本发明涉及一种新型5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮衍生物；对选自由akt激酶、rsk激酶和s6k激酶所组成的组中的至少一种激酶的抑制剂；用于治疗选自由akt激酶、rsk激酶和s6k激酶所组成的组中的至少一种激酶相关疾病的药物组合物，以及抗肿瘤剂。
背景技术：
akt激酶(以下记作“akt”)，别名为pkb，属于丝氨酸/苏氨酸激酶，是在细胞存活、增殖、代谢等中具有中心作用的分子(非专利文献1)。
在各种类型的癌症中，可见akt的异常激活和akt基因自身的变异，强烈提示akt与癌症的发生、持续、性状表现相关(非专利文献2、3)。
目前为止，人们开发出一些靶向akt的抑制剂，报道了其抗肿瘤效果。但是，这些抑制剂在非临床模型中，作为单一制剂未表现出足够的抗肿瘤效果，未获得低浓度下的强力细胞杀伤效果和体内(invivo)的强力抗肿瘤效果等(非专利文献4、5)。另外，关于这些抑制剂，临床效果尚未得到证实。
另外，迄今为止的报道中，akt抑制剂表现出一定效果的癌症种类仅限于乳腺癌、前列腺癌、胶质瘤等细胞和模型(非专利文献4、6)，在除此以外的癌症种类，例如大肠癌等中未看到表现出强力效果的示例。
将40s核糖体蛋白s6磷酸化的丝氨酸/苏氨酸激酶中，分子量为90kda的激酶称为rsk激酶或p90rsk激酶(以下记作“rsk”)。rsk存在于ras-raf-mapk信号级联的下游，其是具有控制细胞增殖、存活、代谢、运动功能的重要信号传导分子，有报道称其具有癌细胞增殖所需的多种功能(非专利文献7)。
目前报道了一些对rsk表现出抑制活性的化合物(非专利文献7、8、9)。但是，其抗肿瘤效果有限。目前为止的非临床研究中，作为rsk抑制剂表现出一定效果的癌症种类，报道有肺癌、乳腺癌、甲状腺癌、前列腺癌等，但尚不存在临床开发阶段的rsk抑制剂。
s6k激酶(以下记作“s6k”)和rsk同为控制40s核糖体蛋白s6的磷酸化所必需的丝氨酸/苏氨酸激酶。s6k因胰岛素样生长因子等的生长因子刺激，经由pi3k/mtor信号通路而被活化，通过将癌的多种性质(增殖、存活、浸润转移等)所需的各种功能分子磷酸化而进行控制(非专利文献10)。另外也报道了s6k在肿瘤中普遍高表达，从而期待s6k抑制表现出抗肿瘤效果。
近年来报道了对s6k具有选择性抑制活性的化合物，但在临床试验中，mtd用量也未能获得效果(非专利文献11)。
另外，作为具有akt、rsk、s6k抑制活性的哌嗪衍生物，报道了专利文献1、2记载的化合物，但其抗肿瘤效果均不理想。
因此，在癌症治疗领域中，仍然希望开发作为单一制剂能够发挥强力的抗肿瘤效果，且对大范围的癌症种类有效的丝氨酸/苏氨酸激酶抑制剂。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：国际公开第wo2005/117909号公报
专利文献2：国际公开第wo2010/056563号公报
非专利文献
非专利文献1：jcellsci.2005；118(pt24)：5675-8.
非专利文献2：currcancerdrugtargets.2008；8(1)：27-36.
非专利文献3：nature.2007；448(7152)：439-44.
非专利文献4:molcancerther.2005；4(6)：977-86.
非专利文献5:molcancerther.2010；9(7)：1956-67.
非专利文献6：cancerres.2008；68(7)：2366-74.
非专利文献7：biochemj.2012；441(2)：553-69.
非专利文献8:molcancerres.2014；12(5)：803-12.
非专利文献9:molcancerther.2016；15(11)：2598-2608.
非专利文献10：intjbiochemcellbiol.2011；43(1)：47-59.
非专利文献11：eurjcancer.2014；50(5)：867-75.
技术实现要素：
发明所要解决的问题
本发明所要解决的问题在于提供一种新型5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮衍生物；对选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种的抑制剂；用于治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种相关疾病的药物组合物，或者抗肿瘤剂。
解决问题的技术方案
本发明人等为了解决上述问题而反复进行了深入研究，结果发现以5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮为基本结构，其第4位经由哌嗪或哌啶而具有六元含氮不饱和杂环，且在该不饱和杂环具有特定取代基的化合物组，对选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种具有优异的抑制活性和/或癌细胞增殖抑制作用，以及/或者可用作治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种相关各种疾病(尤其是癌症)的药物，从而完成本发明。
本发明包含以下内容：
[1]一种由下述式(i)表示的化合物或其盐，
[化1]
式中，r1为可具有取代基，并具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式不饱和杂环基团；
r2为氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基或c3-c6环烷基；
r3、r4和r5相同或不同地为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基，或者r4和r5与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r3为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基；
r6为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基；
r7和r8相同或不同地为氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基或c3-c6环烷基，或者r7和r8与它们结合的碳原子一起形成c3-c10环烷基；
x1和x2相同或不同地为n或cr9，r9为氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基或c3-c6环烷基；
当虚线部
[2]根据[1]所述的化合物或其盐，其中，r1为可具有1～3个选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基，并具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式不饱和杂环基团。
[3]根据[1]或[2]所述的化合物或其盐，其中，r2为氢原子或卤素原子，r6为氢原子，r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基，x1为n或cr9，r9为氢原子或卤素原子，x2为n或ch。
[4]根据[1]～[3]中任一项所述的化合物或其盐，其中，r1为可具有1～3个选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基的呋喃基、噻吩基、噻唑基、噻二唑基、噁唑基、噁二唑基、吡啶基或吡唑基。
[5]根据[1]～[4]中任一项所述的化合物或其盐，其中，r3、r4和r5相同或不同地为氢原子或c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子或c1-c6烷基，或者r4和r5与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r3为氢原子或c1-c6烷基。
[6]根据[1]～[5]中任一项所述的化合物或其盐，其中，
r1为具有卤素原子或c1-c6烷氧基的吡啶基、具有c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基的吡唑基、具有c1-c6卤代烷基的噁二唑基，或者无取代的呋喃基，或者噻唑基，
r2、r5和r6为氢原子，
r3为氢原子，且r4为c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，
r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基，
x1和x2彼此不同地为n或ch，
当虚线部
[7]根据[6]所述的化合物或其盐，其中，r1为具有c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基的吡唑基，或者具有c1-c6卤代烷基的噁二唑基。
[8]根据[1]～[7]中任一项所述的化合物或其盐，其中，所述化合物选自于以下化合物组：
4-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮；
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮；以及
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮。
[9]一种akt抑制剂，其有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[10]一种rsk抑制剂，其有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[11]一种s6k抑制剂，其有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[12]一种针对选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种的抑制剂，其有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[13]一种针对akt、rsk和s6k的抑制剂，其有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[14]一种用于治疗akt相关疾病的药物组合物，其含有的有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[15]一种用于治疗rsk相关疾病的药物组合物，其含有的有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[16]一种用于治疗s6k相关疾病的药物组合物，其含有的有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[17]一种用于治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种相关疾病的药物组合物，其含有的有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[18]一种用于治疗akt、rsk和s6k相关疾病的药物组合物，其含有的有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[19]一种抗肿瘤剂，其有效成分为[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
本发明还包含以下内容：
[20-1]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于抑制akt。
[20-2]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于抑制rsk。
[20-3]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于抑制s6k。
[20-4]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于抑制选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种。
[20-5]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于抑制akt、rsk和s6k。
[21-1]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于治疗akt相关疾病。
[21-2]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于治疗rsk相关疾病。
[21-3]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于治疗s6k相关疾病。
[21-4]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种相关疾病。
[21-5]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于治疗akt、rsk和s6k相关疾病。
[22]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐，其用于治疗肿瘤。
[23-1]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于抑制akt。
[23-2]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于抑制rsk。
[23-3]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于抑制s6k。
[23-4]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于抑制选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种。
[23-5]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于抑制akt、rsk和s6k。
[24-1]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于治疗akt相关疾病。
[24-2]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于治疗rsk相关疾病。
[24-3]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于治疗s6k相关疾病。
[24-4]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种相关疾病。
[24-5]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于治疗akt、rsk和s6k相关疾病。
[25]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用于治疗肿瘤。
[26-1]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于抑制akt的药物。
[26-2]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于抑制rsk的药物。
[26-3]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于抑制s6k的药物。
[26-4]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于抑制选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种的药物。
[26-5]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于抑制akt、rsk和s6k的药物。
[27-1]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于治疗akt相关疾病的药物。
[27-2]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于治疗rsk相关疾病的药物。
[27-3]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于治疗s6k相关疾病的药物。
[27-4]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种相关疾病的药物。
[27-5]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于治疗akt、rsk和s6k相关疾病的药物。
[28]根据[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐的用途，其用以制造用于治疗肿瘤的药物。
