一种从槐米中提取芦丁的方法
【专利摘要】本发明公开了一种新的从槐米中提取芦丁的方法，包括以下步骤：将干燥槐米粉碎采用超临界CO2进行灭酶，洗涤甩干后，加入合理配比的表面活性剂Tween20和OP-15等，用60%～70%的乙醇在一定条件下进行超声波辅助提取，将提取液静置结晶，抽滤得芦丁粗品，将芦丁粗品通过正丁醇精制，静置结晶并在130℃下烘干，得到纯度98%以上的芦丁产品，收率达23%以上。综合以上所述，本发明方法操作简便，提取效率高，适用于生产实际。
【专利说明】一种从槐米中提取芦丁的方法
【技术领域】
[0001] 本申请涉及一种从槐米中提取芦丁的方法。
【背景技术】
[0002] 槐米为豆科植物槐树的干燥花及花蕾，入药已有2000多年的历史，《神农本草经》 将其列为上品。槐米中含有的芦丁又称芸香苷、紫槲皮苷，属于黄酮苷类化合物，能降低毛 细血管通透性和脆性，促进细胞增生和防止血细胞凝聚，还具有抗炎、抗过敏、利尿、镇咳、 降血脂的等作用。芦丁在临床上已用作高血压病的辅助治疗、防止因芦丁缺乏导致的其他 出血症，以及预防和治疗糖尿病及合并高血脂症。另外，芦丁作为天然的抗氧化剂和使用黄 色素，也被广泛使用在保健食品和化妆品种。芦丁在槐米晾晒、洗涤、粉碎、提取过程中，易 受到共存于槐米中的芸香酶作用而发生水解，因此，提取前或提取过程中灭酶或降低酶的 活性十分重要。现有技术中采用的灭酶方法主要有干蒸、紫外线照射、 6°Co照射、微波灭酶 等，其中干蒸温度高，在灭酶的同时即会造成芦丁的水解和氧化，亦会导致部分芦丁溶于热 水而流失；而紫外线照射虽可有效灭酶，但用时较长，成本也高，使生产效率降低。随着表面 活性剂在化工、食品、日用品生产和水处理等领域的广泛使用，很多中药中不溶于水或不易 溶于水的有效成分，如黄酮类物质、生物碱、挥发油等，可以通过表面活性剂在其表面或界 面上形成吸附作用，或在溶液中形成分子聚合体，进而改变这些成分在水溶液中的溶解性， 提高了中药的提取效率，降低了提取成本，安全环保的特点。
[0003] 现有技术中有采用表面活性剂辅助芦丁提取的报道，但多采用一种表面活性剂。 如李金秀等("芸香甙提取工艺的改进研究"，李金秀，龚盛昭，黄秋瑾，广东化工，2003年第 1期，P15)采用了以下方法进行芸香苷的提取：槐米粉碎，加入5倍量的水，用石灰水调节 pH8?9,在温度为50?60°C提取20?30min，过滤，按同样条件反复提取3次，滤液用盐 酸调节pH为3,加入0. 5%表面活性剂0P，在60?70°C保温lOmin，静置30min，过滤，洗涤， 干燥，得到芸香苷产品产率18. 4%，含量96%。
【发明内容】
[0004] 本申请旨在提供一种新的从槐米中提取芦丁的方法。
[0005] 本发明所述方法包括以下步骤： (1)清洗灭酶：将干燥槐米粉碎至20?80目，加入温度为30?40°C，pH = 4?5的 酸水后，置入超临界C02萃取装置中，在压力为30MPa、温度为30?40°C下处理20?40min， 之后使用温度为〇?5°C, pH = 4?5的酸水洗漆两次后甩干； ⑵提取：甩干后的槐米颗粒加入1?5%的硼砂、1?5%的Na2S03和15-30倍的60? 70%乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 3?0. 4%的Tween 20和0. 05? 0. 2%的OP-15,在20?30kHz、30?50°C的条件下避光超声波提取10?30min，之后过滤， 滤液在30?50°C下避光备用；滤渣再次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤 液合并，向合并后的滤液中加入5%活性炭，30?50°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤 液酸化至pH=3?4,静置20?30min,抽滤得芦丁粗品； (3)精制：将芦丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干， 将得到的干燥芦丁加入正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入去离子水，采用20? 30kHz的超声在0?5°C下避光处理20?30min，静置结晶并在130°C下烘干，得到纯度98% 达以上的芦丁，收率达23%以上。
[0006] 进一步地，本发明所述步骤（1)中，灭酶处理的时间优选40min ;所述酸水可以为 盐酸水溶液。
[0007] 进一步地，本发明所述步骤（2)中，优选加入3?4%的硼砂和1%的Na2S0 3。
[0008] 进一步地，本发明所述步骤（2)中，优选加入0· 35?0· 45%的Tween 20和0· 05? 0· 15% 的 0P-15。
[0009] 进一步地，本发明所述步骤（2)中，超声波提取的条件优选在30kHz、40?5(TC下 提取15?25min ; 进一步地，本发明所述步骤（3)中，加入正丁醇的体积与槐米原料质量之比为20? 30mL/g ;加入去离子水的体积与槐米原料质量之比为2?3mL/g ;超声波处理的条件优选在 30 kHz 下处理 20 ?30min。
[0010] 本发明采用超临界co2进行灭酶，用时短，且芦丁在超临界co2条件下不易溶解，不 会导致芦丁的水解、氧化和流失，最大限度地保留了芦丁的有效成分含量；合理配比的表面 活性剂Tween 20和0P-15使提取时间与结晶时间均有缩短，提取效率提高，再辅以超声波， 使芦丁在提取过程中的氧化流失减少，收率增加明显。采用正丁醇对芦丁进行精制，可以有 效去除残留胶质、脂肪酸等杂质，提高芦丁的纯度。综合本发明所述的各个步骤来看，本发 明所述方法操作简便，提取效率高，适用于生产实际。
【专利附图】
【附图说明】
[0011] 图1为芦丁标准品HPLC谱图。
[0012] 图2为实施例2中芦丁终产物的HPLC谱图。
【具体实施方式】
[0013] 实施例1 将50g干燥槐米粉碎至40目，加入温度为40°C、pH = 4?5的酸水后，置入超临界C02 萃取装置中，在压力30MPa、温度40°C下处理20?40min，之后使用温度为0?5°C，pH = 4?5的酸水洗涤两次后甩干；甩干后的槐米颗粒加入3%的硼砂、1%的Na2S03和25倍的 60%乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 35%的Tween 20和0. 15%的0P-15， 在30kHz、40°C的条件下避光超声波提取20min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤渣再 次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并，向合并后的滤液中加入5%活 性炭，40°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置20min，抽滤得芦 丁粗品；将芦丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干，将得到 的干燥芦丁加入1300mL正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入130mL去离子水，采用 30kHz的超声在0?5°C下避光处理20min，静置结晶，130°C下烘干，得到纯度98. 33%的芦 丁 11. 61g，收率 23. 21%。
