一种快速检测植物感染青枯病的设备及使用方法与流程

文档序号:13727281阅读:330来源:国知局
一种快速检测植物感染青枯病的设备及使用方法与流程
本发明涉及青枯病检测
技术领域
,具体涉及一种快速检测植物感染青枯病的设备及使用方法。
背景技术
:青枯病的病原为劳尔氏菌,主要症状为:最初,地上部分未见任何异常现象的植株,白天突然失去生机,整个地上部均枯萎。阴天和早晚有所恢复,如同健株,然而,不久之后便枯萎,呈青枯症状,这一过程进展十分迅猛。是一种广泛分布于热带、亚热带和某些温带地区的世界性病害,是多种农作物减产的主要原因。植株的细根首先褐变,不久开始腐烂并消失。切开接近地面部位的病茎,可以发现维管束微有褐变,并从该部位分泌出白色混浊污汁。青枯病是番茄、茄子、辣椒、马铃薯等茄科蔬菜的主要病害。主要症状是植株迅速萎蔫、枯死,茎叶仍保持绿色。病茎的褐变部位用手挤压,有乳白色菌液排出。在高温高湿、重茬连作、地洼土黏、田间积水、土壤偏酸、偏施氮肥等情况下,该病容易发生。青枯病菌,可以同病株残体一同进入土壤。长期生存形成侵染源。土壤水分对其在土壤中的生存影响极大。在湿度大的冲积土中,可以生存长达2~3年,而在干燥的土壤中,只能生存几天。青枯病菌,在土壤中并非以休眠状态生存,而是在上述发病植株或某种杂草的根际进行繁殖。生存在土壤中的青枯病菌,主要是由作业过程中造成的伤口或者是由根结线虫、蓝光丽金龟幼虫等根部害虫造成的伤口侵染植株,在茎的导管部位和根部发病。有时也会由无伤口细根侵入植株内发病。目前,关于青枯菌的检测方法包括传统分离培养法、血清学和分子生物学等方法。传统的青枯病菌检测方法是采用选择性培养基对病原物进行分离纯化,然后进行一系列的生理生化实验进行诊断,该方法易受外界因素的影响且灵敏度较低。但是此方法具有广泛的植物适用性,如果能在检测过程中集成化,避免人工因素的影响,建立一套快速、灵敏、准确的青枯病菌检测设备是非常必要的。技术实现要素:针对以上技术问题,本发明提供一种集成度高,对于植物的分类适应性高的快速检测植物感染青枯病的设备及使用方法。本发明的技术方案为:一种快速检测植物感染青枯病的设备,主要包括底座、溶液制备装置、培养装置、加液装置,所述的底座为长方体形状,溶液制备装置固定在底座顶面的左上角,加液装置固定在溶液制备装置的上方,培养装置固定在溶液制备装置的右侧;所述的底座顶面的左下角自下而上分别设置有温度显示屏、ph显示屏、容量显示屏,所述的温度显示屏的右侧设置有混液开关,所述的ph显示屏的右侧设置有排液开关,所述的容量显示屏的右侧设置有加热开关,所述的加热开关的右侧设置有电源开关,底座正面的最右侧设置有培养固定器,所述的培养固定器的右上角设置有阳性按钮和阴性按钮,所述的阳性按钮和阴性按钮内置无线数据发射器;所述的溶液制备装置的内部嵌入设置有控制器,所述的控制器的顶部设置有混液容器,所述的混液容器为球型玻璃混液器皿,混液容器的底部设置有加热装置,所述的加热装置的底部设置有温度传感器,混液容器的底部设置有出液管路,加热装置的顶部设置有搅拌器,混液容器的侧壁上设置有容量感应器,侧壁的下方设置有ph传感器;所述的加液装置为上大下小的漏斗形状,较大的面上分别设置有ph调节管、固体管、液体管,所述的ph调节管上设置有ph调节漏斗,所述的ph调节漏斗的顶部设置有调节液容器,所述的ph调节漏斗和调节液容器的连接处设置有ph调节阀;所述的培养装置主要包括观察窗、集液漏斗、进液管路、培养容器、存液容器、滴液漏斗、滴液阀,所述的观察窗安装在集液漏斗的顶部,所述的进液管路的出液端与集液漏斗连接,进液管路的进液端与所述的出液管路连接,所述的集液漏斗固定在培养容器的顶部,所述的培养容器的侧壁上安装有滴液漏斗,所述的滴液漏斗顶部通过滴液阀与存液容器连接;所述的温度显示屏、ph显示屏、容量显示屏、混液开关、排液开关、加热开关、电源开关与控制器之间电连接,所述的加热装置、温度传感器、搅拌器、容量感应器、ph传感器与控制器之间电连接,加热装置、温度传感器、搅拌器、容量感应器、ph传感器、控制器分别与外接电源连接。