本发明属于药物合成领域，具体涉及一种1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制备方法。
背景技术：
：聚乙二醇(polyethyleneglycol，peg)是由环氧乙烷与水或乙二醇逐步发生加成聚合而得到的一类分子量较低的水溶性聚醚。小分子量的低聚聚乙二醇为无色、无臭有吸湿性的粘稠液体，分子中既有醚链，又有羟基,故具有独特的溶解性能,能与水、醇混溶，微溶于醚。聚乙二醇(polyethyleneglycol,peg)近年来已广泛用于修饰生物大分子及小分子药物的结构。聚乙二醇目前在药用辅料、药物制剂生产、修饰药物分子等方面得到广泛应用，它是实现药物传输过程及控释过程的重要中间体。因为聚乙二醇具有优异的生物相容性，对一些生物相容性差的活性分子可以用官能团化的聚乙二醇改性。将一些生物相容性差的有生物活性的分子用官能团化的聚乙二醇修饰，可以提高活性分子的生物相容性、水溶性，甚至提高生物活性分子的稳定性和降低其毒性。peg修饰技术逐渐应用于许多有机小分子药物，目前也取得了一定的进展。聚乙二醇和小分子药物链接后的新化合物也就具备了聚乙二醇的许多优良性质，如优异的生物相容性。实验表明聚乙二醇在体内可以被组织液溶解，从而可以随着体液被机体代谢出体外，没有任何的毒副作用。因此它打开了某些活性分子在医学应用上的限制，备受瞩目。1965年英国科学家banghan等人提出脂质体(liposomes)这一概念。脂质体又称微脂粒，是具有靶向给药功能的一种新型药物制剂。脂质体在水中时，分子亲水部分插入水中，其疏水尾部伸向空气，充分搅拌后，通常会形成双分子层膜的球型囊泡，直径在25～1000nm之间。在生物学中脂质体通常是指当两性分子分散在水相中时，分子的疏水部分倾向于聚集在一起以避开水相，其亲水的头部包头在水相中，从而形成了有双分子层结构的封闭囊泡。药剂学中脂质体一般定义是通过类脂质的双分子层结构将药物包封起来而形成微型囊泡体。药剂学中脂质体将药物送入细胞内部，就是利用了脂质体可以和细胞膜融合这一特点，目前脂质体通常用于转基因，或制备药物。在生物学、医学和药学领域中，脂质体被广泛用于药物传递系统。由于在血液中脂质体的磷脂成分倾向于聚集融合，容易与载脂蛋白结合，接着发生互换，脂质体膜形成孔洞。同时补体系统被脂质体激活，生成攻膜复合体，脂质体膜中形成亲水性通道，引起包封药物的渗漏，水、电解质的大量进入，最终脂质体会渗透裂解，最后由单核巨噬细胞系统快速清除。脂质体在血液循环中的半衰期较短(一般为30分钟)，其主动靶向性和稳定性较差。由于血液中存在多种破坏因素，发挥药物载体的关键因素就是血液中脂质体的稳定性。在脂质体膜表面引入聚合物分子，形成空间稳定的脂质体，不但解决了脂质体的发展所遇到的瓶颈期，也为制剂领域注入了新的活力。其中最常用的、研究最多的聚合物分子就是聚乙二醇(peg)，聚乙二醇结构简单，价格低廉，两端的羟基很容易衍生化，修饰药物时候可以增加体内半衰期，降低免疫原性，同时还可以增加药物的水溶性。peg可以延长脂质体的血循环，对脂质体渗漏也有一定积极影响，还具有被动靶向、在空间稳定免疫脂质体中的桥接等作用。peg修饰的脂质体是将peg分子直接连接脂质体，或者用peg分子包衣脂质体，从而改进药物分子的细胞内药代动力学特性，比如提高脂质体的稳定性，防止其非特异性吸收等。peg化脂质体的合成过程较为简单，成本较低，生物相容性好，对药物的修饰效果较为理想。近年来，peg修饰脂质体的应用已成为提高药物疗效及减少毒副作用的有效手段。研究发现peg长度能影响rna的体内表达，因此一般使用所含peg平均分子量为1kda～3kda的脂质体。分子量较低(如500或750da)的peg不形成稳定的脂质体。近年来，有学者利用小干扰rna脂质体药物用于多种疾病的治疗研究，如老年视黄斑退化、肌肉萎缩性侧索硬化症、类风湿性关节炎、肥胖症，以及抗病毒和帕金森病等的治疗。由于sirna分子量高，存在聚阴离子中心，带有较强的的负电，所以他们的几何体不能以自由扩散的方式穿过由双脂层构筑的细胞膜。因此，sirna输送载体是sirna治疗成功的关键，而阳离子脂质体是一种较为常见的sirna药物的传递手段。有研究表明，在这类阳离子脂质体的材料中，还需要添加一种聚乙二醇化的脂质体材料，其中mpeg-1,2-二肉豆蔻酸甘油酯，即mpeg-dmg就是其中一种关键材料，它可以通过与聚阴离子核酸的经典作用自组装成大分子纳米颗粒，然后以这种方式封装sirna，从而有效地将sirna输送至胞浆并释放出sirna，与其靶位结合进而引发目标mrna降解。这类脂质体系统被证明在治疗高胆固醇血症方面有广阔的前景。但是目前在国内市场上没有mpeg2000-dmg销售，而且在国外定制价格极其昂贵，这也严重制约了国内sirna药物的研究。我们在查阅有关mpeg2000-dmg的合成文献后，发现这类关于材料的合成报道较少，汤杰等人采用新的路线进行mpeg2000-dmg的合成：以(r)-(-)-甘油醇缩丙酮为原料经过加苄基保护、脱叉酮保护、dcc缩合、还原、迈克尔加成、对硝基氯甲酸苯酯活化、醇胺酰化等七步得到目标产物。但是操作过程工艺复杂，且反应过程中涉及氰基的还原，反应过程中会有剧毒挥发等等不利条件，其反应需要严谨的条件不利于工业化生产，反应温度的控制也使得能耗增加，综合经济价值不高，因此该工艺路线仍需改进。技术实现要素：本发明提出更优的一种1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制备方法，该制备方法原料简单易得，步骤较短，纯化简单，污染少，无毒性。一种1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制备方法，包括以下步骤：1)将mpeg-oh、rcl在碱和有机溶剂存在的条件下进行磺酰化反应，制得mpeg-r，再通过氨化反应制成mpeg-nh2；2)将1,2-二肉豆蔻酸甘油酯与活化剂在碱的催化下在有机溶剂中制得1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化剂；3)将制得的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化剂与mpeg-nh2在碱的催化下于有机溶剂中，缩合得到最终产物peg-1,2-二肉豆蔻酸甘油酯,其中r为甲磺酸基、对甲苯磺酸基、对硝基苯磺酸基中的一种，所述mpeg-oh的结构式为：其中n为10-1000的整数。