技术领域：
本发明属于天然植物提取及应用
技术领域：
，具体涉及蒿属植物中单体奇蒿黄酮的提取及其在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。
背景技术：
：金黄色葡萄球菌(StaphylococcusAureus，SA)为一种革兰氏染色阳性球形细菌，在自然中广泛存在，主要寄存于鼻前庭黏膜，腹股沟，会阴部和新生儿脐带残端等部位，偶尔也寄生于口咽部、皮肤、肠道及阴道口等，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染,是医院感染常见的病原体之一。据报道，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。金黄色葡萄球菌除了引起感染外，其产生的肠毒素可污染食物而致食物中毒。在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33％(LeLoirY，BaronF，GautierM.Staphylococcusaurensandfoodpoisoning[J].GenetMolRes，2003，2(1)：63-76.)，加拿大则更多，占45％(MeadPS，SlutskerL，DietzV，eta1.Food-relatedillnessanddeathintheUnitedStates[J].EmergInfectDis，1999,5(5)：607-625.)，中国每年发生的此类中毒事件也非常多(陈艳，刘秀梅，樊永祥，等.2004年中国食源性疾病暴发事件监测资料分析[J].中国食品卫生杂志，2008，20(6)：503-506.)。目前，对金黄色葡萄球菌感染的患者可以先用红霉素、新型青霉素、庆大霉素、万古霉素或先锋霉素Ⅵ等抗生素药物治疗。随着抗生素药物的广泛使用，临床上出现了对多种抗生素不敏感的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)，该细菌与乙型肝炎、艾滋病一起被称为当今世界三大感染顽疾(FrazeeBW，LynnJ，CharleboisED，etn.HighprevalenceofmethicillinresistantStaphy1ococcusaureusinemergencydepartmentskinandsofttissueinfections[J].AnnEmergMed，2005,45(3)：311-320.WilleyBM，MazzulliT，McGeerA，eta1.Evaluationofscreeningmediafordetectionofmethicillin-resistantStaphylOCOCCUNaureus(MRSA)fromsurveillanceswabs[J].AmJInfectControl，2005，33(5)：181)近期调查报道，医院(陈叶红,丁洁卫,金燕等.金黄色葡萄球菌耐药性变迁及抗菌药物应用分析[J].中华医院感染学杂志,2014,24(2)：342-344)中MRSA对青霉素G耐药率最高，为91.5-97.4％,对其他耐药率较高的抗菌药物依次为红霉素、克林霉素、环丙沙星、头孢唑林等，MRSA的耐药性机制在发生不同变化。医院根据习惯用药已经不能很好的控制细菌感染。耐甲氧西林和其他抗生素的金黄色葡萄球菌广泛流行，使传统的抗生素药物的使用和研究面临严峻的挑战。从植物中寻找高效、低毒的抗菌有效成分是现在抗生素药物发展重要方向，本研究基于奇蒿中药材的临床应用(荣远明,叶琦莉,何善明.用中药刘寄奴治疗急性细菌性痢疾34例[J].上海中医药杂志,1983,(1)：21.邓存国.刘寄奴治疗早期乳痈效佳[J].中医杂志,2008,(9):820-821.)，对奇蒿抗菌有效部位(谭蔚峰，王靖，邢新.中药奇蒿提取物体外抗菌活性的实验研究[J].药学实践杂志，2010，28(2):101-104.)进行分离纯化，得到具有抗菌活性的奇蒿黄酮单体化合物。该化合物对金黄色葡萄球菌抗菌效果显著，为临床抗生素药物的研究开发和利用提供重要物质基础。单体奇蒿黄酮是蒿属植物奇蒿中特有的化学成分(5,7-二羟基-6,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮)，目前未见其他植物中有此成分；前期，学者肖永庆对中药奇蒿的乙醚提取部位进行分离纯化，首次从天然产物中得到黄酮类化合物奇蒿黄酮，该黄酮化合物为蒿属植物奇蒿的特征性化合物，可以作为奇蒿药材鉴定的重要依据之一。