一种缓冲式多功能细胞培养皿的制作方法

本实用新型涉及一种细胞培养皿，尤其涉及一种缓冲式多功能细胞培养皿，属于生物医学领域。

背景技术：

随着我国经济和社会的迅速发展，医疗和生物医学领域越来越受到国家的重视。细胞生物学方面的研究一直是生物医学研究最基本的研究方法，细胞培养体系在整个生物医学研究中具有重要的作用。在细胞培养期间，经常会因换液等操作而对贴壁的细胞造成在冲击，从而影响贴壁细胞的正常生长；目前使用的培养皿不能进行细胞生长定量变化的观察，构造较为简单，功能较为单一，很难满足现有研究的需求。

技术实现要素：

技术问题：为了解决上述问题的不足，本实用新型提供了一种缓冲式多功能细胞培养皿。

技术方案：本实用新型提供的一种缓冲式多功能细胞培养皿，包括操作区、缓冲区和培养区；所述培养皿自外而内依次设有培养皿侧壁(1)、缓冲区外壁(2)、缓冲区内壁(3)；所述培养皿侧壁(1)和缓冲区外壁(2)之间为操作区，所述缓冲区外壁(2)和缓冲区内壁(3)之间为缓冲区，所述缓冲区内壁(3)内为培养区；所述缓冲区外壁(2)和缓冲区内壁(3)下部分别缓冲区外壁凹槽(7)和缓冲区内壁凹槽(8)，缓冲区外壁凹槽(7)和缓冲区内壁凹槽(8)之间为错缝结构，缓冲区外壁凹槽(7)和缓冲区内壁凹槽(8)具有特定的排列和形状。

作为改进，培养区的底板(6)底部设有方格网(4)，方格网(4)的交点处分别设有同心圆环(5)；方格网(4)线宽满足显微镜下观察的需要，每个交点都有能在显微镜下识别的特定编号，同心圆环直径根据显微镜的观测倍数和范围确定。培养皿底部的标记体系方便对特定区域细胞定位以及对细胞生长状况的观察及对比。

有益效果：本实用新型提供的缓冲式多功能细胞培养皿构造简单、可操作性强、功能齐全，不仅能降低滴加和抽取液体对细胞培养区的冲击，而且还便于对细胞生长状态进行观察和对比，方便用于检测细胞迁移运动能力的“伤口愈合”实验中的划痕以及拍照区域的定位等操作。

本发明通过缓冲区把细胞培养皿分成操作区和培养区，缓冲区由具有凹槽结构的缓冲区外壁(2)、缓冲区内壁(3)组成，缓冲区外壁(2)和缓冲区内壁(3)上的凹槽形成错缝结构，该错缝结构有三个功能：

(1)普通培养皿在滴加液体时会产生水波纹效应，即滴加液体产生的波纹与到达培养皿内壁反射回来的波纹产生加强效应，对细胞培养环境扰动较大，本发明培养皿在操作区滴加液体时，由于错缝凹槽缓冲区的存在，形成的大部分水波纹只会在操作区传播，经错缝凹槽传播至培养区的水波纹可以通过凹槽结构的排列进行抵消(传播路径差为λ为波长)，从而降低对培养区细胞的干扰；

(2)根据流体力学可知，流速与流经路径成反比，当在操作区移加培养液时，培养区的培养液需流经缓冲区，由于缓冲区内外壁上凹槽的存在，增长了培养液的流经路径，流速减小，从而降低了移加液体对培养区细胞的影响；

(3)由于移动培养皿使培养皿内液体产生水头差时，缓冲区加长了流经路径，减小了流速，从而降低对培养区细胞生长环境的干扰。

附图说明

图1是本实用新型缓冲式多功能细胞培养皿的结构示意图。

图2是本实用新型缓冲式多功能细胞培养皿的俯视图。

具体实施方式

以下结合附图对本实用新型做进一步详细的说明。

缓冲式多功能细胞培养皿，包括操作区、缓冲区和培养区；所述培养皿自外而内依次设有培养皿侧壁(1)、缓冲区外壁(2)、缓冲区内壁(3)；所述培养皿侧壁(1)和缓冲区外壁(2)之间为操作区，所述缓冲区外壁(2)和缓冲区内壁(3)之间为缓冲区，所述缓冲区内壁(3)内为培养区；所述缓冲区外壁(2)和缓冲区内壁(3)下部分别缓冲区外壁凹槽(7)和缓冲区内壁凹槽(8)，缓冲区外壁凹槽(7)和缓冲区内壁凹槽(8)之间为错缝结构，缓冲区外壁凹槽(7)和缓冲区内壁凹槽(8)具有特定的排列和形状。作为改进，培养区的底板(6)底部设有方格网(4)，方格网(4)的交点处分别设有同心圆环(5)；方格网(4)线宽满足显微镜下观察的需要，每个交点都有能在显微镜下识别的特定编号，同心圆环直径根据显微镜的观测倍数和范围确定。

该培养皿使用方法：

(1)在操作区进行移加液体操作；

(2)观察细胞贴壁生长状态时，记录显微镜倍数下圆圈的编号及细胞数量，特定时间间隔后继续观察和记录圆圈的编号及细胞数量，通过对比获取细胞生长的情况；

(3)沿方格网水平或者竖直线方向将贴壁的细胞间划出特定宽度的“伤痕”，通过观察“伤痕”处细胞的“愈合”情况来判断细胞的迁移及运动情况。