本发明涉及生物医药领域，特别涉及一种具有ampk激动活性的黄酮类化合物，本发明还涉及该类化合物的制备方法及其作为ampk激动剂的医药用途。
背景技术：
：ampk(腺苷酸活化蛋白激酶)是调控机体能量代谢及炎症反应的关键激酶，其磷酸化激活可克服胰岛素抵抗、降血糖、降血脂(通过抑制脂肪酸及胆固醇的合成)、抗炎、抗凋亡、抗纤维化、促进线粒体合成、增强线粒体的氧化代谢、抗衰老和抗肿瘤等(physiol.rev.2009，89，1025)。然而，由于安全性或有效性的原因，在研的ampk激动剂进入临床研究的化合物寥寥无几。例如，广谱ampk-β亚基激动剂mk-8722尽管可以降血糖，但在大鼠和猴子实验中发现动物心脏发生不可逆性心肌肥厚副作用(science2017，357，507)。而选择性的ampk-β1亚基激动剂pf-249则只降血脂，但不具备降血糖活性(cellmetab.2017，25，1147)。综上所述，临床上亟需开发活性高、毒副作用小的新型ampk激动剂。技术实现要素：本发明的目的是提供一种具有ampk激动活性的黄酮类化合物。本发明的另一个目的是提供所述黄酮类化合物作为ampk激动剂的医药用途。该类化合物在体外生化水平和细胞水平均对ampk具有显著的激动活性，可能通过抑制线粒体complexi活性而激活ampk信号通路，因而可用于制备预防或治疗ampk介导的多种疾病的药物。为实现目的，本发明的技术方案如下：本发明所述的如下式(i)所示的化合物或其药学上可接受的盐或酯或溶剂化物：其中，a为黄酮或者异黄酮；r1、r2为各自单独取代的卤素、甲基、乙基或h；x为-o，-nh，-r4nh，-r4，其中r4为0-3个碳的烷基；y为-n，-ch；r3为苄基，苯甲酰基，苯磺酰基，亚甲基嘧啶，嘧啶甲酰基等任意取代或非取代的芳基，杂芳基，环烷基、环烯基、杂环烷基、杂环烯基、烷基、烯基、或炔基。在某些实施方案中，本发明的化合物是表1所示的化合物或其药学上可接受的盐或酯或溶剂化物：表1、化合物的结构与命名本发明的化合物也可作为药用盐。该盐可为下列酸中的至少一种的酸盐：半乳糖二酸、d-葡糖醛酸、甘油磷酸、马尿酸、羟乙磺酸、乳糖酸、马来酸、1，5-萘二磺酸、萘-2-磺酸、新戊酸、对苯二甲酸、硫氰酸、胆酸、正十二烷基硫酸、苯磺酸、柠檬酸、d-葡萄糖，乙醇酸、乳酸、苹果酸、丙二酸、扁桃酸、磷酸、丙酸、盐酸、硫酸、酒石酸、琥珀酸、甲酸、氢碘酸、氢溴酸、甲烷磺酸、烟酸、硝酸、乳清酸、草酸、苦味酸、l-焦谷氨酸、糖精酸、水杨酸、龙胆酸、对甲苯磺酸、戊酸、棕榈酸、葵二酸、硬脂酸、月桂酸、乙酸、己二酸、碳酸、4-苯磺酸、乙烷二磺酸、乙基琥珀酸、富马酸、3-羟基萘-2-甲酸、1-羟基萘-2-甲酸、油酸、十一碳烯酸、抗坏血酸、樟脑酸、樟脑磺酸、二氯乙酸、乙烷磺酸。本发明的化合物也可以按酯、前药形式、n-氧化物或其溶剂化物组成药物组合物。本发明人发现，如上式(i)化合物或其药学上可接受的盐或酯或溶剂化物是新型ampk激动剂，其可能通过抑制线粒体complexi复合物而激活ampk信号通路，因而可用于制备预防和治疗以下多种疾病的药物。本发明的化合物可用于预防和治疗多种代谢异常相关疾病和心脑血管疾病，包括：胰岛素抵抗、代谢综合征、1型和2型糖尿病、高脂血症、肥胖症、动脉粥样硬化、心肌缺血、心肌梗死、心律失常、冠心病、高血压、心衰、心肌肥大、心肌炎、糖尿病并发症(包括糖尿病心肌病、糖尿病肾病、视网膜病变、神经病和伤口愈合延迟等)、非酒精性脂肪肝、非酒精性脂肪性肝炎、酒精性脂肪肝、肝硬化、高尿酸血症、痛风、骨质疏松、中风和脑梗死等。本发明的化合物可用于预防和治疗各种炎症疾病、自身免疫性疾病、器官纤维化疾病、神经损伤性疾病和病原体感染所致的继发性疾病，例如，肺炎、肺结核、炎性肠病(如克罗恩病和溃疡性结肠炎)、白塞氏病、哮喘、慢性阻塞性肺病、慢性支气管炎、肺气肿、闭塞性细支气管炎、系统性红斑狼疮、类风湿关节炎、脊椎关节炎、骨关节炎、滑膜炎、肌腱炎、血栓闭塞性脉管炎、静脉炎、间歇性跛行、瘢痕瘤、银屑病、鱼鳞癣、大疱性类天疱疮、皮炎、接触性皮炎、胰腺炎、慢性肾炎、膀胱炎、脑膜炎、胃炎、败血症、坏疽性脓皮症、葡萄膜炎、特发性肺纤维化、囊性纤维化、帕金森病、阿尔茨海默病、α-共核蛋白病、抑郁症、多发性硬化症、肌萎缩侧索硬化病、纤维肌痛综合症、神经痛、唐氏综合征、哈勒沃登-施帕病、亨廷顿舞蹈病和威尔逊病等。本发明的化合物可用于治疗细胞增殖不足或在其它细胞增殖障碍、外伤和老化引起的细胞衰老或凋亡保护作用。例如，变性疾病、生长缺乏、损伤、身体外伤和其中神经酰胺在细胞内蓄积的疾病。本发明的化合物可用于治疗和调节线粒体功能障碍和紊乱疾病，包括：肌无力、肌阵挛、运动不耐受、卡恩斯-赛尔综合征、慢性疲乏综合征、利氏综合征、线粒体肌病-脑病-高乳酸血症、中风综合征和中风样发作。同样，此类化合物也可用于治疗肌肉营养不良状态，例如，杜氏肌营养不良、贝壳肌营养不良和弗立德希氏共济失调。本发明的化合物具有抗肿瘤作用。