学者肖永庆取奇蒿全草地上部分用乙醚渗漉，乙醚浓缩液用2％氯化钠水溶液萃取，萃取液用浓盐酸调至PH2，再用乙醚萃取，乙醚萃取液用蒸馏水洗至中性，无水硫酸钠脱水，浓缩后进行硅胶柱层析，用环己烷-醋酸乙酯梯度洗脱，环己烷-醋酸乙酯(2:1)洗脱部分得奇蒿黄酮粗晶。奇蒿黄酮提取工艺条件对酸性要求较高，需严格控制萃取液PH值，若控制不合适，则目标产物会萃取不完全。且PH2萃取液用水洗至中性，需要很大量的水，不便于工业上生产。工艺所用提取试剂乙醚为易燃易爆试剂，操作危险性很大。该提取方法所得奇蒿黄酮样品含杂量大，需要进一步对提取产物分离纯化，常规的色谱柱分离方法很难提取得到高纯度的奇蒿黄酮样品，且会造成样品损失，因此该方法对奇蒿黄酮的提取纯化利用具有局限性，有待进一步优化提取工艺。(肖永庆,屠呦呦.蒿属中药南刘寄奴脂溶性成分的分离鉴定[J].药学学报,1984,19(12).909)技术实现要素：本发明的目的在于提供一种蒿属植物中单体奇蒿黄酮的提取方法及其在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。蒿属植物中单体奇蒿黄酮(5,7-二羟基-6,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮)的提取方法，按照下述步骤进行：A、制备总粗提物将中药奇蒿(南刘寄奴HerbaArtemisiaeAnomalae)粉碎，取奇蒿粉末30kg，加入提取溶剂70％乙醇水(乙醇和水的体积比为7:3)300L，加热70℃回流提取2h，提取2次，将提取液减压浓缩，得粗提取物5.3kg。B、分离纯化将5.3kg粗提取物加水10L溶解，使其混悬，得提取物混悬液，加入石油醚萃取三次(提取物混悬液与每次加入萃取的石油醚体积比为1:2)，弃去三次石油醚萃取液，得到经石油醚萃取后的提取物混悬液；再向经石油醚萃取后的提取物混悬液中加入氯仿萃取三次(经石油醚萃取后的提取物混悬液与每次加入萃取的氯仿体积为1:2)，合并三次萃取液，减压回收溶剂得氯仿部位浸膏。将氯仿部位浸膏上硅胶柱色谱(氯仿部位浸膏1.5kg，加入1.5kg硅胶干法拌样上柱，装柱硅胶7kg，以石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统8:2:1:0.1的溶液溶解硅胶装柱。)，用石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统以8:2:1:0.1、6:2:1:0.1、4:2:1:0.1、2:2:1:0.1、1:1:1:0.1进行梯度洗脱，每个梯度约20L，流速为3滴/秒，各流分接样体积1L，通过薄层层析法对各流分进行点样，合并相同极性的流分，按极性差别从小到大共得到7个部分洗脱液Fr1～Fr7，其中Fr5部分为2:2:1:0.1洗脱部分的流分，该流分在极性为1:2:1:0.1的石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸展开剂系统中，Rf值为0.4～0.6的流分进行合并所得。Fr5用SephadexG-20凝胶柱色谱分离，用氯仿：甲醇＝1:1溶液2L等度洗脱，流速为6秒/滴，每份样品约接100ml，分别得组分Fr5a～Fr5n，经薄层层析点样法，在石油醚-乙酸乙酯＝5:1展开剂系统中，Rf值为0.6的流分Fr5g-Fr5j含有奇蒿黄酮，合并得Fr5g；合并后的Fr5g用反相高效液相制备，制备条件为色谱柱KromasilC18(250mm×21.2mmi.d.；5μm)；流动相比例为乙腈：0.2％甲酸水＝52：48，流速20ml/min，柱温25℃，检测波长250nm，根据检测器谱图上显示，时间段在41min到46min内接收流分“a”，得到奇蒿黄酮(5,7-二羟基-6,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮)。采用高效液相色谱法对所得流分进行纯度检测，测得流分“a”为单一色谱峰，纯度高于99％，挥干溶剂后对流分“a”进行MS、1HNMR和13CNMR分析，根据所得数据进行结构确认，流分“a”为奇蒿黄酮(5,7-二羟基-6,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮)。