本发明涉及中药化学领域，具体涉及一种从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法。
背景技术：
山豆根，别名广豆根，是豆科植物越南槐Sophora tonkinensis Gagnep.的干燥根及根茎，为我国传统中药。具有清热解毒、利咽消肿之功效，用于治疗火毒蕴结，咽喉肿痛，齿龈肿痛、，湿热黄疸以及心律失常、肝炎、肝癌等症。山豆根中含有丰富的生物碱、黄酮、三萜类等多种活性成分。
高丽槐素为山豆根中的一种黄酮成分，其分子式为C16H12O5，分子量为284.267。高丽槐素具有很强的抗真菌作用,浓度至10μg/ml,就能抑制真菌的生长，对白血病细胞(HL-60)和大鼠嗜碱性细胞白血病细胞(RBL-2H3)具有细胞毒活性。
目前还未见有从山豆根中提取纯化高丽槐素的相关报道。
以上背景技术内容的公开仅用于辅助理解本发明的发明构思及技术方案，其并不必然属于本专利申请的现有技术，在没有明确的证据表明上述内容在本专利申请的申请日已经公开的情况下，上述背景技术不应当用于评价本申请的新颖性和创造性。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种纯度高，适用于工业化生产的从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法。
本发明所采用的技术方案如下：
一种从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法，包括以下步骤：
(1)称取山豆根药材，加有机溶剂的水溶液，超声提取过滤，滤液回收乙醇至无醇味后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯后，所得溶液上大孔树脂柱，依次用30％、70％、95％乙醇溶液进行洗脱，收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇，得溶液；
(2)取步骤(1)所得溶液，上聚酰胺柱，用甲醇洗脱，收集甲醇洗脱液，回收甲醇后，减压浓缩至干，得固体；
(3)重结晶：步骤(2)得到的固体用溶剂反复重结晶，即得。
以上所述从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法，其中步骤(1)中所述药材粉碎过40-60目筛；所述有机溶剂的水溶液为70％乙醇溶液，加入量为10-20倍量；所述超声提取的次数为3-5次，每次1h；所述大孔树脂为HPD100大孔树脂，径高比为1:8-10；所述洗脱液的量为3-5倍量柱体积，洗脱流速为1-2ml/min。
以上所述从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法，其中步骤(2)中所述聚酰胺柱的径高比为1:10-15；所述洗脱液的量为3-5倍量柱体积，洗脱流速为1-2ml/min。
以所述从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法，其中步骤(3)中所述溶剂为甲醇、乙醇或丙酮；固体与溶剂的用量比为1g：(1-10)ml。
本发明的有益效果：
1、本发明提供的从山豆根中提取纯化高丽槐素的方法中分离使用的材料再生简单、毒性小污染小，适合工业化大生产。
2、本发明方法提取纯化所得的高丽槐素纯度高，均在98.0％以上。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步描述，但不限制本发明的保护范围和应用范围：
实施例1
称取山豆根药材50g，粉碎过40目筛，加10倍量70％乙醇溶液，超声提取3次，每次1h，过滤，滤液回收乙醇至无醇味后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯后，所得溶液上HPD100大孔树脂柱(径高比为1:8)，依次用3倍量柱体积的30％、70％、95％乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为1ml/min收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇后，所得溶液上聚酰胺柱(径高比为1:10)，用3倍量柱体积的甲醇洗脱，洗脱流速为1ml/min，收集甲醇洗脱液，回收甲醇后，减压浓缩至干，得固体用甲醇溶解，固体与溶剂的用量比为1g:1ml，反复重结晶至高丽槐素结晶完全，得高丽槐素0.27g，含量为99.80％。
实施例2
称取山豆根药材100g，粉碎过50目筛，加15倍量70％乙醇溶液，超声提取4次，每次1h，过滤，滤液回收乙醇至无醇味后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯后，所得溶液上HPD100大孔树脂柱(径高比为1:9)，依次用4倍量柱体积的30％、70％、95％乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为1.5ml/min收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇后，所得溶液上聚酰胺柱(径高比为1:12)，用4倍量柱体积的甲醇洗脱，洗脱流速为1.5ml/min，收集甲醇洗脱液，回收甲醇后，减压浓缩至干，用乙醇溶解，固体与乙醇的用量比为1g:5ml，浓缩至高丽槐素结晶完全，得高丽槐素0.53g，含量为99.82％。
实施例3
称取山豆根药材200g，粉碎过60目筛，加20倍量70％乙醇溶液，超声提取5次，每次1h，过滤，滤液回收乙醇至无醇味后，用等体积的乙酸乙酯萃取5次，合并乙酸乙酯萃取液，回收乙酸乙酯后，所得溶液上HPD100大孔树脂柱(径高比为1:10)，依次用5倍量柱体积的30％、70％、95％乙醇溶液进行洗脱，洗脱流速为2ml/min收集70％乙醇洗脱液，回收乙醇后，所得溶液上聚酰胺柱(径高比为1:15)，用5倍量柱体积的甲醇洗脱，洗脱流速为2ml/min，收集甲醇洗脱液，回收甲醇后，减压浓缩至干，得固体用丙酮溶解，固体与丙酮的用量比为1g:10ml，浓缩至高丽槐素结晶完全，得高丽槐素1.05g，含量为99.81％。
以上内容是结合具体的/优选的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，其还可以对这些已描述的实施例做出若干替代或变型，而这些替代或变型方式都应当视为属于本发明的保护范围。