遏蓝菜硒多糖、富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法以及应用与流程

文档序号:12899566阅读:440来源:国知局

本发明涉及硒多糖提取技术领域,尤其涉及一种遏蓝菜硒多糖、富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法以及应用。



背景技术:

遏蓝菜,是一种一年生或多年生的草本植物,属于十字花科,原产于欧洲中部、西部和南部。圆叶遏蓝菜主要分布在我国湖北恩施自治州一带,是该地区的一种地缘性植物资源,主要分布在恩施双河桥半径150公里(宣恩,鹤峰,建始)范围的"硒"矿床之上,当地人也称之为野油菜或虎耳菜。圆叶遏蓝菜具有很强的硒元素吸附能力,富硒圆叶遏蓝菜目前已成为当地老百姓餐桌上招待“缺硒”地区考察客商的一道美味佳肴。经研究和检测发现富硒圆叶遏蓝菜含“硒”最高可达1427mg/kg,叶片含“硒”可达500mg/kg,由此可见,对于富硒圆叶遏蓝菜中“硒”的提取具有重要的意义。

硒是人体生命活动的必需的微量元素之一,在人类防癌抗癌、延缓衰老、提高机体免疫力、清除体内自由基、预防和治疗心血管疾病和克山病等方面都发挥着重要作用。硒的存在形式有无机硒和有机硒两种,无机硒吸收效果差且毒性较大,相对而言有机硒毒性低、副作用小,能够更好地发挥硒的生理活性。有机硒主要包括硒多糖、硒氨基酸、硒蛋白和硒核酸等,其中硒多糖具有多种生理活性,其不但具有无机硒的多种活性,还具有多糖的各种生理功能,并且已有研究证明硒多糖的活性普遍高于硒和多糖,更利于被机体吸收利用。

目前,国内外对于硒多糖的研究尚处于起步阶段,一般是理论研究,很难进行实际应用和工厂化生产。并且,现有技术中关于富硒遏蓝菜中硒多糖的提取的技术方案资源更是缺乏,发明人通过大量的文献均未发现有专门针对富硒遏蓝菜中的硒多糖的提取方法的记载。

有鉴于此,发明人通过大量的实践和研究,提出了本发明。



技术实现要素:

本发明的第一目的在于提供一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,能够有效提取原料的有效活性成分,提取效率高,并且操作简单易行,运行成本低。

本发明的第二目的在于提供一种遏蓝菜硒多糖,以富硒遏蓝菜为原料生产获得的一种遏蓝菜硒多糖,具有较高的抗氧化活性,能提高人体的免疫力,保健效果好,应用价值高。

本发明的第三目的在于提供一种遏蓝菜硒多糖在制备增强机体抗氧化功能和免疫调节功能的保健药品或食品添加剂中的应用,既可以作为抗氧化性的功能食品,又可以作为人体补硒食品,具有较高的应用价值。

为了实现本发明的上述目的,特采用以下技术方案:

根据本发明的一个方面,本发明提供一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,所述方法包括以下步骤:原料预处理、浸提、离心、浓缩、除杂、醇沉和干燥;

其中,所述浸提步骤中,浸提温度为40~65℃,浸提次数为1~3次,每次浸提的时间为15~30min,并且采用超声波辅助和/或酶处理进行浸提。

作为进一步优选技术方案,所述浸提步骤中,浸提温度为55~60℃,浸提次数为2次,每次浸提的时间为18~22min,第一次在功率为35~45w的超声波辅助下浸提,第二次在ph值为6.5~7.5条件下用酶浸提;

优选地,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至7,然后用复合酶进行浸提;

优选地,以质量分数计,所述复合酶包括纤维素酶0.8~1.5份、果胶酶1~2份和木瓜蛋白酶2~3份;

优选地,所述浸提步骤中,将预处理后的遏蓝菜和水按照1:15~25的料水比加入至提取装置中进行浸提。

作为进一步优选技术方案,所述原料预处理包括清洗、干燥和粉碎;

优选地,所述清洗步骤包括两道鼓泡清洗,一道将遏蓝菜用自来水或软化水清洗,二道用纯净水清洗;

优选地,所述干燥步骤中,将清洗后的遏蓝菜干燥至其水分含量为0%~5%时,取出;

