新的肽衍生物的制作方法

专利名称：新的肽衍生物的制作方法
本专利申请是CN94192799．7的分案申请。原申请的申请日是1994年6月2日；原申请的发明名称是“新的肽衍生物”。
本发明涉及对胰蛋白酶类丝氨酸蛋白酶，特别是凝血酶和例如激肽释放酶等激肽原酶具有抑制作用的新型竞争性抑制剂、它们的合成、含这些化合物作为活性组份的药物制剂和这些化合物分别作为凝血酶抑制剂与抗凝血剂和作为消炎型抑制剂的应用。本发明还涉及化合物在合成一种丝氨酸蛋白酶抑制剂的过程中作为起始物质的新用途。本发明还涉及在丝氨酸蛋白酶抑制剂中的一种新结构片段。
背景技术：
血液凝固是止血(即阻止血液从受伤的血管中流失)和血栓形成(即血管被血块病理性闭塞)中的关键过程。血液凝固是一复杂系列酶反应的结果，其中最后步骤之一是酶原凝血酶原转变为活性酶凝血酶。
在血液凝固过程中凝血酶起着重要作用。它激活血小板，将血纤维蛋白原转化为可自发聚合成丝的血纤维蛋白单体，并且激活因子Ⅷ，而因子Ⅷ将聚合物交联至不溶性血纤维蛋白上。凝血酶在一正反馈反应(Positive feedback reaction)中还激活因子Ⅴ和因子Ⅷ。凝血酶抑制剂因此可望通过抑制血小板、形成血纤维蛋白和稳定血纤维蛋白而成为有效的抗凝剂。通过抑制正反馈机理，它们可望在导致血液凝固和凝血作用的过程链中的早期起抑制作用。
激肽原酶是作用于激肽原以产生激肽(血管舒缓激肽、胰激肽和蛋氨酸-赖氨酸-舒缓激肽)的丝氨酸蛋白酶。血浆激肽释放酶，组织激肽释放酶和肥大细胞类胰蛋白酶代表着重要的激肽原酶。
激肽(血管舒缓激肽、胰激肽)一般与炎症有关。例如，实际炎症过程与血管渗透性增大有关，导致血浆渗出进入组织中。随后的血浆渗出液含有循环血液的全部蛋白物系，只要实际血浆渗出过程一直进行，则血浆衍生的激肽原就不可避免地与不同的激肽释放酶相互作用，不断形成激肽。血浆渗出的发生并不取决于与炎症有关的机理，不管炎症机理是过敏反应、感染还是其他因素(Persson等，Ediforial，Thorax，1992，47993-1000)。因此血浆渗出为许多疾病的特征之一，这些疾病包括哮喘、鼻炎、感冒和肠炎疾病。特别在过敏症中，肥大细胞类胰蛋自酶将被释放出来，有助于激肽形成和哮喘，鼻炎及肠道疾病中的其池致病(Salomonsson等，Am．Rev．Respir．Dis．，1992，1461535-1542)。
激肽是具有平滑肌效应，分泌效应、神经原效应和延长炎症过程的作用，包括激活磷脂酶A2、增加血管渗透性等的生物高活性物质。后一种作用可引起激肽为更多激肽的生成刨造条件这样一种恶性循环。
组织激肽释放酶主要是分解低分子量激肽原使之生成胰激肽，而血浆激肽释放酶优选从高分子量激肽原释放出血管舒缓激肽。
现有技术
等在J．Clin，Lab．Invest．24，suppl 107，59(1969)中首先报导了以围绕血纤维蛋白原Aα链断裂位置的氨基酸序列为基础的凝血酶抑制剂，文章认为序列Phe-Val-Arg(P9-P2-P1，在本发明中称怍P3-P2-P1序列)是最好的抑制剂。
在US 4，346，078中．S．Bajusz等描述了凝血酶抑制剂H-DPhe-Pro-Agm，这种抑制剂是一种在P1位有一氨基烷基胍的二肽基衍生物。
EP-A2-0，468，231公开了以肽衍生物为基础的凝血酶抑制剂，这种肽衍生物在P1-位带-如3-氨甲基-1-脒基哌啶的环状氨基烷基胍。
在EP-A2-0，185，390中S．Bajusz等公开了用精氨酸醛代替胍基丁胺得到一种具有更高效力的凝血酶抑制剂。
有更早的报道关于以围绕Arg-Ser断裂位置的氨基酸序列为基础的激肽释放酶抑制剂。
在Biochemistry 1978，174778-4784和Meth．Enzym．1981，80826-842中Kettner和Shaw报道了用作血浆激肽释放酶抑制剂的精氨酸氯甲基酮类H-DPro-Phe-Arg-CH2Cl和H-Dphe-Phe-Arg-CH2Cl。
同样，Fareed等在Ann．N．Y．Acad．Sci．1981，370765-784中报导了作为血浆激肽释放酶抑制剂的含H-DPro-Phe-Arg序列酯类和酰胺类。
在下列专利文献中描述了以在P1-位上的亲电性酮类而不是醛类为基础的丝氨酸蛋白酶抑制剂EP-A2-0，195，212描述了肽基α-酮基酯类和酰胺类，EP-A1-0，362，002描述了氟代烷基酰胺酮类，EP-A2-0，364，344描述了具有不同肽酶抑制性能的α，β，δ-三酮基化合物。
在EP-A2-0，293，881中公开了类似胰蛋白酶的丝氨酸蛋白酶(如凝血酶和激肽释放酶)的抑制剂，此抑制剂的基础是精氨酸C-端基硼酸衍生物及其异硫脲类似物。
WO 92／04371描述了激肽原酶抑制剂，例如基于精氨酸衍生物的激肽释放酶抑制剂。
EP-A1-0，530，167描述了用作凝血酶抑制剂的精氨酸α-烷氧基酮衍生物。
发明的公开本发明的一个目的是提供新型有效的类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶抑制剂，特别是对它们的酶类具有竞争性抑制活性，即引起可逆抑制作用的抗凝血和消炎化合物。更准确地说是涉及预防和治疗血栓栓塞疾病的抗凝血剂以及治疗炎症的激肽原酶抑制作用，血栓栓塞疾病例如静脉血栓形成、肺栓塞、动脉血脉形成，特别是心肌梗塞形成和脑血栓形成，如血管成形术和冠状动脉分流术的术后全身凝固性过高状态和局部凝固性过高状态以及其他被认为是凝血酶起作用的疾病，如阿尔茨海默症；所述炎症例如哮喘、鼻炎、荨麻症、肠炎和关节炎。本发明的另一目的是获得经口服也有生物利用性并且对凝血酶的抑制要强于对其他丝氨酸蛋白酶的抑制的选择性凝血酶抑制剂。本发明的还一目的是获得可经口、直肠、表面如皮肤或经吸入等方式给药的激肽原酶抑制剂。
化合物根据本发明，已发现包括立体异构体在内的通式Ⅰ化合物本身或其生理上可接受的盐类是丝氨酸蛋白酶，特别是凝血酶和如激肽释放酶等激肽原酶的有效抑制剂，A1——A2——NH——(CH2)n——B式Ⅰ其中A1代表式Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd或Ⅱe的结构片段；
其中k为整数0、1、2、3或4；m为整数1、2、3或4；q为整数0、1、2或3；R1代表H、含1至4个碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2；而R17为甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12为H或含1至4个碳原子的烷基；并且R11为H或含1至6个碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或
R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各种情况下各自为H、甲基或乙基；R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R21为H或含1至4个碳原子的烷基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31为H或含1至4个碳原子的烷基，且k为0、1，或R3代表1-萘基或2-萘基，且k为0、1；或
R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它们可能被也可能不被-OR31取代，其中R31的定义与前面相同，并且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；R4代表H、含1至4个碳原子的烷基、环己基或苯基；A2代表式Ⅲa、Ⅲb或Ⅲc的结构片段
其中p为整数0、1或2；m为整数1、2、3或4；Y代表亚甲基；或Y代表1，2-亚乙基并且产生的五员环在4位上可带也可不带一或两个氟原子、一个羟基或一个氧代基，或者可以是也可以不是不饱和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有杂原子官能团；或Y代表1，3-亚丙基，并且产生的六员环在5位上可带也可不带一个氟原子、一个羟基或一个氧代基，在4或5位其中之一上可带也可不带二个氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不饱和的，或在4位上可以带也可以不带一个含1至4个碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3的定义与前相同；R5代表H或含1至4个碳原子的烷基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p为0、1或2，R51为H或含1至4个碳原子的烷基；或n为整数0、1、2、3或4；B代表一个如式Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc或Ⅳd的结构片段
其中r为整数0或1；X1代表CH2、NH或不存在；X2代表CH2、NH或C=NH；X3代表NH、C=NH、N-C(NH)-NH2、CH-C(NH)-NH2、CH-NH-C(NH)-NH2或CH-CH2-C(NH)-NH2；X4代表CH2或NH；优选的X1、X2、X3、X4和r组合是X1、X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，而r为0、1；或X1、X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，而r为D1；或X1和X3为NH，X2为C=NH，X4为CH2，而r为0、1；或X1和X4代表CH2，X2为C=NH，X3为NH，而r为0、1；或X1为CH2，X2和X4为NH，X3为C=NH，而r为1；或X1、X2和X4为CH2，X3为CH-NH-C(NH)-NH2，r为0、1；或X1不存在，X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，r为0；或X1不存在，X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为0；特别优选的X1、X2、X3、X4和r组合是X1、X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，r为1X1、X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为0或1；X1不存在，X2和X4为CH2，X2为N-C(NH)-NH2，r为0；X1和X3为NH，X2为C=NH，X4为CH2，r为1；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2；
R6代表H或含1～4个碳原子的烷基；X8代表CH或N；其中在A2氨基酸上具有S-构型的式Ⅰ化合物是优选的化合物，在这些化合物中，还在A1氨基酸上具有R-构型的是特别优选的化合物。
在本发明中，如无另外说明，则术语“含1至4个碳原子的烷基”可以是直链或支链的。含1至4个碳原子烷基可以是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基和叔丁基。
本发明中，如无另外说明，则术语“含1至6个碳原子的烷基”可以是直链或支链的。含1至6个碳原子烷基可以是甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、异戊基、叔戊基、新戊基、正己基或异己基。说到不饱和时，其意为一个碳-碳双键。
式Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd、Ⅱe、Ⅲa、Ⅱb、Ⅲc中羰基碳原子上的波浪线、式Ⅲa、Ⅲb、Ⅲc中氮原子上的波浪线和式Ⅳa、Ⅳb、Ⅳd中环系碳原子上的波浪线都用来表示这些片段的键合位置。
文中所用略语的含意在说明书的最后列出。
根据本发明，已发现包括在立体异构体在内的通式Ⅰa的化合物本身或其生理可接受盐类是凝血酶的有效抑制剂
其中，A1代表式Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc或Ⅱd的结构片段，优选Ⅱa或Ⅱb，
其中k为整数0、1、2、3或4，优选0、1；q为整数0、1、2或3，优选1；R1代表H、含1至4个碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2；而R17为甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12为H或含1至4个碳原子的烷基；并且R11为H或含1至6个碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含有1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各种情况下各自为H、甲基或乙基；
优选R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，并且R11为H；R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R21为H或含1至4个碳原子的烷基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表1-萘基或2-萘基，且k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；R4代表含1至4个碳原子的烷基，环己基或苯基，其中优选环己基或苯基；A2代表式Ⅲa、Ⅲb或Ⅲc，并优选Ⅲa的结构片段；其中p为整数0、1或2；m为整数1、2、3或4，优选2、3。
Y代表亚甲基；或Y代表1，2-亚乙基并且产生的五员环在4位上可带也可不带一或两个氟原子、一个羟基或一个氧代基，或者可以是也可以不是不饱和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有杂原子官能团；或Y代表1，3-亚丙基，并且产生的六员环在5位上可带也可不带一个氟原子、一个羟基或一个氧代基，在4或5位其中之一上可带也可不带二个氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不饱和的，或在4位上可以带也可以不带一个含1至4个碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3代表含1-4个碳原子的烷基，或R3代表Si(Me)3基团；R5代表H或含1至4个碳原子的烷基，其中优选H或甲基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p为0、1或2，R51为H或含1至4个碳原子的烷基，优选p等于0而R51为H；n为整数0、1、2、3或4，优选1、2、3；B代表式Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc或Ⅳd，并优选Ⅳa或Ⅳb的结构片段；其中X1、X2、X3、X4、X5和X6的定义与前面相同；r为整数0或1；R6代表H或含1-4个碳原子的烷基，优选H；优选的X1、X2、X3、X4和r组合是X1、X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，而r为0、1；或X1、X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，而r为0、1；或X1和X3为NH，X2为C=NH，X4为CH2，而r为0、1；或X1和X4代表CH2，X2为C=NH，X3为NH，而r为0、1；或X1为CH2，X2和X4为NH，X3为C=NH，而r为1；或
X1、X2和X4为CH2，X3为CH-NH-C(NH)-NH2，r为0、1或X1不存在，X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，r为0；或X1不存在，X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为0；特别优选的X1、X2、X3、X4和r组合是X1、X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，r为1X1、X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为0或1；X1不存在，X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为0；X1和X3为NH，X2为C=NH，X4为CH2，r为1；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2，优选C(NH)-NH2；X6代表CH或N；根据一个优选实施方案，本发明涉及式Ⅰa的化合物，其中A1代表式Ⅱa的结构片段，其中k为0或1；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，特别是亚甲基或1，2-亚乙基，R11为H；R2代表H；R3代表环己基；A2代表式Ⅲa的结构片段，其中Y代表亚甲基、1，2-亚乙基，或者1，3-亚丙基并且产生的六员环在4位上可带也可不带一个含1至4个碳原子的烷基，优选Y代表亚甲基、1，2-亚乙基；R5代表H；B代表式Ⅳa的结构片段，其中X1不存在、X2和X4为CH2、X3为N-C(NH)-NH2、r为0，n为1或2；X1和X3为NH、X2为C=NH、X4为CH2、r为1，n为2，或者X1、X2和X4为CH2、X3为CH-C(NH)-NH2、r为1，n为1，或者X1、X2和X4为CH2、X3为N-C(NH)-NH2、r为0或1，n为1或2；或更特别优选的化合物为其中B代表式Ⅳb的结构片段，其中X5代表C(NH)-NH2、R6为H，n=1。
本发明优选的化合物为HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-PabH-(R)Cgl-Pic-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-PabH-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-PabH-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(Rors)CH(COOH) - (R) Cha-Pro-Pab／aHOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab／bHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-PabEtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabPh(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-PabH-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CO-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-PabMe-OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-PabH2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-PabBoc-(R)Cha-Pic-PabAc-(R)Cha-Pic-PabMe-SO2-(R)Cha-Pic-PabH-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Val-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-PabH-(R)Hoc-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigH-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PacH-(R)Cha-Pro-PacH-(R)Cgl-Ile-PabH-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-PabMeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabH-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig-HOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)ItpH-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpH-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigH-(R)Cha-Pro-(R，S)HigH-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig
HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-RlgHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ItpH-(R)Cha-Pro-(R，S)MigH-(R)Cha-Pro-MigH-(R)Cha-Pro-DigH-(R)Cha-Aze-Dig现在特别优选的式Ⅰa化合物有HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig在上表的化合物中，字母／a和／b表示在注有“Rors”的碳原子处的基本纯的立体异构体。各化合物的立体异构体可参考本文的实验部分确定。“R、S”表示立体异构体的混合物。
根据本发明，已发现包括立体异构体在内的通式Ⅰb化合物本身或其生理上可接受的盐类是激肽原酶的有效抑制剂
其中，A1代表式Ⅱa、Ⅱb或Ⅱe，优选Ⅱa或Ⅱb的结构片段；
其中k为整数0、1、2、3或4，优选0、1；q为整数0、1、2或3，优选1R1代表H、含1至4个碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2；而R17为甲基、苯基、OH、COOR12或CONHR12，其中R12为H或含1至4个碳原子的烷基；并且R11为H或含1至6个碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各种情况下各自为H、甲基或乙基；
R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R21为H或含1至4个碳原子的烷基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31为H或含1至4个碳原子的烷基，且k为0、1；或R3代表1-萘基或1-萘基，且k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它们可能被也可以不被-OR31取代，其中R31的定义与前面相同，并且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或HC(R32)2，其中R32为环已基或苯基；R4代表H、含1至4个碳原子的烷基、环己基或苯基；优选H；A2代表式Ⅲb或Ⅲc的结构片段，其中优选式Ⅲb的结构片段，其中p为整数0、1或2；m为整数1、2、3或4，优选2、3 ；R3的定义与前面相同；n为整数0、1、2、3或4，优选1、2、3 ；B代表式Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc或Ⅳd的结构片段，其中优选式Ⅳa或Ⅳb的结构片段；其中X1、X2、X3和X4的定义与前面相同；
R6代表H或含1～4个碳原子的烷基，优选H或甲基；r为整数0或1；优选的X1、X2、X3和X4组合是X1、X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，而r为0、1；或X1、X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，而r为0、1；或X1和X3为NH，X2为C=NH，X4为CH2，而r为0、1；或X1和X4代表CH2，X2为C=NH，X3为NH，而r为0、1；或X1为CH2，X2和X4为NH，X3为C=NH，而r为1；或X1、X2和X4为CH2，X3为CH-NH-C(NH)-NH2，r为0、1；或X1不存在，X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，r为0；或X1不存在，X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为0；特别优选的X1、X2、X3和X4组合是X1、X2和X4为CH2，X3为CH-C(NH)-NH2，r为1；或X1、X2和X4为CH2，X3为N-C(NH)-NH2，r为1；X5代表C(NH)-NH2或NH-C(NH)-NH2，优选C(NH)-NH2；X6代表CH或N。
本发明的优选化合物有
H-(R)Pro-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Pro-Phe-PabH-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CO-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Phe-Phe-PabH-(R)Cha-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pne-PabH-(R)Phe-Cha-PabHOOC-CH2-(R)Phe-Cha-PabH-(R)Cha-Cha-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Cha-Pab此外，已发现经口服或肠道外用药后，包括立体异构体在内的通式Ⅴ化合物本身或其生理可接受的盐类是丝氨酸蛋白酶，特别是凝血酶和如激肽释放酶等激肽原酶的有效抑制剂A1-A2-NH-(CH2)n-B-D式Ⅴ其中，A1代表式Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc、Ⅱd或Ⅱe的结构片段；
其中k为整数0、1、2、3或4；m为整数1、2、3或4；q为整数0、1、2或3；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2，R17为COOR12、CONHR12，其中R12代表H或含1至4个碳原子的烷基或苄基；并且R11代表H或含1至6个碳原子的烷基或苄基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含有1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R21为H或含1至4个碳原子的烷基或苄基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31为H或含1至4个碳原子的烷基，且k为0、1；或R3代表1-萘基或2-萘基，且k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它们可能被也可以不被-OR31取代，其中R31的定义与前面相同，并且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；R4代表H、含1至4个碳原子的烷基、环己基或苯基；A2、B和n的定义与前面描述式Ⅰ时的相同；D代表Z或(Z)2，其中乙代表一个苄氧基羰基。
苄氧基羰基(Z或(Z)2)与B中脒基或胍基的氮结合。
优选和特别优选的组合与前面式Ⅰ中的描述相同。
此外，已发现，经口服或肠道外用药用，包括立体异构体在内的通式Ⅴa化合物本身或其生理可接受的盐类是凝血酶的有效抑制剂A1-A2-NH-(CH2)n-B-D式Ⅴa其中，A1代表Ⅱa、Ⅱb、Ⅱc或Ⅱd的结构片段，其中优选Ⅱa或Ⅱb的结构片段；其中k为整数0、1、2、3或4，优选0、1；q为整数0、1、2或3，优选1；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2，R17为COOR12、CONHR12，其中R12代表H或含1至4个碳原子的烷基或苄基；并且R11代表H或含1至6个碳原子的烷基或苄基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可以被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或
R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或优选R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R11的定义与前面相同。
R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且R21为H或含1至4个碳原子烷基或苄基；R3代表含1～4个碳原子的烷基，所述烷基可有也可没有一个或多个氟原子；或R3代表环戊基，环己基或苯基，它们可被也可不被一个含1～4个碳原子的烷基取代；或R3代表1-萘基或2一萘基，k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；R4代表含1至4个碳原子的烷基，环己基或苯基，其中优选环己基或苯基；A2、B和n的定义与前面式Ⅰa描述的相同；D为Z或(Z)2；Z代表苄氧基羰基。
优选的整数、基团或组合以及特别优选的组合与前面式Ⅰa中的描述相同，但是R4代表H、含1～6个碳原子烷基或苄基。优选的式Ⅴa化合物为BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Aze-Pab (Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab (Z)BnOOC-CH2-CH2-(R) Cgl-Pro-Pab (Z)(BnOOC-CH2)2-(R) Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R) Cgl-Pic-Pab (Z)BnOOC-CH2-(R) Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S )CH(COOBn)-(R) Cha-Aze-Pab (Z)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab (Z)／aBnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab (Z)／bBnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab (Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab (Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab (Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab (Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab (Z)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOB-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)(BnOOC=CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
特别优选的化合物为BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)此外，已发现经口服或肠道外用药后，包括立体异构体在内的通式Ⅴb化合物本身或其生理可接受的盐类是激肽释放酶的有效抑制剂A1-A2-NH-(CH2)n-B-D式Ⅴb其中A1代表一个式Ⅱa、Ⅱb或Ⅱe的结构片段，其中优选式Ⅱa或Ⅱb的结构片段其中k为整数0、1、2、3或4，优选0、1；q为整数0、1、2或3，优选1；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2，R17为COOR12或CONHR12，其中R11代表H或含1至4个碳原子的烷基，R11代表H或含1至6个碳原子烷基或苄基；R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且R21为H或含1至4个碳原子烷基或苄基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R21为H或含1至4个碳原子的烷基，且k为0、1；或R3代表1-萘基或1-萘基，且k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它们可能被也可能不被-OR31取代，其中R31的定义与前面相同，并且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；R4代表H、含1至4个碳原子烷基、环己基或苯基，优选H；A2、B和n的定义与前面式Ⅰb中的描述相同。
D为Z或(Z)2。
优选的整数、基团或组合以及特别优选的组合与前面式Ⅰb中的描述相同，但R11代表H、含1～6个碳原子的烷基或苄基。
优选的式Ⅴb化合物为Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)在另一个实施方案中，本发明涉及下式所示化合物在肽类丝氨酸蛋白酶抑制剂的合成，特别在肽类凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂的合成中作为起始物的新用途。它可直接使用，或其脒基在N原子上用例如苄氧基羰基等保护基团单保护或双保护。脒基衍生物的由脒基化合物保护技术中已知方法实现。本发明中这一化合物命名为“1-脒基-4-氨甲基苯”或“H-Pab”。这一化合物特别在Biochem．Pharm．Vol 23，p．2247-2256中已公开。
然而下式所示结构片段作为药物活性化合物，特别是肽类化合物中的结构单元以前却没有公开过。此片段使得丝氨酸蛋白酶抑制剂，尤其是凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂有价值。
在另一个实施方案中，本发明涉及下式所示化合物在凝血酶抑制剂合成中作为起始物的新用途。此化合物的脒基在N上可用例如苄氧基羰基等保护基团单保护或双保护。脒基衍生物的保护由脒基化合物保护技术中的已知方法实现。在本发明中这一化合物命名为“1-脒基-4-氨甲基环己烷”或“H-Pac”。此化合物在DE 2748295中早已公开。
然而，下式所示结构片段作为凝血酶抑制剂中的有价值的结构单元以前却没有公开过。
在另一个实施方案中，本发明涉及下式所示的新化合物及其作为起始物在丝氨酸蛋白酶抑制剂的合成，特别是在凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂的合成中的应用。此化合物的脒基可在N上用例如苄氧基羰基等保护基单保护或双保护。脒基衍生物的保护由脒基化合物保护技术中的已知方法实现。在本发明中这一化合物命名为“4-氨乙基-1-脒基哌啶”或“H-Rig”。
下式所示结构片段作为药物活性化合物，特别是肽类化合物中的结构单元以前却没有公开过。此结构片段使得丝氨酸蛋白酶抑制剂，尤其是凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂有价值。
在另一个实施方案中，本发明涉及下式所示的新化合物及其作为起始物在丝氨酸蛋白酶抑制剂的合成，特别是在凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂的合成中的应用。此化合物的脒基可在N上用例如苄氧基羰基等保护基单保护或双保护。脒基衍生物的保护由脒基化合物保护技术中的已知方法实现。在本发明这一化合物命名为“1，3-二氮杂-2-亚氨基-4-氢乙基环己烷”或“H-Itp。
下式所示结构片段作为药物活性化合物，特别是肽类化合物中的结构单元以前却没有公开过。此结构片段使得丝氨酸蛋白酶抑制剂，尤其是凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂有价值。
在另一个实施方案中，本发明涉及下式所示的新化合物及其作为起始物在丝氨酸蛋白酶抑制剂的合成，特别是在凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂的合成中的应用。此化合物的脒基可在N上用例如苄氧基羰基等保护基单保护或双保护。脒基衍生物的保护由脒基化合物保护技术中的已知方法实现。
其中n为12，s为01。这些化合物的名称为当n=1，s=1时，1-脒基-3-氨甲基吡咯烷或“H-Nig”，当n=2，s=1时，1-脒基-3-氨乙基吡咯烷或“H-Hig”，
当n=1，s=0时，3-氨甲基-1-脒基氮杂环丁烷或“H-Mig”，当n=2，s=0时，3-氨乙基-1-脒基氮杂环丁烷或“H-Dig”。
下式所示结构片段作为药物活性化合物，特别是肽类化合物中的结构单元以前却没有公开过。此结构片段使得丝氨酸蛋白酶抑制剂，尤其是凝血酶抑制剂或激肽原酶抑制剂有价值。
本发明的另一个实施方案是脒基在N上用例如苄氧基羰基等保护基单保护或双保护的新化合物，这些化合物的实例有4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)苯(H-Pab(Z))，4-氨甲基-1-(N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基)苯(H-Pab(Z)2)，4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)环己烷(H-Pac(Z))，4-氨甲基-1-(N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基)环己烷(H-Pac(Z)2)，4-氨乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)哌啶(H-Rig(Z))，4-氨乙基-1-N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基哌啶(H-Rig(Z)2)，(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-Nig(Z))，(3RS)-1-(N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-Nig(Z)2)，(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-Hig(Z))，(3RS)-1-(N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-Hig(Z)2)，3-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(H-Mig(Z))，3-氨甲基-1-(N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基)氮杂环丁烷(H-Mig(Z)2)，3-氨乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(H-Dig(Z))，3-氨乙基-1-(N，N＇-二(苄氧基羰基)脒基)氮杂环丁烷(H-Dig(Z)2)。
所述化合物用作制备式Ⅰ、Ⅰa、Ⅰb、Ⅴ、Ⅴa和Ⅴb的要求专利保护的肽衍生物过程的起始物。
医用和药用本发明还提供治疗人和动物的其中需要抑制凝血酶的疾病和特别是炎症等生理障碍的组合物和方法。
本发明的凝血酶抑制化合物可望用于包括人在内的动物的血液或组织中的血栓形成和凝固性过高的治疗或预防。而且还可望用于阿尔茨海默症和胰腺炎等其中无凝固性过高迹象而凝血酶过多的疾病。可用作本发明化合物治疗和／或预防的症状包括静脉血栓形成和肺栓塞、动脉血栓形成，例如心肌梗塞形成、不稳定心绞痛和基于血栓形成的中风，以及经常在动脉纤维性颤动过程中来自心房或在穿壁性心肌梗塞形成后来自左心室的末梢动脉血栓形成和全身性栓塞。此外，这些化合物可望用于预防例如冠状动脉、大脑动脉和末梢动脉的动脉粥样硬化疾病。此外，当这些化合物与具有不同作用机理的任何抗血栓形成制剂(如抗血小板制剂乙酰水杨酸)结合使用时可产生协同抗血栓作用。此外，这些化合物可望与血栓溶解剂结合用于血栓形成疾病，尤其是心肌梗塞。此外，这些化合物可望用于预防血栓溶解、经皮穿腔血管成形术(PTCA)和冠状动脉分流术之后的血管再次闭塞。此外，这些化合物可望用于防止显微外科手术和普通血管外科手术之后的血栓重新形成。此外，这些化合物可望用于治疗和防止由细菌、多重创伤、中毒或其他各种机制引起的播散性血管内凝固。此外，当血液与体内异质表面(例如血管移植物、血管Stemts、血管导管、机械和生物修复装置或其他各种医用装置)接触时，这些化合物可望用于抗血凝固治疗。此外，当血液与体外医疗器械(例如心血管外科手术用物或心肺机)接触时或在验血诊断中，这些化合物可望用于抗血凝固治疗。
本发明的抗血凝固化合物还可望用于清洗病人体内使用的导管和机械装置，以及作为体外存放血液、血浆或其他血液制品的抗血凝固剂。
本发明的消炎抑制化合物可望用于治疗或预防包括人在内的动物的炎症，例如哮喘、鼻炎、胰腺炎、荨麻症、肠炎和关节炎。可以单独使用加有或不加可药用载体或稀释剂的有效剂量激肽原酶抑制化合物，也可与其他治疗剂结合使用。
该化合物抑制激肽释放酶的活性，这种活性根据已知方法用生色酶作用物进行评价。本发明化合物的消炎作用可通过例如在气道粘膜或内脏粘膜中化合物对过敏诱发渗出性炎症过程的抑制作用进行研究。
药物制剂本发明的化合物一般以药物制剂形式经口、直肠、皮肤、鼻道、气管、支气管、非肠道或吸入等给药，药物制剂在可药用剂型中含有游离碱或可药用无毒有机或无机酸加成盐形式的活性成分，所述盐例如盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐、硝酸盐、乳酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、苯甲酸盐、琥珀酸盐、酒石酸盐、三氟乙酸盐等。根据所治疗的疾病和病人以及给药途径的不同，组合物可以不同剂量给药。
剂型可以是由本身已知的技术制成的固体、半固体或液体制剂。通常情况下，活性物质构成制剂重量的0．1％至99％，更具体地说，对于非肠道给药的制剂为0．1～50％；而对于口服给药的制剂为0．2～75％。
对人进行治疗时，本发明化合物适宜的口服日剂量为大约0．001-100mg／kg体重，而非肠道给药日剂量为0．001-50mg／kg体重。
制备本发明的进一步目的是化合物的制备方式。式Ⅰ和Ⅴ的化合物的制备过程包括用标准方法将N-端保护的二肽或氨基酸与下式所示化合物本身，或者其胍基或脒基氮原子用氨基保护基单保护或双保护的该化合物偶联，当所用氨基酸为N-端氨基酸时，随后加第二种氨基酸H2N-(CH2)n-X
其中，n为整数0、1、2、3或4；X代表B或B-D，其中B与式Ⅰ中的定义相同而D与式Ⅴ中的定义相同，所述胺保护基例如苄氧羰基、叔丁氧羰基或对甲苯磺酰基；或X代表可转移到B的基团；然后去除保护基团或将N-端氮脱保护，之后使N-端氮烷基化；如果需要则再用已知方法脱保护，并且如果需要，形成一种生理可接受盐类；对于反应生成立体异构体混合物的情况，可任选标准色谱或重结晶技术将它们分离，如果需要，还可分离出单一立体异构体。
更具体地说，式Ⅰ或Ⅴ的化合物可用下列方法之一制备方法Ⅰa用标准肽偶联方法使N-端保护的二肽与下式化合物偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ的A1和A2并通过标准肽偶联方法制得，
偶联过程如下所示
其中n与式Ⅰ中的定义相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和苄氧基羰基等N-端氨基保护基Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等胺保护基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基团通过本技术领域已知的方法随后转移至脒基(例如给出Q1=-C(NH)-NH2)；或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定义同上，其中当Q1为-NH-W2(W2在这种情况下必须与W1正交)时，W2-基脱保护后，氨基通过本技术领域已知的方法随后转移至胍基(给出Q1=-NH-C(NH)NH2)。
最终化合物可根据Q1-基团的性质由下列途径之一制得去除保护基(当Q1=-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2)；或将W1-基选择性脱保护(例如Q1=-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2(W2在这种情况下必须与W1正交)，然后用本技术领域已知的方法使N-端氮烷基化，并根据需要用已知方法脱保护。
方法Ⅰb用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸与下式化合物偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，并通过标准方法制得；
偶联过程如下
其中n、W1和Q1的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，形成方法Ⅰa所述的保护的肽。最终产物肽的合成按方法Ⅰa继续进行。
方法Ⅱa用标准肽偶联方法使N-端保护二肽与下式化合物偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ中的A1和A2并通过标准肽偶联方法制得；
偶联过程如下所示
其中n与式Ⅰ中的定义相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和苄氢基羰基等N-端氨基保护基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等胺保护基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基团通过本技术领域已知的方法随后转移至脒基(例如给出Q1=-C(NH)-NH2)；或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定义同上，其中当Q1为-NH-W2(W2在这种情况下必须与W1正交)时，W2-基脱保护后，氨基通过本技术领域已知的方法随后转移至胍基(给出Q1=-NH-C(NH)NH2)。
最终化合物可根据Q1-基团的性质由下列途径之一制得去除保护基(当Q1=-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2)；或将W1-基选择性脱保护(例如Q1=-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2(W2在这种情况下必须与W1正交))，然后用本技术领域已知的方法使N-端氮烷基化，并根据需要用已知方法脱保护。
方法Ⅱb用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸与下式化合物偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，并通过标准方法制得；
偶联过程如下
其中n、W1和Q1的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，形成方法Ⅱa所述的保护的肽。最终产物肽的合成按方法Ⅱa继续进行。
方法Ⅲa用标准肽偶联方法使N-端保护的二肽与下式化合物偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ中的A1和A2并用标准肽偶联方法制得，
偶联反应如下所示
其中n与式Ⅰ中的定义相同；当X1、X2和X4代表CH2时，r为0、1，而当X2和X4代表CH2，X1不存在时，r为0；W1代表如同叔丁氧基羰基和苄氧基羰基等N-端氨基保护基；Q2代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2，其中W2代表如同叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等胺保护基或者Q2与W2相同，其中在W2基团脱保护后(W2在这种情况下必须与W1正交，氨基用本技术领域已知的方法用未保护、N-保护或N，N＇-双保护的胍化试剂转移至胍基(给出Q2=-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2)。