进一步的,所述的培养固定器为条形挡板,所述的条形挡板的左侧设置有合页,并通过合页与底座连接,条形挡板的右侧设置有紧固开关,培养固定器通过紧固开关与底座固定,通过打开条形挡板可以将培养容器独立于培养装置取出,方便快捷,使用和清洗方便。进一步的,所述的集液漏斗上设置有环形加热装置,所述的环形加热装置为若干加热丝,所述的加热丝设置在集液漏斗侧壁上,加热丝通过导线连接到控制器,集液漏斗内设置有温度感应探头,所述的温度感应探头与控制器电连接,可以给培养基制造一个适合的环境温度,选择性高,温度调节范围大。进一步的,所述的加热开关为单开双控设置,加热开关的控制模式与温度显示屏的显示模式保持一致,所述的控制模式包括加热装置控制和加热丝控制两种,所述的显示模式包括温度传感器温度显示和温度感应探头温度显示,单开双控可选择操作,集成度高,节约成本。进一步的,所述的控制器为市售的plc控制器,主要包括电源、中央处理单元、存储器、输入输出接口电路、功能模块、通信模块,所述的电源控制一般交流电压波动在±10%范围内,将plc直接连接到交流电网;所述的中央处理单元是plc的控制中枢,用于接收并存储从编程器键入的用户程序和数据;检查电源、存储器、i/o以及警戒定时器的状态,并能诊断用户程序中的语法错误;所述的存储器存放系统软件。一种快速检测植物感染青枯病的设备的使用方法主要包括以下步骤:步骤一:首先,打开电源开关,通过液体管加入单位体积的等离子水,然后通过固体管分别加入0.5-1.5g/l的水解乳蛋白,8-12g/l的蛋白胨,4-6g/l的葡萄糖,16-18g/l的琼脂,然后打开混液开关,进行搅拌混液5-15min,待溶液搅拌均匀后,通过ph显示屏观察溶液的ph值,将ph调节剂加入到调节液容器,所述的ph调节剂为1mol/l盐酸,然后旋转ph调节阀,通过ph调节漏斗进行ph调节,直至溶液的ph值为6.5-7.0,然后打开加热开关,通过温度显示屏控制加热溶液在121℃的温度下加热灭菌15min,打开排液开关,使得溶液分别通过出液管路和进液管路进入培养容器,待冷却至常温后形成固体培养基,备用;步骤二:先打开观察窗,然后将分离好的植物病原菌注入制备好的固体培养基中,调节加热开关,通过温度感应探头观察固体培养基的培养温度,使用加热丝加热,使得固体培养基的温度为35℃,然后在此温度下培养植物病原菌24-48h;步骤三:培养完成后,给存液容器中加入所述溶液体积3-5%的2,3,5-氯化三苯四氮唑,打开滴液阀,使用滴液漏斗将2,3,5-氯化三苯四氮唑加入固体培养基中,通过观察窗观察,根据反应颜色来判定所述的植物病原菌中是否含有青枯菌,氯化三苯四氮唑可与青枯菌发生化学反应,致病性菌落会反应后会变成白色晕圈的粉红色,无致病性的菌落反应后会变成深红色,kelman于1954年研究出的ttc/tzc(triphenytetrazoliumchoride)培养基。专门用于分离青枯菌,在cpg的基础上加入2,3,5-氯化三苯四氮唑,该培养基中含有氯化三苯四氮唑与青枯菌发生化学反应,从而区分开两种菌落类型:致病性菌落出现白色晕圈的粉红色菌落,无致病性的菌落则表现为深红色,如果含有青枯菌则按下阳性按钮,没有青枯菌则按下阴性按钮,将检测结构通过无线数据发射器发出。进一步的,所述的植物病原菌的分离是采用组织分离法通过采样装置得到的,所述的采样装置主要包括进样孔、挤压盘、电机、进水口、水箱、喷水器、漂洗箱、出样孔、出样开关、消毒箱出料开关、出料挡板、消毒箱、消毒液出入口、灭菌灯,所述的进样孔与挤压盘连接,所述的挤压盘与电机通过传动轴连接,挤压盘的右侧与消毒箱连接,所述的消毒箱顶部设置有灭菌灯,消毒箱上面与消毒液出入口连接,消毒箱的底部设置有出料挡板,所述的出料挡板与消毒箱出料开关连接,出料挡板与漂洗箱连接,所述的漂洗箱左侧设置有喷水器,所述的喷水器与水箱连接,所述的水箱与进水口连接,漂洗箱的右下侧设置有出样孔,所述的出样孔上设置有出样开关,所述的出样开关与挤压器连接,所述的挤压器与培养装置连接;切取待测植物的2-3mm的小块病组织放入进样孔,在灭菌灯的无菌条件下,通过消毒液出入口加入4-6%的次氯酸钠溶液消毒5-8min,然后使用消毒箱出料开关将消毒的小块病组织放入漂洗箱的无菌水中,漂洗3次,然后通过挤压器挤压出植物病原菌即可。