优选地,所述粉碎步骤中,粉碎的粒度为70~90目。

作为进一步优选技术方案,所述离心步骤中,在3000~5000r/min的条件下离心10~20min,收集上清液。

作为进一步优选技术方案,所述浓缩步骤中,采用减压浓缩,将所述上清液浓缩至原体积的1/3~1/5,得到浓缩液。

作为进一步优选技术方案,所述除杂步骤中,包括采用sevage法进行脱蛋白,以及采用电透析法进行小分子杂质的去除;

优选地,脱蛋白处理的操作参数为,sevage试剂添加量为浓缩得到的浓缩液体积的1/3~1/4,氯仿与正丁醇的体积比为3~5:1,振摇时间为20~40min,脱蛋白的次数为1~3次,之后进行离心8~15min,得到上清料液;

优选地,将所述上清料液通过电透析法进行小分子杂质的去除,得到清液,电透析的操作参数为:电流密度为5~15ma/cm2,循环流量为10~20l/h,温度为15~35℃,时间为150~300min。

作为进一步优选技术方案,所述醇沉步骤中,在除杂后得到的所述清液中加入3~5倍体积量的浓度为85%~98%的乙醇进行醇沉,静置12~24小时,得到硒多糖沉淀物,将所述硒多糖沉淀物用80%~90%浓度的乙醇进行洗涤2~4次,得到粗品硒多糖。

作为进一步优选技术方案,所述干燥步骤中,将醇沉得到的所述粗品硒多糖进行真空冷冻干燥,即得到遏蓝菜硒多糖;

优选地,干燥的温度为-30~-20℃,真空度为20~90pa,时间为2~4小时。

根据本发明的另一个方面,本发明提供一种遏蓝菜硒多糖,所述遏蓝菜硒多糖由上述的富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法制得。

根据本发明的另一个方面,本发明提供一种上述的遏蓝菜硒多糖在制备增强机体抗氧化功能和免疫调节功能的保健药品或食品添加剂中的应用。

与现有技术相比,本发明的有益效果在于:

1、本发明提供的富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,经科学的原料预处理、浸提、离心、浓缩、除杂、醇沉和干燥的操作方式,能够有效提取原料的有效活性成分,产品的有效活性成分流失少,操作简单易行,效果好、效率高,成本低廉,具有显著的综合经济效益,有利于实现工厂化的规模生产。

尤为突出的是,本发明在浸提步骤中,采用超声波辅助和/或酶处理进行浸提,一方面极大的提高了提取效率,缩短了提取时间,另一方面降低了提取温度,避免了高温对于有效成分的破坏,对于原料中遇热不稳定等有效成分起到了保护作用,还节省了能耗;同时还有助于提高硒多糖的纯度,保证保健品的质量。

2、通过本发明提供的富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法制得的遏蓝菜硒多糖,可应用在制备具有增强机体抗氧化功能和免疫调节功能的保健药品或食品添加剂中,不仅保健疗效明显,有助于提高人体免疫力、防癌、抗肿瘤等,而且产品稳定性好,便于携带和服用。

具体实施方式

下面将结合实施方式和实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施方式和实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市售购买获得的常规产品。

第一方面,本实施方式提供一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,所述方法包括以下步骤:原料预处理、浸提、离心、浓缩、除杂、醇沉和干燥;

其中,所述浸提步骤中,浸提温度为40~65℃,浸提次数为1~3次,每次浸提的时间为15~30min,并且采用超声波辅助和/或酶处理进行浸提。

有鉴于富硒圆叶遏蓝菜中“硒”元素含量较高,具有较高的应用价值,而现有技术中还未有针对富硒圆叶遏蓝菜中“硒”的提取方案,本实施方式提供了一种行之有效的富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,达到了方法操作简单,经济适用,成本低,提取效率高的效果,能够充分发挥遏蓝菜中硒多糖的独特保健价值,填补了富硒遏蓝菜中硒多糖的提取的空白。

本实施方式经过科学的原料预处理、浸提、离心、浓缩、除杂、醇沉和干燥的操作方式,提取得到遏蓝菜硒多糖。其中,在浸提步骤中,采用超声波辅助和/或酶处理进行浸提,一方面极大的提高了提取效率,超声波独有的物理特性能够促使植物细胞组织破壁或变形,能够使得原料中的有效成分提取的更充分,与传统的浸提方式相比可提高提取率50%-500%;并且缩短了提取时间,与传统的浸提方式相比可缩短提取时间2/3以上;同时提取液中杂质少,有助于提高硒多糖的纯度,确保保健品的质量。另一方面,降低了提取温度,避免了高温对于有效成分的破坏,对于原料中遇热不稳定、易水解或氧化等有效成分起到了保护作用,还节省了能耗,降低了运行成本。