最终化合物可根据所用Q2-基的性质由下列途径之一制得去除保护基(当Q2=-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2)，或对W1-基团选择性脱保护(例如当Q2=-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2，W2在这种情况下必须与W1正交)，然后用本技术领域已知方法使N-端氮烷基化并根据需要用已知方法脱保护。
方法Ⅲb用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸与下式化合物偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2并通过标准方法制得；
偶联反应如下所示
其中n、r、X1、X2和X4，W1和Q2的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，形成方法Ⅲa所述的保护的肽。最终产物肽的合成按方法Ⅲa继续进行。
方法Ⅳa用标准肽偶联方法使N-端保护的二肽与下式化合物偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ的A1和A2并通过标准肽偶联方法制得，
偶联过程如下所示
其中n值与式Ⅰ中的定义相同；W1代表如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等N-端氨基保护基；W3代表H或如同芳基磺酰基、苄氧基羰基或叔丁氧基羰基等氨基保护基。
最终化合物可由下列途径之一制得脱除保护基或对W1-基选择性脱保护(W1必须与W2正交)，然后使N-端氮烷基化并根据需要脱保护。
方法Ⅳb用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸与下式化合物偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，并通过标准方法制得；
偶联过程如下
其中n、W1和W3的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护(W1必须与W3正交)，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，生成如方法Ⅳa中所述的被保护肽。根据方法Ⅳa继续合成目标肽。
发明的详细说明如下描述说明本发明各方面。
实验部分一般实验方法质谱记录在装有电子流接口(electrospray interface)的Finnigan Mat TSQ 700三级四极质谱仪上完成。
1HNMR和13CNMR的测定由BRUKER AC-P 300和BRUKERAM 500光谱仪完成，前者在1H频率为500．14 MHz、13C频率为1 25．76 MHz下操作，后者在1H和13C频率分别为300．13MHz和75．46MHz下操作。
取大约10～50mg的试样溶于0．6ml溶剂中，溶剂选自CDCl3(同位素纯度＞99．8％)、CD3OD(同位素纯度＞99．95％)、D2O(同位素纯度＞99．98％)或DMSO-d6(同位素纯度＞99．8％)中的一种。所有溶剂购自Dr．Glaser AG，Basel 。
在CDCl3和CDOD中1H和13C化学位移值为相对于四甲基硅烷外标的值。在D2O中，1H化学位移以3-(三甲基甲硅烷基)-d4-丙酸钠盐为基准，而13C化学位移以1，4-二噁烷(67．3ppm)为基准，二者都为外标物。用外标物校正在某些情况下与内标物校正相比可能存在小的位移差别，不过这种差别在1H化学位移中小于0．02ppm而在13C中则小于0．1ppm。
含一个脯氨酸或一个“脯氨酸类”残基的肽系列其1HNMR谱经常表现为二组共振，这对应于对围绕脯氨酸为N-部分的酰氨键旋转而言存在着二种有贡献的异构体。这二种异构体称为顺式和反应。本发明化合物中序列(R)Cha-Aze、(R)Cha-Pro-和(R)Cha-Pic经常会出现其中一种异构体作为主要异构体(＞90％)的顺一反平衡。在这种情况下本发明只给出主要旋转异构体的1H化学位移数据，只有在次要旋转异构体产生的信号可被清楚地分辨的情况下，NMR-数据表才记录这些信号。对于CDCl3中NH-信号的判别也采用这种方式，只有在信号可被清楚分辨情况下，NMR-数据中才记录旋转异构体的二组化学位移值。这意味着对有些中间体来说，NMR-数据表所给出的质子数目将少于由化学式算得的质子数目。
薄层色谱在商用Merck Silicagel 60F254涂层玻璃或铝板上完成，目测方法采用UV-光照射、随后用混合溶液(由372ml EtOH(95％)、13．8ml浓硫酸、4．2ml浓醋酸和10．2ml对-甲氧基苯甲醛或磷钼酸试剂(5-10重量％的乙醇(95％)溶液)配制而成)喷显，再加热三者的结合。
闪色谱在大气压力下用Merck Silica gel 60(40～63mm，234～400目)上进行。
反相高效液相色谱(实施例中称作RPLC)在Waters M-590液相色谱仪上进行，仪器装有三根不同直径的反相Kromasil 100，C8柱(EKa-Nobel)分别用于分析(4．6mm×250mm)、半制备(1＂×250mm)和制备(2＂×500mm)，检测波长为226nm。
冷冻干燥在一个Lyovac GT 2型Leybold-Heraeus装置上完成。
起始物的制备Boc-(R)-Pgl-OH与由H-(R)Pgl-OH制备Boc-(R)Cha-OH中所述方法相同(参看下文)。
Boc-(R)Cha-OH在21．55g(125．8mmol)H-(R)Cha-OH的130ml 1M NaOH和65ml THF溶液中加入30g(137．5mmol)(Boc)2O，在室温下将混合物搅拌4．5hr(小时)。蒸去THF并补充加入150ml水。所得碱性水溶液相用EtOAc洗涤二次，然后用2M KHSO4酸化并用3×150mlEtOAc萃取。所得混合有机相用水、盐水洗涤后干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂后得到30．9g(90．5％)标题化合物白色固体。
Boc-(R)Hop-OHH-(R)Hop-OH为起始物，制备过程与所述Boc-(R)Cha-OH的制备过程相同。
1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ1．45(s，9H)，2．00(m，1H)，2．22(m，1H)， 2．75(bt，2H)，4．36(bs，1H)，5．05(bs，1H)，7．15-7．33(m，5H)。
4-(叔丁氧基羰基氨甲基)吡啶在10．81g(100mmol)4-氨甲基吡啶的100ml THF溶液中加入溶于70ml THF的24g(110mmol)Boc2O，加入温度10℃、时间20分钟。使所得溶液达到室温并搅拌4小时(反应过程中有沉淀生成，浆液变成红色)。除去溶剂并将残余物溶于EtOAc后用硅胶过滤。蒸去溶剂后得到红色油状标题化合物，静置结晶。粗产物无须进一步纯化即直接使用。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ1．45(s，9H)，4．32(d，2H)，5．05(bs，1H(NH))，7．2(d，2H)，8．55(d，2H)．4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)-苯(H-Pab(Z))(ⅰ)4-氰基苄基叠氮化物在室温下将20．23g(0．31mol)叠氮化钠的50ml水溶液加入溶于200ml DNF的49．15g(251mmol)4-氰基苄基溴中，发生放热反应，反应1．5hr后反应混合物用200ml甲苯和500ml水稀释(注意为避免分离有可能爆炸的叠氮化物，建议向混合物中加入水之前先加入甲苯)。所得水相再用2×50ml甲苯萃取，合并的有机萃取物用2×50ml水和盐水洗涤后干燥(MgSO4)并过滤。在下步反应中直接使用此溶液。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)；δ4．4(s，2H)，7．4(d，2H)，7．7(d，2H)。
(ⅱ)4-脒基苄基叠氮化物250ml无水乙醇和上述(ⅰ)步所得溶液(约200ml)的混合物在-5℃下通入HCl气体直至饱和，将温度升至8℃存放24hr后蒸去大部分溶剂，然后加入无水乙醚沉淀，过滤分离后得到白色晶体并将其溶于1．8升酒精氨中。48hr后大部分溶剂被除去，此时加入200ml 3．75M NaOH溶液使4-脒基苄基叠氮化物沉淀为无色晶体，用过滤方法将此结晶分离出来，以此计算的4-脒基苄基叠氮化物的产率为22．5g(总计51％)。乙基咪唑并苯甲基叠氮化物盐酸盐1H-NMR(500 MHz，CD3OD)；δ1．6(t，3H)，4．5(s，2H)，4．65(q，2H)，4．8(brs，2H)，7．6(d，2H)，8．1(d，2H)4-脒基苄基叠氮化物1H-NMR(500MHz，CDCl3)；δ4．3(s，2H)，5．7(brs，3H)，7．3(d，2H)，7．6(d，2H)。13C-NMR(125MHz，CDCl3)脒碳δ 165．5 。
(ⅲ)4-(苄氧基羰基脒基)苄基叠氮化物上步(ⅱ)所得结晶溶于500ml二氯甲烷并将所成溶液干燥(K2CO3)，过滤后加入27ml(194mmol)三乙胺。在反应混合物用冰浴冷却、搅拌条件下将25ml氯甲酸苄酯慢慢加到上述溶液中，反应30min(分钟)后补加入2ml氯甲酸苄酯并继续搅拌30min。然后加入水并用2M HCl将水溶液pH值调至7。干燥(MgSO4)有机相并在真空下除去溶剂，最后用乙醚／二氯甲烷／己烷分离出4-(苄氧基羰基脒基)苄基叠氮化物无色结晶。1H-NMR(500MHz，CDCl3)；δ4．4(s，2H)，5．3(s，2H)，6．3-7．0(brs，1H)，7．3-7．4(m，5H)，7．5(d，2H)，7．9(d，2H)，9．3-9．6(brs，1H)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)脒碳δ 167．5。
(ⅳ)4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)-苯(H-Pab(Z))将上步(ⅲ)所得4-(苄氧基羰基脒基)苄基叠氮化物溶于160ml THF中，在室温下加入26．3g(100mmol)三苯基膦。16 hr后补加6．6g(25 mmol)三苯基膦，溶液静置4h后真空下除去溶剂。残余物溶于二氯甲烷并用2M HCl萃取。所得水溶液相用二氯甲烷和乙醚洗涤后用3．75M NaOH溶液碱化。用二氯甲烷萃取、干燥(K2CO3)并在真空下除去溶剂制得20g黄色油状物(以氰基苄基溴计算的总收率为28％)，静置固化。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)；δ1．2-2．2(brs，2H)，3．8(s，2H)，5．2(s，2H)，7．2-7．35(m，5H)，7．4(d ， 2H)，7．8(d，2H)，9．1-9．6(brs，1H)．13C-NMR(125 MHz，CDCl3)脒和羰基碳δ 164．6和168．17。
H-Pig(Z)2(ⅰ)4-(叔丁氧基羰基-氨甲基)哌啶向17．7g 4-叔丁氧基羰基氨甲基哌啶的125ml MeOH溶液中加入2g 5％Rh／Al2O3，在0．34 MPa压力下氢化过夜。1H-NMR数据表明加氢化并未完全，因此将混合物中的催化剂滤去并在真空下除去溶剂，然后将残余物溶于100ml乙酸，加入2g 5％Ph／Al2O3，在0．34 MPa压力下继续氢化混合物4天。滤去催化剂并在真空下除去大部分乙酸。向残余物补加50 ml水，用5M NaOH碱化，水相用1×200+1×100ml CH2Cl2萃取，合并有机相，用25ml水洗涤并干燥(MgSO4)。除去溶剂，得到17．2g棕色油状物，将它溶于50ml二乙醚，加入200ml戊烷形成沉淀，过滤后得到7．7g棕色粉末，母液经蒸发后得到7g白色油状物。棕色粉末溶于100ml EtOAc，有机相用1×50ml+1×25ml 1M KHSO4洗涤。合并酸性相，用2M NaOH碱化，并用1×200+1×75ml EtOAc萃取。合并有机相，干燥、蒸发，提到5．2g标题化合物，为白色粉末。
用同样方法处理由母液所得的白色油状物得到另外3．4g产物。总收率40％。1H-NMR(500 MHz，CDCl3，二种旋转异构体的混合物，3∶1)主要旋转异构体δ1．11(dq，2H)，1．44(s，9H)，1．49-1．60(m，1H)，1．63-1．70(m，2H)，2．58(dt，2H)，2．93-3．03(m，2H)，3．07(m，2H)，4．75(bs，1H(NH))。由次要旋转异构体产生的可分辨信号出现在δ 1．21(dq)和1．91(dt)。
(ⅱ)Boc-Pig(Z)2向2g(9．33mmol)4-(叔丁氧基羰基氨甲基)哌啶的60mlCH3CN溶液中加入3．34g(9．33mmol)N，N＇-(二苄氧基羰基)甲基异硫脲，混合物在60℃搅拌22小时。蒸去溶剂并将残余物溶于EtOAc中，有机相用2×20ml 1M KHSO4、1×20ml水、1×20ml盐水洗涤并干燥(MgSO4)，蒸去溶剂后用石油醚／EtOAc(1／1)作为洗脱剂进行闪色谱处理得到2．43g(50％)所需产物。
1H-NMR(500 MHz，CDCl3)由于分子内的交换过程使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。特别是哌啶环中的2-和6-CH2基更为明显，它们表现为3．7-4．5ppm范围的宽峰。δ1．19-1．31(m，2H)，1．43(s，9H)，1．63-1．80(m，3H)，2．66-3．05(m，4H)，3．7-4．5(bs，2H)，4．65(bt，1H(NH))5．13(s，4H)，7．2-7．4(m，10H)，10．5(bs，1H(NH))。
(ⅲ)H-Pig(Z)2163mg(0．31mmol)Boc-Pig(Z)2的5ml EtOAc溶液用HCl(气)饱和后在环境温度下搅拌3小时20分钟。蒸去溶剂并将残余物溶于30ml CH2Cl2中。有机相用5ml 2M NaOH、1×50ml水、1×5ml盐水洗涤后干燥(MgSO4)，蒸去溶剂得到100mg(76％)标题化合物。
1H-NMR(500 MHz，CDCl3)由于分子内的交换过程使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。特别是哌啶环中的2-和6-CH2基更为明显，它们表现为3．7-4．5ppm范围的宽峰。δ 1．18-1．37(m，2H)，1．46-1．63(m，1H)，1．68-1．83(m，2H)，2．57(d，2H)，2．86-3．03(m，2H)，3．7-4．5(bs，2H)，5．13(s，4H)，7．2-7．4(m，10H)。
4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)-环己烷(H-Pac(Z)×2 HCl)。
(ⅰ)N-[N-4-(苄氧基羰基)脒基苄基]叔丁基氨基甲酸酯向1．81g(6．4mmol)4-(苄氧基羰基)脒基苄基胺和1 ml(7．1mmol)三乙胺于25 ml二氯甲烷的溶液中在冰冷搅拌下加入1．466g(6．7mmol)(Boc)2O。20 min后加入更多的二氯甲烷并用5％乙酸和10％ Na2CO3溶液洗涤混合物。干燥(硫酸镁)并在真空下除去溶剂，残余物用CH2Cl2／己烷结晶得到产物1．66g(68％)。
(ⅱ)N-[N-4-脒基苄基]叔丁基氨基甲酸酯1．60g(4．2mmol)N-[4-(苄氧基羰基)脒基苄基]叔丁基氨基甲酸酯、5 ml乙酸和160mg 10％炭载钯于50 ml乙醇的混合物在氢气氛下搅拌2 hr。用硅藻土滤去催化剂后真空除去溶剂，制得定量收率的标题化合物。
(ⅲ)N-[4-脒基环己基甲基]叔丁基氨基甲酸酯17 mmol N-[4-脒基苄基]叔丁基氨基甲酸酯的乙酸化物在100ml甲醇中在863mg 5％ Rh／Al2O3催化剂存在下在3．4MPa压力下加氢20 hr。滤去催化剂并真空除去溶剂。残余物溶于水后用氢氧化钠碱化。随后经过二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥(碳酸钾)、真空除去溶剂，制得3．8g(87％)标题化合物。
(ⅳ)N-[N-4-(苄氧基羰基)脒基环己基甲基]叔丁基氨基甲酸酯搅拌2．04g(8 mmol)N-[4-脒基环己基]叔丁基氨基甲酸酯、1．23ml(8．8mmol)三乙胺和197mg DMAP于40 ml二氯甲烷的溶液，在0℃下加入1．25ml(8．8mmopl)苄基氯甲酸酯，10 min后反应混合物用二氯甲烷稀释并用水、稀乙酸和碳酸氢钠溶液萃取。有机相加到硅胶柱上，随后用乙酸乙酯含量不断增加的二氯甲烷淋洗得到2．49g(80％)标题化合物。
(ⅴ)4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)-环己烷(H-Pac(Z)×2 HCl)2 g(5．1mmol)N-[4-苄氧基羰基)脒基环己基甲基]叔丁基氨基甲酸酯的40 ml乙酸乙酯溶液中通入氯化氢，10 min后加入甲醇并在真空下除去部分溶剂使目标化合物的二盐酸盐结晶出来。
4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)哌啶(H-Pig(Z)×HCl)(ⅰ)4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-苄氧基羰基脒基)哌啶(Boc-pig(Z))在25 ml乙醇中混合7．8g(36．4mmol)4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)哌啶和8．98g(40 mmol)N-苄氧基羰基-S-甲基异硫脲。混合物在60～70℃加热6小时并在室温下放置二天。蒸去溶剂并将残余物溶于CH2Cl2。有机层用0．3M KHSO4洗涤二次，用盐水洗涤一次。合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到的粗产物闪色谱上用CH2Cl2／MeOH的梯度洗脱液(100／0、97／3、955、90／10)冲洗提纯得到5．22g(37％)标题化合物。
(ⅱ)H-Pig(Z)×HCl(4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)哌啶5．22g(13．5mmol)Boc-Pig(Z)溶于100ml用HCl(气)饱和的乙酸乙酯。使混合物静置1小时后蒸发。残余物溶于水并用二乙醚和乙酸乙酯的混合物洗涤。水层经冷冻干燥得到4．0g(91％)标题化合物。1H-NMR(D2O，300 MHz)δ1．40-1．60(m，2H)，2．05(bd，2H)，2．19(m，1H)，3．07(d，2H)，3．34(bt，2H)，4．08(bd，2H)，5．40(s，2H)，7．5-7．63(m，5H)MSm／z 291(M++1)4-氨乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z))(ⅰ)1-苄氧基羰基脒基-4-羟乙基哌啶溶于50 ml乙腈的6．2g(0．028mol)4-羟乙基哌啶和3．6g(0．028mol)N-苄氧基羰基-S-甲基异硫脲的混合物回流过夜。经蒸发和用乙酸乙酯进行硅胶闪色谱处理制得3．5g(41％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ1．1-1．85(m，7H)，2．83(bt，2H)，4．70(bt，2H)，4．18(bd，2H)，5．12(s，2H)，6．9-7．2(m，2H)，7．2-7．5(m，5H)。
(ⅱ)1-苄氧基羰基脒基-4-甲磺酰氧基乙基哌啶溶于40 ml二氯甲烷和10 ml四氢呋喃的3．50g(0．0115mol)1-苄氧基羰基脒基-4-羟乙基哌啶和1．15g(0．0115mol)三乙胺的冰冷溶液中滴加入1．30g(0．115mol)甲磺酰氯。使反应混合物搅拌1hr。混合物倒入水中并保留有机层，水层用二氯甲烷萃取。合并有机层，经水洗、干燥(Na2SO4)和蒸发产物无须进一步精制即可用于下一步。收率4．4g(100％)。1H NMR(500 MHz，CDCl3)d 1．15-1．3(m，2H)，1．65-1．8(m，5H)，2．84(bt，2H)，3．01(s，3H)，4．20(bd，2H)，4．27(t，2H)，5．12(s，2H)，7．1-7．5(m，7H)。
(ⅲ)4-叠氮基乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶4．4g(0．0115mol)粗品1-苄氧基羰基脒基-4-甲磺酰氧基乙基哌啶溶于100ml二甲基甲酰胺中并加入4．5g(0．069mol)叠氮化钠。混合物在100℃加热2．5hr，然后将其倒入水中并用乙酸乙酯萃取三次。合并有机相，水洗、干燥(Na2SO4)和蒸发。残余物用以乙酸乙酯／庚烷(1／1)为冲洗剂进行硅胶闪色谱处理。得率3．0g(79％)。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ1．20(dq，2H)，1．5-1．8(m，5H)，2．85(dt，2H)，3．35(t，2H)，4．22(bd，2H)，5．13(s，2H)，6．9-7．2(b，2H)，7．2-7．45(m，5H)。
(ⅳ)4-氨乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z))向30 ml水中加入0．40g 10％Pd／C。1．0g(0．031mol)硼氢化钠溶于30 ml水后将其小心加到搅拌且冰冷却的Pd／C和水的浆液中。2．9g(8．8mmol)4-叠氮基乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶溶于80 ml四氢呋喃的溶液滴加到前述的冰冷水性浆液中。混合物在室温下搅拌4 hr后再次用冰冷却并加入30 ml 2M HCl。用硅藻土过滤混合物后再用另外的水冲洗硅藻土。蒸去四氢呋喃后，水相用乙酸乙酯洗涤。水相用2M NaOH碱化，再用二氯甲烷萃取三次。合并有机相经水洗、干燥(Na2SO4)和蒸发，产物无须进一步精制即可用于下步反应。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ1．1-1．5(m，6H)， 1．55-1．65(m，1H)，1．73(bd，2H)，2．72(b，2H)，2．81(dt，2H)，4．20(bd，2H)，5．12(s，2H)，6．9-7．2(b，2H)，7．2-7．5(m，5H)。
(3 RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-(R，S)Nig(Z))(ⅰ)(3 RS)-3-羟甲基吡咯烷16．4g(0．0857mmol)(3 RS)-1-苄基-3-羟甲基吡咯烷(参看H-(R，S)Hig(Z)(i)，见后)与1．6g Pd／C(10％)、5ml水和150ml乙醇的混合物在0．26MPa压力下氢化过夜。hyflo过滤并蒸去溶剂后，1H-NMR数据表明反应并未完全。在0．26 MPa压力下在1．6g Pd／C(10％)存在下于5ml水／150ml乙醇中继续氢化3天，使还原反应进行完全。经Hyflo过滤并蒸去溶剂得到定量收率的产物。
(ⅱ)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-羟甲基吡咯烷将1．01g(0．01mol)(3RS)-3-羟甲基吡咯烷和2．29g(0．011mol)N-苄氧基羰基-O-甲基异脲溶于(胺不是很好溶)甲苯，加热至60℃保持3小时，随后在室温下搅拌过夜。蒸发溶剂，1H-NMR数据表明反应并未完全，于是将混合物溶于15ml乙腈并加热至60℃保持3小时，随后在室温下搅拌过夜。蒸去溶剂后的混合物溶于CH2Cl2，用水洗涤一次后干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发。所得粗产物在闪色谱上用CH2Cl2／MeOH(95／5)淋洗提纯得到0．70g(25％)产物。
MS m／z 278(M++1)(ⅲ)(3RS)-1-N-苄氧基羰基脒基)-3-甲磺酰氧基甲基吡咯烷将0．7g(2．53mmol)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-羟甲基吡咯烷和0．70ml(5．05mmol)三乙胺溶于15ml二乙醚／CH2Cl2(1／1)，混合物冷至0℃。将0．25ml(3．29mmol)甲磺酰氯溶于3 ml二乙醚后缓慢加到上述混合物中并在0℃下搅拌3小时。蒸去溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯，用0．3M KHSO4溶液萃取。水层用CH2Cl2洗涤一次后用10M NaOH溶液将其调至中性，然后再用CH2Cl2萃取二次。合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发制得0．450g(50％)标题化合物。
(ⅳ)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-叠氮基甲基吡咯烷将0．450g(1．27mmol)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-甲磺酰氧基甲基吡咯烷和0．124g(1．9mmopl)叠氮化钠溶于10ml二甲基甲酰胺，加热至60℃保持4小时，然后在室温下搅拌过夜。加水并用甲苯／乙酸乙酯(2／1)萃取所得混合物二次，合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，所得粗产物用洗脱剂CH2Cl2MeOH(955)进行闪色谱纯化得到0．262g(68％)产物。
MS m／z 303(M++1)(ⅴ)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷(H-(R，S)Nig(Z))
将32 mg Pd／C(10％)和2．6ml水混合并通入平缓的氮气气流，加入溶于2．6ml水的98 mg NaBH4，然后再缓慢加入溶于7 ml MeOH的262mg(0．87 mmol)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-甲磺酰氧基吡咯烷。使混合物静置1小时。加入5 ml 1M HCl并用hyflo过滤。在减压下蒸去有机溶剂，所剩水层用乙酸乙酯洗涤一次，用NaOH溶液碱化，再用CH2Cl2萃取若干次。合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，制得130mg(54％)产物。
MS m／z 277(M++1)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-(R，S)Hig(Z))(ⅰ)(3RS)-1-苄基-3-羟甲基吡咯烷在氩气氛下将25．2g(0．1063mol)(3RS)-苄基-2-氧代-4-甲氧基羰基吡咯烷缓慢加到6．22g氢化铝锂的160ml乙醚浆液中。混合物搅拌过夜然后加热回流1小时。将反应混合物冷至室温并加入0．2g Na2SO4×10H2O，然后依次缓慢加入6ml水、18ml 3．75MNaOH溶液和6ml水。浆液用Na2SO4硅藻土干燥除去过量的水，过滤和蒸发后得到产物(20．3g)。1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ1．64-1．77(m，1H)，1．93-2．07(m，1H)，2．27-2．40(m，2H)，2．51(dd，1H)，2．62(dd，1H)，2．82(m，1H)，3．52(dd，1H)，3．59(s，2H)，3．67(dd，1H)，7．15-7．40(m，5H)(ⅱ)(3 RS)-1-苄基-3-氯甲基吡咯烷在15．3g(0．08mol)(3RS)-1-苄基-3-羟甲基吡咯烷的220ml CHCl3回流溶液中缓慢加入330ml亚硫酰氯的60 ml CHCl3溶液，继续回流1小时。蒸发混合物并将残余物溶于水。水层用乙酸乙酯洗涤，再用0．2M NaOH溶液碱化。水层用乙酸乙酯萃取三次，合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到定量收率(16．8g)的产物。1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ1．55(m，1H)，2．05(m，1H)，2．38(dd，1H)，2．48-2．64(m，3H；其中 2．58(t，2H)))，2．73(dd，1H)，3．51(d，2H)，3．60(s，2H)，7．2-7．4(m，5H)(ⅲ)(3RS)-1-苄基-3-氰甲基吡咯烷将16．8g(0．08mol)(3RS)-1-苄基-3-氯甲基吡咯烷和5．88g(0．1 2mol)氰化钠溶于250ml二甲基亚砜。混合物在60℃下搅拌二天并在室温下搅拌一星期。加入水并将混合物用乙酸乙酯萃取三次。合并有机层，用盐水洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到14．7g(92％)产物。1H-NMR(CDCl3，500 MHz)δ1．55(m，1H)，2．13(m，1H)，2．35(dd，1H)，2．42(t，2H)，2．44-2．59(m，2H)，2．65(m，1H)，2．73(dd，1H)，3．61(s，2H)，7．2-7．4(m，5H)(ⅳ)(3 RS)-1-苄基-3-氨乙基吡咯烷14．7g(0．0734mol)(3RS)-1-苄基-3-氰甲基吡咯烷溶于220ml乙醚，在氩气氛下缓慢加入到2．94g氢化铝锂的74ml乙醚浆液中。混合物搅拌过夜，加入6ml水，18ml 3．75M NaOH溶液和6ml水。浆液用Na2SO4硅藻土干燥除去过量的水、抽滤和蒸发，得到14．84g(99％)产物。1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ1．41(m，1H)，1．51(q，2H)，1．90-2．10(m，2H；其中2．05(dd，1H)))，2．18(m，1H)，2．43(m，1H)，2．55-2．73(m，3H)，2．80(明显t，1H)，3．58(明显d，2H)，7．15-7．4(m，5H)(ⅴ)(3RS)-1-苄基-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷向14．84g(0．0726mol)(3RS)-1-苄基-3-氨乙基吡咯烷、72．6ml 1M NaOH溶液，76ml水和145ml THF的混合物中加入17．44g(0．08mol)二叔丁基二碳酸酯，混合物搅拌过夜。浓缩溶液并用乙酸乙酯萃取三次，合并有机层，用盐水洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发。所得粗产物用闪色谱以CH2Cl2／MeOH梯度冲洗(955，90／10)分离纯化得到14．69g(80％)产物。1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ1．25-1．65(m，12H；其中1．40(s，9H))，1．90-2．25(m，3H)，2．46(m，1H)，2．67(m，1H)，2．80(明显t，1H)，3．09(m，2H)，3．59(s，2H)，4．60(bs，NH)，7．15-7．35(m，5H)(ⅵ)(3RS)-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷于40ml乙醇(95％)中的0．6g Pearlman催化剂(Pd(OH)2)存在下，在0．28 MPa压力下使3．1g(0．01mol)(3RS)-1-苄基-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷氢化过夜。用硅藻土滤去催化剂，蒸去溶剂，1H-NMR数据表明反应没有完全。因此再加入于40 ml乙醇(95％)中的0．6g Pearlman催化剂，在0．28 MPa氢气氛下对混合物继续处理过夜。用硅藻土过滤，蒸去溶剂得到定量收率(2．18g)的产物。
MS m／z 214(M+)(ⅶ)(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷(H-(R，S)Hig(Z))将2．18g(0．0102mmol)(3RS)-3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)吡咯烷和2．81g(0．0125mol)N-苄氧基羰基-S-甲基异硫脲溶于30ml甲苯，加热至60～70℃保持8小时，然后在室温下搅拌一天。加入0．3M KHSO4溶液，水层用甲苯和乙酸乙酯混合物洗涤并静置2天，其间除去Boc基团。碱化后的酸性水相用CH2Cl2萃取四次，合并有机层，干燥(Na2SO4)，过滤和蒸发，制得2．0g(51％)标题化合物。1H-NMR(CDCl3，330 K，300 MHz)δ1．45-1．7(m，3H)，2．07(m，1H)，2．26(m，1H)，2．74(t，2H)，3．00( 明显t，1H)，3．33(明显q，1H)，3．45-3．80(m，2H)，5．12(s，2H)，6．72(bs，2 NH)，7．15-7．45(m，5H)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氨乙基环己烷(H-(R，S)Itp(Ts))(ⅰ)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-羧基环己烷用Journal of Org．Chem．，P．46，1917所述方法制备。
(ⅱ)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-羟甲基环己烷向9．9g(33 mmol)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-羧基环己烷于330ml无水THF的冷却浆液中(冰浴温度)中小心加入12．9g(345mmol)LiAlH4，在室温下搅拌反应过夜。根据Fieser&Fieser方法，例如以向混合物中依次加入12．9g水、38．7g3．75M NaOH、12．9g水、Na2SO4、CH2Cl2和硅藻土，然后进行过滤的方法对反应混合物进行后处理，蒸发溶剂后得到7．0g(75％)所需产物。
MS m／z 284(M++1)
(ⅲ)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-甲磺酰氧基甲基环己烷7．0g(24．7mmol)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-羟甲基环己烷于6．9ml(49．4mmol)三乙胺和125ml CH2Cl2的冷(冰浴温度)浆液中小心加入2．9ml MSCl(37．1mmol)。1小时15分钟后加入水，并将有机相分离出来，经干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发得到定量收率的标题化合物。
MS m／z 362(M++1)(ⅳ)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氰甲基环己烷将8．9g(24．7mmol)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-甲磺酰氧基甲基环己烷和1．3g(27．2mmol)NaCN溶于75 mlDMSO。在40℃搅拌60 hr后再加入0．31g(6 mmol)NaCN，再在65℃搅拌反应3小时。加入150ml水使结晶从溶液中沉淀出来，过滤分出结晶并干燥制得5．4g(75％)所需产物。
MS m／z 293(M++1)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氨乙基环己烷(H-(R，S)Itp(Ts))2．4g(8．2mmol)(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氰甲基环己烷于90 ml THF的冷却(冰浴温度)浆液中小心加入935mg LiAlH4。搅拌2小时后依次加入1g水、3g 3．75MNaOH、1g水、Na2SO4、硅藻土和CH2Cl2。混合物经过滤和真空除去溶剂，得到2．2g(90％)所需化合物。1H NMR(500MHz，MeOD)；δ1．52-1．71(m，3H)，1．88-1．96(m，1H)，2．37(s，3H)，2．64-2．73(m，2H)，3．2-3．4(m，2H，与溶剂信号部分重叠)，3．44-3．53(m，1H)，7．28(d，2H)，7．71(d，2H)。
(4S)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氨乙基环己烷(H-(S)Itp(Ts))由旋光纯2，4-二氨基丁酸出发，用与H-(R，S)Itp(Ts)所用相同的方式制备。1H NMR(300．13 MHz，CDCl3)；δ0．97-1．15(s宽，1H)，1．48-1．69(m，3H)，1．84-1．95(m，1H)，2．37(s，3H)，2．68-2．82(m，1H)，2．86-2．98(m，1H)，3．22-3．44(m，2H)，3．45-3．58(m，1H)，7．19(d，2H)，7．72(d，2H)13C-NMR(300．13 MHz，CDCl3)；δ胍碳 154．05。
H-Aze-OEt×HCl由H-Aze-OH(参看下文)开始，用与H-Pic-OEt x HCl所用相同的方式制备。
H-Aze-OMe×HCl根据Seebach D．等在Liebigs Ann．Chme．，p．687，1990中所描述的步骤制备。
H-Pab(Z)×HCl将溶于异丙醇的1 mol当量的5M HCl加到粗H-Pab(Z)的EtOH溶液(大约1g／10 ml)中，随即H-Pab(Z)x HCl就从溶液中沉淀出来。过滤得到的沉淀用冷EtOH洗涤二次，干燥得到几乎为定量收率的标题化合物。
H-Pic-OEt×HCl向4．0g(0．031mol)L-2-哌啶酸于100ml无水乙醇中的浆液小心地鼓泡通入HCl(气)直至得到透明溶液。溶液置于冰浴中冷却并在15分内滴入17 ml亚硫酰氯。移去冰浴并将混合物回流2．5hr。蒸去溶剂后制得定量收率的盐酸盐形式产物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．33(t，3H)，1．8-2．1(m，5H)，2．3-2．5(m，1H)，3．1-3．3(m，1H)，3．5-3．7(m，1H)，4．14(dd，1H)，4．44(q，2H)。
H-(R，S)betaPic-OMe×HCl2．0g(15．5mmol)3-哌啶甲酸于8 ml甲醇中的混合物置于冰浴中冷却，加入2．76g(23．2mmol)亚硫酰氯。混合物在室温下搅拌20小时，蒸去溶剂并将残余物溶于少量的甲醇，加入乙醚使H-(R，S)betaPic-OMe×HCl呈白色结晶沉淀，过滤得到晶体2．57g(92％)。
Boc-(R)Cgl-OH32．6g(0．13mol)Boc-(R)Pgl-OH溶于300ml甲醇并加入5 g Rh／Al2O3。溶液在5．2至2．8 MPa压力下氢化3天，过滤并蒸去溶剂后，NMR数据表明还有约25％标题化合物的甲酯存在。将粗产物溶于500ml THF和300ml水并加入20 gLiOH，混合物搅拌过夜并蒸去THF，剩余的水相用KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取三次，合并有机层，水洗、干燥(Na2SO4)和蒸发，得到28．3g(83％)所需产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．9-1．7(m，20H)，4．0-4．2(m，1H)，5．2(d，1H)。
Boc-(R)Cgl-OSu向溶于25 ml CH3CN的2．01g(7．81mmol)Boc-(R)Cgl-OH和1．83g(15．6mmol)HOSu和冰冷溶液中加入1．69g(8．2mmol)DCC，使反应自行升至室温，搅拌3天，滤去DCU沉淀并蒸去溶剂，残余物溶于EtOAc，有机相用H2O、KHSO4、NaHCO3、盐水洗涤并干燥(Na2SO4)，蒸去溶剂后得到定量收率的标题化合物。
Boc-(R)Cha-OSu将Boc-(R)Cha-OH(1当量)、HOSu(1．1当量)和DCC或CME-CDI(1．1当量)溶于乙腈(大约2．5ml／mmol酸)并在室温下搅拌过夜。滤去反应过程中形成的沉淀，蒸去溶剂并在真空下干燥产物。(反应如使用CME-CDI，则将蒸去CH3CN后的残余物溶于EtOAc，用水洗涤有机相，干燥)。蒸去溶剂后得到标题化合物。
1H-NMR(500 MHz，CDCl3，2种旋转异构体比例大约为1∶1)0．85-1．1(m，2H)，1．1-1．48(m，4H)，1．5-1．98(m，16H；其中1．55(bs，9H)，2．82(bs，4H)，4．72(bs，1H，主要旋转异构体)，4．85(bs，1H，次要)。
Boc-(R)Hoc-OH3．2g(11．46mmol)Boc-(R)Hop-OH(见上)溶于甲醇(75ml)并加入0．5g活性氧化铝载铑(Rh／Al2O3)，混合物在0．41 MPa氢气氛下搅拌18hr。用hyflo滤去催化剂并将溶剂蒸去后得到近于定量收率的产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．90(m，2H)，1．08-1．33(m，6H)，1．43(s，9H)，1．60-1．74(m，6H)，1．88(bs，1H)，4．27(bs，1H)。
Boc-(R)Hoc-OSu由Boc-(R)-Hoc-OH开始，制备过程与Boc-(R)Cha-OSu的制备过程相同。
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH按照J．Y．L Chung等在Journal of Organic Chemistry，No．1，p．270-275，1990中所描述的方法制备。
Boc-(R)Cgl-Aze-OH(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Aze-OMe向5℃、3．86g(15mmol)Boc-(R)Cgl-OH、2．27g(15mmol)H-Aze-OMe×HCl和2．75g(22．5mmol)DMAP于40ml CH3CN搅拌的混合物中加入3．16g(16．5mmol)EDC。反应混合物在室温下搅拌48 hr。蒸去溶剂并将残余物溶于150ml EtOAc和20ml H2O中，分离出的有机层用2×20 ml 0．5M KHSO4、2×10 ml NaHCO3(饱和)、1×10ml H2O、1×10ml盐水洗涤并干燥(MgSO4)。蒸去溶剂后得到4．91g(92％)标题化合物，不再精制即用于下步。1H NMR(500 MHz，CDCl30．1g／ml)主要旋转异构体，0．83-1．35(m，5H)，1．38(s，9H)，1．47-1．84(m，6H)，2．18-2．27(m，1H)，2．50-2．62(m，1H)，3．72(s，3H)，3．94-4．06(m，1H)，4．07-4．15(m，1H)，4．39-4．47(m，1H)，4．68(dd，J=9．1，J=5．1，1H)，5．09(d，J=9．2，1H)。由次要旋转异构体产生的可分辨峰。2．27-2．35(m，1H)，3．77(s，3H)，3．80-3．87(m，1H)，3．88-3．95(m，1H)，4．92(d，J=9．2，1H)，5．21(dd，J=9．1 ， J-5，1H)。
(ⅱ)Boc-(R)Cgl-Aze-OH采用所述用于Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法(参见下文)对Boc-(R)Cgl-Aze-OWe进行水解。用EtOH／丙酮／水(1／1／3．95)结晶产物。收率为80％。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．85-1．3(m，5H)， 1．40(s，9H)，1．5-1．9(m，6H)，1．95-2．2(m，2H)，3．92(m，1H)，4．09(m，1H)，4．35(m，1H)，4．95(m，1H)，5．16(bd，1H)。
Boc-(R)Cgl-Pic-OH(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pic-OMe向溶于甲苯(25ml)和DMF(5ml)的Boc-(R)Cgl-OH(2．086g，8．1mmol)和三乙胺(1．13ml，8．1mmol)溶液中加入新戊酰氯(1．0ml，8．1mmol)，然后在冰浴温度下再加入于DMF(20ml)中的H-Pic-OMe×HCl(1．46g，8．1mmol)和三乙胺(1．13ml，8．1mmol)混合物。反应混合物自行缓慢升至室温，24 hr后用水稀释并用甲苯萃取。用0．3M KHSO4、10％NaCO3和盐水洗涤后，真空除去溶剂制得2．52g(81％)无色油状产物，不再精制即使用。1H-NMR(500 MHz，CDCl3，二种旋转异构体比例为5∶1)δ 0．8-1．8(m，25H)，2．25(d，1H)，2．75(t，1H，次要旋转异构体)，3．3(t，1H)，3．7(s，3H)，3．85(d，1H)，4．3(t，1H，次要旋转异构体)，4．5-4．6(m，1H)，5．25(d，1H)，5．30(d，1H)。
(ⅱ)Boc-(R)Cgl-Pic-OH用水解Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法(见下文)用上述(ⅰ)的产物进行制备。用异丙醚和己烷结晶得到产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3，二种旋转异构体比例为5∶1)δ 0．8-1．8(m，25H)，2．3(d，1H)，2．8(t，1H，次要旋转异构体)，3．3(t，1 H)，3．9(d，1H)，4．4(t，1H，次要)，4．5-4．6(m，1H)，5．1(s，1H，次要旋转异构体)，5．3(d，1H)，5．40(d，1H)。
Boc-(R)Cgl-Pro-OH3．59g(31．24mmol)L-脯氨酸与20 ml水和1．18g(29．7mmol)氢氧化钠混合。向其中加入于10 ml DMF中的2．8g(7．8mmol)Boc-(R)Cgl-OSu。考虑到溶解能力，因而再加入30 ml DMF并将反应混合物搅拌3天。蒸去溶剂并加入水，水相用乙酸乙酯洗涤、用0．3M KHSO4溶液酸化，用乙酸乙酯萃取三次。有机相用水和盐水各洗涤一次，干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发得到2．3g(83％)产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．89-2．17(m，23H)，2．37(m，1H)，3．55(q，1H)，3．90(bs，1H)，4．28(t，1H)，4．52(bs，1H)，5．22(bs，1H(NH))。
Boc-(R)Cha-Aze-OH由Boc-(R)Cha-OH和H-Aze-OEt×HCl出发，用所述用于Boc-(R)-Cha-Pic-OH的方法(见下)制备。
Boc-(R)-Cha-Pro-OH将H-(S)-Pro-OH(680mmol)溶于0．87M NaOH(750ml)。在20 min内滴加Boc(R)-Cha-OSu(170mmol)的DMF(375ml)溶液，反应混合物在室温下搅拌20 hr。混合物酸化(2M KHSO4)并用乙酸乙酯萃取三次。有机层合并后用水洗涤三次，用盐水洗涤一次。用硫酸钠干燥，并蒸去溶剂，将得到的糖浆状油溶于乙醚，蒸发溶剂，真空干燥，得到近于定量收率的Boc-(R)Cha-Pro-OH白色粉末。1H-NMR(500 MHz，CDCl3，二个旋转异构体的混合物9∶1)δ0．8-1．05(m，2H)，1．05-1-55(m，15H；其中1．5(bs，9H))，1．55-1．8(m，5H)，1．8-2．15(m，3H)，2．47(m，1H)，3．48(m，1H)，3．89(m，1H)，4．55(m，2H)，5．06(m，1H)；由次要异构体产生的可分辨信号出现在2．27(m)，3．58(m)，4．33(m)，5．0(m)。
Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu
(ⅰ)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH由Boc-(Me)(R)Cha-OSu和H-Pro-OH出发，用前述用于Boc-(R)Cha-Pro-OH的方法进行制备。
(ⅱ)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu由Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH出发，用所述用于Boc-(R)Cha-OSu的方法进行制备。
