薯蓣皂苷的提取纯化方法与流程

本发明涉及生物医药
技术领域：
，特别涉及一种薯蓣皂苷的提取纯化方法。
背景技术：
：薯蓣皂苷(Dioscin)是由螺甾烷型的薯蓣皂苷元和一个连接在3位羟基上的糖链以糖苷键相连构成，是一种典型的活性天然皂苷类化合物，存在于薯蓣科、百合科、石竹科和蔷薇科等药用植物中，尤其是在薯蓣科植物中含量丰富，如穿龙薯蓣、盾叶薯蓣和黄山药等。中医学认为，薯蓣皂苷具有祛痰、舒筋活血、消食利水等作用。现代药理学研究表明薯蓣皂苷还具有脱敏、抗炎、降脂、抗肿瘤、保肝、抗病毒等作用。由于薯蓣皂苷连有糖残基，易溶于甲醇、乙醇、醋酸等极性溶剂，不易溶于氯仿、石油醚、乙醚等非极性溶剂，微溶于丙酮、戊醇。薯蓣皂苷的水解产物为薯蓣皂苷元(diosgenin)，有研究认为，在人体内，薯蓣皂苷口服后经肠道菌群代谢产生的薯蓣皂苷元是发挥作用的有效成分；薯蓣皂苷水解后以薯蓣皂苷元的形式发挥作用，薯蓣皂苷元可用作合成多种甾体激素类药物的原料，其应用前景非常广阔。现有的薯蓣皂苷提取方法有超声提取法、回流提取法和冷浸提取法等，主要是用甲醇或者稀乙醇作为溶剂。比如：超声波提取法：对盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的提取中，采用80％乙醇为提取溶剂、料液比为1∶25、在700W和40kHz的条件下超声提取40min；乙醇回流提取法：用乙醇回流法提取薯蓣科植物根茎中的薯蓣皂苷，提取条件为用6倍量70％乙醇回流提取3次，每次2h；薯蓣皂苷的纯化方法多采用大孔树脂、聚酰胺、中性氧化铝以及水饱和正丁醇等对药材提取液进行富集纯化得到粗皂苷，再经硅胶柱色谱、制备液相色谱、高速逆流色谱等技术进行分离，以得到纯度较高的薯蓣皂苷。以上薯蓣皂苷提取及纯化方法均存在生产时间长、有机溶剂使用量较大的缺点。技术实现要素：本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。本发明还有一个目的是提供一种薯蓣皂苷的提取纯化方法，其以薯蓣科植物根茎为原料，采用超微粉碎、微波辅助乙醇回流、醇沉和反相硅胶柱色谱法纯化得到纯度高于98％的薯蓣皂苷；综上，本发明方法的技术操作简单，大量减少有机溶剂的用量，工艺时间缩短50％以上，不使用酸碱，主要有机溶剂均可以回收再利用，大大降低了工业化生产后“三废”的产生量。为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种薯蓣皂苷的提取纯化方法，包括以下步骤：将薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂的混合物Ⅰ经多次循环提取处理获得混合物Ⅱ，其中，所述混合物中薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂混合的体积比为1:11-20，任一次提取处理包括依次进行的微波处理和回流法处理；以及将所述混合物Ⅱ提纯后获得薯蓣皂苷纯品。优选的是，将所述混合物Ⅰ经4-5次循环提取处理后过滤获得混合物Ⅱ。优选的是，所述微波处理的具体条件为：微波功率为300-500W，提取时间为10-20min，提取温度40-50℃；所述回流法的时间为30-60min，温度为35-45℃。优选的是，所述微波处理的具体条件为：微波功率为300-400W，提取时间为12-15min，提取温度48-50℃；所述回流法的时间为50-60min，温度为40-45℃。