在一个具体实施方式中,可选的,浸提温度为40℃、42℃、45℃、48℃、50℃、52℃、55℃、58℃、60℃、62℃或65℃;浸提次数为1次、2次或3次;每次浸提的时间为15min、16min、17min、18min、19min、20min、21min、22min、23min、24min、25min、26min、28min、29min或30min。

作为一种可选的实施方式,所述浸提步骤中,浸提温度为55~60℃,浸提次数为2次,每次浸提的时间为18~22min,第一次在功率为35~45w的超声波辅助下浸提,第二次在ph值为6.5~7.5条件下用酶浸提;

优选地,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至7,然后用复合酶进行浸提;

优选地,以质量分数计,所述复合酶包括纤维素酶0.8~1.5份、果胶酶1~2份和木瓜蛋白酶2~3份;

优选地,所述浸提步骤中,将预处理后的遏蓝菜和水按照1:15~25的料水比加入至提取装置中进行浸提。

本实施方式中,优选为2次浸提,第一次用超声波辅助,第二次用酶处理,但并不限于此,还可以进行1次浸提,浸提过程中用超声波辅助或者酶处理;或者进行3次浸提,第一次用超声波辅助,第二次用酶处理,第三次不做任何处理。每次浸提的温度和时间均可相同。

在一个具体实施方式中,可选的,第一次在功率为35w、36w、37w、37.5w、38w、38.5w、39w、40w、41w、42w、43w、44w或45w的超声波辅助下浸提。

在一个具体实施方式中,可选的,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至6.5、6.6、6.7、6.8、6.9、7、7.1、7.2、7.3、7.4或7.5,然后用复合酶处理进行浸提。

在一个具体实施方式中,可选的,以质量分数计,所述复合酶包括纤维素酶1份、果胶酶1.5份和木瓜蛋白酶2.5份;或者包括纤维素酶0.8份、果胶酶1份和木瓜蛋白酶2份;或者包括纤维素酶1.5份、果胶酶2份和木瓜蛋白酶3份;

本领域技术人员可根据现有技术选择纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶的来源,本发明不做具体限定。

在一个具体实施方式中,可选的,遏蓝菜和水的比例即料水比(g/ml)可以为1:15、1:16、1:17、1:18、1:19、1:20、1:21、1:22、1:23、1:24或1:25。

这样,通过上述热水浸提,并在超声波和酶辅助的操作方式下,能够更加有效的提取遏蓝菜中的硒多糖,提取效果好、效率高。

作为一种可选的实施方式,所述原料预处理包括清洗、干燥和粉碎;

优选地,所述清洗步骤包括两道鼓泡清洗,一道将遏蓝菜用自来水或软化水清洗,二道用纯净水清洗;

优选地,所述干燥步骤中,将清洗后的遏蓝菜干燥至其水分含量为0%~5%时,取出;

优选地,所述粉碎步骤中,粉碎的粒度为70~90目。

本实施方式中的原料处理方式可以为,先挑选新鲜圆叶遏蓝菜,两道鼓泡清洗,一道将遏蓝菜用自来水或软化水进行清洗,二道用纯净水进行清洗;然后采用烘干机将清洗后的遏蓝菜干燥至其水分含量在5%以下,取出;再用粉碎机将干燥后的遏蓝菜粉碎成70~90目的粗粉。

在一个具体实施方式中,可选的,干燥后的遏蓝菜的水分含量为0%、0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%、3.5%、4%、4.5%或5%。

在一个具体实施方式中,可选的,粉碎的粒度为70目、75目、80目、85目或90目。

这样,通过上述对于遏蓝菜原料的预处理方式,更有助于其提取,有助于提高提取效率,以及有效成分的提取率。

作为一种可选的实施方式,所述离心步骤中,在3000~5000r/min的条件下离心10~20min,收集上清液。

作为一种可选的实施方式,所述浓缩步骤中,采用减压浓缩,将所述上清液浓缩至原体积的1/3~1/5,得到浓缩液。

本实施方式将浸提步骤得到的提取液先在常温下进行离心,并收集上清液,再将收集到的浓缩液进行减压浓缩。

在一个具体实施方式中,可选的,在3000r/min、3500r/min、4000r/min、4500r/min或5000r/min的条件下离心10min、12min、14min、15min、16min、18min或20min。

