一种阿福豆苷衍生物的制备方法与流程

本发明属于树木高附加值次生代谢成分高效制备领域，具体涉及一种文献中从未报道过的阿福豆苷衍生物即8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷和以溶液提取、不同极性溶剂梯度萃取及色谱法分离等工艺相组合从连香树木质部边材中制备8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷的方法。本发明提出的制备方法具有原料易得、制备过程简单高效、目标产物纯度高等特点。

背景技术：

连香树科(cercidiphyllaceae)连香树属(cercidiphyllum)植物中的第三纪孑遗落叶乔木树种连香树(cercidiphullumjaponicum)，其俗名为紫荆叶木或子母树，现主要分布于中国，在韩国、朝鲜和日本等国家的部分地区也有栽培。连香树为单性异株，其花无花被，花与叶同时开放或先于叶开放，花呈紫红色，具1苞片。雄花序一般为4朵簇生，近无梗，雄蕊15～20；雌花序一般2～6朵簇生，有总梗。连香树现已被我国列为国家二级重点保护野生植物(jin，etal.，plosone，2017，12(5)：e0178382；张莹，李思锋，陕西林业科技，2009，(1)：53～54；manchester，etal.，journalofsystematicsandevolution，2009，47(1)：1～42)。连香树的树皮、树枝和树叶等多个器官因具有良好的抗氧化、抗炎、促生发、抗菌、抗冰核等药学功效，在亚洲多国多年来一直被大范围应用于民间传统药物或相关疾病的预防和治疗中(towatari，etal.，plantamedica，2002，68：995～998；tada&sakurai，phytochemistry，1991，30(4)：1119～1120；wang，etal.，planta，2012，235：747～759)。迄今，国内外的一些科研工作者对连香树的树皮、树叶、木质部心材等器官部位的次生代谢化学成分进行过零星探究(bae&kim，journalofthekoreanwoodscienceandtechnology，2017，45(3)：250～257；guan，etal.，ecologicalinformatics，2016，33，51～56；lee，etal.，journalofkoreanwoodscienceandtechnology，2016，44(4)：551～558；王静蓉，等，植物学报，1991，41(2)：209～212)，而截至目前，对连香树木质部边材中的次生代谢成分研究还未系统展开。

本发明以溶液提取、不同极性溶剂梯度萃取和色谱法分离等相组合的方法从连香树木质部边材中制备得到一种文献中从未报道过的8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷，本制备方法具有制备过程清洁高效、目标产物纯度高、操作简单易行等优势。

技术实现要素：

本发明的目的是提供一种文献中从未报道过的阿福豆苷衍生物，即8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷，该化合物对应的英文名为8-methoxyafzelin-4′-o-β-d-glucopyranoside。

本发明的第二个目的是提供从连香树木质部边材中高效制备8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷的方法。

本发明的技术方案概述如下：

下述结构式为8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷：

本发明中的阿福豆苷衍生物是一种浅黄色粉末，其分子式为c28h32o16，化学名为8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷，其对应的英文名为8-methoxyafzelin-4′-o-β-d-glucopyranoside。经检索，该阿福豆苷衍生物为文献中从未报道过的新化合物。

从连香树木质部边材中制备8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷的方法，按顺序包括如下特征步骤：

(1)取阴干的连香树木质部边材植物原料，粉碎后按料液质量比为1∶2～1∶6加入体积比为1∶3∶6的石油醚-乙醇-水溶液，常温提取或加热提取或超声波辅助提取1～8次，提取液过滤或离心除去不溶物，减压干燥后得连香树木质部边材粗提物；

(2)加入连香树木质部边材粗提物质量0.5～3倍的水，搅拌，然后依次用石油醚、正己烷、氯仿、乙酸乙酯萃取；

(3)取乙酸乙酯萃取液，真空减压干燥，得连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物；

(4)连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物经色谱法分离精制得到8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷。

