本发明属于生物工程和生物医药领域，具体涉及一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂及其制备方法。
背景技术：
免疫细胞(immunecell)是白细胞的俗称，包括淋巴细胞和各种吞噬细胞等，也特指能识别抗原、产生特异性免疫应答的淋巴细胞等。淋巴细胞是免疫系统的基本成分，在体内分布很广泛，主要是t淋巴细胞、b淋巴细胞受抗原刺激而被活化(activation)，分裂增殖、发生特异性免疫应答。除t淋巴细胞和b淋巴细胞外，还有k淋巴细胞和nk淋巴细胞，共四种类型。t淋巴细胞是一个多功能的细胞群。除淋巴细胞外，参与免疫应答的细胞还有浆细胞、粒细胞、肥大细胞、抗原呈递细胞及单核吞噬细胞系统的细胞。
然而现在对于癌症的治疗，自身的免疫细胞已经不能够维持患者自身免疫系统的正常运行，因此需要进行自体免疫细胞回输治疗，就是将患者自身具有抗病毒和抗肿瘤活性的细胞在体外激活和扩增处理，选择性产生高效低毒的抗病毒、抗肿瘤免疫细胞，然后，将这些细胞回输到患者体内，从而达到清除病毒和杀灭肿瘤细胞的目的。人体内数量众多分工明确的免疫细胞在保持人体内环境中发挥重要作用。淋巴细胞是免疫细胞中的精锐部队，而抗原提呈细胞是免疫细胞中的雷达部队。抗原提呈细胞一旦探测到机体危险信号，将会传递给淋巴细胞，使其能够快速反应并前往危险地带排除危险。在肿瘤和慢性病毒性肝炎患者体内，免疫细胞数量及活力不足，不能及时探测到肿瘤细胞和病毒入侵信号，恶变的肿瘤细胞和入侵的病毒不能被及时清除，导致疾病进一步恶化。细胞治疗此时成了激活自身免疫力的钥匙。即细胞治疗将患者体内受抑制的免疫细胞，主要是淋巴细胞和抗原提呈细胞取出，经过体外复制、激活过程，使它们的数量和活性得到大幅度提高，然后再回输到患者体内，从而发挥抗病毒、抗肿瘤的效应。
然而现有技术中的免疫细胞扩增的活化剂效果不太理想，培育扩增的免疫细胞数量低且质量差，并且用到的活化剂的成分随免疫细胞回输入患者体内，容易造成不良反应。
技术实现要素：
针对以上技术问题，本发明提供一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂及其制备方法。
本发明的技术方案为：一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂，所述新型活化剂包括以下重量组分：20-26％生物导电纳米纤维、1-3％发电细胞、3-4％凝胶混合溶液、9-11％复合激动剂、12-14％人工细胞膜、0.3-0.8％细胞膜激活物、8-10％特异性抗体，余量为培养基液；生物导电纳米纤维能够为作为复合激动剂的载体，还能够使免疫细胞和发电细胞进行攀附；发电细胞能够放电模拟人体环境生物电，并且可刺激免疫细胞扩增，人工细胞膜经过细胞膜激活物处理后能够与更多的特异性抗体进行粘度，从而提高免疫细胞与特异性抗体的结合率，最终提高免疫细胞的意外扩增率。
所述复合激动剂按照重量百分比包括：0.2-0.9％青蓝霉素a、0.1-0.3％环孢菌素、2-5％特异性半胱氨酸蛋白酶、1.3-2.5％银杏黄酮甙、3.6-5.4％白果内酯、0.7-1.4％三叶青提取物、0.4-0.7％木酚素、3.2-6.7％可溶性蛋白多糖，余量为白介素2；所述青蓝霉素a具有有效的抗真菌活性，并且青蓝霉素a能显著地增加t细胞上ctla-4的表达以及随后下调cd28的表达；所述白果内酯、特异性半胱氨酸蛋白酶具有免疫调节活性，诱导免疫细胞扩增；银杏黄酮甙能够使免疫细胞处于兴奋状态，可有效抑制其进入休眠，进而促进免疫细胞进行扩增；三叶青提取物能够纠正免疫系统的紊乱；木酚素能够激活免疫细胞受体活性，并且还具有良好的抗氧化性；可溶性蛋白是重要的渗透调节物质和营养物质，他们的增加和积累能提高细胞的保水能力，对细胞的生命物质及生物膜起到保护作用，此外，可溶性蛋白多糖可作为乳化稳定剂，使复合激动剂中的各个成分进行均匀混合，并且增强其稳定性；