Boc-(R)Cha-Pic-OH(ⅰa)Boc-(R)Cha-Pic-OEt将6．3g(0．023mol)Boc-(R)Cha-OH溶于150ml CH2Cl2。该溶液在冰浴中冷却，加入6．3g(0．047mol)W-羟基苯并三唑和11．2g(0．0265mol)CME-CDI。15 min后移去冰浴并将反应混合物在室温下搅拌4 hr。蒸发溶剂并将残余物溶于150ml DMF，在冰浴中冷却。加入4．1g(0．021mol)H-Pic-OEt×HCl并用N-甲基吗啉调pH值至约9。15 min后移去冰浴并将反应混合物搅拌三天。蒸发溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯，用稀KHSO4(水溶液)、NaHCO3(水溶液)和水洗涤。有机层经干燥(Na2SO4)和蒸发，得到7．7g(89％)Boc-(R)Cha-Pic-OEt，不再提纯即使用。1H-NMR(500 MHz，CDCl3，2个旋转异构体，3∶1比例)d 0．7-1．0(m，2H)，1．1-1．9(m，29H；其中1．28(t，3H))，1．45(bs，9H)，2．01(bd，1H，主要异构体)，2．31(bd，1H)，2．88(bt，1H，次要)，3．30(bt，1H，主要)，3．80(bd，1H，主要)，4．15-4．3(m，2H)，4．5-4．7(m，2H，次要)，4．77(bq，1H，主要)，4．90(bd，1H，次要)，5．28(bd，1H，主要)，5．33(bd，1H，主要)。
(ⅰb)．Boc-(R)Cha-Pic-OMe
10ml甲基和2ml DMF中加入875mg(3．22mmo1)Boc-(R)Cha-OH和450μl(3．23mmol)三乙胺的混合物，搅拌之并向其中加入400μl(3．23mmol)新戊酰氯。45min后在所得到的浆液中加入于5ml DMF中的596mg(3．32mmol)(S)-哌啶酸甲酯盐酸化物和463μl(3．32mmol)三乙胺混合物。2hr后再加入100μl(0．72mmol)三乙胺并继续搅拌18hr。反应混合物中加入水和甲苯，有机相用0．3M KHSO4、10％ Na2CO3和盐水洗涤。干燥(MgSO4)，在真空下除去溶剂，得到1．16g标题化合物。
(ⅱ)Boc-(R)Cha-Pic-OH将5．6g(0．014mol)Boc-(R)Cha-Pic-OEt与100ml THF、100ml水和7gLiOH混合，在室温下将混合物搅拌过夜。蒸去THF，水溶液用KHSO4(水溶液)酸化，用乙酸乙酯萃取三次。合并有机相，用水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发，得到4．9g(94％)Boc-(R)Cha-Pic-OH，不再提纯即使用。此化合物可用异丙醚／己烷结晶。
前面步骤(ⅰb)中生成的甲酯可用(ⅱ)中所述用于乙酯的方法进行水解。1H-NMR(500 MHz，CDCl3，2个旋转异构体，比例3．5∶1)δ0．8-1．1(m，2H)，1．1-2．1(m，27H；其中1．43(s，9H，主要旋转异构体)，1．46(s，9H，次要))，2．33(bd，1H)，2．80(bt，1H，次要)，3．33(bt，1H，主要)，3．85(bd，1H，主要)，4．57(bd，1H，次要)，4．68(m，1H，次要)，4．77(bq，1H，主要)，5．03(bs，1H，次要)，5．33(bd，1H，主要)，5．58(m，1H，主要)。
Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OH(ⅰ)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OMe向2．0g(7．3mmol)Boc-(R)Cha-OH和0．81ml(7．3mmol)4-N-甲基吗啉的20 ml乙腈溶液中加入0．9ml(7．3mmol)新戊酰氯，搅拌1hr 30min后再加入1．3g(7．3mmol)H-(R，S)betaPic-OMe×HCl和1．62ml(14．6mmol)4-N-甲基吗啉，反应混合物搅拌24 hr。蒸发溶剂并将残余物溶于甲基和一些乙醚中，用0．3MKHSO4和KHCO3溶液洗涤，用Na2SO4干燥，真空除去溶剂。用冲洗剂庚烷／乙酸乙酯(7／3)进行闪色谱处理得到2．4g(83％)所需产物。
(ⅱ)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPiC-OH室温下将2．35g(5．9mmol)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OMe溶于35mml THF中，加入于35 ml水中的2．1g LiOH。搅拌5hr后真空除去THF。水相用2M KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取，用Na2SO4干燥并蒸发，得到2．0g(89％)。
Boc-(R)Cha-Val-OH(ⅰ)Boc-(R)Cha-Val-OMe搅拌于50ml DMF中的6．75g(25mmol)Boc-(R)Cha-OH和3．5ml(25mmol)三乙胺混合物，在环境温度下向其中加入3．1ml(25mmol)新戊酰氯。3小时后加入于50ml DMF和3．5ml三乙胺中的4．16g(25mmol)盐酸缬氨酸甲酯，搅拌过夜后加入一些DMAP的结晶并将反应混合物加热至50℃保持5分钟。真空除去溶剂，残余物中加入乙醚和甲苯。用0．3M KHSO4和10％Na2CO3洗涤，干燥(MgSO4)，真空除去溶剂得到残余物，用冲洗剂甲基／乙酸乙酯进行闪色谱处理，最后得到6．99g(73％)标题化合物。
(ⅱ)Boc-(R)Cha-Val-OH将于75ml THF和75ml水中的8．73g(23mmol)Boc-(R)Cha-Val-OMe与5．6g(230mmol)氢氧化锂的混合物搅拌4小时。真空除去THF，残余溶液用水稀释，用乙醚萃取，用2M KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取，再干燥(MgSO4)和真空去除溶剂，得到8．15g(96％)标题化合物。
Boc-(R)Hoc-Aze-OH(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Aze-OEt室温下，将1．0g(3．5mmol)Boc-(R)Hoc-OH和0．95g(7．0mmol)HOBt溶于15ml CH2Cl2。溶液在冰浴中冷却，加入0．77g(4．0mmol)EDC。移去冰浴并使反应混合物在室温下搅拌3hr。蒸去溶剂并将残余物溶于20 ml DMF，加入0．58g(3．5mmol)H-(R)Aze-OH，用N-甲基吗啉调pH值至约9，反应混合物搅拌一天。反应混合物在水和甲苯间进行分配，分离有机相，0．3MKHSO4、稀KHCO3和盐水洗涤、用Na2SO4干燥，蒸发。用闪色谱(溶于CH2Cl2和庚烷的1％EtOH∶EtOAc)处理得到0．35g(25％)所需产物。
(ⅱ)Boc-(R)Hoc-Aze-OH室温下将0．65g(1．6mmol)Boc-(R)Hoc-Aze-OEt溶于10mlTHF，加入于10ml水中的0．59gLiOH。搅拌24小时后加入2M KHSO4并在真空下除去THF。水相用2M KHSO4酸化，用乙酸乙酯萃取，用Na2SO4干燥，蒸发。得到0．5g(85％)标题化合物。
Boc-(R)Hoc-Pro-OH从Boc-(R)Hoc-OSu开始，用所述用于Boc-(R)Cha-Pro-OH的方法进行制备。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．80-0．94(m，2H)，1．05-1．36(m，7H)，1．36-1．48(bs，9H)，1．48-1．78(m，7H)，1．98-2．14(m，2H)，2．34(m，1H)，3．48(m，1H)，3．85(m，1H)，4．43(m ， 1H)，4．52(bd，1H)，5．26(bd，1H)，次要旋转异构体信号δ 1．92，2．25，3．58，4．20和4．93。
Boc-(R)Hoc-Pic-OH(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Pic-OMe以Boc-(R)Hoc-OH和H-Pic-OMe×HCl作为起始物，用所述用于Boc-(R)Cha-Pic-OEt的方法(见上)进行制备。
(ⅱ)Boc-(R)Hoc-Pic-OH以Boc-(R)Hoc-Pic-OMe作为起始物，用所述用于Boc-(R)Cha-Pic-OH的方法(见上)进行制备。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．82-0．97(m，2H)，1．10-1．36(m，7H)，1．36-1．50(bs，9H)，1．50-1．82(m，11H)，2．35(bd，1H)3．28(bt，1H)，3．85(bd，1H)4，63(m，1H)，5．33(bs，1H)，5．44(bd，1H)，5．33(bs，1H)，5．44(bd，1H)，次要旋转异构体信号δ 1．88，2．80，4．25，4．55和4．97。
Boc-(R)Pro-Phe-OH(ⅰ)Boc-(R)Pro-Phe-ONe向2．0g(9．29mmol)Boc-(R)Pro-OH和0．94g(9．29mmol)三乙胺的70ml甲苯／DMF(5／2)溶液中加入1．12g(9．29mmol)新戊酰氯，在室温下搅拌反应30 min。反应物冷至0℃并加入于40mlDMF中的2．0g(9．29mmol)H-Phe-OMe和0．94g三乙胺混合物，在室温下搅拌过夜。反应混合物用甲苯稀释，有机相用3×50ml 0．3MKHSO4和1×50 ml水洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸除溶剂，得到定量收率的标题化合物，此化合物不再精制即用于下一步。
(ⅱ)Boc-(R)Pro-Phe-OH将4．0g(10．6mmol)Boc-(R)Pro-Phe-OMe和8．93g(21．3mmol)LiOH×H2O的混合物溶于140ml水／THF(1／1)，在室温下剧烈搅拌过夜。蒸去THF，水相用1M KHSO4酸化并用3×75ml EtOAc萃取。合并有机相，经水洗、干燥(Na2SO4)、过滤和蒸除溶剂，得到残余物，用异丙醚结晶纯化制得2．329g(60％)标题化合物的白色晶状固体。
Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH(ⅰ)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn将1．61g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-OH、1．65g H-Pro-OBn×HCl和0．75g HOBt的混合物溶于11ml DMF，在室温下向其中加入0．84ml NAM和2．92g CME-CDI，反应混合物搅拌3天。蒸去溶剂并将残余物溶于300ml EtOAc。有机相用2×100ml水、2×100ml1M KHSO4、3×100ml 1M NaOH和3×100ml水洗涤并干燥，蒸去溶剂，得到2．53g油状物，用冲洗剂CH2Cl2／MeOH(97／3)进行闪色谱纯化，得到2．11g(88％)标题化合物。
(ⅱ)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH将0．94g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OBn溶于70mlEtOH、加入0．42g 5％Pd／C催化剂氢化3．5小时。滤去催化剂并蒸除溶剂，制得定量收率的标题化合物白色结晶。
Boc-(R)Tic-Pro-OH根据P．D．Gesellchen和R．T．Shumarn在EP-0，479，489-A2中所述方法进行制备。
BnOOC-CH2-NH-O-CH2-Br向P-TsOH×H-Gly-OBn(5mmol)和三乙胺(5mmol)的10mlCH2Cl2溶液中加入溶于10ml CH2Cl2中的2-溴乙酸(5 mmol)和二环己基碳化二亚胺(5mmol)，混合物在室温下搅拌过夜并过滤。有机相用0．2M KHSO4、0．2M NaOH和盐水洗涤二次，干燥。经蒸发和闪色谱(CH2Cl2／MeOH，95／5)处理得到定量收率的所需产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ3．89(s，2H)，4．05-4．11(d，2H)，5．19(s，2H)，7．06(bs，1H)，7．3-7．4(m，5H)。
Boc-(R)Cgl-Ile-OH用所述用于Boc-(R)Cgl-Pro-OH的方法进行制备，其中的H-Pro-OH用H-Ile-OH代替。收率为91％。
Boc-(R)Phe-Phe-OH(ⅰ)Boc-(R)Phe-Phe-OMe将Boc-(R)Phe-OH(18．8mmol购自Bachem FeinchemicalienAG)、Phe-OMe(20．7mmol)和4-二甲基氨基吡啶(37．7mmol)溶于30ml乙腈。溶液冷至冰水温度并加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺(24．5mmol)盐酸化物。移去冷却浴，搅拌反应混合物再过夜。减压下除去溶剂，并将残余物溶于50ml乙酸乙酯。有机相用50ml 0．5M硫酸氢钾的季铵氯化物、1M碳酸氢钠和水依次萃取，蒸去溶剂得到7．5g Boc-(R)Phe-Phe-OMe(94％)，此化合物不再纯化即用于下一步。
(ⅱ)Boc-(R)Phe-Phe-OH将Boc-(R)Phe-Phe-OMe(16．4mmol)溶于40 ml四氢呋喃并快速加入溶于20ml水的氢氧化锂(32．8mmol)，反应混合物搅拌3．5hr后减压除去溶剂。将残余物溶于50ml乙酸乙酯并用50ml0．5M硫酸钾和50ml水依次萃取。减压除去溶剂后得到8．0g Boc-(R)Phe-Phe-OH(定量的)无定形固体。
1H NMR(200 MHz，d-CHCl3)；δ7．4-6．7(m，10H)，5．7-4．2(m，6H)，1．34(s，9H)。
HO-CH2-COOBn根据Lattes A．等在Bull．Soc．Chim．Franca．，Noll，pp．4018-23，1971中所述的方法制备。
苄基-2-(邻-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯(2-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn将1．66g(10mmol)苄基甘醇酸酯溶于25ml CH2Cl2和25 ml乙醚，混合物冷至0℃并加入2．8ml(10 mmol)三乙胺，温度保持0℃情况下，将2．44g(11mmol)邻-硝基苯磺酰氯在15 min内分小批加入。所得浆液在0℃下搅拌50 min，加入20 ml水和30 ml CH2Cl2。二相分离，有机相用20 ml 1M HCl和20 mlH2O洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤和真空蒸发后得到3．34g残余物，残余物用冲洗剂庚烷EtOAc(2∶1)进行闪色谱处理，得到1．18g(34％)标题化合物。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ4．92(s，2H)，5．17(s，2H)，7．83(m，5H)，7．76(m，3H)，8．16(dd，1H)。
苄基-2-(对-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯(4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn根据上述用于苄基-2-(邻-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯的方法进行制备。蒸发溶剂后所得的最后产物呈结晶状，纯度已足以供使用，无须再纯化。(64％产率)。1H-NMR(300MHz，CDCl3)δ4．79(s，2H)，5．13(s，2H)，7．2-7．4(m，5H)，8．10(d，2H)，8．30(d，2H)。
Tfo-CH2COOMe向4．05ml(50 mmol)甲基甘醇酸酯和4．04ml(50 mmol)吡啶于CH2Cl2的混合物(总计62．5ml)在0℃下，滴入溶于CH2Cl2的10．09ml(60mmol)三氟甲基磺酸酐，滴加时间在25分钟以内，然后在0℃下搅拌1hr。用0．3M KHSO4和饱和Na2CO3洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤和真空蒸发溶剂后得到9．94g(90％)标题化合物。
TfO-CH2COOEt以乙基甘醇酸酯作为起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制备。
TfO-CH2COOnBu以丁基甘醇酸酯作为起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制备。
TfO-CH2COOBn以HO-CH2COOBn作为起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制备。
TfO-CH2COOnHex(ⅰ)HO-CH2COOnHex向于12．8ml CH3CN中的215mg(2．82mmol)甘醇酸中加入719mg(3．39mmol)1-碘己烷和429mg(2．82mmol)DBU。搅拌过夜和回流4 hr后蒸去溶剂并加入乙酸乙酯和1M KHSO4，二相分离，有机层用盐水洗涤、干燥(MgSO4)、过滤和真空蒸发，得到333mg(74％)产物。
(ⅱ)TfO-CH2COOnHex以HO-CH2COOnHex作为起始物，按所述用于TfO-CH2COOMe的方法制备。
H-Mig(Z)(3-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(ⅰ)3-氨甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷按文献制备，参看A．G．Anderson，Jr．和R．Lok，J．Org．Chem．，37，3953，1972。
(ⅱ)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-二苯甲基氮杂环丁烷向溶于45ml THF的3．50g(13．9mmol)3-氨甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷中加入0．56g(13．9mmol)NaOH的45ml水溶液。将反应混合物冷至0℃，加入3．03g(13．9mmol)二叔丁基二碳酸酯。几分钟后移去冷却浴并将混合物在室温下搅拌过夜，蒸去THF，残余物用3×45ml乙醚萃取，合并有机层，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥、过滤。蒸发溶剂，得到4．6g(94％)标题化合物。
(ⅲ)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)氮杂环丁烷将3．4g(9．6mmol)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-二苯甲基氮杂环丁烷溶于170ml MeOH，加入0．30g Pd(OH)2后在5MPa压力下氢化过夜。滤去催化剂并蒸发溶剂。粗产物用闪色谱纯化，冲洗剂依次为MeOH／CH2Cl2(1／9)和MeOH(氨气饱和)／CH2Cl2(1／9)，得到1．2g(67％)标题化合物。
(ⅳ)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(Boc-Mig(Z))将0．9g(4．8mmol)3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)氨杂环丁烷和1．3g(6．3mmol)N-苄氧基羰基-O-甲基异脲在6．5ml甲苯中混合后加热至70℃反应72hr，然后在室温下放置72hr。反应产物经蒸发后用闪色谱处理，冲洗剂依次为EtOAc和MeOH(氨气饱和)／CH2Cl2(1／9)，得到0．67g(38％)标题化合物，为白色粉末。
(ⅴ)3-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(H-Mig(Z))将0．67g(1．85mmol)Boc-Mig(Z)溶于10 ml用HCl(g)饱和的EtOAc，并在室温下搅拌10分钟。滴加入10 ml KOH的饱和水溶液。二相分离，水相用3×8ml EtOAc萃取，合并有机层、用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，蒸发，得到0．43g(89％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ2．55-2．65(m，1H)，2．84(d，2H)，3．66(dd，2H)4．03(dd，2H)5．07(s，2H)，7．2-7．4(m，5H)。
MS m／z 263(M++1)3-氨乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(H-Dig(Z))(ⅰ)3-羧酸-1-二苯甲基氮杂环丁烷按文献制备，参见A．G．Anderson，Jr．和R．Lok，J．Org．Chem．，37，3953，1972。
(ⅱ)3-羟甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷将8．7g(32．5mmol)3-羧酸-1-二苯甲基氮杂环丁烷的80ml无水THF溶液在室温下缓慢加入到4．9g(130．2mmol)LiAlH4在30mlTHF的悬浮液中，反应混合物回流3．5hr。在冷却下，小心地加入NH2Cl水溶液，使过量氢化物试剂水解，将胶凝状混合物过滤，用THF洗涤滤饼多次。蒸发溶剂，得到7．1g(86％)标题化合物为淡黄色晶体。
(ⅲ)3-甲磺酰甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷向6．62g(26．1mmol)3-羟基甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷于50 ml无水吡啶中的溶液在0℃下加入4．5g(39．2mmol)甲基磺酰氯。反应混合物搅拌1 hr后在冰箱中静置过夜。将反应混合物倒入冰和水的混合物中。收集沉淀物，用水洗涤，真空干燥，得到7．75g(89．5％)标题化合物。
(ⅳ)3-氰基甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷向7．75g(23．4mmol)3-甲基磺酰甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷的50 ml DMF溶液中加入3．44g(70．0mmol)NaCN的10 ml水溶液。混合物加热至65℃反应20 hr后，冷却，并倒入冰水混合物中。收集沉淀物，用水洗涤，真空干燥，得到5．7g(93％)标题化合物。
(ⅴ)3-氨乙基-1-二苯甲基氮杂环丁烷在室温下将5．7g(21．7mmol)3-氰基甲基-1-二苯甲基氮杂环丁烷慢慢加到2．9g(76．0mmol)LiAlH4在80ml无水THF中的悬浮液中。反应混合物回流4hr。在冷却下小心加入NH4Cl水溶液，使过量氢化物试剂水解。过滤胶凝状混合物并将滤饼用THF洗涤多次。蒸去溶剂，将残余物溶于乙醚，用盐水洗涤、用Na2SO4干燥。蒸发溶剂，得到5．0g(87％)标题化合物。
(ⅵ)3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-二苯甲基氮杂环丁烷按用于3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-二苯甲基氮杂环丁烷的方法，由3-氨乙基-1-二苯甲基氮杂环丁烷制得标题化合物，产率为6．5g(95％)。
(ⅶ)3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)氮杂环丁烷按用于3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)氮杂环丁烷的方法，由3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-二苯甲基氮杂环丁烷制得标题化合物，产率为1．2g(70％)。
(ⅷ)3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(Boc-Dig(Z))
按用于3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷的方法，由3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)氨杂环丁烷制得标题化合物，产率为0．090g(34％)。
(ⅸ)3-氢乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷(H-Dig(Z))将0．589g(1．56mmol)Boc-Dig(Z)溶于10 ml用HCl(气)饱和的EtOAc中，并在室温下搅拌10 min。滴加入10 ml KOH的饱和水溶液。二相分离，水相用3×8 ml EtOAc萃取，合并有机层，用盐水洗涤，用Na2SO4干燥，蒸发，得到0．415g(96％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ1．60(dt，2H)，2．52-2.5．4(m，3H)，3．53(bs，2H)，4．0(bt，2H)，5．00(s，2H)，7．17-7．31(m，5H)。
工作实施例实施例1HOOC-CH2(R)Cgl-Aze-Pab(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)向搅拌的3．40g(10 mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-OH(见起始物的制备)和5．13g DMAP(42 mol)于120ml CH3CN中的混合物中加入3．18g H-Pab(Z)×HCl(见起始物的制备)。在室温下搅拌2小时后混合物冷却至-8．℃并加入2．01g(10．5mmol)EDC。令反应温度自行升至室温，继续搅拌47小时。蒸发溶剂并将残余物溶于200ml EtOAc，有机相用1×50ml水、1×50+2×25ml 0．5MKHSO4，2×25ml NaHCO3(饱和)和1×50ml水洗涤并干燥。蒸发溶剂得到5．21g(86％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-1．9(m，20H；其中1．30(s，9H))，2．35-2．6(m，2H)，3．74(bt，1H)，4．10(m，1H)，4．25-4．4(m，2H)，4．45-4．6(m，1H，旋转异构体)，4．75-5．0(m，1H，旋转异构体)，5．08(bd，2H)，5．15(s，2H)，7．15-7．35(m，5H)，7．41(d，2H)，7．77(d，2H)，8．21(m，1H)。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)向冷却的于195ml EtOAc中的18．8g HCl(气)溶液(冰浴温度)中同时加入4．69g(7．743mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)和40 ml EtOAc。使反应混合物自行升至室温并搅拌30 min。向所得透明溶液中加入140ml Et2O，随即产生沉淀物。反应体系在室温下静置1小时40分钟。过滤出沉淀物，用150ml Et2O快速冲洗、真空干燥。将沉淀物溶于50 ml水，并用15 ml 2M NaOH碱化，碱性水相用1×100+1×50 ml CH2Cl2萃取。合并有机相，用1×20 ml水和1×20ml盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发溶剂，得到3．44g(88％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-2．0(m，11H)，2．51(m，1H)，2．67(m，1H)，3．07(d，1H)，4．11(m，1H)，4．18(m，1H)，4．43(dd，1H)，4．53(dd，1H)，4．91(m，1H)，5．22(s，2H)，7．2-7．4(m，7H)，7．45(d，2H)，8．51(d，2H)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)混合1．13g(2．2mmol)H-(R)-Cgl-Aze-Pab(Z)、0．9g(2．6mmol)苄基-2-(邻-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯((2-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn)(见起始物的制备)、0．99g(5．6mmol)K2CO3和113ml CH3CN并在60℃油浴中加热3hr。真空蒸发溶剂。加入EtOAc并用水洗涤混合物，有机相用1M KHSO4萃取，水相用EtOAc洗涤。用1N NaOH碱化酸性水相至pH＞8，再用EtOAc萃取。有机相用水洗涤，干燥(Na2SO4)，过滤并真空蒸发，得到1．17g残余物，残余物用闪色谱处理二次，冲洗剂先为CH2Cl2／MeOH(NH3饱和)95／5，后为乙醚／MeOH(NH3饱和)9／1，得到0．525g(36％)标题化合物。
烷基化也用苄基-2-(对-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯((4-NO2)Ph-SO2-OCH2-COOBn)(见起始物的制备)采用上述方法进行，标题化合物的产率为52％。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．85-2．15(m，11H)，2．48(m，1H)，2．63(m，1H)，2．88(d，1H)，3．24(d，1H)，3．27(d，1H)，3．95(m，1H)，4．05(m，1H)，4．44(m，1H)，4．55(m，1H)，4．91(m，1H)，5．07(s，2H)，5．22(s，2H)，7．2-7．4(m，10H)，7．45(d，2H)，7．79(d，2H)，8．42(m，1H)。
(ⅳa)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2 HCl将20 mg(0．031mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)溶于5 ml甲醇中，加入几滴氯仿和5％Pd／C。反应混合物在常压下加氢1 hr。过滤，蒸发后产物冷冻脱水得到11 mg(72％)标题化合物。1H-NMR(500MHz，D2O)δ1．0-2．0(m，11H)，2．10(m，1H)，2．44(m，1H)，2．82(m，1H)，3．90(s，2H)，4．09(d，1H)，4．4-4．55(m，2H)，4．66(s，2H)，5．08(m，1H)，7．65(d，2H)，7．89(d，2H)。13C-NMR(75．5 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．3，167．9，169．9和172．4。
(ⅳb)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab
将BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)溶于EtOH(99％)，加入5％Pd／C后在常压下加氢5小时。用硅藻土滤去催化剂，蒸发溶剂，以97％产率得到标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD，二个旋转异构体的混合物)主要异构体δ1．00-1．12(m，1H)，1．13-1．34(m，4H)，1．55-1．70(m，3H)，1．73-1．85(m，2H)，1．94-2．02(bd，1H)，2．32-2．42(m，1H)，2．54-2．64(m，1H)，2．95-3．10(AB-系加d，3H)，4．18-4．25(bq，1H)，4．28-4．32(bq，1H)，4．43-4．60(AB-系，2H)，4．80-4．85(dd，1H)，7．48-7．54(d，2H)，7．66-7．71(d，2H)。次要异构体可分辨信号δ 0．95(m)，1．43(m)，2．24(m)，2．84(d)，3．96(m)，4．03(m)，7．57(bd)，7．78(bd)。13C-NMR(125 MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ 168．0，173．0，176．3和179．0。
实施例2HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2 HCl(ⅰ)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)按实施例1(ⅱ)中所述方法进行制备，所生成的盐酸盐用碱处理得到游离碱。
(ⅱ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)将0．19g(0．38mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)和70mg(0．43mmol)苄基丙烯酸酯溶于2 ml异丙醇。混合物放置6天。用冲洗剂CH2Cl2／THF=8／2进行闪色谱处理得到0．12g(48％)标题化合物。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-1．9(m，10H)，1．95(bd，1H)，2．4-2．6(m，4H)，2．7-2．8(m，3H；其中2．79(d，1H))，4．13(m，1H)，4．37(dd，1H)，4．60(dd，1H)，4．97(dd，1H)，5．09(dd，2H)，5．22(s，2H)，7．25-7．4(m，10H)，7．47(d，2H)，7．83(d，2H)，8．61(bt，1H)。
(ⅲ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2 HCl将0．10g(0．15mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)溶于10ml乙醇，加入5％Pd／C后在常压下加氢1hr。溶液经过滤、蒸发，粗产物在RPLC上用CH3CN／0．1M NH4oAc(1／4)纯化，所得产物经冷冻干燥、过量浓HCl处理，并再次冷冻干燥，得到31mg二盐酸盐。1H NMR(300 MHz，D2O)δ 0．8-2．1(m，11H)，2．38(m，1H)，2．7-2．9(m，3H)，3．2-3．4(m，2H)，3．98(d，1H)，4．35-4．55(m，2H)，4．60(s，2H)，5．04(dd，1H)，7．59(d，2H)，7．83(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．2，167．8，172．3和175．5。
实施例3HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)将2．3g(6．49mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(见起始物的制备)、2．38g(19．47mmol)DMAP和1．84g(6．49mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)在30ml乙腈中混合，混合物冷至-15℃并加入1．31g(6．81mmol)EDC。使混合物的自行升至室温并搅拌过夜。蒸发后，将残余物溶于乙酸乙酯和用0．3M KHSO4溶液中，酸性水相用乙酸乙酯萃取三次。有机相0．3M KHSO4溶液洗涤二次、用NaHCO3溶液洗涤二次，用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)、过滤蒸发粗产物，用洗脱剂乙酸乙酯进行硅胶闪色谱纯化得到1．77g(44％)产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．9-1．49(m，14H)，1．5-2．1(m，9H)，2．37(bs，1H)，3．53(q，1H)，3．94(bs，1H)，4．02(m，1H)，4．43(bs，2H)，4．65(d，1H)，5．09(bs，1H)，5．20(s，2H)，7．18-7．4(m，5H)，7．45(d，2H)，7．62(bs，1H)，7．81(m，2H)，(ⅱ)H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)将1．45g(2．34mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)溶于75ml盐酸饱和的乙酸乙酯中，混合物在室温下静置10mim。蒸去溶剂，得到1．3g产物的二盐酸盐。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．0-1．45(m， 5H)，1．58-2．2(m，9H)，2．3-2．5(m，1H)，3．75-3．90(m，2H)，4．25(d，2H)，4．5-4．66(m，3H)，5．49(s，2H)，7．45-7．7(m，7H)，7．87(d，2H)将二盐酸盐溶于0．1M NaOH溶液中并用乙酸乙酯萃取水相三次，以此得到胺。有机相用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)，过滤并蒸发，得到1．19g(97％)标题化合物。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)将0．340g(0．65mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)与0．215g(0．65mmol)BnOOC-CH2-OTf(见起始物的制备)、0．299g(2．17mmol)K2CO3在4 ml二氯甲烷中混合并回流半小时，然后将反应混合物在室温下搅拌过夜。反应混合物用CH2Cl2稀释，有机层用水和盐水各洗涤一次、干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发。粗产物在闪色谱上用梯度洗脱剂CH2Cl2／MeOH(97／3，然后95／5)纯化得到299mg二种产物的混合物(根据TLC判断。因此在闪色谱上用梯度洗脱剂乙酸乙酯／甲苯(9／1，93／7，95／5，100／0)进一步纯化所得混合物，得到首先从柱中流出的46mg(9％)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)和随后流出的133mg(31％)所需产物BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)δ0．9-1．3(m，5H)，1．4-2．1(m，9H)，2．3-2．4(m，1H)，3．05(d，1H)， 3．20-3．37(AB-系中心位于δ3．29，2H)，3．5-3．6(m，2H)，4．29-4．57(ABX-系中心位于d4．43，2H)，4．62(d，1H)，4．91(明显单峰，2H)，5．19(s，2H)，6．75(bs，NH)，7．1-7．5(m，12H)，8．7-8．8(m，2H+NH)，9．45(bs，NH)1H-NMR(300 MHz，CDCl3)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)δ0．68-0．9(m，2H)，1．0-1．3(m，3H)，1．43(bd，1H)，1．55-2．0(m，7H)，2．05(bd，1H)，2．3-2．4(m，1H)，3．15(d，1H)，3．25-3．48(m，2H)，3．55-3．79(AB-系中心位于d 3．67，4H)，4．38-4．58(ABX-系中心位于d 4．48，2H)，4．68(d，1H)，4．82-4．98(AB-系中心位于d4．91，4H)，5．19(s，2H)，6．66(bs，NH)，7．1-7．5(m，17H)，7．75(d，2H)，7．80(t，NH)，9．37(bs，NH)13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 164．7，168．1，171．5，172．3和172．6。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl将0．133g(0．2mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)与0．06g 5％Pd／C、1ml 1M HCl溶液和10ml乙醇混合。在氢气氛下处理1小时。经hyflo过滤、蒸发溶液并二次冷冻脱水得到93mg(产率为90％)的产物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．0-1．45(m，5H)，1．5-2．1(m，9H)，2．2-2．4(m，1H)，3．55-3．85(m，4H；其中3．79(s，
2H))，4．23(dt，1H)，4．33-4．57(m，3H)，7．44(d，2H)，7．69(d，2H)13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 166．9，167．2，169．1，174．5。
实施例4HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)BnooC-CH2-CH2(R)Cgl-Pro-Pab(Z)将0．4069(0．782mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)(见实施例3)溶于3ml乙醇并加入132μl(0．816mmol)苄基丙烯酸醋。将反应混合物在室温下搅拌3天，蒸发，所得粗产物在闪色谱上用梯度洗脱剂CH2Cl2∶MeOH 95／5和90／10纯化得到0．3999(75％)产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．8-1．0(m，1H)，1．0-1．3(m，4H)，1．35-2．2(m，9H)，2．3-2．6(m，4H)，2．65-2．78(m，1H)，3．05(d，1H)，3．4-3．6(m，2H)，4．25-4．52(ABX-系中心位于d 4．40，2H)，4．64 (dd，1H)，5．05(s，2H)，5．20(s，2H)，7．2-7．38(m，10H)，7．43(d，2H)，7．78(d，2H)13C～NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 164．7，167．9，171．3，172．7和175．4。
(ⅱ)HOOC-CHz-CHz-(R)Cgl-Pro-Pab×2HCl将0．261g(0．383mmol)BnooC-CH2-CH2(R)Cgl-Pro-Pab(Z)与0．075g 5％ Pd／C、1ml 1M HCl溶液和10ml乙醇混合，在常压下加氢2小时。经hyflo过滤、蒸发溶剂和二次冷冻脱水后得到0．1969(96％)产物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ 1．17-1．40(m，5H)，1．60-1．92(m，5H)，1．92-2．2(m．4H)，2．32-2．48(m．1H)，2．81(t．2H)，3．11-3．36(ABX2-系中心位于δ3．24，2H)，3．63-3．90(m，2H)，4．25(d，1H)，4．42-4．63(m，3H)，7．54(d，2H)，7．78(d，2H)13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．0，1 67．30，174．6和174．7。
实施例5(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab×2 HCl将46mg(0．056mmol)(BnOOC-CH2)-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)(见实施例3)与25mg 5％Pd／C，0．7ml 1M HCl溶液和7 ml乙醇混合，在常压下加氢1小时，经hyflo过滤催化剂、蒸发溶剂和二次冷冻脱水干燥后得到25mg(77％)最终产物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．0-1．4(m，5H)，1．45-2．2(m，9H)，2．25-2．45(m，1H)，3．53-3．84(m，2H)，3．84-4．22(AB-系中心位于δ 4．03，4H)，4．26(d，1H)，4．35-4．6(m，3H)，7．53(d，2H)，7．77(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．1，167．3，170．6和174．5。
实施例6H-(R)Cgl-Pic-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)搅拌0．875g(2．37mmol)Boc-(R)Cgl-Pic-OH(见起始物的制备)、1．22g(9．97mmol)DMAP和0．706g(2．49mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)于30ml乙腈和1 ml DMF混合物的溶液，在-18℃下加入0．478g(2．49mmol)EDC。使反应混合物在数小时内达到室温并继续搅拌48 hr。真空除去溶剂并将残余物溶于50 ml乙酸乙酯。溶液用15 ml水、3×15ml 0．3M KHSO4、2×15 ml Na2CO3溶液和水洗涤。除去溶剂，残余物用洗脱剂乙酸乙酯／庚烷(9∶1)进行闪色谱处理得到0．96g(64％)产物。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)将氯化氢气体鼓泡通入0．56g(0．88mmol)Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)的25ml乙酸乙酯溶液中，数分钟后溶液析出结晶。真空除去溶剂并加入50ml乙酸乙酯，用2×15 ml 2M氢氧化钠溶液洗涤，用25 ml乙酸乙酯萃取水相，合并萃取物，干燥(硫酸钠)，真空除去溶剂，得到0．448g(95％)所需产物。
(ⅲ)H-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl于5ml 95％乙醇和1ml水的98 mg(0．18mmol)H-Cgl-Pic-Pab(Z)溶液在5％Pd／C存在下，于氢气氛中搅拌4小时。过滤混合物，加入0．3ml 1M盐酸，真空除去乙醇并将残余物冷冻干燥，得到70mg(81％)所需产物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ1．00-1．56(m，7H)，1．56-1．94(m，9H)，2．32(bd，1H)，3．32-3．45(m，1H)，3．90(bd，1H)，4．35(d，1H)，4．50(s，2H)，5．10-5．20(m，1H)，7．55(d，2H)，7．76(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．2，170．5和173．4。
实施例7HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)于2．5ml乙醇中的350mg(0．66mmol)H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)(见实施例6)和233mg马来酸二苄酯的混合物在室温下保存4天，真空除去乙醇，将残余物用洗脱剂乙酸乙酯／庚烷(9∶1)进行闪色谱处理得到0．108mg产物。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab×2HCl将105mg(0．13mmol)BnOOC-CH-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)溶于5 ml 95％乙醇和1 ml水，在5％Pd／C存在下加氢5小时。加入0．3ml 1M盐酸并将混合物过滤，真空除去溶剂。将残余物溶于水并冷冻于燥，得到54mg(73％)所需产物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD，两非对映体5／4混合物)δ1．10-1．60(m，7H)，1．60-2．04(m，9H)，2．23-2．42(m，1H)，2．93-3．15(m 2H)，3．30-3．42(m，1H，被MeOD峰部分掩盖)，3．71-3．95(m，1H)，3．98-4．10(m，1H)，4．40-4．60(m，3H)，5．10-5．20(m，1H)，7．49-7．60(m，2H)，7．70-7．81(m，2H)13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．1，168．95，169．6和173．1。
