专利名称：生产硫酸软骨素的方法
技术领域：
本发明涉及硫酸软骨素的生产方法。
背景技术：
硫酸软骨素具有澄清脂质和提高机体解毒功能的作用，还具有利尿和镇痛的作用，不但对胶原性疾病有效而且对于链霉素引起的听觉障碍也有效，近年来又大量用于化妆品行业，它既是一种用途广泛的药物，也是我国出口创汇的一种重要品种。由于以往传统生产工艺中所用的原料为猪小肠，牛、猪、羊的喉鼻软骨，等，其中残留的抗生素及残存的致病病原体极易污染最终的硫酸软骨素成品，令人们越来越担心其生物安全性，加之原料成本一直居高不下，致使国内生产厂家仅在微利的情况下勉强维持生产，本发明摒弃了以家畜副产品为原料的传统工艺，代之以海洋生物为原料进行提取、合成，具有原料来源广泛，价格低廉，并且无污染的明显优势，所制得的硫酸软骨素完全符合药用并达到了出口标准。
发明内容
因此，本发明的目的是提供一种制备硫酸软骨素的方法，该方法包括以下步骤A、将卡拉胶分解为分子量为1-4万，优选2-3万的卡拉胶寡糖(例如用氧化剂，如次氯酸钠和双氧水)；B、将鱿鱼骨用高浓度的强碱液(例如15％以上的NaOH或KOH溶液，例如15％到饱和NaOH或KOH溶液)处理(例如在50-80℃，优选60-70℃下)，然后用酸(例如氯乙酸)中和(例如在50-90℃，优选55-65℃下)，收集胶体；C、将步骤A制得的卡拉胶寡糖、步骤B制得的胶体和氨基葡萄糖在酸性(例如pH2-7，优选pH5-6.5)条件下反应，再纯化(例如通过醇沉)，获得硫酸软骨素。
在一个优选的实施方案中，在步骤B中的鱿鱼骨用强碱液处理之前，先用低浓度碱液(例如1-12％氢氧化钠或氢氧化钾溶液)处理，以便除去鱿鱼骨中的蛋白质或其它杂质。
在另一个优选的实施方案中，氨基葡萄糖通过将氨基葡萄糖盐酸盐用二乙胺和无水乙醇处理进行N-乙酰化脱盐酸来制备。
在一个特定实施方案中，本发明的方法包括以下步骤A、κ-卡拉胶寡糖液(原料A)的制备取纯净水适量加热至50-100℃，优选约60-70℃，在搅拌下均匀撒入卡拉胶粉(水∶胶＝5-50∶1-5，优选约30∶1)，继续加热搅拌至胶全溶，然后加入适量的次氯酸钠及双氧水充分搅拌(例如次氯酸钠为基于卡拉胶的5-50％，优选约10-20％，双氧水为基于卡拉胶的1-10％，优选约2-5％)，随着胶液粘度下降，反应液颜色逐渐变浅，待分子量降至1-4万，优选约2-3万后，立即加入活性炭，搅拌10-30，优选约20分钟，趁热压滤，得澄清液体，为原料A。
B、氨基葡萄糖液(原料B)的制备取氨基葡萄糖盐酸盐加入二乙胺和无水乙醇中进行N-乙酰化脱盐酸(例如氨基葡萄糖∶二乙胺∶无水乙醇＝1-3∶1-5∶5-20，优选1∶1.2∶20)，充分反应后过滤，用6-15，优选约10倍量纯净水将晶体溶化，再通过阴离子树脂柱纯化，精滤，得原料B。
C、鱿鱼骨水解液(原料C)的制备将鱿鱼骨用2-10，优选约5倍量3-10％，优选约6％的NaOH溶液浸泡，加热至70-90℃，优选约80℃，时时搅拌下浸泡4-10小时，优选约6小时，取出用水洗净鱿鱼骨上的碱液，使pH＝7-8，然后将鱿鱼骨投入2-6，优选约3.6倍量15％到饱和，优选约50％的NaOH溶液中，加温至60-70℃，优选约65℃，保温1-3小时，优选约2小时后，将鱿鱼骨与碱液一起加入事先用异丙醇溶化的氯乙酸溶液中，加温到50-70℃，优选约60℃(鱿鱼骨∶NaOH液∶氯乙酸∶异丙醇＝1-3∶2-10∶1.8-8∶5-15，优选1-2∶3-5∶1.5-4∶8-12，更优选约1∶3.6∶2.1∶10)，保温2-4小时，优选约3小时后，虹吸出上清液，另行回收异丙醇及醋酸盐；收集底部胶体，用4-9倍，优选约6倍量10-90％，优选约70％的乙醇洗涤2-6次，优选约3次，洗出胶体内残留醋酸盐，甩干，最后用4-15，优选约8倍量纯净水溶解此胶体，过滤，滤液为原料C。