其中在步骤B中Fr5的制备步骤也可为：将氯仿部位浸膏上硅胶色谱柱(氯仿部位浸膏1.5kg，加入1.5kg硅胶干法拌样上柱，装柱硅胶7kg，以石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统4:2:1:0.1的溶液溶解硅胶装柱)，用石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统以4:2:1:0.1约60L和2:2:1:0.1约20L进行梯度洗脱，流速为3滴/秒，各流分接样体积1L，通过薄层层析法对2:2:1:0.1洗脱的各流分进行点样，在极性为1:2:1:0.1的石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸展开剂系统中，Rf值为0.4～0.6的流分进行合并，减压回收溶剂得到Fr5。奇蒿黄酮结构式如下式Ⅰ：该化合物为黄色颗粒状结晶，EI-MSm/z:,结合1H-NMR和13C-NMR谱图数据确定分子式为C19H18O8。1H-NMR(600MHz,MeOH)δ3.84(3H,s,C4′-OCH3),3.88(3H,s,C6-OCH3),3.94(6H,s,C3′,C5′-OCH3),6.60(1H,s,H-8),6.72(1H,s,H-3),7.24(2H,s,H-2′,H-6′).13C-NMR(600MHz,MeOH)δ166.0(s,C-2),106.0(d,C-3),184.8(s,C-4),155.6(s,C-5),132.2(s,C-6),158.3(s,C-7),96.0(d,C-8),152.9(s,C-9),106.7(s,C-10),128.5(s,C-1′),105.8(d,C-2′),155.6(s,C-3′),142.1(s,C-4′),155.6(s,C-5′),105.8(d,C-6′)。HMBC表示，H-3与C10，C2和C1′相关，H-8与C10，C6和C7相关。NOESY显示H-3和H-8相关。本发明还进一步发现了通过上述方法制备的单体奇蒿黄酮，通过抑菌试验发现对金黄色葡萄球菌药物效果更佳，比从奇蒿中提取的其他提取物的效果更佳。上述制备方法所得的单体奇蒿黄酮在制备抑制金黄色葡萄球菌药物中的应用。有益效果：上述制备所得的具有抗菌活性，对革兰氏阳性菌活性明显，；经体外抗菌实验发现奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抑菌浓度是10μg/ml，杀菌浓度为0.1mg/ml，对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抑菌浓度均为0.3mg/ml，杀菌浓度为1mg/ml，抑菌效果图见图2和图7。附图说明图1奇蒿黄酮正离子模式扫描的MS图谱，奇蒿黄酮的正离子检测峰为[M+Na]+＝397.1m/z检测仪器：AgilentLC-MS6460检测方法：ESI+电子轰击源，色谱柱为AgilentSB-C18(4.6×250mm,5μm)，流动相：甲醇：0.5％甲酸水0-20min35-50％甲醇；20-30min50-60％甲醇；30-50min60-95％甲醇，检测波长：250nm，流速：1ml/min，柱温：30℃，进样量：10μl，干燥器温度：350℃，干燥器流速：12ml/min，雾化器压力：45psi，毛细管电压：135v。图2奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抗菌效果图，实施例1所得单体奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抑菌浓度为10ug/ml，图2中带有+标记的曲线，该浓度下细菌抑制并有下降的趋势，杀菌浓度为0.3mg/ml，为图中▲标记的曲线。以0h，2h，4h，8h和24h为横坐标，以不同时间点与0h在490nm下的吸光值差值为纵坐标，作曲线图。根据吸光度-时间曲线，可以确定实施例1所得单体蒿黄酮样品随着浓度增加。图3芹菜素对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抗菌效果图图4槲皮素对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抗菌效果图图5木犀草素对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抗菌效果图图6青霉素对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抗菌效果图，青霉素对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抑菌浓度为0.1mg/ml，图6中带有*标记的曲线，该浓度下抑菌效果显著。