与现有技术相比本发明的有益效果为:本发明的快速检测植物感染青枯病的设备将固体培养基制备、细菌培养一体化集成,避免了因为多重人为操作对生化反应过程中造成的影响,从加液、混液、ph调节、加热、出液步骤中,实行流水线密封操作,无菌化程度高,不易产生污染,本发明的设备使用方法操作简单,根据反应颜色来判定所述的植物病原菌中是否含有青枯菌,致病性菌落会反应后会变成白色晕圈的粉红色,无致病性的菌落反应后会变成深红色,色差明显,无需使用专业的观察设备,肉眼即可快速观察,效果准确,对于植物种类选择的应用面广泛。附图说明图1是本发明的结构示意图;图2是本发明的集液漏斗结构示意图;图3是本发明的电器连接关系图;图4是本发明的采样装置结构示意图;其中,1-底座,101-温度显示屏,102-ph显示屏,103-容量显示屏,104-混液开关,105-排液开关,106-加热开关,107-电源开关,108-培养固定器,1081-紧固开关,1082-合页,2-溶液制备装置,201-混液容器,202-容量感应器,203-搅拌器,204-加热装置,205-温度传感器,206-ph传感器,207-出液管路,208-控制器,3-培养装置,301-观察窗,302-集液漏斗,3021-加热丝,3022-温度感应探头,3023-导线,303-进液管路,304-培养容器,305-存液容器,306-滴液漏斗,307-滴液阀,4-加液装置,401-ph调节管,402-固体管,403-液体管,404-ph调节漏斗,405-ph调节阀,406-调节液容器,5-采样装置,501-进样孔,502-挤压盘,503-电机,504-进水口,505-水箱,506-喷水器,507-漂洗箱,508-出样孔,509-出样开关,510-消毒箱出料开关,511-出料挡板,512-消毒箱,513-消毒液出入口,514-灭菌灯,515-挤压器。具体实施方式下面结合具体实施例来对本发明进行更进一步详细的说明:外接电源将本发明的一种快速检测植物感染青枯病的设备用于某烟草疑似的青枯病感染检测中,选取某烟草30株,分为三组,每组10株,实验组1、实验组2、实验组3,对于三组实验组的烟草分别使用实施例1、实施例2、实施例3的设备进行检测,然后对于检测结果进行复验,验证本发明的设备的准确性:实施例1:如图1所示,设备主要包括底座1、溶液制备装置2、培养装置3、加液装置4,底座1为长方体形状,溶液制备装置2固定在底座1顶面的左上角,加液装置4固定在溶液制备装置2的上方,培养装置3固定在溶液制备装置2的右侧;底座1顶面的左下角自下而上分别设置有温度显示屏101、ph显示屏102、容量显示屏103,温度显示屏101的右侧设置有混液开关104,ph显示屏102的右侧设置有排液开关105,容量显示屏103的右侧设置有加热开关106,加热开关106的右侧设置有电源开关107,底座1正面的最右侧设置有培养固定器108,培养固定器108的右上角设置有阳性按钮109和阴性按钮110,阳性按钮109和阴性按钮110内置无线数据发射器;培养固定器108为条形挡板,条形挡板的左侧设置有合页1082,并通过合页1082与底座1连接,条形挡板的右侧设置有紧固开关1081,培养固定器108通过紧固开关1081与底座1固定,通过打开条形挡板可以将培养容器304独立于培养装置3取出,方便快捷,使用和清洗方便。