技术领域本发明属于医药技术领域，具体涉及一种直链醇苷类化合物及其制备方法和应用。
背景技术：
恶性肿瘤已成为危害人类健康的严重疾病之一。目前癌症治疗手段有手术和化疗途径，但具有复发转移率较高，毒副作用大等局限性，因此抗癌药物的研究对象逐渐转向高效、低毒的天然植物。中药抗肿瘤研究已显示巨大的潜力，尤其是开发植物中药中抗癌有效组分，解析中药化学结构和提取分离其有效成分是当前的探索方向。有研究表明，核桃青皮提取物可抑制体外培养的肿瘤细胞的增殖，其机理是直接杀伤肿瘤细胞；另外还有许多临床报道和民间用药经验均显示核桃青皮体内抗肿瘤效果也很显著。但目前对其产生抗肿瘤作用的有效成分尚不确定，因此对青龙衣开展活性成分挖掘工作是十分必要的。
技术实现要素：
本发明的目的是为了解决上述问题，扩大治疗肿瘤药物资源，提供一种新的具有肿瘤细胞抑制作用的化合物。为了达到上述目的，本发明提供了己醇-1-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷，其结构式如下所示：本发明还提供了己醇-1-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷的制备方法：以核桃青皮为原料，依次通过醇提、柱层析制备得到。上述柱层析依次包括大孔树脂柱、正相硅胶柱、反相硅胶柱和制备高效液相色谱柱。本发明己醇-1-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷具体制备步骤如下：（1）醇提：将核桃青皮（来源为核桃楸JuglansmandshuricaMaxim的青果皮）鲜品低温40℃烘干，得到的干燥品为原料，采用乙醇回流提取3次，分别为，第1次用60L95%乙醇提取3h，第2次40L95%乙醇提取2h，第3次用35L95%乙醇提取2h，过滤，合并3次滤液，减压回收溶剂，干燥，得粉末状提取物；（2）富集纯化：将上述步骤（1）中醇提所得粉末状提取物用水分散至相对密度为1.25±0.05的溶液，经AB-8型大孔树脂柱色谱富集纯化，分别以水、10%乙醇、25%乙醇、95%乙醇依次洗脱，收集25%乙醇洗脱液，减压回收溶剂得25%乙醇洗脱部分；（3）正相硅胶柱分离：将上述步骤（2）中所得25%乙醇洗脱部分进行正相硅胶柱色谱纯化，分别用10：0、9：1、8：2、7：3、6：4、5：5、4：6、3：7、2：8、1：9和0：10的二氯甲烷-甲醇梯度淋洗，每一个比例淋洗2.5个柱体积，将5：5和4：6的二氯甲烷-甲醇洗脱部分合并，减压回收溶剂得到分离产物；（4）反相硅胶柱分离：取经上述步骤（3）分离后的产物，通过反相硅胶ODS柱色谱，先以水洗脱2个柱体积，弃去。然后更换至甲醇：水=1：1（V/V）洗脱3.5个柱体积，收集洗脱液，回收至干得粗品；（5）制备高效液相色谱柱分离：将上述步骤（4）中所得粗品采用甲醇溶解进入制备型高效液相，流动相为体积比是34：66的甲醇和水混合溶液，洗脱流速为3mL/min，保留时间tR=23.0min～23.4min阶段内收集馏分后，回收干燥即得。本发明还提供了己醇-1-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷在抗肿瘤方面的应用。优选为在治疗人肝癌、胃癌方面的应用。迄今为止以上研究成果尚未有专利或文献报道。本发明的有益效果和意义在于：采用的原料为核桃青果皮，每年产量很大，但通常被当做废物抛弃且污染环境，以此为原料进行化合物提取，不仅有利于该药用资源的可持续发展还很大程度上保护了环境；所述新化合物具有较好的抗肿瘤作用，可用于制备抗癌药物，应用前景广阔。附图说明图1为本发明化合物的化学结构式；图2为本发明化合物的正性HR-ESI-MS谱图；图3为本发明化合物的1H-NMR谱图；图4为本发明化合物的13C-NMR谱图；图5为本发明化合物的DEPT谱图；图6为本发明化合物的HSQC谱图；图7为本发明化合物的HMBC谱图。具体实施方式根据本发明所公开的技术内容，本领域技术人员很清楚本发明的其他实施方案，下述实施方案仅作示例。在不违反本发明主旨及范围的情况下，可对本发明进行各种调整和改进。这些变化应在本发明的保护范围内。下面结合具体实施例对本发明进行详细说明。