进一步地，所述碱为三乙胺、氢氧化钠、吡啶、4-二甲氨基吡啶中的一种。进一步地，所述有机溶剂为二氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环中的一种。进一步地，所述步骤1)的磺酰化反应是于反应的温度为0℃～20℃，反应的时间为10～15h的条件下制得mpeg-r。进一步地，所述步骤1)的氨化反应是在温度40-60℃，10-20h条件下进行。进一步地，所述步骤1)中的mpeg-oh、rcl和碱的摩尔比为1：1.1：1.3。进一步地，所述步骤2)将1,2-二肉豆蔻酸甘油酯与活化剂是于反应温度为10℃～40℃，反应的时间为1～5h的条件下制得活化的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯。进一步地，所述步骤2)中的活化剂是对硝基氯甲酸苯酯。进一步地，所述步骤2)将1,2-二肉豆蔻酸甘油酯与对硝基氯甲酸苯酯在温度为30℃条件下反应3h得到1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化剂。该制备方法的路线如下：，其中n为10-1000的整数，r＝甲磺酸基、对甲苯磺酸基、对硝基苯磺酸基。同现有技术相比，本发明在实现制备1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的过程中，具有以下有益效果：1.无需柱层析分离纯化，大大降低了纯化难度；2.制备反应过程，不涉及剧毒试剂或溶剂，对极大的降低了对环境的污染，绿色环保；3.其制备过程对设备要求低，操作简单，一方面，极大的简化了操作流程，降低成本，对于1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的制备进入工业化大规模生产具有重要意义，另一方面，有效地降低了操作中的危险系数；4.制备过程中，同时可以筛选出高的产率和纯度1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化剂，即活化后的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯。具体实施步骤制备1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物的方法，包括以下步骤：1)将mpeg-oh、rcl在碱与有机溶剂存在的条件下于反应的温度为0℃～20℃，反应的时间为10～15h的条件下进行磺酰化反应，制得mpeg-r，再于温度40-60℃，10-20h条件下进行氨化反应制成mpeg-nh2；其中mpeg、rcl和碱的摩尔比为1：1.1：1.3；2)将1,2-二肉豆蔻酸甘油酯与第二活化剂在碱的催化下于有机溶剂中制得1,2-二肉豆蔻酸甘油酯活化剂；3)于反应温度为10℃～40℃，反应的时间为1～5h的条件下将活化的1,2-二肉豆蔻酸甘油酯与mpeg-nh2在碱的催化下于第三有机溶剂中，缩合得到最终产物1,2-二肉豆蔻酸甘油酯衍生物，即peg-1,2-二肉豆蔻酸甘油酯,其中r为甲磺酸基、对甲苯磺酸基、对硝基苯磺酸基中的一种，所述mpeg-oh的结构式为：其中n为10-1000的整数，其中碱为三乙胺、氢氧化钠、吡啶、4-二甲氨基吡啶(dmap)中的一种；活化剂是对硝基氯甲酸苯酯；有机溶剂为四氢呋喃、二氯甲烷、二氧六环中的一种。该制备方法的路线如下：实施例1(1)将100gmpeg5000，2.62g三乙胺加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取4.2g对甲苯磺酰氯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，滴毕温度0℃，反应12h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到磺酰化的粗产物。粗产品运用二氯甲烷重结晶，得到100g纯品mpeg5000-tos，产率：90％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.811(t，j＝6.4hz，2h)；7.422(t，j＝6.4hz，2h)；3.739(t，j＝4.4hz，2h)；3.685～3.636(m，452h)；3.240(s，3h)；2.353(s，3h)；(2)将步骤(1)得到的100gmpeg5000-tos加入到100ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季铵碱，升温到50℃，搅拌15h。反应结束，冷却至室温，用氢氧化钠溶液调ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到固体。用二氯甲烷重结晶，得到90g纯品mpeg5000-nh2，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.630(m，452h)；2.830(t，j＝6.4hz，2h)；3.242(s，3h)；2.102(s，2h)；(3)将50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取20g对硝基氯甲酸苯酯于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，于温度为10℃条件下反应5h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到粗产物。