溶液制备装置2的内部嵌入设置有控制器208,控制器208的顶部设置有混液容器201,混液容器201为球型玻璃混液器皿,混液容器201的底部设置有加热装置204,加热装置204的底部设置有温度传感器205,混液容器201的底部设置有出液管路207,加热装置204的顶部设置有搅拌器203,混液容器201的侧壁上设置有容量感应器202,侧壁的下方设置有ph传感器206;加液装置4为上大下小的漏斗形状,较大的面上分别设置有ph调节管401、固体管402、液体管403,ph调节管401上设置有ph调节漏斗404,ph调节漏斗404的顶部设置有调节液容器406,ph调节漏斗404和调节液容器406的连接处设置有ph调节阀405;培养装置3主要包括观察窗301、集液漏斗302、进液管路303、培养容器304、存液容器305、滴液漏斗306、滴液阀307,观察窗301安装在集液漏斗302的顶部,进液管路303的出液端与集液漏斗302连接,进液管路303的进液端与出液管路207连接,集液漏斗302固定在培养容器304的顶部,培养容器304的侧壁上安装有滴液漏斗306,滴液漏斗306顶部通过滴液阀307与存液容器305连接;如图2所示,集液漏斗302上设置有环形加热装置,环形加热装置为加热丝3021,加热丝3021设置在集液漏斗302侧壁上,加热丝3021通过导线3023连接到控制器208,集液漏斗302内设置有温度感应探头3022,温度感应探头3022与控制器208电连接,可以给培养基制造一个适合的环境温度,选择性高,温度调节范围大。如图3所示,温度显示屏101、ph显示屏102、容量显示屏103、混液开关104、排液开关105、加热开关106、电源开关107与控制器208之间电连接,加热装置204、温度传感器205、搅拌器203、容量感应器202、ph传感器206与控制器208之间电连接,加热装置204、温度传感器205、搅拌器203、容量感应器202、ph传感器206、控制器208分别与外接电源连接;加热开关106为单开双控设置,加热开关106的控制模式与温度显示屏101的显示模式保持一致,控制模式包括加热装置204控制和加热丝3021控制两种,显示模式包括温度传感器205温度显示和温度感应探头3022温度显示,单开双控可选择操作,集成度高,节约成本,控制器208为市售的plc控制器,主要包括电源、中央处理单元、存储器、输入输出接口电路、功能模块、通信模块,电源控制一般交流电压波动在±10%范围内,将plc直接连接到交流电网;中央处理单元是plc的控制中枢,用于接收并存储从编程器键入的用户程序和数据;检查电源、存储器、i/o以及警戒定时器的状态,并能诊断用户程序中的语法错误;存储器存放系统软件。如图4所示,植物病原菌的分离是采用组织分离法通过采样装置5得到的,采样装置5主要包括进样孔501、挤压盘502、电机503、进水口504、水箱505、喷水器506、漂洗箱507、出样孔508、出样开关509、消毒箱出料开关510、出料挡板511、消毒箱512、消毒液出入口513、灭菌灯514,进样孔501与挤压盘502连接,挤压盘502与电机503通过传动轴连接,挤压盘502的右侧与消毒箱512连接,消毒箱512顶部设置有灭菌灯514,消毒箱512上面与消毒液出入口513连接,消毒箱512的底部设置有出料挡板511,出料挡板511与消毒箱出料开关510连接,出料挡板511与漂洗箱507连接,漂洗箱507左侧设置有喷水器506,喷水器506与水箱505连接,水箱505与进水口504连接,漂洗箱507的右下侧设置有出样孔508,出样孔508上设置有出样开关509,出样开关509与挤压器515连接,挤压器515与培养装置3连接。