所述肿瘤包括但不限于：骨癌、急性骨髓性白血病、慢性骨髓性白血病、急性淋巴细胞系白血病、慢性淋巴细胞系白血病、骨髓增生性疾病、多发性骨髓瘤、骨髓增生异常综合征、霍奇金氏淋巴瘤、非霍奇金氏淋巴瘤、血管瘤、肉芽瘤、黄瘤、脑膜肉瘤、神经胶质瘤、星形细胞瘤、成神经管细胞瘤、室管膜瘤、生殖细胞瘤(松果体瘤)、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质细胞瘤、神经鞘瘤、成视网膜细胞瘤、纤维神经瘤、肉瘤、食道癌、胃癌、胰腺癌、大肠癌、结肠癌、直肠癌、肾癌、前列腺癌、淋巴癌、睾丸癌、间质细胞癌、肺癌、肝癌、皮肤癌、恶性黑素瘤和基底细胞癌等。本发明还提供了一种预防和治疗上述疾病的药物组合物，其中含有治疗有效量的式(i)化合物或其药学上可接受的盐或酯或溶剂化物作为活性成份和药学上可接受的载体。可任意混合的载体根据剂型、给药形式等可以改变。载体的例子包括赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、矫味剂、香味剂、着色剂和甜味剂等。所述药物组合物可以是胶囊剂、散剂、片剂、颗粒剂、丸剂、注射剂、糖浆剂、口服液、吸入剂、软膏剂、栓剂和贴剂等制剂学上常规的制剂形式。如果需要，本发明的化合物可与一种或多种其他类型的预防或治疗上述疾病的药物联合使用，包括但不限于以下几种联合用药的情形。可选择与本发明的化合物联合使用的其他类型的预防或治疗药物可以是一种或多种抗糖尿病药物，包括二甲双胍、磺酰脲类降糖药(如格列苯脲和格列美脲等)、葡萄糖苷酶抑制剂(如阿卡波糖和米格列醇等)、pparγ激动剂(如吡格列酮和罗格列酮)、pparα/γ双重激动剂、二肽基肽酶iv(dpp-iv)抑制剂(如西格列汀、沙格列汀、阿格列汀和利格列汀等)、格列奈类降糖药(如瑞格列奈和那格列奈等)、sglt2抑制剂(如坎格列净、达格列净、恩格列净、依格列净、鲁格列净和托格列净等)、葡萄糖激酶激动剂(如hms5552等)、胰岛素、胰高血糖素样肽-1(glp-1)类药物(如埃塞那肽、利拉鲁肽、利司那肽、杜拉鲁肽、贝那鲁肽和阿必鲁肽等)、ptp1b抑制剂、糖原磷酸化酶抑制剂、葡萄糖-6-磷酸酶抑制剂、ampk激动剂、gpr40激动剂或gpr120激动剂。可选择与本发明的化合物联合使用的其他类型的预防或治疗药物可以是一种或多种减肥药物，包括氯卡色林、奥利司他和胰高血糖素样肽-1(glp-1)类药物(如埃塞那肽、利拉鲁肽、利司那肽、杜拉鲁肽、贝那鲁肽和阿必鲁肽等)等。可选择与本发明的化合物联合使用的其他类型的预防或治疗药物可以是一种或多种抗非酒精性脂肪性肝病药物，包括：ampk激动剂(如二甲双胍)、法尼酯x受体(fxr)激动剂(如奥贝胆酸、gs-9674、edp-305和ljn452等)、乙酰辅酶a羧化酶(acc)抑制剂(如gs-0976等)、凋亡信号调节激酶-1(ask1)抑制剂(如selonsertib等)、ppar激动剂(如elafibranor、saroglitazar、iva337和msdc-0602k等)、半胱天冬酶(caspase)抑制剂(如emricasan等)、硬脂酰辅酶a去饱和酶1(scd1)抑制剂(如aramchol等)、长效胰高血糖素样肽-1(glp-1)受体激动剂(如semaglutide等)、顶端钠依赖性胆盐转运体(asbt)抑制剂(如volixibat等)、血管粘附蛋白1(vap-1)抑制剂(如bi1467335等)、ccr5r阻断剂(如cenicriviroc等)和甲状腺激素受体β(thr-β)激动剂(如mgl-3196等)等。可选择与本发明的化合物联合使用的其他类型的预防或治疗药物可以是一种或多种降血脂药物，包括烟酸、他汀类药物(如洛伐他丁、辛伐他汀、普伐他汀、美伐他汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、西立伐他汀、罗伐他汀和pitavastatin)、胆固醇吸收抑制剂(如依折麦布等)、贝特类药物(如氯贝特、苯扎贝特、非诺贝特等)、pcsk9抑制剂(如evolocumab和alirocumab等)、cetp抑制剂(如anacetrapib等)、ampk激动剂和acc抑制剂(如gs-0976等)等。本发明的化合物的制备可参照以下合成路线或改进的方法进行。合成路线1.合成路线2.合成路线3.合成路线4.在上述合成路线中，r1、r2、r3的定义与上述式(i)化合物中的定义一致。本发明制备的结构如式(i)所示的化合物具有显著的ampk激动活性，且至少是部分通过抑制线粒体complexi而起作用的。本发明具有式(i)结构的化合物可应用于制备有机体中ampk相关疾病的防治药物，例如可用于防治糖尿病及其并发症、高血脂症及非酒精性脂肪性肝病、心肌病和心力衰竭等。附图说明图1是化合物对hepg2细胞ampk磷酸化的影响图：不同浓度的化合物25处理hepg2细胞24小时后pampk和ampk表达情况。