一种槐米中提取芦丁的方法
【专利摘要】本发明公开了一种新的从槐米中提取芦丁的方法，包括以下步骤：将干燥槐米以干蒸法在70℃下处理之后晾干并粉碎；加入合理配比的表面活性剂Tween20和OP-15等，用60%～70%的乙醇在一定条件下进行超声波辅助提取，将提取液静置结晶，抽滤得芦丁粗品，将芦丁粗品通过正丁醇精制，静置结晶并在130℃下烘干，得到纯度98%以上的芦丁产品，收率达22%以上。综合以上所述，本发明方法操作简便，提取效率高，适用于生产实际。
【专利说明】-种槐米中提取芦丁的方法 【技术领域】
[〇〇〇1] 本申请涉及一种从槐米中提取芦丁的方法。 【背景技术】
[0002] 槐米为豆科植物槐树的干燥花及花蕾，入药已有2000多年的历史，《神农本草经》 将其列为上品。槐米中含有的芦丁约8%?28%(根据槐米产地及收取时间的不同而有所差 异)。芦丁又称芸香苷、紫槲皮苷，属于黄酮苷类化合物，具有凉血止血，清肝泻火的功效，能 降低毛细血管通透性和脆性，促进细胞增生和防止血细胞凝聚，还具有抗炎、抗过敏、利尿、 镇咳、降血脂的等作用。芦丁在临床上已用作高血压病的辅助治疗、防止因芦丁缺乏导致的 其他出血症，以及预防和治疗糖尿病及合并高血脂症。另外，芦丁作为天然的抗氧化剂和使 用黄色素，也被广泛使用在保健食品和化妆品种。
[0003] 现有技术中常见的芦丁提取方法有沸水煎煮、碱提酸沉、超声或微波提取、索氏提 取、超临界C0 2提取等。常见纯化方法有结晶、大孔吸附树脂处理、高效液相色谱处理等；随 着表面活性剂在化工、食品、日用品生产和水处理等领域的广泛使用，很多中药中不溶于水 或不易溶于水的有效成分，如黄酮类物质、生物碱、挥发油等，可以通过表面活性剂在其表 面或界面上形成吸附作用，或在溶液中形成分子聚合体，进而改变这些成分在水溶液中的 溶解性，提高了中药的提取效率，降低了提取成本，安全环保的特点。现有技术中有采用表 面活性剂辅助芦丁提取的报道，但多采用一种表面活性剂。如李金秀等("芸香甙提取工艺 的改进研究"，李金秀，龚盛昭，黄秋瑾，广东化工，2003年第1期，P15)采用了以下方法进行 芸香苷的提取：槐米粉碎，加入5倍量的水，用石灰水调节pH8?9,在温度为50?60°C提取 20?30min，过滤，按同样条件反复提取3次，滤液用盐酸调节pH为3,加入0. 5%表面活性 剂0P，在60?70°C保温lOmin，静置30min，过滤，洗漆，干燥，得到芸香苷产品产率18. 4%， 含量96%。
【发明内容】
[0004] 本申请旨在提供一种新的从槐米中提取芦丁的方法。
[0005] 本发明所述方法包括以下步骤： (1)预处理：将干燥槐米以干蒸法在70°C下处理30min，再用70°C热水淋洗出胶质，之 后将其晾干并粉碎为20-80目； ⑵提取：将槐米颗粒加入1?5%的硼砂、1?5%的Na2S03和15-30倍的60?70% 乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 3?0. 5%的Tween 20和0. 05?0. 3% 的OP-15,在20?30kHz、30?50°C的条件下避光超声波提取10?30min，之后过滤，滤液 在30?50°C下避光备用；滤渣再次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合 并，向合并后的滤液中加入5%活性炭，30?50°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸 化至pH=3?4,静置20?30min,抽滤得芦丁粗品； (3)精制：将芦丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干， 将得到的干燥芦丁加入正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入去离子水，采用20? 30kHz的超声在0?5°C下避光处理20?30min，静置结晶并在130°C下烘干，得到纯度98% 以上的芦丁，收率达22%以上。
[0006] 进一步地，本发明所述步骤（2)中，优选加入3?4%的硼砂和1%的Na2S0 3。
[0007] 进一步地，本发明所述步骤（2)中，优选加入0. 35?0. 45%的Tween 20和0. 05? 0· 2% 的 0P-15。
[0008] 进一步地，本发明所述步骤（2)中，超声波提取的条件优选在30kHz、40?5(TC下 提取15?25min。
[0009] 进一步地，本发明所述步骤（3)中，加入正丁醇的体积与槐米原料质量之比为 20?30mL/g ;加入去离子水的体积与槐米原料质量之比为2?3mL/g ;超声波处理的条件 优选在30 kHz下处理20?30min。
[0010] 更进一步地，本发明所述步骤（2)中，更加优选加入0· 35?0· 45%的Tween 20和 0· 05 ?0· 15% 的 0P-15。
