专利名称：抗菌剂的制作方法
技术领域：
本发明涉及用于预防和治疗人类和动物如牛的传染性疾病的抗菌剂。根据本发明，提供了抵抗格兰氏阴性和格兰氏阳性细菌的抗菌剂。
背景技术：
在人类和动物如牛、鸟类和鱼类的由致病细菌如金黄色葡萄球菌，溶血性链球菌、炭疽芽孢杆菌和破伤风梭菌引起的传染性疾病中，通常使用抗菌素或合成抗菌剂，包括青霉素、四环素、大环内酯、头孢菌素和头孢烯。
通常，这些传统抗菌素或合成抗菌剂的长期或大量使用对上述致病细菌产生抗药性。特别是抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MR-SA)，它因毒性强而引起高死亡率，已成为大的社会问题，因为它对许多药物产生抗药性并造成治疗困难。
本发明人进行了广泛的研究，以期解决上述问题，并发现某些迄今已知具有除草活性的酮腈(Ketonitrile)衍生物(见日本专利申请公开(Kokai)No.5-148,213,6-179,646和7-109,249)以及甚至一些迄今已公认不具有除草活性的酮腈衍生物具有抗菌活性，且特别是对格兰氏阳性细菌如葡萄球菌和链球菌以及格兰氏阴性细菌具有高抗菌活性，从而完成了本发明。发明公开本发明涉及一种抗菌剂，含有下式(1)所示酮腈衍生物或其盐作活性成分 (其中R1为氢原子或低级烷基，各R2、R3、R4和R5相同或互不相同，为氢原子，卤素原子，硝基，低级烷基，低级烷氧基，或取代的或未取代的苯氧基，X为取代的或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团，Y为取代或未取代的芳烃基团，取代或未取代的杂环基团，由取代或未取代的芳烃基团或由取代或未取代的杂环基团取代的羰基，或N，N-二取代的氨基甲酰基)。实施本发明的最佳方式在式(1)中，由R1所示的低级烷基的实例包括甲基，乙基，丙基和异丙基。优选R1为氢原子或甲基。
在式(1)中，各R2-R5的实例包括氢原子；卤原子，如氯，溴，氟和碘；硝基；低级烷基，如甲基，乙基，丙基和丁基；以及低级烷氧基，如甲氧基，乙氧基和丙氧基；苯氧基如2-氯-4-三氟甲基苯氧基。
在式(1)中，X所示未取代的芳烃基团的实例包括苯基和萘基。X所示未取代的杂环基团的实例包括含一个或多个杂原子氧、硫或氮的5元或6元环构成的基团；或由这些基团和苯环缩合形成的基团，例如芳族杂环基团，如吡啶基，喹啉基，异喹啉基，嘧啶基，噁唑基，苯并噁唑基，呋喃基，苯并呋喃基，噻唑基，苯并噻唑基，噻吩基和苯并噻吩基；以及非芳族杂环基团，如哌啶基，吡咯烷基，吗啉基，四氢呋喃基和四氢噻吩基。尤其优选芳族杂环基团。
当基团X为取代的芳烃基团或取代的杂环基团时，取代基的实例包括卤素原子如氯，氟，溴和碘；卤代烷基如三氟甲基；硝基，氰基，烷基，烷硫基和烷氧羰基。取代基数目可为一个或多个。从所得化合物显示增强的抗菌活性来看，尤其优选该取代基或这些取代基为选自卤素原子和卤代烷基的一种或均质或非均质的两种。
在式(1)中，Y所示未取代的芳烃基团包括苯基和萘基。也由Y所示的未取代杂环基团包括由各含一个或多个杂原子氧、硫或氮的5元或6元环构成的基团；或由这些基团与苯环缩合所形成的基团，例如对基团X所提到的上述杂环基团。尤其优选芳族杂环基团。
当基团Y为取代的芳烃基团，取代的杂环基团或被取代的芳烃基团或取代的杂环基团之一取代的羰基时，取代基的实例包括卤素原子如氯，氟，溴和碘；卤代烷基如三氟甲基；烷基，烷氧基，烷硫基和烷氧羰基。
N，N-二取代的氨基甲酰基的实例包括取代或未取代的烷基，取代或未取代的链烯基，取代或未取代的烷氧基，取代或未取代的芳族基团或由取代或未取代的杂环基团取代的氨基甲酰基。另外，键于氨基甲酰基上的两个取代基可结合形成一个可含有杂原子的环(该环的实例包括吡咯烷，哌啶和吗啉)。也可使用可与苯环稠合或可用烷基取代的1-氮杂环烷基羰基或类似基团。
式(1)化合物分成下式(2)、(3)和(4)所示的3类。在本发明中，可使用属于任一这些化合物类的化合物。 (式中R1，R2，R3，R4，R5，X和Y具有上面所定义的相同含意)。
在式(2)中，基团X优选是未取代或取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，取代或未取代的苯并噁唑基，或取代或未取代的苯并噻唑基。特别优选可用卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯基；可用卤素原子，卤代烷基或氰基取代的吡啶基；可用卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯并噁唑基；或可用卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯并噻唑基。
在(2)中，Y优选为取代或未取代的苯基，取代或未取代的嘧啶基，取代或未取代的噻吩基，取代或未取代的萘基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。特别优选被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的苯基；被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的嘧啶基；被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的噻吩基；或被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的萘基；被低级烷基，芳基或芳烷基取代的N，N-二取代氨基甲酰基；或可与苯环稠合或可用烷基取代的1-氮杂环烷基羰基。
在式(2)中，X和Y优选是取代或未取代的芳族杂环基团，其中X的优选实例包括取代或未取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，取代或未取代的苯并噁唑基，或取代或未取代的苯并噻唑基，Y的优选实例包括取代或未取代的苯基，取代或未取代的嘧啶基，取代或未取代的噻吩基，取代或未取代的萘基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。更优选X为可由卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯基；可由卤素原子，卤代烷基或氰基取代的吡啶基；可由卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯并噁唑基；或可由卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯并噻唑基；而Y为可由卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的苯基；可由卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的嘧啶基；可由卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的噻吩基；可由卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的萘基；可由低级烷基，芳基或芳烷基取代的N，N-二取代氨基甲酰基；或可与苯环稠合成可用烷基取代的1-氮杂环烷基羰基。
在式(2)中，X和Y的更优选组合如下X为取代或未取代的吡啶基，Y为取代或未取代的苯基，取代或未取代的嘧啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基；X为取代或未取代的苯基，Y为取代或未取代的嘧啶基或N，N-二取代的氨基甲酰基；X为取代或未取代的苯并噁唑基或取代或未取代的苯并噻唑基，Y为取代或未取代的苯基。
在式(2)所示的酮腈衍生物中，尤其优选4-[4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶基氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(pentanonitrile)(化合物号4)，因其抗菌活性突出。
在式(3)中，X优选为取代或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团。特别优选X为取代或未取代的苯基，或取代或未取代的吡啶基。具体而言，优选已用卤素原子或卤代烷基取代的苯基和已用卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基。
在式(3)中，Y优选为取代或未取代的苯基，取代或未取代的萘基，取代或未取代的吡啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。更优选可用卤素原子，卤代烷基或烷氧基取代的苯基和N，N-二取代的氨基甲酰基。特别优选用卤素原子或卤代烷基取代的苯基。