[29-1]一种抑制akt的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[29-2]一种抑制rsk的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[29-3]一种抑制s6k的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[29-4]一种抑制选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[29-5]一种抑制akt、rsk和s6k的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[30-1]一种治疗akt相关疾病的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[30-2]一种治疗rsk相关疾病的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[30-3]一种治疗s6k相关疾病的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[30-4]一种治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种相关疾病的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[30-5]一种治疗akt、rsk和s6k相关疾病的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
[31]一种治疗肿瘤的方法，其包括：向有该需要的患者给予有效剂量的[1]～[8]中任一项所述的化合物或其盐。
本说明书包含了作为本申请的优先权基础的日本专利申请第2016-101599号的内容。
发明效果
根据本发明，可以提供一种新型5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮衍生物；对选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种的抑制剂；用于治疗选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种相关疾病的药物组合物，或者抗肿瘤剂。
在一个实施方式中，可知本发明化合物或其盐对选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种具有优异的抑制活性，且表现出对癌细胞株的增殖抑制效果。因此，本发明化合物或其盐可用作选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少一种相关疾病，例如癌症的预防和/或治疗剂。
具体实施方式
本发明由上述式(i)表示的化合物，其特征在于，以5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮为基本结构，其第4位经由哌嗪或哌啶而具有六元含氮不饱和杂环，且在该不饱和杂环具有特定取代基，该化合物是上述所有现有技术文献等均未记载的新型化合物。
本申请说明书中，作为“取代基”，例如可列举：卤素原子、羟基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c3-c10环烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基、c1-c6烷氧基、氨基、单或二烷基氨基、酰基、羧基、烷氧羰基、氨基甲酰基、具有1～4个选自n、s和o中的杂原子的四元至十元饱和杂环基团或四元至十元不饱和杂环基团、c6-c14芳香烃基等，当有上述取代基存在时，其个数为典型的1～3个。
本说明书中，作为“卤素原子”，具体可列举氯原子、溴原子、氟原子、碘原子，优选氯原子、氟原子，特别优选氟原子。
本说明书中，“c1-c6烷基”表示碳数1～6的直链状或支链状饱和烃基，具体可列举：甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基等，优选碳数1～4的直链状烷基或碳数3～4的支链状烷基，更优选甲基、异丙基、叔丁基。
本说明书中，“c2-c6烯基”表示含有至少一个碳-碳双键的碳数2～6的直链状或支链状烃基，具体可列举：乙烯基、烯丙基、甲基乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等，优选含有至少一个碳-碳双键的碳数2～4的直链状或支链状烃基。
本说明书中，“c2-c6炔基”表示含有至少一个碳-碳三键的碳数2～6的直链状或支链状烃基，具体可列举：乙炔基、2-丙炔基等，优选含有至少一个碳-碳三键的碳数2～4的直链状或支链状烃基。
本说明书中，“c1-c6卤代烷基”表示碳数1～6的直链状或支链状饱和烃基中1个至全部氢原子被上述卤素原子取代的基团，具体可列举：单氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、1-氟乙基、2-氟乙基、1,1-二氟乙基、1,2-二氟乙基、2,2-二氟乙基、2,2,2-三氟乙基等，优选碳数1～6的直链状或支链状饱和烃基中1～3个氢原子被上述卤素原子取代的基团，更优选二氟甲基、三氟甲基。
本说明书中，“c1-c6烷氧基”表示碳数1～6的直链状或支链状饱和烃基所结合的氧基，具体可列举：甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、正丁氧基、异丁氧基、叔丁氧基等，优选碳数1～4的直链状或支链状饱和烃基所结合的氧基，更优选甲氧基。
本说明书中，“c3-c10环烷基”表示碳数3～10的单环式或多环式饱和烃基，具体可列举：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基、十氢萘基(デカリル基)等，优选碳数3～6的单环式饱和烃基，更优选环丙基。
本说明书中，“四元至十元饱和杂环基团”表示四元至十元单环式或多环式完全饱和杂环基团，具体可列举：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、六亚甲基亚氨基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基、四氢呋喃基、四氢吡喃基等，优选具有1～4个选自n、s和o中的杂原子的四元至十元单环式或多环式完全饱和杂环基团。
本说明书中，“四元至六元单环式饱和杂环基团”表示四元至六元单环式完全饱和杂环基团，具体可列举：氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、六亚甲基亚氨基、吗啉基、硫代吗啉基等，优选具有1～4个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式完全饱和杂环基团，更优选具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的五元至六元单环式完全饱和杂环基团，特别优选吡咯烷基。
本说明书中，“四元至十元不饱和杂环基团”表示四元至十元单环式或多环式完全不饱和或部分饱和杂环基团，作为完全不饱和的不饱和杂环基团，具体可列举：吡咯基、咪唑环、吡唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吲哚基、异吲哚基、吲唑基、苯并咪唑基、苯并三唑基、氮杂吲哚基、吡咯并吡啶基、咪唑并吡啶基、吡唑并吡啶基、三唑并吡啶基、吡咯并嘧啶基、咪唑并嘧啶基、吡唑并嘧啶基、苯并呋喃基、苯并噁唑基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基、喹噁啉基等；作为部分饱和的不饱和杂环基团，具体可列举：二氢吲哚基、亚甲基二氧基苯基、亚乙基二氧基苯基、二氢苯并呋喃基等。优选具有1～4个选自n、s和o中的杂原子的四元至十元单环式或多环式完全不饱和或部分饱和杂环基团。
本说明书中，“四元至六元单环式不饱和杂环基团”表示四元至六元单环式完全不饱和或部分不饱和杂环基团，作为完全不饱和的不饱和杂环基团，具体可列举：吡咯基、咪唑环、吡唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、噁唑基、异噁唑基、噁二唑基、噻吩基、噻唑基、异噻唑基、噻二唑基、吡啶基、嘧啶基、哒嗪基等；作为部分不饱和的不饱和杂环基团，具体可列举：四二氢呋喃基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、四氢吡啶基、二氢噻喃基等。优选具有1～4个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式完全不饱和杂环基团，更优选具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的五元至六元单环式完全不饱和杂环基团，特别优选吡啶基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基。
本说明书中，“c6-c14芳香烃基”表示碳数6～14的单环式或多环式芳香烃基，具体可列举：苯基、萘基、四氢萘基、蒽基等。
式(i)中，r1为“可具有取代基，并具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式不饱和杂环基团”。
r1中，作为“具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式不饱和杂环基团”，可列举上述“四元至六元单环式不饱和杂环基团”，优选具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的五元至六元单环式完全不饱和杂环基团，更优选吡啶基、吡唑基、噻唑基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、呋喃基、噻吩基。
“具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式不饱和杂环基团”可以被取代，或者也可以未被取代。优选的取代基的个数为1～3个。此处，作为取代基，可列举上述“取代基”，可优选选自由卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基、c1-c6卤代烷基以及c3-c10环烷基所组成的组，可更优选选自由卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6烷氧基以及c1-c6卤代烷基所组成的组，进一步优选c1-c6烷基和/或c1-c6卤代烷基。
优选地，式(i)中，r1为可具有1～3个选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基，并具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式不饱和杂环基团。
更优选地，式(i)中，r1为可具有1～3个选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基的呋喃基、噻吩基、噻唑基、噻二唑基、噁唑基、噁二唑基、吡啶基或吡唑基。
进一步优选地，式(i)中，r1为具有1～3个选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基的吡啶基、吡唑基、噻唑基、噁二唑基或噻二唑基，或者为无取代的呋喃基、噻吩基、噻唑基或噁唑基。
进一步优选地，式(i)中，r1为具有卤素原子或c1-c6烷氧基的吡啶基、具有c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基的吡唑基、具有c1-c6卤代烷基的噁二唑基，或者无取代的呋喃基，或者噻唑基。
特别优选地，式(i)中，r1为具有c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基的吡唑基，或者具有c1-c6卤代烷基的噁二唑基。
式(i)中，r2为氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基或c3-c6环烷基。
优选地，式(i)中，r2为氢原子、卤素原子或c1-c6烷基，更优选氢原子或卤素原子，特别优选氢原子。
式(i)中，r3、r4和r5相同或不同地为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基，或者r4和r5与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r3为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基。
式(i)中，作为r3和r4表示的“与它们结合的氮原子一起形成具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式饱和杂环”，可列举上述“四元至六元单环式饱和杂环基团”，优选具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，特别优选吡咯烷基。
式(i)中，作为r4和r5表示的“与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1～3个选自n、s和o中的杂原子的四元至六元单环式饱和杂环”，可列举上述“四元至六元单环式饱和杂环基团”，优选具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，特别优选吡咯烷基。
优选地，式(i)中，r3、r4和r5相同或不同地为氢原子或c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子或c1-c6烷基，或者r4和r5与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r3为氢原子或c1-c6烷基。
特别优选地，式(i)中，r3和r5为氢原子，且r4为c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子。
式(i)中，r6为氢原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基或c3-c6环烷基。
优选地，式(i)中，r6为氢原子或c1-c6烷基，特别优选氢原子。
式(i)中，r7和r8相同或不同地为氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基或c3-c6环烷基，或者r7和r8与它们结合的碳原子一起形成c3-c10环烷基。
优选地，式(i)中，r7和r8相同或不同地为氢原子或c1-c6烷基。更优选地，式(i)中，r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基；特别优选地，r7为甲基，r8为氢原子或甲基。
式(i)中，x1和x2相同或不同地为n或cr9，r9为氢原子、卤素原子、羟基、氨基、氰基、硝基、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c2-c6烯基、c2-c6炔基或c3-c6环烷基。其中，x1和x2中的至少一个为n。
优选地，式(i)中，x1为n或cr9，r9为氢原子、卤素原子或c1-c6烷基，x2为n或ch(其中，x1和x2中的至少一个为n)。更优选地，x1为n，且x2为ch，或者x1为cr9，r9为氢原子或卤素原子，且x2为n。更优选地，x1和x2彼此不同地为n或ch。特别优选地，x1为n，x2为ch。
式(i)中，当虚线部
作为本发明的化合物，优选以下化合物：式(i)中，r1可具有选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基1～3个，并具有选自n、s和o中的杂原子1～3个的四元至六元单环式不饱和杂环基团，
r2为氢原子或卤素原子，
r3、r4和r5相同或不同地为氢原子或c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子或c1-c6烷基，或者r4和r5与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，r3为氢原子或c1-c6烷基，或者r3和r5为氢原子，且r4为c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子，
r6为氢原子，
r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基，
x1和x2彼此不同地为n或ch，
虚线部
更优选以下化合物：r1为可具有1～3个选自卤素原子、c1-c6烷基、c1-c6卤代烷基、c1-c6烷氧基和c3-c10环烷基中的取代基的呋喃基、噻吩基、噻唑基、噻二唑基、噁唑基、噁二唑基、吡啶基或吡唑基。
r2和r6为氢原子，
r3、r4和r5相同或不同地为氢原子或c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子或c1-c6烷基，或者r4和r5与它们结合的氮原子和相邻的碳原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，r3为氢原子或c1-c6烷基，或者r3和r5为氢原子，且r4为c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，且r5为氢原子，