层析柱纯化，得到55g活化的dmg，产率：99％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)将步骤(3)得到的12g活化的dmg加入到500ml二氧六环中，加入90gmpeg5000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室温搅拌8h。反应结束，用氢氧化钠溶液调ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氧六环溶解，抽滤，无水硫酸钠干燥滤液，旋干滤液，经过二氯甲烷重结晶，得到90g纯品产物，产率：96％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.410～5.335(m，1h)；4.528(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.328(m，2h)；4.335(t，j＝4.8hz，1h)；3.662～3.617(m，454h)；3.240(s，3h)；2.377～2.314(m，4h)；1.632(t，j＝6.8hz，4h)；1.294(s，40h)；0.896(t，j＝6.4hz，6h)。实施例2(1)将100gmpeg500，10.4g氢氧化钠加入到300ml四氢呋喃中，搅拌，称取41.5g对甲苯磺酰氯溶于200ml四氢呋喃，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，滴毕20℃下反应15h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到磺酰化的粗产物。粗产品运用二氯甲烷重结晶，得到100g纯品mpeg500-tos，产率：90％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.822(t，j＝6.4hz，2h)；7.401(t，j＝6.4hz，2h)；3.754(t，j＝4.4hz，2h)；3.672～3.638(m，42h)；3.240(s，3h)；2.351(s，3h)；(2)将步骤(1)得到的100gmpeg500-tos加入到150ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季铵碱，升温到60℃，搅拌10h。反应结束，冷却至室温，用氢氧化钠溶液调ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到固体。用二氯甲烷重结晶，得到90g纯品mpeg500-nh2，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.636(m，42h)；2.825(t，j＝6.4hz，2h)；3.241(s，3h)；2.124(s，2h)；(3)将50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取20g对硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，在30℃下反应2h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到粗产物。层析柱纯化，得到58g活化的dmg，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)将步骤(3)得到的58g活化的dmg加入到400ml四氢呋喃中，加入40gmpeg500-nh2，4-二甲氨基吡啶，室温搅拌8h。反应结束，用氢氧化钠溶液调ph＝7，然后旋干水相，再用200ml四氢呋喃溶解，抽滤，无水硫酸钠干燥滤液，旋干滤液，经过二氯甲烷重结晶，得到60g纯品产物，产率：97％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.426～5.334(m，1h)；4.522(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.326(m，2h)；4.330(t，j＝4.8hz，1h)；3.672～3.644(m，44h)；3.241(s，3h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)。实施例3(1)将100gmpeg500，20.5g吡啶加入到300ml四氢呋喃中，搅拌，称取49g对硝基苯磺酰氯溶于200ml四氢呋喃，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，滴毕20℃下反应15h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到磺酰化的粗产物。粗产品运用二氯甲烷重结晶，得到100g纯品mpeg500-tos，产率：90％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.822(t，j＝6.4hz，2h)；7.401(t，j＝6.4hz，2h)；3.754(t，j＝4.4hz，2h)；3.672～3.638(m，42h)；3.240(s，3h)；2.351(s，3h)；(2)将步骤(1)得到的100gmpeg500-tos加入到150ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季铵碱，升温到60℃，搅拌10h。反应结束，冷却至室温，用氢氧化钠溶液调ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到固体。用二氯甲烷重结晶，得到90g纯品mpeg500-nh2，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.636(m，42h)；2.825(t，j＝6.4hz，2h)；3.241(s，3h)；2.124(s，2h)；(3)将50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取20g对硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，在25℃下反应2.5h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到粗产物。