所述培养基液按照重量百分比包括：4.5-6.8％脐带提取物、1.2-2.6％纤维蛋白原、0.5-1.2％凝血因子、0.3-0.6％三碘甲状腺原氨酸、3.5-5.0％％谷胱甘肽、4.7-5.3％壳寡糖、3.1-6.0％牛磺酸、2.0-4.5％维生素c、2.2-3.6％柠檬酸锌、1.5-3.7％尿囊素、2.6-4.9％不饱和脂肪酸、7.6-9.4％平衡盐溶液，余量为dmem基础培养介质；脐带提取物能偶为免疫细胞以及发电细胞提供营养物质；尿囊素具有抗敏舒缓的作用，能够减小人体对体外扩增后的免疫细胞的过敏反应。
进一步地，所述生物导电纳米纤维包括以下重量组份：40-60份碳纳米管、11-13份聚多巴胺、7-9份聚吡咯、30-50份n-甲基吡咯烷酮、24-35份丝素蛋白、13-22份胶原、8-10份乳酸乙醇酸共聚物，其中，丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物具有良好的生物延展性，并且可降解，不会对人体及体外的细胞产生危害；碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯为导电材料，能够将发电细胞发电进行传导，进而促进免疫细胞进行扩增。
更进一步地，所述生物导电纳米纤维的制备方法包括以下步骤：
s1：将所述碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯溶解在所述n-甲基吡咯烷酮中，形成导电材料溶液；
s2：将所述丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物进行混合得到生物材料溶液；将所述导电材料溶液与所述生物材料溶液利用超声波进行分散混合均匀，得到生物导电材料溶液；
s3：再利用静电纺丝技术将所述生物导电材料溶吹成生物导电纤维丝；
s4：将所述生物导电纤维丝放置在真空干燥箱内，在60-80℃温度下低温干燥24-30h，即得生物导电纳米纤维。
进一步地，所述发电细胞来自电鳗、电鳐、电鲶中的任意一种。
进一步地，所述凝胶混合溶液是由水凝胶原蛋白胶、透明质酸、3d聚左旋乳酸按照重量比为3:1:0.5混合而成。
进一步地，所述人工细胞膜是由以下重量组分组成：34-40％卵磷脂、12-15％胆固醇、0.1-0.5％抗坏血酸四异棕榈酸、1.2-2.3％维生素e酯、2.5-3.6％酯丙酮酸钠、1.3-1.8％鸟氨酸、1.0-1.6％脯氨酸、2.8-4.1％二硬脂酰磷脂酰甘油、余量为去离子水；所述维生素e酯具有抗氧化作用；鸟氨酸、脯氨酸作为亲水性辅助剂能覆盖在磷脂双层表面上，从而起到保护脂质体的作用。
进一步地，所述新型活化剂的制备方法包括以下步骤：
(1)负载复合激动剂：将所述白介素2、青蓝霉素a、环孢菌素、特异性半胱氨酸蛋白酶、银杏黄酮甙、白果内酯、三叶青提取物、木酚素、可溶性蛋白多糖按照上述比例进行混合，得到复合激动剂；再将所述生物导电纳米纤维裁切成2-5mm的生物导电纳米纤维棒并利用紫外线消毒处理10-20min，取消毒后的70-80％的生物导电纳米纤维棒与所述复合激动剂进行混合均匀，利用超声波进行分散负载，直至复合激动剂完全负载在生物导电纳米纤维棒上；
(2)制备液态人工细胞膜：将卵磷脂、胆固醇、抗坏血酸四异棕榈酸、维生素e酯按照上述比例进行混合形成疏水性混合物，所述疏水性混合物以1:2-3的体积比溶解在混合有机溶剂中，得到预混物；将所述预混物进行蒸发处理，去除所述混合有机溶剂，得到磷脂膜；再将所述酯丙酮酸钠、鸟氨酸、脯氨酸、二硬脂酰磷脂酰甘油溶解于所述去离子水中，形成亲水性混合物；再将所述亲水性混合物与所述磷脂膜进行混合，机械搅拌3-5min，得到液态人工细胞膜；