在式(3)中，X和Y的优选组合如下X为取代的苯基或取代的吡啶基，Y为取代或未取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。尤其优选其中X为卤素原子或卤代烷基取代的苯基或卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基，而Y为由卤素原子，卤代烷基或烷氧基取代的苯基的组合。
在式(3)所示酮腈衍生物中，因其突出的抗菌活性而优选如下化合物2-(3-溴苯基)-4-[2-氯-5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-3-氧代戊腈，4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，和4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈。
在式(4)中，X优选为取代或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团。特别优选X为取代或未取代的苯基或取代或未取代的吡啶基。尤其优选被卤素原子或卤代烷基取代的苯基和卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基。具体而言，优选被卤素原子或卤代烷基取代的苯基。
在式(4)中，Y优选为取代或未取代的苯基，取代或未取代的萘基或取代或未取代的吡啶基。更优选被卤素原子，卤代烷基或烷氧基取代的苯基。特别优选被卤素原子或卤代烷基取代的苯基。
在式(4)中，X和Y的优选组合如下X为取代的苯基或取代的吡啶基，Y为取代或未取代的苯基，或取代或未取代的吡啶基。尤其优选其中X为被卤素原子或卤代烷基取代的苯基；或被卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基；Y为未取代苯基或被卤素原子，卤代烷基或烷氧基取代的苯基的组合。
在式(4)所示的酮腈衍生物中，因其抗菌活性突出而优选下列化合物4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯氧基]-2-(3-溴苯基)-3-氧代戊腈和4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3-溴苯基)-3-氧代戊腈。
用于本发明的式(1)的酮腈衍生物可以为盐形式。这些盐包括例如与无机酸如盐酸，硫酸，硝酸，氢溴酸或磷酸形成的无机盐；与有机酸如乙酸，富马酸，马来酸，乳酸，酒石酸，柠檬酸，苹果酸，草酸，甲磺酸，苯磺酸和对甲苯磺酸形成的有机盐；与酸性氨基酸如天冬氨酸和谷氨酸形成的盐；与金属如钠，钾，钙，镁，锌和银形成的金属盐；与有机碱如二甲胺，三乙胺，二乙醇胺和苄基胺形成的盐；以及与碱性氨基酸如赖氨酸和精氨酸(alginine)形成的盐。在本发明中，以其水合物为代表的酮腈衍生物(1)的溶合物也可使用。
用于本发明的酮腈化合物(1)例如可按下列方法(a)-(e)中任一种制备(a)使式(5)所示化合物和式(6)所示化合物在有或无溶剂存在下反应得到酮腈衍生物 (其中M为氢原子或碱金属，Z为卤素原子，R1，R2，R3，R4，R5，X和Y具有上面定义的相同含意)。
(b)使式(7)所示化合物和式(8)所示化合物在有或无溶剂存在下反应得到酮腈衍生物 (其中R6为烷氧基或卤素原子，和R1、R2、R3，R4，R5，X和Y具有上面定义的相同含意)。
(c)使式(9)所示化合物与式(10)所示化合物在有或无溶剂存在下反应得到酮腈衍生物(1)。 (其中R1、R2、R3，R4，R5，M，X，Y和Z具有上面定义的相同含意)。
(d)使式(11)所示化合物与式(12)所示化合物在有或无溶剂存在下反应得到酮腈衍生物(1)。 (其中R1、R2、R3，R4，R5，X，Y，Z和M具有上面定义的相同含意)。
(e)使式(13)所示化合物与式(14)所示化合物在有或无溶剂存在下反应得到其中Y为N，N-二取代的氨基甲酰基的式(1)所示酮 (其中Y’和Y”各自表示氢原子，取代或未取代的烷基，链烯基，烷氧基，烷硫基，烷氧羰基，氰基，取代或未取代的芳族基团，取代或未取代的杂环基团，其中Y’和Y”可连在一起形成饱和或不饱和环，该环可含有一个杂原子，R1，R2，R3，R4，R5，X，Y和Z具有上面所定义的相同含意)。
用于上述方法(a)-(e)中的溶剂并无特别限制，并且可使用任何已知溶剂。通常使用的溶剂的典型实例包括醇类如甲醇和乙醇；醚类如二乙醚，二甲氧基乙烷，四氢呋喃和二噁烷；芳烃类如苯和甲苯；含氯溶剂如二氯甲烷，氯仿和四氯化碳；N，N-二甲基甲酰胺，二甲亚砜和Sulorane。
优选如果需要，在反应体系中存在卤化氢清除剂，以除去以副产物出现的卤化氢。对卤化氢清除剂并无特别限制，并可使用常规的那些。卤化氢清除剂的典型和优选实例包括三烷基胺如三乙胺，三甲胺和三丙胺；吡啶，醇钠(sodium alcoholato)，醇钾，DBU，碳酸钠，碳酸钾，氢氧化钠，氢氧化钾和氢化钠。
在方法(a)-(e)中的反应优选在-30℃至200℃的温度下，优选5-150℃下进行。反应时间为0.5-45小时，优选3-24小时。
用已知方法将酮腈衍生物(1)与反应混合物分离并纯化，对此并无特别限制。在通常情况下，优选进行下列程序首先将反应混合物与水混合，然后溶于有机溶剂中，再除去溶剂。残余物由重结晶或柱色谱法提纯。
一般来说，用于本发明的酮腈衍生物在室温和大气压下是浅黄色或黄棕色粘稠物或固体物。
本发明的抗菌剂可制成各种剂形，并以各种给药方法按照待给药主体的种类，即哺乳动物，包括人类，家禽，鱼类等，使用。
当人类为主体时，本发明的药物经口或非肠道给药。此时，药物可任意配成口服制剂如片剂，粉剂，粒剂，胶囊，液体，糖浆，酏剂和油基或水状悬浮液；注射液；局部应用制剂如液体，悬浮液，乳液，软膏，凝胶，霜剂，洗剂和喷雾剂；以及栓剂。
若该药物配成固体制剂，则可使用药物上可接受的药物载体，如填料，增量剂，粘合剂，崩解剂，增溶剂，润湿剂，赋形剂和润滑剂。
若该药物配成注射液，则注射制品可含有增溶剂，防腐剂，增强剂和溶液助剂。此外，在置入容器后，注射制剂可冻干得到固体产品。它们在使用时可返回到注射液。尽管在单一容器内可含有单一剂量，但多个剂量也可含于单一容器内。
当配制液体制剂时，它们可含有悬浮剂，乳化剂或类似物。
为了对人类以外的哺乳动物、家禽或鱼类给予本发明的抗菌剂，该药物可直接口服或与饲料或饮用水混合或溶于其中。另外，该药物可通过注射，经直肠，乳房注射或药浴(在鱼类情况下)经非肠道投药。对于这些目的，该药物可按需要适当地制成例如粉剂，粒剂，可溶性粉剂，糖浆，液体，注射液，栓剂和乳房注射液。
本发明的抗菌剂剂量对成人来说为50mg-1g，优选100mg-600mg/天。当该药物施予人类以外的哺乳动物、家禽或鱼类时，剂量因给药目的(治疗或预防处理)，待治疗主体的种类和大小，引起感染的细菌种类和感染的严重性而不同。通常，药物的给药量为1-200mg/天，优选5-100mg/天/kg体重，每天一次给药或分2-4次给药。对于人类，动物和其他物种，剂量可根据疾病状况，年龄和体重而改变。
本发明的抗菌剂对属于葡萄球菌属，链球菌属，利斯特氏小菌属，芽孢杆菌属，梭菌属，棒杆菌属，丹毒丝菌属，博德特氏菌属，和巴斯德氏菌属的细菌具有增强的抗菌活性。
因此，本发明的抗菌剂可有效地用于各种由上述细菌引起的疾病，包括例如毛囊炎，疖，痈，丹毒，淋巴管炎/淋巴结炎，脓肿，汗腺炎，肛门脓肿，乳腺炎，与创伤，烧伤或手术创伤有关的浅表继发性感染，支气管炎，肺炎，肾炎，膀胱炎，尿道炎，子宫内感染，中耳炎， 炎，心内膜炎，脓毒症，炭疽和破伤风。本发明的抗菌剂也可有效地应用于非人类动物的各种传染疾病，包括例如家禽的葡萄球菌和梭菌感染，猪的链球菌感染，猪丹毒，猪的棒杆菌感染和梭菌感染，奶牛的乳腺炎，牛梭菌感染，狗和猫的膀胱炎和子宫脓肿，鱼的链球菌感染和肠球菌感染，以及鱼的pseudoluberculosis。
实施例下面用实施例来说明本发明，这些实施例不应看作限制本发明。制备实施例14-[4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶氧基)苯氧基]-2-(2，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号2)的制备将在N，N-二甲基甲酰胺(50ml)中的2-(2，4-二氯苯基)-4-(4-羟基苯氧基)-3-氧代戊腈的钾盐(3.2g)和2，3-二氯-5-三氟甲基吡啶(1.8g)在50℃下加热4小时。然后减压蒸除N，N-二甲基甲酰胺。残余物与水混合，然后用氯仿萃取。萃取液浓缩。分离残余物并用柱色谱法纯化。结果得到白色固体状标题化合物(产率60％)。制备实施例24-[4-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-2-甲基苯基amidecarbonile-3-氧代戊腈(化合物号36)的制备将在二甲基甲酰胺(50ml)中的3，4-二氯三氟甲苯(2g)，4-[4-(4-羟基苯氧基)苯氧基]-2-甲基苯基amidecarbonile-3-氧代戊腈(3g)和碳酸钾(3g)在160℃下加热6小时。过滤反应混合物并除去滤液。分离残余物并用柱色谱法纯化。结果得到浅黄色粘稠状标题化合物(4.00g，产率83.2％)。制备实施例34-[4-(3-氯-5-三氟甲基吡啶氧基)苯氧基]-2-二苄基amidecarbonile-3-氧代戊腈(化合物号38)的制备将在苯(20ml)中的2-[4-(2-氯-5-三氟甲基-2-吡啶氧基)苯氧基]丙酰氯(3.00g)滴加到N，N-二苄基-2-氰基乙酰胺(1.20g)，DBU(1.44g)和苯(30ml)的混合溶液中。所得混合物在90℃下回流5小时。取出反应混合物并用氯仿进行萃取。浓缩萃取液。分离残余物并用柱色谱法提纯，结果得到浅黄色粘稠状标题化合物(2.08g，产率53.1％)。制备实施例4以类似于制备实施例1-3中所述的方式，制备标记为化合物号1-47的化合物。