MS m／z 516(M++1)实施例8H-(R)Cha-Aze-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z)搅拌0．72g(2．03mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)。1．04g(8．53mmol)DMAP和604mg(2．13mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)于20 ml乙腈的混合物，在-18℃下向其中加入409mg(2．13mmol)EDC。反应混合物达到室温过夜后在真空下除去溶剂。将残余物溶于40 ml乙酸乙酯并用10ml水、3×10 ml 0．3MKHSO4、2×10 ml Na2CO3-NaCl(水溶液)和10 ml盐水依次洗涤有机相。干燥(Na2SO4)、真空除去溶剂，残余物用冲洗剂乙酸乙酯／甲醇(9∶1)进行闪色谱处理，得到645mg(51％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)于25 ml乙酸乙酯中的640mg(1．03mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶液中鼓泡通入氯化氢气体。数分钟后经TLC分析表明反应已完全。用真空除去过量氯化氢，然后用乙酸乙酯将混合物稀释至50 ml。用2×15 ml Na2CO3(水溶液)洗涤混合物，水相用15 ml乙酸乙酯萃取，合并有机萃取物，水洗涤、干燥(Na2SO4)，真空除去溶剂，得到513mg(96％)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)。
(ⅲ)H-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl将76 mg(0．15mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于5ml95％乙醇和1 ml水中，加入5％Pd／C后在常压下加氢4小时。反应混合物经过滤去除催化剂，加入0．4ml 1M盐酸，真空蒸发溶剂，将残余物溶于2 ml水。冷冻干燥得到57 mg(85％)产物。1H-NMR(500 MHz，D2O，2个旋转异构体，3∶1混合物)δ 1．02-1．20(m，2H)，1．22-1．92(m，11H)，2．40-2．50(m，1H)，2．80-2．90(m，1H)，4．25(bt，1H)，4．40(dq，1H)，4．53(dq，1H)，4．65(s，2H)，5．05-5．10(m，1H)，7．65(d，2H)，7．88(d，2H)。次要异构体可分辨信号的化学位移δ0．57(m)，0．85(m)，2．95(m)，4．06(dq)，4．17(dq)，4．63(s)，5．33(m)，7．70(d)，7．93(d)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．2，170．4和172．8。
实施例9HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)向0．27g(0．52mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(见实施例8)和0．158g(1．14mmol)K2CO3于5．2ml乙腈的混合物中加入0．119g(0．52mmol)溴乙酸苄酯，油浴加热至60℃反应1 hr。去除溶剂，加入乙酸乙酯和水。分相，有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)和真空蒸发后得到0．344g残余物，残余物在闪色谱上用乙酸乙酯洗脱液处理，再用洗脱剂乙酸乙酯∶四氢呋喃∶NH3-饱和甲醇(60∶5∶2)处理得到0．163所需产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)；δ0．7-1．0(m，2H)。1．05-2．05(m，11H)，2．35-2．55(m，1H)，2．55-2．75(m，1H)，3．15-3．32(m，3H)，3．95-4．05(t，2H)，4．4 and 4．5(ABX-系，2H)，4．8-4．95(m，1H)，5．05(s，2H)，5．2(s，2H)，7．2-7．5(m，12H)，7．7-7．85(d，2H)，8．3-8．45(t，1H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 164．5，167．8，170．7，171．9和175．9。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl将0．163g(0．243mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于5．5ml乙醇(99．5％)和0．7ml盐酸(1N)，在0．17g 5％Pd／C存在下加氢4 hr。过滤去除催化剂、蒸发溶剂，溶于水中，并冷冻干燥制得107mg(85％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD，二种旋转异构体的混合物)主要异构体δ0．95-1．95(m，13H)，2．3-2．4(m，1H)，2．6-2．75(m，1H)，3．5-3．75(m，2H)，4．05-4．15(m，1H)，4．15-4．23(m，1H)， 4．36-4．43(m，1H)，4．43-4．5(m，1H)，4．58-4．65(m，1H)，4．83-4．88(m，1H)，7．5-7．6(m，2H)，7．73-7．82(m，2H)。次要异构体可分辨信号位于δ 2．2-2．3(m)，3．95-4．05(m)，5．1-5．17(m)，7．6-7．67(m)。13C-NMR(75 MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ 168．2，169．8，168．9和172．3。
实施例10HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)230mg(0．443mmol)H-(R)-Cha-Aze-Pab(Z)(见实施例8)和144mg(0．487mmol)马来酸二苄酯于1．5ml 95％乙醇的混合物在环境温度下搅拌5天。真空去除乙醇后，残余物用洗脱剂乙酸乙酯／甲醇(95／5)进行闪色谱处理，得到54 mg(15％)产物。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab将49 mg(0．06mmol)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于5 ml 95％乙醇和1 ml水，在5％Pd／C存在下加氢4．5hr。滤去催化剂，蒸发溶剂，将残余物溶于2ml水和0．2ml 1M盐酸，冷冻干燥得到32 mg(93％)产物。
在D2O中标题化合物1H-NMR谱出现由二个非对映体产生的二组严重重叠信号，谱中还出现由次要旋转异构体引起的另外一些可分辨共振信号，这些信号合计约15％。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．03-2．00(m，13H)，2．32-2．53(m，1H)，2．72-2．96(m，1H)，3．06-3．28(m，2H)，4．10-4．55(m，4H)，4．62(bs，2H)，5．00-5．10(m，1H)，7．55-7．68(m，2H)，7．80-7．94 (m，2H)由次要旋转异构体所产生的可分辨信号位于δ 0．65(m)，0．80(m)，4．00(m)，5．24(m)，5．35(m)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．2，169．0，171．0，172．3和174．1。
实施例11HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-Cha-Aze-Pab／a×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(Rors)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze- Pab(Z)／a2．0g(3．8491mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(见实施例8)和1．37g马来酸二苄酯于10ml 95％乙醇中的混合物在环境温度下搅拌4天。真空除去乙醇，将残余物用洗脱液乙酸乙酯／甲醇(98／2)进行闪色谱处理得到1．024g(32％)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)。用洗脱液CH3CN／0．1M NH4OAc(65／35)进行RPLC分离二种非对映体。首先从柱中流出的是标题化合物非对映体组分。真空除去乙腈后，水相用乙酸乙酯萃取三次。有机相用水洗一次、干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到0．352g标题化合物的纯立体异构体。
(ⅱ)HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／a×2HCl将350mg(0．43mmol)BnOOC-CH2-(Rors)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)／a(前面(ⅰ)的非对映体)溶于15 ml95％乙醇和3 ml水，在5％Pd／C存在下加氢4．5hr。滤去催化剂，真空蒸去溶剂，将残余物溶于5 ml水和1．0ml 1M盐酸，冷冻干燥得到214mg(87％)纯立体异构体产物。1H-NMR(300 MHz，MeOD，二种旋转异构体的混合物)δ 0．85-1．93(m，1 3H)，2．25-2．38(m，1H)，2．60-2．75(m，1H)，2．88(dd，2H)，3．92(t，1H)，4．15-4．25(m，2H)，4．30-4．43(m，1H)，4．56(AB-系，2H)，4．76-4．86(m，1H，被溶剂信号部分掩盖)，7．59(d，2H)，7．78(d，2H)。由次要旋转异构体产生的可分辨信号位于δ 0．70，2．95，3．82，4．00，5．08和7．83。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 166．9，168．8，171．7，172．3和173．8。
实施例12HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／b×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)／b按上述实施例11用于BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)的方法得到标题化合物。此非对映体在第一组分之后流出柱子，收率为0．537g。
(ⅱ)HOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／b×2HCl将530mg(0．65mmol)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)／b溶于15 ml 95％乙醇和3 ml水，在5％Pd／C存在下加氢5 hr。过滤除去催化剂，在真空下蒸发溶剂，将残余物溶于6ml水和1．0ml 1M盐酸，冷冻干燥后得到290mg(78％)产物。1H-NMR(300 MHz，MeOD，二种旋转异构体的混合物)δ 0．86-1．90(m，13H)，2．30-2．42(m，1H)，2．60-2．75(m，1H)，2．75-2．85(m，1H)，2．95-3．05(m，1H)，3．65-3．71(m，1H)，4．00-4．10(m，1H)，4．14-4．24(m，1H)，4．36-4．62(m，3H)，4．78-4．86(m，1H被溶剂信号部分掩盖)，7．57(d，2H)，7．75(d，2H)。由次要旋转异构体产生的可分辨信号位于δ 0．78，2．92，3．82，5．36和7．80。13C-NMR(75MHz D2O)脒碳和羰基碳δ166．8，169．0，172．0，172．4和175．2。
实施例13HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)182mg(0．35mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(见实施例8)和62．5mg(0．385mmol)丙烯酸苄酯于1．5ml 95％乙醇中的混合物在室温下搅拌4天。真空去除溶剂，残余物用洗脱液乙酸乙酯／甲醇(9∶1)进行闪色谱处理得到200mg(84％)标题化合物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl将195mg(0．29mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)溶于10ml 95％乙醇和2 ml水，在5％Pd／C存在下加氢4 hr。滤去催化剂，真空蒸发溶剂，将残余物溶于2 ml水和0．4m1 1M盐酸，冷冻干燥得到130mg(86％)产物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD)δ0．98-1．27(m，2H)，1．30-1．90(m，11H)，2．27-2．35(m，1H)，2．65-2．74(m，1H)，2．77(t，2H)，3．32(t，2H)，4．10(t，1H)，4．17-4．25(m，1H)，4．40-4．49(m，1H)，4．55(AB，2H)，4．83-4．90(m，1H)，7．58(d，2H)，7．77(d，2H)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．0，168．9，172．4和174．6。
实施例14HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)将0．212g(0．408mmol)H-(R)Cha-Aze-Pab(Z)(见实施例8)、0．124g(0．89mmol)K2CO3和0．128g(0．449mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br(见起始物的制备)于6 ml乙腈的混合物在50℃下搅拌2小时。蒸发溶剂后将残余物溶于水和乙酸乙酯。水层用乙酸乙酯萃取二次，合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发。产物在闪色谱上用梯度洗脱液乙酸乙酯／四氢呋喃(85／15、4／1、7／3)纯化，得到0．190g(64％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．75-2．1(m，13H)，2．43(m，1H)，2．56(d，1H)，2．79(m，1H)，3．0-3．15(m，2H；其中3．05(d，1H))，3．89-4．18(m，5H)，4．8-4．98(m，2H)，5．15(s，2H)，5．18(s，2H)，7．2-7．47(m，12H)，7．72(t，NH)，7．86(d，2H)，8．14(bs，NH)，8．31(dd，NH)，9．42(bs，NH)13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 164．5，168．7，169．22，169．83，171．7，175．5。
(ⅱ)HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab×2HCl0．19g(0．26mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)与0．075g 5％Pd／C、1．5ml 1N HCl溶液、3 ml水和17 ml乙醇混合后在常压下加氢1小时。过滤催化剂、蒸发溶剂，冷冻脱水干燥、得到144mg(97％)标题化合物。1H-NMR(D2O，300 MHz，二种旋转异构体4∶1)δ 0．88-1．88(m，13H)，2．25-2．42(m，1H)，2．63-2．89 (m，1H)，3．94(s，2H)，3．99(明显双峰，2H)，4．16(t，1H)，4．28(q，1H)，4．41(q，1H)，4．56(s，2H)，4．98(dd，1H)，7．53(d，2H)，7．77(d，2H)，由次要旋转异构体产生的可分辨信号位于δ 0．50(bq)，0．77(bq)，5．21(dd)，7．56(d)和7．81(d)。13C-NMR(D2O，75 MHz)羰碳和脒碳δ 166．8，166．9，168．6，172．3和173．4。由次要旋转异构体产生的可分辨信号位于δ166．6，169．6和172．0.
实施例15H-(R)Cha-Pro-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z)搅拌0．155ml(1．1mmol)三乙胺和405mg(1．1mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)于5 ml DMF中的混合物并加入0．135ml(1．1mmol)新戊酰氯。3hr后再加入于5ml DMF中的340mg(1．1mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)并继续搅拌过夜。用水稀释反应混合物，用乙酸乙酯／甲苯(1∶1)萃取，有机相经干燥(MgSO4)和真空去除溶剂，残余物用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱处理。得到309mg(49％)产物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于20 ml乙酸乙酯和1．246g(2 mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶液中在室温下鼓泡通入氯化氢气体直至饱和，30分钟后加入碳酸钠溶液(10％)并将分离出的有机相干燥(K2CO3)。干燥剂用二氯甲烷洗涤，溶剂由合并的有机相中蒸出，得到1．11g(100％)标题化合物。
(ⅲ)H-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl100mg(0．19mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于15 ml乙醇，在38mg 10％Pd／C存在下加氢1．5hr。反应混合物经蒸馏水稀释、滤去催化剂、真空去除乙醇和冷冻干燥后制得标题化合物的无色粉末，无色粉末溶于盐酸后冷冻干燥得到90 mg(100％)标题化合物二盐酸盐，由此肽最终转化为二盐酸盐。1H-NMR(300 MHz，D2O)；δ1．0-2．0(m，13H)，2．0-2．3(m，3H)，2．3-2．5(m，1H)，3．6-3．7(m，1H)，3．8-3．9(m，1H)，4．3-4．5(t，1H)，4．5-4．6(m，2H)，7．4-7．6(m，3H)，7．6-7．9(m，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．2，170．0，174．9。
实施例16HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2 HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)268mg(0．5mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)、90μl(0．55mmol)溴乙酸苄酯和181mg(1．3mmol)K2CO3于2ml乙腈的混合物在40℃下声波处理2．5hr。混合物用hyflo过滤，真空去除溶剂，得到残余物，残余物用洗脱剂乙酸乙酯进行色谱处理得到194mg(57％)标题化合物。
HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2 HCl194mg(0．28mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在77 mg 10％Pd／C存在下氢化3 hr。反应混合物用水稀释并过滤除去催化剂，经真空蒸发乙醇和冷冻干燥后得到白色残余物，加入盐酸并将生成溶液冷冻干燥得到115mg(68％)所需产物。1H-NMR(300 MHz，D2O)；δ1．0-1．2(m，2H)，1．2-1．5(m，3H)，1．5-2．0(m，8H)，2．0-2．3(m，3H)，2．3-2．5(m，1H)，3．6-3．8(m，1H)，3．8-4．0(m，3H)，4．4-4．7(m，4H)，7．5-7．7(d，2H)，7．7-7．9(d，2H)。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 167．1，168．2，169．3，174．6。
实施例17HOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(ⅰ)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)向0．8g(1．67mmol)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu(见起始物的制备)的3 ml DMF溶液中加入0．562g(1．85mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)的3 ml DMF溶液，用N-甲基吗啉将生成溶液的pH值调节至8-9，然后使其在室温下搅拌2天。溶液倒入水中，混合物用3×25 ml乙酸乙酯萃取，有机溶液用1M KHSO4溶液、10％NaHCO3溶液、水和盐水依次洗涤并干燥(Na2SO4)，蒸发溶剂得到0．65g(60％)标题化合物的黄白色粉未。
(ⅱ)Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于50 mlEtOH的0．60g(0．92mmol)Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶液在0℃下用HCl饱和，并将此溶液置于冰箱存放过夜。所得溶液蒸发至干，将残余物溶于Na2CO3溶液，用3×25ml乙酸乙酯萃取。萃取物盐水洗涤，蒸发得到0．4g(79％)化合物的白色膨松粉未。1H-NMR(CDCl3，300 MHz)δ0．8-1．0(m，2H)，1．1-1．4(m，5H)，1．4-1．55(m，1H)，1．6-1．9(m，10H)，1．9-2．05(m，2H)，2．05-2．2(m，2H)，2，19(s，3H)，2．4-2．5(m，1H)，3．28(dd，1H)，3．41(q，1H)，3．62(m，1H)，4．42(m，2H)，4．61(d，1H)，5．2(s，2H)，7．2-7．45(m，7H)，7．72(t，1H)，7．79(d，2H)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)0．40g(0．73mmol)Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)、0．17gBnOOC-CH2Br和0．20g(2当量)K2CO3(研细的)于15 ml CH2CN的混合物在室温下搅拌过夜。蒸发所得混合物，加入乙酸乙酯，混合物用和盐水洗涤，干燥(Na2SO4)蒸发粗产物(0．69g)，用闪色谱(CH2Cl2／MeOH 10／1)处理得到0．39g(77％)浅黄色高粘性油状物。
HOOC-CH2(Me)(R)Cha-Pro-Pab向0．39g(0．56mmol)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)于30ml EtOH的溶液中加入0．1g Pd／C(10％)，在常压下氢化。过滤和蒸发溶液，残余糖浆状物冷冻干燥得到0．25g(95％)白色结晶粉未状化合物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ0．85-1．1(m，2H)，1．1-1．4(m，6H)，1．5-1．85(m，9H)，1．9-2．05(m，3H)，2．05-2．15(m，1H)，2．15-2．3(m，1H)，2．57(s，3H)，3．32(d，1H)，3．55-3．75(m，2H)，3．95-4．1(m，2H)，4．35-4．5(m，3H)，7．55(d，2H)，7．72(d，2H)。13C-NMR(75MHz，CD3OD)。脒碳和羰基碳δ 168．4，171．5，174．7，175．1。
实施例18HOOC-CH2-CH2(R)Cha-Pro-Pab×2 HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)149mg(0．28mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)和66mg(0．4mmol)丙烯酸苄酯于1．5ml乙醇的混合物在室温下静置36hr。真空去除溶剂并将残余物用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱处理，制得124mg(64％)所需产物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2(R)Cha-Pro-Pab×2 HCl将124mg(0．18mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在55mg 10％Pd／C存在下氢化1hr。过滤除去催化剂，真空去除溶剂，将残余物溶于盐酸，冷冻干燥溶液得到87mg(79％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．0-2．0(m，13H)，2．0-2．2(m，3H)，2．2-2．4(m，1H)，2．7-2．8(t，2H)，3．2-3．3(m，1H)，3．3-3．4(m，1H)，3．5-3．7(m，1H)，3．7-3．9(m，1H)，4．3-4．6(m，4H)，7．4-7．6(m，2H)，7．7．6-7．8(m，2H)。13C-NMR(75MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．0，168．3和174．6(二碳有重叠)。
实施例19HOOC-CH2-CH2(Me)(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)向274mg(0．5mmol)Me-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例17)于5ml EtOH(99％)的溶液中加入97．3mg(0．6mmol)丙烯酸苄酯，在室温下搅拌反应72 hr后再加入16．2mg(0．1mmol)丙烯酸苄酯并继续搅拌24 hr。蒸去溶剂，残余物用闪色谱(CH2Cl2／MeOH(NH3饱和)，95／5)处理，得到198mg(56％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-2．0(若干m，16H)，2．14(s，3H)，2．24-2．33(m，2H)，2．38-2．46(m，1H)，2．67(t，2H)，3．32-3．40(m，2H)，3．71(m，1H)，4．36-4．44(m，2H)，4．58(m，1H)，5．03(近似s，2H)，5．20(s，2H)，7．25-7．37(m，10H)，7．43(d，2H)，7．64(t，1H(NH))，7．81(d，2H)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．7，167．9，171．7，172．3和172．6(ⅱ)HOOC-CH2-CH2(Me)(R)Cha-Pro-Pab×2 HCl向198mg(0．27mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于10 ml EtOH和1ml 1M HCl的溶液中加入60mg 5％Pd／C(含50％重量的水)并将将混合物在常压下氢化4 hr。滤去催化剂并蒸去溶剂。将残余油状物溶于水中，冷冻干燥得到定量收率的标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)δ1．08-1．2(m，2H)，1．2-1．42(m，4H)，1．68-1．91(m，5H)，1．93-2．08(m，2H)，2．09-2．26(m，3H)，2．49(m，1H)，2．95(m，2H)，3．03(s，3H)，3．60(近似bs，2H)，3．82(m，1H)，3．98(m，1H)，4．53(m，1H)，4．61(bs，2H)，4．64(m，1H)，7．63(d，2H)，7．97(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．2，167．8和174．5。二峰有可能重叠。
实施例20HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro -Pab／a×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)0．50g(0．94mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)和0．28g(0．94mmol)马来酸二苄酯于20ml EtOH的混合物在室温下保存5天。蒸发溶剂，用洗脱剂CH2Cl2／MeOH进行闪色谱处理，得到0．15g(19％)非对映体的混合物。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．7-2．1(m，17H)，2．3-2．4(m，1H)，2．5-2．8(m，2H)，3．2-3．7(m，4H)，4．46(d，1H)，4．65(bd，1H)，4．81(d，1H)，4．9-5．1(m，3H)，5．20(s，2H)，7．1-7．4(m，15H)，7．4-7．5(m，2H)，7．6-7．8(m，3H)。
(ⅱ)HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab／a×2HCl溶于5 ml乙醇的0．15g(0．18mmol)BnOOC-CH2-(R，S)CH，(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)混合物在5％Pd／C和常存在下压条件下氢化1hr制得HOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab。两种非对映体用洗脱剂(CH3CN／0．1M NH4OAc15／85)进行RPLC处理分离，然后用HCl冷冻干燥。本非对映体首先从柱中洗出，收率为19mg(18％)。1H-NMR(500 MHz，D2O，二种旋转异构体的混合物)主要异构体δ1．0-2．0(m，15H)，2．15(m，2H)，2．44(m，1H)，3．00(bd，1H)，3．05(bd，1 H)，3．69(m，1H)，3．84 (m，1H)，3．97(bs，1H)，4．5-4．7(m，3H)，7．62(d，2H)，7．87(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．2，168．3，173．8，174．6和178．2。
实施例21HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab／b×2HCl
按实施例20用于HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab的方法得到标题化合物。本非对映体在第一个非对映体之后流出，产率19mg(18％)。1H-NMR(500 MHz，D2O，二种旋转异构体的混合物)主要异构体δ1．0-2．0(m，14H)，2．15-2．25(m，3H)，2．44(m，1H)，3．11(bd，1H)，3．19(bd，1H)，3．71(m，1H)，3．92(m，1H)，4．03(bs，1H)，4．5-4．7(m，3H)，7．58(d，2H)，7．84(d，2H)。由次要异构体产生的可分辨信号位于δ 7．66(d)和7．91(d)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．3，168．5和174．7。二碳有可能重叠。
实施例22HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)在6 ml乙腈中混合0．246g(0．460mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)、0．140g(1．01mmol)K2CO3和0．145g(0．506mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-Br(见起始物的制备，混合物在50℃下搅拌2 hr 30分钟。蒸发溶剂并将残余物在水和乙酸乙酯间分配后。分离各相，水层再用乙酸乙酯萃取一次，合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到0．350g油状物。粗产物在闪色谱上用梯度洗脱剂CH2Cl2／1MeOH 97／3，95／5，92．5／7．5纯化得到0．227g(67％)标题化合物。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)δ25．0，26．0，26．2，26．4，26．7，32．4，34．2，34．4，40．8，40．9，42．9，46．7，50．5，58．4，60．2，67．0，67．2，127．5，127．8，128．2，128．3，128．4，128．5，128．6，128．6，134．1，135．2，137．0，142．6，164．7，168．9，169．3，170．4，172．2，175．0(ⅱ)HOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×2HCl0．089g(0．12mmol)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)与30mg 5％Pd／C混合后溶于10ml乙酸。混合物在常压下氢化1．5小时，经hyflo过滤催化剂，用1 ml 1N盐酸冷冻干燥得到0．058g(82％)所需产物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ0．9-2．2(m，16H)，2．25-2．47(m，1H)，3．55-3．7(m，1H)，3．7-4．1(m，5H)，4．42(t，1H)，4．48-4．6(m，3H)，7．51(d，2H)，7．77(d，2H)13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166．8，167．1，168．2，173．6和174．6实施例23EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc(ⅰ)EtOOC-CH=CH-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)在20℃条件下用K2CO3(141mg，1．02mmol)和BrCH2CH=CHCOOEt(108mg，0．56mmol)的CH2CN(10ml)溶液对H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)(275mg，0．51mmol)处理20 hr。蒸发溶剂，将残余物溶于EtOAc(5 ml)／H2O(2 ml)，分离有机层，干燥(Na2SO4)并浓缩，得到397mg油状物，油状物用洗脱剂EtOAc／庚烷(1／4)进行闪色谱纯化，得到252mg(77％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-1．05(m，2H)，1．1-1．45(m，3H)，1．3(t，3H)，1．5-1．9(m，8H)，1．95-2．05(m，1H)，2．1-2．15(m，1H)，2．45-2．55(m，1H)，3．0 and 3．15(two d，2H)，3．35-3．45(m，2H)，3．55-3．65(m，1H)，4．15(q，2H)，4．3(d，1H)，4．6-4．7(m，2H)，5．2(s，2H)，5．85
(d，1H)，6．75(dt，1H)，5．3-5．4(m，4H)，7．45(d，2H)，7．85(d，2H)。
13C-NMR(75．0 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ165．7，171．2和175．7(二峰有可能重叠)。
(ⅱ)EtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc将EtOOCCH=CHCH2-(R)Cha-Por-Pab(Z)(250mg，0．38mmol)溶于乙醇并在5％Pd／C存在下氢化约2 hr。过滤除去催化剂、真空蒸发溶剂，用洗脱剂(CH3CN／0．1M NH4OAc)进行RPLC纯化，得到70 mg(36％)所需产物。1H NMR(500 MHz，CD3OD)δ0．9-1．05(m，2H)，1．15-1．55(m，5H)，1．25(t，3H)，1．6-1．85(m，7H)，1．95-2．6(m，8H)，3．55-3．65(m，2H)，3．8(m，1H)，4．1(q，2H)，4．45(mand d，2H)，4．55(d，1H)，7．55和7．75(two d，4H)。13C-NMR(75．0 MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168．3，173．2，174．6和174．9。
实施例24Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab×HCl(ⅰ)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)向156mg(0．29mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)和59mg(0．58mmol)三乙胺于4 ml二氯甲烷的溶液中在冰浴温度加入64 mg(0．32mmol)4-氯磺酰基-苯甲酸。使混合物慢慢升至室温，24 hr后用水洗涤并干燥(Na2SO4)，真空除去溶剂，残余物在闪色谱上先用乙酸乙酯／甲醇(9∶1)后用二氯甲烷／甲醇(3∶1)作洗脱液纯化，得到82 mg(39％)产物。
(ⅱ)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab×HCl
于EtOH中在5％Pd／C存在下将80 mg(0．11mmol)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)氢化，滤去催化剂，蒸去溶剂。粗产物用洗脱剂(CH2CN／0．1M NH4OAc 1／4)进行RPLC纯化，用HCl冷冻干燥将其转化为盐酸盐，得到21 mg(29％)产物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD，二种旋转异构体的混合物)δ0．45-1．82(m，13H)，1．90-2．30(m，4H)，2．95-4．16(若干m，总计3H)，4．35-4．68(m，3H)，7．54(d，2H)，7．74(d，1H)，7．80(d，1H)，7．90-8．00(m，2H)，8．05-8．22(m，2H)13C-NMR(75 MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168．4，173．4，173．9和174．2。MS m／z 584(M++1)实施例25H-(R)Cha-Pic-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)在200ml DMF中将7．11g(18．6mmol)Boc-(R)Cha-Pic-OH(见起始物的制备)、9．07g(74．2mmol)DMAP和5．26g(18．6mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)混合，在-15℃下向其中加入3．57g(18．6mmol)EDC，温度升至20℃后过夜。在真空下除去溶剂并加入甲苯和水；有机相用水、1M KHSO4、10％Na2CO3和盐水洗涤，干燥(MgSO4)、真空除去溶剂，得到13．63g残余物，残余物在硅胶闪色谱上用乙酸乙酯／甲苯(2∶1)冲洗，得到9．5g(79％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．7-1．0(m，2H)，1．0-2．2(m，25H)，2．3-2．5(m，1H)，2．9-3．1(m，1H)，3．8(d，1H)，4．3(dd，1H)，4．4-4．6(m，2H)，5．1(s，2H)，5．1-5．3(m，2H)，7．2-7．3(m，5H)，7．35(d，2H)，7．4-7．5(m，1H)，7．75(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ156．8，164．6，168．2，170．0和173．4。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)9．5g(14．7mmol)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)于100ml乙酸乙酯的溶液在室温下鼓泡通入氯化氢气体，直至饱和。10分钟后加入Na2CO3溶液(10％)并分出有机相。有机相经干燥(K2CO3)和真空去除溶剂，得到定量收率的标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD)δ0．85-1．05(m，2H)，1．15-1．90(m，16H)，2．25-2．35(m，1H)，3．20-3．30(m，1H)，3．80-3．90(d，1H)，3．90-4．0(m，1H)，4．4-4．5(two d，2H)，4．7(brs，5H)5．15(s，2H)，5．20(m，1H)，7．25-7．45(m，7H)，7．85(d，2H)。
(ⅲ)H-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl55 mg(0．1mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于5 ml乙醇和0．45ml 1M盐酸的混合物中，在33 mg 10％Pd／C存在下氢化1．5hr。过滤除去催化剂并真空蒸去溶剂，残余物用洗脱剂0．1MNH4OAC／CH3CN进行RPLC处理。将提纯后的肽溶于盐酸后冷冻干燥转化为二盐酸盐形式。收率为17mg(35％)。1H-NMR(300 MHz，D2O，二种旋转异构体，3∶1混合物)δ 1．0-2．0(m，18H)，2．33(d，1H)，3．4-3．5(m，1H)，3．8-3．9(m，1H)，4．4-4．8(m，3H)，5．15．5．25(m，1H)，7．5-7．7(m，2H)，7．8-8．0(m，2H)。由次要异构体产物的可分辨信号位于δ0．5-0．7(m)和3．0-3．1(M)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．3，171．6和173．6 。由次要异构体产生的可分辨信号位于δ 170．6和172．4。
实施例 26HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2 HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)742mg(1．35mmol)H-(R)Cha-Pi c-Pab(Z)(见实施例25)、230ml(1．45mmol)溴乙酸苄酯和558mg(4 mmol)K2CO3于4 ml乙腈的混合物在40℃下用声波处理40分钟。除去溶剂，残余物用闪色谱处理得到720mg(77％)所需产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)；δ0．8-1．0(m，2H)，1．1-1．9(m，16H)，2．1-2．4(brs，1 or 2H)，2．4(d，1H)，3．0(m，1H)，3．25(d，1H)，3．45(d，1H)，3．55-3．65(m，1H)，3．7(m，1H)，4．35(dd，1H)，4．55(dd，1H)，4．80(two d，2H)，5．2(s，2H)，5．3(m，1H)，7．2-7．4(m，12H)，7．8(d，2H)。13C-NMR(125 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．5，167．9，170．5，173．4和175．5。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2 HCl将509mg(0．73mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于25 ml乙醇，在259mg 10％Pd／C存在下氢化4 hr。过滤除去催化剂，真空蒸去溶剂，将所得残余物溶于蒸馏水。加入盐酸，冷冻干燥后得到281mg(79％)标题化合物。1H-NMR(500MHz，D2O，4∶1旋转异构体的混合物)主要异构体δ1．0-2．0(m，18H)，2．25-2．40(m，1H)，3．4-3．5(m，1H)，3．8-3．95(m，3H)，4．55-4．65(two d，2H)，5．15(m，1H)，7．55-7．75(m，2H)，7．8-8．0(m，2H)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．3，169．9，170．3和173．5。由次要异构体产生的可分辨信号位于δ166．9，169．2和172．0。
实施例27HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／a×2 HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)592mg(1．1mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)和332mg(1．1mmol)马来酸二苄酯于1 ml乙醇的混合物在室温下保存1星期，真空除去溶剂并将所得的残余物用洗脱剂甲醇／二氯甲烷进行色谱处理，得到275mg(30％)非对映的混合物。
(ⅱ)HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／a×2HCl将275mg BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于20ml 95％乙醇，在75mg 10％Pd／C存在下氢化18小时。混合物经hyflo过滤除去催化剂，真空蒸去溶剂。加入水，然后冷冻干燥得到166mg HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab。二种非对映体用洗脱剂(CH3CN／0．1M NH4OAc 1／4)进行RPLC分离，再由HCl冷冻干燥。标题非对映体在柱中首先洗出，收率为9 mg。1H-NMR(300 MHz，D2O，旋转异构体的混合物)δ1．0-2．0(m，18H)，2．25-2．4(m，1H)，3．0-3．2(m，2H)，3．4(t，1H)，3．8(d，1H)，4．05(t，1H)，4．5-4．7(m，3H)，5．2(s，1H)，7．55(d，2H)，7v9(d，2H)。由次要旋转异构体产生的可分辨信号位于δ4．0(t)和7．7(d)。
实施例28HOOC-CH2-(Rors)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／b×2HCl按实施例27所述用于HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab方法得到标题化合物。本非对映体在第一个非对映体之后流出。1H-NMR(500 MHz，D2O，旋转异构体的混合物)δ1．0-2．0(m，18H)，2．25-2．4(m，1H)，3．0-3．2(m，2H)，3．5(t，1H)，3．85(d，1H)，4．15(s，1H)，4．5-4．7(m，3H)，5．15(s，1H)，7．55(d，2H)，7．8(d，2H)。由次要旋转异构体产生的可分辨信号位于δ4．35(s)，7．65(d)和7．9(d)。
