一种栀子来源的藏红花酸的制备方法
【专利摘要】本发明提供一种栀子来源的藏红花酸的制备方法，包括以下步骤：提取栀子原料；酶解上述制得粉末，加入混合酶；碱提，酶解后，加入反应物氢氧化钠溶液，搅拌提取1h，过滤，有粗产品析出，再次过滤，得到含量50%以上的藏红花酸；结晶，将得到的藏红花酸，加入无水乙醇，回流2小时，放凉结晶，过滤烘干后即得含量95%以上的藏红花酸产品。本发明解决藏红花药材紧缺、价格昂贵问题。
【专利说明】一种栀子来源的藏红花酸的制备方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种桅子来源的藏红花酸的制备方法。
【背景技术】
[0002]藏红花酸是藏红花柱头的有效成分之一，具有不饱和共轭多烯酸结构，属于类胡萝卜素类。藏红花酸具有降低胆固醇，抑止肿瘤生长，肝中毒抑止剂等多种生理功能。此外，藏红花酸是皮肤单线态氧清除剂，胶原质合成刺激剂和皮肤免疫促进剂，所有这些都有需要高纯度的藏红花酸。但是藏红花柱头产量极低，且其资源极其有限，在中国很难大面积栽培，致使其价格昂贵被誉为“植物黄金”。[0003]传统中药桅子的干燥成熟果实含丰富的黄色素，其主要成分是藏红花素(Crocin)和藏红花酸(Crocetin)，因此，可以考虑从桅子中制备高纯度藏红花酸，以代替藏红花。
[0004]专利申请201110417356.1公开了一种制备藏红花酸和藏红花素的方法。该方法包括用乙醇在超声波条件下制备桅子果提取液，提取液浓缩得到浸膏。浸膏溶在聚乙二醇水溶液中，然后用溶剂进行选择性萃取得到藏红花酸及藏红花素。该方法选择性萃取得到藏红花酸及藏红花素，使用有机试剂较多，对环境污染较大，而且得到的是藏红花酸和藏红花素的混合物，藏红花酸纯度偏低。
[0005]专利申请20091009785.9公开了一种从菌草科植物桅子属(狭叶桅子、匙叶桅子、海南桅子、大黄桅子、桅子)植物的果实、西红花和西红花组织培养物中高效分离西红花酸的方法。桅子属果实(西红花和西红花组织培养物)通过酸水提取色素后或原料直接用碱水提取，水液酸化后用乙酸乙酯萃取得到西红花酸粗品，粗品用不同溶剂重结晶得到西红花酸纯品。此方法藏红花酸收率低，未能将桅子原料中的藏红花素转化成藏红花酸，原料利用率低；而且过程中要用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯对环境影响较大，毒性较大。
[0006]专利申请200710001116公开了一种从桅子中提取制备西红花酸的方法，将桅子粉碎经蒸馏水或乙醇溶液超声强化提取，提取液过滤后浓缩或经大孔树脂分离桅子苷类物质后将西红花苷洗脱液浓缩，酸水解或碱水解(碱水解液需调P H至酸性)，离心，水洗沉淀得西红花酸粗品；进一步纯化西红花酸粗品，将反式西红花酸与顺式西红花酸分离，得到高纯度的反式西红花酸；高纯度的反式西红花酸便于进行结构修饰，形成不同水溶性和药效特点的西红花酸衍生物，从而为相关的制剂研发和应用提供原料。此方法中进行了大孔树脂吸附，增加了溶剂消耗和环境污染，而且会使桅子原料中原有的藏红花酸有部分损失，原料利用率低。
【发明内容】
[0007]本发明提供了一种桅子来源的藏红花酸的制备方法，以解决藏红花药材紧缺、价格昂贵问题。
[0008]本发明给出的解决方案是:
[0009]一种桅子来源的藏红花酸的制备方法，包括以下步骤:[0010](I)提取:桅子原料，用8-10倍70%乙醇提取，将提取液浓缩后喷雾干燥，粉末备用；
[0011](2)酶解:上述制得粉末，加入3-5倍量水和1-1.5%混合酶，在40_45°C，ρΗ5_5.5条件下酶解24小时；所述混合酶为植物精提复合酶SPE-005、植物精提复合酶SPE-007A及黑曲霉以1:1:3比例混合；
[0012](3)碱提:酶解后，加入反应物4-5倍量、质量浓度为1%的氢氧化钠溶液，70°C搅拌提取lh，过滤，过滤后碱液用稀酸中和至ph3-4，会有粗产品析出，再次过滤，得到含量50%以上的藏红花酸；
[0013](4)结晶:将步骤(3)得到的藏红花酸，加入15-20倍量无水乙醇，80°C回流2小时，放凉结晶，过滤烘干后即得含量95%以上的藏红花酸产品。
[0014]基于上述基本方案，本发明还作如下优化限定和改进:
[0015]步骤(1)中，用8倍质量的70% (V/V)乙醇提取2次，合并提取液。
[0016]步骤(3)中采用稀酸采用稀盐酸。
[0017]步骤(3)中，反应物里加入5倍量1%的氢氧化钠溶液。
