调节目标蛋白表达的折叠因子及其应用的制作方法

文档序号:11126083阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种调节目标蛋白重组表达或活性的方法,其特征在于,所述方法包括:当目标蛋白在细胞表达的同时,还在细胞内表达折叠因子;所述的折叠因子选自:PDI2蛋白、PDI3蛋白或NEF蛋白。

2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的调节目标蛋白重组表达或活性包括:促进目标蛋白的表达或活性或抑制目标蛋白的表达或活性。

3.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的细胞是酵母细胞;较佳地是毕赤酵母细胞,酿酒酵母细胞。

4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的目标蛋白是外源蛋白;较佳地,所述的目标蛋白是适于利用酵母细胞重组表达的蛋白;较佳地,所述的目标蛋白包括:结构蛋白,功能性蛋白,酶。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,所述的目标蛋白包括EGFP蛋白或Gal蛋白,且所述的PDI2蛋白、PDI3蛋白或NEF蛋白抑制目标蛋白的重组表达;或所述的目标蛋白是Gal蛋白,且所述的PDI3可提高Gal蛋白的活性;或所述的目标蛋白是CPC酰化酶,且所述的PDI2蛋白、PDI3蛋白或NEF蛋白促进目标蛋白的重组表达或活性。

6.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的PDI2蛋白是:(a)如SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽;(b)将SEQ ID NO:2氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的,且具有(a)多肽功能的由(a)衍生的多肽;或(c)与(a)限定的多肽序列有80%以上同源性且具有(a)多肽功能的由(a)衍生的多肽;

所述的PDI3蛋白是:(a’)如SEQ ID NO:4氨基酸序列的多肽;(b’)将SEQ ID NO:4氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的,且具有(a’)多肽功能的由(a’)衍生的多肽;或(c’)与(a’)限定的多肽序列有80%以上同源性且具有(a’)多肽功能的由(a’)衍生的多肽;

所述的NEF蛋白是:(a”)如SEQ ID NO:6氨基酸序列的多肽;(b”)将SEQ ID NO:6氨基酸序列经过一个或多个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的,且具有(a”)多肽功能的由(a”)衍生的多肽;或(c”)与(a”)限定的多肽序列有80%以上同源性且具有(a”)多肽功能的由(a”)衍生的多肽。

7.折叠因子的用途,用于调节目标蛋白重组表达或活性;其中,所述的折叠因子选自:PDI2蛋白、PDI3蛋白或NEF蛋白。

8.如权利要求7所述的用途,其特征在于,所述的调节目标蛋白重组表达包括:促进目标蛋白的表达或抑制目标蛋白的表达。

9.用于调节目标蛋白的表达的折叠因子集,其特征在于,所述的折叠因子集包括:PDI2蛋白、PDI3蛋白和NEF蛋白。

10.一种重组表达目标蛋白的方法,其特征在于,所述方法包括:

(1)将目标蛋白的表达盒转入细胞中,分别将权利要求9的折叠因子集中的折叠因子转入细胞中;

(2)观察各折叠因子对于目标蛋白的表达或活性的影响,选择出促进目标蛋白的表达或活性的折叠因子;

(3)将步骤(2)选择出的折叠因子与目标蛋白共表达。

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