一种提取贻贝DNA的方法与流程

文档序号:12712416阅读:来源:国知局
技术总结
本发明涉及一种提取贻贝DNA的方法,步骤如下:(1)取贻贝肌肉组织粉碎后加入到含500μL STE及50μL 10% SDS裂解缓冲液的离心管中,并加入5μL浓度为20mg/mL的蛋白酶K,55-57℃水浴10-60min;(2)加入250μL饱和酚、250μL氯仿/异戊醇(24:1),轻柔晃动5-15min,室温10000-12000rpm离心8-15min;(3)吸取上清液至新离心管中,重复步骤(2);(4)吸取上清液至新离心管中,加入500μL氯仿/异戊醇,轻柔晃动5-15min,室温10000-12000rpm离心8-15min;(5)吸取上清液,加入50μL 3M NaAc,添加1mL在-20℃预冷的无水乙醇,-20℃放置20-50min,10000-15000rpm离心8-15min,得到DNA沉淀;(6)70%乙醇洗涤沉淀1-3次;(7)沉淀干燥溶解去RNA;本发明的方法特别适于贻贝DNA的提取,提取的DNA浓度、纯度非常高,适于文库构建、PCR等后续研究。

技术研发人员:焦秀花
受保护的技术使用者:焦秀花
文档号码:201510956363
技术研发日:2015.12.21
技术公布日:2017.06.27

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