一种快速检测植物感染青枯病的设备的使用方法主要包括以下步骤:步骤一:首先,打开电源开关107,通过液体管403加入单位体积的等离子水,然后通过固体管402分别加入0.5g/l的水解乳蛋白,8g/l的蛋白胨,4g/l的葡萄糖,16g/l的琼脂,然后打开混液开关104,进行搅拌混液5min,待溶液搅拌均匀后,通过ph显示屏102观察溶液的ph值,将ph调节剂加入到调节液容器406,ph调节剂为1mol/l盐酸,然后旋转ph调节阀405,通过ph调节漏斗404进行ph调节,直至溶液的ph值为6.5,然后打开加热开关106,通过温度显示屏101控制加热溶液在121℃的温度下加热灭菌15min,打开排液开关105,使得溶液分别通过出液管路207和进液管路303进入培养容器304,待冷却至常温后形成固体培养基,备用;步骤二:切取待测植物的2mm的小块病组织放入进样孔501,在灭菌灯514的无菌条件下,通过消毒液出入口513加入4%的次氯酸钠溶液消毒5min,然后使用消毒箱出料开关510将消毒的小块病组织放入漂洗箱507的无菌水中,漂洗3次,然后通过挤压器515挤压出植物病原菌即可;步骤三:先打开观察窗301,然后将分离好的植物病原菌注入制备好的固体培养基中,调节加热开关106,通过温度感应探头3022观察固体培养基的培养温度,使用加热丝3021加热,使得固体培养基的温度为35℃,然后在此温度下培养植物病原菌24h;步骤四:培养完成后,给存液容器305中加入所述溶液体积3%的2,3,5-氯化三苯四氮唑,打开滴液阀307,使用滴液漏斗306将2,3,5-氯化三苯四氮唑加入固体培养基中,通过观察窗301观察,根据反应颜色来判定植物病原菌中是否含有青枯菌,氯化三苯四氮唑可与青枯菌发生化学反应,致病性菌落会反应后会变成白色晕圈的粉红色,无致病性的菌落反应后会变成深红色,如果含有青枯菌则按下阳性按钮109,没有青枯菌则按下阴性按钮110,将检测结构通过无线数据发射器发出。实施例2:如图1所示,设备主要包括底座1、溶液制备装置2、培养装置3、加液装置4,底座1为长方体形状,溶液制备装置2固定在底座1顶面的左上角,加液装置4固定在溶液制备装置2的上方,培养装置3固定在溶液制备装置2的右侧;底座1顶面的左下角自下而上分别设置有温度显示屏101、ph显示屏102、容量显示屏103,温度显示屏101的右侧设置有混液开关104,ph显示屏102的右侧设置有排液开关105,容量显示屏103的右侧设置有加热开关106,加热开关106的右侧设置有电源开关107,底座1正面的最右侧设置有培养固定器108,培养固定器108的右上角设置有阳性按钮109和阴性按钮110,阳性按钮109和阴性按钮110内置无线数据发射器;培养固定器108为条形挡板,条形挡板的左侧设置有合页1082,并通过合页1082与底座1连接,条形挡板的右侧设置有紧固开关1081,培养固定器108通过紧固开关1081与底座1固定,通过打开条形挡板可以将培养容器304独立于培养装置3取出,方便快捷,使用和清洗方便。溶液制备装置2的内部嵌入设置有控制器208,控制器208的顶部设置有混液容器201,混液容器201为球型玻璃混液器皿,混液容器201的底部设置有加热装置204,加热装置204的底部设置有温度传感器205,混液容器201的底部设置有出液管路207,加热装置204的顶部设置有搅拌器203,混液容器201的侧壁上设置有容量感应器202,侧壁的下方设置有ph传感器206;加液装置4为上大下小的漏斗形状,较大的面上分别设置有ph调节管401、固体管402、液体管403,ph调节管401上设置有ph调节漏斗404,ph调节漏斗404的顶部设置有调节液容器406,ph调节漏斗404和调节液容器406的连接处设置有ph调节阀405;培养装置3主要包括观察窗301、集液漏斗302、进液管路303、培养容器304、存液容器305、滴液漏斗306、滴液阀307,观察窗301安装在集液漏斗302的顶部,进液管路303的出液端与集液漏斗302连接,进液管路303的进液端与出液管路207连接,集液漏斗302固定在培养容器304的顶部,培养容器304的侧壁上安装有滴液漏斗306,滴液漏斗306顶部通过滴液阀307与存液容器305连接;如图2所示,集液漏斗302上设置有环形加热装置,环形加热装置为设置在集液漏斗302侧壁上的4圈加热丝3021,加热丝3021通过导线3023连接到控制器208,集液漏斗302内设置有温度感应探头3022,温度感应探头3022与控制器208电连接,可以给培养基制造一个适合的环境温度,选择性高,温度调节范围大。