实施例29HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2 HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)851mg(1．55mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)和269(1．71mmol)丙烯酸苄酯于5 ml乙醇中的混合物在室温下保存40 hr 。真空去除溶剂，将残余物用洗脱剂二氯甲烷／甲醇进行闪色谱处理，得到812mg(74％)产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-1．0(m，2H)，1．1-1．9(m，16H)，2．3-2．5(m，3H)，2．6-2．8(m，2H)，3．0(m，1H)，3．5(m，1H)，3．6-3．7(m，1H)，4．3(dd，1H)，4．6(dd，1H)，4．95-5．05(two d，2H)，5．2(s，2H)，5．3(m，1H)，6．5-6．9(brs，1H)，7．0-7．1(m，1H)，7．2-7．5(m，12H)，7．75-7．85(d，2H)，9．3-9．7(brs，1H)。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2 HCl将780mg(1．1mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于25 ml乙醇，在306mg 15％Pd／C存在下氢化4 hr。过滤除去催化剂，真空去除溶剂，将残余物溶于盐酸并将所得溶液冷冻干燥，得到481mg(78％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)δ0．95-1．1(m，2H)，1．15-1．9(m，16H)，2．2-2．3(m，1H)，2．7-2．8(t，2H)，3．2-3．3(m，3H)，3．4-3．5(m，1H)，3．75-3．85(m，1H)，4．4-4．6(m，3H)，5．15(m，1H)，7．5-7．6(m，2H)，7．8-7．9(m，2H)，8．6-8．7(m，1H).13C-NMR(125 MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ170．6，175．9，179．5和183．5。
实施例30HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab×HOAc(ⅰ)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)向0．42g(0．77mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)和0．21g(1．5mmol)K2CO3于10 ml CH3CN的混合物中在室温下加入0．12g乙基草酰氯，2小时后再加入0．07g(0．5mmol)乙基草酰氯。反应混合物在室温下搅拌过夜。真空除去溶剂，将残余物溶于CH2Cl2，并用水洗涤。以蒸发和闪色谱(先甲苯∶乙酸乙酯(1∶2)，后CH2Cl2∶甲醇)处理得到0．21g(42％)产物。
(ⅱ)HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)将0．21g(0．32mmol)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于3 mlTHF并加入溶于3 ml水的0．17g(4．2mmol)LiOH。混合物在室温下搅拌过夜，然后倒入乙酸乙酯／水中。分离二相，有机相用KHCO3溶液萃取。水相用0．5M HCl(pH 1)酸化并用CH2Cl2萃取，用Na2SO4干燥，蒸发，得到80mg产物。
(ⅲ)HOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab×HOAcHOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)在乙醇中在5％Pd／C存在下氢化。滤出催化剂，蒸发溶剂。残余物用RPLC纯化得到标题化合物。1H NMR(500 MHz，DMSO-d6)；δ0．8-1．0(m，2H)，1．1-1．75(m，15H)，1．86-1．94(m，1H)，2．13-2．2(m，1H)，3．75-3．81(m，1H)，4．32，4．44(AB，2H)，4．71-4．77(m，1H)，4．98-5．02(m，1H)，7．41(d，2H)，7．75(d，2H)，8．1-8．15(m，1H)，8．22-8．27(m，1H)，9．32(宽s)，9．90(宽s)。一个质子的信号(3．25)被溶剂信号部分掩盖。MS m／z 486(M++1)实施例31HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(ⅰ)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)将0．39g(0．72mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例2 5)和0．9g(0．8mmol)丙二酸单甲酯溶于40 ml CH2Cl2并加入0．16g(0．8mmol)DCC。溶液在室温下搅拌过夜。过滤除去沉淀出的DCU，滤液用0．3M KHSO4和KHCO3溶液洗涤、干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，用洗脱剂甲苯／乙酸乙酯(1／3)进行闪色谱处理，得到0．27g(58％)所需产物。
(ⅱ)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab90mg(0．14mmol)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于10ml乙醇，在5％Pd／C存在下氢化5小时。过滤除去催化剂，蒸发溶剂，得到50mg(70％)标题化合物。1H NMR(300 MHz，CD3OD)δ0．85-1．1(m，2H)，1．1-1．9(m，16H)，2．35-2．45(m，1H)，3．2-3．4(m，3H)，3．7(s，3H)，3．95-4．05(m，1H)，4．4-4．55(m，3H)，5．15-5．25(m，1H)，7．4-7．55(m，2H)，7．7-7．85(m，2H)。13C NMR(75MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ 168．2，168．7，170．0，172．4和174．6。MS m／z 514(M++1)(ⅲ)HOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab向0．14g(0．27mmol)MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab于5ml甲醇的溶液中，在室温下加入2 ml 0．5MNaOH，搅拌5小时后，加入水并在真空下去除甲醇。冷冻干燥水相。用无水乙醇将可溶性物质从非溶性无机盐中萃取出来，蒸去乙醇后残余固体悬浮于水中，过滤分离得到70 mg(52％)标题化合物。1H NMR(300 MHz，DMSO-d6)δ0．8-1．0(m，2H)，1．0-1．9(m，16H)，2．15-2．30(m，1H)，2．58，2．86(AB，2H)，3．8-3．95(m，1H)，4．2-4．5(m，2H)，4．7-4．85(m，1H)，4．95-5．05(m，1H)，7．40(d，2H)，7．77(d，2H)，8．2-8．3(m，1H)，9．3-9．4(m，1H)，9．90(宽s，3H)。一种质子的信号(3．21)被溶剂信号部分掩盖。13C NMR(75 MHz，DMSO-d6)脒碳和羰基碳δ165．8，168．8，169．9，172．2和172．4。MS m／z 500(M++1)实施例32MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab见上述实施例31(ⅱ)。
实施例33H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(ⅰ)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)455mg(0．83mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)与80 mg(0．86mmol)氯乙酰胺于3 ml乙腈中在395mg(2．86mmol)碳酸钾存在下，在40℃下用声波处理进行的烷基化反应非常缓慢。即使加入230mg(2．6mmol)溴化锂也未见反应速度有所增加。然而此反应在加入碘化锂并加热／声波处理条件下进行时经TLC分析表明能生成少量产物。经加入水、用乙酸乙酯／甲苯萃取、干燥有机相(MgSO4)、真空除去溶剂得到残余物，用洗脱剂MeOH／CH2Cl2进行闪色谱处理，得到118mg(24％)所需产物。
(ⅱ)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab×2HCl118mg(0．2mmol)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于10ml 95％乙醇，在143mg 10％Pd／C存在下氢化2 hr。混合物用蒸馏水和盐酸稀释并用hyflo过滤。冷冻干燥得到26mg(24％)所需产物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ0．9-1．1(m，2H)，1．1-1．9(m，16H)，2．3(d，1H)，3．4(t，1H)，3．6(AB-系，2H)，3．8(d，2H)，4．35(t，1H)，4．5(s，2H)，5．2(s，1H)，7．55(d，2H)，7．8(d，2H)。
实施例34Boc-(R)Cha-Pic-Pab10mg(0．01 5mmol)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)溶于5 ml乙醇，在38mg 10％Pd／C存在下氢化4 hr。过滤除去催化剂，真空蒸去溶剂，然后将残余物溶于水，冷冻干燥得到7．6mg(95％)产物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ0．9-1．1(m，2H)，1．1-1．9(m，16H)，2．4(d，1H)，3．25(t，1H)，4．0(d，1H)，4．5(AB-system，2H)，4．5-4．6(m，1H)，5．25(s，1H)，7．45(d，2H)，7．75(d，2H)。
实施例35Ac-(R)Cha-Pic-Pab×HCl(ⅰ)Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)向0．37g(0．68mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例2 5)和0．19g(1．35mmol)K2CO3于10ml CH3CN的混合物中在室温下加入0．06g(0．8mmol)乙酰氯。反应混合物在室温继续搅拌30分钟后真空去除溶剂。将残余物溶于CH2Cl2，用水洗涤蒸发，并在闪色谱上用梯度冲洗液CH2Cl2／MeOH(99．9／0．1，99．8／0．2，99．6／0．4，99．2／0．8和98．4／1．6)处理得到0．24g(60％)产物。
(ⅱ)Ac-(R)Cha-Pic-Pab×HCl常压下将Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)在5％Pd／C上氢化，滤去催化剂并蒸去溶剂，粗产物在RPLC上用CH3CN／0．1M NH4oAc(35／65)冲洗剂处理纯化。去除溶剂和地量NH4oAc，用1M HCl冷冻干燥，得到标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CD3OD)δ0．85-1．1(m，2H)，1．15-2．0(m，19H)，2．35-2．47(m，1H)，3．2-3．33(m，1H)，3．95-4．05(m，1H)，4．46，4．57(ABX，2H)，5．16-5．22(m，1H)，7．51(d，2H)，7．76(d，2H)，8．23(m，1H)。一种质子的信号被溶剂信号全部掩盖。13C-NMR(75 MHz，CD3OD)脒碳和羰基碳δ168．3，172．5，173．8，175．1。MS m／z 456(M++1)实施例36Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab×HCl(ⅰ)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)对209mg(0．382mmol)H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例2 5)和0．11ml(0．763mmol)三乙胺于5 ml二氯甲烷的溶液进行搅拌，在0℃时加入于0．5ml二氯甲烷的48mg(0．42mmol)甲磺酰氯。反应混合物达到室温过夜。经水洗、干燥(Na2SO4)和真空蒸去溶剂，残余物用洗脱剂乙酸乙酯／甲醇(95／5)进行闪色谱处理，得到159mg(67％)产物。
(ⅱ)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab×HCl将150mg(0．24mmol)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)溶于5 ml 95％乙醇和1 ml水中，在5％Pd／C存在下氢化4 hr。过滤除去催化剂，加入0．2ml 1M盐酸，并真空蒸去溶剂，将残余物溶于2 ml水，冷冻干燥得到116mg(86％)产物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD)δ0．90-1．10(m，2H)，1．15-1．85(m，15H)，1．90(bd，1H)，2．30(bd，1H)，2．85(s，3H)，3．35(dt，1H)，3．90(bd，1H)，4．45(AB-系，2H)4．50-4．55(m，1H)，5．13(dd，1H)，7．50(d，2H)，7．75(d，2H)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ166．8，173．0和174．6。
实施例37H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)搅拌1．0g(2．6mmol)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-OH(见起始物的制备)、1．28g(10．5mmol)DMAP和0．74g(2．6mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)于35 ml DMF中的溶液，在-18℃下加入EDC。反应混合物温度达到室温过夜，然后真空除去溶剂。将残余物溶于CH2Cl2，有机相用0．3M KHSO4、KHCO3溶液和盐水依次洗涤。经干燥(Na2SO4)和除去溶剂，残余物用洗脱剂庚烷／含4％甲醇的乙酸乙酯进行闪色谱处理，得到0．74g(44％)所需产物。
(ⅱ)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)将0．68g(1．05mmol)Boc-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)溶于用HCl(气)饱和的乙酸乙酯。在室温下搅拌溶液1 hr。加入水并用K2CO3碱化混合物。水相用乙酸乙酯萃取。然后用水洗涤并干燥(Na2SO4)有机相，蒸发得到0．5g(87％)所需产物。
(ⅲ)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl将65mg(0．19mmol)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)溶于7 ml乙醇，并在5％Pd／C存在下氢化4小时。过滤除去催化剂、蒸发溶剂、用1M HCl和水冷冻干燥后得到41 mg(71％)产物。1H NMR(300 MHz，D2O，二个非对映体4／5，以及旋转异构体)；δ0．8-2．16(m，)，2．5-2．77(m，3H)，3．13-3．43(m，3H)，3．68-3．94(m，1H)，4．18-4．41(m，1H)，4．41-4．52(m，3H)，7．46-7．57(m，2H)，7．72-7．83(m，2H)。
实施例38HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)将0．21g(0．38mmol)H-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)(见实施例37)溶于2 ml乙醇，加入0．68g(0．42mmol)丙烯酸苄酯后使溶液搅拌5天。经蒸发和用洗脱剂CH2Cl2／MeOH(95／5)进行闪色谱处理，得到0．19g(70％)所需产物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab×2HCl将170mg(0．24mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-Pab(Z)溶于10 ml乙醇，在5％Pd／C存在下氢化4小时。过滤除去催化剂、蒸发溶剂、用1M HCl和水冷冻干燥，得到103mg(77％)产物。1H NMR(300 MHz，D2O，二个非对映体4／5和旋转异构体的混合物)；δ0．92-2．03(m，H)，2．51-2．78(m，1H)，3．21-3．52(m，1H)，3．88-4．01(m，1H)，4．07-4．3(m，2H)，4．4-4．71(m，2H)，7．59(d，2H)，7．86(d，2H)13C-NMR(300．13 MHz，D2O，二个非对映体4／5和旋转异构体的混合物)脒碳和羰基碳δ167．0，168．0，168．1，175．9，176．0，176．3，176．4和178．2。
实施例39HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)在-12℃下将1．77g(9．2mmol)EDC加到3．41g(9．2mmol)Boc-(R)Cha-Val-OH(见起始物的制备)，2．61g(9．2mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)和4．5g(36．8mmol)DMAP于50ml DMF的混合物中。使反应混合物达到室温过夜，用水稀释，用甲苯、乙醚和乙酸乙酯萃取，合并有机萃取物，干燥(MgSO4)、真空去除溶剂，用洗脱剂CH2Cl2／MeOH进行闪色谱处理，得到2．77g(47％)所需产物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Val-Pab(Z)2．77g(4．4mmol)Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)于75ml乙酸乙酯的溶液中鼓泡通入氯化氢气体，15分钟后加入碳酸钠溶液至pH 10，水相用乙酸乙酯萃取。干燥(碳酸钾)，真空除去溶剂，得到1．8g(77％)H-(R)Cha-Val-Pab(Z)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)在40℃下用声波处理326mg(0．61mmol)H-(R)Cha-Val-Pab(Z)、105ml(0．67mmol)溴乙酸苄酯和252mg(1．83mmol)碳酸钾于2 ml乙腈中的混合物2．5hr。再加入乙腈使产物溶解，过滤混合物，真空除去溶剂。残余物用洗脱剂甲醇／二氯甲烷进行闪色谱纯化，产物最后用乙酸乙酯结晶得到124mg(30％)无色结晶。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2HCl将124mg(0．18mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)溶于20ml乙醇，在25mg 10％Pd／C存在下氢化2小时。再加入10mlTHF继续氢化2小时(50℃下)。用hyflo过滤反应混合物，滤饼用稀盐酸洗涤。合并滤液，除去有机溶剂，将剩余的溶液冷冻干燥，得到55mg(50％)所需化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ0．75-1．4(m，12H)，1．5-1．9(m，7H)，2．0-2．15(bs，1H)，3．45(AB-系，2H)，4．1(m，2H)，4．5(m，2H)，7．5(s，2H)，7．7(s，2H)，8．9(s，1H)。
实施例40HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2HCl(ⅰ)H-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)以用于Boc-(R)Cha-Pic-OMe(见起始物的制备)的新戊酰偶联将Boc-(R)Cha-Val-OH与H-Pab(Z)偶联制备标题化合物。由缬氨酸的差向立体异构作用而得到Boc-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)，然后以用于Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z)(见实施例39)中的方法去除Boc保护基团制得标题化合物。
(ⅱ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)1．007g(1．9mmol)H-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)和308mg(1．9mmol)丙烯酸苄酯于3 ml乙醇的溶液在40℃下放置过夜。真空除去溶剂，残余物用洗脱剂甲醇／二氯甲烷(10／90)进行闪色谱纯化，得到1．086g(82％)标题化合物。
(ⅲ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-Pab×2 HCl1．086g(1．6mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)溶于25ml THF和14ml 0．5M盐酸，在223mg 10％Pd／C存在下氢化2小时。用硅藻土过滤除去催化剂并在真空下除去THF，然后将剩余水溶液冷冻干燥得到残余物，其中约300mg的残余物用洗脱剂25％乙腈的0．1M NH4OAc缓冲剂进行HPLC处理，分离出二个主要馏分，其中第二个馏分中含有标题化合物。最后分离出67 mg标题化合物，为二盐酸盐。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ 1．0-1．15(m，12H)，1．2-1．4(m，7H)，1．65-1．9(m，7H)，2．15-2．25(m，1H)，2．85(t，2H)，3．15-3．2(m，1H)，3．3-3．35(m，1H)，4．15-4．2(m，1H)，4．25(d，1H)，4．55-4．65(AB-体系，2H)，7．65(d，2H)，7．85(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．0，169．8，173．96和174．04。
实施例41H-(R)Hoc-Aze-Pab×2 HCl(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)以用于Boc-(R)-Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)的方法进行制备，其中Boc-(R)Cha-Pic-OH用Boc-(R)Hoc-Aze-OH(见起始物的制备)代替。粗产物经闪色谱(甲苯／EtOAc 1／6)处理得到0．32g(37％)所需产物。
(ⅱ)H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)按实施例25用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)的方法对Boc-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)进行处理，得到0．23g(88％)标题化合物。
(ⅲ)H-(R)Hoc-Aze-Pab×2HCl将20 mg(0．037mmol)H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)溶于3 ml乙醇，在5％Pd／C存在下常压氢化4 hr。过滤除去催化剂、蒸发溶剂，1M HCl冷冻干燥得到11kg产物。1H NMR(300．13 MHz，D2O，二种旋转异构体3∶1的混合物)主要旋转异构体δ0．9-2．1(m，15H)，2．4-2．6(m，1H)，2．7-3．0(m，1H)，4．1-4．3(m，1H)，4．35-4．56(m，1H)，4．65(s，2H)，5．0-5．11(m，1H)，7．62(d，2H)，7．9(d，2H)。一种质子的信号被H-O-D-信号全部遮蔽。
实施例42HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab×2TFA(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)在室温下将0．067g(0．41mmol)丙烯酸苄酯加到于2 ml乙醇(95％)的0．2g(0．37mmol)H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)(见实施例41)溶液中，将反应在室温下进行5天，真空除去溶剂，残余物用闪色谱(CH2Cl2∶MeOH，96／4)纯化得到0．16g(62％)所需产物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab×2TFA将160mg(0．23mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)溶于10 ml乙醇，在5％Pd／C存在下常压氢化3小时。过滤除去催化剂、蒸发溶剂，用水TFA冷冻干燥得到120mg(87％)产物。1H NMR(300．13 MHz，D2O，二种旋转异构体3∶1)主要旋转异构体δ0．9-1．9(m，13H)，1．94-2．16(m，2H)，2．38-2．55(m，1H)，2．7-2．97(m，3H)，3．2-3．44(m，2H)，4．16(m，1H)，4．35-4．58(m，2H)，4．65(s，2H)，5．0-5．12(m，1H)，7．63(d，2H)，7．87(d，2H)13C NMR(300．13 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．3，168．7，172．5和176．6 。
实施例43HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)用实施例25用于Boc-(R)CM-Pic-Pab(Z)的方法由Boc-(R)Hoc-Pro-OH(见起始物的制备)制得。用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱纯化，得到标题化合物0．886g(58％)。1H-NMR．(300 MHz，CDCl3)；δ0．7-0．95(m， 2H)，0．95-2．1(m，27H(其中1．2(s，9H))，2．1-2．4(m， 1H)，3．3-3．5(m，1H)，3．65-3．95(m，1H)，4．0-4．2(m，1H)，42-4．45(m，2H)，4．45-4．6(d，1H)，5．15(近似bs，2H)，5．2-5．3(d，1H)，7．1-7．4(m，7H)，7．65(m，1H)，7．7-7．8(d，2H)，9．4(bs．1H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ156．3，164．6，168．1，171．4和172．4。
(ⅱ)H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)在0℃下将用氯化氢饱和的40ml乙酸乙酯加到0．82g(1．266mmol)Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)中。令温度自行升至室温。1．5hr后反应没有完全，因而在反应混合物中再鼓泡通入氯化氢5分钟。蒸去溶剂，加入乙酸乙酯和饱和碳酸钠溶液，分成二相。有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4)并真空蒸发溶剂，得到几乎定量收率的标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)；δ0．75-0．95(m，2H)，0．95-2．4(m，17H)，3．3-3．55(m，2H)，3．55-3．7(m，1H)，4．25-4．45(m，2H)，4．5-4．6(m，1H)，5．15(s，2H)，7．15-7．35(m，5H)，7．35-7．45(m，2H)，7．6-7．7(m，1H)，7．7-7．85(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．5，167．8，171．4和175．3。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)向于1．5ml EtOH(99％)中的0．15g(0．5mmol)丙烯酸苄酯加入0．273g(0．498mmol)H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)，混合物在室温下搅拌10天。真空除去溶剂，残余物用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱处理，得到0．103g(25％)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)；δ0．75-2．05(m，18H)，2．3-2．45(m，1H)，2．45-2．8(m，3H)，3．15-3．45(m，3H)，3．5-3．65(m，1H)，4．3-4．5(m，2H)，4．55-4．7(m，1H)，4．8(s，1H)，4．9-5．1(m，3H)，5．2(s，2H)，7．1-7．2(m，1H)，7．2-7．4(m，13H)，7．4-7．45(d，2H)，7．6-7．8(m，3H)。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab×2HCl将103mg(0．122mmol)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)溶于4 ml乙醇(99．5％)和0．3ml氯仿中，在111mg 5％Pd／C存在下氢化2 hr。过滤除去催化剂、蒸发溶剂、然后溶于水，冷冻干燥，表明混合物氢化不完全。于是在乙醇、1NHCl和5％Pd／C存在下继续氢化5小时。
过滤除去催化剂并蒸去溶剂，溶于水中，冷冻干燥，得到标题化合物。1H-NMR(500MHz，CD3OD，二个非对映体的混合物)；δ0．8-1．0(m，2H)，1．1-1．4(m，6H)，1．6-1．8(m，5H)，1．9-2．15(m，5H)2．25-2．35(m，1H)，2．9-3．2(m，2H)，3．5-3．65(m，1H)，3．7-3．9(2m，总计1H)，4．15-4．4(2m，总计1H)，4．4-4．6(m，4H)，7．5-7．6(m，2H)，7．7-7．85(m，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ167．9，168．2，168．3，172．8，173．6，174．3和174．4。二个非对映体的信号有部分重叠。
实施例44HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)以Boc-(R)Hoc-Pic-OH(见起始物的制备)和H-Pab(Z)(见起始物的制备)为原料，按所述用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)的方法进行制备。用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱处理，得到1．3g(78％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．75-0．95(m，2H)，0．95-2．0(m，31H(其中1．3(s，9H))，2．4-2．5(m，1H)，3．0-3．1(m，1H)，3．8(m，1H)，4．2-4．45(m，2H)，4．45-4．55(m，2H)，5．15(近似bs，3H)，5．25-5．3(m，1H)，7．0(bs，1H)，7．15-7．5(m，7H)，7．7-7．85(d，2H)，9．45(bs，1H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 156．6，164．7，168．1，170．0和173．0。
(ⅱ)H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)用氯化氢饱和的100ml乙酸乙酯在0℃下加到1．3g(1．96mmol)Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)中。使反应物温度自行升至室温。40分钟后蒸去溶剂并加入乙酸乙酯和饱和碳酸钠溶液，分成二相。有机相用盐水洗涤、干燥(Na2SO4)，真空蒸发溶剂，得到0．85g(77．5％)产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．75-0．95(m，2H)，1．05-2．3(m，25H)，3．0-3．15(m，1H)，3．6-3．75(m，2H)，4．25-4．4(m，2H)，5．15(近似bs，3H)，7．05-7．2(d，2H)，7．2-7．35(m，4H)，7．35-7．4(d，1H)，7．6-7．8 (d，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．5，167．9，170．8和175．7。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)向0．4g(0．712mmol)H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)和0．217g(1．57mmol)K2CO3于7 ml乙腈的混合物中加入0．171g(0．748mmol)溴乙酸苄酯。在油浴中加热混合物至60℃反应1 hr。去除溶剂并加入乙酸乙酯和水，二相分离。有机相用盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。真空蒸发得到0．626g残余物，残余物用乙酸乙酯洗脱剂进行闪色谱处理后得到2种产物。从柱中流出的第一种化合物是(BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)(0．28g)，第二种化合物是标题化合物(0．27g)。BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．7-0．95(m，2H)，1．0-1．75(m，18H)，2．3-2．5(m，1 or 2H)，2．9-3．05(m，1H)，3．2-3．3(m，1H)，3．35-3．5(m，2H)，3．6-3．7(m，1H)，4．35，4．55(ABX-体系，2H)，4．75(s，2H)，5．15(近似s，3H)，5．25-5．3(m，1H)，7．1-7．45(m，12H)，7．7-7．8(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．6，167．9，170．5，173．4和175．0。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl将259mg(0．365mmol)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)溶于7．8ml乙醇(99．5％)和1．2ml盐酸(1N)，在280mg 5％Pd／C存在下氢化4 hr。过滤除去催化剂、蒸发溶剂，溶于水中并冷冻干燥，得到170mg(83％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．4-1．85(m，20H)，1．85-2．2(m，1H)，2．9-3．2(m，1H)，3．4-3．9(m，3H)，4．05-4．3(m，2H)，4．3-5．05(m，2H)，7．1-7．4(m，2H)，7．4-7．7(m，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ167．8，168．6，169．6和172．3。
实施例45(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl(ⅰ)(BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)
标题化合物可从上面实施例44中所述H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)的烷基化过程中获得。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．7-0．95(m，2H)，0．95-1．95(m，18H)，2．35-2．5(m，1H)，2．9-3．05(m，1H)，3．5-3．85(m，6H)，4．35-4．55(m，2H)，4．9(2s，4H)，5．2(s，2H)，5．25-5．35(m，1H)，7．1-7．45(m，16N)，7．5-7．65(m，1H)，7．7-7．85(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．7，167．9，170．5，172．0和172．4。
(ⅱ)(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab×2HCl将153mmg(0．178mmol)(BnOOC-CH2)2(R)Hoc-Pic-Pab(Z)溶于4．5ml乙醇(99．5％)和0．5ml盐酸(1N)，在150mg 5％Pd／C存在下氢化3．5hr。过滤除去催化剂、蒸发溶剂，然后溶于水中，冷冻干燥，得到109mg(99％)(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab二盐酸盐。此粗产物(纯度80％)在RPLC上用CH3CN／0．1M NH4OAc，1∶4洗脱剂纯化。除去溶剂和过量NH4OAc，再用1M HCl中冷冻干燥，得到标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O，二个旋转异构体的混合物)主要异构体δ0．95-2．15(m，20H)，2．25-2．35(m，1H)，3．45-3．55(m，1H)，3．95-4．25(m，5H)，4．6-4．65(m，2H)，4．92-5．01(m，1H)5．15-5．20(m，1H)，7．58-7．63(d，2H)，7．84-7．89(d，2H)．由次要异构体产生的可分辨信号位于δ0．7-0．85(m)，2．35-3．45(m)，3．05-3．15(m)，4．47-4．55(m)，4．55-4．6(m)，4．65-4．7(m)，7．63-7．67(d)，7．89-7．95(d)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ168．20，169．70，170．20和172．71。
实施例46HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)向570mg(1．5mmol)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH(见起始物的制备)、425mg(1．5mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)和733mg(6 mmol)DMAP于25ml CH3CN／DMF(1．5／l)的溶液中加入310mg(1．62mmol)EDC，混合物在室温下搅拌23 hr。蒸去大部分溶剂，残余物中加入50 ml水。水相用1×75和2×50 mlEtOAc萃取。合并有机相，用1×20+1×10 ml 1M KHSO4、1×15 ml NaHCO3(水溶液)、3×15 ml水、1×15 ml盐水依次洗涤。干燥(MgSO4)。过滤和蒸发溶剂，得到670mg油状物，用洗脱剂EtOAc进行闪色谱精制，最后得到529mg(55％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ1．26(s，9H)，1．53-1．88(m，3H)，2．1-2．31(m，3H)，2．52(q，1H)，3．58-3．77(m，4H)，4．31(d，1H)，4．35 and 4．47(ABX-系，2H)，4．65(dd，1H)，5．19(s，2H)，7．1-7．37(m，10H)，7．42(d，2H)，7．81(d，2H)，8．0(t，1H(NH))。13C-NMR(75MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ154．6，164．6，168．1，171．1和171．3。
(ⅱ)H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)将529mg(0．81mmol)Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)溶于15 ml EtOAc／HCl(气，饱和)，在室温下搅拌3 hr。蒸去溶剂，将残余物溶于70 ml CH2Cl2。有机相用1×10 ml2M NaOH、1×10ml水和1×10ml盐水依次洗涤，干燥(MgSO4)。过滤、蒸发溶剂，得到403mg(90％)标题化合物，为白色粉末。1H-NKR(300 MHz，CDCl3)δ1．44-1．57(m，1H)，1．62-1．86(m，2H)，1．96-2．35(m，3H)，2．45(q，1H)，3．05-3．35(m，4H)，3．83(bd，1H)，4．25-4．45(m，2H)，4．53(m，1H)，5．19(s，2H)，7．16-7．37(m，3．10H)，7．42(d，2H)，7．66(t，1H，(NH))，7．77(d，2H)．13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．4，167．9，171．1和173．0。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)200ms(0．36mmol)H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)、105mg(0．46mmol)Br-CH2-COOBn和125mg(0．90mmol)K2CO3于10ml CH3CN的混合物加热至50℃反应1 hr 30 min。蒸去溶剂并将残余物溶于70ml EtOAc。有机相用10ml水洗涤、干燥(MgSO4)。过滤和蒸发溶剂后得到260mg油状物。粗产物在闪色谱上用梯度冲洗液CH2Cl2／MeOH(NH3-饱和)(95／5然后9／1)提纯，得到182mg(72％)标题化合物，为白色固体。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ1．43-1．82(m，3H)，1．96-2．13(m，1H)，2．14-2．22(m，1H)，2．26-2．43(m，2H)，3．02-3．14(m，2H)，3．24-3．51(m，4H)，3．s3(d，1H)，4．29-4．46(ABx-系中心位于4．37，2H)，4．5s(ad，1H)，4．97-5．l(kB-系中心位于at．5．03，2H)，5．19(s，2H)，7．16-7．38(m，15H)，7．43(d，2H)，7．5．7．8(m，3H，- NH)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 164．5，167．9，171．15，171．2和172．7。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl0．18g(0．26mmol)BnOOC-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)与0．075g 5％Pd／C、1．0ml 1N HCl溶液、1 ml水和10 ml乙醇混合，在常压下氢化1小时。用hyflo过滤催化剂、蒸去溶剂，用水冷冻干燥二次，得到129mg粗产物。粗产物在RPLC上用梯度洗脱液0．1M NH4OAc／CH3CN(先4／1后3／1)分离精制，蒸发，用水和1N HCl溶液冷冻干燥得到70 mg(50％)纯化合物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．42-1．60(m，1H)，1．65-1．83(m，1H)，1．83-1．98(m，1H)，2．03-2．20(m，2H)，2．63(t，2H)，3．28-3．40(m，1H)，3．55-3．78(m，2H)，3．81-3．96(AB-体系中心在δ3．88，2 H)，4．06-4．19(m，1H)，4．37-4．61(AB-体系中心在δ4．49，2H)，4．48(dd，1H)，4．70(d，1H)，7．35-7．58(m，7H)，7．74(d，2H)13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 167．02，167．2，169．3和174．4。
实施例47HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)向190mg(0．34mmol)H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)(见实施例46)于7ml EtOH(99％)的溶液中加入114mg(0．70mmol)丙烯酸苄酯，反应混合物在室温下搅拌24 hr。蒸发溶剂，在闪色谱上用CH2Cl2／MeOH(NH3-饱和)梯度冲洗剂(先95／5后9 ／1)分离得到202mg(83％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ1．5-1．71(m，2H)，1．74-1．9(m，1H)，1．9-2．05(m，1H)，2．2-2．64(m，5H)，2．69-2．82(m，2H)，2．84-2．96(m，1H)，3．18-3．48(m，4H)，4．28-4.4．4(m，2H)，4．61(m，1H)，4．48-5．08( AB-体系中心在5．03，2H)，5．19(s，2H)，7．15-7．37(m，15H)，7．44(d，2H)，7．75-7．85(m，3H，-NH)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．6，168．0，171．2，172．5和172．9。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab×2HCl0．20g(0．28mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)与0．075g 5％Pd／C、1．0ml 1N HCl溶液、1ml水和10ml乙醇混合后在常压下氢化1小时。反应产物经hyflo滤去催化剂、蒸发溶剂，用水冷冻干燥二次，得到125mg(79％)标题化合物。H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．44(m，1H)，1．65-1．9(m，2H)，2．0-2．2(m，2H)，2．62(q，2H)，2．83(t，2H)，3．27-3．4(m，1H)，3．4-3．8(m，4H)，4．0-4．15(m，1H)，4．35-4．6(m，3H)，4．68(d，1H)，7．35-7．6(m，7H)，7．77(d，2H)13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 166．2，167．1，174．1和174．2。