图7奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抗菌效果图，实施例1所得单体奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抑菌浓度为0.3mg/ml，图7中带有×标记的曲线，该浓度下细菌没有生长的趋势。图8芹菜素对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抗菌效果图图9槲皮素对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抗菌效果图图10木犀草素对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抗菌效果图图11青霉素对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抗菌效果图，青霉素对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抑菌浓度为30ug/ml,图11中带有*标记的曲线。图12奇蒿黄酮在反相高效液相制备检测器的位置示意图具体实施方式下面结合实施例对本发明作进一步详细说明，但不以任何方式限制本发明。实施例1蒿属植物中单体奇蒿黄酮的提取方法，按照下述步骤进行：A、制备总粗提物将南刘寄奴HerbaArtemisiaeAnomalae干药材30kg粉碎，然后用300L的70％乙醇水(乙醇和水的体积比为7:3)加热至70℃回流提取2次，合并提取液，减压回收乙醇，得粗提物5.3kg。B、分离纯化将5.3kg粗提取物加水10L溶解，使其混悬，得提取物混悬液，加入石油醚萃取三次(提取物混悬液与每次加入萃取的石油醚体积比为1:2)，合并三次萃取液，减压回收溶剂得石油醚部位浸膏，弃去三次石油醚部位浸膏，得到经石油醚萃取后的提取物混悬液；再向经石油醚萃取后的提取物混悬液中加入氯仿萃取三次(经石油醚萃取后的提取物混悬液与每次加入萃取的氯仿体积为1:2)，合并三次萃取液，减压回收溶剂得氯仿部位浸膏；将氯仿部位浸膏上硅胶柱色谱(氯仿部位浸膏1.5kg，加入1.5kg硅胶干法拌样上柱，装柱硅胶7kg，以石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统8:2:1:0.1的溶液溶解硅胶装柱。)，用石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统以8:2:1:0.1、6:2:1:0.1、4:2:1:0.1、2:2:1:0.1、1:1:1:0.1进行梯度洗脱，每个梯度约20L，流速为3滴/秒，各流分接样体积1L，通过薄层层析法对各流分进行点样，合并相同极性的流分，按极性差别从小到大共得到7个部分洗脱液Fr1～Fr7，Fr1部分为8:2:1:0.1洗脱部分；Fr2部分为6:2:1:0.1洗脱部分；Fr3部分为6:2:1:0.1与4:2:1:0.1的混合洗脱部分，该部分流分在展开剂以石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统为5:2:1:0.1极性下展开，薄层板上Rf值为0.4～0.6的流分合并所得；Fr4部分为4:2:1:0.1部分；Fr5部分为2:2:1:0.1洗脱部分的流分，在极性为1:2:1:0.1的石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸展开剂系统中，Rf值为0.4～0.6的流分合并所得；Fr6部分为2:2:1:0.1与1:1:1:0.1的混合洗脱部分，该部分流分在展开剂以石油醚-二氯甲烷-甲醇-甲酸系统为1:2:1:0.1极性下展开，薄层板上Rf值为0.4的流分合并所得；Fr7部分为1:1:1:0.1洗脱部分。Fr5用SephadexG-20凝胶柱色谱分离，用氯仿：甲醇＝1:1溶液2L等度洗脱，流速为6s/滴，每份样品约接100ml，分别得组分Fr5a～Fr5n，经薄层层析点样法，在石油醚-乙酸乙酯＝5:1展开剂系统中，Rf值为0.6的流分Fr5g～Fr5j含有奇蒿黄酮，合并得Fr5g；合并后的Fr5g用反相高效液相制备，制备条件为色谱柱KromasilC18(250mm×21.2mmi.d.