优选的是，薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂混合液中薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂混合的体积比为1:12-14。优选的是，所述提纯还包括以下步骤：将所述薯蓣皂苷提取液减压回收有机溶剂后得到浸膏；向所述浸膏中加入3-5倍体积的去离子水稀释后减压蒸馏处理获得蒸馏物；将所述蒸馏物沉淀至少6h后，弃去上清液获得沉淀物，将所述沉淀物离心处理获得一次离心沉淀，将所述一次离心沉淀溶于乙醇中后离心处理获得二次离心沉淀和二次上清液；将二次上清液减压干燥后获得薯蓣皂苷粗品粉末；将所述薯蓣皂苷粗品粉末经反向硅胶柱色谱法处理后获得洗脱液；将所述洗脱液减压干燥获得薯蓣皂苷。优选的是，所述反向硅胶柱色谱法中的反相色谱柱的反向填料为C18，粒径为75-150μm，梯度洗脱的流动相依次为按照体积比为9∶0.9∶0.1、8∶1.8∶0.2、7∶2.8∶0.2和7∶2.5∶0.5的比例混合的正丁醇－甲醇－水，洗脱流速为1.0-2.0mL/min，保留20-30min的洗脱液。优选的是，减压蒸馏处理的温度为45-50℃，压力为-0.1～-0.2MPA。优选的是，有机溶剂为质量百分含量为85-90％乙醇或甲醇。优选的是，所述穿龙粉的制备方法还包括以下步骤：将薯蓣科植物根茎洗净、表皮风干后，备用；开启电机驱动支撑轴带动多层烘干网低速旋转；将薯蓣科植物根茎经进料斗输送至一对挤压辊碾碎处理后，落入低速旋转的多层烘干网上进行逐级烘干至含水量≤6％，逐级烘干的具体步骤包括：开启加热送风机将薯蓣科植物根茎的温度在30-50min内匀速加温至80-82℃后恒温烘干处理30-50min；将薯蓣科植物根茎再升温至84-86℃后恒温烘干处理40-60min；将薯蓣科植物根茎再升温至88-90℃后恒温烘干至含水量低于6％；逐级烘干同时将烘干气体通入过滤槽内的乙醇中过滤，待烘干结束将乙醇移出与薯蓣皂苷提取液混合提纯后获得薯蓣皂苷；启动一对伸缩杆伸展开并带动所述刷体的刷毛均抵触在所述多层烘干网上后停止，之后再次开启电机低速旋转至少5圈，经逐级烘干后的薯蓣科植物根茎随刷毛扫落至收集槽，再经收集槽的卸料口卸料；将卸料出桶形壳体的逐级烘干后的薯蓣科植物根茎粉碎成300-500目的超细微的薯蓣科植物根茎粉；其中，碾碎烘干装置包括：桶形壳体，其内由水平挡板分割成上下排列设置的第一容置空间和第二容置空间；旋转烘干组件，其包括电机，其设置在所述水平挡板的中部；支撑轴，其与电机的驱动轴同轴设置，且所述支撑轴贯穿所述水平挡板后沿所述第二容置空间的轴向延伸设置；多层烘干网，其呈同心圆状依次间隔开设置在所述支撑轴上，且自上向下，多层烘干网的直径逐渐增大；加热送风机，其设置在所述旋转烘干组件的下方；出风口，其设置在所述桶形壳体的侧壁或顶部；过滤槽，其通过输送管连通至出风口处，且所述过滤槽内填充有质量百分含量为70％以上的乙醇，所述输送管的一端伸缩入乙醇中，所述过滤槽的上端罩设百叶窗式盖体；一对挤压辊，其设置在所述水平挡板上，且所述一对挤压辊沿所述水平挡板的半径方向延伸设置；进料斗，其设置在所述桶形壳体的上端，且所述进料斗的下端开口连通至桶形壳体的第一容置空间后正对一对挤压辊设置；卸料组件，其包括一对伸缩杆，其可伸缩的设置在所述水平挡板的下表面上，且一对伸缩杆中相对较短的伸缩杆靠近所述支撑轴设置；刷体，其连接设置在一对伸缩杆的下端，所述刷体呈阶梯式多连杆结构，在多连杆的下端面上设置有连续的刷毛，且所述刷体的多连杆的数量与多层烘干网的数量相适应，阶梯式多连杆结构中相邻两个连杆的落差与其正下方的相邻两