[0011] 本发明在提取步骤中使用了合理配比的表面活性剂Tween 20和0P-15,该配比 的表面活性剂使提取时间与结晶时间均有缩短，提取效率提高，再辅以超声波，使收率增加 明显。采用正丁醇对芦丁进行精制，可以有效去除残留胶质、脂肪酸等杂质，提高芦丁的纯 度。综合本发明所述的各个步骤来看，本发明所述方法操作简便，提取效率高，适用于生产 实际。 【专利附图】
【附图说明】
[0012] 图1为芦丁标准品HPLC谱图。
[0013] 图2为实施例2中芦丁终产物的HPLC谱图。 【具体实施方式】
[0014] 实施例1 将50g干燥槐米以干蒸法在70°C下处理30min，再用70°C热水淋洗出胶质，之后将其晾 干并粉碎为20目。将槐米颗粒加入3%的硼砂、1%的Na2S03和20倍的60?70%乙醇中，使 用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 35%的Tween 20和0. 15%的0P-15,在30kHz、40°C 的条件下避光超声波提取20min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤渣再次以上述同样 的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并；向合并后的滤液中加入5%活性炭，40°C下 避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置20min，抽滤得芦丁粗品。将芦 丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干，将得到的干燥芦丁加 入1300mL正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入130mL去离子水，采用30kHz的超声在 0?5°C下避光处理20min，静置结晶，滤出后130°C烘干，得到纯度98. 66%的芦丁 11. 38g， 收率 22. 76%。
[0015] 实施例2 将80g干燥槐米以干蒸法在70°C下处理30min，再用70°C热水淋洗出胶质，之后将其晾 干并粉碎为40目。将槐米颗粒加入4%的硼砂、1%的Na2S03和25倍的60?70%乙醇中，使 用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 40%的Tween 20和0. 10%的0P-15,在30kHz、40°C 的条件下避光超声波提取20min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤渣再次以上述同样 的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并；向合并后的滤液中加入5%活性炭，40°C下 避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置20min，抽滤得芦丁粗品。将芦 丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干，将得到的干燥芦丁加 入2L正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入200mL去离子水，采用30kHz的超声在0? 5°C下避光处理20min，静置结晶，滤出后130°C烘干，得到纯度98. 81%的芦丁 18. 57g，收率 23. 21%。
[0016] 实施例3 将120g干燥槐米以干蒸法在70°C下处理30min，再用70°C热水淋洗出胶质，之后将其 晾干并粉碎为60目。将槐米颗粒加入3%的硼砂、1%的Na2S03和30倍的60?70%乙醇中， 使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 45%的Tween 20和0. 05%的OP-15,在30kHz、40°C 的条件下避光超声波提取20min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤渣再次以上述同样 的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并；向合并后的滤液中加入5%活性炭，40°C下 避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置20min，抽滤得芦丁粗品。将芦 丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干，将得到的干燥芦丁加 入3L正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入300mL去离子水，采用30kHz的超声在0? 5°C下避光处理20min，静置结晶，滤出后130°C烘干，得到纯度98. 86%的芦丁 27. 16g，收率 22. 63%。