(3)包膜处理：将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒加入到所述液态人工细胞膜中，并利用超声波包覆技术，将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒外层均匀包覆上液态人工细胞膜，得到包膜生物导电纳米纤维棒；
(4)添加特异性抗体：将所述细胞膜激活物加入到所述包膜生物导电纳米纤维棒中，培养活化1-2h后加入所述特异性抗体，使特异性抗体与包膜生物导电纳米纤维棒进行30-60min特异结合，得到带有抗体的生物导电纳米纤维棒，待用；
(5)种植发电细胞：从所述电鳗、电鳐、电鲶中分离发电细胞，并将所述发电细胞与所述凝胶混合溶液按照上述比例进行混合均匀，得到混合体；并利用细胞种植术将所述混合体种植在剩下的20-30％的生物导电纳米纤维棒上，培养1-3h，得到带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒，待用；
(6)制备活化剂：将所述脐带提取物、纤维蛋白原、凝血因子、三碘甲状腺原氨酸、谷胱甘肽、壳寡糖、牛磺酸、维生素c、柠檬酸锌、尿囊素、3d聚左旋乳酸、不饱和脂肪酸、平衡盐溶液按照上述比例加入到所述dmem基础培养介质中，形成形成培养基液；再将所述所述带有抗体的生物导电纳米纤维棒与带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒分别加入到所述培养基液中，得到活化剂。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：本发明利用一大部分生物导电纳米纤维对复合激动剂进行负载，然后再利用人工细胞膜进行包裹，最后利用细胞膜激活物处理活化后，在其表面结合更多的特异性抗体；将发电细胞与凝胶混合溶液利用细胞种植术种植在另一小部分生物导电纳米纤维上，形成生物电刺激原，然后将两部分生物导电纳米纤维均放置入培养基液中构成免疫细胞扩增的新型活化剂。其中，本发明利用发电细胞模拟人体环境生物电，并且可刺激免疫细胞扩增；并且，复合激动剂中的青蓝霉素a具有有效的抗真菌活性，并且青蓝霉素a能显著地增加t细胞上ctla-4的表达以及随后下调cd28的表达；白果内酯、特异性半胱氨酸蛋白酶具有免疫调节活性，诱导免疫细胞扩增；银杏黄酮甙能够使免疫细胞处于兴奋状态，可有效抑制其进入休眠，进而促进免疫细胞进行扩增；三叶青提取物能够纠正免疫系统的紊乱；木酚素能够激活免疫细胞受体活性，并且还具有良好的抗氧化性；可溶性蛋白是重要的渗透调节物质和营养物质，他们的增加和积累能提高细胞的保水能力，对细胞的生命物质及生物膜起到保护作用，此外，可溶性蛋白多糖可作为乳化稳定剂，使复合激动剂中的各个成分进行均匀混合，并且增强其稳定性。总之，本发明能将免疫细胞的体外增殖率提高10-15倍，在药物研究和临床治疗中具有积极意义。
具体实施方式
下面结合具体实施例来进一步详细说明本发明，但实施例不限制本发明的范围，本发明的范围与核心内容依据权利要求书加以确定。
实施例1
一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂，所述新型活化剂包括以下重量组分：20％生物导电纳米纤维、1％发电细胞、3％凝胶混合溶液、9％复合激动剂、12％人工细胞膜、0.3％细胞膜激活物、8％特异性抗体，余量为培养基液；其中，所述发电细胞来自电鳗。生物导电纳米纤维能够为作为复合激动剂的载体，还能够使免疫细胞和发电细胞进行攀附；发电细胞能够放电模拟人体环境生物电，并且可刺激免疫细胞扩增，人工细胞膜经过细胞膜激活物处理后能够与更多的特异性抗体进行粘度，从而提高免疫细胞与特异性抗体的结合率，最终提高免疫细胞的意外扩增率。