个烘干网的落差相适应；其中，一对伸缩杆的伸缩长度与所述刷毛与其正下方的多层烘干网的距离相适应；集料槽，其为环绕设置在所述加热送风机的外周的环形收纳槽，且所述集料槽的内环直径小于多层烘干网中相对最大的烘干网的直径，所述集料槽的外环直径与桶形壳体的内直径相适应，且所述集料槽的底部自一侧向另一侧倾斜设置，相对较低的所述集料槽的底部通过卸料口延伸出所述桶形壳体；温度传感器和湿度传感器，其设置在所述第二容置空间内；以及温湿度控制器，其设置在所述桶形壳体的侧壁上，且所述温湿度控制其与温度传感器和湿度传感器电连接。本发明至少包括以下有益效果：(1)将薯蓣科植物根茎进行超微粉碎处理，相对于现有技术，避免了酸碱的预处理；(2)在多次循环提取处理中采用微波辅助回流法处理，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出来，耗费溶剂量仅为单一回流法提取的1/5，所需时间为单一回流法提取的1/10，使提取方法具有快捷、高效、节能等特点；(3)采用醇沉得薯蓣皂苷粗品，充分利用的薯蓣皂苷易溶于甲醇、乙醇、醋酸等极性溶剂，难溶于水的物理特性，避免了酸碱的使用；(4)反相硅胶柱色谱法纯化，减少了有机溶剂的用量，提高了薯蓣皂苷的纯度。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。附图说明图1为本发明的一个实施例中所述的薯蓣皂苷的提取纯化方法的工艺流程图；图2为本发明的一个实施例中所述的碾碎烘干装置的剖面结构示意图。具体实施方式下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不排除一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。如图1所示，本发明提供一种薯蓣皂苷的提取纯化方法，包括以下步骤：将薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂的混合物Ⅰ经多次循环提取处理获得混合物Ⅱ，其中，所述混合物中薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂混合的体积比为1:11-20，任一次提取处理包括依次进行的微波处理和回流法处理；以及将所述混合物Ⅱ提纯后获得薯蓣皂苷纯品。一个优选方案中，将所述混合物Ⅰ经4-5次循环提取处理后过滤获得混合物Ⅱ。一个优选方案中，所述微波处理的具体条件为：微波功率为300-500W，提取时间为10-20min，提取温度40-50℃；所述回流法的时间为30-60min，温度为35-45℃。一个优选方案中，所述微波处理的具体条件为：微波功率为300-400W，提取时间为12-15min，提取温度48-50℃；所述回流法的时间为50-60min，温度为40-45℃。一个优选方案中，薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂混合液中薯蓣科植物根茎粉和有机溶剂混合的体积比为1:12-14。一个优选方案中，所述提纯还包括以下步骤：将所述薯蓣皂苷提取液减压回收有机溶剂后得到浸膏；向所述浸膏中加入3-5倍体积的去离子水稀释后减压蒸馏处理获得蒸馏物；将所述蒸馏物沉淀至少6h后，弃去上清液获得沉淀物，将所述沉淀物离心处理获得一次离心沉淀，将所述一次离心沉淀溶于乙醇中后离心处理获得二次离心沉淀和二次上清液；将二次上清液减压干燥后获得薯蓣皂苷粗品粉末；将所述薯蓣皂苷粗品粉末经反向硅胶柱色谱法处理后获得洗脱液；将所述洗脱液减压干燥获得薯蓣皂苷。