图2是化合物对complexi活性的影响图：不同浓度的化合物25对complexi的抑制情况。具体实施方式下面通过实施例具体说明本发明的内容。在本发明中，以下所述的实施例是为了更好地阐述本发明，并不是用来限制本发明的范围。在不背离本发明的精神和范围的前提下，可以对本发明进行各种变化和修饰。实施例17-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基)-3-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物1)取苯乙酸(5.4g，0.40mol)和无水氯化锌(3.2g，0.032mol)置于反应瓶中，油浴加热至120℃，加入间苯二酚(1.778g，0.016mol)。加热3小时后，向反应液中加入10％乙酸钠水溶液(50ml)，转移至分液漏斗中，以乙酸乙酯(50ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得黄色液体，硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝9∶1)纯化，得化合物i-3(黄色固体，2.64g)。取化合物i-3(1g，4.4mmol)溶于无水dmf(5ml)，室温下缓慢滴加三氯氧磷(2.85ml)，滴加完毕后升温至70℃反应2小时。将反应液倒入冰水(50ml)中，冷却该处理过的反应液并抽滤，收集粗品固体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)纯化，得化合物1-4(黄色固体，184mg)。取化合物i-4(330mg，0.46mmol)和碳酸钾(960mg，2.3mmol)置于dmf(10ml)中，室温下搅拌半小时，然后加入溴乙酸乙酯(1ml)，70℃反应2小时，加入水(40ml)稀释，转移至分液漏斗中，以乙酸乙酯(30ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得黄色液体，硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)纯化，得化合物i-5(白色固体，468mg)。取化合物i-5(205mg，0.63mmol)溶于二氯甲烷(9ml)和甲醇(1ml)溶液中，加入2n氢氧化钠的甲醇溶液(5ml)，室温搅拌过夜。将反应液用1n盐酸的水溶液调至酸性，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得化合物i-6(黄色固体，84mg)。取化合物i-6(84mg，0.29mmol)溶于dmf(3ml)，加入1，1-羰基二咪唑(54mg，0.33mmol)，70℃条件下搅拌半小时后，加入4-苄基哌嗪(51mg，0.29mmol)，继续加热2小时。反应液加水(15ml)稀释，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯(10ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(5ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得无色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/三乙胺＝10∶20∶0.5)纯化，得化合物1(白色固体，81mg)。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.24(d，j＝8.9hz，1h)，7.95(s，1h)，7.55(s，2h)，7.47-7.39(m，3h)，7.36-7.25(m，5h)，7.03(dd，j＝8.9，2.3hz，1h)，6.96(d，j＝2.2hz，1h)，4.81(s，2h)，3.65-3.56(m，4h)，3.54-3.50(m，2h)，2.51-2.39(m，4h).esi-ms：m/z455.2[m+h]+.实施例2n-(1-(4-氰基苄基)哌啶-4-基)-2-((4-氧代-3-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物2)参照实施例1的方法制得化合物i-6。取化合物i-6(150mg，0.53mmol)溶于dmf(5ml)，加入1，1-羰基二咪唑(99mg，0.61mmol)，70℃条件下搅拌半小时后，加入1-boc-4-氨基哌啶(107mg，0.53mmol)，继续加热2小时。