其中，所述复合激动剂按照重量百分比包括：0.2％青蓝霉素a、0.1％环孢菌素、2％特异性半胱氨酸蛋白酶、1.3％银杏黄酮甙、3.6％白果内酯、0.7％三叶青提取物、0.4％木酚素、3.2％可溶性蛋白多糖，余量为白介素2；所述青蓝霉素a具有有效的抗真菌活性，并且青蓝霉素a能显著地增加t细胞上ctla-4的表达以及随后下调cd28的表达；所述白果内酯、特异性半胱氨酸蛋白酶具有免疫调节活性，诱导免疫细胞扩增；银杏黄酮甙能够使免疫细胞处于兴奋状态，可有效抑制其进入休眠，进而促进免疫细胞进行扩增；三叶青提取物能够纠正免疫系统的紊乱；木酚素能够激活免疫细胞受体活性，并且还具有良好的抗氧化性；可溶性蛋白是重要的渗透调节物质和营养物质，他们的增加和积累能提高细胞的保水能力，对细胞的生命物质及生物膜起到保护作用，此外，可溶性蛋白多糖可作为乳化稳定剂，使复合激动剂中的各个成分进行均匀混合，并且增强其稳定性；
其中，所述培养基液按照重量百分比包括：4.5％脐带提取物、1.2％纤维蛋白原、0.5％凝血因子、0.3％三碘甲状腺原氨酸、3.5％％谷胱甘肽、4.7％壳寡糖、3.1％牛磺酸、2.0％维生素c、2.2％柠檬酸锌、1.5％尿囊素、2.6％不饱和脂肪酸、7.6％平衡盐溶液，余量为dmem基础培养介质；脐带提取物能偶为免疫细胞以及发电细胞提供营养物质；尿囊素具有抗敏舒缓的作用，能够减小人体对体外扩增后的免疫细胞的过敏反应。
其中，所述生物导电纳米纤维包括以下重量组份：40份碳纳米管、11份聚多巴胺、7份聚吡咯、30份n-甲基吡咯烷酮、24份丝素蛋白、13份胶原、8份乳酸乙醇酸共聚物，其中，丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物具有良好的生物延展性，并且可降解，不会对人体及体外的细胞产生危害；碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯为导电材料，能够将发电细胞发电进行传导，进而促进免疫细胞进行扩增。所述生物导电纳米纤维的制备方法包括以下步骤：
s1：将所述碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯溶解在所述n-甲基吡咯烷酮中，形成导电材料溶液；
s2：将所述丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物进行混合得到生物材料溶液；将所述导电材料溶液与所述生物材料溶液利用超声波进行分散混合均匀，得到生物导电材料溶液；
s3：再利用静电纺丝技术将所述生物导电材料溶吹成生物导电纤维丝；
s4：将所述生物导电纤维丝放置在真空干燥箱内，在60℃温度下低温干燥24h，即得生物导电纳米纤维。
其中，所述凝胶混合溶液是由水凝胶原蛋白胶、透明质酸、3d聚左旋乳酸按照重量比为3:1:0.5混合而成。
其中，所述人工细胞膜是由以下重量组分组成：34％卵磷脂、12％胆固醇、0.1％抗坏血酸四异棕榈酸、1.2％维生素e酯、2.5％酯丙酮酸钠、1.3％鸟氨酸、1.0％脯氨酸、2.8％二硬脂酰磷脂酰甘油、余量为去离子；水所述维生素e酯具有抗氧化作用；鸟氨酸、脯氨酸作为亲水性辅助剂能覆盖在磷脂双层表面上，从而起到保护脂质体的作用。
一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂的制备方法包括以下步骤：
(1)负载复合激动剂：将所述白介素2、青蓝霉素a、环孢菌素、特异性半胱氨酸蛋白酶、银杏黄酮甙、白果内酯、三叶青提取物、木酚素、可溶性蛋白多糖按照上述比例进行混合，得到复合激动剂；再将所述生物导电纳米纤维裁切成2mm的生物导电纳米纤维棒并利用紫外线消毒处理10min，取消毒后的70％的生物导电纳米纤维棒与所述复合激动剂进行混合均匀，利用超声波进行分散负载，直至复合激动剂完全负载在生物导电纳米纤维棒上；