D、合成取原料A、B、C按1-5∶1-10∶2-15，优选约1-2∶1.5-4∶3-8，更优选约2∶3∶5的比例混合后，加稀HCl调pH＝4-7，优选6-6.5，更优选约6.5，进行反应，用70-99％，优选约80％乙醇沉淀，滤取沉淀，换用90-99％，优选约95％乙醇吸附沉淀中水份，10-15小时，优选约12小时后，滤取沉淀，于60-80℃，优选约70℃真空干燥，得硫酸软骨素，含量＞85％。
另外需要指出的是，除非另有规定，本发明中的量和百分数均按重量计。
具体实施例方式
实施例取30000ml纯净水，加热至65℃，均匀撒上60目细度的卡拉胶粉1kg，继续加热并搅拌至胶全溶，然后加入600ml次氯酸钠溶液及100ml的30％双氧水，充分搅拌，当胶液粘度下降，颜色变浅，分子量降至约2-3万后，加入100g活性炭，搅拌20分钟，趁热过滤，得原料A约30500ml。
取1千克氨基葡萄糖盐酸盐加入1200ml二乙胺和20000ml无水乙醇的混合液中，充分反应后过滤，得反应产物0.9kg，加900ml的纯净水溶化，再通过阴离子树脂柱纯化，精滤得原料B约9100ml。
取3kg鱿鱼骨用15000ml的6％NaOH溶液浸泡并加热至80℃，时时搅拌，6小时后取出鱿鱼骨，用水洗净其上碱液，至最后洗出液pH＝7-8，然后投入10800ml的50％NaOH溶液中，加温至65℃，保温2小时，将鱿鱼骨与碱液一起加入用30kg异丙醇溶化的6.3kg氯乙酸溶液中，加热至60℃，保温3小时，虹吸出上清液，回收异丙醇及醋酸盐，收集底部的胶体约9kg。分别用54kg70％的乙醇洗涤3次，甩干，得6kg胶体，最后用48000ml纯净水溶解胶体，过滤，得原料C约54000ml。
4、取原料A 600ml，原料B 900ml，原料C 1500ml混合均匀，加稀HCl调pH＝6.5进行反应，反应完毕后，向反应液加入95％乙醇，使溶液含醇量达80％，静置沉淀，滤取沉淀，再用过量95％乙醇吸附水份12小时，再滤取沉淀，于70℃真空干燥得硫酸软骨素干品1.4kg，含量90％。
权利要求
1.一种制备硫酸软骨素的方法，该方法包括以下步骤A、将卡拉胶分解为分子量为1-4万，优选2-3万的卡拉胶寡糖；B、将鱿鱼骨用15％到饱和的强碱液处理，然后用酸中和，收集胶体；C、将步骤A制得的卡拉胶寡糖、步骤B制得的胶体和氨基葡萄糖在酸性条件下反应，再纯化，获得硫酸软骨素。
2.根据权利要求1的方法，其中卡拉胶的分解用次氯酸钠和双氧水进行。
3.根据权利要求1的方法，其中步骤B的强碱液处理在60-70℃下进行。
4.根据权利要求1的方法，其中步骤B的酸是氯乙酸。
5.根据权利要求1的方法，其中步骤C的酸性条件为pH5-6.5。
6.根据权利要求1的方法，其中在步骤B中的鱿鱼骨用强碱液处理之前，先用低浓度碱液处理，以便除去鱿鱼骨中的蛋白质或其它杂质。
7.根据权利要求1的方法，其中氨基葡萄糖通过将氨基葡萄糖盐酸盐用二乙胺和无水乙醇处理进行N-乙酰化脱盐酸来制备。
全文摘要
本发明涉及一种制备硫酸软骨素的方法，该方法包括以下步骤A.将卡拉胶分解为分子量为1－4万，优选2－3万的卡拉胶寡糖；B.将鱿鱼骨用15％到饱和的强碱液处理，然后用酸中和，收集胶体；C.将步骤A制得的卡拉胶寡糖、步骤B制得的胶体和氨基葡萄糖在酸性条件下反应，再纯化，获得硫酸软骨素。
文档编号C08B37/00GK1563098SQ20041000622
公开日2005年1月12日 申请日期2004年3月15日 优先权日2004年3月15日
发明者王善科, 秦入伟 申请人:王善科, 秦入伟