包括在制备实施例1-3中所得到的化合物的化合物号1-47的化学结构由下式表示。 对这些化合物所得到的分析数据示于表1-10中，其中取代基R1，R2，R3，R4，R5，X和Y也列入表中。在各表中，IR光谱数据是基于醚键和氰基的特征吸收值，而质谱数据是分子离子峰(M+)和碎片峰。在表1-10中指示R2-R5取代位置的数字如上式的苯环所示，而且正如所看到的，这些数值并不对应在化合物的命名中的数字。
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
表9 *化合物41，42和43是其中R2的氯原子在2位或3位的化合物的混合物。
表10 制备实施例5(1)将2-(3-羟基苯氧基)丙酸甲酯(8g)和3，4-二氯苄基氰(8.4g)溶于乙醇(100ml)中。往所产生的溶液中滴加由乙醇(15ml)和金属钠(3.1g)制备的乙醇钠。加入完成后，回流混合物3小时，蒸发除去乙醇。混合物冷却至室温，加入水(100g)。使用盐酸将混合物pH调为酸性，然后用乙酸乙酯进行萃取。有机层依次用水和饱和NaCl溶液洗涤，并用无水硫酸镁干燥。减压蒸除乙酸乙酯。柱色谱纯化得到6.8g2-(3，4-二氯苯基)-4-(3-羟基苯氧基)-3-氧代戊腈(48％)。
(2)将由此得到的2-(3，4-二氯苯基)-4-(3-羟基苯氧基)-3-氧代戊腈(2g)溶于二甲基甲酰胺(DMF，30ml)中。往所产生的混合物中加入碳酸钾(1.6g)和2，3-二氯-5-三氟甲基吡啶(1.3g)，然后于120℃下搅拌混合物2小时。随后冷却溶液至室温。往冷却的溶液中加入乙醚(150ml)。依次用稀HCl，水和饱和NaCl溶液洗涤混合物，并用无水硫酸镁干燥。减压蒸除乙醚。柱色谱纯化得到1g4-[3-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(32％)(化合物号101)。制备实施例6通过使用在制备实施例5(1)中得到的2-(3，4-二氯苯基)-4-(3-羟基苯氧基)-3-氧代戊腈和2-氯-5-三氟甲基吡啶，重复制备实施例5的程序。结果得到1g2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代-4-[3-(5-三氟甲基-2-吡啶氧基)苯氧基]戊腈(化合物号102)(32％)。制备实施例7(1)将氢化钠(油状，60％)(2.6g)置入烧瓶中。使用己烷将烧瓶内容物反复滗析以除去油组分。将二甲基甲酰胺(DMF，50ml)加入到烧瓶中以悬浮氢化钠。往悬浮液中逐渐加入3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯酚(16.9g)。所产生的混合物与2-氯丙酸甲酯(8.6g)混合，然后与碘化钾(0.5g)混合。在80℃加热搅拌混合物2小时。然后冷至室温。加入乙醚(250ml)。依次用HCl，水和饱和NaCl溶液洗涤混合物，乙醚层用无水硫酸镁干燥。减压蒸除乙醚。柱色谱纯化得到20.6g2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(93％)。
(2)将由此得到的2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯和3，4-二氯苄基氰(1.5g)溶于乙醇(10ml)中。往所得溶液中滴加由乙醇(5ml)和金属钠(0.3g)制备的乙醇钠。回流该溶液2小时，然后室温搅拌一夜。加入乙醚(150ml)。混合物用稀HCl，水和饱和NaCl溶液依次洗涤，并用无水硫酸镁干燥。减压蒸除乙醚。柱色谱纯化得到0.9g4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(33％)(化合物号103)。制备实施例8通过使用在制备实施例7(1)中制备的2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)和3-溴苄基氰(1.3g)，重复制备实施例7的程序。结果得到0.6g(20％)2-(3-溴苯基)-4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-3-氧代戊腈(化合物号104)。制备实施例9将在四氢呋喃(THF)中的苯基乙腈(0.7g)在室温下滴加到溶于THF(10ml)中的二异丙基氨化锂(2M，庚烷/THF/乙苯溶液)中。往所得混合物中滴加在THF中的2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)，室温搅拌混合物6小时。加入乙醚(150ml)。依次用稀HCl，水和饱和NaCl溶液洗涤混合物，并用无水硫酸镁干燥。减压蒸除乙醚。柱色谱法纯化得到0.8g(31％)4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-3-氧代-2-苯基戊腈(化合物号105)。制备实施例10通过使用3-三氟甲基苄氰(1g)和2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)，重复制备实施例9的程序。结果得到0.8g(31％)4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-3-氧代-2-(3-三氟甲基苯基)戊腈(化合物号106)。制备实施例11通过使用4-甲氧基苄氰(0.9g)和2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)重复制备实施例9的程序。结果得到0.8g(29％)4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-2-(4-甲氧苯基)-3-氧代戊腈(化合物号107)。制备实施例12通过使用2，4-二氯苄氰(1.1g)和2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)重复制备实施例7的程序。结果得到0.6g(21％)4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-2-(2，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号108)。制备实施例13通过使用3-(3-溴-2-氟苯氧基)苯酚(5.5g)和2-氯丙酸甲酯(3.3g)，制备2-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(6.9g)(96％)。通过使用由此得到的2-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(1g)和3，4-二氯苄氰(0.7g)，重复制备实施例7的程序。结果得到0.2g(17％)4-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号109)。制备实施例14通过使用2-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)和3-氯苄氰(1g)，重复制备实施例7的程序。结果得到0.6g(23％)4-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]-2-(3-氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号110)。制备实施例15通过使用2-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(2g)和3-溴苄氰(1g)，重复制备实施例7的程序。结果得到0.6g(21％)4-[3-(4-溴-2-氟苯氧基)苯氧基]-2-(3-溴苯基)-3-氧代戊腈(化合物号111)。制备实施例16通过使用5-甲基间苯二酚(11g)和3，4-二氯三氟甲苯(17g)制备3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯酚(2.3g，9％)。