:1 10:1，优选的，所述的层析介质为100 200目硅胶。
7.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于:步骤⑥所述的低级烷烃为正己烷、正戊烷。
8.如权利要求1所述的从羊毛脂中分离提取留醇的方法，其特征在于步骤③所述的精制工艺包括如下步骤:粗羊毛酸用水萃取分离 ，其中深棕色上层和黄色中层在低温下结成胶状羊毛酸固体；下层为水，分离去除下层。
全文摘要
本发明公开了一种从羊毛脂中分离提取高纯度甾醇的方法，包括如下步骤①羊毛脂在碱醇溶液中进行皂化反应；②利用氯化钙与上步产物进行皂化复分解，得到钙皂及羊毛醇；③抽滤得到的滤液，利用低级脂肪醇对滤渣回流萃取，收集滤液，加入脂肪酸，除去残留的钙离子；④滤饼经酸化漂白后得到羊毛酸；⑤重结晶得到精制产品。经过以上各步骤后，得到的胆固醇纯度高于93%，收率大于78%。该方法优点是得到产品纯度及收率高、色泽和晶型佳、无异味，且工艺流程简单、易于操作，而且工艺流程中的溶剂、层析介质均可回收再利用，基本上无废弃物产生，从而使得该工艺成本低廉，可工业化生产。
文档编号C07J9/00GK103113446SQ20131008252
公开日2013年5月22日 申请日期2013年3月15日 优先权日2013年3月15日
发明者谭天伟, 董森, 马凯琛, 周雅莉, 王斌, 刘广 申请人:北京化工大学