优选的是，所述反向硅胶柱色谱法中的反相色谱柱的反向填料为C18，粒径为75-150μm，梯度洗脱的流动相依次为按照体积比为9∶0.9∶0.1、8∶1.8∶0.2、7∶2.8∶0.2和7∶2.5∶0.5的比例混合的正丁醇－甲醇－水，洗脱流速为1.0-2.0mL/min，保留20-30min的洗脱液。一个优选方案中，减压蒸馏处理的温度为45-50℃，压力为-0.1～-0.2MPA。一个优选方案中，有机溶剂为质量百分含量为85-90％乙醇或甲醇。一个优选方案中，所述穿龙粉的制备方法还包括以下步骤：将薯蓣科植物根茎洗净、表皮风干后，备用；开启电机驱动支撑轴带动多层烘干网低速旋转；将薯蓣科植物根茎经进料斗输送至一对挤压辊碾碎处理后，落入低速旋转的多层烘干网上进行逐级烘干至含水量≤6％，逐级烘干的具体步骤包括：开启加热送风机将薯蓣科植物根茎的温度在30-50min内匀速加温至80-82℃后恒温烘干处理30-50min；将薯蓣科植物根茎再升温至84-86℃后恒温烘干处理40-60min；将薯蓣科植物根茎再升温至88-90℃后恒温烘干至含水量低于6％；将薯蓣科植物根茎碾碎处理，可挤压出其中的大量水分，并且不会过多损害薯蓣科植物根茎的表皮，尽可能多的保留不溶于水的薯蓣皂苷；逐级烘干处理，且前期缓慢匀速升温处理，可保证薯蓣科植物根茎内水分逐渐散失出来，不会影响薯蓣科植物根茎内的组织结构的致密性，避免进一步损失薯蓣皂苷，进而最大限度保留薯蓣科植物根茎内的薯蓣皂苷；逐级烘干同时将烘干气体通入过滤槽内的乙醇中过滤，待烘干结束将乙醇移出与薯蓣皂苷提取液混合提纯后获得薯蓣皂苷；烘干气体通过乙醇过滤后，将其中有可能带出薯蓣皂苷分离出来，提高薯蓣皂苷最终的提取率；启动一对伸缩杆伸展开并带动所述刷体的刷毛均抵触在所述多层烘干网上后停止，之后再次开启电机低速旋转至少5圈，经逐级烘干后的薯蓣科植物根茎随刷毛扫落至收集槽，再经收集槽的卸料口卸料；将卸料出桶形壳体的逐级烘干后的薯蓣科植物根茎粉碎成300-500目的超细微的薯蓣科植物根茎粉；其中，如图2所示，碾碎烘干装置包括：桶形壳体10，其内由水平挡板13分割成上下排列设置的第一容置空间11和第二容置空间12；旋转烘干组件20，其包括电机21，其设置在所述水平挡板的中部；支撑轴22，其与电机的驱动轴同轴设置，且所述支撑轴贯穿所述水平挡板后沿所述第二容置空间的轴向延伸设置；多层烘干网23，其呈同心圆状依次间隔开设置在所述支撑轴上，且自上向下，多层烘干网的直径逐渐增大；加热送风机24，其设置在所述旋转烘干组件的下方；出风口25，其设置在所述桶形壳体的侧壁或顶部；过滤槽26，其通过输送管261连通至出风口处，且所述过滤槽内填充有质量百分含量为70％以上的乙醇，所述输送管的一端伸缩入乙醇中，所述过滤槽的上端罩设百叶窗式盖体262；一对挤压辊30，其设置在所述水平挡板上，且所述一对挤压辊沿所述水平挡板的半径方向延伸设置；进料斗40，其设置在所述桶形壳体的上端，且所述进料斗的下端开口连通至桶形壳体的第一容置空间后正对一对挤压辊设置；进料斗的底部为无纺布材质，以便在加薯蓣科植物根茎的时候尽量阻挡烘干气体自此开口吹出；加薯蓣科植物根茎完成后，将进料斗关闭；卸料组件50，其包括一对伸缩杆51，其可伸缩的设置在所述水平挡板的下表面上，且一对伸缩杆中相对较短的伸缩杆靠近所述支撑轴设置；刷体52，其连接设置在一对伸缩杆的下端，所述刷体呈阶梯式多连杆结构，在多连杆的下端面上设置有连续的刷毛521，且所述刷体的多连杆的数量与多层烘干网的数量相适应，阶梯式多连杆结