然后，通过使用该产物和2-氯丙酸甲酯合成出2.3g2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]丙酸甲酯(79％)。此外，通过使用该物质和3，4-二氯苄氰(1.1g)得到0.2g(5％)4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号112)。制备实施例17通过使用5-甲氧基间苯二酚(10g)和3，4-二氯三氟甲苯(16g)合成3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲氧基苯酚(5.2g，23％)。然后通过使用该产品和2-氯丙酸甲酯合成出5.9g2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲氧基苯氧基]丙酸甲酯(86％)。此外，通过使用该物质(2g)和3，4-二氯苄氰(0.9g)得到0.4g(14％)4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲氧基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号113)。制备实施例18通过使用4-氯间苯二酚(15g)和3，4-二氯三氟甲苯(19g)合成出3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-氯苯酚(11g，33％)。随后通过使用该产品和2-氯丙酸甲酯合成出13g2-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-氯苯氧基]丙酸甲酯(93％)。此外，通过使用该物质(2g)和1-萘基乙腈(0.8g)得到0.5g(19％)4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-氯苯氧基]-2-(1-萘基)-3-氧代戊腈(化合物号114)。制备实施例19将吡啶(0.79g)滴加入2-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]丙酰氯(2.12g)，2-吡啶基乙腈(0.65g)和无水甲苯(20ml)的混合物中。所得混合物于室温下搅拌一天。然后浓缩，用10％HCl水溶液调为酸性。用乙酸乙酯进行萃取。浓缩萃取液。
残余物用乙醚-乙酸乙酯重结晶。结果得到1.06g(41.9％)4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]-3-氧代-2-(2-吡啶基)戊腈(化合物号115)。制备实施例20将无水THF(30ml)中的2，4-二氯苯基乙腈(0.93g)冷却至-78℃。往该溶液中加入1.6M正丁基锂-己烷溶液(3.5ml)。随后将THF中的2-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]丙酰氯(2.12g)滴加到产生的混合物中。搅拌混合物30分钟。加入10％HCl水溶液使混合物呈酸性。用乙酸乙酯萃取。有机层用无水硫酸镁干燥并浓缩。
浓缩残余物用硅胶色谱法纯化。结果得到0.75g(26.3％)4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]-2-(2，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号116)。制备实施例21往金属钠(0.35g)溶于乙醇(50ml)所得的溶液中加入2-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基]丙酸乙酯(2.16g)和2，3-二氯苯基乙腈(0.93g)，混合物加热回流4小时。浓缩反应混合物，残余物与10％HCl水溶液混合。用氯仿萃取，浓缩萃取液。残余物用硅胶柱色谱法纯化。结果得到1.86g(65.0％)4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈(化合物号117)。制备实施例22将3-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-氯苯氧基]丙酸甲酯(2g)和3-溴苄氰(1g)溶于乙醇中。往所得混合物中滴加入通过使用乙醇和金属钠(0.3g)制备的乙醇钠。回流混合物2小时，然后冷却至室温。加入乙醚。用稀HCl，水和饱和NaCl溶液依次洗涤混合物，然后用无水硫酸镁干燥。滤除硫酸镁，减压蒸除乙醚。所得粗产物用柱色谱法纯化，得到0.8g(28％)2-(3-溴苯基)-4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-氯苯氧基]-3-氧代戊腈(化合物号155)。制备实施例23往N-甲基哌嗪(0.5g)，三乙胺(0.87g)和二甲氧基乙烷(30ml)的溶液中滴加4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]-2-氰基-3-氧代戊酰氯(2.45g)在二甲氧基乙烷(20ml)中的溶液。所得混合物在室温下搅拌6小时，取出反应混合物，用氯仿萃取。浓缩萃取液。残余物用硅胶色谱法纯化。结果得到2.11g(76.2％)4-[5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-2-硝基苯氧基]-2-(4-甲基-1-哌嗪基羰基)-3-氧代戊腈(化合物号118)。制备实施例24以类似于制备实施例5-23的方式制备化物号118-217。
包括在制备实施例5-23中制备的化合物在内的化合物号101-217的化学结构由下式表示。 对这些化合物所得到的分析数据示于表11-34，其中取代基R1，R2，R3，R4，R5，X和Y也列入表中。在表中，IR光谱数据是基于醚键和氰基的特征吸收值，质谱数据是分子离子峰(M+)和碎片峰。在表11-34中表示取代基R2-R5的取代位置的数字示于上式的苯环中，且正如所看到的，这些数字并不对应化合物命名中的数字。
表11
表12
表13
表14
表15
表16
表17
表18
表19
表20
表21
表22
表23
表24
表25
表26
表27
表28
表29
表30
表31
表32
表33
表34 制备实施例25将4-甲基儿茶酚(12.4g)溶于六甲基磷酰胺中。往所得混合物中加入氢化钠(油状物，70％)(3.4g)，铜粉(3.0g)和3，4-二氯三氟甲苯(21.5g)，在160℃下搅拌4小时。过滤除去溶液中的铜粉，滤液中加入乙醚。用水洗涤乙醚层，之后减压蒸除乙醚。残余粗产物用硅胶柱色谱法纯化，得到2.6g2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯酚和2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯酚的混合物。将混合物溶于二甲基甲酰胺中。往该溶液中加入氢化钠(0.34g)和2-氯丙酸甲酯(1.1g)并在80℃下搅拌2小时。混合物冷却之后，加入乙醚，醚层用水洗涤。减压蒸除乙醚，所得粗产物用硅胶柱色谱纯化，得到2.2g2-(2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯氧基]丙酸甲酯和2-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]丙酸甲酯的混合物。将该混合物溶于乙醇中，与1.1g3，4-二氯苄氰混合。加入由金属钠(0.4g)制备的乙醇钠并在回流下加热3小时。反应混合物冷却之后加入乙醚。醚层用水洗涤并减压蒸除乙醚。所得粗产物用硅胶柱色谱法纯化。结果得到0.5g4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈和4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈的混合物(化合物号308)。制备实施例26以类似于制备实施例25的方法制备化合物号301-310。
包括在制备实施例25中得到的化合物在内的化合物号301-310的化学结构由下式表示。 对这些化合物所得到的分析数据示于表35和36中，其中取代基R1，R2，R3，R4，R5，X和Y也列入表中。在表中，IR光谱数据是基于醚键和氰基的特征吸收值，而质谱数据是分子离子峰(M+)和碎片峰。在表35和36中表示R2-R5取代位置的数字示于上式的苯环中，而且正如所看到的，这些数值并不对应在化合物的命名中的数字。
表35 *化合物号303和304表示其中R2的氯原子在4-或5-位的化合物的混合物。
化合物号305表示其中R2的叔丁基在4-或5-位的化合物的混合物。
表36 *化合物号308和309表示其中R2的甲基在4-或5-位的化合物的混合物。
化合物号310表示其中R2的叔丁基在4-或5-位的化合物的混合物。实施例1(用于人类的胶囊)将下列组分装入胶囊中以制备胶囊制剂。