[0014] 实施例2 将80g干燥槐米粉碎至50目，加入温度为40°C、pH = 4?5的酸水后，置入超临界C02 萃取装置中，在压力30MPa、温度40°C下处理30min，之后使用温度为4°C，pH = 4?5的酸水 洗涤两次后甩干；甩干后的槐米颗粒加入4%的硼砂、1%的Na2S03和20倍的70%乙醇中，使 用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 4%的Tween 20和0. 1%的0P-15,在30kHz、40°C的 条件下避光超声波提取25min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤渣再次以上述同样的 条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并，向合并后的滤液中加入5%活性炭，40°C下避 光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置25min，抽滤得芦丁粗品；将芦丁 粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干，将得到的干燥芦丁加入 2L正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入200mL去离子水，采用30kHz的超声在0?5°C 下避光处理30min，静置结晶，130°C下烘干，得到纯度98. 27%的芦丁 18. 77g，收率23. 46%。
[0015] 实施例3 将120g干燥槐米粉碎至50目，加入温度为40°C、pH = 4?5的酸水后，置入超临界 C02萃取装置中，在压力30MPa、温度40°C下处理30min，之后使用温度为0?5°C，pH = 4? 5的酸水洗涤两次后甩干；甩干后的槐米颗粒加入3%的硼砂、1%的Na2S03和30倍的60? 70%乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 45%的Tween 20和0. 05%的OP-15， 在30kHz、40°C的条件下避光超声波提取25min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤渣再 次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并，向合并后的滤液中加入5%活 性炭，40°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置30min，抽滤得芦 丁粗品；将芦丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干，将得到 的干燥芦丁加入3L正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入300mL去离子水，采用30kHz 的超声在〇?5°C下避光处理25min，静置结晶并在130°C下烘干，得到纯度98. 35%的芦丁 28. 22g，收率 23. 52%。
【权利要求】
1. 一种从槐米中提取芦丁的方法，其特征在于包括以下步骤： (1)清洗灭酶：将干燥槐米粉碎至20?80目，加入温度为30?40°C，pH = 4?5的 酸水后，置入超临界C02萃取装置中，在压力为30MPa、温度为30?40°C下处理20?40min， 之后使用温度为〇?5°C, pH = 4?5的酸水洗漆两次后甩干； ⑵提取：甩干后的槐米颗粒加入1?5%的硼砂、1?5%的Na2S03和15-30倍的60? 70%乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 3?0. 5%的Tween 20和0. 05? 0. 2%的OP-15,在20?30kHz、30?50°C的条件下避光超声波提取10?30min，之后过滤， 滤液在30?50°C下避光备用；滤渣再次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤 液合并，向合并后的滤液中加入5%活性炭，30?50°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤 液酸化至pH=3?4,静置20?30min,抽滤得芦丁粗品； (3)精制：将芦丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干， 将得到的干燥芦丁加入正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入去离子水，采用20? 30kHz的超声在0?5°C下避光处理20?30min，静置结晶并在130°C下烘干，得到纯度98% 达以上的芦丁，收率达23%以上。
2. 如权利要求1所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（1)中，灭酶处理 的时间为40min ;所述酸水可以为盐酸水溶液。
3. 如权利要求1或2所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，加入 3?4%的硼砂和1%的Na2S03。
4. 如权利要求1或2所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，加入 0· 35 ?0· 45% 的 Tween 20 和 0· 05 ?0· 15% 的 0P-15。
5. 如权利要求1或2所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤⑵中，在 30kHz、40?50°C条件下超声波提取15?25min。
6. 如权利要求1或2所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（3)中，加入 正丁醇的体积与槐米原料质量之比为20?30mL/g ;加入去离子水的体积与槐米原料质量 之比为2?3mL/g ;在30 kHz下超声波处理20?30min。
7. 如权利要求3所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，加入 0. 35 ?0. 45% 的 Tween 20 和 0. 05 ?0. 15% 的 0P-15 ;在 30kHz、40 ?50°C条件下超声波 提取15?25min。
8. 如权利要求7所述的一种提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（3)中，加入正丁 醇的体积与槐米原料质量之比为20?30mL/g ;加入去离子水的体积与槐米原料质量之比 为2?3mL/g ;在30 kHz下超声波处理20?30min。
【文档编号】C07H17/07GK104098635SQ201410390859
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2014年8月11日 优先权日:2014年8月11日
【发明者】高旭光, 马亚琼, 张成亮, 白易, 刘宏 申请人:白心亮