实施例48HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)用Boc-(R)Tic-Pro-OH(见起始物的制备)代替Boc-(R)Cha-Pic-OH，按所述用于Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)(见实施例25)的方法制备，用洗脱剂庚烷／EtOAc(4／1)进行闪色谱处理，得到425mg(37％)标题化合物。1H NMR (500 MHz，CDCl3)δ1．35(s，9H)，1．95-2．15(m，3H)，2．4(m，1H)，2．8(m，1H)，3．3(m，1H)，3．55(m，2H)，4．25-4．4(two m，2H)，4．55-4．7(二m，2H)，7．15-7．5(m，10H)，7．85(d，2H)。13C-NMR(75．0 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．6，171．5和171．6(二峰有可能重叠)。
(ⅱ)H-(R)Tic-Pro-Pab(Z)将Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)(379mg，0．59mmol)溶于用HCl(气)饱和的EtOAc，在室温下搅拌。蒸去溶剂，得到251mg(79％)标题化合物，为白色粉末。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ1．65-2．15(二m，7H)，2．45(m，1H)，2．75(m，1H)，2．9(m，1H)，3．0(m，1H)，3．25(m，1H)，3．55(m，1H)，3．85(m，1H)，4．35-4．55(m，2H)，4．75(d，1H)，4．9(s，1H)，5．25(s，2H)，6．8-7．45(几个m，8H)，7．5 and 7．85(二d，4H)。13C-NMR(75．0 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ164．5，171．3和172．7(二峰有可能重叠)。
(ⅲ)BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)在20℃于EtOH(1．3ml)中用丙烯酸苄酯(63mg，0．39mmol)处理H-(R)Tic-Pro-Pab(Z)(140mg，0．26mmol)48 hr。蒸发溶剂，用冲洗剂(50％EtOAc／庚烷及随后的10％MeOH／EtOAc)进行闪色谱处理得到133mg(73％)所需产物，为白色固体物质。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ1．75-2．0(二m，4H)，2．25(m，1H)，1．4-1．65(m，2H)，2．7-2．95(二m，4H)，3．05-3．2(m，
2H)，3．9(m，1H)，4．45(m，2H)，4．65(m，1H)，5．1(二d，2H)，5．25(s，2H)，6．85-7．45(几个m，12H)，7．5和7．9(二d，4H)。
13C-NMR(75．0 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 171．5，171．9和172．1(二峰有可能重叠)。
(ⅳ)HOOC-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab×2 HCl用EtOH／HCl作溶剂，将BnO2C-CH2-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)(125mg，0．17mmol)在5％Pd／C上氢化。滤去催化剂，冷冻干燥，得到73 mg(77％)标题化合物，为白色粉末。1H NMR(500 MHz，D2O)δ 2．1-2．35(二m，3H)，2．6(m，1H)，2．95-3．1(m，2H)，3．25-3．5(二 m，2H)，3．65(m，3H)，4．65(s，2H)，4．75(m，1H)，5．85(s，1H)，7．15-7．6(三 m，4H)，7．6和d 7．85(二d，4H).13C-NMR(75．0 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 166．9，167．1和174．3(二峰有可能重叠)。
实施例49HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2向0．623g(1．83mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-OH(见起始物的制备)、0．816g(1．92mmol)H-Pig(Z)2(见起始物的制备)和0．89g(7．3mmol)DMAP于10 ml二氯甲烷的混合物中加入0．368g(1．92mmol)EDC并搅拌过夜。混合物用0．3M KHSO4稀释和洗涤后用盐水洗涤一次。有机层经干燥(Na2SO4)，过滤和蒸发，得到1．4g粗产物。粗产物在闪色谱上用乙酸乙酯洗脱液分离纯化，得到0．3g(22％)纯产物。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)20．3g(0．4mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2与10ml二氯甲烷和2．5ml三氟乙酸混合后，搅拌1．5小时。蒸发溶剂。将残余物溶于二氯甲烷并用0．2M NaOH溶液洗涤二次。合并水层，用二氯甲烷再萃取一次。合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到0．24g(93％)产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3，339K)δ0．9-1．9(m，15H)，1．94(bd，1H)，2．37-2．52(m，1H)，2．65-2．8(m，1H)，2．9-3．08(m，3H)，3．20(t，2H)，4．05-4．28(m，4H)，4．86(dd，1H)，5．16(s，4H)，7．2-7．42(m，10H)，7．98(bs，NH)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)20．231g(0．36mmol)溶于2 ml乙醇并加入61μl(0．40mmol)丙烯酸苄酯，反应混合物在室温下搅拌5天。蒸发混合物，粗产物在闪色谱上用CH2Cl2／MeOH(95／5，90／10)梯度洗脱液分离精制，得到0．218g(75％)纯产物。1H-NMR(300 MHz，CDCl3，335K)δ 0．93(bq，1H)，1．02-1．85(m，14H)，1．94(bd，1H)，2．33-2．5(m，3H)，2．58-2．77(m，2H)，2．79-3．02(m，4H)，3．17(t，2H)，4．0-4．25(m，4H)，4．86(dd，1H)，5．11(s，2H)，5．12(s，4H)，7．2-7．4(m，15H)，8．03(bs，NH)，10．35(bs，NH)(ⅳ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig×2HCl0．218g(0．27mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2与0．10g 5％Pd／C、1ml 1M HCl溶液、1 ml水和10 ml乙醇混合，在常压下氢化1小时。hyflo过滤除去催化剂、蒸发溶剂、用水冷冻干燥二次后得到134mg(95％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．0-1．4(m，7H)，1．55-2．05(m，9H)，2．22-2．34(m，1H)，2．61-2．76(m，1H)，2．88(t，2H)，3．08(bt，2H)，3．19(d，2H)，3．34(m，2H)，3．83(bd，2H)，3．95(d，1H)，4．29-4．49(m，2H)，4．90(dd，1H)13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 156．4，167．6，172．1和174．7。
实施例50HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2向1g(2．82mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(见起始物的制备)、1．197g(2．82mmol)H-Pig(Z)2(见起始物的制备)和1．38g(11．28mmol)DMAP在乙腈的混合物中在-15℃下加入0．568g(2．96mmol)EDC。反应混合物温度升至室温过夜。真空蒸去溶剂，加入二氯甲烷和1 MKHSO4，二相分离，有机相用饱和NaHCO3、水和盐水洗涤、干燥(Na2SO4)，蒸发溶剂，留下2．033g残余物，用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱处理得到二种产物。首先流出柱子的是标题化合物720mg(34％)；随后流出的是失去一个Z保护基形成的Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)775mg(44％)。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子内的交换作用使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。哌啶环中的2-和6-CH2基所产生的3．5至4．5ppm范围内的特别明显。δ0．85-2．1(m，19H)，2．3-2．45(m，1H)，2．8-3．2(m，4H)，0．45-3．55(m，1H)，3．55-3．65(m，次要旋转异构体)，3．8-3．93(m，1H)，3．97-4．1(m，1H)，4．52-4．62(d，1H)，5．1(形似bs，5H)，7．12-7．41(m，10H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ 155．2，156．3，171．0和172．1。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2将720mg(0．946mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2溶于35 ml TFA／CH2Cl2，1／4并搅拌30分钟。真空除去溶剂并加入乙酸乙酯和2 M NaOH。有机层用水和盐水洗涤、干燥(Na2SO4)，真空蒸发溶剂，得到定量收率的标题化合物。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子内的交换作用使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。哌啶环中的2-和6-CH2基所产生的3．5至4．5ppm范围内的特别明显。δ0．8-2．15(m，19H)，2．22-2．4(m，1H)，2．75-2．98(m，2H)，2．98-3．18(m，2H)，3．18-3．35(m，1H)，3．35-3．5(重峰，1H)，3．5-3．7(m，1H)，4．42-4．58(d，1H)，5．1(s，4H)，7．1-7．5(m，10H)。13C-NMR(75 MHz，CDCl3)脒碳和羰基碳δ154．96，171．31，174．82。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2向0．64g(0．999mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2和0．513g(2．996mmol)K2CO3于6．4ml乙腈的混合物中加入0．298g(0．999mmol)BnOOC-CH2-OTf(见起始物的制备)，加热回流。1 hr 20 mim后混合物用水洗涤，干燥(Na2SO4)并真空蒸发溶剂，得到729mg残余物。残余物用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱处理得到二种产物首先从柱中流出的120mg(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2和随后的142mg(18％)标题化合物。
1H-NMR(300MHz、CDCl3)由于分子内的交换作用使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。哌啶环中的2-和6-CH2基所产生的3．5至4．6ppm范围内的特别明显。δ0．94-2．27(m，19H)，2．28-2．43(m，1H)，2．g-2．98(m，2H)，2．98-3．06(m，1H)，3．06-3．15(d，1H)，3．15-3．25(m，1H)，3．3-3．5(m，4H)，4．5-4．61(d，1H)，5．1(s，6H)，7．1-7．6(m，15H)，10．52(bs，1H)。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl在0．88ml 1M盐酸、10 ml乙醇(99．5％)和180mg 5％Pd／C存在下将142mg(0．176mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2氢化2小时。在hyflo和微孔滤纸中过滤除去催化剂，真空蒸发溶剂，冷冻干燥，得到95 mg HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig×2 HCl，此粗产物(79％纯度)在RPLC上用CH3CN／0．1M NH4OAc 15／85冲洗精制，冷冻干燥除去溶剂和过量NH4OAc，然后将其溶于1M盐酸转化为盐酸盐，再冷冻干燥后得到标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ1．1-1．35(m，6H)，1．63-2．14(m，13H)，2．26-2．36(m，1H)，3．01-3．23(m，4H)，3．49-3．62(qvart．，2H)，3．62-3．77(m，2H)，3．77-3．88(形似d，2H)，4．18-4．32(d，1H)，4．37-4．5(m，1H)。
实施例51H-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-hze-Pig(Z)2向86mg(0．243mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)、100mg(0．236mmol)H-Pig(Z)2(见起始物的制备)和115mg(0．944mmol)DMAP于5 ml CH3CN中充分搅拌的混合物中，加入50mg(0．260mmol)EDC，使反应在室温下搅拌进行20 hr。蒸去溶剂，并将残余物溶于70ml EtOAc，有机相用3×5 ml 1M KHSO4、1×5 mlNaHCO3、3×5 ml H2O和1×5 ml盐水洗涤，干燥(MgSO4)。过滤并蒸发溶剂得到141mg油状物。此粗产物在闪色谱(36 g SiO2)上用CH2Cl2／MeOH(97／3，然后95／5)梯度洗脱液分离精制，得到43 mg(24％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)243 mg(0．0565mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2于10ml乙酸乙酯的混合物中鼓泡通入氯化氢气体5分钟。真空蒸去溶剂，加入乙酸乙酯和0．1MNaOH溶液。二相分离，有机相用水和盐水洗涤、干燥(Na2SO4)，蒸去溶液得38mg残余物，残余物用洗脱剂10％NH3-饱和甲醇的乙酸乙酯溶液进行闪色谱处理制得28mg所需产物。
1H-NMR(300 MHz、CDCl3)由于分子内的交换作用使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。哌啶环中的2-和6-CH2基所产生的3．7至4．6ppm范围内的特别明显。δ0．75-1．85(m，18H)，2．35-2．53(m，1H)，2．62-2．78(m，1H)，2．8-3．0(m，2H)，3．0-3．28(m，2H)，3．28-3．37(m，1H)，3．97-4．18(m，2H)，4．8-4．9(m，1H)，5．1(s，4H)，7．2-7．45(m，9H)，8．05-8．15(m，1H)。
(ⅲ)H-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl28mg(0．042mmol)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2溶于2 ml乙醇(99．5％)和0．13ml盐酸(1N)，在35 mg 5％Pd／C存在下氢化4 hr。过滤除去催化剂真空蒸发溶剂、溶于水中并冷冻干燥，得到12mg(60％)H-(R)Cha-Aze-Pig二盐酸盐。
1H-NMR(500MHz、300K，CD3OD)由于分子内的交换作用使得有些信号，尤其是哌啶环内的信号选择性变宽。特别是哌啶环上的2-和6-CH2基在3．7-4．5ppm范围表现出的宽峰更为明显。δ0．75-2．1(m，18H)，2．2-2．35(m，1H)，2．62-2．75(m，1H)，3．0-3．12(t，2H)，3．12-3．23(d，2H)，3．85-3．95(d，2H)，3．95-4．0(dd，1H)，4．15-4．23(m，1H)，4．35-4．42(m，1H)，4．72-4．78(m，1H)。13C-NMR(75 MHz，CD3OD)胍δ157．6；羰基碳δ170．0和172．6。
实施例52HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)向0．47g(1．4mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-OH(见起始物的制备)、0．40g(1．4 mmol)H-Pac(Z)(见起始物的制备)和0．67g(5．5mmol)DMAP于5 ml乙腈的溶液中在0℃下加入0．27g EDC。反应混合物在室温下搅拌过夜，再用乙酸乙酯稀释。溶液用KHSO4(水溶液)和NaHCO3(水溶液)洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤并蒸发。用洗脱剂乙酸乙酯／甲醇(98／2)进行闪色谱处理制得0．25g(30％)标题化合物，为就分子中的Pac部分而言为1，4-顺-和1，4-反-产物的混合物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-2．0(m，29H；其中1．45(s，9H))，2．15和d 2．34(m，1H，异构体)，2．45-2．7(m，2H)，3．0-3．4(m，2H)，3．85(m，1H)，4．14(m，1H)，4．33(m，1H)，4．85(m，1H)，4．98(m，1H)，5．04(s，2H)，7．25-7．45(m，5H)，7．8-7．9(m，1H)，9．2-9．5(m，1H)。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)×HCl将0．25g(0．41mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)溶于100ml乙酸乙酯，在冰浴中冷却。鼓泡通入HCl(气)5分钟并蒸发溶剂。1H-NMR(300 MHz，MeOD)δ0．8-2．0(m，22H)，2．05-2．35(m，1H)，2．4-2．55(m，1H)，2．6-2．75(M，1H)，3．00(d ，1H)，3．05和3．37(多重峰，分别为0．6和0．4H，异构体)3．15-3．3(m，1H)，4．05-4．2(m，2H)，4．88(dd，1H)，5．11(s，2H)，7．2-7．45(m，5H)，8．0-8．15(m，1H)。
(ⅲ)BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)0．17g(0．33mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)×HCl、0．11g(0．37mmol)三氟甲磺酰氧乙酸苄酯和0．14g(1．0mmol)K2CO3于5ml乙腈的混合物在室温下搅拌3天。粗产物用洗脱剂EtOAc／CH2Cl2／MeOH 95／20／5进行闪色谱处理，收率70mg(32％)。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．85-2．3(m，20H)，2．48(m，1H)，2．63(m，1H)，2．87(m，1H)，3．05-3．25(m，1H)，3．25-3．35(m，2H)，3．38(dd，1H)，3．95(m，1H)，4．08(m，1H)，4．88(m，1H)，5．1-5．2(m，4H)，5．9-6．3(m，1H)，7．25-7．5(m，10H)，8．00和8．08(宽三重峰，1H，异构体)。
(ⅳ)HO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac×2HCl将70mg(0．11mmol)BnO2C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)溶于5 ml乙醇，加入5％Pd／C和0．1ml浓盐酸。混合物在常压下氢化1小时。过滤和蒸发后，产物在制备RPLC上用0．1M NH4OAc／CH3CN(4／1)洗脱精制，经转变为盐酸盐并冷冻干燥后得到标题化合物，标题化合物就分子中的Pac部分而言是1，4-顺式和反式异构体的45／55混合物，收率40mg(74％)。1H-NMR(500 MHz，D2O)δ1．1-2．1(m，20 H)，2．32(m，1H)，2．52(m，1H)，2．63(m，1H)，2．72(m，1H)，3．1-3．3(m，1H)，3．40(m，1H)，3．8-3．95(m，2H)，4．04(d，1H)，4．39(m，1H)，4．93(m，1H)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ167．7，172．0，174．9和175．2。
实施例53H-(R)Cha-Pro-Pac×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)于℃下。向搅拌的0．4g(1．1mmol)H-Pac(Z)×2 HCl(见起始物的制备)、0．4g(1．1mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)和0．55g DMAP于7 ml乙腈的溶液中加入211mg(1．1mmol)EDC，反应混合物在0℃下搅拌1 hr后在室温下搅拌2 hr。真空除去溶剂并用乙酸乙酯和水稀释残余物。有机相用乙酸、水和碳酸氢钠溶液洗涤并干燥(MgSO4)真空除去溶剂，残余物用洗脱剂乙酸乙酯进行闪色谱分离精制，制得196mg(27％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)196mg Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)于25ml乙酸乙酯的溶液中鼓泡通入氯化氢，10分钟后用二氯甲烷稀释反应混合物并加入氢氧化钠溶液，水相用二氯甲烷萃取几次。合并有机相，经干燥(K2CO3)，真空除去溶剂，得到86mg(52％)标题化合物。(ⅲ)H-(R)Cha-Pro-Pac×2HCl将H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)溶于乙醇，在10％Pd／C存在下氢化制得标题化合物。H-NMR(300 MHz，D2O；分子的Pac部分是1，4-顺式和1，4-反式异构体的混合物，比约1∶1)；δ1．15-1．3(q)，1．6-1．85(m)，1．9-2．0(m)，2．0-2．1(d)，2．1-2．15(m)，2．15-2．2(m)，2．65-2．7(m)，2．7-2．8(m)，2．95-3．0(d)，3．15-3．2(d)，5．4(s)，7．45-7．55(m)。
实施例54H-(R)Cgl-Ile-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)搅拌的1．33g(3．6mmol)Boc-(R)Cgl-Ile-OH(见起始物的制备)、1．12g(3．9mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)和1．76g(14．4mmol)DMAP于50ml CH3CN N／DMF(1／1)的混合物中在+5℃时加入0．75g(3．9 mmol)EDC。使反应混合物温度升至室温并放置60 hr。蒸发除去CH3CN将残余物倒入100ml水中(出现黄色沉淀)。混合物用2×50ml EtOAc萃取。合并有机相，用2×30 mlNaHCO3(饱和)、2×50ml 0．2M HCl和1×50ml盐水洗涤，干燥(MgSO4)。蒸发后用CH2Cl2／THF(85／15)洗脱剂进行闪色谱处理，得到510mg(24％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)将530mg Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)溶于14ml CH2Cl2／TFA(2．5／1)并在室温下搅拌2 hr。蒸发溶剂，用CH2Cl2／MeOH(NH3-饱和)(95／5)洗脱剂进行闪色谱处理得到标题化合物。
(ⅲ)H-(R)Cgl-Ile-Pab×2HCl于含过量HCl(g)的5 ml EtOH中加入75 mg(0．14mmol)H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)，在10％Pd／C上常压氢化6hr，得到二盐酸盐。加入2g活性炭和20 ml EtOH，用硅藻土过滤、蒸发溶剂，用水冷冻干燥，得到50mg(89％)标题化合物，为白色粉未。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ0．90(t，3H)，0．94(d，3H)，1．1-2．0(m，14H)，3．83(bs，1H)，4．26(d，1H)，4．50(m，2H)，7．57(bd，2H)，7．78(bd，2H)。
实施例55H-(R)Cgl-Aze-Pab257mg(5．08mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(见实施例1(ⅱ))在于6 ml EtOH／H2O中在5％Pd／C上常压氢化6 hr，然后滤去催化剂，蒸发溶剂，用水冷冻干燥，制得200mg(89％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)δ1．0-2．0(m，11H)，2．25(m，1H)，2．70(m，1H)，3．30(m，1H)，3．75(m，1H)，4．30(m，1H)，4．45(m，1H)，4．55(m，2H)，7．60(m，2H)，7．77(m，2H)。MS m／z 372(M++1)。
实施例56HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc(ⅰ)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)溶于5 ml CH2Cl2的0．250g(0．47mmol)H-(R)Cha-Pro-Pab(Z)(见实施例15)冷却至-10℃并慢慢加入溶于3 ml CH2Cl2的150mg(0．48mmol)TfOCH2COOBn(见起始物的制备)。再加入200mg(1．45mmol)碳酸钾，将混合物在室温下搅拌20 hr。混合物用CH2Cl2稀释、用水萃取、干燥(MgSO4)。蒸去溶剂，用洗脱剂CH2Cl2／MeOH(9／1)进行闪色谱处理，得到150mg(46％)标题化合物。
(ⅱ)HOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab×HOAc150mg(0．2mmol)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)于20ml乙醇中在50 mg 5％Pd／C上常压氢化4 hr。滤去催化剂、蒸发溶剂，用洗脱剂CH3CN／0．1M NH4OAc1／4进行RPLC精制处理，得到35 mg(37％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ1．00(m，1H)，1．20-1．45(m，5H)，1．5(m，1H)，1．6-1．8(m，6H)，1．9-2．1(m，6H)，2．25(m，1H)，3．25(m，1H)，3．5(m，1H)，3．85(m，1H)，4．15(m，1H)，4．35-4．6(m，3H)，4．9(m，被HOD线部分掩盖，6H)，7．55(d，2H)，7．75(d，2H)。
实施例57MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(ⅰ)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)向0．425g(0．81 4mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(见实施例1)、0．894g(5．04mmol)K2CO3于CH2Cl2(总计4．3ml)的混合物中于室温下慢慢加入溶于CH2Cl2的0．186g(0．841mmol)Tfo-CH2-COOMe(见起始物的制备)并搅拌过夜。再加入CH2Cl2，混合物水和盐水洗涤，干燥、过滤、真空蒸发溶剂，得到0．51g残余物，残余物在硅胶闪色谱上先用CH2Cl2／THF／MeOH(16／41)，再用CH2Cl2／THF(2％NH3)(8／2)最后用乙醚／MeOH(NH3-饱和)(95／5)洗脱三次，得到0．324g(67％)标题化合物。
(ⅱ)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl在1．14ml 1N HCl，6．5 ml MeOH和300mg Pd／C存在下将220mg(0．38mmol)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)氢化2 hr。用硅藻土和微孔滤纸上滤去催化剂，随后真空蒸发溶剂，并冷冻干燥二次得到178mg(91％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ1．12-1．4(m，5H)，1．68-1．81(m，2H)，1．81-1．9(m，3H)，1．97-2．1(m，1H)，2．29-2．4(m，
1H)，2．68-2．8(m，1H)，3．86(s，3H)，4．1(s，2H)，4．1-4．5(d，1H)，4．36-4．42(t，2H)，4．59(s，2H)，4．99-5．04(m，1H)，7．65-7．7(d，2H)，7．8-7．85(d，2H)。
13C-NMR(75 MHz，MeOD)脒碳和羰基碳δ 146．78，167．68，168．15，172．29。
实施例58EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(ⅰ)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)0．443g(0．876mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(见实施例1)和0．931g(5．26mmol)K2CO3的混合物溶于冰浴冷却的CH2Cl2(总计4ml)，并向其中缓慢加入溶于CH2Cl2的0．208g(0．876mmol)Tfo-CH2-COOEt(见起始物的制备)。2 hr后移去冰浴并在室温下继续搅拌2小时。再加入CH2Cl2，混合物用水和盐水洗涤，干燥、过滤并真空蒸发溶剂，得到0．51g残余物，残余物用洗脱剂乙醚／MeOH(NH3-饱和)进行闪色谱处理，得到0．387g(75％)标题化合物。
(ⅱ)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2 HCl在12ml EtOH(99．5％)和390mg Pd／C存在下将395mg(0．668mmol)EtOOC-CH2-(R)Cgl-hze-Pab(Z)氢化5 hr。用硅藻土和微孔滤纸上滤去催化剂，随后真空蒸发溶剂，并冷冻干燥二次，得到281mg(88％)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab，加入2当量1N HCl，冷冻干燥三次，得到288mg(81％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ1．05-1．48(m，8H)，1．6-2．05(m，6H)，2．15-2．33(m，1H)，2．58-2．79(m，1H)，3．89-4．0(m，3H)，4．2-4．33(m，3H)，4．33-4．44(m，1H)，4．44-4．66(m，2H)，4．91(m，1H(被H-O-D信号部分遮蔽))，7．54-7．63(d，2H)，7．72-7．84(d，2H)。
实施例59nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×HOAc(ⅰ)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)用Tfo-CH2-COOnBu作为烷基化试剂，按所述用于nHeXOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)的方法(见实施例60(ⅰ))进行制备。粗产物先用洗脱剂CH2Cl2／MeOH(95／1)后用CH2Cl2／异丙醇(90／7)进行闪色谱处理共二次，得到324mg(47％)标题化合物。
(ⅱ)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×HOAc按实施例57(ⅱ)中的所述方法进行脱保护，粗产物在RPLC上用溶于0．05N NH4OAc的CH3CN(30％)和0．05M HOAc作为洗脱液精制，得到100mg(53％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，MeOD)；δ0．85-2．1(m，18H)，2．15-2．37(m，1H)，2．58-2．8(m，1H)，3．7-5．0(m，10H)，4．88-5．0(被H-O-D信号部分掩盖))，7．46-7．65(d，2H)，7．71-7．88(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，MeOD)脒碳和羰基碳δ146．8，168．12，168．2，172．2。
实施例60nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl(ⅰ)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)0．695g(1．375mmol)H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)(见实施例1)和1．463g(8．25mmol)K2CO3的混合物溶于CH2Cl2(总计4ml)中，在＜-10℃下慢慢加入溶于CH2Cl2的0．402g(1．375mmol)TfO-CH2-COOnHex(见起始物的制备)，1 hr后移去CO2-冰浴并在室温下继续搅拌45分钟。再加入CH2Cl2，混合物用水和盐水洗涤，干燥、过滤，真空蒸发溶剂，得到0．828g残余物，残余物在闪色谱上先用乙醚／MeOH(NH3-饱和)(95／5)后用CH2Cl2／MeOH(NH3-饱和)(95／5)冲洗处理二次，得到0．42g(47％)标题化合物。
(ⅱ)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab×2HCl在12 ml THF和400mg Pd／C存在下将400mg(0．617mmol)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)氢化1．5hr还不能使其完全脱保护。于是在1．7ml 1N HCl，12ml MeOH和340mg Pd／C存在下氢化4 hr使反应完全。用硅藻土和微孔滤纸滤去催化剂，然后真空蒸发溶剂并冷冻干燥二次，得到287mg(79％)标题化合物。1H-NMR(300 MHz，MeOD)；δ0．8-2．13(m，22H)，2．13-2．31(m，1H)，2．61-2．81(m，1H)，3．93-4．15(m，3H)，4．15-4．37(m，3H)，4．37-4．7(m，3H)，4．88-5．0(m，1H(被H-O-D-信号部分掩盖))，7．52-7．69(d，2H)，7．75-7．9(d，2H)。13C-NMR(75 MHz，MeOD)脒碳和羰基碳δ146．84，167．67，167．84，172．17。
实施例61H-(R)Cgl-Pro-Pac×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)向708g(1．95mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(见起始物的制备)，714mg(2．0mmol)H-Pac(Z)×2HCl(见起始物的制备)和1．078g(8．8mmol)DMAP于12．5ml乙腈的搅拌溶液中在0℃下加入377mg(1．97mmol)EDC。反应混合物自行升温至室温过夜。真空除去溶剂，残余物用洗脱剂溶于二氯甲烷的10％甲醇进行闪色谱和RPLC处理。分离出二个馏份(51 mg和150mg)，MS m／z=626(M+1)。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)向141mg(0．22mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)于50 ml乙酸乙酯的溶液中鼓泡通入氯化氢气体。15分钟后加入10％NaCO3溶液，分出有机相并干燥(K2CO3)，蒸去溶剂得到71mg(61％)产物。
(ⅲ)H-(R)Cgl-Pro-Pac×2HCl71mg(0．14mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)和一小勺10％Pd／C的混合物于10ml乙醇中，在室温下和常压下氢化2 hr。过滤除去催化剂，真空除去溶剂，残余物溶于50 ml水和0．6g 1M盐酸中。冷冻干燥得到38mg(58％)标题化合物。
MS m／z 392(M+1)实施例62HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac×HOAc(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)84 mg(0．15mmol)H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)(见实施例53(ⅱ))、一勺碳酸钾和47 mg TfOCH2-COOBn(见起始物的制备)的混合物于3ml二氯甲烷中在室温下搅拌过夜。反应混合物经过滤和真空除去溶剂得到残余物，残余物在闪色谱上用乙酸乙酯／二氯甲烷／甲醇95∶20∶5冲洗，分离出29mg所需产物。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac×HOAc29mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)和37mg 10％Pd／C的混合物于5 ml乙醇中，在室温和常压下搅拌4 hr，滤去催化剂，随后去除溶剂并用RPLC纯化，得到所需产物。
MS m／z=464(M+1)实施例63HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(ⅱ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)0．35g(0．64mmol)H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)(见实施例61(ⅱ))、124mg(0．76mmol)丙烯酸苄酯和280μl(2mmol)三乙胺于1ml EtOH的溶液在室温下保持3天。除去溶剂后用HPLC纯化得到18 mg(4％)标题化合物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac18mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)和一小勺10％Pd／C的混合物在EtOH中于室温和常压下氢化2 hr。过滤、真空除去溶剂、溶于水和冷冻干燥，得到7 mg(78％)标题化合物。MS m／z=464(M+1)实施例64HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)0．4g(1．38mmol)H-Pac(Z)(见起始物H-Pac(Z)×2HCl的制备)、0．5g(1．41mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)和0．67g(5．5mmol)DMAP于20 ml乙腈的溶液在0℃下与溶于15 ml乙腈的0．26g(1．4mmol)EDC溶液混合，反应混合物温度保持室温过夜，真空除去溶剂。残余物在乙酸乙酯和水之间分配。水相用乙酸乙酯再萃取一次，合并有机相，用硫酸氢钠溶液、碳酸钠溶液和盐水洗涤，干燥(硫酸钠)，蒸发溶剂得到0．54g(63％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)0．54g(0．9mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)的乙酸乙酯溶液中鼓泡通入氯化氢气体。将溶液在冰箱中保存过夜后真空除去溶剂。残余物于溶乙酸乙酯。溶液经碳酸氢钠水溶液、水和盐水洗涤，干燥(硫酸钠)。除去溶剂得到0．35g(77％)产物。
(ⅲ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)将180mg(0．33mmol)H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)和53 mg(0．33mmol)丙烯酸苄酯的乙醇溶液在室温下保持60 hr。真空除去溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯。溶液用硫酸氢钾溶液、碳酸氢钠溶液和盐水洗涤。干燥(硫酸钠)并真空去除溶剂后得到残余物，残余物在闪色谱上用10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱纯化，得到150mg(66％)标题化合物。
(ⅳ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac×2HCl115mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)与67mg10％Pd-C于10ml乙醇的混合物在室温和常压下氢化1．5hr。过滤，真空除去溶剂，将残余物溶于水和1．5ml 1M HCl制成溶液，冷冻干燥得到30mg(33％)标题化合物。
MS m／z 464(M+1)实施例65HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)向0．473g(1．236mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)、0．404g(1．236mmol)H-Pig(Z)×HCl(见起始物的制备)和0．604g(4．94mmol)DMAP于13．5ml DMF的混合物中在＜-15℃时加入0．249g(1．298mmol)EDC，将温度升至室温过夜。真空蒸发溶剂并加入EtOAc和2M KHSO4。二相分离，有机相用饱和Na2CO3和盐水洗涤。重复萃取过程一次后干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发溶剂，得到0．612g残余物，残余物用洗脱液EtOAc／MeOH 9／1进行闪色谱处理，得到407mg(53％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)0．4g(0．638mmol)Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)溶于24．4mlTFA／CH2Cl21／4，在冰浴中搅拌30分钟后在室温下搅拌30分钟。真空除去溶剂并加入EtOAc和饱和Na2CO3。二相分离，有机层用水和盐水洗涤、干燥(Na2SO4)，过滤和真空蒸发溶剂，得到336mg(100％)标题化合物。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)0．296g(0．562mmol)H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)和0．171g(1．236mmol)K2CO3于6 ml CH3CN的混合物在油浴中加热至60℃后缓慢加入89ml(0．562mmol)BnOOC-CH2-Br，1 hr 45min后蒸去溶剂，并加入EtOAc。混合物用水洗涤、干燥(Na2SO4)、过滤和真空蒸发溶剂，得到346mg残余物，残余物用洗脱剂CH2Cl2／THF／MeOH(8／2／1)进行闪色谱处理，得到297mg(78％)标题化合物。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig×2HCl在1．7ml 1N HCl、10ml EtOH(99．5％)和300mg Pd／C存在下将243mg(0．36mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)氢化2 hr。用硅藻土和微孔滤纸滤去催化剂，真空蒸发溶剂，并冷冻干燥二次，得到166mg(88％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ0．6-1．9(m，18H)，2．1-2．27(m，1H)，2．52-2．76(m，1H)，2．82-3．2(m，4H)， 3．46-3．61(m，1H)，3．61-3．81(m，2H)，3．81-4．0(m，2H)，4．0-4．24(m，2H)，4．24-4．4(m，1H)。
实施例66HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)向0．3495g(0．95mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)、0．464g(3．8mmol)DMAP和0．31 0g(0．95mmol)H-Pig(Z)×HCl(见起始物的制备)于5 ml CH2Cl2的混合物中加入0．192g(1 mmol)EDC，混合物在室温下搅拌过夜。混合物蒸发后将残余物溶于乙酸乙酯。有机相用0．3M KHSO4洗涤二次用盐水洗涤一次，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发。粗产物在闪色谱上用梯度冲洗液CH2Cl2／MeOH(100／0、97／3、95／5、90／10)处理纯化，得到307mg标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)将0．306g(0．48mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)溶于30mlHCl饱和的乙酸乙酯中。将混合物静置半小时。蒸去溶剂，并将残余物溶于CH2Cl2。有机层用0．2M NaOH洗涤二次。合并水层，用CH2Cl2萃取一次，合并有机层，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到257mg(99％)标题化合物。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)0．256g(0．473mmol)H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)、0．144g(1．04mmol)K2CO3和82μl(0．521mmol)溴乙酸苄酯于6 ml乙腈的混合物在搅拌下加热至60℃反应2小时。蒸去溶剂，将残余物溶于CH2Cl2，用水和盐水各洗涤一次、干燥(Na2SO4)，过滤和蒸发溶剂，得到粗产物。粗产物在闪色谱上用梯度冲洗液CH2Cl2／MeOH(97／3、95／5、90／10)分离纯化得到0．2g产物(根据RPLC的纯度为90％)。最后将产物置于2 mm硅石板色谱管(Harrisonresearch model 7924T)中用CH2Cl2／MeOH 95／5冲洗，制得0．158g(48％)纯产物。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl0．158g(0．227mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)与0．075g Pd／C(5％)、1．0ml 1N HCl溶液和10ml乙醇混合，在常压下氢化1小时。用硅藻土过滤、蒸发溶剂，用水冷冻干燥二次，得到119mg(97％)产物。1H-NMR(D2O，300 MHz)δ0．95-1．44(m，7H)，1．52(m，1H)，1．60-2．20(m，13H)，2．39(m，1H)，3．07-3．32(m，4H)，3．68(m，1H)，3．77-4．02(m，5H；其中3．98(s，2H)，4．44-4．58(m，2H)13C-NMR(D2O，75 MHz)羰基碳和胍碳δ156．5，168．3，169．6，174．5。