在一个具体实施方式中,可选的,将上清液浓缩至原体积的1/3、1/4或1/5。

作为一种可选的实施方式,所述除杂步骤中,包括采用sevage法进行脱蛋白,以及采用电透析法进行小分子杂质的去除;

优选地,脱蛋白处理的操作参数为,sevage试剂添加量为浓缩得到的浓缩液体积的1/3~1/4,氯仿与正丁醇的体积比为3~5:1,振摇时间为20~40min,脱蛋白的次数为1~3次,之后进行离心8~15min,得到上清料液;

优选地,将所述上清料液通过电透析法进行小分子杂质的去除,得到清液,电透析的操作参数为:电流密度为5~15ma/cm2,循环流量为10~20l/h,温度为15~35℃,时间为150~300min。

本实施方式中的除杂包括脱蛋白和小分子杂质的去除,其中脱蛋白是多糖分离纯化中较为重要的缓解,多糖脱蛋白的方法涉及化学法、物理法以及生物法,较为常用的有sevage法、离子交换法和酶法等。其中,sevage法除蛋白具有操作简单、条件温和、对糖链破坏小,且所用试剂常规、价格低等优点。由于多糖的来源不同,sevage法脱蛋白的工艺参数也会略有差别。本实施方式采用现有的sevage法脱蛋白的操作方式进行操作,具体的操作参数如下:

在一个具体实施方式中,可选的,sevage试剂添加量为浓缩得到的浓缩液体积的1/3或1/4,氯仿与正丁醇的体积比为3:1、4:1或5:1,振摇时间为20min、25min、30min、35min或40min,脱蛋白的次数为1次、2次或3次,脱蛋白之后进行离心8min、9min、10min、11min、12min、13min、14min或15min,即可得到上清料液。

进一步地,本实施方式将得到的上清料液进行电透析,以去除小分子杂质,进一步纯化硒多糖。通过电透析的方式,除杂效果好,操作简便,效率高,能够进一步提高硒多糖的纯度,确保产品的质量。

在一个具体实施方式中,可选的,电透析的操作参数为:电流密度为5ma/cm2、6ma/cm2、7ma/cm2、8ma/cm2、9ma/cm2、10ma/cm2、11ma/cm2、12ma/cm2、13ma/cm2、14ma/cm2或15ma/cm2;循环流量为10l/h、11l/h、12l/h、13l/h、14l/h、15l/h、16l/h、17l/h、18l/h、19l/h或20l/h;温度为15℃、16℃、18℃、20℃、22℃、25℃、26℃、28℃、30℃、32℃或35℃;时间为150min、160min、180min、200min、220min、240min、250min、260min、280min或300min。

作为一种可选的实施方式,所述醇沉步骤中,在除杂后得到的所述清液中加入3~5倍体积量的浓度为85%~98%的乙醇进行醇沉,静置12~24小时,得到硒多糖沉淀物,将所述硒多糖沉淀物用80%~90%浓度的乙醇进行洗涤2~4次,得到粗品硒多糖。

本实施方式将经过电透析处理后得到的清液进行醇沉,以析出硒多糖,得到沉淀物。

在一个具体实施方式中,可选的,乙醇的体积浓度为85%、86%、87%、88%、89%、90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97或98%;加入的乙醇的量为清液的3倍、4倍或5倍体积量;静置的时间为12小时、13小时、14小时、15小时、16小时、17小时、18小时、19小时、20小时、21小时、22小时、23小时或24小时;然后将硒多糖沉淀物用80%、81%、82%、83%、84%、85%、86%、87%、88%、89%或90%浓度的乙醇进行洗涤2次、3次或4次。

作为一种可选的实施方式,所述干燥步骤中,将醇沉得到的所述粗品硒多糖进行真空冷冻干燥,即得到遏蓝菜硒多糖;

优选地,干燥的温度为-30~-20℃,真空度为20~90pa,时间为2~4小时。

在一个具体实施方式中,可选的,干燥的温度为-30℃、-29℃、-28℃、-27℃、-26℃、-25℃、-24℃、-23℃、-22℃、-21℃或-20℃;真空度为20pa、30pa、40pa、50pa、60pa、70pa、80pa或90pa;时间为2小时、2.5小时、3小时、3.5小时或4小时。

这样,通过上述清洗、干燥、粉碎、醇提、离心、浓缩、脱蛋白、电透析、醇沉和冷冻干燥各操作步骤的配合使用,以及各操作步骤中参数的设置,精制而成遏蓝菜硒多糖,具有提取效率高,产品纯度高,易于操作,运行成本低,产品纯度好等优点,易于工业化生产。