对于上述制备方法需要说明的是：

上述步骤(1)中，所述提取用植物原料为连香树木质部边材；

上述步骤(1)中，所述提取用溶液为体积比为1∶3∶6的石油醚-乙醇-水溶液；

上述步骤(4)中，所述色谱分离方法为凝胶色谱法、硅胶色谱法、高效液相色谱法、高速逆流色谱法中的一种或几种组合。

本发明提出的制备方法具有原料易得、制备过程简单高效、目标产物纯度高等特点。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明作进一步详细的描述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能将本发明局限于这些具体实施方式。本领域技术人员应该意识到，本发明涵盖了权利要求书范围内所可能包括的所有改进方案、备选方案和等效方案。

实施例1：从连香树木质部边材中制备8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷

(1)取阴干的连香树木质部边材植物原料，粉碎后按料液质量比为1∶3加入体积比为1∶3∶6的石油醚-乙醇-水溶液，常温提取4次，提取液过滤除去不溶物，减压干燥后得连香树木质部边材粗提物；

(2)加入连香树木质部边材粗提物质量1倍的水，搅拌，然后依次用石油醚、正己烷、氯仿、乙酸乙酯萃取；

(3)取乙酸乙酯萃取液，真空减压干燥，得连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物；

(4)连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物经硅胶色谱和高效液相色谱法分离精制得到8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷。

实施例2：从连香树木质部边材中制备8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷

(1)取阴干的连香树木质部边材植物原料，粉碎后按料液质量比为1∶4加入体积比为1∶3∶6的石油醚-乙醇-水溶液，加热提取3次，离心除去不溶物，减压干燥后得连香树木质部边材粗提物；

(2)加入连香树木质部边材粗提物质量1.5倍的水，搅拌，然后依次用石油醚、正己烷、氯仿、乙酸乙酯萃取；

(3)取乙酸乙酯萃取液，真空减压干燥，得连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物；

(4)连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物经硅胶色谱和凝胶色谱法分离精制得到8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷。

该阿福豆苷衍生物的化学结构解析：

借助熔点测定仪，测得本发明中阿福豆苷衍生物的熔点为239～241℃，旋光度为-21.2°(c，0.5，meoh)。正性快原子轰击质谱positivefab-ms实验中，该化合物的[m+k]为m/z663、[m+na]为m/z647、[m+h]为m/z625，结合其他实验数据揭示本发明中阿福豆苷衍生物的分子式为c28h32o16。该阿福豆苷衍生物在氘代二甲基亚砜(dmso-d6)溶剂中的¹h(600mhz)及¹³c(150mhz)核磁共振谱数据如表1所示。根据该化合物的化学物理数据，特别是其¹h及¹³c核磁共振数据信息可知该化合物中包含着a环c-8及c环c-3位置上分别连接甲氧基和o-α-l-鼠李糖基的黄酮醇苷类化合物即8-甲氧基-阿福豆苷(8-methoxyafzelin)。该化合物的其他化学、物理及核磁共振等实验数据还充分表明该阿福豆苷衍生物分子中还连接着一个o-β-d-葡萄糖基单元(o-β-d-glucose)。通过该化合物的多键碳氢关系(hmbc)和异核多量子关系(hmqc)及其他二维图谱可推知其o-β-d-葡萄糖基单元结合在阿福豆苷b环c-4′位置。根据以上信息，该化合物的化学式被解析确定为8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷，其对应的英文名为8-methoxyafzelin-4′-o-β-d-glucopyranoside。

表1.化合物8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷的¹h(600mhz)及¹³c(150mhz)核磁共振实验数据(dmso-d6)

实施例3：从连香树木质部边材中制备8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷

(1)取阴干的连香树木质部边材植物原料，粉碎后按料液质量比为1∶5加入体积比为1∶3∶6的石油醚-乙醇-水溶液，超声波辅助提取2次，提取液过滤除去不溶物，减压干燥后得连香树木质部边材粗提物；

(2)加入连香树木质部边材粗提物质量2倍的水，搅拌，然后依次用石油醚、正己烷、氯仿、乙酸乙酯萃取；

(3)取乙酸乙酯萃取液，真空减压干燥，得连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物；

(4)连香树木质部边材乙酸乙酯萃取物经硅胶色谱和高速逆流色谱法分离精制得到8-甲氧基-4′-o-β-d-葡萄糖基阿福豆苷。