构中相邻两个连杆的落差与其正下方的相邻两个烘干网的落差相适应；其中，一对伸缩杆的伸缩长度与所述刷毛与其正下方的多层烘干网的距离相适应；集料槽53，其为环绕设置在所述加热送风机的外周的环形收纳槽，且所述集料槽的内环直径小于多层烘干网中相对最大的烘干网的直径，所述集料槽的外环直径与桶形壳体的内直径相适应，且所述集料槽的底部自一侧531向另一侧532倾斜设置，相对较低的所述集料槽的底部通过卸料口533延伸出所述桶形壳体；在实际应用中，桶形壳体内长期加温处理，刷毛的材质可以选择耐高温的棕榈扇叶或尼龙材质，除刷毛外，桶形壳体内其他结构的材质为不锈钢或合金材质；温度传感器60和湿度传感器70，其设置在所述第二容置空间内；以及温湿度控制器80，其设置在所述桶形壳体的侧壁上，且所述温湿度控制其与温度传感器和湿度传感器电连接。经温湿度控制器预定逐级烘干温度，并根据温湿度检测数据进行烘干温度和时间的调整；此外，一对挤压辊通过挤压辊电机驱动，一对伸缩杆可以是电动伸缩杆或气动伸缩杆，包括加热送风机在内的以上各电动或气动装置还与控制面板电连接，以统一控制。实施例11.1超微粉碎：取穿山龙1kg，经碾碎烘干装置碾碎并80-90℃逐级烘干至含水量为6％，超微粉碎后，粉末过300目筛，得到超微粉末；逐级烘干的条件依次为将薯蓣科植物根茎的温度在40min内匀速加温至80℃后恒温烘干处理50min；将薯蓣科植物根茎再升温至84℃后恒温烘干处理40min；将薯蓣科植物根茎再升温至90℃后恒温烘干至含水量为6％；1.2微波辅助乙醇回流提取薯蓣皂苷：取1.1中的超微粉末，料液比为1:12，乙醇浓度为90％，微波功率为300W，提取时间为12min，提取温度50℃，提取5次，每次回流60min，回流温度45℃；1.3醇沉得薯蓣皂苷粗品：50℃、压力为-0.1MPA下减压蒸馏回收有机溶剂得到浸膏，加入3倍体积的去离子水稀释减压蒸馏后，静置沉淀6h；弃去上清液后离心，取沉淀，用乙醇将沉淀溶解，离心后去上清液减压干燥后获得薯蓣皂苷粗品粉末；1.4反相硅胶柱色谱法纯化：薯蓣皂苷粗品粉末，进经反相硅胶柱色谱(C18，粒径75μμm)，用正丁醇－甲醇－水系统(9∶0.9∶0.1、8∶1.8∶0.2、7∶2.8∶0.2、7∶2.5∶0.5)梯度洗脱，流速1.0-2.0mL/min，保留20-30min的洗脱液；将洗脱液减压蒸馏干燥后，采用高效液相色谱分析，薯蓣皂苷纯品的纯度为98.7％。穿龙山的薯蓣皂苷的提取率为70％。实施例21.1超微粉碎：取板砖薯蓣1kg(此处就按照您的建议吧)，经碾碎烘干装置碾碎并80-90℃逐级烘干至含水量为5％，超微粉碎后，粉末过300目筛，得到超微粉末；逐级烘干的条件依次为将薯蓣科植物根茎的温度在30min内匀速加温至82℃后恒温烘干处理40min；将薯蓣科植物根茎再升温至86℃后恒温烘干处理60min；将薯蓣科植物根茎再升温至88℃后恒温烘干至含水量为5％；1.2微波辅助乙醇回流提取薯蓣皂苷：取1.1中的超微粉末，料液比为1:14，乙醇浓度为85％，微波功率为400W，提取时间为15min，提取温度45℃，提取4次，每次回流45min，回流温度35℃；1.3醇沉得薯蓣皂苷粗品：48℃，压力为-0.2MPA下减压回收有机溶剂得到浸膏，加入4倍体积的去离子水稀释减压蒸馏后，静置沉淀7h；弃去上清液后离心，取沉淀，用乙醇将沉淀溶解，离心后去上清液减压干燥后获得薯蓣皂苷粗品粉末；1.4反相硅胶柱色谱法纯化：薯蓣皂苷粗品粉末，进经反相硅胶柱色谱(C18，粒径75μμm)，用正丁醇－甲醇－水系统(9∶0.9∶0.1、8∶1.8∶0.2、7∶2.8∶0.2、7∶2.5∶0.5)梯度洗脱，流速1.0-2.0mL/min，保留20-30min的洗脱液；将洗脱液减压蒸馏干燥后，采用高效液相色谱分析，薯蓣皂苷纯品的纯度为98.5％，板砖薯蓣的薯蓣皂苷的提取率为68％。