第二方面,本实施方式一种遏蓝菜硒多糖,所述遏蓝菜硒多糖由上述的富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法制得。

第三方面,本实施方式提供一种上述的遏蓝菜硒多糖在制备增强机体抗氧化功能和免疫调节功能的保健药品或食品添加剂中的应用。

本实施方式提取制得的遏蓝菜硒多糖既可以作为抗氧剂功能食品,又可以作为人体补硒食品,将其应用在保健药品或食品添加剂中,保健效果明显,有助于提高人体免疫力、防癌、抗肿瘤等,具有较高的应用价值。

下面结合具体实施例和对比例,对本发明作进一步说明。

实施例1

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,包括以下步骤:

原料预处理、浸提、离心、浓缩、除杂、醇沉和干燥;

其中,浸提步骤中,料水比(g/ml)为1:20,浸提温度为55℃,浸提次数为2次,每次浸提的时间为20min,第一次在功率为37.5w的超声波辅助下浸提,第二次在ph值为7的条件下用酶处理进行浸提。

实施例2

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,包括以下步骤:

清洗、干燥、粉碎、浸提、离心、浓缩、脱蛋白、电透析、醇沉和干燥;

其中,浸提步骤中,料水比(g/ml)为1:22,浸提温度为60℃,浸提次数为1次,浸提的时间为25min,在功率为40w的超声波辅助下进行浸提。

实施例3

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,包括以下步骤:

(1)清洗:挑选新鲜圆叶遏蓝菜,通过两道鼓泡清洗,一道将遏蓝菜用自来水或软化水进行清洗,二道用纯净水进行清洗;

(2)干燥:采用烘干机将清洗后的遏蓝菜干燥至其水分含量为3%时,取出;

(3)粉碎:用粉碎机将干燥后的遏蓝菜粉碎成80目的粗粉;

(4)浸提:将得到的粗粉和水按照1:20的料水比加入至提取装置中进行浸提,浸提温度为56℃,浸提次数为2次,每次浸提的时间为20min,第一次在功率为38w的超声波辅助下浸提,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至7,然后复合酶进行浸提;其中,以质量分数计,复合酶包括纤维素酶1份、果胶酶1.5份和木瓜蛋白酶2.5份;

(5)离心:在4000r/min的常温条件下离心15min,收集上清液;

(6)浓缩:采用减压浓缩,将收集到的上清液浓缩至原体积的1/5,得到浓缩液;

(7)脱蛋白:采用sevage法进行脱蛋白,其中sevage试剂添加量为浓缩得到的浓缩液体积的1/4,氯仿与正丁醇的体积比为4:1,振摇时间为30min,脱蛋白的次数为1次,之后进行离心10min,得到上清料液;

(8)电透析:采用电透析法进行小分子杂质的去除,电流密度为10ma/cm2,循环流量为15l/h,温度为25℃,时间为180min,得到清液;

(9)醇沉:在得到的清液中加入4倍体积量的浓度为95%的乙醇进行醇沉,静置18小时,得到硒多糖沉淀物,将硒多糖沉淀物用85%浓度的乙醇进行洗涤3次,得到粗品硒多糖;

(10)干燥:采用真空冷冻干燥的方式对粗品硒多糖进行干燥,干燥的温度为-30℃,真空度为40pa,时间为2小时,即得到遏蓝菜硒多糖。

实施例4

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,包括以下步骤:

(1)清洗:挑选新鲜圆叶遏蓝菜,通过两道鼓泡清洗,一道将遏蓝菜用自来水或软化水进行清洗,二道用纯净水进行清洗;

(2)干燥:采用烘干机将清洗后的遏蓝菜干燥至其水分含量为4%时,取出;

(3)粉碎:用粉碎机将干燥后的遏蓝菜粉碎成70目的粗粉;

(4)浸提:将得到的粗粉和水按照1:25的料水比加入至提取装置中进行浸提,浸提温度为45℃,浸提次数为2次,每次浸提的时间为30min,第一次在功率为35w的超声波辅助下浸提,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至7.5,然后复合酶进行浸提;其中,以质量分数计,复合酶包括纤维素酶1.5份、果胶酶2份和木瓜蛋白酶3份;

(5)离心:在5000r/min的常温条件下离心10min,收集上清液;

(6)浓缩:采用减压浓缩,将收集到的上清液浓缩至原体积的1/3,得到浓缩液;