实施案例一本发明化合物的制备方法：（1）将核桃青皮（来源为核桃楸JuglansmandshuricaMaxim的青果皮）鲜品低温40℃烘干，得到的干燥品为原料，采用乙醇回流提取3次，分别为，第1次用60L95%乙醇提取3h，第2次40L95%乙醇提取2h，第3次用35L95%乙醇提取2h，过滤，合并3次滤液，减压回收溶剂，干燥，得粉末状提取物650g；（2）富集纯化：将上述步骤（1）中醇提所得粉末状提取物用水分散至相对密度为1.25±0.05的溶液，经AB-8型大孔树脂柱色谱富集纯化（色谱柱内径5cm长1.2m，其中树脂有效高度0.8m），分别以水（用量3个柱体积）→10%乙醇（用量2个柱体积）→25%乙醇（用量5个柱体积）→95%乙醇（用量3.5个柱体积）依次洗脱，收集25%乙醇洗脱液，减压回收溶剂得25%乙醇洗脱部分43g；（3）正相硅胶柱分离：将上述步骤（2）中所得25%乙醇洗脱部分采用正相硅胶柱（色谱柱内径3cm长1.5m，其中硅胶有效高度0.8m），依次采用纯二氯甲烷（用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（9：1，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（8：2，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（7：3，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（6：4，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（5：5，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（4：6，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（3：7，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（2：8，V/V，用量2.5个柱体积）→二氯甲烷-甲醇（1：9，V/V，用量2.5个柱体积）→纯甲醇溶液（用量2.5个柱体积）进行系统梯度洗脱，将5：5和4：6的二氯甲烷-甲醇洗脱部分合并，减压回收溶剂至干，称重3.12g；（4）反相硅胶柱分离：取经上述步骤（3）分离后的产物，通过反相硅胶ODS柱色谱（色谱柱内径2cm，长0.8m，其中反相硅胶有效高度0.5m），先以水洗脱2个柱体积，弃去。然后更换至甲醇：水=1：1（V/V）洗脱3.5个柱体积，收集洗脱液，回收至干得粗品0.23g；（5）制备高效液相色谱柱分离：将上述步骤（4）中所得粗品进一步以制备型高效液相制备（Waters515-2414，SunFireTMPrepC18，250mm×10mmi.d.，5μm），以流动相甲醇：水=34：66（V/V）洗脱，洗脱流速为3mL/min，在保留时间tR=23.0min～23.4min阶段内收集馏分后，回收干燥即得纯品8.2mg。实施案例二本发明化合物的表征本发明化合物为淡黄色无定形粉末，易溶于甲醇。正性HR-ESI-MS谱中，在m/z419.4137处可见[M+Na]+离子峰，表明该化合物的分子量为396。结合1H-NMR、13C-NMR及DEPT谱等推测其分子式为C17H32O10，计算其不饱和度为2。其具体波谱数据见表1。表1发明化合物的NMR数据归属效果实施例MTT（四唑盐）法测定己醇-1-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷对人肿瘤细胞的杀伤作用。（1）肿瘤细胞类型：人肝癌HepG-2细胞和人胃癌BGC-823细胞。（2）实验具体操作方法：肿瘤细胞培养于RPMI1640基质中（含有10%L-谷氨酰胺的胎牛血清，100μg·mL?1盘尼西林，100μg·mL?1链霉素）。取处于对数生长期的肿瘤细胞，加入0.25%胰蛋白酶消化，以浓度为10×104个mL-1，取180μL的细胞悬液置于96孔板中，每组均设3个平行孔，另设空白孔和对照孔，空白孔未接种细胞，对照孔为不含药物的培养液。于37℃、5%CO2条件下培养24h后，在培养液中加入待测样品（样品溶解于DMSO中，用培养基逐步稀释，加入细胞中药液的DMSO终浓度低于1%），使药物终浓度为0、5、25、50、75、100μM。溶液继续在37℃5%CO2培养箱中共同培养48h。每孔加入20μLMTT溶液（5mg/mL，溶解于PBS中，继续培养4h后，终止培养。小心吸弃上清液，每孔加入150μLDMSO，摇床上震荡10min，使结晶物完全充分溶解。用酶标仪在570nm处测每孔的吸光值（A），计算出细胞存活抑制率：细胞存活抑制率%=[1-(实验组A-空白组A)/（对照组A-空白组A）]×100%。数据使用SPSS软件分析系统进行处理。（3）实验结果：不同浓度该新化合物对肿瘤细胞的存活抑制率实验数据见表2。结果表明，本发明化合物对上述肿瘤细胞均有较好的生长抑制作用，对人肝癌HepG-2细胞和人胃癌BGC-823细胞的IC50分别为56.43μM和51.47μM。表2新化合物对人肝癌HepG-2细胞和人胃癌BGC-823细胞存活抑制率综上所述，本发明所述的从青龙衣中分离得到的直链醇苷化合物己醇-1-O-α-L-呋喃阿拉伯糖苷(1→6)-β-D-吡喃葡萄糖苷具有制备临床肿瘤治疗药物的前景。