本发明涉及发酵多糖，尤其涉及一种小枣发酵多糖及其制备方法和用途。
背景技术：
体力疲劳又叫躯体性疲劳，当机体长时间从事繁重紧张的体力劳动时，会有大量的代谢物在体内积聚，刺激人体组织细胞和神经系统，使人产生疲劳感。缓解体力疲劳就是通过一些方法手段来缓解这种疲劳的感觉，从而使人感觉轻松。金丝小枣(ziziphusjujuba)隶属于鼠李科枣属植物，至今已有3000多年的栽培历史，风味甘美，营养丰富，含有多糖、环磷酸腺苷、生物碱类、皂苷类、黄酮类等，是传统的药食兼用佳品。枣多糖有抗氧化、抗肿瘤、降低血糖和血脂、延缓机体衰老、增强免疫力、保肝等药理功效。
目前，cn106397621a公开一种广枣多糖制取工艺，用纤维素复合酶辅助热水提取多糖，cn102086237a公开利用红枣制取枣多糖的方法及枣多糖，用微波加热除杂的方式辅助热水提取多糖，cn103880973a公开一种木枣多糖及其制备方法，用酶解、超声波辅助热水提取多糖并用deae-52纤维素柱和sephadexg-100葡聚糖凝胶柱联用的方法纯化多糖，cn104277136a公开黄河滩枣多糖其提取精致方法及应用，用超生波辅助热水提取多糖的同时做了体外抗氧化活性评价，体外抗肿瘤活性评价，保肝实验研究。对于枣多糖的研究主要集中在利用酶解、超声波、微波辅助热水提取多糖以及纯化阶段。
技术实现要素：
本发明所要解决的技术问题是，提供小枣发酵多糖及其制备方法和用途。
为了解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：一种小枣发酵多糖的制备方法，将新鲜小枣去核打浆后，按质量百分比添加0.6％～1.5％的酵母菌进行发酵，设定摇床温度为36～38℃，转速为120～180r/min，发酵时间6～8h；采用热水浸提法提取发酵多糖，按质量料液比1:2～1:5，水浴温度75℃～85℃，浸提时间1.5h～3h，浸提2次，用质量百分比浓度95％的乙醇醇沉，离心后收集沉淀，蒸馏水复溶后用sevage法脱蛋白1～3次，冷冻干燥得发酵多糖。
所述小枣为乐陵小枣。
上述小枣发酵多糖的制备方法制备的发酵多糖。
上述发酵多糖在缓解体力疲劳中的用途。
本发明的有益效果是：以乐陵小枣为原料，经酵母菌发酵后提取得发酵多糖，通过缓解体力疲劳功能的动物实验，证明发酵多糖具有抗疲劳作用，为功能性食品的研发提供一定的理论依据。
具体实施方式
下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细说明：
本发明的小枣发酵多糖的制备方法，将新鲜小枣去核打浆后，按质量百分比添加0.6％～1.5％的酵母菌进行发酵，设定摇床温度为36～38℃，转速为120～180r/min，发酵时间6～8h，采用热水浸提法提取发酵多糖，按质量料液比1:2～1:5，水浴温度75℃～85℃，浸提时间1.5h～3h，浸提2次，用质量百分比浓度95％的乙醇醇沉，离心后收集沉淀，蒸馏水复溶后用sevage法脱蛋白1～3次，冷冻干燥得发酵多糖。
优选，所述小枣为乐陵小枣。
上述小枣发酵多糖的制备方法制备的发酵多糖。
上述发酵多糖在缓解体力疲劳中的用途。
发酵多糖经动物实验表明，可延长小鼠力竭游泳时间，提高小鼠肝糖原(hg)、肌糖原含量(mg)，谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)、超氧化物歧化酶(sod)活力，降低小鼠的血乳酸(ld)、血尿素氮(bun)含量，肌酸激酶(ck)活力，具有增强运动耐力，缓解体力疲劳的作用。
下面通过以下具体实施例进一步详细说明本发明，但并不受限于此，可以在本发明权利要求限定的范围内进行各种改变。下面没有特殊说明的数据，均为质量数据。
1发酵多糖的制备
1.1原料处理：新鲜乐陵小枣经挑择后清洗，去核打浆；
1.2发酵枣浆：添加1％的酵母菌，设定摇床温度为37℃，转速为150r/min，发酵时间8h；
1.3提取发酵多糖：水提(料液比1:3，水浴温度80℃，浸提时间2h，浸提2次)乙醇醇沉，离心后收集沉淀，加水溶解，用sevage法脱蛋白3次；
1.4干燥：冷冻干燥得发酵多糖。
2发酵多糖对小鼠的抗疲劳功能实验