如图3所示,温度显示屏101、ph显示屏102、容量显示屏103、混液开关104、排液开关105、加热开关106、电源开关107与控制器208之间电连接,加热装置204、温度传感器205、搅拌器203、容量感应器202、ph传感器206与控制器208之间电连接,加热装置204、温度传感器205、搅拌器203、容量感应器202、ph传感器206、控制器208分别与外接电源连接;加热开关106为单开双控设置,加热开关106的控制模式与温度显示屏101的显示模式保持一致,控制模式包括加热装置204控制和加热丝3021控制两种,显示模式包括温度传感器205温度显示和温度感应探头3022温度显示,单开双控可选择操作,集成度高,节约成本,控制器208为市售的plc控制器,主要包括电源、中央处理单元、存储器、输入输出接口电路、功能模块、通信模块,电源控制一般交流电压波动在±10%范围内,将plc直接连接到交流电网;中央处理单元是plc的控制中枢,用于接收并存储从编程器键入的用户程序和数据;检查电源、存储器、i/o以及警戒定时器的状态,并能诊断用户程序中的语法错误;存储器存放系统软件。如图4所示,植物病原菌的分离是采用组织分离法通过采样装置5得到的,采样装置5主要包括进样孔501、挤压盘502、电机503、进水口504、水箱505、喷水器506、漂洗箱507、出样孔508、出样开关509、消毒箱出料开关510、出料挡板511、消毒箱512、消毒液出入口513、灭菌灯514,进样孔501与挤压盘502连接,挤压盘502与电机503通过传动轴连接,挤压盘502的右侧与消毒箱512连接,消毒箱512顶部设置有灭菌灯514,消毒箱512上面与消毒液出入口513连接,消毒箱512的底部设置有出料挡板511,出料挡板511与消毒箱出料开关510连接,出料挡板511与漂洗箱507连接,漂洗箱507左侧设置有喷水器506,喷水器506与水箱505连接,水箱505与进水口504连接,漂洗箱507的右下侧设置有出样孔508,出样孔508上设置有出样开关509,出样开关509与挤压器515连接,挤压器515与培养装置3连接。一种快速检测植物感染青枯病的设备的使用方法主要包括以下步骤:步骤一:首先,打开电源开关107,通过液体管403加入单位体积的等离子水,然后通过固体管402分别加入1g/l的水解乳蛋白,10g/l的蛋白胨,5g/l的葡萄糖,17g/l的琼脂,然后打开混液开关104,进行搅拌混液10min,待溶液搅拌均匀后,通过ph显示屏102观察溶液的ph值,将ph调节剂加入到调节液容器406,ph调节剂为1mol/l盐酸,然后旋转ph调节阀405,通过ph调节漏斗404进行ph调节,直至溶液的ph值为6.75,然后打开加热开关106,通过温度显示屏101控制加热溶液在121℃的温度下加热灭菌15min,打开排液开关105,使得溶液分别通过出液管路207和进液管路303进入培养容器304,待冷却至常温后形成固体培养基,备用;步骤二:切取待测植物的2.5mm的小块病组织放入进样孔501,在灭菌灯514的无菌条件下,通过消毒液出入口513加入5%的次氯酸钠溶液消毒6.5min,然后使用消毒箱出料开关510将消毒的小块病组织放入漂洗箱507的无菌水中,漂洗3次,然后通过挤压器515挤压出植物病原菌即可;步骤三:先打开观察窗301,然后将分离好的植物病原菌注入制备好的固体培养基中,调节加热开关106,通过温度感应探头3022观察固体培养基的培养温度,使用加热丝3021加热,使得固体培养基的温度为35℃,然后在此温度下培养植物病原菌36h;步骤四:培养完成后,给存液容器305中加入所述溶液体积4%的2,3,5-氯化三苯四氮唑,打开滴液阀307,使用滴液漏斗306将2,3,5-氯化三苯四氮唑加入固体培养基中,通过观察窗301观察,根据反应颜色来判定植物病原菌中是否含有青枯菌,氯化三苯四氮唑可与青枯菌发生化学反应,致病性菌落会反应后会变成白色晕圈的粉红色,无致病性的菌落反应后会变成深红色,如果含有青枯菌则按下阳性按钮109,没有青枯菌则按下阴性按钮110,将检测结构通过无线数据发射器发出。