本发明具体涉及一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，属于鹰嘴豆栽培方法
技术领域：
。
背景技术：
：鹰嘴豆，学名：cicerarietinum，又名桃尔豆、鸡豆、鸡头豆等，是印度和巴基斯坦的重要蔬菜之一，在欧洲食用鹰嘴豆也十分普遍，也是维吾尔医学常用药材。因其面形奇特，尖如鹰嘴，故称此名。鹰嘴豆为豆科草本植物，起源于亚洲西部和近东地区。是世界上栽培面积较大的豆类植物，约一亿五千万亩，其中印度和巴基斯坦两国的种植面积占全世界的80％以上，中国只有零星分布。鹰嘴豆的淀粉具有板栗香味。鹰嘴豆粉加上奶粉制成豆乳粉，易于吸收消化，是婴儿和老年人的营养食品。鹰嘴豆还可以做成各种点心和油炸豆。籽粒可做利尿剂、催奶剂、可治疗失眠，预防皮肤病和防治胆病。淀粉广泛用于造纸工业和纺织工业。根瘤菌是与豆科植物共生，形成根瘤并固定空气中的氮气供植物营养的一类杆状细菌。能促使植物异常增生的一类革兰氏染色阴性需氧杆菌。正常细胞以鞭毛运动，无芽孢。可利用多种碳水化合物，并产生相当量的胞外粘液。目前，对鹰嘴豆根瘤菌的研究非常少，对于根瘤菌剂的研究在现有技术中，限于大豆根瘤菌剂、复合根瘤菌剂、花生根瘤菌剂、苜蓿根瘤菌剂等，对于鹰嘴豆根瘤菌的制备尚没有现有技术进行研究。技术实现要素：因此，针对现有技术的上述问题，本发明提供一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，具体的，所述制备方法具体为用鹰嘴豆根瘤菌菌株、培养基、微量元素营养液、粘合剂制备鹰嘴豆根瘤菌菌剂；所述培养基为优化的yma培养基。进一步的，所述培养基包括甘露醇8-12g，谷氨酸钠0.3-0.7g，k2hpo40.3-0.7g，无水mgso40.05-0.15g，nacl0.03-0.07g，cacl20.02-0.06g，fecl30.02-0.06g，酵母粉0.8-1.2g，琼脂粉15-20g，去离子水1000ml，培养基的ph值为6.g-7.2。进一步的，所述微量元素营养液包括znso40.15-0.25g，mnso41.0-2.0g，h3bo32.5-3.5g，cuso4·5h2o0.5-1.2g，h2moo40.01-0.03g，制备方法为将上述组分用去离子水溶解并定容到1l。进一步的，所述粘合剂为0.5-2.0％羧甲基纤维素钠溶液。本发明的有益效果在于：本发明提供一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，通过本方法制备的鹰嘴豆根瘤菌菌剂，在大田对鹰嘴豆进行接种，鹰嘴豆的株高、根重量、地上部重量、根瘤重量等都获得了明显的提升。具体实施方式下面对本发明的具体实施方式进行说明：本实施例中，鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备用到了菌株、培养基、配套微量元素营养液、粘合剂。1、菌株的准备。鹰嘴豆根瘤菌菌株从我们建立的鹰嘴豆根瘤菌菌库里优选出了一个适应性较好的菌株mesorhizobiummuleienseccbau83963(该菌株保藏于中国农业大学菌库，可以直接从该菌库购买)，用该菌株进行菌剂的制备。2、培养基的制备和菌株的发酵。选用优化的yma培养基，更加有利于生长较慢的根瘤菌的培养。【甘露醇8-12g，谷氨酸钠0.3-0.7g，k2hpo40.3-0.7g，无水mgso40.05-0.15g，nacl0.03-0.07g，cacl20.02-0.06g，fecl30.02-0.06g，酵母粉0.8-1.2g，去离子水1000ml，ph6.8-7.2】，按上述配方配置培养基后，灭菌处理，然后，接种菌株ccbau83963到制作的培养基里，25-28摄氏度下，以每分钟160-180转的转速振荡培养4-7天，直至菌体生长达到对数生长期，即od600大约为0.8-1.2；3、微量元素营养液的准备：微量元素液里含有多种成分，包括根瘤菌结瘤必须的钼、锌、錋、铜和锰，有利于根瘤菌的结瘤固氮；配方为：znso40.15-0.25g，mnso41.0-2.0g，h3bo32.5-3.5g，cuso4·5h2o0.5-1.2g，h2moo40.01-0.03g，去离子水溶解并定容到1l。4、粘合剂的制备：制备0.5-2.0％羧甲基纤维素钠溶液。在接种前，先将微量元素液以1∶1000比例加入第2步获得的菌液内，混匀；然后再加入1-1.5倍体积的粘合剂，混匀后就获得了高活性速配菌剂，然后以每亩地种子用量为4-6公斤种子为例，接入15-30ml速配菌剂，戴上无菌手套拌匀后，在遮光条件下放置5-10分钟即可播种。用上述鹰嘴豆根瘤菌菌剂，在大田做接种实验，结果如表1所示，接种过鹰嘴豆根瘤菌菌剂的鹰嘴豆株高、根重量、地上部重量、根瘤数量、根瘤重量等均优于未接种对照，证明该接种方法切实可行。表1鹰嘴豆株高(cm)根部重量(g)地上部重量(g)根瘤数量(个/株)接种菌剂处理832015020不接种对照526730从表1可以看出，接种使得鹰嘴豆结出了根瘤，结瘤率增长了200％；接种增加了地上部和根部重量，分别增加了105％和230％，鹰嘴豆株高增加了60％。以上是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本
技术领域：
的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改选和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。技术特征：技术总结本发明公开了一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，属于鹰嘴豆栽培方法
技术领域：
。目的是提供一种鹰嘴豆根瘤菌菌剂制备方法，具体的，所述制备方法具体为用鹰嘴豆根瘤菌菌株、培养基、微量元素营养液、粘合剂制备鹰嘴豆根瘤菌菌剂；所述培养基为优化的YMA培养基。通过本方法制备的鹰嘴豆根瘤菌菌剂，在大田对鹰嘴豆进行接种，鹰嘴豆的株高、根重量、地上部重量、根瘤重量等都获得了明显的提升。技术研发人员：张俊杰;陈文峰;郑坚强;孟牒;何培新;杨旭;郭晨;尚益民受保护的技术使用者：郑州轻工业学院技术研发日：2017.05.11技术公布日：2017.08.18