；5μm)；流动相比例为乙腈：0.2％甲酸水＝52：48，流速20ml/min，柱温25℃，检测波长250nm，根据检测器谱图上显示，时间段在41min到46min内接收流分“a”，如下图12(出峰时间t＝43min处为奇蒿黄酮样品峰)。用高效液相色谱法对所得流分进行纯度检测，测得流份“a”为单一色谱峰，纯度高于99％，挥干溶剂后对流分“a”进行MS、1HNMR和13CNMR分析，根据所得数据进行结构确认，流分“a”为奇蒿黄酮(5,7-二羟基-6,3′,4′,5′-四甲氧基黄酮)。奇蒿黄酮正离子模式扫描的MS图谱见图1。奇蒿黄酮结构式如下式Ⅰ：该化合物为黄色颗粒状结晶，EI-MSm/z:,结合1H-NMR和13C-NMR谱图数据确定分子式为C19H18O8。1H-NMR(600MHz,MeOH)δ3.84(3H,s,C4′-OCH3),3.88(3H,s,C6-OCH3),3.94(6H,s,C3′,C5′-OCH3),6.60(1H,s,H-8),6.72(1H,s,H-3),7.24(2H,s,H-2′,H-6′).13C-NMR(600MHz,MeOH)δ166.0(s,C-2),106.0(d,C-3),184.8(s,C-4),155.6(s,C-5),132.2(s,C-6),158.3(s,C-7),96.0(d,C-8),152.9(s,C-9),106.7(s,C-10),128.5(s,C-1′),105.8(d,C-2′),155.6(s,C-3′),142.1(s,C-4′),155.6(s,C-5′),105.8(d,C-6′)。HMBC表示，H-3与C10，C2和C1′相关，H-8与C10，C6和C7相关。NOESY显示H-3和H-8相关。实施例2奇蒿黄酮的体外实验一、主要试验材料菌种：金黄色葡萄球菌(CMCC26003)购自北京北纳创联生物技术研究院；金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、痢疾志贺菌[CMCC(B)51252]和无乳链球菌(CICC10465)购自南京便诊生物科技有限公司。主要试剂：青霉素G钠盐无水购自上海生工生物工程有限公司；改良肉汤培养基和血琼脂培养基购自青岛海博生物技术有限公司；96孔板和培养皿购自广州洁特生物过滤制品有限公司。主要仪器：LDZX-50KB立式压力蒸汽灭菌器，上海申安医疗器械厂；SW-CJ-ID型单人净化工作台，苏州净化；ELX800酶标仪，基因有限公司；HZQ-X100恒温振荡培养箱，华美生化仪器；DHP-022电热恒温培养箱，上海申贤恒温设备厂。二、奇蒿黄酮的抗菌实验药物配制：待筛样品以10mg/ml溶解于体积分数50％的乙醇溶剂中，阳性药(青霉素G钠盐、氯霉素和丁胺卡那霉素无水)以100mg/ml溶解于蒸馏水中。菌种活化和培养：a.称取18g改良肉汤培养基于300ml蒸馏水中，于121℃灭菌20min。无菌条件下，分装至15ml的离心管中，每管10ml。b.取1ml培养基至菌种冻干粉中，吹打混匀后转移到15ml离心管，于37℃，150rpm培养24h。c.取100ul菌悬液涂布于血琼脂培养基表面，于37℃电热恒温培养箱培养24h。挑取单克隆于肉汤培养基中培养24h。3.MBC和MIC测定：a.取培养24h后的细菌种96孔板，每孔100ul；设置不加药孔，加药孔和阳性对照药孔。加药浓度从3mg/ml起，用培养基3倍梯度稀释，共6个梯度。阳性对照药孔从10mg/ml起，3倍梯度稀释，共6个梯度。b.酶标板490nm测定OD值：加完药测定0h，2h，4h，8h和24h共6个时间点，计算MIC。c.取酶标板中有抑菌效果的菌液，均匀涂抹于平板培养基上，生化培养箱中继续培养24小时，无菌落形成的最小浓度即为MBC.三、其他类似提取物的抗菌试验中药奇蒿中所含化学成分种类复杂，其有效活性物质主要为黄酮类化合物，经研究天然产物化学研究发现[张琳,田富饶,周文明等.奇蒿化学成分研究[C].第九届全国中药和天然药物学术研讨会大会报告及论文集.2007.373-379]，奇蒿中含有除奇蒿黄酮以外其他黄酮类化合物，主要为芹菜素、槲皮素、木犀草素等。对于以上黄酮类化合物，相关学者也进行了很多研究，其中SousaA[SousaA，FerreiraIC，CalhelhaR，eta1.Phenolicsandantimierobialactivityoftraditionalstonedtableolivesalcaparra[J].BioorgMedChem，2006，14(24)：8533-8538]采用最低抑菌浓度实验对芹菜素糖苷抗菌活性进行研究，结果表示芹菜素糖苷的最低抑菌浓度为25mg/ml，为中等强度的抑菌活性。