反应液加水(15ml)稀释，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯(10ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(5ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得无色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1∶1)纯化，得化合物i-7(黄色固体，78mg)。取化合物i-7(78mg，0.16mmol)溶于二氯甲烷(3ml)，加入三氟乙酸(1ml)，室温下搅拌过夜。用饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，转移至分液漏斗中，用二氯甲烷(5ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(5ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得化合物i-8(黄色固体，62mg)。取化合物i-8(62mg，0.16mmol)溶于二氯甲烷(5ml)，加入三乙胺(0.022ml)和对氰基溴苄(32mg，0.16mmol)，室温下搅拌4小时。反应液减压浓缩得无色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/三乙胺＝10∶40∶0.5)纯化，得化合物2(白色固体，61mg)。1hnmr(500mhz，cdcl3)δ8.33(d，j＝8.9hz，1h)，8.02(s，1h)，7.65(d，j＝8.0hz，2h)，7.60(d，j＝7.2hz，2h)，7.52-7.42(m，4h)，7.44(s，1h)，7.10(dd，j＝8.8，2.3hz，1h)，6.95(d，j＝2.3hz，1h)，6.38(s，1h)，4.62(s，2h)，3.98(s，1h)，3.58(s，2h)，2.80(s，2h)，2.31-2.20(m，2h)，2.10-1.95(m，2h)，1.42-1.21(m，2h).esi-ms：m/z494.2[m+h]+.实施例3n-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)-2-((4-氧代-3-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物3)参照实施例2的方法制得化合物3。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.26(d，j＝8.9hz，1h)，7.96(s，1h)，7.55(d，j＝6.8hz，2h)，7.45-7.38(m，3h)，7.21(d，j＝8.3hz，2h)，7.08(dd，j＝8.8，1.8hz，1h)，6.89(s，1h)，6.84(d，j＝8.4hz，2h)，6.37(d，j＝7.8hz，1h)，4.56(s，2h)，3.93-3.90(m，1h)，3.79(s，3h)，3.44(s，2h)，2.82-2.78(m，2h)，2.16-2.10(m，2h)，1.95-1.91(m，2h)，1.57-1.47(m，2h).esi-ms：m/z499.2[m+h]+.实施例47-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基)-2-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物4)取2，4-二羟基苯乙酮(1.53g，10mmol)和碳酸钾(10.1g，73mmol)置于丙酮(100ml)中，向此混合物中滴加苯甲酰氯(2.3ml)，70℃条件下反应3小时。冷却至室温，过滤，以丙酮(20ml)洗涤滤饼。滤液用10％冰醋酸调节至酸性，过滤，收集固体，冷水洗涤滤饼，红外灯下干燥，得化合物ii-3(淡黄色固体，1.6g)。取化合物ii-3(1.46g，4mmol)和醋酸钠(3.65g，55mmol)置于冰醋酸(17ml)中，130℃条件下加热5小时，冷却，抽滤，滤饼依次用5％nahco3溶液(20ml)洗涤，沸水(10ml)洗涤，红外灯下干燥，得化合物ii-4(淡红色固体，509mg)。取化合物ii-4(850mg，3.57mmol)和碳酸钾(2.96g，21.4mmol)置于dmf(15ml)中，室温条件下搅拌半小时，然后加入溴乙酸乙酯(1.19ml)，70℃反应2小时。反应混合物加水(45ml)稀释，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯(25ml×3)萃取，有机层以饱和食盐水(15ml×3)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得黄色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5∶1)纯化，得化合物ii-5(白色固体，509mg)。