r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基，
x1和x2彼此不同地为n或ch，
虚线部
更优选以下化合物：式(i)中，r1为具有卤素原子或c1-c6烷氧基的吡啶基、具有c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基的吡唑基、具有c1-c6卤代烷基的噁二唑基，或者无取代的呋喃基，或者噻唑基，
r2、r5和r6为氢原子，
r3为氢原子，且r4为c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，
r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基，
x1和x2彼此不同地为n或ch，
虚线部
更优选以下化合物：r1为具有c1-c6烷基和c1-c6卤代烷基的吡唑基，或者具有c1-c6卤代烷基的噁二唑基，
r2、r5和r6为氢原子，
r3为氢原子，且r4为c1-c6烷基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成具有1个氮原子的四元至六元单环式饱和杂环，
r7为c1-c6烷基，r8为氢原子或c1-c6烷基，
x1和x2彼此不同地为n或ch，
虚线部
进一步优选以下化合物：r1为具有甲基和三氟甲基的吡唑基，或者具有二氟甲基的噁二唑基，
r2、r5和r6为氢原子，
r3为氢原子，且r4为异丙基或叔丁基，或者r3和r4与它们结合的氮原子一起形成吡咯烷基，
r7为甲基，r8为氢原子或甲基，
x1和x2彼此不同地为n或ch，
虚线部
作为本发明的具体化合物，可例举出通过以下实施例制造的化合物，但并不限于此。
作为本发明优选的化合物，可例举出以下化合物：
4-(4-(5-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1))；
4-(4-(2’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,4’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(13))；
4-(4-(6-(呋喃-3-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物14)；
4-(4-(5-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-5’-甲氧基-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(15))；
5-甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(噻唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(24))；
4-(5-氟-5’-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-5”,6”-二氢-[3,2’：6’,4”-三联吡啶]-1”(2”h)-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(26))；
5-甲基-4-(4-(5-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-2-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(27))；
4-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(30))；
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(32))；
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(41))；以及
5,5-二甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(44))。
作为本发明更优选的化合物，可例举出以下化合物：
4-(4-(5-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1))；
4-(4-(2’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,4’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(13))；
4-(4-(6-(呋喃-3-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物14)；
4-(4-(5-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-5’-甲氧基-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(15))；
4-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(30))；
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(32))；
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(41))；以及
5,5-二甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(44))。
作为本发明特别优选的化合物，从口服吸收性和herg试验(心脏毒性)的观点出发，可例举出以下化合物：
4-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(30))；
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(32))；以及
4-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(41))。
下面，对本发明的化合物的制法进行说明。
本发明由式(i)表示的化合物例如可通过以下制法或实施例所示的方法等制造。但是，本发明由式(i)表示的化合物的制法并不限于这些反应例。各步骤得到的生成物可利用已知的分离纯化方法进行分离纯化，例如浓缩、减压浓缩、结晶化、溶剂提取、再沉淀、层析法等，或者无需进行分离纯化，直接供于下一步骤。
[化2]
制法1
[式中，r9表示氢原子或pg1。r7和r8与上述同义。当虚线部
[化3]
(式中，x1、x2、r2与上述同义。r1a为氢原子、卤素基、氰基、co2r11，或与r1同义。r12为氨基、2-羟乙基，或者由式(vii)表示的取代基：
[化4]
(式中，r3、r4、r5和r6与上述同义))；
r11为氢原子或可取代的低级烷基(也可以与2个r11结合的氧原子一起形成环(环上也可以有取代基))。pg1和pg2表示保护基。]
(步骤1)本步骤是使用碱和烷基化剂来处理由式(ii)表示的化合物，并通过烷基化反应来制造由式(iii)表示的化合物的步骤。
本步骤中使用的碱，例如可列举：三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、4-二甲基氨基吡啶、叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅烷重氮钠、六甲基二硅基胺基钾、二异丙基氨基锂、丁基锂等有机碱，或者碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢化钠等无机碱。
本步骤中使用的烷基化剂只要能引入r7和r8就没有特别限制，可例举：碘甲烷、碘乙烷、1,2-二溴乙烷、1,3-二溴丙烷、1,4-二溴丁烷等。
本步骤中，作为催化剂，可使用溴化铜(i)等。
本步骤中，相对于1摩尔由式(ii)表示的化合物，通常予以使用的碱为0.5摩尔到5摩尔，优选1到2摩尔，烷基化剂为0.5摩尔到5摩尔，优选1到3摩尔。
反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选异丙醇、叔丁醇、甲苯、苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。
反应温度通常为-78℃至溶剂的回流温度，优选0℃至室温。
反应时间通常为10分钟至24小时，优选10分钟至1小时。
(步骤2)本步骤是通过由式(iii)表示的化合物与由式(iv)表示的化合物的snar反应来制造由式(v)表示的化合物的步骤。
pg1和pg2只要是常用的氨基保护基，则没有特别限制，作为pg1，优选2,4,6-三甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基或4-甲氧基苄基；作为pg2，优选叔丁氧羰基、苄氧羰基或4-甲氧基苄基。
本步骤中，相对于1摩尔由式(iii)表示的化合物，通常予以使用的由式(iv)表示的化合物为0.5摩尔到5摩尔，优选1到2摩尔。
本步骤中使用的碱，例如可列举：三乙胺、二异丙基乙胺、吡啶、二甲基吡啶、三甲基吡啶、4-二甲基氨基吡啶、叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅烷重氮钠、六甲基二硅基胺基钾、丁基锂等有机碱，或者碳酸氢钠、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢化钠、磷酸钠、磷酸钾等无机碱。
反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选异丙醇、叔丁醇、甲苯、苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。
反应温度通常为0℃至200℃，优选80℃至180℃。
反应时间通常为10分钟至3天，优选1小时至10小时。
[化5]
制法2
[式中，r1a、r2、r7、r8、r9、r12、x1、x2和x3与上述同义。当虚线部
(步骤3)本步骤是通过由式(viii)表示的化合物与由式(ix)表示的化合物的交叉耦合反应来制造由式(x)表示的化合物的步骤。
本步骤例如可应用已知的铃木耦合反应、根岸反应、布赫瓦尔德和哈特维希等人报告的在钯催化剂存在下由芳基卤化物和胺类合成芳香胺的方法等。
本反应例如可通过在钯催化剂的存在下或不存在下，在适当的溶剂中，在20℃至200℃的范围内加热来进行。
作为可以使用的钯催化剂，例如可列举：乙酸钯、氯化钯、四(三苯基膦)钯、二氯二(三苯基膦)钯、二氯[1,1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯、二氯二乙腈钯、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)。
相对于1摩尔由式(viii)表示的化合物，可以使用的钯催化剂的量在0.001～1摩尔范围内为宜。
如有需要，作为钯的配体，可以使用：1-1’-双(二苯基膦)二茂铁、4,5-双(二苯基膦)-9,9’-二甲基氧杂蒽、2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基联苯、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯、2-二-叔丁基膦基-3,4,5,6-四甲基-2’,4’,6’-三异丙基联苯等。
作为可以使用的反应溶剂，只要不参与反应就没有特别限制，例如可列举：四氢呋喃、1,4-二噁烷等醚类；甲醇、乙醇等醇类；n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基-2-吡咯烷酮等酰胺类；苯、甲苯等烃类；乙腈、二甲基亚砜、水，或者它们的混合溶剂。
本步骤中，作为碱，例如可以使用：叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅烷重氮钠、六甲基二硅基胺基钾、丁基锂等有机碱，或者碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、磷酸钠、磷酸钾等无机碱。
反应时间因使用原料的种类、反应温度而异，通常在30分钟～24小时的范围内为宜。
[化6]
制法3
[式中，r2、r12、x1和x2与上述同义。r1b为氢原子、氰基、co2r11，或与r1同义。r13为pg2，或为由式(xiii)表示的取代基：
[化7]
(式中，r7、r8和r9与上述同义)；
pg2与上述同义。]
(步骤4)本步骤是将由式(xi)表示的化合物还原来制造由式(xii)表示的化合物的步骤。
本步骤例如可在乙腈、乙酸乙酯、thf、甲醇、乙醇、dmf、dma、nmp等不妨碍反应的适当溶剂中，使用氢、甲酸、甲酸铵、环己二烯等氢源，将钯/碳、氢氧化钯/碳等作为催化剂来进行。本步骤中，相对于1摩尔由式(xi)表示的化合物，通常予以使用的催化剂为0.01摩尔到5摩尔，优选0.05到1摩尔。反应温度通常为室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为1小时至24小时。
[化8]
制法4
[式中，r1b、r2、r12、r13、x1、x2和x3与上述同义。r1c表示卤素基。]
(步骤5)本步骤是将由式(xiv)表示的化合物卤化来制造由式(xv)表示的化合物的步骤。
本步骤可以使用n-氯代琥珀酰亚胺、n-溴代琥珀酰亚胺、n-碘代琥珀酰亚胺、溴和碘等进行。作为溶剂，只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如可在乙腈、乙酸乙酯、thf、甲醇、乙醇、dmf、dma、nmp等不妨碍反应的适当溶剂中进行。反应温度通常为0℃至100℃，优选室温至回流温度。反应时间通常为10分钟至3天，优选30分钟至24小时。
(步骤6)本步骤是通过由式(xv)表示的化合物与氰化钠、氰化钾等的氰化反应，或者与有机硼试剂、有机锡试剂、有机锌试剂等的交叉耦合反应，或者通过插入一氧化碳的酯合成反应，由此制造由式(xvi)表示的化合物的步骤。本反应例如可通过在钯催化剂的存在下或不存在下，在适当的溶剂中，在20℃至200℃的范围内加热来进行。作为可以使用的钯催化剂，例如可列举：乙酸钯、氯化钯、四(三苯基膦)钯、二氯二(三苯基膦)钯、二氯[1,1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯、二氯二乙腈钯、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)。对于1摩尔由式(xv)表示的化合物，可以使用的钯催化剂的量在0.001～1摩尔范围内为宜。如有需要，作为钯的配体，可以使用：1-1’-双(二苯基膦)二茂铁、4,5-双(二苯基膦)-9,9’-二甲基氧杂蒽、2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基联苯、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯、2-二-叔丁基膦基-3,4,5,6-四甲基-2’,4’,6’-三异丙基联苯等。
本步骤中，作为碱，例如可以使用：叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅烷重氮钠、六甲基二硅基胺基钾、丁基锂等有机碱，或者碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、磷酸钠、磷酸钾等无机碱。
作为可以使用的反应溶剂，只要不参与反应就没有特别限制，例如可列举：四氢呋喃、1,4-二噁烷等醚类；甲醇、乙醇等醇类；n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基-2-吡咯烷酮等酰胺类；苯、甲苯等烃类；乙腈、二甲基亚砜、水，或者它们的混合溶剂。反应时间因使用原料的种类、反应温度而异，通常在30分钟～24小时的范围内为宜。
[化9]
制法5
[式中，r2、r12、r13、x1、x2和x3与上述同义。r14为氢原子、可被取代的烷基，或者可被取代的环烷基。]
(步骤7)本步骤是通过由式(xvii)表示的化合物与羟基胺的反应来制造由式(xviii)表示的化合物的步骤。羟基胺可作为水溶液或与盐酸等的盐以及适当地与碱同时使用。作为碱，可例举：三乙胺、二异丙基乙胺等有机碱，或者碳酸钠、磷酸钾等无机碱。反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选甲醇、乙醇、丙醇、异丙醇、叔丁醇、甲苯、苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选10分钟至1小时。
(步骤8)本步骤是从由式(xviii)表示的化合物通过酰化和环化反应来制造由式(xix)表示的化合物的步骤。作为酰化剂，可使用：具有r14的羧酸酐、混合酸酐、酰氯或羧酸。后续的环化反应，可以通过使用过量的上述酰化剂，或者通过使用三苯基膦-四溴化碳、磷酰氯、丙基膦酸酐(环状三聚体)或二环己基碳化二亚胺等脱水缩合剂来进行。反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选甲苯、苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选10分钟至1小时。