(2)制备液态人工细胞膜：将卵磷脂、胆固醇、抗坏血酸四异棕榈酸、维生素e酯按照上述比例进行混合形成疏水性混合物，所述疏水性混合物以1:2的体积比溶解在混合有机溶剂中，得到预混物；将所述预混物进行蒸发处理，去除所述混合有机溶剂，得到磷脂膜；再将所述酯丙酮酸钠、鸟氨酸、脯氨酸、二硬脂酰磷脂酰甘油溶解于所述去离子水中，形成亲水性混合物；再将所述亲水性混合物与所述磷脂膜进行混合，机械搅拌3min，得到液态人工细胞膜；
(3)包膜处理：将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒加入到所述液态人工细胞膜中，并利用超声波包覆技术，将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒外层均匀包覆上液态人工细胞膜，得到包膜生物导电纳米纤维棒；
(4)添加特异性抗体：将所述细胞膜激活物加入到所述包膜生物导电纳米纤维棒中，培养活化1h后加入所述特异性抗体，使特异性抗体与包膜生物导电纳米纤维棒进行30min特异结合，得到带有抗体的生物导电纳米纤维棒，待用；
(5)种植发电细胞：从所述电鳗中分离发电细胞，并将所述发电细胞与所述凝胶混合溶液按照上述比例进行混合均匀，得到混合体；并利用细胞种植术将所述混合体种植在剩下的20％的生物导电纳米纤维棒上，培养1h，得到带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒，待用；
(6)制备活化剂：将所述脐带提取物、纤维蛋白原、凝血因子、三碘甲状腺原氨酸、谷胱甘肽、壳寡糖、牛磺酸、维生素c、柠檬酸锌、尿囊素、3d聚左旋乳酸、不饱和脂肪酸、平衡盐溶液按照上述比例加入到所述dmem基础培养介质中，形成形成培养基液；再将所述所述带有抗体的生物导电纳米纤维棒与带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒分别加入到所述培养基液中，得到活化剂。
实施例2
一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂，所述新型活化剂包括以下重量组分：23％生物导电纳米纤维、2％发电细胞、3.5％凝胶混合溶液、10％复合激动剂、13％人工细胞膜、0.55％细胞膜激活物、9％特异性抗体，余量为培养基液；其中，所述发电细胞来自电鳐。生物导电纳米纤维能够为作为复合激动剂的载体，还能够使免疫细胞和发电细胞进行攀附；发电细胞能够放电模拟人体环境生物电，并且可刺激免疫细胞扩增，人工细胞膜经过细胞膜激活物处理后能够与更多的特异性抗体进行粘度，从而提高免疫细胞与特异性抗体的结合率，最终提高免疫细胞的意外扩增率。
其中，所述复合激动剂按照重量百分比包括：0.22％青蓝霉素a、0.2％环孢菌素、3.5％特异性半胱氨酸蛋白酶、1.9％银杏黄酮甙、4.5％白果内酯、1.0％三叶青提取物、0.55％木酚素、4.9％可溶性蛋白多糖，余量为白介素2；所述青蓝霉素a具有有效的抗真菌活性，并且青蓝霉素a能显著地增加t细胞上ctla-4的表达以及随后下调cd28的表达；所述白果内酯、特异性半胱氨酸蛋白酶具有免疫调节活性，诱导免疫细胞扩增；银杏黄酮甙能够使免疫细胞处于兴奋状态，可有效抑制其进入休眠，进而促进免疫细胞进行扩增；三叶青提取物能够纠正免疫系统的紊乱；木酚素能够激活免疫细胞受体活性，并且还具有良好的抗氧化性；可溶性蛋白是重要的渗透调节物质和营养物质，他们的增加和积累能提高细胞的保水能力，对细胞的生命物质及生物膜起到保护作用，此外，可溶性蛋白多糖可作为乳化稳定剂，使复合激动剂中的各个成分进行均匀混合，并且增强其稳定性；
其中，所述培养基液按照重量百分比包括：5.65％脐带提取物、1.9％纤维蛋白原、0.85％凝血因子、0.45％三碘甲状腺原氨酸、4.25％％谷胱甘肽、5.0％壳寡糖、4.55％牛磺酸、3.25％维生素c、2.9％柠檬酸锌、2.6％尿囊素、3.75％不饱和脂肪酸、8.5％平衡盐溶液，余量为dmem基础培养介质；脐带提取物能偶为免疫细胞以及发电细胞提供营养物质；尿囊素具有抗敏舒缓的作用，能够减小人体对体外扩增后的免疫细胞的过敏反应。