(7)脱蛋白:采用sevage法进行脱蛋白,其中sevage试剂添加量为浓缩得到的浓缩液体积的1/3,氯仿与正丁醇的体积比为5:1,振摇时间为20min,脱蛋白的次数为2次,之后进行离心15min,得到上清料液;

(8)电透析:采用电透析法进行小分子杂质的去除,电流密度为5ma/cm2,循环流量为10l/h,温度为35℃,时间为300min,得到清液;

(9)醇沉:在得到的清液中加入5倍体积量的浓度为88%的乙醇进行醇沉,静置24小时,得到硒多糖沉淀物,将硒多糖沉淀物用80%浓度的乙醇进行洗涤2次,得到粗品硒多糖;

(10)干燥:采用真空冷冻干燥的方式对粗品硒多糖进行干燥,干燥的温度为-20℃,真空度为80pa,时间为3小时,即得到遏蓝菜硒多糖。

实施例5

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是步骤(4),其余均与实施例3相同。

(4)浸提:将得到的粗粉和水按照1:15的料水比加入至提取装置中进行浸提,浸提温度为60℃,浸提次数为2次,每次浸提的时间为25min,第一次在功率为36w的超声波辅助下浸提,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至6.5,然后复合酶进行浸提;其中,以质量分数计,复合酶包括纤维素酶0.8份、果胶酶1份和木瓜蛋白酶2份。

实施例6

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是步骤(4),其余均与实施例3相同。

(4)浸提:将得到的粗粉和水按照1:20的料水比加入至提取装置中进行浸提,浸提温度为55℃,浸提次数为3次,每次浸提的时间为18min,第一次在功率为40w的超声波辅助下浸提,第二次先用碳酸钠将料液ph值调至7,然后复合酶进行浸提;其中,以质量分数计,复合酶包括纤维素酶1份、果胶酶1.5份和木瓜蛋白酶2.5份;第三次在不做任何辅助处理的条件下进行浸提。

实施例7

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是步骤(7)和(8),其余均与实施例3相同。

(7)脱蛋白:采用sevage法进行脱蛋白,其中sevage试剂添加量为浓缩得到的浓缩液体积的1/4,氯仿与正丁醇的体积比为3:1,振摇时间为40min,脱蛋白的次数为3次,之后进行离心8min,得到上清料液;

(8)电透析:采用电透析法进行小分子杂质的去除,电流密度为15ma/cm2,循环流量为20l/h,温度为15℃,时间为150min,得到清液。

实施例8

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是步骤(9)和(10),其余均与实施例3相同。

(9)醇沉:在得到的清液中加入3倍体积量的浓度为98%的乙醇进行醇沉,静置12小时,得到硒多糖沉淀物,将硒多糖沉淀物用90%浓度的乙醇进行洗涤3次,得到粗品硒多糖;

(10)干燥:采用真空冷冻干燥的方式对粗品硒多糖进行干燥,干燥的温度为-25℃,真空度为60pa,时间为4小时,即得到遏蓝菜硒多糖。

对比例1

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是步骤(4),其余均与实施例3相同。

采用普通的浸提的方式,即不采用超声波辅助或酶处理的方式进行浸提。

对比例2

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是步骤(4),其余均与实施例3相同。

其中,酶采用普通的生物酶,可以为纤维素酶、果胶酶或木瓜蛋白酶中任意一种。

对比例3

一种富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,与实施例3不同的是不包括步骤(8)电透析,其余均与实施例3相同。

采用原子吸收光谱法对获得的遏蓝菜硒多糖进行硒元素的测定,测定结果为,实施例3-8中遏蓝菜硒多糖中硒元素的含量分别为7.8ug/g、6.8ug/g、6.7ug/g、8.1ug/g、7.5ug/g和7.2ug/g,而对比例1-3中遏蓝菜硒多糖中硒元素的含量分别为3.8ug/g、4.2ug/g和3.5ug/g。并计算得到实施例3-8中遏蓝菜硒多糖的提取率(即得率)分别为3.6%、2.8%、2.5%、3.8%、3.4%和3.1%,而对比例1-3中遏蓝菜硒多糖的提取率分别为1.0%、1.2%和0.7%。

由此可以看出,本发明提供的富硒遏蓝菜中硒多糖的提取方法,能够有效提取富硒遏蓝菜中的有效成分,不仅提取效率高,而且还提高了提取率和产品的纯度,具有显著的经济效益,值得推广应用。

最后应说明的是:以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。

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