(步骤9)本步骤是从由式(xix)表示的化合物通过异构化反应来制造由式(xx)表示的化合物的步骤。本步骤例如可通过在甲苯、苯、二氯甲烷、三氯甲烷、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮等或它们的混合溶剂等反应溶剂中与羟基胺反应来进行。反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选10分钟至1小时。
[化10]
制法6
[式中，r2、r11、r12、r14、x1和x2与上述同义。x4表示氧原子或硫原子。r15为氢原子、卤素基或由式(xxiv)表示的取代基：
[化11]
(式中，x3和r13与上述同义)]
(步骤10)本步骤是从由式(xxi)表示的化合物与肼来制造由式(xxii)表示的化合物的步骤。肼可以作为水合物或与盐酸等的盐来使用。当使用羧酸作为原料时，作为活化剂，可以使用羰基二咪唑、磷酰氯、丙基膦酸酐(环状三聚体)或二环己基碳化二亚胺等脱水缩合剂。反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选乙醇、丙醇、甲苯、苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选30分钟至12小时。
(步骤11)本步骤是将由式(xxii)表示的化合物酰化和通过环化反应来制造由式(xxiii)表示的化合物的步骤。本步骤可与步骤8同样地进行。
[化12]
制造例7
(式中，r1a、r2、r3、r4、r5、r6、r15、x1和x2与上述同义。r16表示卤素基，或甲苯磺酰基、甲磺酰基，或三氟甲磺酰基等离去基团。r17表示卤素基)
(步骤12)本步骤是将由式(xxv)表示的化合物的硝基还原，来制造由式(xxvi)表示的化合物的步骤。本步骤可以通过使用钯碳等催化剂的氢化反应、将铁、锌等金属和氯化锡(ii)用作还原剂的反应来进行。反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选甲醇、乙醇、丙醇、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选30分钟至12小时。
(步骤13)本步骤是通过由式(xxvi)表示的化合物与醛或其等价物的还原性氨基化反应来制造由式(xxvii)表示的化合物的步骤。作为本步骤所使用的醛或其等价物，可以使用：1,4-二氧六环-2,5-二元醇、2-羟基乙醛等。作为还原剂，可以使用：硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠等。反应溶剂只要不妨碍反应，就没有特别限制，例如优选甲醇、乙醇、丙醇、甲苯、苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选30分钟至12小时。
(步骤14)本步骤是将由式(xxvii)表示的化合物的羟基转化为卤素基、甲磺酰基等离去基团来制造由式(xxviii)表示的化合物的步骤。作为磺酰酯化的条件，可例举使用甲磺酰氯、甲苯磺酰氯等和适当的碱的条件。作为用于卤化的条件，可例举：使用四氯化碳、四溴化碳或碘等卤化剂和三苯基膦等条件；或者通过卤化锂等处理上述磺酰酯，将其转化为卤素基的条件。
另外，由式(xxviii)表示的化合物也可以从由式(xxvi)表示的化合物直接通过还原性氨基化等来合成。此时，作为醛，可以使用2-氯乙醛或2-溴乙醛等，与步骤13同样地合成。
(步骤15)本步骤是通过由式(xxviii)表示的化合物与由hnr3r4表示的胺的反应来制造由式(xxix)表示的化合物的步骤。本步骤可以通过使用过量的由hnr3r4表示的胺，或者在适当的碱的存在下，作用于由hnr3r4表示的胺反应来进行。本步骤无需使用溶剂即可进行，而当使用溶剂时，例如优选乙醇、丙醇、甲苯、苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选30分钟至12小时。
(步骤16)本步骤是通过由式(xxx)表示的化合物与由式(xxxi)表示的胺的反应来制造由式(xxix)表示的化合物的步骤：
[化13]
(式中，r3、r4、r5和r6与上述同义)。本步骤可以通过使用过量的由式(xxxi)表示的胺，或使用由式(xxxi)表示的胺和适当的碱来进行。另外，本反应中可以使用钯或铜等催化剂。作为可以使用的钯催化剂，例如可列举：乙酸钯、氯化钯、四(三苯基膦)钯、二氯二(三苯基膦)钯、二氯[1,1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯、二氯二乙腈钯、三(二亚苄基丙酮)二钯(0)等。
对于1摩尔由式(xxx)表示的化合物，可以使用的钯催化剂的量在0.001～1摩尔范围内为宜。
如有需要，作为钯的配体，可以使用：1-1’-双(二苯基膦)二茂铁、4,5-双(二苯基膦)-9,9’-二甲基氧杂蒽、2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基联苯、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯、2-二-叔丁基膦基-3,4,5,6-四甲基-2’,4’,6’-三异丙基联苯等。
本步骤中，作为碱，例如可以使用：三乙胺、二异丙基乙胺、叔丁酸钾、叔丁酸钠、甲醇钠、乙醇钠、六甲基二硅基胺基锂、六甲基二硅烷重氮钠、六甲基二硅基胺基钾等有机碱，或者碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、磷酸钠、磷酸钾等无机碱。作为反应溶剂，优选乙醇、丙醇、甲苯、苯、四氢呋喃、1,4-二氧六环、n,n-二甲基甲酰胺、n,n-二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮、二甲基亚砜等，或它们的混合溶剂等。反应温度通常为0℃至溶剂的回流温度，优选室温至溶剂的回流温度。反应时间通常为10分钟至24小时，优选30分钟至12小时。
(步骤17)本步骤是通过由式(xxx)表示的化合物与由式(xxxii)表示的胺的反应来制造由式(xxvii)表示的化合物的步骤：
[化14]
(式中，r5和r6与上述同义。r18表示保护基或氢原子)。本步骤可与(步骤16)同样地进行。
本发明化合物或其盐可以是非晶或结晶，无论是单一晶型还是多晶型混合物，均包含在本发明化合物或其盐中。结晶可以通过应用已知的结晶方法进行结晶来制造。本发明化合物或其盐无论是溶剂化物(例如水合物等)还是无溶剂化物，均包含在本发明化合物或其盐中。用同位素(例如3h、14c、35s、125i等)等标记的化合物也包含在本发明化合物或其盐中。
本发明化合物的盐是指药学上可接受的盐。
本发明化合物或其盐中也包括其前药。前药是在生物体内的生理条件下通过酶和胃酸等的反应而转化为本发明化合物或其盐的化合物，即发生酶促氧化、还原、水解等而变成本发明化合物或其盐的化合物、由于胃酸等而发生水解等变成本发明化合物或其盐的化合物。另外，也可以为在日本广川书店1990年出版的《药物开发》第7卷分子设计第163～198页记载的生理条件下变成本发明化合物或其盐的化合物。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐具有优异的akt抑制活性。本说明书中，“akt”包括人或非人哺乳动物的akt，优选人akt。另外，“akt”中包括多种亚型，例如，当akt为人akt时，包括akt1、akt2和akt3。在一个实施方式中，本发明化合物或其盐对这些亚型中的至少一种，优选两种以上，更优选三种以上，进一步优选全部亚型具有抑制活性。具体而言，优选akt1或akt2，更优选akt1。本发明化合物对akt的抑制活性，可通过本领域已知的一般方法进行测定(biochem.j.vol.385，pp399-408(2005)和cancerres.vol.68，pp2366-2374(2008))。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐具有优异的rsk抑制活性。本说明书中，“rsk”包括人或非人哺乳动物的rsk，优选人rsk。另外，“rsk”中包括多种亚型，例如，当rsk为人rsk时，包括rsk1(rps6ka1)、rsk2(rps6ka3)、rsk3(rps6ka2)、rsk4(rps6ka6)。在一个实施方式中，本发明化合物或其盐对这些亚型中的至少一种，优选两种以上，更优选三种以上，进一步优选全部亚型具有抑制活性。具体而言，优选rsk1。本发明化合物对rsk的抑制活性，可通过本领域已知的一般方法进行测定(biol.pharm.bull.vol.39.pp547-555(2016))。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐具有优异的s6k抑制活性。本说明书中，“s6k”包括人或非人哺乳动物的s6k，优选人s6k。另外，“s6k”中包括多种亚型，例如，当s6k为人s6k时，包括s6k1(rps6kb1)、s6k2(rps6kb2)。在一个实施方式中，本发明化合物或其盐对这些亚型中的至少一种，优选全部亚型具有抑制活性。具体而言，优选s6k1。本发明化合物对s6k的抑制活性，可通过本领域已知的一般方法进行测定(j.biol.chem.vol.285.pp4587-4594(2010))。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐通过其优异的akt抑制活性，可用作用于预防和治疗akt相关疾病的药物。关于“akt相关疾病”，列举有通过缺失、抑制和/或阻碍akt的功能来降低发病率，缓解、缓和和/或治愈症状的疾病。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐通过其优异的rsk抑制活性，可用作用于预防和治疗rsk相关疾病的药物。关于“rsk相关疾病”，列举有通过缺失、抑制和/或阻碍rsk的功能来降低发病率，缓解、缓和和/或治愈症状的疾病。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐通过其优异的s6k抑制活性，可用作用于预防和治疗s6k相关疾病的药物。关于“s6k相关疾病”，列举有通过缺失、抑制和/或阻碍s6k的功能来降低发病率，缓解、缓和和/或治愈症状的疾病。
作为“akt相关疾病”、“rsk相关疾病”或“s6k相关疾病”，例如列举有癌症、自身免疫疾病、巨球蛋白血症等，但并不限于此。作为本发明对象的肿瘤没有特别限制，例如列举有：头颈癌、胃肠道癌(食道癌、胃癌、十二指肠癌、肝癌、胆道癌(胆囊与胆管癌等)、胰腺癌、大肠癌(结肠直肠癌、结肠癌、直肠癌等)等))、肺癌(非小细胞肺癌、小细胞肺癌、间皮瘤等)、乳腺癌、生殖器官癌(卵巢癌、子宫癌(宫颈癌、宫体癌等)等)、泌尿系统肿瘤(肾癌、膀胱癌、前列腺癌、睾丸肿瘤等)、造血系统肿瘤(白血病、恶性淋巴瘤、多发性骨髓瘤等)、骨与软组织肿瘤、皮肤癌、脑肿瘤等。作为本发明对象的肿瘤，优选胃肠道癌和生殖器官癌，更优选大肠癌和宫体癌。
在一个实施方式中，本发明化合物或其盐同时抑制选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种。例如，本发明化合物或其盐同时抑制akt和rsk。例如，本发明化合物或其盐同时抑制akt和s6k。例如，本发明化合物或其盐同时抑制rsk和s6k。例如，本发明化合物或其盐同时抑制akt、rsk和s6k。利用单一化合物同时抑制选自由akt、rsk和s6k所组成的组中的至少两种，由此与利用多种化合物同时抑制这些激酶的情况相比，有望降低副作用且获得协同的治疗效果。
在将本发明化合物或其盐用作药物时，可根据需要配入药学载体，根据预防或治疗目的采用各种给药剂型，作为该剂型，例如可以为口服剂、注射剂、栓剂、软膏剂、吸入剂、贴剂等中的任一剂型，优选采用口服剂。这些给药剂型可由本领域技术人员通过已知的常用制剂方法来制造。
作为药学上可接受的载体，使用常用的各种有机或无机载体物质作为制剂材料，可配入作为固形制剂中的赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、液状制剂中的溶剂、助溶剂、悬浮剂、等渗剂、缓冲剂、舒缓剂等。另外，根据需要也可使用防腐剂、抗氧化剂、着色剂、甜味剂、稳定剂等制剂添加物。
当制备口服用固形制剂时，可以在向本发明化合物中添加赋形剂且根据需要添加粘合剂、崩解剂、润滑剂、着色剂、矫味矫臭剂等之后，通过常规方法制造片剂、包衣片剂、颗粒剂、散剂、胶囊剂等。
当制备注射剂时，可以在向本发明化合物中添加ph调节剂、缓冲剂、稳定剂、等渗剂、局部麻醉剂等，通过常规方法制造皮下、肌肉和静脉用注射剂。
上述各给药剂量单位剂型中应配入的本发明化合物的量，根据应用其的患者症状或根据其剂型等而非固定，一般而言，在每给药剂量单位剂型中，口服剂中优选约0.05～1000mg，注射剂中优选约0.01～500mg，栓剂中优选约1～1000mg。
另外，具有上述给药剂型的药剂每天的给药量，根据患者的症状、体重、年龄、性别等而异，无法一概而论，作为本发明化合物，普通成年人(体重50kg)每天约0.05～5000mg，优选0.1～1000mg即可，优选将其分为每天1次或2～3次左右给药。
实施例
下面，通过实施例和试验例对本发明进行更加详细的说明，但本发明并不限于这些实施例。
实施例中所使用的各种试剂，如无特别记载，则使用市售品。硅胶柱色谱法和碱性硅胶柱色谱法使用昭光科技公司或拜泰齐公司生产的预装柱。nmr谱使用al400(400mhz；日本电子(jeol))或mercury400(400mhz；varian)型分光仪，氘代溶剂中含有四甲基硅烷时使用四甲基硅烷作为内标，除此以外的情况则使用nmr溶剂作为内标进行测定，全部δ值以ppm表示。使用拜泰齐公司生产的initiator(注册商标)进行微波反应。
另外，lcms谱是使用waters公司生产的sqd并按照以下条件测定的。
柱：acquitybehc18，2.1×50mm，1.7μm
ms检测：esipositive
uv检测：254nm和210nm
柱流速：0.5ml/分钟
流动相：水/乙腈(0.1％甲酸)
注入量：1μl
梯度
缩写的含义如下所示。
s：单峰
d：双峰
t：三重峰
q：四重峰
dd：双二重峰
dt：双三重峰
ddd：双双二重峰
m：多重峰
br：宽峰
dmso-d6：氘代二甲基亚砜
cdcl3：氘代氯仿
thf：四氢呋喃
dmf：n,n-二甲基甲酰胺
dmso：二甲基亚砜
dipea：n,n-二异丙基乙胺
hatu：2-(7-偶氮苯并三氮唑)-n,n,n',n'-四甲基脲六氟磷酸酯
nbs：n-溴代琥珀酰亚胺
tfa：三氟乙酸
参考例14-氯-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(参考例(1))
向4-氯-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(6g)、thf(93.8ml)、叔丁醇钾(6.32g)的混合物中缓慢滴入碘甲烷(3.51ml)，然后在室温下搅拌2小时。向反应混合物中加入饱和氯化铵水溶液之后，用三氯甲烷提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，从而得到上述标题的参考例(1)，为白色固体。
参考例24-氯-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(参考例(2))
步骤1：按照pierik，antonioj.；ciceri，daniele；broeker，gerd；edwards，christopherh.；mcfarlane，william；winter，joachim；buckel，wolfgang；golding，bernardt.；journaloftheamericanchemicalsociety，124(47)，14039-14048；2002.中记载的方法，将合成的丙烷-1,1,2-三羧酸三乙酯(3.0g)、甲醇(7.0ml)、甲醇钠(25％，甲醇溶液，0.050ml)的混合物在室温下搅拌3小时。将反应混合物减压浓缩后，加入甲醇钠(25％，甲醇溶液，5.3g)、甲醇(2ml)、甲脒乙酸盐(1.3g)，在室温下搅拌15小时。向反应混合物中加入氯化氢(5％-10％，甲醇溶液，19ml)，在0℃下搅拌15分钟。过滤收集所产生的固体，用甲醇洗涤后进行减压干燥，得到2-(4,6-二羟基嘧啶-5-基)丙酸甲酯(参考例(2-1))，为白色固体。
步骤2：将参考例(2-1)(1.2g)、三氯氧磷(3.5ml)、n,n-二乙基苯胺(4.0ml)的混合物在130℃下搅拌3小时。将得到的混合物冷却至室温后，用甲苯(40ml)稀释，注入到冰水中。分离有机层后，用无水硫酸钠干燥并过滤，然后浓缩。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到2-(4,6-二氯嘧啶-5-基)丙酸甲酯(参考例(2-2))，为褐色固体。