其中，所述生物导电纳米纤维包括以下重量组份：50份碳纳米管、12份聚多巴胺、8份聚吡咯、40份n-甲基吡咯烷酮、29.5份丝素蛋白、17.5份胶原、9份乳酸乙醇酸共聚物，其中，丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物具有良好的生物延展性，并且可降解，不会对人体及体外的细胞产生危害；碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯为导电材料，能够将发电细胞发电进行传导，进而促进免疫细胞进行扩增。所述生物导电纳米纤维的制备方法包括以下步骤：
s1：将所述碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯溶解在所述n-甲基吡咯烷酮中，形成导电材料溶液；
s2：将所述丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物进行混合得到生物材料溶液；将所述导电材料溶液与所述生物材料溶液利用超声波进行分散混合均匀，得到生物导电材料溶液；
s3：再利用静电纺丝技术将所述生物导电材料溶吹成生物导电纤维丝；
s4：将所述生物导电纤维丝放置在真空干燥箱内，在70℃温度下低温干燥27h，即得生物导电纳米纤维。
其中，所述凝胶混合溶液是由水凝胶原蛋白胶、透明质酸、3d聚左旋乳酸按照重量比为3:1:0.5混合而成。
其中，所述人工细胞膜是由以下重量组分组成：37％卵磷脂、13.5％胆固醇、0.3％抗坏血酸四异棕榈酸、1.75％维生素e酯、3.05％酯丙酮酸钠、1.55％鸟氨酸、1.3％脯氨酸、3.45％二硬脂酰磷脂酰甘油、余量为去离子；水所述维生素e酯具有抗氧化作用；鸟氨酸、脯氨酸作为亲水性辅助剂能覆盖在磷脂双层表面上，从而起到保护脂质体的作用。
一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂的制备方法包括以下步骤：
(1)负载复合激动剂：将所述白介素2、青蓝霉素a、环孢菌素、特异性半胱氨酸蛋白酶、银杏黄酮甙、白果内酯、三叶青提取物、木酚素、可溶性蛋白多糖按照上述比例进行混合，得到复合激动剂；再将所述生物导电纳米纤维裁切成3.5mm的生物导电纳米纤维棒并利用紫外线消毒处理15min，取消毒后的75％的生物导电纳米纤维棒与所述复合激动剂进行混合均匀，利用超声波进行分散负载，直至复合激动剂完全负载在生物导电纳米纤维棒上；
(2)制备液态人工细胞膜：将卵磷脂、胆固醇、抗坏血酸四异棕榈酸、维生素e酯按照上述比例进行混合形成疏水性混合物，所述疏水性混合物以1:2.5的体积比溶解在混合有机溶剂中，得到预混物；将所述预混物进行蒸发处理，去除所述混合有机溶剂，得到磷脂膜；再将所述酯丙酮酸钠、鸟氨酸、脯氨酸、二硬脂酰磷脂酰甘油溶解于所述去离子水中，形成亲水性混合物；再将所述亲水性混合物与所述磷脂膜进行混合，机械搅拌4min，得到液态人工细胞膜；
(3)包膜处理：将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒加入到所述液态人工细胞膜中，并利用超声波包覆技术，将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒外层均匀包覆上液态人工细胞膜，得到包膜生物导电纳米纤维棒；
(4)添加特异性抗体：将所述细胞膜激活物加入到所述包膜生物导电纳米纤维棒中，培养活化1.5h后加入所述特异性抗体，使特异性抗体与包膜生物导电纳米纤维棒进行45min特异结合，得到带有抗体的生物导电纳米纤维棒，待用；