2.1动物：spf级昆明小鼠，雄性，体重20±2g，由中国食品药品检定研究院提供，实验动物生产许可证：scxk(京)2014-0013。
2.2试剂盒：bun、ld、hg、mg、gsh-px、sod、ck试剂盒，南京建成生物工程研究所。
2.3方法：实验环境下适应性喂养3天后随机分为4组，每组6只。正常对照组每天灌胃生理盐水，其余各组连续灌胃不同剂量(低剂量组100mg/kg·d、中剂量组150mg/kg·d、高剂量组200mg/kg·d)发酵多糖液28天，每天下午灌胃前进行体重的测定。
负重游泳实验：于末次灌胃30min后，将尾根部负荷小鼠自身体重6％铁丝的小鼠置于游泳箱(尺寸约60cm×60cm×50cm)中游泳，水深约30cm，水温25℃左右，记录小鼠从游泳到其头部沉入温水中8s后，不能再露出水面的时间，即为小鼠的力竭游泳时间。
相关指标检测实验：于末次灌胃30min后，置于游泳箱中游泳，1h后摘眼球取血(于4℃12000r/min的转速离心10min，取上清)并脱颈处死，解剖取肝脏和后腿肌肉，漂洗后制成10％肝脏匀浆和10％肌肉匀浆，冰箱保存，备测。
2.4指标检测：根据中华人民共和国卫生部颁布的《保健食品检验与评价技术规范》的文件要求记录小鼠每日体重及力竭游泳时间，按bun、ld、hg、mg、gsh-px、sod、ck、试剂盒说明测定各指标。
3结果与分析
3.1发酵多糖对小鼠体重增量的影响
体重变化是小鼠生长发育受到影响最直接的体现。
表1发酵多糖对小鼠体重增量的影响
注：与对照组相比，*表示有显著性差异(p<0.05)，**表示有极显著性差异(p<0.01)
由表1可知，与对照组相比，各组小鼠每两周内体重的增量有差别，但均无显著性差异，说明在饲养期间，灌胃发酵多糖不会对小鼠的生长及发育造成不良影响。
3.2发酵多糖对小鼠力竭游泳时间的影响
运动耐力的提高是抗疲劳能力加强最直接的表现。
表2发酵多糖对小鼠力竭游泳时间的影响
注：与对照组相比，*表示有显著性差异(p<0.05)，**表示有极显著性差异(p<0.01)
由表2可知，与对照组相比，各个实验组小鼠的力竭游泳时间都有所延长，中剂量组的延长率最高，说明中剂量组更能缓解小鼠的体力疲劳。
3.3发酵多糖对抗疲劳评价指标的影响
肝糖原和肌糖原是机体运动时重要的供能物质，剧烈运动时，肝糖原(hg)和肌糖原(mg)被大量消耗以维持血糖恒定，当hg、mg耗竭，血糖含量明显下降，氧供应相对不足，血乳酸(ld)、血尿素氮(bun)等代谢产物增多，引起肌肉收缩效率下降。
表3发酵多糖对小鼠血乳酸、血尿素氮、肝糖原、肌糖原的影响
注：与对照组相比，*表示有显著性差异(p<0.05)，**表示有极显著性差异(p<0.01)
由表3可知，与对照组相比，实验组各组小鼠hg和mg含量均有所增加，血清中ld和bun含量均有所降低，其中中剂量组极显著的增加了hg和mg含量，降低了ld和bun含量，说明发酵多糖可不同程度的改善机体糖代谢系统，减少机体蛋白质和含氮物质的分解代谢，以提高肌肉的运动能力，缓解小鼠的体力疲劳，中剂量组更能缓解小鼠的体力疲劳。
3.4发酵多糖对抗氧化评价指标的影响
自由基理论认为，抗氧化与缓解体力疲劳具有一定的关系，谷胱甘肽过氧化物酶(gsh-px)、超氧化物歧化酶(sod)、肌酸激酶活力(ck)三项指标能直接反应机体的抗氧化状态和脂质过氧化水平。
表4发酵多糖对小鼠gsh-px、sod、ck的影响
注：与对照组相比，*表示有显著性差异(p<0.05)，**表示有极显著性差异(p<0.01)
由表4可知，与对照组相比，各剂量组多糖均能提高gsh-px、sod活力，降低ck活力，其中中剂量组极显著的增加了gsh-px、sod活力，降低了ck活力，说明发酵多糖具有良好的体内抗氧化活性，不仅显著提高了体内酶系统的抗氧化活力，而且能够有效清除体内自由基并防止细胞膜脂质过氧化，减少血管壁及一些组织的损伤，进而缓解小鼠的体力疲劳。中剂量组缓解小鼠体力疲劳的效果最佳。
以上所述的实施例仅用于说明本发明的技术思想及特点，其目的在于使本领域内的技术人员能够理解本发明的内容并据以实施，不能仅以本实施例来限定本发明的专利范围，即凡本发明所揭示的精神所作的同等变化或修饰，仍落在本发明的专利范围内。