层析柱纯化，得到58g活化的dmg，产率：97％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)将步骤(3)得到的58g活化的dmg加入到400ml四氢呋喃中，加入40gmpeg500-nh2，4-二甲氨基吡啶，室温搅拌8h。反应结束，用氢氧化钠溶液调ph＝7，然后旋干水相，再用200ml四氢呋喃溶解，抽滤，无水硫酸钠干燥滤液，旋干滤液，经过二氯甲烷重结晶，得到60g纯品产物，产率：95％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.426～5.334(m，1h)；4.522(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.326(m，2h)；4.330(t，j＝4.8hz，1h)；3.672～3.644(m，44h)；3.241(s，3h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)。实施例4(1)将100gmpeg5000，3.2g4-二甲氨基吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取2.5g甲磺酰氯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，滴毕温度0℃，反应12h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到磺酰化的粗产物。粗产品运用二氯甲烷重结晶，得到100g纯品mpeg5000-tos，产率：90％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.811(t，j＝6.4hz，2h)；7.422(t，j＝6.4hz，2h)；3.739(t，j＝4.4hz，2h)；3.685～3.636(m，452h)；3.240(s，3h)；2.353(s，3h)；(2)将步骤(1)得到的100gmpeg5000-tos加入到100ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季铵碱，升温到50℃，搅拌15h。反应结束，冷却至室温，用氢氧化钠溶液调ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到固体。用二氯甲烷重结晶，得到90g纯品mpeg5000-nh2，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.682～3.630(m，452h)；2.830(t，j＝6.4hz，2h)；3.242(s，3h)；2.102(s，2h)；(3)将50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取20g对硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，于温度为40℃条件下反应1h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到粗产物。层析柱纯化，得到55g活化的dmg，产率：96％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)将步骤(3)得到的12g活化的dmg加入到500ml二氧六环中，加入90gmpeg5000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室温搅拌8h。反应结束，用氢氧化钠溶液调ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氧六环溶解，抽滤，无水硫酸钠干燥滤液，旋干滤液，经过二氯甲烷重结晶，得到90g纯品产物，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.410～5.335(m，1h)；4.528(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.328(m，2h)；4.335(t，j＝4.8hz，1h)；3.662～3.617(m，454h)；3.240(s，3h)；2.377～2.314(m，4h)；1.632(t，j＝6.8hz，4h)；1.294(s，40h)；0.896(t，j＝6.4hz，6h)。实施例5(1)将100gmpeg2000，66g三乙胺加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取10.5g对甲苯磺酰氯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，滴毕0℃下反应15h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到磺酰化的粗产物。粗产品运用二氯甲烷重结晶，得到105g纯品mpeg2000-tos，产率：91％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.812(t，j＝6.4hz，2h)；7.402(t，j＝6.4hz，2h)；3.734(t，j＝4.4hz，2h)；3.675～3.630(m，178h)；3.240(s，3h)；2.351(s，3h)；(2)将步骤(1)得到的105gmpeg2000-tos加入到100ml甲醇中，再加入400ml氨水，加入10g季铵碱，升温到40℃，搅拌20h。