表37组分 (用量，mg)酮腈衍生物(化合物号4) 100玉米淀粉 23CMC-Ca 22.5羟甲基纤维素 3硬脂酸镁 1.5总计 150.0实施例2(用于饲料的粉状添加剂)将下列组分混合以制备用于饲料的粉末添加剂。
表38组分 (用量，g)酮腈衍生物(化合物号4) 5-20轻质硅酸酐 0.5玉米淀粉94.5-79.5总计100.0实施例3(急性毒性试验)使用雄性小鼠(Slcddy，5周龄)试验本发明酮腈衍生物(化合物号4)的急性毒性(LD50)。每5只小鼠一组，一次强行口服给予悬浮在0.5％CMC水溶液中的化合物，以使最终剂量为707；1,000；1,414；和2,000mg/kg。观察小鼠14天。结果在口服给药条件下测得LD50值大于2,000mg/kg。因而证实该化合物完全无毒。实施例4将适量样品溶于二甲亚砜(DMSO)中，所得溶液用同样量的无菌蒸馏水稀释制得1,000μg/ml的本体样品。将Mueller-Hinton肉汤(DIFCO的产品)分配到96孔微板的各孔中。然后将本体样品加到一排的第一孔中，并用无菌蒸馏水连续稀释(每次10倍)。单独地，将已在上述肉汤中于37℃培养一夜的用于试验的细菌细胞悬浮液(金黄色葡萄球菌209-P)接种到各孔中，以使最终接种量达106CFU/ml。最终的样品浓度为100,10和1μg/ml。
由抑制浓度(下文缩写为IC)来评价抗菌活性，在该浓度下，在37℃下培养18小时的细菌的繁殖得到抑制。通过培养基的浊度来确定抑制作用。表示法“IC≤100”，“≤10”和“≤1”分别表示在连续以两倍稀释样品时得到的MIC当量值为100-10μg/ml，10-1μg/ml和不大于1μg/ml。结果示于表39中。在表39中，表示法“≤100”，“≤10”和“≤1”分别表示化合物在其浓度不大于100μg/ml，10μg/ml和1μg/ml下抑制细菌繁殖。(在以后实施例中，相应地应用同样的规则)。
表39对金黄色葡萄球菌209-P的抗菌活性样品号 样品号 样品号 样品号 样品号(IC)(IC) (IC) (IC) (IC)1 12 22 33 44(≤10) (≤100)(≤10) (≤10) (≤1)2 13 23 34 45(≤100) (≤100)(≤100)(≤10) (≤10)3 14 24 35 46(≤10) (≤100)(≤100)(≤10) (≤10)4 15 25 37 47(≤1) (≤10) (≤100)(≤100)(≤10)5 16 26 38 308(≤10) (≤100)(≤100)(≤10) (≤1)6 17 27 39 309(≤100) (≤100)(≤10) (≤100)(≤10)7 18 29 40(≤100) (≤100)(≤100)(≤100)8 19 30 41(≤100) (≤100)(≤100)(≤1)10 20 31 42(≤10) (≤100)(≤100)(≤1)11 21 32 43(≤100) (≤100)(≤100)(≤10)从表39可明显看出，所有试验样品均有效地以不大于100μg/ml的浓度抑制细菌生长。此外，相当数 量的样品在不大于10μg/ml或不大于1μg/ml的浓度下抑制细菌生长。实施例5以类似于实施例4所述方式测定本发明化合物的抗菌活性。用于试验的细菌是金黄色葡萄球菌TI-1。结果示于表40。
表40对金黄色葡萄球菌TI-1的抗菌活性样品号 样品号 样品号 样品号 样品号(IC) (IC) (IC)(IC)(IC)11222 33 46(≤10) (≤10)(≤10) (≤10) (≤1)21324 34 47(≤10) (≤100) (≤100)(≤10) (≤1)31425 35 308(≤10) (≤100) (≤100)(≤100) (≤1)41526 36 309(≤1)(≤10)(≤100)(≤10) (≤1)51627 37(≤10) (≤10)(≤10) (≤100)61728 41(≤100) (≤100) (≤100)(≤1)71829 42(≤10) (≤10)(≤100)(≤1)8 1930 43(≤10) (≤100) (≤100)(≤10)10 2031 44(≤10) (≤10)(≤100)(≤1)11 2132 45(≤100) (≤10)(≤100)(≤1)从表40可明显看出，所有试验样品在不大于100μg/ml浓度下均有效地抑制细菌生长。此外，相当数量的样品在不大于10μg/ml或1μg/ml的浓度下抑制细菌生长。实施例6以类似于实施例4所述的方式测定本发明化合物的抗菌活性。用于试验的细菌是巴斯德氏菌Kobe-6(来源猪；多杀巴斯德氏菌)。结果示于表41 。
表41对多杀巴斯德氏菌(Kobe-6)的抗菌活性样品号 样品号 样品号 样品号(IC) (IC) (IC) (IC)115 41 47(≤100) (≤100) (≤10) (≤100)216 42 308(≤100) (≤100) (≤10) (≤10)317 43 309(≤100) (≤100) (≤10) (≤10)420 44(≤100) (≤100) (≤10)522 45(≤100) (≤100) (≤10)10 27 46(≤100) (≤100) (≤100)从表41可明显看出，所有试验样品在不大于100μg/ml浓度下均有效抑制格兰氏阴性细菌-多杀巴斯德氏菌的生长。实施例7以类似于实施例4所述的方式测定本发明化合物的抗菌活性。用于试验的细菌是支气管炎博德特氏菌(SM2-4)。结果示于表42中。
表42对支气管炎博德特氏菌(SM2-4)的抗菌活性样品号 样品号 样品号 样品号(IC) (IC) (IC) (IC)2 9 14 16(≤100) (≤100) (≤100) (≤100)414243 44(≤100) (≤100) (≤100) (≤100)454647 308(≤100) (≤100) (≤100) (≤100)从表42可明显看出，所有试验样品在不大于100μg/ml浓度下均有效抑制格兰氏阴性细菌-支气管炎博德特氏菌的生长。实施例8将适量样品溶于二甲亚砜(DMSO)中，之后用相同量无菌蒸馏水稀释所得溶液，制备出1,000μg/ml的本体样品。单独地，制备已在Mueller-Hinton肉汤(DIFCO的产品)中培养的用于试验的细菌液体(从人分离出的抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA))并接种到含有样品的Muller-Hinton琼脂(DIFCO的产品)中，以使最终接种量达106CFU/ml。样品最终浓度为100,10和1μg/ml。
在37℃培养18小时后，以类似于实施例4所述方式按IC评价抗菌活性。结果示于表43。
表43各种化合物对由人类分离的抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌活性菌株化合物号41 4243 44 4546 47308 309900056 ≤1 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤1 ≤1900048 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤1 ≤1891187 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤1 ≤1891185 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1891192 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1891179 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1 ≤10从表43可明显看出，所有试验样品均在不大于10μg/ml的浓度下呈现对MRSA的抑制活性。实施例9通过使用本发明的酮腈衍生物(化合物号4)作样品，按JapanChemotherapy Association认可的标准程序[“Chemotherapy”，29，76-79，1981，标题为“Revised Measurement of Minimum InhibitoryConcentration(MIC)”]由琼脂板稀释方法确定来自牛的金黄色葡萄球菌和巴斯德氏菌的最小抑制浓度(MIC)。将样品溶于二甲亚砜并用相同量的无菌蒸馏水稀释以制备1000μg/ml的本体样品液。使用无菌蒸馏水将该本体液稀释成一系列2倍稀释液。
单独地，预先将表18所示用于试验的细菌细胞悬浮液在37℃下于Mueller-Hinton肉汤(DIFCO)中培养18-20小时。通过使用Mueller-Hinton肉汤控制它们以使细菌量为106CFU/ml。由此控制的液体接种到含样品的Muller-Hinton琼脂板上，然后于37℃培养18小时。不再观察到细菌生长的浓度设为MIC。结果示于表44。