取化合物ii-5(509mg，1.57mmol)溶于二氯甲烷(27ml)和甲醇(3ml)溶液中，加入2n氢氧化钠的甲醇溶液(14ml)，室温搅拌过夜。反应液用1n盐酸调至酸性，抽滤并收集析出的固体。滤液用乙酸乙酯(20ml×3)萃取，饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，减压浓缩得白色固体。滤饼和滤液共得464mg化合物ii-6(白色固体)。取化合物ii-6(123mg，0.44mmol)溶于dmf(5ml)，加入1，1-羰基二咪唑(82mg，0.51mmol)，70℃条件下搅拌半小时后，加入4-苄基哌嗪(78mg，0.44mmol)，继续加热2小时。反应混合物加水(15ml)稀释，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯(10ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(5ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得无色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/三乙胺＝10∶20∶0.5纯化)，得化合物4(白色固体，78mg)。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.18(d，j＝8.8hz，1h)，7.93(dd，j＝6.6，3.1hz，2h)，7.59-7.52(m，3h)，7.40-7.22(m，5h)，7.09(d，j＝2.2hz，1h)，7.04(dd，j＝8.8，2.3hz，1h)，6.79(s，1h)，4.84(s，2h)，3.75-3.59(m，4h)，3.53(s，2h)，2.52-2.45(m，4h).esi-ms：m/z455.2[m+h]+.实施例5n-(1-(4-氰基苄基)哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物5)参照实施例4的方法制得化合物ii-6。取化合物ii-6(270mg，0.96mmol)溶于dmf(10ml)，加入1，1-羰基二咪唑(178mg，1.1mmol)，70℃条件下搅拌半小时后，加入1-boc-4-氨基哌啶(192mg，0.96mmol)，继续加热2小时。反应混合物加水(30ml)稀释，转移至分液漏斗中，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得无色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1∶1)纯化，得化合物ii-7(黄色固体，230mg)。取化合物ii-7(230mg，0.48mmol)溶于二氯甲烷(12ml)，加入三氟乙酸(2ml)，室温下搅拌过夜。反应液以饱和碳酸氢钠溶液淬灭反应，转移至分液漏斗中，用二氯甲烷(5ml×3)萃取，有机相以饱和食盐水(5ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得化合物ii-8(黄色固体，177mg)。取化合物ii-8(162mg，0.43mmol)溶于二氯甲烷(6m)，加入三乙胺(0.066ml)和对氰基溴苄(84mg，0.43mmol)，室温下搅拌4小时。反应液减压浓缩得无色液体，粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯/三乙胺＝10∶40∶0.5)纯化，得化合物5(白色固体，96mg)。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.21(d，j＝8.7hz，1h)，7.92(dd，j＝7.3，2.3hz，2h)，7.61(d，j＝8.2hz，2h)，7.58-7.51(m，3h)，7.46(s，1h)，7.43(s，1h)，7.09-7.00(m，2h)，6.80(s，1h)，6.39(d，j＝7.9hz，1h)，4.61(s，2h)，3.94(s，1h)，3.55(s，2h)，2.85-2.75(m，2h)，2.30-2.10(m，2h)，2.04-1.95(m，2h)，1.59-1.47(m，2h).esi-ms：m/z494.2[m+h]+.实施例62-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)-n-(1-(4-(三氟甲基)苄基)哌啶-4-基)乙酰胺(化合物6)参照实施例5的方法制得化合物6。