1.一株能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌,其特征在于,在酿酒酵母菌中导入了来源于热带假丝酵母的木糖还原酶XR和木糖醇脱氢酶XDH。
2.根据权利要求1所述的能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌,其特征在于,所述的酿酒酵母菌为S.cerevisiae BY4741(MATa;ura3;his3;leu2;met15)。
3.根据权利要求1所述的能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌,其特征在于,所述的木糖还原酶XR,其核苷酸序列如SEQ ID NO.:1所示,所述的木糖醇脱氢酶XDH其核苷酸序列如SEQ ID NO.:2所示。
4.根据权利要求1所述的能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌,其特征在于,所述的木糖还原酶XR和木糖醇脱氢酶XDH的基因的启动子为TEF1或PGK1;
所述TEF1启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.:3所示;
所述PGK1启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.:4所示。
5.根据权利要求4所述的能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌,其特征在于,所述的木糖还原酶XR的基因的启动子为TEF1,所述的木糖醇脱氢酶XDH的基因的启动子为PGK1。
6.根据权利要求4所述的能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌,其特征在于,所述木糖还原酶XR基因和木糖醇脱氢酶XDH的基因的3’端克隆有终止子,所述终止子的核苷酸序列如SEQ ID NO.:5所示。
7.权利要求1~6任一所述的能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌的构建方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)用overlap PCR得到包含启动子、目的基因、终止子的DNA片段,将该DNA片段克隆到pYX212质粒上,得到重组质粒;
(2)将步骤(1)得到的重组质粒转化酿酒酵母菌。
8.权利要求1~7任一所述能共利用木糖和葡萄糖的酿酒酵母基因工程菌在利用木糖为碳源中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,发酵培养基中,木糖与葡萄糖的质量比例为1:5~5:1。
10.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,发酵前,种子培养的条件如下:培养温度为30~32℃,培养时间为20~24h,转速为200~240rpm,种子培养基包括:葡萄糖20g/L,酵母粉10g/L,蛋白胨20g/L,初始pH5.2,溶剂为水;
发酵时,发酵培养的条件如下:培养温度为30~32℃,培养时间为40~108h,转速为200~240rpm,发酵培养基包括:葡萄糖10~50g/L,木糖10~50g/L,酵母粉10~20g/L,蛋白胨20~30g/L,初始pH5.2~5.5。