本发明属于微藻养殖技术领域,尤其涉及一种亚心形扁藻的保藏方法。
背景技术:
亚心形扁藻适应性强、广温广盐条件下都能生长,在我国沿海各省都有大量的培养,可作为海产品幼体前期的优质植物性饵料,营养价值高,无毒、副作用,投喂幼体后,能够提高其免疫和抗病能力,对海产品幼体的生长发育有着极其重要的作用。
目前亚心形亚心形扁藻主要是通过固体培养基和液体培养基这两种方式保藏。固体培养基保藏时间长,但是长时间的放置会使培养基中的水分蒸发,降低藻株的生长活力;液体培养基中藻株活动空间大、生长能力强,但是快速的生长造成营养的迅速消耗,其保藏时间相对就减少,需要频繁更换保藏培养液。
技术实现要素:
为解决当前技术存在的问题,我们提供一种亚心形扁藻的保藏方法。
本发明所采用的技术方案:
一种亚心形扁藻的保藏方法,所用到的保藏培养基配方为:硝酸钠0.04~0.06g、磷酸二氢钾0.01~0.03g、柠檬酸铁0.15~0.25ml、维生素B1 0.08~0.12mg、维生素B12 0.08~0.12μg、海泥浸出液10~30ml、琼脂4~6g、过滤海水补足1000ml。
所述柠檬酸铁为1%柠檬酸铁溶液,避光于4℃保存。
一种亚心形扁藻的保藏方法,包括以下步骤:
步骤一按半固体培养基配方比例称量各成分,加入锥形瓶中,高温高压灭菌;
步骤二灭菌完成后于超净工作台中混匀,分装到若干灭菌试管中,塞上棉塞,冷却后紫外线照射一段时间;
步骤三将接种环在酒精灯火焰旁灼烧冷却后,沾取少量亚心形扁藻,迅速移至试管中;
步骤四将接种环从半固体培养基中央垂直刺入至距管底1/4~1/3处,然后原路退出;
步骤五在火焰旁灼烧试管口,塞紧并用包头纸包好棉塞,置于23℃、12:12光照条件下,让藻株自由生长;
步骤六待培养基中出现绿色亚心形扁藻藻落后,将试管移至10℃冰箱中,放置保存即可。
所述步骤一中,灭菌条件为121℃,30min。
所述步骤二中,紫外线照射时间为15~25min。
所述步骤四中,原路退出时,接种环不能在培养基中左右移动。
本发明的有益效果:
使用本发明的方法保藏亚心形扁藻,有效解决了以往固体培养基中水分快速蒸发的问题,使亚心形扁藻能持续从培养基中获得营养,不断生长,从而延长保藏时间;使用半固体培养基保藏亚心形扁藻,给藻株一定的活动空间,保持其生长活力,在需要时能迅速复苏;整个过程在无菌环境中进行,操作简单方便,且能有效防止藻株不被污染。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行详细阐述:
一种亚心形扁藻的保藏方法,所用到的保藏培养基配方为:硝酸钠0.05g、磷酸二氢钾0.02g、1%柠檬酸铁溶液0.2ml、维生素B1 0.1mg、维生素B12 0.1μg、海泥浸出液20ml、琼脂5g、过滤海水补足1000ml。
一种亚心形扁藻的保藏方法,包括以下步骤:
步骤一按半固体培养基配方比例称量各成分,加入锥形瓶中,121℃,30min灭菌;
步骤二灭菌完成后于超净工作台中混匀,分装到若干灭菌试管中,塞上棉塞,冷却后紫外线照射20min;
步骤三将接种环在酒精灯火焰旁灼烧冷却后,沾取少量亚心形扁藻,迅速移至试管中;
步骤四将接种环从半固体培养基中央垂直刺入至距管底1/3处,然后原路退出;
步骤五在火焰旁灼烧试管口,塞紧并用包头纸包好棉塞,置于23℃、12:12光照条件下,让藻株自由生长;
步骤六待培养基中出现绿色亚心形扁藻藻落后,将试管移至10℃冰箱中,放置保存即可。
上述仅为本发明的一个具体实施方式,显然,本发明不限于以上实施例,还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形,均应认为是本发明的保护范围。