实施例67HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)将0．297g(0．55mmol)H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(见实施例66(ⅱ))溶于2 ml乙醇并加入90μl(0．59mmol)丙烯酸苄酯。反应混合物在室温下搅拌4天。蒸去溶剂，粗产物在2mm硅石板色谱管(Harrison research model 7924T)中用梯度洗脱液CH2Cl2／MeOH 95／5，90／10)处理，得到0．338g(8．7％)标题化合物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl0．238g(0．227mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)与0．120g Pd／C(5％)、1．2ml 1N HCl溶液和15ml乙醇混合，在常压下氢化1小时。用硅藻土过滤催化剂，蒸发溶剂，在水中冷冻干燥二次，得到178mg(95％)标题化合物。1H-NMR(D2O，300 MHz)δ0．82-1．45(m， 8H)，1．45-2．15(m，13H)，2．29(m，1H)，2．83 (t，2H)，2．9-3．4(m，6H)，3．57(bq，1H)，3．67-3．87(m，3H)，4．25-4．43(m，2H)13C-NMR(D2O，75 MHz)羰基碳和胍碳δ 156．3，168．2，174．3，174．6。MS m／z 479(M++1)实施例68(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig×2HCl在0．75mg 1N HCl、7ml EtOH(99．5％)和150mg Pd／C存在下将120mg(0．126mmol)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2(见实施例50(ⅲ))氢化4 hr，用硅藻土和微孔滤纸滤去催化剂，真空蒸发溶剂，冷冻干燥得到66 mg(90％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，D2O)；δ1．05-1．38(m，7H)，1．53-1．64(d，1H)，1．64-2．14(m，11H)，2．27-2．39(m，1H)， 3．03-3．28(m，4H)，3．58-3．70(m，1H)，3．7-3．8(m，1H)，3．8-3．9(d，2H)，4．07-4．22(m，2H)，4．22-4．35(m，1H)，4．38-4．5(m，1H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 156．28，166．73，170．14，174．01。
实施例69HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)向100mg(0．14mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(见实施例67(ⅰ))和80 mg(0．57mmol)碳酸钾于4 ml CH2Cl2的冷却(冰浴温度)混合物中小心地加入溶于1 ml CH2Cl2的64ml(0．21mmol)TfO-CH2-COOBn溶液。反应混合物在0℃放置30分钟，使其升至室温放置2h，然后加热回流30分钟并在室温下放置过夜。蒸发溶剂，用洗脱剂CH2Cl2／MeOH(97／3)进行闪色谱处理，得到65 mg(54％)标题化合物。
(ⅱ)HOOC-CH2-CH2-(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig×2HCl将65 mg(0．08mmol)BnOOC-CH2-CH2-(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)溶于10 ml EtOH／1M HCl(9／1)，在10％Pd／C上常压氢化3 hr。过滤催化剂、蒸发溶剂，用水冷冻干燥，得到40 mg(97％)标题化合物，为白色粉末。13C-NMR(125 MHz，MeOD)脒基和羰基碳δ 157．5，167．2，169．1，173．7和174．1。
实施例70HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)将Boc-(R)Cgl-Aze-OH(见起始物的制备)(400mg，1．17mmol)、H-(R，S)Itp(Ts)(见起始物的制备)(366mg，1．23mmol)和DMAP(286mg，2．34mmol)溶于CH3CN(6 ml)并冷至5℃。加入EDC(236mg，1．23mmol)，将所得混合物在室温下搅拌过夜。除去CH3CN并将残余物溶于MeOH／EtOAc／H2O。分离出的有机层用K2CO3(饱和)、2M KHSO4、盐水洗涤，干燥(Na2SO4)。蒸去溶剂产出688mg(85％)白色固体。
MS m／z 620(M++1)(ⅱ)H-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)将Boc-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(500mg，0．8mmol)溶于CH2Cl2(50ml)并鼓泡通入HCl(气)约4 min。45min后蒸发除去溶剂，所得产物溶于EtOAc／MeOH／H2O并用2M NaOH(aq)将酸性溶液pH值调至8-9，分出有机层并干燥(Na2SO4)。蒸去溶剂得到425mg(100％)标题化合物，为白色固体。
MS m／z 520(M++1)(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)将H-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(400mg，0．77mmol)、苄基-2-(对-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯(见起始物的制备)(325mg，0．92mmol)和K2CO3(235mg，1.7mmol)置于CH3CN(5ml)中，在45℃下搅拌反应几小时后反应转化率仅为25％，于是将温度升高至60℃并再加入一定量的苄基-2-(对-硝基苯磺酰氧基)乙酸酯使反应继续搅拌进行48 hr(起始物与产物的克数比达到25∶63)，然后进行后处理。蒸去溶剂，向残余物中加入EtOAc／H2O。二相分离，水相用EtOAc洗涤二次，合并有机相，用K2CO3(饱和溶液)、2MKHSO4和水洗涤并干燥(Na2SO4)，经酸性KHSO4反萃取后得到约340mg物料，用RPLC精制，得到34mg(7％)标题化合物。
MS m／z 668(M++1)
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp×2HCl将BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(34 mg，0．05mmol)溶于THF(5 ml)，并用干冰冷却器将NH3(气)(40ml)通入反应烧瓶中。加入Na(S)，出现深蓝颜色。反应搅拌进行5分钟后用HOAc(50μl)中止反应。移去干冰冷却器使NH3(1)挥发。残余物中加入H2O和HOAc使之pH=7。冷冻干燥，在制备RPLC上处理得到几个馏分，用FAB-MS分析。两个馏分含有所需化合物，用2．2当量的1M HCl冷冻干燥，得到3 mg(10％)。
MS m／z 424(M++1)实施例71HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)(169mg，0．5mmol)、H-(R，S)Itp(Ts)(见起始物的制备)(155mg，0．52mmol)和DMAP(122mg，1 mmol)溶于CH3CN(2．5ml)并冷却至5℃。加入EDC×HCl(115mg，0．6mmol)，所得混合物在室温下搅拌过夜，此后再加入(0．5当量)H-(R，S)Itp(Ts)和EDC。并继续搅拌一晚，按前述用于Boc-(R)Cgl-Aze-(R，S)Ite(Ts)(见实施例70)的方法对反应混合物进行处理，得到260mg粗产物，经RPLC纯化得到180mg(57％)标题化合物。
MS m／z634(M++1)(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)将Boc-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)(180mg，0．28mmol)溶于CH2Cl2(20 ml)并鼓泡通入HCl(气)约4 min。45 min后蒸发除去溶剂，将所得产物溶于CH2Cl2并用2M NaOH洗至pH=8-9。分出有机相，干燥(Na2SO4)，蒸发得到163mg(约100％)产物。
MS m／z 534(M++1)(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp(Ts)在60℃下搅拌在CH3CN(1．5ml)中的H-(R)Cha-Aze-(R，S)Ite(Ts)(80 mg，0．15mmol)、K2CO3(45 mg，0．33mmol)和Br-CH2COOBn(39mg，0．17mmol)2．5hr。蒸去溶剂，残余物溶于EtOAc／H2O。分成二想，有机相用10％柠檬酸洗涤，干燥(Na2SO4)、蒸去溶剂得到171mg粗产物，粗产物用RPLC纯化产出53mg(52％)标题化合物。
MS m／z 681(M++1)(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp按所述用于BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)Itp(Ts)(见实施例70(ⅳ))的方法对BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)Itp(Ts)(50mg，0．07mmol)进行处理，所得产物混合物经RPLC精制得到12 mg由标题化合物与在质谱439(m／z)处出现的还原形态所组成的1∶1混合物。
MS m／z 438(M++1)实施例72H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Ts)在室温下，将2．1g(5．5 mmol)Boc-(R)Cha-Pic-OH(见起始物的制备)、1．0g(8．2mmol)DMAP和1．7g(5．8mmol)H-(R，S)Itp(Ts)(见起始物的制备)溶于40 ml乙腈。搅拌几分钟后加入1．1g(5．8mmol)EDC并继续搅拌60小时。真空蒸去溶剂，残余物溶于CH2Cl2用水、0．3M KHSO4和KHCO3(水溶液)洗涤、干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂，用硅胶过滤得到2．43g(62％)产物。
MS m／z 661(M++1)(ⅱ)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp将2．4g(3．6mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Ts)溶于15 ml THF并将NH3(气)冷凝入烧瓶，随后再加入Na。 5 min后用乙酸中止反应并蒸去NH3和THF。残余物在水中冷冻干燥，用RPLC(CH3CN／0．1M NH4OAc，6／4)纯化得到0．93g(51％)所需产物。
MSm／z507(M++1)(ⅲ)H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl在室温下，将50 mg(0．099mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp溶于用HCl(气)饱和的乙酸乙酯。搅拌2 hr后真空除去溶剂，残余物用水冷冻干燥三次得到35mg(74％)所需产物。
MSm／z407(M++1)实施例73HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)在室温下，将0．84g(1．66mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(见实施例72)溶于10ml CH2Cl2和10ml 0．5M NaOH中。滴加入0．29ml(1．82mmol)Z-Cl。搅拌3 hr后，二相分离，有机相用水洗涤，用Na2SO4干燥。蒸发，用闪色谱(乙酸乙酯／庚烷9／1)处理得到0．5g(47％)所需产物。
MS m／z 641(M++1)(ⅱ)H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)
在室温下，将0．5g(0．78mmol)Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)溶于用HCl饱和的乙酸乙酯中。加入水并用K2CO3碱化混合物。二相分离。水相用CH2Cl2萃取而有机相用水洗涤。合并有机相，干燥(Na2SO4)。蒸去溶剂得到0．3g(71％)所需产物。
MS m／z 541(M++1)(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)0．29g(0．5mmol)H-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)和0．15g(1mmol)K2CO3溶于25ml乙腈。加入154mg(0．6mmol)溴乙酸苄酯，在50℃下搅拌混合物4 hr。蒸发，用RPLC(乙腈0．1MNH4OAc 70∶30)纯化得到约200mg所需产物。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp×2HCl将200mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)溶于乙醇中。加入1小勺10％Pd／C，混合物氢化4 hr。经hyflo过滤、蒸发溶剂，用水冷冻干燥得到53 mg所需产物。1H NMR(300．13 MHz，D2O)；δ 1．0-2．35(重叠m，22H)，3．28-3．51(m，5H)，3．51-3．64(m，1H)，3．75-4．03(m，3H)，5．03-5．14(s宽峰，1H)。一个质子的信号被H-O-D信号部分掩盖。
MS m／z 465(M++1)实施例74H-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)向1．0g(2．95mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-OH(见起始物的制备)、1．44g(11．8mmol)DMAP和1．12g(3．25mmol)H-(R，S)Hig(Z)(见起始物的制备)于15ml CH2Cl2中的混合物中加入0．62g(3．2mmol)EDC，在室温下搅拌混合物过夜。蒸去溶剂，将残余物溶于乙酸乙酯。有机层用0．3M KHSO4溶液洗涤二次时，油状物从有机层中分离出来。将乙酸乙酯层干燥(Na2SO4)并过滤。而油和水层用CH2Cl2萃取。干燥有机层(Na2SO4)，过滤，与前面的乙酸乙酯相混合。经蒸发得到粗产物，粗产物在色谱管(Harrison research，model 7924T)上用2mm氧化硅板和梯度冲洗剂CH2Cl2／MeOH(97／3、95／5、90／10)纯化得到1．1g(59％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig×2HCl将81mg(0．13mmol)Boc-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)溶于50ml用HCl饱和的乙酸乙酯中。保持一小时后蒸发。将残余物溶于10 ml乙醇。加入40 mg Pd／C(5％)、1 ml水和0．5ml 1M HCl溶液，在常压下氢化混合物过夜。硅藻土过滤催化剂，蒸发溶剂，用水冷冻干燥3次后得到75％收率的标题化合物。1H-NMR(D2O，300 MHz)δ0．95-1．35(m，5H)，1．50-2．45(m，15H)，3．02(bt，1H)，3．1-3．8(m，7H)，4．13(d，1H)，4．38(bd，1H)13C-NMR(D2O，75 MHz)羰基碳和胍碳δ 154．8，168．9，174．4。
MS m／z 393(M++1)实施例75HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig×2HCl(ⅰ)H-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)将1g(1．6mmol)Boc-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig(Z)(见实施例74(ⅰ))溶于100ml用HCl饱和的乙酸乙酯中，并保持1小时。混合物蒸发后将残余物溶于CH2Cl2。有机层用0．2M NaOH溶液洗涤二次，干燥(Na2SO4)、过滤和蒸发，得到0．825g(98％)标题化合物。
(ⅱ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)在12 ml THF中混合0．442g(0．839mmol)H-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig(Z)、0．256g(1．85mmol)K2CO3和145μl(0．512mmol)溴乙酸苄酯。混合物在40℃下搅拌1小时，再在室温搅拌过夜。蒸去溶剂，将残余物溶于CH2Cl2并有水和盐水各洗涤一次。干燥有机层(Na2SO4)、过滤并蒸发，粗产物在2mm硅石板色谱管(Harrisonresearch，model 7924T)上用梯度洗脱液CH2Cl2／MeOH(97／3、95／5、90／10)纯化，得到0．165g(29％)标题化合物。
(ⅲ)HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig×2HCl混合0．165g(0．25mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro(R，S)Hig(Z)与0．050g Pd／C(5％)、0．7ml 1M HCl溶液和10ml乙醇。混合物在常压下氢化4小时。用硅藻土过滤除去催化剂，蒸发溶剂，随后用水冷冻干燥二次，得到0．1g(75％)产物。1H-NMR(D2O，300 MHz)δ1．05-1．45(m，5H)，1．55-2．5(m，15H)，3．08(bt，1H)，3．2-4．05(m，9H)，4．30(d，1H)，4．44(m，1H)13C-NMR(D2O，75 MHz)羰基碳和胍碳δ 154．9，167．2，169．4，174．1。
实施例76H-(R)Cha-Pro(R，S)Hig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro(R，S)Hig(Z)0．72g(1．95mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)、0．95g(7．8mmol)DMAP和0．74g(2．14mmol)84％纯度H-(R，S)Hig(Z)(见起始物的制备)于10ml CH2Cl2中的混合物中加入0．486g(2．54mmol)EDC，于室温下搅拌3天。反应混合物用CH2Cl2稀释后用水洗涤一次，用0．3M KHSO4溶液洗涤二次，用盐水洗涤一次。干燥有机层(Na2SO4)、过滤、蒸发，粗产物用CH2Cl2／MeOH 95／5洗脱剂进行闪色谱纯化，得到0．450g(33％)产物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro(R，S)Hig×2HCl将50 mg(0．078mmol)Boc-(R)Cha-Pro(R，S)Hig(Z)溶于20 ml用HCl饱和的乙酸乙酯中，保持1小时。蒸发将残余物溶于10 ml乙醇。加入20mgPd／C(5％)和0．3ml 1M HCl溶液，在常压下氢化2小时。用硅藻土滤去催化剂，蒸发溶剂，用水冷冻干燥二次，得到28 mg(76％)标题化合物。1H-NMR(D2O，3 00 MHz)δ0．9-1．6(m，6H)，1．6-2．5(m，16H)，3．09(t，1H)，3．31(t，1H)，3．37-3．74(m，4H)，3．81(m，1H)，4．35-4．47(m，2H)13C-NMR(D2O，75 MHz)羰基碳和胍碳δ 154．9，169．8，174．5。
实施例77H-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)向0．50g(1．6mmol)H-Rig(Z)(见起始物的制备)、0．59g(1．6mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)和0．84g(6．9mmol)二甲基氨基吡啶于30 ml乙腈和5 ml二甲基甲酰胺中的溶液中加入0．33g(1．7mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N，-乙基碳化二亚胺盐酸盐。搅拌反应3天，然后蒸发并在硫酸氢钾水溶液和二氯甲烷之间分配。二氯甲烷层用NaHCO3水溶液和水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。粗物质用硅胶板以CH2Cl2／甲醇9／1抽滤，蒸发后得到0．78g(76％)所需产物。1H NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．8-1．9(m，27H)，2．4-2．6(m，2H)，2．78(bt，2H)，3．15-3．4(m，2H)，3．80(bt，1H)，4．0-4．4(m，4H)，4．75(bt，1H)，4．97(bd，1H)，5．08(s，2H)，7．1-7．4(m，7H)，7．74(b，1H)。
(ⅱ)H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)×2HCl盛有溶于50 ml乙酸乙酯和0．76g(1．2mmol)Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)的烧瓶在冰浴中冷却。鼓泡通入于HCl气体5 min，蒸去溶剂，得到0．74g(100％)二盐酸盐，为白色粉末。1H-NMR(300 MHz，MeOD)δ1．1-2．0(m，18H)，2．23(m，1H)，2．68(m，1H)，3．15-3．45(m，4H)，3．72(bd，1H)，3．9-4．0(bd，2H)，4．27(m，1H)，4．39(m，1H)，4．78(m，1H)，5．30(s，2H)，7．3-7．5(m，5H)。
(ⅲ)H-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl将20mg H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)的溶液和少量5％Pd／C装入烧瓶，在常压下氢化1hr。用硅藻土过滤、蒸发。残余物用几滴浓盐酸冷冻干燥得到产物，产率为8 mg(52％)。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ1．1-2．0(m，18H)，2．37(m，1H)，2．75(m，1H)，3．08(bt，2H)，3．39(bt，2H)，3．8-4．0(m，3H)，4．35-4．5(m，2H)，4．90(m，1H)。13C NMR(75．5 MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ 172．2，169．4，156．4。
实施例78HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)将0．20g(0．33mmol)H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)(见实施例77)、0．13g碳酸钾、80mg碘化钠、10ml四氢呋喃和10ml乙腈的混合物加热至60℃反应10 hr。蒸去溶剂，并将粗产物在硅胶闪色谱上用二氯甲烷／甲醇92／8冲洗提纯。收率0．13g(58％)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．9-2．1(m，18H)，2．45(m，1H)，2．61(m，1H)，2．81(m，2H)，2．88(d，1H)，3．2-3．5(m，4H)，3．94(m ， 1H)，4．0-4．25(m，3H)，4．85(m，1H)，5．12(s，2H)，5．14(s，2H)，6．9-7．2(b．2H)，7．2-7．5(m，10H)，7．95(m，1H)。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig×2 HCl0．12g(0．18mmol)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)、5 ml乙醇、3滴浓盐酸和少量5％Pd／C的混合物在常压下氢化1 hr。混合物用硅藻土过滤并蒸发。残余物用水冷冻干燥，得到91mg(98％)产物。1H-NMR(500 MHz，D2O)δ1．1-1．9(m，17H)，2．00(m，1H)，2．29(m，1H)，2．70(m，1H)，3．10(m，2H)，3．34(t，2H)，3．83(bd，2H)，3．89(dd，2H)，4．00(d，1H)，4．35(m，2H)，4．87(m，1H)。13C NMR(125．8 MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ 171．8，169．6，167．7，156．3。
实施例79HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig×2 HCl
(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)向0．25g(0．82mmol)4-氨乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z))(见起始物的制备)、0．32g(0．82mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)和0．4g(3．3mmol)二甲基氨基吡啶于10 ml乙腈和2 ml二甲基甲酰胺的溶液中加入0．165g(0．86mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N＇-乙基碳化二亚胺盐酸盐。搅拌反应3天后蒸发，并在硫酸氢钾水溶液和二氯甲烷间分配。二氯甲烷层用NaHCO3水溶液和水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。粗产物的NMR谱令人满意，并且含有一些二甲基甲酰胺的产物可直接用于下一步而无须再纯化。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-2．2(m，32H；其中1．41(s，9H))，2．34(m，1H)，2．77(bt，2H)，3．10(m，1H)，3．29(m，1H)，3．40(m，1H)，3．83(m，1H)，4．17(m，2H)，4．30(m，1H)，4．54(m，1H)，5．07(m，1H)，5．08(s，2H)，7．03(m，1H)，7．05-7．4(m，7H)。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)的粗产物于100ml乙酸乙酯的溶液装入烧瓶，并置于冰浴冷却。鼓泡通入无水HCl气体5分钟。蒸发溶液除去过量HCl。将产物溶于水并用乙酸乙酯萃取二次除去上步带入的二甲基甲酰胺。水相用NaHCO3水溶液碱化，用二氯甲烷萃取二次。合并有机相，用水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。经二步制备后的产率0．37g(81％)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．8-2．4(m，24H)，2．82(bt，2H)，3．26(m，2H)，3．42(bq，1H)，3．70(m，2H)，4．19(m，2H)，4．49(bd，1H)，5．11(s，2H)，6．9-7．5(m，8H)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)将0．18g(0．32mmol)H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)、过量碳酸钾和10ml乙腈的混合物加热至60℃反应2 hr。蒸去溶剂，粗产物在硅胶闪色谱上用CH2Cl2／甲醇95／5洗脱。收率为0．20g(88％)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ 0．8-2．1(m，23H)，2．37(m，1H)，3．1-3．5(m，7H)，4．0-4．2(m，2H)，4．54(m，1H)，5．1(m，4H)，6．9-7．5(m，13H)。
(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig×2 HCl0．15g(0．21mmol)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)、10 ml乙醇、4滴液盐酸盐和少量5％Pd／C的混合物在常压下氢化1 hr，混合物用硅藻土过滤并蒸发。残余物用水冷冻干燥得到95mg(64％)产物。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ0．85-2．1(m，23H)，2．30(m，1H)，3．10(m，2H)，3．25(m，1H)，3．35(m，1H)，3．54(m，1H)，3．85-4．0(m，3H)，4．03(d，1H)，4．41(m，1H)，4．50(m，1H)。13C-NMR(125．8 MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ 174．0，168．9，168．1，157．5。
实施例80HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z)向0．25g(0．82mmol)4-氨乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶(H-Rig(Z)(见起始物的制备)、0．31g(0．86mmol)Boc-(R)Cha-Aze-OH(见起始物的制备)和0．40g(3．3mmol)二甲基氨基吡啶于10 ml乙腈和2 ml二甲基甲酰胺的溶液中加入0．17g(0．86mmol)N-(3-二甲基氨基丙基)-N＇-乙基碳化二亚胺盐酸盐。搅拌反应3天后蒸发，并在硫酸氢钾水溶液和二氯甲烷间分配。二氯甲烷层用NaHCO3水溶液和水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。含有一些二甲基甲酰胺的粗产物无须进一步精制即用于下一步。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．85(m，1H)，0．97(m，1H)，1．1-1．75(m，26H ；其中1．41(s，9H))，1．82(bd，1H)，2．53(m，2H)，2．77(bt，2H)，3．25(m，2H)，4．03(q，1H)，4．08(m，1H)，4．18(m，2H)，4．29(m，1H)，4．78(m，1H)，4．97(m，1H)，5．09(s，2H)，7．1-7．4(m，7H)，7．65(m，1H)。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Rig(Z)将Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z)的粗产物溶于100ml乙酸乙酯的溶液装入烧瓶，并置于冰浴冷却，鼓泡通入无水HCl气体5分钟。蒸发溶液除去过量的HCl。将产物溶于水并用乙酸乙酯萃取二次除去上步带入的二甲基甲酰胺。水相加入NaHCO3(水溶液)碱化，用二氯甲烷萃取二次。合并有机相，用水洗涤，干燥(Na2SO4)并蒸发。经二步制备后的产率为0．31g(70％)。1H-NMR(300 MHz，CDCl3)δ0．8-1．9(m，20H)，2．48(m，1H)，2．73(m，1H)，2．85(bt，2H)，3．25(m，1H)，3．35(m，2H)，4．05(q，1H)，4．1-4．25(m，3H)，4．86(m，1H)，5．12(s，2H)，6．9-7．2(m，2H)，7．2-7．45(m，5H)，7．93(m，1H)。
(ⅲ)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)使0．31g(0．57mmol)H-(R)Cha-Aze-Rig(Z)和93mg(0．57mmol)丙烯酸苄酯于5ml乙醇的溶液在室温下保持一星期。蒸发，在硅胶闪色谱上用洗脱剂二氯甲烷／甲醇94／6处理，产率0．20g(49％)。1H NMR(500 MHz，CDCl3)δ0．8-1．0(m，2H)，1．1-1．8(m，18H)，2．48(m，1H)，2．54(bt，2H)，2．68(m，2H)，2．81(bt，2H)，2．87(m，1H)，3．20(m，1H)，3．25(m，1H)，3．31(m，1H)，4．04(q，1H)，4．1-4．2(m，3H)，4．84(dd，1H)，5．05-5．15(m，4H)，7．0-7．5(m，12H)，8．03(m，1H)。
(ⅳ)HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig×2HCl按实施例80中所述之制备和精制方法，将0．20g(0．28mmol)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)制成标题化合物，二盐酸盐的产率为30mg(19％)。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ1．0-1．9(m，20H)，2．33(m，1H)，2．70(m，1H)，2．83(m，2H)，3．10(m，2H)，3．3-3．4(m，4H)，3．85(bd，2H)，3．92(m，旋转异构体)，4．14(t，1H)，4．17(m，旋转异构体)，4．31(m，1H)，4．46(m，1H)，4．89(m，1H)，5．18(m旋转异构体)。13C NMR(125．8MHz，D2O)胍碳和羰基碳δ 175．4，171．8，168．8，156．3。
实施例81HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Pha-Pro-(S)Itp(Ts)在室温下，将0．87g(2．36mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)、0．78g(4．72mmol)DMAP和0．70g(2．36mmol)H-(S)Itp(Ts)(见起始物的制备)溶于12ml乙腈。搅拌20分钟后加入0．59g(3．07mmol)EDC。18小时后在真空下除去溶剂，并将残余物溶于CH2Cl2。用水、柠檬酸(10％)、KHCO3(水溶液)、水洗涤后用Na2SO4干燥。蒸发得到1．74g(＞100％)产率(纯度约为60％)所需产物。此产物无须进一步精制即用于下一步。
FAB-MSm／z=647(M++1)(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)按所述用于Boc-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)(见实施例72(ⅱ))的方法脱除Boc-保护基，得到0．75g(81％)标题化合物。
FAB-MSm／z=547(M++1)(ⅲ)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)0．75g(1．37mmol)H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)和0．38g(2．74mmol)K2CO3置于15 ml乙腈中，加入0．39g(1．65mmol)溴乙酸苄酯并在50℃下搅拌2hr。蒸去溶剂后用洗脱剂乙酸乙酯／甲醇(95／5)进行闪色谱纯化，得到530mg所需产物。
FAB-MSm／z=695(M++1)(ⅳ)HOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp×2HCl0．53g(0．76mmol)BnOOC-CH2-(R)Pha-Pro-(S)Itp(Ts)溶于15ml THF置于烧瓶中，将NH3(气)冷凝入烧瓶并加Na(m)。30分钟后用乙酸中止反应并蒸除NH3和THF，残余物用水冷冻干燥，用RPLC(乙腈／0．1M HOAc 15／85)处理，所得物用HCl水溶液冷冻干燥得到0．25g(61％)所需产物。1H-NMR(500．13 MHz，D2O)；δ0．9-2．09(重叠m，20H)，2．22-2．35(m，1H)，3．2-3．36(m，4H)，3．44-3．62(重叠m，2H)，3．7-3．8(m，1H)，3．87-3．99(m，2H)，4．33-4．48(重叠m，2H)。13C NMR(500．13 MHz，D2O)羰基碳和胍碳δ 154．3，168．1，169．0和174．2实施例82H-(R)-Cha-Pro-(R，S)Nig×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-(R，S)Nig(Z)在2ml CH2Cl2中混合174mg(0．471mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)、229mg(1．87mmol)DMAP和130mg(0．471mmol)H-(R，S)Nig(Z)(见起始物的制备)，加入117mg(0．61mmol)EDC，搅拌反应4天。混合物用CH2Cl2稀释，用水洗涤、用0．3M KHSO4溶液洗涤二次，用盐水洗涤一次。干燥(Na2SO4)有机层、过滤并蒸发，粗产物先用洗脱剂CH2Cl2／MeOH 95／5进行闪色谱纯化，再用洗脱剂CH2Cl2／MeOH 97／3进行闪色谱纯化，得到0．104g(35％)标题化合物。
MSm／z=627(M++1)(ⅱ)H-(R)Cha-Pro(R，S)Nig×2HCl将10 mg(0．016mmol)Boc-(R)Cha-Pro-(R，S)Nig(Z)溶于15 ml用HCl饱和的乙酸乙酯中。混合物保持半小时后进行蒸发。将残余物溶于6ml乙醇并加入8mg 5％Pd／C和0．1ml 1M HCl溶液。在常压下氢化一个半小时，经hyflo过滤和蒸发溶剂，得到4 mg标题化合物。1H-NMR(300 MHz，D2O)δ0．9-1．58(m，6H)，1．58-2．45(m，13H)，2．65(m，1H)，3．19(m，1H)，3．34(d，2H)，3．4-3．73(m，4H)，3．82(m，1H)，4．34-4．49(m，2H)。13C-NMR(75 MHz，D2O)羰基碳和胍碳δ 155．1，169．9和174．8。
实施例83H-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl(ⅰ)Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)向1．2g(3．31mmol)Boc-(R)Pro-Phe-OH(见起始物的制备)和1．70g(13．91mmol)DMAP于40mlCH3CN的混合物中在室温下加入0．98g(3．35mmol)H-Pab(Z)(见起始物的制备)溶于1ml DMF的溶液。搅拌2hr后将混合物冷却至-18℃并分批加入0．66g(3．48mmol)EDC，在室温下反应过夜。蒸去溶剂并将残余物溶于100ml EtOAc，用1×30ml水、3×30ml 0．3M KHSO4、1×30ml Na2CO3和1×30ml水洗涤，干燥。蒸发溶剂，用洗脱剂CH2Cl2／MeOH(95／5)进行闪色谱处理，得到0．691g(38％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)将0．673g Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)溶于30ml EtOAc中，溶液用HCl(气)饱和几分钟(溶液出现白色固体沉淀)。蒸去溶剂和过量的HCl，残余物中加入60ml EtOAc，并用2×20ml 2MNaOH洗涤有机相。洗涤水用1×25ml EtOAc萃取，萃取后的EtOAc与其他EtOAc相合并，合并有机相用水洗涤、干燥和蒸发，得到560mg(98％)所需产物。1H-NMR(500 MHz，CDCl3)δ 1．5-1．74(m，3H)，1．98-2．05(m，1H)，2．78-2．85(m，1H)，2．90-2．96(m，1H)，3．0-3．2(ABx-体系中心在3．1，2H)，3．62(dd，1H)，4．3-4．45(ABX-体系中心在4．37，2H)，4．58(q，1H)，5．22(s，2H)，6．96(bt，1H)，7．1-7．4(m，10H)，7．46(d，2H)，7．76(d，2H)，8．12(d ， 1H)。
(ⅲ)H-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl将200mg H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)溶于10ml 95％EtOH和2ml水中，混合物在5％Pd／C上常压氢化5hr。滤去催化剂，加入1ml 1M HCl，经蒸发和冷冻干燥脱水，得到88％产率的标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD)1．51-1．59(m，1H)，1．69-1．80(m，1H)，1．87-1．97(m，1H)，2．19-2．29(m，1H)，2．90(dd，1H)，3．20-3．33(m，3H，被溶剂峰部分掩盖)，4．27(m，1H)，4．43-4．54(AB-系中心位于4．48，2H)，4．75-4．81(m，1H)，4．87(s，2H)，7．2-7．3(m，5H)，7．45(d，2H)，7．75(d，2H)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 166．7，170．1和173．4。
实施例84HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)向244mg(0．463mmol)H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)(见实施例83)和159．9g(1．157mmol)K2CO3于8ml DMF／CH3CN(5／3)的浆液中加入于2ml DMF中的127．2mg(0．555mmol)溴乙酸苄酯，混合物在60℃下搅拌1．5hr，在室温搅拌过夜。蒸去溶剂，将残余物溶于50ml EtOAc，用2×20ml水洗涤、干燥(Na2SO4)、蒸发溶剂，用洗脱剂CH2Cl2／MeOH(9／1)进行闪色谱处理，得到176mg(56％)标题化合物，为白色固体。1H-NMR(300 MHz)，CDCl3)δ1．45-1．80(m，3H)，2．06(m，1H)，2．54(m，1H)，2．92-3．28(m，6H)，4．3-4．5(ABX-体系中心在atδ=4．4，2H)，4．60(dd，1H)，5．10(s，2H)，5．2(形似s，2H)，7．1-7．4(m，15H)，7．43(d，2H)，7．75(d，2H)，7．932(d，1H)。
(ⅱ)HOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab×2HCl将170mg(0．252mmol)BnOOC-CH2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)溶于12ml EtOH／水(5／1)，在5％Pd／C上常压氢化4．5hr。滤去催化剂，蒸去溶剂，用HCl(水溶液)冷冻干燥残余物，得到标题化合物。1H-NMR(500 MHz，CD3OD)δ1．62(m，1H)，1．82(m，1H)，2．08(m，1H)，2．38(m，1H)，2．90(dd，1H)，3．25-3．35(m，2H)，被溶剂峰部分掩盖)，3．80(m，1H)，4．08-4．19(AB-体系中心位于δ=4．19，2H)，4．39(m，1H)，4．45-4．58(AB-体系中心位于δ=4．50，2H)，4．80(m，1H)，7．20-7．35(m，5H)，7．45(d，2H)，7．75(D，2H)。13C-NMR(125 MHz，D2O)脒碳和羰基碳δ 166．8，169．1，169．5和173．2。
实施例85H-(R)Phe-Phe-Pab(ⅰ)Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)在50ml乙腈中溶入Boc-(R)Phe-Phe-OH(16．4mmol)(见起始物的制备)、Pab(Z)-HCl(18．0mmol)和4-二甲基氨基吡啶(24．6mmol)溶液冷至冰-水温度并加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐(21．3mmol)。撤去冷浴并将反应混合物搅拌过夜。减压蒸发溶剂，将残余物溶于50ml乙酸乙酯中，所得溶液用50ml水萃取。从二相混合物沉淀出的Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)经过滤，用水洗涤，在45℃下真空干燥24hr，得到8．7g(78％)。1HNMR(200 MHz，d-CHCl3and d4-CH3OH)；δ 8．35-7．00(m，19H)，4．63(t，1H)，4．3-4．1(m，1H)，3．40-2．70(m，6H)，1．30(s，9H)。
(ⅱ)H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)将Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(10．3mmol)浆化于70ml乙酸乙酯中，加入31 ml 3．3M乙酸乙酯／HCl。搅拌浆液4 hr后，将H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)的盐酸盐滤出，并用乙酸乙酯洗涤几遍。用50 ml二氯甲烷、50 ml 1M碳酸钾和约5 ml乙醇的混合物溶解所得的盐，收集有机层，减压除去溶剂，得到5．0g H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(84％)。1H NMR(200 MHz，d6-DMSO)；δ 9．1(s，2M)，8．59(m，1H)，8．1(m，1H)，7．90(d，2H)，7．4-7．0(m，17H)，5．09(s，2H)，4．58(m，1H)，4．31(m，2H)，3．1-2．7(m，4H)。
(ⅲ)将H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0．42mmol)溶于10 ml四氢呋喃和1 ml水中。加入炭载钯(42 mg)后，将混合物置于Parr摇动装置中于45 psi氢压下氢化2天。氢解反应完成后，用甲醇稀释混合物并滤去催化剂，蒸发溶剂，得到H-(R)Phe-Phe-Pab粗品，在中性氧化铝(70-230目)色谱上用二氯甲烷-甲醇-氢氧化铵(80∶20∶2)冲洗纯化，得到76mg(41％)标题化合物。1HNMR(200 MHz，d6-DMSO)；δ7．61(d，2H)，7．4-7．0(m，12H)，4．64(m，1H)，4．44(m，2H)，4．13(t，1H)，3．1-2．8(m，4H)。