实施例31.1超微粉碎：取柳叶薯蓣1kg，经碾碎烘干装置碾碎并80-90℃逐级烘干至含水量为4％，超微粉碎后，粉末过300目筛，得到超微粉末；逐级烘干的条件依次为将薯蓣科植物根茎的温度在50min内匀速加温至81℃后恒温烘干处理30min；将薯蓣科植物根茎再升温至85℃后恒温烘干处理50min；将薯蓣科植物根茎再升温至89℃后恒温烘干至含水量低于4％；1.2微波辅助乙醇回流提取薯蓣皂苷：取1.1中的超微粉末，料液比为1:12，乙醇浓度为90％，微波功率为300W，提取时间为20min，提取温度40℃，提取5次，每次回流30min，回流温度40℃；1.3醇沉得薯蓣皂苷粗品：45℃，压力为-0.2MPA下减压回收有机溶剂得到浸膏，加入5倍体积的去离子水稀释减压蒸馏后，静置沉淀8h；弃去上清液后离心，取沉淀，用乙醇将沉淀溶解，离心后去上清液减压干燥后获得薯蓣皂苷粗品粉末；1.4反相硅胶柱色谱法纯化：薯蓣皂苷粗品粉末，进经反相硅胶柱色谱(C18，粒径75μμm)，用正丁醇－甲醇－水系统(9∶0.9∶0.1、8∶1.8∶0.2、7∶2.8∶0.2、7∶2.5∶0.5)梯度洗脱，流速1.0-2.0mL/min，保留20-30min的洗脱液；将洗脱液减压蒸馏干燥后，采用高效液相色谱分析，薯蓣皂苷纯品的纯度为98.4％，柳叶薯蓣的薯蓣皂苷的提取率为67％。其中，实施例1中的微波辅助乙醇回流方法获得的薯蓣皂苷粗品粉末得率与现有的单一的乙醇提取方法或超声辅助乙醇回流方法相比较，比较结果见下表1：其中，乙醇提取方法或超声辅助乙醇回流方法中所使用的提取原料的重量及目数均与实施例1相同，乙醇提取方法的具体条件为：95％乙醇，料液比为1:10，提取温度50℃，提取5次，每次4-5h；在超声辅助乙醇回流方法的具体条件为：95％乙醇，料液比为1:10，超声30-60min，提取3-4次，每次2-3h。以上提取方法获得的薯蓣皂苷粗品粉末均应用实施例1中的反向硅胶柱纯化方法，薯蓣皂苷的最终提取率见下表1。表1提取条件乙醇提取超声辅助乙醇回流实施例1乙醇耗费量(L/100g)5-10L4-5L1-2L提取时间(h)20.0-30.08.0-12.02.0-3.0薯蓣皂苷粗品粉末得率(g/100g)1.33±0.071.72±0.051.89±0.03薯蓣皂苷的最终提取率(％)35±9.450±6.970由上表1可知，应用本发明方法提取纯化薯蓣皂苷有以下有益效果：(1)将薯蓣科植物根茎进行超微粉碎处理，相对于现有技术，避免了酸碱的预处理；(2)在多次循环提取处理中采用微波辅助回流法处理，使原料中有效成分更充分和更容易地被提取出来，耗费溶剂量仅为单一回流法提取的1/5，所需时间为单一回流法提取的1/10，使提取方法具有快捷、高效、节能等特点；(3)采用醇沉得薯蓣皂苷粗品，充分利用的薯蓣皂苷易溶于甲醇、乙醇、醋酸等极性溶剂，难溶于水的物理特性，避免了酸碱的使用；(4)反相硅胶柱色谱法纯化，减少了有机溶剂的用量，提高了薯蓣皂苷的纯度以及提取率，减少原料的浪费。尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离说明书及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。当前第1页1 2 3