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.21(d，j＝8.8hz，1h)，7.98-7.87(m，2h)，7.63-7.51(m，5h)，7.45(d，j＝8.0hz，2h)，7.07(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.03(d，j＝2.2hz，1h)，6.82(s，1h)，6.41(d，j＝8.1hz，1h)，4.62(s，2h)，3.96(d，j＝8.2hz，1h)，3.56(s，2h)，2.89-2.78(m，2h)，2.29-2.09(m，2h)，2.02-1.89(m，2h)，1.68-1.50(m，2h).esi-ms：m/z537.2[m+h]+.实施例7n-(1-(4-氟苄基)哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物7)参照实施例5的方法制得化合物7。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.21(d，j＝8.8hz，1h)，7.99-7.88(m，2h)，7.57(d，j＝1.7hz，2h)，7.55(t，j＝3.1hz，1h)，7.06(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，7.06-7.02(m，3h)，6.81(s，1h)，6.40(d，j＝7.8hz，1h)，4.61(s，2h)，3.95(d，j＝8.3hz，1h)，3.47(s，2h)，2.91-2.78(m，2h)，2.25-2.05(m，2h)，2.02-1.93(m，2h)，1.75-1.49(m，2h).esi-ms：m/z487.2[m+h]+.实施例8n-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物8)参照实施例5的方法制得化合物8。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.13(d，j＝8.7hz，1h)，7.92-7.80(m，2h)，7.55-7.41(m，3h)，7.15(d，j＝8.6hz，2h)，6.98(dd，j＝8.8，2.4hz，1h)，6.94(d，j＝2.2hz，1h)，6.78(d，j＝8.6hz，2h)，6.73(s，1h)，6.32(d，j＝7.9hz，1h)，4.53(s，2h)，3.86(d，j＝8.5hz，1h)，3.73(s，3h)，3.37(s，2h)，2.86-2.69(m，2h)，2.16-1.96(m，2h)，1.92-1.79(m，2h)，1.59-1.40(m，2h).esi-ms：m/z499.2[m+h]+.实施例9n-(1-苯甲酰哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物9)参照实施例5的方法制得化合物9。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.17(d，j＝8.7hz，1h)，7.89(dd，j＝7.3，2.3hz，2h)，7.59-7.47(m，3h)，7.42-7.30(m，5h)，7.07-7.03(m，1h)，7.00(d，j＝2.2hz，1h)，6.78(s，1h)，6.54(d，j＝8.2hz，1h)，4.69(s，1h)，4.59(s，2h)，4.19-4.10(m，1h)，3.79(s，1h)，3.19-3.05(m，2h)，3.01-2.85(m，1h)，2.05(s，1h)，1.99-1.88(m，1h)，1.55(s，2h).esi-ms：m/z483.2[m+h]+.实施例10n-(1-烟酰基哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物10)参照实施例5的方法制得化合物10。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.68(d，j＝3.8hz，2h)，8.21(d，j＝8.6hz，1h)，7.97-7.87(m，2h)，7.76(d，j＝7.9hz，1h)，7.61-7.49(m，3h)，7.38(dd，j＝7.6，4.9hz，1h)，7.05(d，j＝9.5hz，2h)，6.80(s，1h)，6.50(d，j＝7.5hz，1h)，4.63(s，2h)，4.21(d，j＝8.3hz，1h)，3.78(s，1h)，3.14-3.10(m，2h)，2.09-2.05(m，2h)，1.60-1.41(m，2h).esi-ms：m/z484.2[m+h]+.实施例11n-(1-(4-氯苯甲酰基)哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)乙酰胺(化合物11)参照实施例5的方法制得化合物11。