(5)种植发电细胞：从所述电鳐中分离发电细胞，并将所述发电细胞与所述凝胶混合溶液按照上述比例进行混合均匀，得到混合体；并利用细胞种植术将所述混合体种植在剩下的25％的生物导电纳米纤维棒上，培养2h，得到带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒，待用；
(6)制备活化剂：将所述脐带提取物、纤维蛋白原、凝血因子、三碘甲状腺原氨酸、谷胱甘肽、壳寡糖、牛磺酸、维生素c、柠檬酸锌、尿囊素、3d聚左旋乳酸、不饱和脂肪酸、平衡盐溶液按照上述比例加入到所述dmem基础培养介质中，形成形成培养基液；再将所述所述带有抗体的生物导电纳米纤维棒与带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒分别加入到所述培养基液中，得到活化剂。
实施例3
一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂，所述新型活化剂包括以下重量组分：26％生物导电纳米纤维、3％发电细胞、4％凝胶混合溶液、11％复合激动剂、14％人工细胞膜、0.8％细胞膜激活物、10％特异性抗体，余量为培养基液；其中，所述发电细胞来自电鲶。生物导电纳米纤维能够为作为复合激动剂的载体，还能够使免疫细胞和发电细胞进行攀附；发电细胞能够放电模拟人体环境生物电，并且可刺激免疫细胞扩增，人工细胞膜经过细胞膜激活物处理后能够与更多的特异性抗体进行粘度，从而提高免疫细胞与特异性抗体的结合率，最终提高免疫细胞的意外扩增率。
其中，所述复合激动剂按照重量百分比包括：0.9％青蓝霉素a、0.3％环孢菌素、5％特异性半胱氨酸蛋白酶、2.5％银杏黄酮甙、5.4％白果内酯、1.4％三叶青提取物、0.7％木酚素、6.7％可溶性蛋白多糖，余量为白介素2；所述青蓝霉素a具有有效的抗真菌活性，并且青蓝霉素a能显著地增加t细胞上ctla-4的表达以及随后下调cd28的表达；所述白果内酯、特异性半胱氨酸蛋白酶具有免疫调节活性，诱导免疫细胞扩增；银杏黄酮甙能够使免疫细胞处于兴奋状态，可有效抑制其进入休眠，进而促进免疫细胞进行扩增；三叶青提取物能够纠正免疫系统的紊乱；木酚素能够激活免疫细胞受体活性，并且还具有良好的抗氧化性；可溶性蛋白是重要的渗透调节物质和营养物质，他们的增加和积累能提高细胞的保水能力，对细胞的生命物质及生物膜起到保护作用，此外，可溶性蛋白多糖可作为乳化稳定剂，使复合激动剂中的各个成分进行均匀混合，并且增强其稳定性；
其中，所述培养基液按照重量百分比包括：6.8％脐带提取物、2.6％纤维蛋白原、1.2％凝血因子、0.6％三碘甲状腺原氨酸、5.0％％谷胱甘肽、5.3％壳寡糖、6.0％牛磺酸、4.5％维生素c、3.6％柠檬酸锌、3.7％尿囊素、4.9％不饱和脂肪酸、9.4％平衡盐溶液，余量为dmem基础培养介质；脐带提取物能偶为免疫细胞以及发电细胞提供营养物质；尿囊素具有抗敏舒缓的作用，能够减小人体对体外扩增后的免疫细胞的过敏反应。
其中，所述生物导电纳米纤维包括以下重量组份：60份碳纳米管、13份聚多巴胺、9份聚吡咯、50份n-甲基吡咯烷酮、35份丝素蛋白、22份胶原、10份乳酸乙醇酸共聚物，其中，丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物具有良好的生物延展性，并且可降解，不会对人体及体外的细胞产生危害；碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯为导电材料，能够将发电细胞发电进行传导，进而促进免疫细胞进行扩增。所述生物导电纳米纤维的制备方法包括以下步骤：
s1：将所述碳纳米管、聚多巴胺、聚吡咯溶解在所述n-甲基吡咯烷酮中，形成导电材料溶液；
s2：将所述丝素蛋白、胶原、乳酸乙醇酸共聚物进行混合得到生物材料溶液；将所述导电材料溶液与所述生物材料溶液利用超声波进行分散混合均匀，得到生物导电材料溶液；