表44化合物号4对来自牛的金黄色葡萄球菌和巴斯德氏菌的抗菌活性测试细菌 来源MIC(ug/m1)金黄色葡萄球菌209P 标准株1.56金黄色葡萄球菌TI-1 牛6.25金黄色葡萄球菌3-2猪3.13金黄色葡萄球菌1SS1 鸡3.13溶血巴斯德 氏菌1F-15牛6.25多杀巴斯德 氏菌1F-17牛1.56从表44可明显看出，MIC值在1.56-6.25μg/ml范围内，表明对所测试的各个细菌具有高抗菌活性。实施例10通过使用本发明的酮腈衍生物(化合物号4)作样品，按JapanChemotherapy Association认可的标准程序[“Chemotherapy”，29，76-79，1981，标题为“Revised Measurement of Minimum InhibitoryConcentration(MIC)”]由微液稀释法确定各细菌株的最小抑制浓度(MIC)。将样品溶于二甲亚砜中并用相同量的无菌蒸馏水释释制备1000μg/ml的本体样品液。将该本体样品于37℃在Mueller-Hin-ton肉汤中培养18小时。结果示于表45中。
表45化合物号4对各种细菌株的抗菌活性测试细菌 MIC(ug/ml)金黄色葡萄球菌SMITH 3.13*金黄色葡萄球菌M5-1 3.13*金黄色葡萄球菌M5-2 3.13表皮葡萄球菌56556 6.25酿脓链球菌G-36 6.25缓症链球菌11D 685 12.5Enterococcus faecalis ATCC 194336.25枯草芽孢杆菌ATCC66333.13*抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌从表45明显看出，本发明衍生物对病理格兰氏阳性细菌(包括抗甲氧西林的葡萄球菌)具有高活性。尤其本发明衍生物对抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌有效。实施例11(用于人类的胶囊)将下列组分装入胶囊以制备胶囊制剂。
表46组分(用量，mg)酮腈衍生物(化合物号155) 100玉米淀粉 23CMC-Ca22.5羟甲基纤维素 3硬脂酸镁 1.5合计 150.0实施例12(用于饲料的粉末添加剂)混合下列组分以制备用于饲料的粉末添加剂。
表47组分 (用量，g)酮腈衍生物(化合物号155) 5-20轻质硅酸酐0.5玉米淀粉 94.5-79.5合计 100.0实施例13(急性毒性试验)使用雄性小鼠(Slcddy，5周龄)来试验本发明的酮腈衍生物(化合物号103和155)的急性毒性(LD50)。对每组5只小鼠一次强行经口投予悬浮在0.5％CMC水溶液中的化合物，以使最终剂量达到500,1000,1500和2000mg/kg。观察小鼠14天。结果测得LD50值高于2000mg/kg。因而证实这些化合物完全无毒。实施例14(吸收试验)对小鼠使用本发明的酮腈衍生物(化合物号103和155)通过以100mg/kg体重的量给予衍生物进行吸收试验。给予化合物1，3，5和24小时后取出血液并分离血清。用HPLC测定血清中化合物浓度。结果是化合物号155和化合物号101在给药1小时和3小时后分别达到最大浓度。因此，两种酮腈衍生物被经口给药快速吸收。实施例15以类似于实施例8所述方式测定表48所示酮腈衍生物的抗菌活性。用于试验的细菌是金黄色葡萄球菌(209-P)。结果示于表48。
表48对金黄色葡萄球菌209-P的抗菌活性样品号样品号样品号样品号样品号(IC) (IC) (IC) (IC) (IC)102109 137 171211(≤10) (≤10)(≤100) (≤10) (≤10)103110 151 172212(≤1) (≤10)(≤1) (≤100)(≤1)104111 152 175213(≤1) (≤10)(≤1) (≤10) (≤10)105112 155 207214(≤10) (≤1) (≤1) (≤1) (≤10)106116 156 208215(≤10) (≤10)(≤10)(≤10) (≤10)107134 169 209216(≤100)(≤00)(≤100) (≤10) (≤10)108136 170 210217(≤10) (≤100) (≤10)(≤10) (≤10)从表48可明显看出，所有试验样品在不大于100μg/ml浓度下均有效抑制细菌生长。此外，相当数量的样品在不大于10μg/ml或1μg/ml的浓度下抑制细菌生长。实施例16以类似于实施例8所述方式测定本发明化合物的抗菌活性。用于试验的细菌是金黄色葡萄球菌(TI-1)。结果示于表49。
表49对金黄色葡萄球菌(TI-1)的抗菌活性样品号 样品号 样品号样品号 样品号(IC) (IC)(IC) (IC) (IC)102108134170212(≤1) (≤10) (≤100)(≤10) (≤1)103109137207213(≤1) (≤1) (≤100)(≤1) (≤10)104 110151 208214(≤1) (≤10) (≤1) (≤10) (≤1)105 111152 209215(≤10) (≤10) (≤1) (≤10) (≤1)106 112155 210216(≤10) (≤1) (≤1) (≤10) (≤1)107 116169 211217(≤100) (≤10) (≤100) (≤10) (≤10)108 136170 210217(≤10) (≤100)(≤10)(≤10) (≤10)从表49可明显看出，所有试验样品在不大于100μg/ml浓度下均有效抑制细菌生长。此外，相当数量的样品在不大于10μg/ml或1μg/ml的浓度下抑制细菌生长。实施例17以类似于实施例8所述方式测定本发明化合物的抗菌活性。用于试验的细菌是巴斯德氏菌Kobe-6(来源猪，多杀巴斯德氏菌)。结果示于表50。
表50对多杀巴斯德氏菌(Kobe-6)的抗菌活性样品号样品号 样品号样品号样品号(IC) (IC)(IC) (IC) (IC)103109134155211(≤10) (≤10) (≤100)(≤100)(≤10)104110135156212(≤10) (≤100)(≤100)(≤100)(≤10)105111137170213(≤100)(≤100)(≤100)(≤100)(≤10)106112151209214(≤100)(≤1) (≤100)(≤10) (≤100)108116152210215(≤100)(≤10) (≤10) (≤100)(≤10)216- - - - (≤100)217- - - - (≤100)
从表50可明显看出，所有试验样品在不大于100ug/ml浓度下均有效抑制格兰氏阴性细菌-多杀巴斯德氏菌的生长。实施例18以类似于实施例8所述的方式测定本发明化合物的抗菌活性。用于试验的细菌是支气管炎博德特氏菌(S1)和支气管炎博德特氏菌(SM2-4)。结果示于表51 。
表51对支气管炎博德特氏菌(S1)的抗菌活性样品号 样品号(IC) (IC)112 212(≤100) (≤100)155 213(≤100) (≤100)对支气管炎博德特氏菌(SM1-4)的抗菌活性样品号 样品号(IC) (IC)112 212(≤100) (≤100)155 213(≤100) (≤100)从表51可明显看出，试验样品在不大于100ug/ml的浓度下有效抑制格兰氏阴性细菌-支气管炎博德特氏菌的生长。实施例19以类似于实施例8所述的方式测量表52所示各种酮腈衍生物的抗菌活性。用于试验的细菌是来自人的抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)。结果示于表52。
表52 各种化合物对从人类分离的抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)的抗菌活性菌株/样品 化合物号103104105109110111112155900056≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1900048≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1891187≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1891185≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1891192≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1891179≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1菌株/样品 化合物号209210211212213214215216217900056≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤10 ≤1≤1≤1≤10900048≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤10 ≤1≤10 ≤1≤10891187≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1≤1≤10 ≤1≤10891185≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1≤1≤1≤1≤10891192≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤1≤10 ≤1≤10 ≤10891179≤10 ≤10 ≤10 ≤1≤10 ≤1≤10 ≤10 ≤10从表52可明显看出，所有试验样品在不大于10ug/ml浓度下均有效抑制MRSA的细菌生长。实施例20以类似于实施例8所述的方式，测量表53-55所示各种酮腈衍生物的抗菌活性。用于试验的细菌是来自鱼的肠球菌和巴斯德氏菌。培养条件是培养基含1.5％NaCl，培养温度为25℃。结果示于表53-55。