秦晓蓉等[秦晓蓉,张铭金,高绪娜等.槲皮素抗菌活性的研究[J].化学与生物工程,2009,26(4)：55-58]采用药敏纸片法对槲皮素的抗菌活性进行了研究，结果显示槲皮素对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度为0.0061μmol/ml(相当于1.8422mg/ml)，抑菌活性显著。林卓慧[林卓慧.木犀草素抗菌活性研究[J].检验医学与临床,2009,6(12)：1022-1023]采用试管稀释法对木犀草素的进行了抗菌研究，实验结果发现木犀草素对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度为0.3mg/ml。根据以上文献，本研究采用实施例2的方法对奇蒿黄酮、芹菜素、槲皮素和木犀草素进行了体外抗菌活性比较，实验结果：奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)和金黄色葡萄球菌(ATCC6538)抑菌浓度分别为10ug/ml和0.3mg/ml，杀菌浓度分别为0.1mg和1mg/ml；芹菜素的抑菌浓度分别为10ug/ml和0.3mg/ml，杀菌浓度均为1mg/ml；槲皮素的抑菌浓度分别为10ug/ml和1mg/ml；杀菌浓度均为0.3mg/ml；木犀草素的抑菌浓度分别为0.3mg/ml，1mg/ml；杀菌浓度分别为1mg/ml，3mg/ml。以上活性数据对，黄酮类化合物对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)抑菌活性的强弱顺序为：奇蒿黄酮＝芹菜素＝槲皮素>木犀草素，杀菌活性活性顺序为：奇蒿黄酮>槲皮素>芹菜素＝木犀草素；对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)抑菌活性的情若顺序为：奇蒿黄酮＝芹菜素>槲皮素＝木犀草素，杀菌活性顺序为：奇蒿黄酮＝槲皮素＝芹菜素>木犀草素。综上所述，对金黄色葡萄球菌杀菌活性强弱顺序为：奇蒿黄酮>芹菜素>槲皮素>木犀草素，表明奇蒿黄酮是目前发现对金黄色葡萄球菌抑菌效果最好的化合物，以上抗菌效果图见图2～5和图7～10。根据实例2方案对单体奇蒿黄酮进行的体外抗菌实验，结果表明单体奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抑菌浓度为10ug/ml，其阳性药青霉素对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抑菌浓度为0.1mg/ml。奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(CMCC26003)的抑菌浓度时青霉素的10倍，效果显著。奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抑菌浓度为0.3mg/ml，青霉素对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抑菌浓度为30ug/ml。经对比表明奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)的抑菌浓度较青霉素高，但该浓度下，奇蒿黄酮对金黄色葡萄球菌(ATCC6538)抑菌效果显著，能够有效的抑制细菌繁殖生长，青霉素抗菌效果图见图6和图11。金黄色葡萄球菌是一种抵抗力较强的革兰氏阳性球菌，这种细菌容易产生耐药性。目前，随着抗生素药物的广泛应用，耐药金黄色葡萄球菌也随之增加，从天然产物中寻找抗生素替代药物任务迫在眉睫。基于本次研究发现奇蒿中奇蒿黄酮对2种型号的金黄色葡萄球菌抑菌效果显著，表明奇蒿黄酮具有类抗生素样作用，为奇蒿黄酮后续进一步扩大抗菌谱研究和体内研究提供基础。本次研究所得抑菌浓度为奇蒿黄酮的临床应用和药物制剂提供参考，为奇蒿药材资源的合理开发和应用提供理论依据。奇蒿黄酮对痢疾志贺菌的最低抑菌浓度为0.1mg/ml,最小杀菌浓度为3mg/ml。对无乳链球菌的最低抑菌浓度为1mg/ml,最小杀菌浓度为3mg/ml。以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。当前第1页1 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