s3：再利用静电纺丝技术将所述生物导电材料溶吹成生物导电纤维丝；
s4：将所述生物导电纤维丝放置在真空干燥箱内，在80℃温度下低温干燥30h，即得生物导电纳米纤维。
其中，所述凝胶混合溶液是由水凝胶原蛋白胶、透明质酸、3d聚左旋乳酸按照重量比为3:1:0.5混合而成。
其中，所述人工细胞膜是由以下重量组分组成：40％卵磷脂、15％胆固醇、0.5％抗坏血酸四异棕榈酸、2.3％维生素e酯、3.6％酯丙酮酸钠、1.8％鸟氨酸、1.6％脯氨酸、4.1％二硬脂酰磷脂酰甘油、余量为去离子；水所述维生素e酯具有抗氧化作用；鸟氨酸、脯氨酸作为亲水性辅助剂能覆盖在磷脂双层表面上，从而起到保护脂质体的作用。
一种用于免疫细胞扩增的新型活化剂的制备方法包括以下步骤：
(1)负载复合激动剂：将所述白介素2、青蓝霉素a、环孢菌素、特异性半胱氨酸蛋白酶、银杏黄酮甙、白果内酯、三叶青提取物、木酚素、可溶性蛋白多糖按照上述比例进行混合，得到复合激动剂；再将所述生物导电纳米纤维裁切成5mm的生物导电纳米纤维棒并利用紫外线消毒处理20min，取消毒后的80％的生物导电纳米纤维棒与所述复合激动剂进行混合均匀，利用超声波进行分散负载，直至复合激动剂完全负载在生物导电纳米纤维棒上；
(2)制备液态人工细胞膜：将卵磷脂、胆固醇、抗坏血酸四异棕榈酸、维生素e酯按照上述比例进行混合形成疏水性混合物，所述疏水性混合物以1:3的体积比溶解在混合有机溶剂中，得到预混物；将所述预混物进行蒸发处理，去除所述混合有机溶剂，得到磷脂膜；再将所述酯丙酮酸钠、鸟氨酸、脯氨酸、二硬脂酰磷脂酰甘油溶解于所述去离子水中，形成亲水性混合物；再将所述亲水性混合物与所述磷脂膜进行混合，机械搅拌5min，得到液态人工细胞膜；
(3)包膜处理：将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒加入到所述液态人工细胞膜中，并利用超声波包覆技术，将负载有复合激动剂的生物导电纳米纤维棒外层均匀包覆上液态人工细胞膜，得到包膜生物导电纳米纤维棒；
(4)添加特异性抗体：将所述细胞膜激活物加入到所述包膜生物导电纳米纤维棒中，培养活化2h后加入所述特异性抗体，使特异性抗体与包膜生物导电纳米纤维棒进行60min特异结合，得到带有抗体的生物导电纳米纤维棒，待用；
(5)种植发电细胞：从所述电鲶中分离发电细胞，并将所述发电细胞与所述凝胶混合溶液按照上述比例进行混合均匀，得到混合体；并利用细胞种植术将所述混合体种植在剩下的30％的生物导电纳米纤维棒上，培养3h，得到带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒，待用；
(6)制备活化剂：将所述脐带提取物、纤维蛋白原、凝血因子、三碘甲状腺原氨酸、谷胱甘肽、壳寡糖、牛磺酸、维生素c、柠檬酸锌、尿囊素、3d聚左旋乳酸、不饱和脂肪酸、平衡盐溶液按照上述比例加入到所述dmem基础培养介质中，形成形成培养基液；再将所述所述带有抗体的生物导电纳米纤维棒与带有发电细胞的生物导电纳米纤维棒分别加入到所述培养基液中，得到活化剂。
结果分析
以本发明的实施例1-3为实验组1-3，常规活化剂为对比组，利用细胞集落技术标准及技术校正公式对体外扩增的免疫细胞进行计数，并采用spss10.0统计软件进行统计处理，计量资料以
表1免疫细胞体外扩增倍数(
由上表可以看出，实验组1-3在各个时间点均显著高于对照组，到第4周时，脐带血造血干细胞扩增高达10.91-15.31倍，而对照组只增加了3.12倍。
尽管已参照其具体实施方案描述和阐明了本发明，但本领域技术人员会认识到，可以在不背离本发明的精神和范围的情况下对其作出各种改变、修改和取代。因此，本发明意在仅受下列权利要求的范围限制且这些权利要求应在合理的程度上尽可能广义地解释。