表53各种化合物对从鱼分离的肠球菌和巴斯德氏菌的抗菌活性(1)化合物号414243308 309155 134 135116EnterococcusSeriolicida MS89060≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89064≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89066≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89068≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida KG86050≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida HI ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-001 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-002 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-003 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-004 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-005 ≤1 ≤1 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤100 ≤100 ≤10Pasteurellapiscicida KP94-02 ≤10 ≤10 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤100Pasteurellapiscicida KP94-04 ≤10 ≤10 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤100Pasteurellapiscicida KP94-05 ≤10 ≤10 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤100Pasteurellapiscicida KP94-06 ≤10 ≤10 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤100
表54 各种化合物对从鱼分离的肠球菌和巴斯德氏菌的抗菌活性(2)化合物号103105106108109110111112209EnterococcusSeriolicida MS89060≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89064≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89066≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89068≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida KG86050≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida HI ≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-001 ≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-002 ≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-003 ≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-004 ≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-005 ≤1≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10 ≤10Pasteurellapiscicida KP94-02 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100Pasteurellapiscicida KP94-04 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100Pasteurellapiscicida KP94-05 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100Pasteurellapiscicida KP94-06 ≤10 ≤100 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100 ≤100 ≤10 ≤100
表55各种化合物对从鱼分离的肠球菌和巴斯德氏菌的抗菌活性(3)化合物号210211212 213 214215 216217EnterococcusSeriolicida MS89060≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89064≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89066≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida MS89068≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida KG86050≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida HI ≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤1≤1 ≤1≤10EnterococcusSeriolicida SE94-001 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-002 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-003 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-004 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10EnterococcusSeriolicida SE94-005 ≤10 ≤10 ≤1 ≤1 ≤10 ≤1 ≤10 ≤10Pasteurellapiscicida KP94-02 ≤100 ≤100 ≤10 ≤10Pasteurellapiscicida KP94-04 ≤100 ≤100 ≤10 ≤10Pasteurellapiscicida KP94-05 ≤100 ≤100 ≤10 ≤10Pasteurellapiscicida KP94-06 ≤100 ≤100 ≤10 ≤10从表53-55可明显看出，所有试验样品在不大于100ug/ml的浓度下均有效抑制各种细菌的生长。
工业应用性如前所述，本发明的抗菌剂对格兰氏阳性和格兰氏阴性细菌具有优异的抗菌活性。尤其值得注意的是本发明的抗菌剂对包括抗甲氧西林的金黄色葡萄球菌(MRSA)在内的病理葡萄球菌有效。因此，本发明的抗菌剂可用于预防和治疗由格兰氏阴性细菌或格兰氏阳性细菌引起的人类和包括人类以外的哺乳动物，家禽和鱼类在内的动物的各种传染性疾病。
权利要求