[0017] 实施例4 本实施例对比了在芦丁提取步骤中使用本发明所述配比的表面活性剂和单独使用 Tween 20对芦丁终产品产率和纯度的影响。首先将50g干燥槐米以本申请实施例1中所述 的预处理方法进行处理。提取步骤操作为：将粉碎为20目的槐米颗粒加入到3%的硼砂、1% 的Na 2S03和20倍的60?70%乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 5%的Tween 20,在30kHZ、40°C的条件下避光超声波提取20min，之后过滤，滤液在40°C下避光备用；滤 渣再次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合并；向合并后的滤液中加入 5%活性炭，40°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸化至pH=3?4,静置20min，抽滤 得芦丁粗品。之后再以本申请实施例1中所述的精制方法对芦丁粗品进行精制。以上操作 与实施例1所述方法分别做2组平行对照试验，将得到的芦丁终产物的质量和纯度进行对 t匕，结果如下表所示：
【权利要求】
1. 一种从槐米中提取芦丁的方法，其特征在于包括以下步骤： (1)预处理：将干燥槐米以干蒸法在70°C下处理30min，再用70°C热水淋洗出胶质，之 后将其晾干并粉碎为20-80目； ⑵提取：将槐米颗粒加入1?5%的硼砂、1?5%的Na2S03和15-30倍的60?70% 乙醇中，使用碳酸氢钠调节pH至9?10,再加入0. 3?0. 5%的Tween 20和0. 05?0. 3% 的OP-15,在20?30kHz、30?50°C的条件下避光超声波提取10?30min，之后过滤，滤液 在30?50°C下避光备用；滤渣再次以上述同样的条件提取一次，得到的滤液与之前滤液合 并，向合并后的滤液中加入5%活性炭，30?50°C下避光搅拌lOmin，将过滤除炭后的滤液酸 化至pH=3?4,静置20?30min,抽滤得芦丁粗品； (3)精制：将芦丁粗品置于烘箱中，40°C下烘干至无醇味，再逐渐升温至130°C烘干， 将得到的干燥芦丁加入正丁醇中加热至溶解，过滤，向滤液中加入去离子水，采用20? 30kHz的超声在0?5°C下避光处理20?30min，静置结晶并在130°C下烘干，得到纯度98% 以上的芦丁，收率达22%以上。
2. 如权利要求1所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，加入3?4%的 硼砂和1%的Na2S0 3。
3. 如权利要求1或2所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，加入 0· 35 ?0· 45% 的 Tween 20 和 0· 05 ?0· 2% 的 OP-15。
4. 如权利要求1或2所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤⑵中，在30kHz、 40?50°C条件下超声波提取15?25min。
5. 如权利要求1或2所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（3)中，加入正丁 醇的体积与槐米原料质量之比为20?30mL/g ;加入去离子水的体积与槐米原料质量之比 为2?3mL/g ;在30 kHz条件下超声波处理20?30min。
6. 如权利要求3所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，加入0.35? 0· 45% 的 Tween 20 和 0· 05 ?0· 15% 的 OP-15。
7. 如权利要求6所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（2)中，在30kHz、40? 50°C条件下超声波提取15?25min。
8. 如权利要求6所述的提取芦丁的方法，其特征在于：所述步骤（3)中，加入正丁醇 的体积与槐米原料质量之比为20?30mL/g ;加入去离子水的体积与槐米原料质量之比为 2?3mL/g ;在30 kHz条件下超声波处理20?30min。
【文档编号】C07H17/07GK104098636SQ201410390877
【公开日】2014年10月15日 申请日期:2014年8月11日 优先权日:2014年8月11日
【发明者】梁玉强, 马亚琼, 白易, 张成亮, 赵永强 申请人:白心亮