一种海水小球藻保存方法与流程

文档序号:12056231阅读:1433来源:国知局
本发明涉及微藻养殖
技术领域
,具体涉及一种海水小球藻保存方法。
背景技术
:小球藻细胞中含有多种高价值的营养成分和化工原料,细胞代谢产生的多糖、蛋白质、色素等,在医药工业、食品工业、动物饲料、环境检测及净化、生物技术以及可再生能源制造等方面发挥着越来越重要的作用。目前,小球藻在水产养殖方面的应用日益重要,海水小球藻由于藻体内EPA、DHA含量比淡水小球藻高,在轮虫和贝类饵料方面应用效果更加突出,并在鱼虾、贝类育苗养殖中得到广泛应用;然而,天然海水中小球藻数量太少,满足不了高密度培养的鱼虾幼体、贝类幼体最佳生长的需要,所以需要供足够量的人工培养、经过优选、具有高营养价值的小球藻。但是,目前海水小球藻浓缩液保存技术较为落后,主要表现在(1)高浓度藻液受生存空间影响,导致藻体不适,易被其他病源微生物侵染,导致腐败变质,进而影响饵料食用效果;(2)保存条件要求严苛,需在低温冷藏条件下进行保存,保存成本高;(3)目前较好的保鲜液由于价钱昂贵而不被市场接受。技术实现要素:针对上述出现的问题,本发明提供了一种海水小球藻保存方法,能满足高浓度海水小球藻在常温(20℃-25℃)避光阴凉条件下长时间保存,该保存方法经济环保、操作便捷,该方法包含如下步骤:(1)配制保鲜液,每份所述保鲜液的组份及用量如下:R-多糖1-8g,102-103cfu/ml复合芽孢杆菌1-7ml,102-103cfu/ml亚硝化菌1-7ml,102-103cfu/ml硝化细菌1-7ml,101-102cfu/ml乳酸菌1-7ml,NH2CONH20.1-0.5g,KH2PO40.1-0.4g;进一步的,每份所述保鲜液的优选配方为:R-多糖2-5g,102-103cfu/ml复合芽孢杆菌2-4ml,102-103cfu/ml亚硝化菌2-4ml,102-103cfu/ml硝化细菌2-4ml,101-102cfu/ml乳酸菌2-4ml,NH2CONH20.1-0.3g,KH2PO40.2-0.3g;进一步的,每份所述保鲜液的优选配方为:R-多糖5g,102cfu/ml复合芽孢杆菌2ml,102cfu/ml亚硝化菌2ml,103cfu/ml硝化细菌2ml,10cfu/ml乳酸菌2ml,NH2CONH20.13g,KH2PO40.17g;(2)将需要保存的小球藻液与所述保鲜液均匀混合,1升小球藻液使用1份保鲜液,装入塑料桶中、密封保存。本发明实现了小球藻浓度液(10×108cell)在常温(20℃-25℃)、避光阴凉条件下保存30天,小球藻生物量占初始生物量90%以上,藻液颜色保持翠绿色,藻液气味正常。具体实施方式实施例一1.将培养得到的海水小球藻液采收离心后收集藻泥,用灭菌海水稀释小球藻液浓度至10×108cell;2.配制保鲜液,保鲜液配方如下:组份用量R-多糖1g102cfu复合芽孢杆菌1ml102cfu亚硝化菌1ml103cfu硝化细菌1ml10cfu乳酸菌1mlNH2CONH20.1gKH2PO40.1g3.将1L小球藻浓度液与上述保鲜液均匀混合后,装入塑料桶中,并密封,于常温25℃、避光阴凉条件下放置观察,同样方法制备相同规格的6份样品。4.分别在第25日、第26日、第27日、第28日、第29日、第30日随机选取上述6个样品中的一个开封,并进行显微镜计数,观察颜色变化情况,藻液气味变化情况,结果如表1所示。实施例二1.将培养得到的海水小球藻液采收离心后收集藻泥,用灭菌海水稀释小球藻液浓度至10×108cell;2.配制保鲜液,保鲜液配方如下:3.将1L小球藻浓度液与上述保鲜液均匀混合后,装入塑料桶中,并密封,于常温25℃、避光阴凉条件下放置观察,同样方法制备相同规格的6份样品。4.分别在第25日、第26日、第27日、第28日、第29日、第30日随机选取上述6个样品中的任一个开封,并进行显微镜计数,观察颜色变化情况,藻液气味变化情况,结果如表1所示。实施例三1.将培养得到的海水小球藻液采收离心后收集藻泥,用灭菌海水稀释小球藻液浓度至10×108cell;2.配制保鲜液,保鲜液配方如下:组份用量R-多糖8g102cfu复合芽孢杆菌7ml102cfu亚硝化菌7ml103cfu硝化细菌7ml10cfu乳酸菌7mlNH2CONH20.5gKH2PO40.4g3.将1L小球藻浓度液与上述保鲜液均匀混合后,装入塑料桶中,并密封,于常温25℃、避光阴凉条件下放置观察,同样方法制备相同规格的6份样品。4.分别在第25日、第26日、第27日、第28日、第29日、第30日随机选取上述6个样品中的任一个开封,并进行显微镜计数,观察颜色变化情况,藻液气味变化情况,结果如表1所示。表1小球藻液活细胞数量、气味及颜色变化情况当前第1页1 2 3 
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