1.一种抗菌剂，含有下式(1)所示酮腈衍生物或其盐作活性成分 其中R1为氢原子或低级烷基，各R2、R3、R4和R5相同或互不相同，为氢原子，卤素原子，硝基，低级烷基，低级烷氧基，或取代的或未取代的苯氧基，X为取代的或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团，Y为取代或未取代的芳烃基团，取代或未取代的杂环基团，由取代或未取代的芳烃基团或由取代或未取代的杂环基团取代的羰基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
2.一种抗菌剂，含有下式(2)所示的酮腈衍生物或其盐作活性成分 其中R1为氢原子或低级烷基，各R2、R3、R4和R5相同或互不相同，为氢原子，卤素原子，硝基，低级烷基，低级烷氧基，或取代的或未取代的苯氧基，X为取代的或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团，Y为取代或未取代的芳烃基团，取代或未取代的杂环基团，由取代或未取代的芳烃基团或由取代或未取代的杂环基团取代的羰基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
3.一种抗菌剂，含有下式(3)所示的酮腈衍生物或其盐作活性成分 其中R1为氢原子或低级烷基，各R2、R3、R4和R5相同或互不相同，为氢原子，卤素原子，硝基，低级烷基，低级烷氧基，或取代的或未取代的苯氧基，X为取代的或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团，Y为取代或未取代的芳烃基团，取代或未取代的杂环基团，由取代或未取代的芳烃基团或由取代或未取代的杂环基团取代的羰基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
4.一种抗菌剂，含有下式(4)所示的酮腈衍生物或其盐作活性成分 其中R1为氢原子或低级烷基，各R2、R3、R4和R5相同或互不相同，为氢原子，卤素原子，硝基，低级烷基，低级烷氧基，或取代的或未取代的苯氧基，X为取代的或未取代的芳烃基团或取代或未取代的杂环基团，Y为取代或未取代的芳烃基团，取代或未取代的杂环基团，由取代或未取代的芳烃基团或由取代或未取代的杂环基团取代的羰基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
5.根据权利要求1-4中任一项的抗菌剂，其中X和Y各自为取代或未取代的芳烃基团或取代或未取代的芳杂环基团。
6.根据权利要求1-4中任一项的抗菌剂，其中X是取代或未取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，取代或未取代的苯并噁唑基，或取代或未取代的苯并噻唑基，Y是取代或未取代的苯基，取代或未取代的嘧啶基，取代或未取代的噻吩基，或取代或未取代的萘基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
7.根据权利要求1-4中任一项的抗菌剂，其中X是可被卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯基；可被卤素原子，卤代烷基或氰基取代的吡啶基；可被卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯并噁唑基；或可被卤素原子，卤代烷基或氰基取代的苯并噻唑基；Y为可被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的苯基；可被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的嘧啶基；可被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的噻吩基；或可被卤素原子，卤代烷基，烷基或烷氧基取代的萘基；被低级烷基，芳基或芳烷基取代的N，N-二取代的氨基甲酰基；或可与苯环稠合或可用烷基取代的1-氮杂环烷基羰基。
8.根据权利要求2的抗菌剂，其中在式(2)中，X为取代或未取代的吡啶基，Y为取代或未取代的苯基，取代或未取代的嘧啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
9.根据权利要求2的抗菌剂，其中在式(2)中，X为取代或未取代的苯基，Y为取代或未取代的嘧啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
10.根据权利要求2的抗菌剂，其中在式(2)中，X为取代或未取代的苯并噁唑基或取代或未取代的苯并噻唑基，Y为取代或未取代的苯基。
11.一种抗菌剂，含有如下化合物或其任一种的盐作活性成分4-[4-(3-氯-5-三氟甲基-2-吡啶氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，2-(3-溴苯基)-4-[2-氯-5-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-3-氧代戊腈，4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，4-[3-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯氧基]-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基)-2-(3，4-二氯苯基)-3-氧代戊腈，4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-4-甲基苯氧基]-2-(3-溴苯基)-3-氧代戊腈，4-[2-(2-氯-4-三氟甲基苯氧基)-5-甲基苯氧基]-2-(3-溴苯基)-3-氧代戊腈。
12.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，X为取代或未取代的芳烃基团或取代或未取代的芳杂环基团。
13.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，X为取代或未取代的苯基，或取代或未取代的吡啶基。
14.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，X为已用卤素原子或卤代烷基取代的苯基，或已用卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基。
15.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，Y为取代或未取代的苯基，取代或未取代的萘基，取代或未取代的吡啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
16.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，Y为用卤素原子或卤代烷基取代的苯基。
17.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，X为取代的苯基或取代的吡啶基，Y为取代或未取代的苯基，取代或未取代的吡啶基，或N，N-二取代的氨基甲酰基。
18.根据权利要求3的抗菌剂，其中在式(3)中，X为卤素原子或卤代烷基取代的苯基或卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基，而Y为由卤素原子，卤代烷基或烷氧基取代的苯基。
19.根据权利要求4的抗菌剂，其中在式(4)中，X为取代或未取代的芳烃基团或取代或未取代的芳杂环基团。
20.根据权利要求4的抗菌剂，其中在式(4)中，X为取代或未取代的苯基或取代或未取代的吡啶基。
21.根据权利要求4的抗菌剂，其中在式(4)中，X为被卤素原子或卤代烷基取代的苯基；或卤素原子或卤代烷基取代的吡啶基。
22.根据权利要求4的抗菌剂，其中在式(4)中，X为可被素原子或卤代烷基取代的苯基。
23.根据权利要求4的抗菌剂，其中在式(4)中，Y为取代或未取代的苯基，取代或未取代的萘基或取代或未取代的吡啶基。
24.根据权利要求4的抗菌剂，其中在式(4)中，Y为用卤素原子或卤代烷基取代的苯基。
25.一种药物组合物，含有如权利要求1所述的酮腈衍生物或其盐以及一种药物上可接受的载体。
26.一种抗菌药物组合物，含有如权利要求1所述的酮腈衍生物或其盐以及一种药物上可接受的载体。
27.如权利要求1所述的酮腈衍生物或其盐作抗菌剂的用途。
28.根据权利要求27的用途，其中抗菌剂用于动物和人类。
全文摘要
本发明提供了一种抗菌剂，含有下式(1)所示酮腈衍生物或其盐作活性成分(见式(I))，(其中R
文档编号C07D409/12GK1151696SQ9519382
公开日1997年6月11日 申请日期1995年6月28日 优先权日1994年6月29日
发明者加藤祥三, 山口真男, 长田圣士, 北岛敏夫, 板鼻秀信, 古木真贵子, 大室史夫, 大原英治, 石崎雅彦 申请人:第一制药株式会社