实施例3:如图1所示,设备主要包括底座1、溶液制备装置2、培养装置3、加液装置4,底座1为长方体形状,溶液制备装置2固定在底座1顶面的左上角,加液装置4固定在溶液制备装置2的上方,培养装置3固定在溶液制备装置2的右侧;底座1顶面的左下角自下而上分别设置有温度显示屏101、ph显示屏102、容量显示屏103,温度显示屏101的右侧设置有混液开关104,ph显示屏102的右侧设置有排液开关105,容量显示屏103的右侧设置有加热开关106,加热开关106的右侧设置有电源开关107,底座1正面的最右侧设置有培养固定器108,培养固定器108的右上角设置有阳性按钮109和阴性按钮110,阳性按钮109和阴性按钮110内置无线数据发射器;培养固定器108为条形挡板,条形挡板的左侧设置有合页1082,并通过合页1082与底座1连接,条形挡板的右侧设置有紧固开关1081,培养固定器108通过紧固开关1081与底座1固定,通过打开条形挡板可以将培养容器304独立于培养装置3取出,方便快捷,使用和清洗方便。溶液制备装置2的内部嵌入设置有控制器208,控制器208的顶部设置有混液容器201,混液容器201为球型玻璃混液器皿,混液容器201的底部设置有加热装置204,加热装置204的底部设置有温度传感器205,混液容器201的底部设置有出液管路207,加热装置204的顶部设置有搅拌器203,混液容器201的侧壁上设置有容量感应器202,侧壁的下方设置有ph传感器206;加液装置4为上大下小的漏斗形状,较大的面上分别设置有ph调节管401、固体管402、液体管403,ph调节管401上设置有ph调节漏斗404,ph调节漏斗404的顶部设置有调节液容器406,ph调节漏斗404和调节液容器406的连接处设置有ph调节阀405;培养装置3主要包括观察窗301、集液漏斗302、进液管路303、培养容器304、存液容器305、滴液漏斗306、滴液阀307,观察窗301安装在集液漏斗302的顶部,进液管路303的出液端与集液漏斗302连接,进液管路303的进液端与出液管路207连接,集液漏斗302固定在培养容器304的顶部,培养容器304的侧壁上安装有滴液漏斗306,滴液漏斗306顶部通过滴液阀307与存液容器305连接;如图2所示,集液漏斗302上设置有环形加热装置,环形加热装置为设置在集液漏斗302侧壁上的5圈加热丝3021,加热丝3021通过导线3023连接到控制器208,集液漏斗302内设置有温度感应探头3022,温度感应探头3022与控制器208电连接,可以给培养基制造一个适合的环境温度,选择性高,温度调节范围大。如图3所示,温度显示屏101、ph显示屏102、容量显示屏103、混液开关104、排液开关105、加热开关106、电源开关107与控制器208之间电连接,加热装置204、温度传感器205、搅拌器203、容量感应器202、ph传感器206与控制器208之间电连接,加热装置204、温度传感器205、搅拌器203、容量感应器202、ph传感器206、控制器208分别与外接电源连接;加热开关106为单开双控设置,加热开关106的控制模式与温度显示屏101的显示模式保持一致,控制模式包括加热装置204控制和加热丝3021控制两种,显示模式包括温度传感器205温度显示和温度感应探头3022温度显示,单开双控可选择操作,集成度高,节约成本,控制器208为市售的plc控制器,主要包括电源、中央处理单元、存储器、输入输出接口电路、功能模块、通信模块,电源控制一般交流电压波动在±10%范围内,将plc直接连接到交流电网;中央处理单元是plc的控制中枢,用于接收并存储从编程器键入的用户程序和数据;检查电源、存储器、i/o以及警戒定时器的状态,并能诊断用户程序中的语法错误;存储器存放系统软件。