步骤3：将参考例(2-2)(0.50g)、2,4-二甲氧基苯甲胺(0.35ml)、dipea(0.44ml)、dmf(5ml)的混合物在60℃下搅拌2.5小时。将反应混合物冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释，依次用水、1n盐酸、水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣溶于甲苯(10ml)中，加入对甲苯磺酸水合物(20mg)，加热回流2.5小时。将反应混合物冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和碳酸氢钠水溶液洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩。向得到的残渣中加入乙酸乙酯，在室温下搅拌。过滤收集所产生的固体，从而得到上述标题的参考例(2)，为白色固体。
参考例37-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2h)-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(参考例(3))
将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2h)-羧酸叔丁酯(1.0g)溶于二氯甲烷(2.0ml)、tfa(2.0ml)中，在室温下搅拌15分钟。浓缩反应混合物并干燥，向得到的残渣中加入参考例(2)(1.1g)、dmso(7.0ml)和dipea(2.3ml)，在微波照射下，120℃下搅拌4小时。冷却至室温后，加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，从而得到上述标题的参考例(3)，为白色非晶态物质。
参考例47-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(4-碘哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(参考例(4))
步骤1：将参考例(1)(6.22g)、dipea(6.23ml)、4-羟基哌啶(1.99g)和dmso(24ml)的混合物在微波照射下，130℃下搅拌3小时。将反应混合物用乙酸乙酯稀释后，用水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到7-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(4-羟基哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(参考例(4-1))，为黄色固体。
步骤2：在0℃下，向参考例(4-1)(7.14g)、thf(89.4ml)的混合物中加入碘(6.81g)、三苯基膦(7.04g)、咪唑(1.83g)，升温至室温，搅拌1小时。向反应混合物中加入饱和硫代硫酸钠水溶液，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化后，用甲醇(80ml)重结晶。过滤收集所得到的固体并干燥，从而得到上述标题的参考例(4)，为白色粉末。
参考例55,5-二甲基-4-(4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼戊环-2-基)-5,6-二氢吡啶-1(2h)-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(参考例(5))
将4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(2.25g)、氯化氢(1,4-二氧六环溶液，4m，6ml)、三氯甲烷(3ml)的混合物在室温下搅拌3小时。浓缩反应混合物，向得到的残渣中加入按照shepherd，timothyalan；dally，robertdean；joseph，sajan；us20100120801a1.中记载的方法合成的4-氯-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(1.31g)、dipea(4.62ml)和dmso(10ml)，将该混合物在140℃下搅拌过夜。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，从而得到上述标题的参考例(5)，为淡黄色非晶态物质。
实施例14-(4-(5-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1))
步骤1：将3-氨基-2-溴吡啶4.0g、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(9.0g)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁-钯(ii)二氯化物-二氯甲烷络合物(1.9g)、1,4-二氧六环(25ml)和碳酸钠水溶液(2m，15ml)的混合物在100℃下搅拌3小时。冷却至室温后，用水稀释，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到3-氨基-5’,6’-二氢-[2,4’-联吡啶]-1’(2’h)-羧酸叔丁酯(化合物(1-1))，为褐色油状物质。
步骤2：将化合物(1-1)(9.0g)、乙酸乙酯(80ml)、10％钯碳(2.5g)的混合物在氢气气氛下，室温下搅拌14小时。氮气置换后，过滤反应混合物。浓缩滤液，得到4-(3-氨基吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(1-2))，为褐色非晶态。
步骤3：在搅拌下，向化合物(1-2)(7.5g)、thf(60ml)和乙醇醛二聚体(4.2g)的混合物中加入0.5m氰基硼氢化钠/0.25m氯化锌的甲醇溶液(30ml)。将反应混合物在室温下搅拌16小时后，加入水、28％氨水溶液，搅拌后，减压蒸馏除去有机溶剂。得到的混合物用三氯甲烷提取，用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(3-((2-羟乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(1-3))，为淡黄色固体。
步骤4：向化合物(1-3)(5.5g)和thf(100ml)的混合物中加入nbs(3.2g)，在室温下搅拌90分钟。向得到的混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液和饱和亚硫酸钠水溶液之后，用三氯甲烷提取。分离有机层后，用无水硫酸钠干燥并过滤，然后浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6-溴-3-((2-羟乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(1-4))，为褐色固体。
步骤5：将化合物(1-4)(6.9g)溶于tfa(20ml)中，在室温下搅拌30分钟。浓缩反应混合物后，向残渣中加入氨甲醇溶液(7m，10ml)，在室温下搅拌。向反应混合物中加入盐水，用三氯甲烷/乙醇的混合溶剂(4:1)提取。分离有机层后，用无水硫酸钠干燥，然后过滤。浓缩滤液，得到2-((6-溴-2-(哌啶-4-基)吡啶-3-基)氨基)乙醇(化合物(1-5))，为褐色非晶态物质。
步骤6：将化合物(1-5)(5.1g)、参考例(1)(6.6g)、dmso(34ml)、dipea(30ml)的混合物在150℃下搅拌16小时。冷却后，加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到4-(4-(6-溴-3-((2-羟乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1-6))，为褐色固体。
步骤7：在冰冷下，向化合物(1-6)(11g)、三苯基膦(6.1g)、thf(90ml)的混合物中加入四溴化碳(7.8g)。将得到的混合物在室温下搅拌30分钟后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯提取。依次用水、饱和盐水洗涤有机层，然后用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶物之后，浓缩滤液。得到的残渣用三氯甲烷(8ml)、甲醇(110ml)的混合溶液重结晶。将得到的残渣过滤并干燥，得到4-(4-(6-溴-3-((2-溴乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1-7))，为白色固体。
步骤8：将化合物(1-7)(0.85g)、thf(3ml)、叔丁胺(0.66ml)的混合物在75℃下搅拌过夜。浓缩反应混合物后，将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(4-(6-溴-3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1-8))，为白色固体。
步骤9：将化合物(1-8)(0.15g)、3-氟吡啶-5-硼酸(0.050g)、1,4-二氧六环(3.5ml)、碳酸钠水溶液(2m，0.40ml)、氯(2-二环己基膦基-2’,4’,6’-三异丙基-1,1’-联苯)[2-(2’-氨基-1,1’-联苯)]钯(ii)(0.020g)的混合物在100℃下搅拌2小时后，冷却，用乙酸乙酯稀释。依次用水、饱和盐水洗涤混合物，然后用无水硫酸钠干燥有机层。过滤除去不溶物之后，浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(4-(5-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(1-9))，为白色固体。
步骤10：将化合物(1-9)(0.050g)、苯甲醚(0.2ml)、tfa(2ml)的混合物在微波照射下，140℃下搅拌1小时。浓缩反应混合物后，将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，从而得到上述标题的化合物(1)。
实施例24-(4-(6’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(2))按照实施例1，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用2-氟吡啶-5-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(2)。
实施例34-(4-(6-(1,3-二甲基-1h-吡唑-5-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(3))
按照实施例1，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用1,3-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(3)。
实施例44-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(1-二氟甲基)-1h-吡唑-4-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(4))
按照实施例1，使用1-(二氟甲基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(4)。
实施例54-(4-(5’,6’-二氟-5-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(5))
按照实施例1，使用异丙胺代替叔丁胺，使用2,3-二氟吡啶-5-硼酸频哪醇酯代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(5)。
实施例64-(4-(6-(2,4-二甲基噻唑-5-基)-3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(6))
按照实施例1，使用异丙胺代替叔丁胺，使用2,4-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,3-噻唑代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(6)。
实施例74-(4-(5’-甲氧基-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(7))按照实施例1，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用3-甲氧基吡啶-5-硼酸频哪醇酯代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(7)。
实施例84-(4-(5’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(8))按照实施例1，使用吡咯烷代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(8)。
实施例94-(4-(6-(3-氯-1-甲基-1h-吡唑-5-基)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(9))
按照实施例1，使用二甲胺(2m，thf溶液)代替叔丁胺，使用3-氯-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(9)。
实施例104-(4-(3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-6-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(10))
按照实施例1，使用异丙胺代替叔丁胺，使用1-甲基-3-三氟甲基吡唑-5-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(10)。
实施例114-(4-(6-(3-氯-1-甲基-1h-吡唑-5-基)-3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(11))
按照实施例1，使用异丙胺代替叔丁胺，使用3-氯-1-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)吡唑代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(11)。
实施例124-(4-(5-((2-(乙基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(12))
按照实施例1，使用乙胺(2m，thf溶液)代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(12)。
实施例134-(4-(2’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,4’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(13))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用2-氟吡啶-4-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(13)。
实施例144-(4-(6-(呋喃-3-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物14)
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)呋喃代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(14)。
实施例154-(4-(5-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-5’-甲氧基-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(15))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用异丙胺代替叔丁胺，使用3-甲氧基吡啶-5-硼酸频哪醇酯代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(15)。
实施例164-(4-(5’-氟-2’-甲氧基-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,4’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(16))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用5-氟-2-甲氧基吡啶-4-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(16)。
实施例174-(4-(2’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(17))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用2-氟吡啶-3-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(17)。