反应结束，冷却至室温，用氢氧化钠溶液调ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到固体。用二氯甲烷重结晶，得到90g纯品mpeg2000-nh2，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.692～3.631(m，178h)；2.831(t，j＝6.4hz，2h)；3.240(s，3h)；2.125(s，2h)；(3)将50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取20g对硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，在温度为20℃下反应2h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到粗产物。层析柱纯化，得到55g活化的dmg，产率：95％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)将步骤(3)得到的35g活化的dmg加入到500ml二氯甲烷中，加入90gmpeg2000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室温搅拌8h。反应结束，用氢氧化钠溶液调ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氯甲烷溶解，抽滤，无水硫酸钠干燥滤液，旋干滤液，经过二氯甲烷重结晶，得到100g纯品产物，产率：97％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.415～5.335(m，1h)；4.525(t，j＝8hz，1h)；4.334～4.322(m，2h)；4.334(t，j＝4.8hz，1h)；3.682～3.639(m，180h)；3.241(s，3h)；2.379～2.314(m，4h)；1.635(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.893(t，j＝6.4hz，6h)。实施例6(1)将100gmpeg20000，0.66g三乙胺加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取1.05g对甲苯磺酰氯溶于20ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，滴毕温度10℃下反应12.5h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到磺酰化的粗产物。粗产品运用二氯甲烷重结晶，得到95g纯品mpeg20000-tos，产率：90％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：7.801(t，j＝6.4hz，2h)；7.429(t，j＝6.4hz，2h)；3.759(t，j＝4.4hz，2h)；3.687～3.636(m，1816h)；3.240(s，3h)；2.358(s，3h)；(2)将步骤(1)得到的95gmpeg20000-tos加入到100ml甲醇中，再加入200ml氨水，加入10g季铵碱，升温到50℃，搅拌15h。反应结束，冷却至室温，用氢氧化钠溶液调ph＝10，再用300ml二氯甲烷萃取3次，无水硫酸钠干燥，旋干得到固体。用二氯甲烷重结晶，得到85g纯品mpeg20000-nh2，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：3.687～3.630(m，1816h)；2.839(t，j＝6.4hz，2h)；3.233(s，3h)；2.096(s，2h)；(3)将50gdmg，8g吡啶加入到300ml二氯甲烷中，搅拌，称取20g对硝基氯甲酸苯酯溶于100ml二氯甲烷，在冰水浴条件下滴加至反应体系中，在30℃温度下反应3h。反应结束，加300ml水洗，分液，无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到粗产物。层析柱纯化，得到40g活化的dmg，产率：98％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：8.301(d，j＝9.2hz，2h)；7.405(d，j＝9.2hz，2h)；5.406～5.355(m，1h)；4.512(t，j＝8hz，1h)；4.383～4.343(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；2.379～2.317(m，4h)；1.638(t，j＝6.8hz，4h)；1.296(s，40h)；0.895(t，j＝6.4hz，6h)；(4)将步骤(3)得到的3g活化的dmg加入到500ml二氯甲烷中，加入85gmpeg20000-nh2，4-二甲氨基吡啶，室温搅拌8h。反应结束，用氢氧化钠溶液调ph＝7，然后旋干水相，再用200ml二氯甲烷溶解，抽滤，无水硫酸钠干燥滤液，旋干滤液，经过二氯甲烷重结晶，得到80g纯品产物，产率：99％。核磁数据如下：1hnmr(400mhz，cdcl3)：δ：5.410～5.329(m，1h)；4.524(t，j＝8hz，1h)；4.331～4.318(m，2h)；4.338(t，j＝4.8hz，1h)；3.655～3.632(m，1818h)；3.240(s，3h)；2.377～2.310(m，4h)；1.631(t，j＝6.8hz，4h)；1.289(s，40h)；0.894(t，j＝6.4hz，6h)。不同活化剂活化dmg的实验结果活化剂反应时间/温度中间体纯度产率对硝基氯甲酸苯酯5h/10℃过柱99％对硝基氯甲酸苯酯2h/30℃过柱98％对硝基氯甲酸苯酯2.5h/25℃过柱97％对硝基氯甲酸苯酯1h/40℃过柱96％对硝基氯甲酸苯酯2h/20℃过柱95％对硝基氯甲酸苯酯3h/30℃过柱98％当前第1页12