一种2‑羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备方法及应用与流程

本发明涉及杀菌剂技术领域，尤其是一种2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备及其作为稻瘟病新型杀菌剂的应用。

背景技术：

由于腙类具有优良的生物活性，特别是对许多酶具备有效的抑制作用，其在农药、医药和分析试剂方面都有广泛的应用，如嘧菌腙用于防治水稻的稻尾孢、稻长蠕孢和稻梨孢等病菌。这种腙类化合物对催化剂，酶反应，分子结构和材料化学的发展有显著地贡献。而腙类金属配合物具有比腙类本身更好的生物活性，开发新的腙类金属配合物作为杀菌剂很有意义。

稻瘟病是水稻上危害最重的病害之一，同纹枯病、白叶枯病被列为我国水稻三大病害，大流行时常造成大面积减产，严重时，至颗粒无收，对水稻生产影响极大，其研究已有100余年的历史，但一直是世界性难题。

鉴于此，开发一类较好的稻瘟病的拟杀菌剂迫在眉睫。而大量具有生物活性的腙类化合物中，芳酰类腙的代谢产物均系低毒或无毒，且至今还没有关于2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物及其作为抑杀稻瘟病及其他作物病害的文献报道。

鉴于上述缺陷，本发明创作者经过长时间的研究和实践终于获得了本创作。

技术实现要素：

根据以上情况，本发明合成了一种低毒或无毒，配位能力强，具有优良生物活性的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙，并根据镍和2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙产生的生物效应，开发一类新的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物抑杀菌剂。

为实现上述目的，本发明提供一种2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备方法包括以下步骤：

步骤a，水杨酰肼的制备；

将水杨酸甲酯和水合肼按1∶1.1的物质的量比加入无水乙醇中，加热回馏反应，蒸出大部分乙醇，冷却，搅拌，析出白色固体，用水和乙醇混合溶剂重结晶，得白色针状晶体；

步骤b，2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙的制备；

将水杨酰肼和乙酰乙酸乙酯按1∶2的物质的量比加入到40mL无水乙醇中，水浴加热回馏搅拌反应，冷却，有白色针状晶体析出，抽滤得到的粗产品用无水乙醇重结晶，得白色针状晶体；

步骤c，2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备；

按硝酸镍与配体1∶2.6的物质的量比称量一定的Ni(NO₃)₂和配体；

先将配体和一定量的乙醇加入烧杯中，超声0.5h使配体全部溶解，再将溶于水的硝酸镍加入，加热反应一段时间然后保温，最后降到室温有红褐色固体析出，待其冷却抽滤，并用热的无水乙醇和丙酮充分洗涤，除去未反应的配体和硝酸镍，放入真空干燥箱中干燥至恒重。

进一步地，上述步骤b中的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙的结构式为：

进一步地，上述步骤c中的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的结构式为：

进一步地，所述步骤a中水杨酸甲酯和水合肼摩尔比为1∶1.1，析出的粗产品水杨酰肼用水和无水乙醇混合溶剂重结晶。

进一步地，所述的步骤b中的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙晶体为单斜晶系，空间群P2(1)/n，晶胞参数a＝8.375(8)nm，b＝14.723(16)nm，c＝22.46(2)nm，α＝90.00°，β＝96.96°，γ＝90.00°，V＝2749(5)nm³，Z＝4，F(000)＝1120。

进一步地，所述步骤c中的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物为单斜晶系，空间群P2(1)/n，晶胞参数a＝12.177(2)nm，b＝13.061(2)nm，c＝11.4015(19)nm，α＝90.00°，β＝113.673(3)°，γ＝90.00°，V＝1660.7(5)nm³，Z＝1，F(000)＝624。

进一步地，所述步骤a和所述步骤b中反应温度为80℃；

进一步地，所述步骤c中反应温度是80℃，保温时间为30h。

本发明还提供一种2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的应用，作为稻瘟病新型杀菌剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明制备出来的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物用于小麦诱病、稻瘟病、苹果腐烂病和番茄灰霉病的抵抗和治疗有明显的效果，且杀菌效率高，制备方法简单。