实施例185-甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(噻吩-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(18))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用3-噻吩硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(18)。
实施例194-(4-(5’-氟-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(19))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(19)。
实施例205-甲基-4-(4-(6-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(20))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用1-甲基-3-三氟甲基吡唑-5-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(20)。
实施例214-(4-(5-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-5’-甲氧基-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(21))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用二甲胺(2m，thf溶液)代替叔丁胺，使用3-甲氧基吡啶-5-硼酸频哪醇酯代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(21)。
实施例225-甲基-4-(4-(2’-甲基-5-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(22))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，使用2-甲基吡啶-3-硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(22)。
实施例234-(4-(3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-6-(噻吩-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(23))
按照实施例1，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用二甲胺(2m，thf溶液)代替叔丁胺，使用3-噻吩硼酸代替3-氟吡啶-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(23)。
实施例245-甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(噻唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(24))
步骤1：按照实施例1的步骤1～8，使用参考例(2)代替参考例(1)，使用吡咯烷代替叔丁胺，得到4-(4-(6-溴-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(24-1))，为黄色非晶态物质。
步骤2：将化合物(24-1)(0.044g)、2-(三丁基甲锡烷基)噻唑(0.032ml)、氯化双(三苯基膦)钯(ii)(4.7mg)、1,4-二氧六环(1.5ml)的混合物在微波照射下，100℃下搅拌1小时。将得到的混合物浓缩后，将残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到7-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(噻唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(24-2))，为淡黄色固体。
步骤3：按照实施例1的步骤10，使用化合物(24-2)代替化合物(1-9)，从而得到上述标题的化合物(24)。
实施例255-甲基-4-(4-(6-(噁唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(25))
按照实施例24，使用2-(三甲基甲锡烷基)噁唑代替2-(三丁基甲锡烷基)噻唑，从而得到上述标题的化合物(25)。
实施例264-(5-氟-5’-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-5”,6”-二氢-[3,2’：6’,4”-三联吡啶]-1”(2”h)-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(26))
步骤1：将5-溴-2-氯吡啶(10g)、乙醇胺(6.3ml)、碘化铜(i)(0.99g)、l-脯氨酸(1.2g)、碳酸钾(14g)、dmso(40ml)的混合物在微波照射下，100℃下搅拌1小时。将得到的混合物用乙酸乙酯稀释后过滤，依次用水、饱和盐水洗涤滤液。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩，得到2-((6-氯吡啶-3-基)氨基)乙醇(化合物(26-1))。
步骤2：将化合物(26-1)(7.2g)溶于thf(150ml)中，冷却至0℃后，缓慢加入nbs(7.4g)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟后，再次冷却至0℃，依次加入三苯基膦(16g)、四溴化碳(21g)。将反应混合物在室温下搅拌30分钟后，加入10％亚硫酸钠水溶液，用乙酸乙酯提取。分离有机层后，依次用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。向得到的残渣中加入甲醇，过滤收集所产生的固体。将得到的固体减压干燥，得到2-溴-n-(2-溴乙基)-6-氯吡啶-3-胺(化合物(26-2))，为白色固体。
步骤3：将化合物(26-2)(0.51g)、thf(2ml)、吡咯烷(0.30ml)的混合物在80℃下搅拌30分钟。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，用饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤。浓缩滤液，得到2-溴-6-氯-n-(2-(吡咯烷-1-基)乙基)吡啶-3-胺(化合物(26-3))，为褐色油状物质。
步骤4：将化合物(26-3)(0.10g)、参考例(3)(0.10g)、二氯[1,1’-双(二苯基膦)二茂铁]钯(ii)二氯甲烷络合物(30mg)、碳酸钠水溶液(2m，0.30ml)、1,4-二氧六环(2ml)的混合物在115℃下搅拌30分钟后，在室温下加入乙酸乙酯，用水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6-氯-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-5’-6’二氢-[2,4’-联吡啶]-1’(2’h)-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(26-4))，为淡黄色固体。
步骤5：按照实施例1的步骤9和10，使用化合物(26-4)代替化合物(1-8)，从而得到上述标题的化合物(26)。
实施例275-甲基-4-(4-(5-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-2-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(27))
步骤1：将3-溴-2-氟吡啶(1.8g)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(3.4g)、四(三苯基膦)钯(0)(0.60g)、碳酸钠水溶液(2m，6.5ml)、1,4-二氧六环(25ml)的混合物在110℃下搅拌20小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释，用饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到2-氟-5’,6’-二氢-[3,4’-联吡啶]-1’(2’h)-羧酸叔丁酯(化合物(27-1))，为淡黄色固体。
步骤2：将化合物(27-1)(2.7g)、乙酸乙酯(20ml)、20％氢氧化钯/碳(1g)的混合物在氢气气氛下，室温下搅拌过夜。氮气置换后，过滤反应混合物。浓缩滤液，得到4-(2-氟吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(27-2))，为淡黄色固体。
步骤3：将化合物(27-2)(0.22g)、2-吡咯烷-1-基乙胺(2ml)的混合物在130℃下搅拌7天。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，依次用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(2-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(27-3))，为淡黄色油状物质。
步骤4：在室温下，向化合物(27-3)(0.17g)、乙酸(5ml)的混合物中加入nbs(96mg)。在室温下搅拌40分钟后，浓缩反应混合物。将得到的残渣用乙酸乙酯稀释，依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和亚硫酸钠水溶液、水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(5-溴-2-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(27-4))，为褐色油状物质。
步骤5：将化合物(27-4)(0.060g)、四(三苯基膦)钯(0)(0.023g)、1,4-二氧六环1ml、1-甲基-3-三氟甲基吡唑-5-硼酸(77mg)、碳酸钠水溶液(2m，0.20ml)的混合物在100℃下搅拌3小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，依次用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(5-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-2-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-羧酸叔丁酯(化合物(27-5))，为无色油状物质。
步骤6：将化合物(27-5)(74mg)、tfa(1ml)的混合物在室温下搅拌30分钟后浓缩。将得到的残渣溶于dmso(1ml)中，加入参考例(2)(42mg)、dipea(0.18ml)，在130℃下搅拌3小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，依次用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到7-(2,4-二甲氧基苄基)-5-甲基-4-(4-(5-(1-甲基-3-(三氟甲基)-1h-吡唑-5-基)-2-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-3-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(27-6))，为无色非晶态物质。
步骤7：按照实施例1的步骤10，使用化合物(27-6)代替化合物(1-9)，从而得到上述标题的化合物(27)。
实施例284-(4-(3,5’-二氟-5-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(28))
步骤1：将2-溴-5-氟-3-硝基吡啶(1.0g)、4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-1,2,3,6-四氢吡啶-1-羧酸叔丁酯(1.7g)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁-钯(ii)二氯化物-二氯甲烷络合物(66mg)、1,4-二氧六环(15ml)、碳酸钠(0.96g)和水(6ml)的混合物加热回流16小时。将反应混合物冷却至室温后过滤，用乙酸乙酯稀释滤液后，用饱和盐水洗涤。分离有机层后，用无水硫酸钠干燥，过滤除去不溶物。浓缩滤液后，将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到5-氟-3-硝基-5’,6’-二氢-[2,4’-联吡啶]-1’(2’h)羧酸叔丁酯(化合物(28-1))，为褐色非晶态物质。
步骤2：按照实施例1的步骤2～10，使用化合物(28-1)代替化合物(1-1)，使用异丙胺代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(28)。
实施例294-(4-(5-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌嗪-1-基)-5-甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(29))
步骤1：向1-(叔丁氧羰基)-哌嗪(4.5g)、2-丙醇(30ml)、dipea(6.1ml)的混合物中加入2,6-二氯-3-硝基吡啶(3.8g)的thf溶液(30ml)，在室温下搅拌2.5小时。向反应混合物加入10％磷酸水溶液后，减压蒸馏除去有机溶剂。过滤收集所产生的固体，用水洗涤。将得到的固体悬浮于乙酸乙酯中，过滤除去不溶物。将得到的滤液依次用饱和碳酸氢钠水溶液、饱和盐水洗涤，分离有机层后，用无水硫酸钠干燥。过滤除去不溶物后，浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6-氯-3-硝基吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(化合物(29-1))。
步骤2：将化合物(29-1)(1.0g)、乙醇(10ml)、水(2ml)、铁(0.80g)、氯化铵(1.2g)的混合物在60℃下搅拌1.5小时。将反应混合物冷却至室温后，加入碳酸氢钠水和乙酸乙酯。过滤除去不溶物后，分离有机层，用饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到4-(3-氨基-6-氯吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(化合物(29-2))。
步骤3：将化合物(29-2)(0.94g)、n,n-二甲基甘氨酸(0.45g)、dmf(10ml)、hatu(1.8g)、dipea(2ml)的混合物在室温下搅拌18小时。再次加入hatu(0.90g)，搅拌18小时后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，依次用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6-氯-3-(2-(二甲基氨基)乙酰胺)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(化合物(29-3))。
步骤4：向化合物(29-3)(0.66g)的thf溶液(10ml)中加入硼烷二甲硫醚络合物(2ml)，在室温下搅拌18小时。缓慢加入水之后，加入2n盐酸(4ml)，在60℃下搅拌12小时。将反应混合物冷却至室温后，加入5n氢氧化钠水溶液5ml、二碳酸二叔丁酯(1m，thf溶液，1.7ml)，搅拌24小时。用水稀释反应混合物后，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(6-氯-3-(2-(二甲基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌嗪-1-羧酸叔丁酯(化合物(29-4))。
步骤5：按照实施例27的步骤5～7，使用化合物(29-4)代替化合物(27-4)，使用3-氟吡啶-5-硼酸代替1-甲基-3-三氟甲基吡唑-5-硼酸，从而得到上述标题的化合物(29)。
实施例304-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(30))