实施例86HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(ⅰ)MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)将H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0．87mmol)(见实施例85(ⅱ))溶于10ml四氢呋喃中。在冰水浴冷却溶液并先后加入三乙胺(1．73mmol)和甲基草酰氯(0．95mmol)。移去冷却浴，并将反应混合物在环境温度下搅拌18hr。反应混合物用乙酸乙酯稀释并用水萃取。收集有机相，减压除去溶剂，得到无须精制即用于下一步的0．45g MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(78％)。TSP-MS发现m／z 664(MH+(C37H38N5O7)计算值664)。
(ⅱ)HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)将MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0．68mmol)溶于4 ml四氢呋喃和2 ml水。加入氢氧化锂(2．6mmol)，在室温下搅拌1．5hr。水解反应完成后用25ml水稀释反应混合物，加入0．5ml乙酸酸化，过滤沉淀物，用水洗涤几次，在45℃下真空干燥，得到0．40g粗品HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)。粗产物浆化于10 ml乙醇和1 ml水中。使溶液回流，将其中的不溶性标题化合物滤出，得到0．23gHOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(经二步后的得率为41％)。
1H NMR(200 MHz，d6-DMSO)δ 8．62(m，2H)，8．41(d，1H)，7．89(d，2H)，7．4-6．9(m，17H)，5．10(s，2H)，4．54(m，2H)，4，34(m，2H)，3．2-2．6(m，4H)。
(ⅲ)HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab将HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0．20mmol)浆化于20ml四氢呋喃和5 ml水中。加入炭载钯(52 mg)，将混合物置于Parr摇动装置中，在45 psi氢压下氢化2天。氢解完成后用甲醇40 ml稀释混合物并滤去催化剂。蒸发溶剂得到50 mg标题化合物(49％)。1H NMR(200 MHz，d6-DMSO)；δ 9．2(s)，8．78(d)，8．60(m)，7．91(m)，7．79(d，2H)，7．35-6．8(m，12H)，4．6-4．0(m，4H)，3．0-2．6(m，4H)。
实施例87HOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(ⅰ)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)将H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0．87mmol)(见实施例85(ⅱ))和碳酸钾(2．6mmol)浆化于10ml乙腈中。加入碘代乙酸苄酯(0．95mmol)，反应溶液加热至30℃并在此温度下搅拌二天。烷基化结束后除去溶剂并将残余物溶于10ml乙酸乙酯。溶液用10ml水快速萃取，标题化合物从合并的有机层中沉淀出来。经过滤和45℃真空干燥24hr得到177mg BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(28％)1HNMR(200 MHz，CDCl3)；δ7．79(d，2H)，7．5-7．1(m，22H)，6．55(t，1H)，5．21(s，2H)，5．03(s，2H)，4．64(m，1H)，4．41(m 2H)，3．3-2．6(m，7H)。
(ⅱ)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)将BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)(0．32mmol)浆化于30 ml四氢呋喃和3ml水中。加入炭载钯(41mg)，将混合物置于Parr摇动装置中，在45psi氢压下氢化2天。氢解完成后用40ml水稀释混合物并滤去催化剂，蒸发溶剂得到95mg标题化合物(59％)。TSP-MS发现m／z502(MH+(C28H32N5O4)计算值502)。
实施例88H-(R)Cha-Pro-Mig(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)向搅拌的0．344g(0．93mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)、0．245g(0．93mmol)H-Mig(Z)(见起始物的制备)和0．227g(1．86mmol)DMAP于10ml CH3CN的混合物中。在-10℃下加入0．232g(1．21mmol)EDC。将反应混合物升至室温并保持5天。蒸去CH3CN并将残余物溶于EtOAc，用H2O、NaHCO(水溶液)和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥并蒸发。粗产物在闪色谱上用梯度冲洗剂EtOAc／MeOH(95／5至90／10)纯化得到0．340g(60％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)将0．34g(0．55mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)溶于经HCl(气)饱和的8ml EtOAc中，在室温下搅拌10min后滴入10ml饱和KOH水溶液。分层，水相用3×8ml EtOAc萃取。有机相合并后用盐水洗涤，用Na2SO4干燥并蒸发制得0．286g(100％)标题化合物。
(ⅲ)H-(R)Cha-Pro-Mig将0．050g(0．132mmol)H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)溶于3mlMeOH，在10％Pd／C上常压氢化过夜。用硅藻土过滤溶液并蒸发溶剂，得到0．040g(80％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ0．92-1．02(m，2H)，1．18-1．47(m，6H)，1．66-1．73(m，4H)，1．85-2．04(m，4H)，2．17-2．22(m，1H)，2．95-2．98(m，1H)，3．12-3．16(m，1H)，3．47-3．55(m，2H)，3．62-3．66(m，1H)，3．75-3．78(m，1H)，3．85-3．89(m，1H)，4．05-4．12(m，3H)，4．34-4．37(m，1H)。次要旋转异构体的信号出现在δ 3．4，3．7，4．13-4．1 6，4．3。MS m／z 379(M++1)实施例89H-(R)Cha-Pro-Dig(ⅰ)Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)向搅拌的0．280g(0．76mmol)Boc-(R)Cha-Pro-OH(见起始物的制备)、0．210g(0．76mmol)H-Dig(Z)(见起始物的制备)和0．1 86g(1．52mmol)DMAP于8ml CH3CN的混合物中在-10℃下加入0．189g(0．99mmol)EDC。将反应混合物升至室温并保持4天。蒸去CH3CN，将残余物溶于EtOAc，用H2O、NaHCO3(水溶液)和盐水洗涤。有机层用Na2SO4干燥并蒸发。粗产物在闪色谱上用梯度洗脱剂EtOAc／MeOH(95／5至90／10)冲洗纯化，得到0．210g(44％)标题化合物。
(ⅱ)H-(R)Cha-Pro-Dig(Z)将0．21 0g(0．33mmol)Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)溶于8 ml用HCl(气)饱和的EtOAc中，在室温下搅拌10 min。滴入8 ml饱和KOH水溶液，分层水相用3×8ml EtOAc萃取。有机层合并后用盐水洗涤、用Na2SO4干燥并蒸发，得到0．146g(83％)标题化合物。
(ⅲ)H-(R)Cha-Pro-Dig将0．046g(0．087mmol)H-(R)Cha-Pro-Dig(Z)溶于3mlMeOH，在10％ Pd／C上常压氢化过夜。用硅藻土过滤溶液并蒸发溶剂，得到0．040g(100％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ0．90-1．04(m，2H)，1．10-1．47(m，6H)，1．66-1．74(m，4H)，1．78-2．05(m，4H)，2．13-2．21(m，1H)，2．74-2．83(m，1H)，2．94-2．99(m，1H)，3．15-3．29(m，1H)，3．44-3．57(m，2H)，3．65-3．87(m，2H)，4．07-4．25(m，3H)，4．35-4．39(m，2H)。次要旋转异构体信号出现在δ 4．29-4．32。MS m／z 393(M++1)实施例90H-(R)Cha-Aze-Dig(ⅰ)Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z)
按照用于Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)的方法，由Boc-(R)Cha-Aze-OH和H-Dig(Z)(见起始物的制备)制得本标题化合物，产率为0．253g(54％)。
(ⅱ)H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)按照用于Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)的方法，由Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z)制得标题化合物，产率0．210g(100％)。
(ⅲ)H-(R)Cha-Aze-Dig将0．060g(0．117mmol)H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)溶于3mlMeOH，在10％Pd／C上常压氢化过夜。用硅藻土过滤溶液并蒸发溶剂，得到0．042g(95％)标题化合物。1H-NMR(500 MHz，MeOD)δ0．91-1．02(m，2H)，1．18-1．48(m，6H)，1．66-1．90(m，8H)，2．15-2．17(m，1H)，2．66-2．68(m，1H)，2．80-2．83(m，1H)，3．14-3．29(m，1H)，3．39-3．44(m，1H)，3．72-3．80(m，2H)，4．01-4．04(m，1H)，4．14-4．23(m，2H)，4．48-4．49(m，1H)，4．60-4．64(m，1H)。次要旋转异构体的信号出现在δ 2．25，2．6，4．3，4．67。MS m／z 379(M++1)。
药物制备实施例本发明的化合物可配制成口服固体剂型，例如普通药片、加膜药片或改进型缓释药片；直肠给药的液体或固体一半固体剂型；肠胃外给药的亲液物或液体，如液体剂或悬浮剂；皮肤表面给药的液体固体或半固体剂型。
也可配制成用于口或鼻吸入的压力气雾剂或干粉吸入剂。
实施例P1口服药片用下列成分配制成1000片药片活性化合物 100g乳糖200g聚乙烯吡咯烷酮 30g微晶纤维素 30g硬脂酸镁6g将活性组份和乳糖与聚乙烯吡咯烷酮的水溶液混合。经干燥和碾磨制成颗粒。然后依次掺入微晶纤维素和硬脂酸镁。所得混合物在制片机上压制，制得1000片药片，其中每片含100mg活性成分。
实施例P2非肠道给药溶液溶液可由下列组份配制而成活性化合物 5g注射用氯化钠6g将pH值调节至大约5-7的氢氧化钠注射用水加至1000ml将活性成份和氯化钠溶于水，用2M NaOH调节pH值至pH=3-9，所得溶液注入无菌安瓿。
实施例P3口服药片1．活性化合物150g2．硅铝酸钠 20g3．石蜡 120g
4．微晶纤维素 20g5．羟丙基纤维素5g6．硬脂酰基富马酸钠3g将1-4混合并加入5的水溶液。经干燥和碾磨后掺入6。所得混合物再用制片机压制。
实施例B6吸入剂粉末在喷雾式碾磨机中将活性化合物制成颗粒大小适合于吸入的微粒(大部分直径＜4μm)。
将100mg微粒粉末填入粉剂多次剂量吸入器(multidoseinhaler)
中，吸入器装有施剂部件，它输送1mg剂量。
生物学凝血酶凝结时间(TT)的测定将pH 7．4，100 μl人体凝血酶(T6769，Sigma Chem(O)的缓冲溶液和100μl抑制剂溶液培育1分钟，然后加入100μl郁积的普通柠檬酸化的人体血浆并用自动装置(KC10，Amelung)测定凝结时间。
以秒数计算的凝结时间对抑制剂浓度作图，内插得到IC50TT。
IC50TT表示使人体血浆凝血酶凝结时间延长一倍的抑制剂浓度。
激活的部分组织促凝血酶原激酶作用时间(APTT)的测定在郁结的普通人体柠檬酸化血浆中用Stago制造的试剂PTTAutomated 5测定APTT。血浆中加入抑制剂(90μl血浆加入10μl抑制剂溶液)并根据试剂使用说明书用凝结作用分析仪(KC10(Amelung)测定APTT。以秒数计算的凝结时间对血浆中抑制剂浓度作图，内插得到IC50APTT。
IC50APTT定义为增加激活的部分组织促凝血酶原激酶时间一倍的血浆中抑制剂的浓度。
体外凝血酶作用时间的测定口服化合物后对凝血酶的抑制作用在清醒的鼠上进行，试验前二天将用于血液取样的导管插入鼠颈总动脉，试验当天服用化合物之后定时抽取血样装入塑料管中；塑料管盛有1份柠檬酸钠溶液(0．13mol每升)和9份血液，然后将塑料管离心处理得到血小板缺乏的血浆，用于下述的凝血酶作用时间测定。
100μl含柠檬酸盐的鼠血浆用100μl 0．9％盐水稀释，加入溶于100μl，pH 7．4缓冲溶液的人体凝血酶(T6769，Sigma Chem Co，USA)引发血浆凝固，凝固时间用自动装置(KC10，Amelung，Germany)测定。
血浆激肽释放酶抑制常数Ki的测定在Roche(Basel，瑞士)制造的Cobas Bio离心分析仪上用生色基质(Chromogenic Substrate)方法测定Ki。将人体血浆激肽释放酶和不同浓度的化合物培养后在三种不同基质浓度条件下测量残余酶活性。并在405nm和37℃下检测吸光度变化。
于含5g／l牛白蛋白(编号810033，ICI Biochemicals Ltd，High，Wycombe，Bucks，GB)的缓冲剂(0．05mol／l Tris-HCl，用NaCl调节pH 7．4，10．15)中的250μl 0．4nKat／ml人体血浆激肽释放酶(E．C．3．4．21．34，Chromogenix AB，Molndal，瑞典)与80μl试验化合物于含10g／l白蛋白的0．15mol／l NaCl溶液一同培养300S。在这一步中加入10μl水。再加入40μl激肽释放酶作用物(S-2302，Chromogenix AB，1．25、2．0或4．0mmol／l水溶液)和20μl水。检测吸光度的变化。
K1可从DiXon图，即抑制剂浓度对1(△A／min)作图所得曲线中估算出来，其中不同作用物浓度所得数据连成直线，其截距X=-K1。
缩略词Ac=乙酰基aq=含水的Aze=氮杂环丁烷-2-甲酸betaPiC=哌啶-3-甲酸Boc=叔丁氧基羧基Boc-Dig(Z)=3-(N-叔丁氧基羰基氨乙基)-1-(N-苯氧基羰基脒基)氮杂环丁烷Boc-Mig(Z)=3-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷Boc-Pig(Z)=4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N-苄氧基羰基脒基)哌啶Boc-Pig(Z)2=4-(N-叔丁氧基羰基氨甲基)-1-(N，N＇-二苄氧基羰基脒基)哌啶Brine=饱和水／NaCl溶液Bn=苄基Bu=丁基Cgl=环己基甘氨酸Cha=β-环己基氨基丙酸CME-CDI=1-环己基-3-(2-吗啉代乙基)碳化二亚胺N-甲-对-甲苯磺酸盐DBU=1，8-二氮杂二环[5．4．0]十一碳-7-烯DCC=二环己基碳化二亚胺DCU=二环己基脲DMAP=N，N-二甲基氨基吡啶DMF=二甲基甲酰胺DMSO=二甲亚砜EDC=1-(3-二甲基氨丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐Et=乙基EtOAc=乙酸乙酯EtOH=乙醇Gly=甘氨酸h=小时HCl=盐酸Hex=己基HOAc=乙酸HOBt=N-羟基苯并三唑Hoc=高环己基氨基丙酸Hop=高苯基氨基丙酸HOSu=N-羟基琥珀酰亚胺H-Dig(Z)=3-氨乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷H-Dig=3-氨乙基-1-脒基氮杂环丁烷H-(R，S)Hig(Z)=(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷H-(R，S)Hig=(3RS)-1-脒基-3-氨乙基吡咯烷H-Hig=1-脒基-3-氨乙基吡咯烷H-(R，S)Itp(Ts)=(4RS)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氨乙基环己烷H-(R，S)Itp=(4RS)-1，3-二氮杂-2-亚氨基-4-氨乙基环己烷H-(S)Itp(Ts)=(4S)-1，3-二氮杂-2-甲苯磺酰亚氨基-4-氨乙基环己烷H-(S)Itp=(4S)-1，3-二氮杂-2-亚氨基-4-氨乙基环己烷H-Itp=1，3-二氮杂-2-亚氨基-4-氨乙基环己烷H-Mig(Z)=3-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷H-Mig=3-氨甲基-1-脒基氮杂环丁烷H-(R，S)Nig(Z)=(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷H-(R，S)Nig=(3RS)-1-脒基-3-氨甲基吡咯烷H-Nig=1-脒基-3-氨甲基吡咯烷H-Pab=1-脒基-4-氨甲基苯H-Pab(Z)=4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)苯H-Pac=1-脒基-4-氨甲基环己烷H-Pac(Z)=4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)环己烷H-Pig=4-氨甲基-1-脒基哌啶H-Pig(Z)=4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)-哌啶H-Pig(Z)2=4-氨甲基-1-(N，N＇-二苄氧基羰基脒基)-哌啶H-Rig(Z)=4-氨乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)-哌啶H-Rig=4-氨乙基-1-N-脒基哌啶Me=甲基MeOH=甲醇Mpa=兆帕Ms=甲磺酰基NMM=N-甲基吗啉Pd／C=炭载钯Pgl=苯基甘氨酸Phe=苯基氨基丙酸Pic=哌啶酸Pro=脯氨酸RPLC=反相高效液相色谱Tf=三氟甲磺酰基TFA=三氟乙酸THF=四氢呋喃Tic=1-羧基-1，2，3，4-四氢异喹啉Ts=二甲苯磺酰基Val=缬氨酸Z=苄氧基羰基词头n、i、s和t的意思与平常所用相同，分别为正、异、仲和叔。如无另外说明，则氨基酸的立体化学一般空缺。
缩略词(接前面，下列结构式中氮原子上的波浪线表示结构片段的键合位置。)
权利要求
1．通式Ⅰ的化合物，其自身或其立体异构体，或其生理上可接受的盐类，
式Ⅰ其中A1代表式Ⅱa的结构片段
其中k为整数0、1、2、3或4；R1代表H、含1至4个碳原子的烷基或者R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2；而R17为甲基、苯基、OH、COOR12或或CONHR12，其中R12为H或含1至4个碳原子的烷基；并且R11为H或含1至6个碳原子的烷基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或R1代表-CH2PO(OR16)2、-CH2SO3H或-CH2-(5-(1H)-四唑基)，其中R16在各种情况下各自为H、甲基或乙基；R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R21为H或含1至4个碳原子的烷基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31为H或含1至4个碳原子的烷基，且k为0、1，或；R3代表1-萘基或2-萘基，且k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它们可能被也可能不被-OR31取代，其中R31的定义与前面相同，并且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；A2代表式Ⅲa、Ⅲb或Ⅲc的结构片段
其中p为整数0、1或2；m为整数1、2、3或4；Y代表亚甲基；或Y代表1，2-亚乙基并且产生的五员环在4位上可带也可不带一或两个氟原子、一个羟基或一个氧代基，或者可以是也可以不是不饱和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有杂原子官能团；或Y代表1，3-亚丙基，并且产生的六员环在5位上可带也可不带一个氟原子、一个羟基或一个氧代基，在4或5位其中之一上可带也可不带二个氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不饱和的，或在4位上可以带也可以不带一个含1至4个碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3的定义与前相同；R5代表H或含1至4个碳原子的烷基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p为0、1或2，R51为H或含1至4个碳原子的烷基；或n为整数0、1、2、3或4；B代表一个如式Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc或Ⅳd的结构片段
其中r为整数0或1；X1代表CH2、NH或不存在；X2代表CH2、NH或C=NH；X3代表NH、C=NH、N-C(NH)-NH2、CH-C(NH)-NH2、CH-NH-C(NH)-NH2或CH-CH2-C(NH)-NH2；X4代表CH2或NH；X5代表C(NH)-NH2；X6代表CH或N；R6代表H或含1～4个碳原子的烷基。
2．通式Ⅴ的化合物，其自身或其立体异构体或其生理可接受的盐类；
式Ⅴ其中，A1代表式Ⅱa的结构片段
其中k为整数0、1、2、3或4；R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位可能被取代，α-取代基为R17-(CH2)p-，其中p为0、1或2，R17为COOR12、CONHR12，其中R12代表H或含1至4个碳原子的烷基或苄基；并且R11代表H或含1至6个碳原子的烷基或苄基；或R1代表Ph(4-COOR12)-CH2-，其中R12的定义同上；或R1代表R13-NH-CO-烷基-，其中所述烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R13代表H、含1至4个碳原子的烷基或-CH2COOR12，其中R12的定义与前述相同；或R1代表R12OOC-CH2-OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子并且在羰基的α位上可能被含1至4个碳原子的烷基取代，并且其中R12的定义与前面相同；或R1代表R14SO2-、Ph(4-COOR12)-SO2-、Ph(3-COOR12)-SO2-或Ph(2-COOR12)-SO2-，其中R12的定义与前面相同，而R14代表含有1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-R15，其中R15为含1至4个碳原子的烷基；或R1代表-CO-OR15，其中R15的定义与前面相同；或R1代表-CO(CH2)p-COOR12，其中R12的定义与前面相同，而p为整数0、1或2；或R2代表H或含1至4个碳原子的烷基或R21OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R21为H或含1至4个碳原子的烷基或苄基；R3代表含1至4个碳原子的烷基，所述烷基可能带也可能不带一个或多个氟原子；或R3代表环戊基、环己基或苯基，它们可能被也可能不被含1至4个碳原子的烷基取代；或R3代表被OR31取代的苯基，其中R31为H或含1至4个碳原子的烷基，且k为0、1，或；R3代表1-萘基或2-萘基，且k为0、1；或R3代表一个顺式或反式萘烷基团，且k为0、1；或R3代表4-吡啶基、3-吡咯烷基或3-吲哚基，它们可能被也可以不被-OR31取代，其中R31的定义与前面相同，并且k为0、1；或R3代表Si(Me)3或CH(R32)2，其中R32为环己基或苯基；A2代表式Ⅱa、Ⅱb或Ⅱc的结构片段
其中p为整数0、1或2；m为整数1、2、3或4；Y代表亚甲基；或Y代表1，2-亚乙基并且产生的五员环在4位上可带也可不带一或两个氟原子、一个羟基或一个氧代基，或者可以是也可以不是不饱和的；或Y代表-CH2-O-、-CH2-S-或-CH2-SO-，其中在4位上有杂原子官能团；或Y代表1，3-亚丙基，并且产生的六员环在5位上可带也可不带一个氟原子、一个羟基或一个氧代基，在4或5位其中之一上可带也可不带二个氟原子，或在4和5位上可以是也可以不是不饱和的，或在4位上可以带也可以不带一个含1至4个碳原子的烷基；或Y代表-CH2-O-CH2-、-CH2-S-CH2-或-CH2-SO-CH2-；或Y代表-CH2-CH2-CH2-CH2-；R3的定义与前相同；R5代表H或含1至4个碳原子的烷基；或R5代表-(CH2)p-COOR51，其中p为0、1或2，R51为H或含1至4个碳原子的烷基；或n为整数0、1、2、3或4；B代表一个如式Ⅳa、Ⅳb、Ⅳc或Ⅳd的结构片段
其中r为整数0或1；X1代表CH2、NH或不存在；X1代表CH2、NH或不存在；X2代表CH2、NH或C=NH；X3代表NH、C=NH、N-C(NH)-NH2、CH-C(NH)-NH2、CH-NH-C(NH)-NH2或CH-CH2-C(NH)-NH2；X4代表CH2或NH；X5代表C(NH)-NH2；X6代表CH或N；R6代表H或含1～4个碳原子的烷基；D代表Z或(Z)2，Z代表苄氧基羰基。
3．根据权利要求1-2中一项或多项的化合物，其中R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R11代表H。
4．根据权利要求1-3中一项或多项的化合物，其中A2为式Ⅲa的结构片段。
5．根据权利要求1-3中一项或多项的化合物，其中A2代表式Ⅲb的结构片段。
6．根据权利要求1-5中一项或多项的化合物，其中B代表式Ⅳa的结构片段；其中X1、X2和X4代表CH2，X3代表CH-C(NH)-NH2，r等于1且n等于1。
7．根据权利要求1-5中一项或多项的化合物，其中B代表式Ⅳa的结构片段；其中X1、X2和X4代表CH2，X3代表CH-C(NH)-NH2，r等于0或1且n等于1或2。
8．根据权利要求1-5中一项或多项的化合物，其中B代表式Ⅳb的结构片段；其中R6代表H，n等于1。
9．根据权利要求1-5中一项或多项的化合物，其中B代表式Ⅳa的结构单元；其中X1和X3代表NH，X2代表C=NH，X4代表CH2、r等于1，n等于2。
10．根据权利要求1-5中一项或多项的化合物，其中B代表式Ⅳa的结构单元；其中X1不存在，X2和X4代表CH2，X3代表N-C(NH)-NH2，r等于0，n等于1或2。
11．根据权利要求1或2的化合物，其中n等于1或2，k等于0或1，R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R2代表H，R3代表环己基；A2代表式Ⅱa的结构片段，其中Y代表亚甲基、1，2-亚乙基或1，3-亚丙基，并且所产生的六员环在4位上可以带也可以不带含1至4个碳原子的烷基，R5代表H；B代表式Ⅳa的结构片段，其中X1、X2和X4为CH2、X3为CH-C(NH)-NH2或N-C(NH)-NH2，r等于0或1，或者X1和X3为NH、X2为C=NH、X4为CH2，r等于1，或者X1不存在、X2和X4为CH2、X3为N-C(NH)-NH2，r等于0。
12．根据权利要求1或2的化合物，其中n等于1，k等于0或1，R1代表R11OOC-烷基-，其中烷基含1至4个碳原子，R2代表H，R3代表环己基；A2代表式Ⅲa的结构片段，其中Y代表亚甲基、1，2-亚乙基或1，3-亚丙基并且产生的六员环在4位上可以带也可以不带含1至4个碳原子的烷基，R5代表H；B代表式Ⅳb的结构片段，R6为H。
13．选自下列物质的化合物，其自身或其立体异构体或其生理上可接受的盐类HOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-PabH-(R)Cgl-Pic-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-PabH-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Cba-Aze-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab／bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-PabH-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R) Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab／aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab／bHOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-PabEtOOC-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabPh(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-PabH-(R)Cha-Pie-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／aHOOC-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab／bHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CO-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-PabMe-OOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-PabH2N-CO-CH2-(R) Cha-Pic-PabBoc-(R)Cha-Pic-PabAc-(R)Cha-Pic-PabMe-SO2-(R)Cha-Pic-PabH-(R)Cha-(P，S)betaPic-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)betaPic-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Val-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Val-PabH-(R)Hoc-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-PabHOOC-CH2-(R，S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(HOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigH-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PacH-(R)Cha-Pro-PacH-(R)Cgl-Ile-PabH-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-PabMeOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-PabEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabnHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabH-(R)Cgl-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-PacHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PacHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-PigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(HOOC-CHH2)2-(R)Cgl-Pro-PigHOOC-CH2-CH2(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-PigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Aze-(R，S)ItpH-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)ItpH-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)HigH-(R)Cha-Pro-(R，S)HigH-(R) Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-RigHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-RigHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)ItpH-(R)Cha-Pro-(R，S)NigH-(R)Cha-Pro-MigH-(R)Cha-Pro-DigH-(R)Cha-Aze-Dig
14．选自下列物质的化合物，其自身或其立体异构体或其生理上可接受的盐类HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pic-PabHOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-PigEtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig
15．选自下列物质的化合物，其自身或其立体异构体或其生理上可接受的盐类BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)BnnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)／aBnOOC-CH2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)／bBnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-NH-CO-CH2-(R)Cha-Pro-Pab (Z)Ph(4-COOH)-SO2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)MeOOC-CH2-CO-(R) Cha-Pic-Pab(Z)H2N-CO-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)Me-SO2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R，S)Val-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R，S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-(R，S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)(BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-CH2(BnOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-(R，S)Itp(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R，S)Hig(Z)BnOOC-CH2-(R) Cgl-Aze-Rig(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig(Z)
16．选自下列物质的化合物，其自身或其立体异构体或其生理上可接受的盐类BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)
17．选自下列物质的化合物，其自身或其立体异构体或其生理上可接受的盐类H-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CH2-(R)Phe-Phe-PabHOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab
18．选自下列物质的化合物，其自身或其立体异构体或其生理上可接受的盐类Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)BnOOC-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)
19．根据权利要求1-18任何一项的化合物的制备方法，所述方法包括用标准方法将N-端保护的氨基酸或二肽或氨基酸与下式化合物本身或其胍基氮或脒基氮用胺保护基单保护或双保护的形式偶联，当采用N-端氨基酸时，随后加入第二种氨基酸，其中，n为整数0、1、2、3或4；X代表B或B-D，其中B与式Ⅰ中的定义相同而D与式Ⅴ中的定义相同，所述胺保护基例如苄氧羰基、叔丁氧羰基或对甲苯磺酰基；或X代表可转移到B的基团；然后去除保护基团或将N-端氮脱保护，之后使N-端氮烷基化；如果需要则用已知方法脱保护，并且如果需要，形成一种生理可接受盐类；对于反应生成立体异构体混合物的情况，可任选标准色谱或重结晶技术将它们分离，如果需要，还可分离出单一立体异构体。
20．根据权利要求19用于制备权利要求1-18中任何一项的化合物的方法，所述方法包括a)(方法Ⅰa)用标准肽偶联方法使N-端保护的二肽偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ的A1和A2，如下所示
其中n与式Ⅰ中的定义相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和苄氧基羰基等N-端氨基保护基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等胺保护基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基团随后转移至脒基或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定义同上，其中当Q1为-NH-W2(W2在这种情况下必须与W1正交)时，W2-基脱保护后，氨基通过本技术领域已知的方法随后转移至胍基(给出Q1=-NH-C(NH)NH2)；b)(方法Ⅰb)用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，偶联过程如下
其中n、W1和Q1的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，形成方法Ⅰa所述的保护的肽；c)(方法Ⅱa)用标准肽偶联方法使N-端保护二肽偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ中的A1和A2，偶联过程如下所示
其中n与式Ⅰ中的定义相同；W1代表例如叔丁氧基羰基和苄氧基羰基等N-端氨基保护基；Q1代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，其中W2代表例如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等胺保护基；或者Q1代表-CN、-CO-NH2或-CS-NH2，其中基团随后转移至脒基；或者Q1代表NH2或NH-W2，其中W2定义同上，其中当Q1为-NH-W2(W2在这种情况下必须与W1正交)时，W2-基脱保护后，氨基通过本技术领域已知的方法随后转移至胍基(给出Q1=-NH-C(NH)NH2)；d)(方法Ⅱb)用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，偶联过程如下
其中n、W1和Q1的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，形成方法Ⅱa所述的保护的肽；e)(方法Ⅲa)用标准肽偶联方法使N-端保护的二肽偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ中的A1和A2，偶联反应如下所示
其中n与式Ⅰ中的定义相同；当X1、X2和X4代表CH2时，r为0或1，而当X2和X4代表CH2，X1不存在时，r为0；W1代表如同叔丁氧基羰基和苄氧基羰基等N-端氨基保护基；Q2代表-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2或-C(NH)-NH-W2，其中W2代表如同叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等胺保护基；或者Q2与W2相同，其中在W2基团脱保护后(W2在这种情况下必须与W1正交)，氨基用本技术领域已知的方法用未保护、N-保护或N，N＇-双保护的胍化试剂转移至胍基；f)(方法Ⅲb)用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，偶联反应如下所示
其中n、r、X1、X2和X4，W1和Q4的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，形成方法Ⅲa所述的保护的肽；g)(方法Ⅳa)用标准肽偶联方法使N-端保护的二肽偶联，其中二肽选自式Ⅰ或Ⅴ的A1和A2，偶联过程如下所示
其中n值与式Ⅰ中的定义相同；W1代表如叔丁氧基羰基或苄氧基羰基等N-端氨基保护基；W3代表H或如同芳基磺酰基、苄氧基羰基或叔丁氧基羰基等氨基保护基；h)(方法Ⅳb)用标准肽偶联方法使N-端保护的氨基酸偶联，其中氨基酸选自式Ⅰ或Ⅴ中的A2，偶联过程如下
其中n、W1和W3的定义与前面相同；随后对W1-基团脱保护，并用保护形式的N-端氨基酸偶联，生成如方法Ⅳa中所述的被保护肽；最终化合物可根据所用Q1或Q2-基的性质由下列途径之一制得去除保护基(当Q1=-C(NH)-NH2、-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2)，或；对W1-基团选择性脱保护(例如当Q1或Q2=-C(NW2)-NH-W2、-C(NH)-NH-W2、-NH-C(NH)-NH-W2、-N(W2)-C(NH)-NH-W2或-NH-C(NW2)-NH-W2，(W2在这种情况下必须与W1正交))，然后使N-端氮烷基化并根据需要脱保护。
21．用于治疗的根据权利要求1-18任何一项的化合物。
22．用作抗凝血剂或抗血栓形成剂的权利要求根据权利要求1-4或6-16任何一项的化合物。
23．用作消炎药剂的根据权利要求1-3、5-9或17-18中任何一项的化合物。
24．药物制剂，包括有效量的，与一种或多种药物载体结合在一起的权利要求1-18中任何一项的化合物。
25．药物制剂，包括有效量的，与一种或多种药物载体结合在一起用作为抗凝血剂或抗血栓形成剂的权利要求1-4或6-16中任何一项的化合物。
26．药物制剂，包括有效量的，与一种或多种药物载体结合在一起用作消炎药剂的权利要求1-3、5-9或17-18中任何一项的化合物。
27．权利要求1-4或6-16中任何一项的化合物作为生产药物制剂的活性组分的应用，所述制剂用于抑制人或动物机体中的凝血酶。
28．权利要求1-3、7-9或17-18中任何一项的化合物作为生产药物制剂的活性组分的应用，所述制剂用于抑制人或动物的激肽原酶。
29．一种使需要抑制凝血酶的人或动物机体获得对凝血酶抑制作用的方法，包括给予所述机体有效抑制剂量的权利要求1-4或6-16中任何一项的化合物。
30．一种使需要抑制激肽原酶的人或动物机体获得对激肽原酶的抑制作用的方法，包括给予所述机体有效抑制剂量的权利要求1-3、5-9或17-18中任何一项的化合物。
31．下式化合物以其自身或其中脒基在N上用保护基单保护或双保护形式或其盐类在合成肽类丝氨酸蛋白酶抑制剂，特别是在合成肽类凝血酶抑制剂或肽类激肽原酶抑制剂中作为起始物的应用。
32．下式的结构片段，在药物活性化合物，尤其是在肽化合物中用作结构单元。
33．化合物4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)苯，其自身或其盐形式或在其他氮上带有苄氧基羰基的保护形式。
34．下式化合物以其自身或其脒基在氮上用保护基单保护或双保护形式或其盐形式在合成凝血酶抑制剂，特别是在合成肽类凝血酶抑制剂中作为起始物的应用。
35．下式结构片段，在凝血酶抑制剂，尤其是在肽类凝血酶抑制剂中作为结构单元。
36．化合物4-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)环己烷，其自身或其盐形式或在其他氮上带有苄氧基羰基的保护形式。
37．下式化合物，其自身或其脒基在氮上用保护基单保护或双保护形式或其盐形式。
38．权利要求37的化合物在合成丝氨酸蛋白酶抑制剂中作为起始物的应用。
39．下式结构片段，在凝血酶抑制剂，尤其是在肽类凝血酶抑制剂中作为结构单元。
40．下式化合物，其自身或其脒基在氮上用保护基单保护或双保护形式或其盐形式。
41．权利要求40的化合物在合成丝氨酸蛋白酶抑制剂中作为起始物的应用。
42．下式结构片段，在凝血酶抑制剂，尤其是在肽类凝血酶抑制剂中作为结构单元。
43．化合物4-氨乙基-1-苄氧基羰基脒基哌啶，其自身或其盐形式或在其他氮上带有苄氧基羰基的保护形式。
44．下式化合物，其自身或其脒基在氮上用保护基单保护或双保护的形式或其盐形式，
其中n等于1或2，s等于0或1。
45．权利要求44的化合物在合成丝氨酸蛋白酶抑制剂中作为起始物的应用。
46．下式的结构片段，在凝血酶抑制剂，尤其是在肽类凝血酶抑制剂中作为结构单元，
其中n等于1或2，s等于0或1。
47．化合物，为(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨甲基吡咯烷、(3RS)-1-(N-苄氧基羰基脒基)-3-氨乙基吡咯烷、3-氨甲基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷或3-氨乙基-1-(N-苄氧基羰基脒基)氮杂环丁烷，其自身或其盐形式或在其他氮上带有苄氧基羰基的保护形式。
全文摘要
本发明涉及类胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶的新型竞争性抑制剂、它们的合成、含这些化合物作为活性组份的药物制剂,以及这些化合物作为凝血酶抑制剂,抗血凝剂和消炎性抑制剂在预防和治疗相关疾病中的应用。此外本发明还描述了在化合物合成中涉及的新化合物、化合物的新用途,特别是新的结构片段,根据式(Ⅰ)∶A
文档编号C07D211/00GK1278530SQ99124859
公开日2001年1月3日 申请日期1999年11月15日 优先权日1993年6月3日
发明者K·T·安敦森, R·E·比隆, N·D·古斯塔夫森, N·O·尼尔森 申请人:阿斯特拉公司