本发明合成方法简单，易于工业化生产。

附图说明

图1为本发明的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备方法的流程图；

图2为2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙的晶体结构图；

图3为2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的晶体结构图。

具体实施方式

以下结合附图，对本发明上述的和另外的技术特征和优点作更详细的说明。

2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤a，水杨酰肼的制备；

将水杨酸甲酯和水合肼按1∶1.1的物质的量比加入无水乙醇中，加热回馏反应，蒸出大部分乙醇，冷却，搅拌，析出白色固体，用水和乙醇混合溶剂重结晶，得白色针状晶体；

步骤b，2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙的制备；

将水杨酰肼和乙酰乙酸乙酯按1∶2的物质的量比加入到40mL无水乙醇中，水浴加热回馏搅拌反应，冷却，有白色针状晶体析出，抽滤得到的粗产品用无水乙醇重结晶，得白色针状晶体；

步骤c，2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物的制备；

按硝酸镍与配体1∶2.6的物质的量比称量一定的Ni(NO₃)₂和配体；

先将配体和一定量的乙醇加入烧杯中，超声0.5h使配体全部溶解，再将溶于水的硝酸镍加入，加热反应一段时间然后保温，最后降到室温有红褐色固体析出，待其冷却抽滤，并用热的无水乙醇和丙酮充分洗涤，除去未反应的配体和硝酸镍，放入真空干燥箱中干燥至恒重。

其中，

所述步骤a中水杨酸甲酯和水合肼摩尔比为1∶1.1，析出的粗产品水杨酰肼用水和无水乙醇混合溶剂重结晶。

所述步骤b中的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙晶体为单斜晶系，空间群P2(1)/n，晶胞参数a＝8.375(8)nm，b＝14.723(16)nm，c＝22.46(2)nm，α＝90.00°，β＝96.96°，γ＝90.00°，V＝2749(5)nm³，Z＝4，F(000)＝1120。

所述步骤c中的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物为单斜晶系，空间群P2(1)/n，晶胞参数a＝12.177(2)nm，b＝13.061(2)nm，c＝11.4015(19)nm，α＝90.00°，β＝113.673(3)°，γ＝90.00°，V＝1660.7(5)nm³，Z＝1，F(000)＝624。

所述步骤a和所述步骤b中反应温度为80℃；反应时间均为3h。

所述步骤c中反应温度是80℃，保温时间为30h。

所述步骤c中的产物2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物作为杀菌剂的应用。

本实施例的反应式如下：

实施例1 2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物对稻瘟病田间药效实验

实验原理：生长速率法也叫培养基加药法。该方法是把供试药剂与未凝固的培养基混合均匀，待冷却凝固后接上菌种，用这种含药的培养基培养病菌，通过菌丝生长速度的快慢来判断供试药剂的抑菌效果。

供试药剂：2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物(NiL)

供试病原菌：稻瘟病病原真菌

实验步骤：不同浓度梯度供试药剂的准备 病原菌种的准备 供试药剂培养基的制备

打致病菌 接菌 培养 检查

试验方法：

在预实验的基础上，将供试药剂稀释5个系列浓度，分别从低浓度到高浓度用灭菌的吸管吸取1ml药液，放入20ml刻度试管，立即倒入溶化的PDA培养基至10ml，(备注：此时培养基中药液浓度是原来未加入培养基前药液浓度的1/10)摇均后倒入9cm培养皿，制成带药的PDA培养基，每个浓度重复3次，以无菌水处理作为对照，待培养基冷却后，用接种针稻瘟病菌菌饼，置与培养皿中央，菌丝一面向下，然后加盖并标记，置于26℃恒温箱中培养，待72小时取出，用卡尺测量菌落直径，计算抑制率，以抑制率机率值Y为纵坐标，浓度对数X为横坐标，得出毒力回归方程Y＝a+bx，并由此计算出药剂的EC50值。

本发明制备出来的2-羰基丁酸乙酯水杨酰腙镍配合物用于小麦诱病、稻瘟病、苹果腐烂病和番茄灰霉病的抵抗和治疗有明显的效果，且杀菌效率高，制备方法简单。

生长速率抑制实验的结果见下表1：

表1药品NiL对水稻稻瘟病菌室内毒力测定结果

由上表可知，NiL在浓度为250mg/L时，其对稻瘟病的抑制作用效果最好。毒力回归方程为y＝1.454X+4.351，相关系数r＝0.992，EC50＝2.79mg/L

上述详细说明是针对本发明其中之一可行实施例的具体说明，该实施例并非用以限制本发明的专利范围，凡未脱离本发明所为的等效实施或变更，均应包含于本发明技术方案的范围内。