步骤1：将化合物(1-6)(2.74g)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁-钯(ii)二氯化物-二氯甲烷络合物(366mg)、三乙胺(1.87ml)、n,n-二甲基甲酰胺(8ml)和甲醇(8ml)的混合物在一氧化碳气氛下，在0.4mpa、80℃下搅拌12小时。冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释反应混合物，用水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到6-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-5-((2-羟乙基)氨基)甲基吡啶酸甲酯(化合物(30-1))，为褐色非晶态物质。
步骤2：将化合物(30-1)(2.60g)、一水合肼(5ml)和乙醇(12ml)的混合物加热回流1小时。将反应混合物冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释，用水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液，得到6-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-5-((2-羟乙基)氨基)甲基吡啶酸酰肼(化合物(30-2))，为淡黄色非晶态物质。
步骤3：向化合物(30-2)(500mg)、二氯甲烷(8.47ml)、三乙胺(0.24ml)的混合物中加入二氟乙酸酐(0.11ml)，在室温下搅拌15分钟。再次加入二氟乙酸(0.11ml)，在室温下搅拌15分钟后浓缩，向残渣中加入氨甲醇溶液(7m，8ml)，在室温下搅拌。浓缩混合物后，将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到n’-(2,2-二氟乙酰)-6-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-5-((2―羟乙基)氨基)甲基吡啶酸酰肼(化合物(30-3))，为白色非晶态物质。
步骤4：将化合物(30-3)(621.2mg)、三苯基膦(710.5mg)、四溴化碳(898.3mg)、咪唑(207.5mg)和二氯甲烷(8.47ml)的混合物在室温下搅拌3小时。进一步在40℃下搅拌1小时，加入三苯基膦(710.5mg)、四溴化碳(898.3mg)，在40℃下搅拌2天。浓缩混合物后，将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到化合物(30-4)，为白色非晶态物质。
步骤5：按照实施例1的步骤8和10，使用化合物(30-4)代替化合物(1-7)，使用吡咯烷代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(30)。
实施例314-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)-3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(31))
按照实施例30，使用异丙胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(31)。
实施例324-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(32))
按照实施例30，使用三氟乙酸酐代替二氟乙酸酐，使用叔丁胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(32)。
实施例334-(4-(3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(33))
按照实施例30，使用三氟乙酸酐代替二氟乙酸酐，使用异丙胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(33)。
实施例344-(4-(3-((2-(叔丁基(甲基)氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(34))
按照实施例30，使用三氟乙酸酐代替二氟乙酸酐，使用甲基叔丁胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(34)。
实施例35(s)-5,5-二甲基-4-(4-(3-((吡咯烷-2-基甲基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(35))
步骤1：将5-氟吡啶-2-羧酸甲酯(0.5g)、(s)-2-(氨基甲基)吡咯烷-1-羧酸叔丁酯(1.0g)、dipea(0.67ml)、dmso(3.0ml)的混合物在130℃下搅拌1.5小时，并在140℃下搅拌1小时。冷却至室温后，经硅胶柱色谱法纯化，得到(s)-5-(((1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)甲基)氨基)甲基吡啶酸甲酯(化合物(35-1))，为无色油状物质。
步骤2：在室温下，向化合物(35-1)(601mg)、thf(9ml)的混合物中加入nbs(319mg)，搅拌1小时。向得到的混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液和饱和亚硫酸钠水溶液之后，用乙酸乙酯提取。分离有机层后，用无水硫酸钠干燥并过滤，然后浓缩。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到(s)-6-溴-5-(((1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)甲基)氨基)甲基吡啶酸甲酯(化合物(35-2))，为无色油状物质。
步骤3：向锌粉(512mg)、n,n-二甲基乙酰胺(5ml)的混合物中加入三甲基氯硅烷(0.06ml)，在室温下搅拌10分钟。接着加入参考例(4)(1.2g)，在60℃下搅拌1小时，得到有机锌试剂n,n-二甲基乙酰胺溶液。向另一反应容器中加入化合物(35-2)(649mg)、乙酸钯(35mg)、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯(64mg)、n,n-二甲基乙酰胺(1.5ml)，在室温下搅拌10分钟。向得到的混合物中加入上述有机锌试剂n,n-二甲基乙酰胺溶液，在60℃下搅拌5小时。冷却至室温，向反应混合物中加入水(5ml)、乙酸乙酯(5ml)，然后进行过滤。分离有机层后，用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到(s)-5-(((1-(叔丁氧羰基)吡咯烷-2-基)甲基)氨基)-6-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)甲基吡啶酸甲酯(化合物(35-3))，为淡黄色非晶态物质。
步骤4：按照实施例30的步骤2～4，使用化合物(35-3)代替化合物(30-1)，使用三氟乙酸酐代替二氟乙酸酐，得到(s)-叔丁基2-(((2-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-6-(5-(三氟甲基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡啶-3-基)氨基)甲基)吡咯烷-1-羧酸(化合物(35-4))，为淡黄色非晶态物质。
步骤5：按照实施例1的步骤10，使用化合物(35-4)代替化合物(1-9)，从而得到上述标题的化合物(35)。
实施例365,5-二甲基-4-(4-(6-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(36))
步骤1：向5-溴吡啶羧酸(10g)、甲醇(50ml)的混合物中加入浓硫酸(1ml)，加热环流3小时后，浓缩反应混合物。将得到的残渣用乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和碳酸氢钠水溶液、饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层后过滤并浓缩滤液。向得到的残渣中加入乙醇(50ml)、一水合肼(10ml)，加热环流3小时后，浓缩反应混合物。向得到的残渣中加入水，过滤收集所产生的固体，得到5-吡啶甲酰肼(化合物(36-1))，为黄色固体。
步骤2：向化合物(36-1)(1.5g)、乙腈(25ml)、三乙胺(1ml)的混合物中加入乙酸酐(0.79ml)，在室温下搅拌30分钟。向反应混合物中加入水，过滤收集所产生的固体，得到n’-乙酰基-5-吡啶甲酰肼(化合物(36-2))，为白色固体。
步骤3：将化合物(36-2)(1.78g)、劳森试剂(2.8g)、1,4-二氧六环(35ml)的混合物加热环流1小时后，浓缩反应混合物。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化。将得到的固体悬浮于甲醇:水(5:1)中。过滤收集固体，得到2-(5-溴吡啶-2-基)-5-甲基-1,3,4-噻二唑(化合物(36-3))，为白色固体。
步骤4：将化合物(36-3)(1.15g)、乙醇胺(0.81ml)、碘化铜(i)(85mg)、l-脯氨酸(103mg)、碳酸钾(1.24g)和dmso(10ml)的混合物在80℃下搅拌过夜。冷却至室温后，用水和乙酸乙酯稀释，过滤后，用三氯甲烷提取3次。用无水硫酸镁干燥有机层后浓缩。将得到的残渣用甲醇稀释后，加入盐酸甲醇溶液，进行浓缩。将得到的残渣悬浮于乙酸乙酯中，过滤收集。将得到的固体悬浮于三氯甲烷中，加入饱和碳酸氢钠水溶液。分离有机层后，将水层用三氯甲烷/甲醇(10:1)提取5次。合并有机层，用无水硫酸镁干燥后浓缩。将得到的残渣悬浮于三氯甲烷中。过滤收集固体，得到2-((6-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-3-基)氨基)乙醇(化合物(36-4))，为褐色固体。
步骤5：向化合物(36-4)(559mg)、thf(10ml)、乙腈(5ml)的混合物中加入nbs(421mg)，在室温下搅拌30分钟。向反应混合物中加入亚硫酸钠水溶液和饱和盐水，用三氯甲烷/甲醇(10:1)提取5次。合并有机层，用无水硫酸镁干燥后浓缩。向得到的残渣中加入乙醚，过滤收集所产生的固体，得到2-((2-溴-6-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-3-基)氨基)乙醇(化合物(36-5))，为褐色固体。
步骤6：向锌粉(705mg)、n,n-二甲基乙酰胺(6ml)的混合物中加入三甲基氯硅烷(0.03ml)，在室温下搅拌10分钟。接着加入参考例(4)(2.25g)，在60℃下搅拌30分钟，得到有机锌试剂n,n-二甲基乙酰胺溶液。向另一反应容器中加入化合物(36-5)(680mg)、乙酸钯(24mg)、2-二环己基膦基-2’,6’-二甲氧基联苯(89mg)、n,n-二甲基乙酰胺(6ml)，在室温下搅拌10分钟。向得到的混合物中加入上述有机锌试剂n,n-二甲基乙酰胺溶液，在60℃下搅拌5小时。冷却至室温后，向反应混合物中加入水(5ml)、乙酸乙酯(5ml)。过滤后，分离有机层，用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸镁干燥有机层后过滤并浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到7-(2,4-二甲氧基苄基)-4-(4-(3-((2-羟乙基)氨基)-6-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(36-6))，为淡黄色非晶态物质。
步骤7：在冰冷下，向化合物(36-6)(804mg)、三苯基膦(501mg)、thf(6ml)的混合物中加入四溴化碳(634mg)。将得到的混合物在室温下搅拌1小时后，加入饱和碳酸氢钠水溶液，用乙酸乙酯提取。依次用水、饱和盐水洗涤有机层，然后用无水硫酸镁干燥后浓缩。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(4-(3-((2-溴乙基)氨基)-6-(5-甲基-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(36-7))，为淡黄色非晶态物质。
步骤8：按照实施例1的步骤8和10，使用化合物(36-7)代替化合物(1-7)，使用吡咯烷代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(36)。
实施例374-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(37))
按照实施例36，使用二氟乙酸酐代替乙酸酐，使用叔丁胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(37)。
实施例384-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-((2-(二甲基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(38))
按照实施例36，使用二氟乙酸酐代替乙酸酐，使用二甲胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(38)。
实施例394-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,3,4-噻二唑-2-基)-3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(39))
按照实施例37，使用异丙胺代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(39)。
实施例404-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-环丙基-1,3,4-噻二唑-2-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(40))
按照实施例36，使用环丙基甲酰氯代替乙酸酐，使用叔丁胺代替吡咯烷，从而得到上述标题的化合物(40)。
实施例414-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(41))
步骤1：将5-氟-2-吡啶甲腈(25g)、dmso(100ml)、2-氨基乙醇(25ml)的混合物在75℃下搅拌40分钟。冷却至室温后，用水稀释，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤。浓缩滤液，得到5-((2-羟乙基)氨基)-2-吡啶甲腈(化合物(41-1))，为白色固体。
步骤2：向化合物(41-1)(29g)和thf(300ml)的混合物中加入nbs(32g)，在室温下搅拌3小时。向得到的混合物中加入硫代硫酸钠水溶液(10％，100ml)之后，用乙酸乙酯提取。分离有机层后，用无水硫酸钠干燥并过滤，然后浓缩。将得到的残渣用乙酸乙酯(110ml)重结晶。将得到的固体过滤收集并干燥，得到6-溴-5-((2-羟乙基)氨基)-2-吡啶甲腈(化合物(41-2))，为白色固体。
步骤3：向化合物(41-2)(3.4g)和吡啶(4.0ml)的混合物中加入乙酸酐(4.0ml)，在室温下搅拌30分钟。将得到的混合物用乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后浓缩，将得到的残渣用乙酸异丙酯重结晶，得到2-((2-溴-6-氰基吡啶-3-基)氨基)乙基乙酸酯(化合物(41-3))，为白色固体。
步骤4：向锌粉(0.97g)和n,n-二甲基乙酰胺(5ml)的混合物中加入三甲基氯硅烷(0.089ml)，在超声波照射下，50℃下反应15分钟。冷却至室温后，加入n,n-二甲基乙酰胺(44ml)、参考例(4)(4.8g)，在超声波照射下，50℃下反应20分钟。冷却至室温后，过滤除去多余的锌粉，将得到的混合液加入到另行配制的化合物(41-3)(1.8g)、乙酸钯(ii)(0.16g)、二环己基(2’,6’-二甲氧基-[1,1’-二苯基]-2-基)膦(0.17g)和n,n-二甲基乙酰胺(4ml)的混合液中，在70℃下搅拌2小时。冷却至室温后，将得到的混合物用乙酸乙酯和水稀释，过滤除去不溶物之后，将得到的滤液依次用水、饱和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后，浓缩滤液，将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到乙酸2-((6-氰基-2-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)吡啶-3-基)氨基)乙酯(化合物(41-4))，为淡黄色非晶态物质。
步骤5：向化合物(41-4)(8.5g)和乙醇(100ml)的混合物中加入羟胺水溶液(50％，2.8ml)，在60℃下搅拌10分钟。将得到的混合物浓缩并干燥，得到乙酸2-((2-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-6-(n-羟基甲脒基)吡啶-3-基)氨基)乙酯(化合物(41-5))，为淡黄色非晶态物质。