[0018]本发明能够获得高含量藏红花酸，解决了藏红花原料短缺、价格昂贵问题。本法直接经含水醇提取浓缩喷雾干燥，然后经酶解将藏花素转化成藏花酸，然后用碱水将藏红花酸提取出来，具体有以下优点: [0019]1、减少了溶剂萃取法使用的有机试剂污染、对环境友好，2、不使用大孔树脂，就减少了有机溶剂使用量，缩短工序，降低成本，3、最重要的是我们可以将桅子原料中的藏红花酸和藏红花素全部提取转化成藏红花酸，大大的提高了藏红花酸的得率，提高了原料利用率。
【具体实施方式】
[0020]下面将结合实施例对本发明进行详细地说明。
[0021]实施例1:一种桅子来源藏红花酸的制备方法，依次包括以下步骤。
[0022]1、提取:桅子果实100g，用8倍量70%乙醇提取2次，合并，浓缩至无醇味，喷雾干燥，得到粉末18.6g。
[0023]2、酶解:上述粉末，加入3倍水，1%的混合酶(SPE-005、SPE-007A、黑曲霉，比例1:1:3)。在45°C，ph5条件下酶解24小时。其中，SPE-005主要含有纤维素酶、果胶酶、兼有木聚糖酶、B-葡聚糖酶；SPE-007A主要含有B-葡萄糖苷酶，兼有鼠李糖苷酶、木聚糖酶、B-葡聚糖酶、纤维素酶、半纤维素酶。
[0024]3、碱提:酶解完成后，反应物里加入5倍量1%的氢氧化钠溶液，70°C搅拌提取lh，过滤，过滤后碱液用稀盐酸中和至ph3-4，会有粗产品析出，离心过滤，离心沉淀烘干，得到含量52.8%的藏红花酸0.78g。
[0025]4、结晶:称取上述3中藏红花酸0.6g，加入12ml无水乙醇，80°C回流2小时，趁热过滤，滤液放凉结晶，得到0.28g，98.4%的藏红花酸产品。
[0026]实施例2: —种桅子来源藏红花酸的制备方法，依次包括以下步骤。
[0027]1、提取:桅子果实200g，用8倍量70%乙醇提取2次，合并，浓缩至无醇味，喷粉，得到粉末37.8g。[0028]2、酶解:上述粉末，加入5倍水，1.5%的混合酶(SPE-005、SPE-007A、黑曲霉，比例1:1:3)。在40°C，ph5.2条件下酶解24小时。
[0029]3、碱提:酶解完成后，反应物里加入5倍量1%的氢氧化钠溶液，70°C搅拌提取lh，过滤，过滤后碱液用稀盐酸中和至ph3-4，会有粗产品析出，离心过滤，离心沉淀烘干，得到含量53.3%的藏红花酸1.55g。
[0030]4、结晶:称取上述3中藏红花酸1.5g，加入25ml无水乙醇，80°C回流2小时，趁热过滤，滤液放凉结晶，得到0.71g，96.7%的藏红花酸产品。
[0031]实施例3: —种桅子来源藏红花酸的制备方法，依次包括以下步骤。
[0032]1、提取:桅子果实200g，用10倍量70%乙醇提取2次，合并，浓缩至无醇味，喷粉，得到粉末38.4g。
[0033]2、酶解:上述粉末，加入5倍水，1.5%的混合酶(SPE-005、SPE-007A、黑曲霉，比例1:1:3)。在45°C，ph5.5条件下酶解24小时
[0034]3、碱提:酶解完成后，反应物里加入5倍量1%的氢氧化钠溶液，70°C搅拌提取Ih,过滤，过滤后碱液用稀盐酸中和至ph3-4，会有粗产品析出，离心过滤，沉淀烘干，得到52.3%的藏红花酸1.69g。
[0035]4、结晶:称取上述3中藏红花酸1.65g，加入30ml无水乙醇，80°C回流2小时，趁热过滤，滤液放凉结晶 ，得到0.68g，97.8%的藏红花酸产品。
【权利要求】
1.一种桅子来源的藏红花酸的制备方法，包括以下步骤: (1)提取:桅子原料，用8-10倍70%乙醇提取，将提取液浓缩后喷雾干燥，粉末备用； (2)酶解:上述制得粉末，加入3-5倍量水和1-1.5%混合酶，在40-45°C，pH5-5.5条件下酶解24小时；所述混合酶为植物精提复合酶SPE-005、植物精提复合酶SPE-007A及黑曲霉以1:1:3比例混合； (3)碱提:酶解后，加入反应物4-5倍量、质量浓度为1%的氢氧化钠溶液，70°C搅拌提取lh，过滤，过滤后碱液用稀酸中和至ph3-4，会有粗产品析出，再次过滤，得到含量50%以上的藏红花酸； (4)结晶:将步骤(3)得到的藏红花酸，加入15-20倍量无水乙醇，80°C回流2小时，放凉结晶，过滤烘干后即得含量95%以上的藏红花酸产品。
2.根据权利要求1所述的桅子来源的藏红花酸的制备方法，其特征在于:步骤(1)中，用8倍质量的70%乙醇提取2次，合并提取液。
3.根据权利要求1所述的桅子来源的藏红花酸的制备方法，其特征在于:步骤(3)中采用稀酸采用稀盐酸。
4.根据权利要求1所述的桅子来源的藏红花酸的制备方法，其特征在于:步骤(3)中，反应物里加入5倍量1%的氢氧化钠溶液。
【文档编号】C07C51/42GK103539657SQ201310508185
【公开日】2014年1月29日 申请日期:2013年10月24日 优先权日:2013年10月24日
【发明者】张永利, 张文雪, 赵江, 李艳, 寇玉锋 申请人:陕西源邦生物技术有限公司