一种蒺藜皂甙K的提取分离方法与流程

本发明涉及一种蒺藜皂甙K的提取分离方法，属医药，化工
技术领域：
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背景技术：
：蒺藜皂甙K(TerrestrosinK)是来源于蒺藜科(Zygophylaceae)蒺藜属(Tribulus)植物蒺藜果。本发明采用的原料为刺蒺藜果。蒺藜皂甙K是一种重要的药物中间体，现代研究证明，蒺藜皂甙K具有治疗心脑血管疾病的药理作用，国外已开发出软化血管的药物。蒺藜皂甙K在天然植物中的含量很低，本发明所用原料的含量为天然植物中含量较高的，也仅为0.4‰。因其含量低，采用传统的柱层析分离提取技术，很难达到纯度98％以上的同时进行工业化生产。本发明开发了一种提取技术，不仅解决了工业化生产的问题，同时也使纯度达到原料药级别。技术实现要素：本发明的目的在于提供一种蒺藜皂甙K的提取分离方法，以解决无法工业化及纯度较高的问题。为了实现上述目的，本发明依据植物提取的常规工艺进行研究开发，采用刺蒺藜果，用质体比为1:8的甲醇低温回流提取3次，合并低温浓缩浸膏状，采用树脂柱乙醇洗脱浓缩富集、硅胶柱分离，硅胶与浓缩液比例为200:1，洗脱剂采用三氯甲烷和甲醇混合溶剂，比例为65:35，TLC跟踪监测，洗脱完成后，收集目标物低温浓缩，用5％乙腈溶解，再采用制备液相再次分离，低温浓缩后冷冻干燥可得纯品蒺藜皂甙K。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述甲醇低温回流提取，不单指低温回流提取，还包括温度范围在60-80℃。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述低温浓缩，不单指低温浓缩，其浓缩温度不能大于80℃。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述采用树脂柱乙醇洗脱浓缩富集，所用树脂型号为D101树脂，水溶浓缩浸膏上样，水洗脱杂质，50％乙醇洗脱目标物，TLC跟踪监测。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述用TLC跟踪监测，指薄层色谱硅胶板，展开剂为三氯甲烷：甲醇：水＝55:35:1，用10％硫酸乙醇溶液显色。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述硅胶柱分离，将反应液浓缩，浓缩至胶状后，将胶状物加入硅胶柱中，硅胶与浓缩液比例为200:1，然后用三氯甲烷和甲醇混合溶剂，比例为65:35(V/V)，进行洗脱。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述制备液相再次分离，其溶解样品不单指用5％乙腈，还包括2％-10％乙腈-水溶液，质体比为1:15。上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述制备液相再次分离，选用洗脱条件如下:时间(min)乙腈(％)水(％)02674203565403565上述蒺藜皂甙K的提取方法，其特征在于：所述低温浓缩后冷冻干燥，浓缩温度控制在80℃以内，冷冻干燥真空度为150Pa以内、温度为-40℃以下。蒺藜皂甙K结构式如下:附图说明图1为本发明最终纯品LC-MS图谱。图2为本发明最终纯品IR图谱。图3为本发明最终纯品HMQC图谱。图4为本发明最终纯品CNMR图谱。图5为本发明最终纯品HNMR图谱。具体实施方式实施例:所述述蒺藜皂甙K的提取方法：取3000Kg刺蒺藜果，烘干粉碎后，加入3000L甲醇，回流3小时，提取3次，合并提取液，将合并液75℃浓缩，浓缩至胶状后比重为1.3，将胶状物加入硅胶柱中，硅胶与浓缩液比例为200:1，然后用三氯甲烷和甲醇混合溶剂，比例为65:35，进行洗脱。通过TLC检测洗脱完成后，目标物低温浓缩至胶状后，用5％乙腈-水溶解，质体比为1:15，乙腈-水比例梯度洗脱，21分钟后收集目标物低温浓缩，冷冻干燥机冻干的纯品120g。当前第1页1 2 3