步骤6：将化合物(41-5)和thf(100ml)的混合物冷却至0℃，依次加入二氟乙酸酐(2.2ml)、吡啶(25ml)，在室温下搅拌5分钟。将得到的混合物进一步在60℃下搅拌2小时。冷却后，加入盐酸(0.5m，30ml)，用乙酸乙酯提取。分离有机层后，依次用水、饱和盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥。过滤后浓缩。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到乙酸2-((6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-2-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)吡啶-3-基)氨基)乙酯(化合物(41-6))，为白色固体。
步骤7：将化合物(41-6)(9.8g)、甲醇(100ml)和thf(50ml)的混合物冷却至0℃，加入氢氧化钠水溶液(5m，0.85ml)，在0℃下搅拌1小时。向得到的混合物中加入盐酸(5m，0.85ml)，在室温下搅拌2小时。过滤收集所产生的固体，用甲醇(50ml)洗涤后减压干燥，得到4-(4-(6-(5-(二氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)-3-((2-羟乙基)氨基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(41-7))，为白色固体。
步骤8：按照实施例1的步骤7、8和10，使用化合物(41-7)代替化合物(1-6)，从而得到上述标题的化合物(41)。
实施例424-(4-(3-((2-(异丙基氨基)乙基)氨基)-6-(5-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(42))
按照实施例41，使用三氟乙酸酐代替二氟乙酸酐，使用异丙胺代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(42)。
实施例434-(4-(3-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-6-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(43))
步骤1：按照实施例41的步骤1～6，使用三氟乙酸酐代替二氟乙酸酐，得到乙酸2-((2-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6,7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-6-(5-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-3-基)吡啶-3-基)氨基)乙酯(化合物(43-1))。
步骤2：将化合物(43-1)(0.44g)、dmf(10ml)、盐酸羟胺(0.43g)、叔丁醇钾(0.69g)的混合物在70℃下搅拌1小时。将反应混合物冷却至室温后，用乙酸乙酯稀释，依次用水、饱和盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤。将得到的滤液浓缩，得到乙酸2-((2-(1-(7-(2,4-二甲氧基苄基)-5,5-二甲基-6-氧代-6，7-二氢-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-4-基)哌啶-4-基)-6-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)吡啶-3-基)氨基)乙酯(化合物(43-2))，为淡黄色非晶态物质。
步骤3：按照实施例41的步骤7和8，使用化合物(43-2)代替化合物(41-6)，从而得到上述标题的化合物(43)。
实施例445,5-二甲基-4-(4-(3-((2-(吡咯烷-1-基)乙基)氨基)-6-(3-(三氟甲基)-1,2,4-噁二唑-5-基)吡啶-2-基)哌啶-1-基)-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(化合物(44))
按照实施例43，使用吡咯烷代替叔丁胺，从而得到上述标题的化合物(44)。
比较例b4-(4-(4-((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-6-基)哌啶-1-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮
步骤1：将2,6-二溴-4-硝基吡啶(1g)、碳酸钾(490.3mg)、2-氨基乙醇(0.32ml)和dmso(10ml)的混合物在60℃下搅拌1.5小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到2-((2,6-二溴吡啶-4-基)氨基)乙醇(比较例b(1-1))，为褐色油状物质。
步骤2：将比较例b(1-1)(212mg)、5-氟吡啶-3-硼酸(50mg)、四(三苯基膦)钯(0)(82.8mg)、碳酸钠水溶液(2m，0.39ml)和1,4-二氧六环(7.16ml)的混合物在100℃下搅拌1小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到2-((6-溴-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-4-基)氨基)乙醇(比较例b(1-2))的粗纯化物。得到的全部粗纯化物无需进一步纯化即可用于下一步骤。
步骤3：将比较例b(1-2)的粗纯化物、四溴化碳(237.6mg)、三苯基膦(187.9mg)、thf(3ml)和二氯甲烷(1ml)的混合物在室温下搅拌30分钟。向反应混合物中加入饱和碳酸氢钠水溶液、水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经硅胶柱色谱法纯化，得到6-溴-n-(2-溴乙基)-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-4-胺(比较例b(1-3))，为黄色非晶态物质。
步骤4：将比较例b(1-3)(65.7mg)、叔丁胺(0.2ml)、thf(1ml)的混合物在80℃下搅拌4小时。向反应混合物中额外加入叔丁胺(0.2ml)，在90℃下搅拌2小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到n1-(6-溴-5’-氟-[2,3’-联吡啶]-4-基)-n2-(叔丁基)乙烷-1,2-二胺(比较例b(1-4))，为黄色非晶态物质。
步骤5：将比较例b(1-4)(57.5mg)、参考例(5)(69.5mg)、1,1’-双(二苯基膦)二茂铁-钯(ii)二氯化物-二氯甲烷络合物(12.8mg)、碳酸钠水溶液(2m，0.10ml)和1,4-二氧六环(1.57ml)的混合物在100℃下搅拌3小时。向反应混合物中加入水，用乙酸乙酯提取。用无水硫酸钠干燥有机层后过滤，并浓缩滤液。将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，得到4-(4’((2-(叔丁基氨基)乙基)氨基)-5-氟-5”,6”-二氢-[3,2’：6’,4”-三联吡啶]-1”(2”h)-基)-5,5-二甲基-5h-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6(7h)-酮(比较例b(1-5))，为褐色非晶态物质。
步骤6：将比较例b(1-5)(16mg)、20％氢氧化钯/碳(15mg)、乙酸乙酯(1ml)、乙醇(0.1ml)、甲醇(0.1ml)、thf(0.1ml)、dmf(0.1ml)和tfa(0.01ml)的混合物在氢气气氛下，室温下搅拌4小时。氮气置换后，过滤反应混合物。浓缩滤液，将得到的残渣经碱性硅胶柱色谱法纯化，从而得到上述标题的比较例(b)。
实施例1～44的化合物的化学结构式和物理性质值示于下述表1中。
[表1]
试验例1确认akt1激酶活性抑制作用
akt1的制备和本发明化合物对akt1的激酶活性的体外抑制活性测定法参考文献biochem.j.vol.385，pp399-408(2005)和cancerres.vol.68，pp2366-2374(2008)中记载的方法来进行。在akt1的制备中，首先，使在昆虫细胞sf9中表达带有中等t抗原(middletantigen)标签的人akt1，然后经亲和柱纯化和pdk1的活化来制备akt1，在测定化合物的抑制活性前保存在-80℃。在化合物的抑制活性测定中，首先，在25℃下，将akt1和本发明化合物在反应用缓冲液(15mmtris-hclph值7.5，0.01％tween-20，2mmdtt)中预培养120分钟。接着，作为底物加入生物素化crosstide(生物素-kgsgsgrprtssfaeg、密理博公司生产)、mgcl2和atp，使三者终浓度分别达到500nm、10mm和150μm，在25℃下反应60分钟。然后向其中加入edta，使其终浓度达到40mm，由此使反应停止，然后使终浓度分别达到0.5nm和62.5nm地添加带eu标签的抗磷酸化crosstide抗体(珀金埃尔默公司生产)和surelightapc-sa(珀金埃尔默公司生产)的检测液，在室温下反应2小时。最后，利用pherastarfs(bmglabtech公司生产)或pherastar(bmglabtech公司生产)，用620nm和665nm的两种波长测定在波长337nm激发光照射时的荧光量。根据两种波长的荧光量比求出磷酸化反应量，将能够抑制50％磷酸化反应的化合物浓度定义为ic50值(nm)，示于下述表2中。
另外，作为对照化合物，使用下述已知具有akt抑制活性的比较例a(wo2010/056563(实施例31))和比较例b。
[化15]
[表2]
试验例2确认rsk1激酶活性抑制作用
本发明化合物对rsk1激酶活性的体外抑制活性使用carnabiosciences公司的qssassisttmfp检测试剂盒进行测定。
在化合物的抑制活性测定中，首先，用二甲基亚砜(dmso)逐步稀释受试化合物。接着，向激酶反应用缓冲液(20mmhepes(ph值7.4)，2mm二硫苏糖醇，0.01％tween-20)中加入rsk1蛋白、底物肽(终浓度为100nm)、氯化镁(终浓度为10mm)、atp(终浓度为30μm)和受试化合物dmso溶液(dmso的终浓度为5％)，在25℃下培养40分钟，进行激酶反应。然后向其中加入用moleculardevices公司的imap渐进结合缓冲液a(imapprogressivebindingbuffera)稀释400倍的imap渐进结合缓冲液a(imapprogressivebindingreagent)，停止激酶反应。在室温下在暗处静置120分钟后，根据利用pherastar(bmglabtech公司，激发波长485nm，检测波长520nm)测得的荧光偏振度，求出磷酸化反应量，将能够抑制50％磷酸化反应的化合物浓度定义为ic50值(nm)，示于下述表3中。
[表3]
试验例3确认s6k1激酶活性抑制作用
本发明化合物对s6k1激酶活性的体外抑制活性使用carnabiosciences公司的qssassisttmfp检测试剂盒进行测定。
在化合物的抑制活性测定中，首先，用二甲基亚砜(dmso)逐步稀释受试化合物。接着，向激酶反应用缓冲液(20mmhepes(ph值7.4)，2mm二硫苏糖醇，0.01％tween-20)中加入s6k蛋白、底物肽(终浓度为100nm)、氯化镁(终浓度为5mm)、atp(终浓度为25μm)和受试化合物dmso溶液(dmso的终浓度为5％)，在25℃下培养30分钟，进行激酶反应。然后向其中加入用moleculardevices公司的imap渐进结合缓冲液a(imapprogressivebindingbuffera)稀释400倍的imap渐进结合缓冲液a(imapprogressivebindingreagent)，停止激酶反应。在室温下在暗处静置120分钟后，根据利用pherastar(bmglabtech公司、激发波长485nm、检测波长520nm)测得的荧光偏振度，求出磷酸化反应量，将能够抑制50％磷酸化反应的化合物浓度定义为ic50值(nm)，示于下述表4中。
[表4]
试验例4细胞增殖抑制试验
按照以下条件，对rko细胞(人大肠癌细胞株)进行体外细胞增殖抑制试验。
在含有10％的fbs、1mm的l-谷氨酰胺(gibco，cat#:25030)和1mm的丙酮酸钠(gibco，cat#:11360)的mem培养基中培养rko细胞(atcc，cat#:crl-2577)，将该rko细胞以每孔2×103个(150μl)接种于96孔平底微孔板(costar，cat#:3904)的各孔中，在37℃、含5％二氧化碳的培养器中培养1天。将用二甲基亚砜逐步稀释的本发明化合物，或只将二甲基亚砜添加到含有10％的fbs、1mm的l-谷氨酰胺和1mm的丙酮酸钠的mem培养基中。将其向上述rko细胞的培养板的各孔中各加入50μl，使化合物的最终浓度分别达到10μm、3μm、1μm、0.3μm、0.1μm、0.03μm、0.01μm、0.003μm、0μm。另外，将另行准备的rko细胞的培养板在室温下放置30分钟后，除去100μl的培养基，然后向各孔中添加50μl的celltiter-glo(注册商标)2.0assay(promega，cat#:g9242)。在暗处放置10分钟后，用多模式读板仪(multimodeplatereader)(珀金埃尔默，enspire)测定加入化合物时来自孔中活细胞的发光量。将加入化合物或只加入二甲基亚砜的细胞在37℃、含5％二氧化碳的培养器中再培养3天。培养后，在室温下放置30分钟，从各孔中各除去150μl的上清液，留下50μl的细胞培养液。向剩余的50μl细胞培养液中添加等量的celltiter-glo(注册商标)2.0assay。在暗处放置10分钟后，用多模式读板仪(multimodeplatereader)测定来自各孔中活细胞的发光量。按照下述公式计算细胞增殖率，求出细胞增殖率达到50％的浓度，即本发明化合物抑制50％细胞增殖的浓度(gi50值(nm))。
细胞增殖率(％)＝(t-c0)/(c-c0)×100；t≧c0时
细胞增殖率(％)＝(t-c0)/c0×100；t<c0时
c0：添加化合物时孔的发光量(每秒计数)
c：只添加二甲基亚砜的孔的发光量(每秒计数)
t：添加被测化合物的孔的发光量(每秒计数)
另外，作为对照化合物，使用下述已知具有akt抑制活性的比较例a(wo2010/056563(实施例31))和比较例b。
[化16]
评价本发明中的代表化合物和对照化合物对rko细胞的gi50值，将其结果示于下述表5中。
[表5]
由该结果可知，本发明化合物相比已知具有akt抑制活性的哌嗪衍生物，具有明显高的细胞增殖抑制活性。另外，从化合物1与比较例b的对比可知，含有r3、r4、r5和r6的氨基侧链的取代位置对细胞增殖抑制活性有明显的影响。这种取代位置所导致的活性不同完全不为人知，这是个令人吃惊的发现。
试验例5细胞增殖抑制试验
按照以下条件，对hec-6细胞(宫体癌细胞株)进行体外细胞增殖抑制试验。
在含有15％的fbs的mem培养基(gibco，cat#:10370)中培养hec-6细胞(healthscienceresearchresourcesbank，细胞编号：jcrb1118)，将该hec-6以每孔500个(20μl)接种于384孔平底微孔板(corning，cat#:3571)的各孔中，在37℃、含5％二氧化碳的培养器中培养1天。将用二甲基亚砜逐步稀释的本发明化合物，或只将二甲基亚砜添加到含有15％的fbs的mem培养基中。将其向上述hec-6细胞的培养板的各孔中各添加5μl，使化合物的最终浓度分别达到10μm、3μm、1μm、0.3μm、0.1μm、0.03μm、0.01μm、0.003μm、0.001μm、0.0003μm、0μm。另外，将另行准备的hec-6细胞的培养板在室温下放置30分钟后，向各孔中添加20μl的celltiter-glo(注册商标)2.0assay(promega，cat#:g9243)。用孔板振荡器搅拌10分钟后，在暗处静置30分钟，然后用多模式读板仪(multimodeplatereader)(珀金埃尔默，envision)测定来自各孔中活细胞的发光量。将加入化合物或只加入二甲基亚砜的细胞在37℃、含5％二氧化碳的培养器中再培养3天。培养后，在室温下放置30分钟，向各孔中加入25μl的celltiter-glo(注册商标)2.0assay。用孔板振荡器搅拌10分钟后，在暗处静置30分钟，然后用多模式读板仪(multimodeplatereader)测定来自各孔中活细胞的发光量。按照下述公式计算细胞增殖率，求出细胞增殖率达到50％的浓度，即本发明化合物抑制50％细胞增殖的浓度(gi50值(μm))。
细胞增殖率(％)＝(t-c0)/(c-c0)×100；t≧c0时
细胞增殖率(％)＝(t-c0)/c0×100；t<c0时
c0：添加化合物时孔的发光量(每秒计数)
c：只添加二甲基亚砜的孔的发光量(每秒计数)
t：添加被测化合物的孔的发光量(每秒计数)
另外，作为对照化合物，使用上述已知具有akt抑制活性的比较例a(wo2010/056563(实施例31))和比较例b。
评价本发明中的代表化合物对hec-6细胞的gi50值，将其结果示于表6。
[表6]
本说明书所引用的全部刊物、专利以及专利申请通过直接引用而编入本说明书。