如图4所示,植物病原菌的分离是采用组织分离法通过采样装置5得到的,采样装置5主要包括进样孔501、挤压盘502、电机503、进水口504、水箱505、喷水器506、漂洗箱507、出样孔508、出样开关509、消毒箱出料开关510、出料挡板511、消毒箱512、消毒液出入口513、灭菌灯514,进样孔501与挤压盘502连接,挤压盘502与电机503通过传动轴连接,挤压盘502的右侧与消毒箱512连接,消毒箱512顶部设置有灭菌灯514,消毒箱512上面与消毒液出入口513连接,消毒箱512的底部设置有出料挡板511,出料挡板511与消毒箱出料开关510连接,出料挡板511与漂洗箱507连接,漂洗箱507左侧设置有喷水器506,喷水器506与水箱505连接,水箱505与进水口504连接,漂洗箱507的右下侧设置有出样孔508,出样孔508上设置有出样开关509,出样开关509与挤压器515连接,挤压器515与培养装置3连接。一种快速检测植物感染青枯病的设备的使用方法主要包括以下步骤:步骤一:首先,打开电源开关107,通过液体管403加入单位体积的等离子水,然后通过固体管402分别加入1.5g/l的水解乳蛋白,12g/l的蛋白胨,6g/l的葡萄糖,18g/l的琼脂,然后打开混液开关104,进行搅拌混液15min,待溶液搅拌均匀后,通过ph显示屏102观察溶液的ph值,将ph调节剂加入到调节液容器406,ph调节剂为1mol/l盐酸,然后旋转ph调节阀405,通过ph调节漏斗404进行ph调节,直至溶液的ph值为7.0,然后打开加热开关106,通过温度显示屏101控制加热溶液在121℃的温度下加热灭菌15min,打开排液开关105,使得溶液分别通过出液管路207和进液管路303进入培养容器304,待冷却至常温后形成固体培养基,备用;步骤二:切取待测植物的3mm的小块病组织放入进样孔501,在灭菌灯514的无菌条件下,通过消毒液出入口513加入6%的次氯酸钠溶液消毒8min,然后使用消毒箱出料开关510将消毒的小块病组织放入漂洗箱507的无菌水中,漂洗3次,然后通过挤压器515挤压出植物病原菌即可;步骤三:先打开观察窗301,然后将分离好的植物病原菌注入制备好的固体培养基中,调节加热开关106,通过温度感应探头3022观察固体培养基的培养温度,使用加热丝3021加热,使得固体培养基的温度为35℃,然后在此温度下培养植物病原菌48h;步骤四:培养完成后,给存液容器305中加入所述溶液体积5%的2,3,5-氯化三苯四氮唑,打开滴液阀307,使用滴液漏斗306将2,3,5-氯化三苯四氮唑加入固体培养基中,通过观察窗301观察,根据反应颜色来判定植物病原菌中是否含有青枯菌,氯化三苯四氮唑可与青枯菌发生化学反应,致病性菌落会反应后会变成白色晕圈的粉红色,无致病性的菌落反应后会变成深红色,如果含有青枯菌则按下阳性按钮109,没有青枯菌则按下阴性按钮110,将检测结构通过无线数据发射器发出。对于三组实验组的致病菌除了使用本发明的设备和方法检测外,还分别使用了酶联免疫吸附法和聚合酶链式反应技术进行检测,得到的患有青枯病的烟草株数结果如下:实验组1实验组2实验组3平均准确率%本发明的设备10株10株10株100.0酶联免疫吸附8株9株9株83.3聚合酶链式反应9株9株8株83.3由上表可知,本发明的设备及使用方法对于青枯病检测的平均准确率为100%,可以在植物青枯病检测
技术领域
广泛使用。最后应说明的是:以上实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明实施例技术方案的精神和范围。当前第1页12
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