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.21(d，j＝8.7hz，1h)，7.92(dd，j＝7.4，2.3hz，2h)，7.62-7.53(m，3h)，7.43-7.31(m，4h)，7，09-7.04(m，1h)，7.03(d，j＝2.1hz，1h)，6.81(s，1h)，6.48(d，j＝8.0hz，1h)，4.63(s，2h)，4.19(d，j＝7.7hz，1h)，3.21-3.09(m，2h)，2.09-2.03(m，2h)，1.58-1.32(m，2h).esi-ms：m/z517.2[m+h]+.实施例12(1-异烟酰基哌啶-4-基)-2-((4-氧代-2-苯基-4h-苯并吡喃-7-基)氧基)乙酰胺(化合物12)参照实施例5的方法制得化合物12。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.69(d，j＝5.9hz，1h)，8.19(d，j＝8.8hz，1h)，7.96-7.85(m，2h)，7.59-7.51(m，3h)，7.28(s，1h)，7.13-6.99(m，2h)，6.79(s，1h)，6.51(d，j＝8.1hz，1h)，4.68(s，1h)，4.61(s，2h)，4.17(s，1h)，3.63(s，1h)，3.27-2.99(m，3h)，2.09-2.04(m，2h)，1.62-1.58(m，2h).esi-ms：m/z506.2[m+na]+.实施例137-((1-(4-(4-氟苄基)哌嗪-1-基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物13)参照实施例5的方法制得化合物13。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.11(d，j＝9.2hz，1h)，7.91(dd，j＝6.5，3.0hz，2h)，7.61-7.49(m，3h)，7.15(dd，j＝8.3，5.6hz，2h)，6.98-6.90(m，4h)，6.88-6.70(m，1h)，3.89-3.67(m，4h)，3.31(s，2h)，2.32(s，2h)，2.07(s，2h)，1.73(s，6h).esi-ms：m/z523.2[m+na]+.实施例147-((1-(4-(4-甲氧基苄基)哌嗪-1-基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物14)参照实施例5的方法制得化合物14。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.11(d，j＝8.9hz，1h)，7.95-7.86(m，2h)，7.53(d，j＝4.5hz，3h)，7.09(d，j＝8.2hz，2h)，6.91(d，j＝7.8hz，2h)，6.77(d，j＝6.8hz，3h)，3.79-3.70(m，5h)，3.67(s，2h)，3.29(s，2h)，2.32(s，2h)，2.08(s，2h)，1.73(s，6h).esi-ms：m/z535.2[m+na]+.实施例157-((2-甲基-1-氧代-1-(4-(4-(三氟甲基)苄基)哌嗪-1-基)丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物15)参照实施例5的方法制得化合物15。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.13(d，j＝8.6hz，1h)，7.91(dd，j＝6.5，3.0hz，2h)，7.66-7.49(m，5h)，7.35(d，j＝8.0hz，2h)，6.96-6.89(m，2h)，6.79(s，1h)，3.79(s，2h)，3.69(s，2h)，3.38(s，2h)，2.35(s，2h)，2.17-1.99(m，2h)，1.74(s，6h).esi-ms：m/z551.2[m+h]+.实施例167-((1-(4-(3-甲氧基苄基)哌嗪-1-基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物16)参照实施例5的方法制得化合物16。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.11(d，j＝8.8hz，1h)，7.95-7.86(m，2h)，7.53(d，j＝5.2hz，3h)，7.14(t，j＝7.9hz，1h)，6.91(d，j＝8.2hz，2h)，6.79-6.68(m，4h)，3.78(s，2h)，3.73(s，3h)，3.69(s，2h)，3.33(s，2h)，2.35(s，2h)，2.10(s，2h)，1.73(s，6h).esi-ms：m/z535.2[m+na]+.实施例177-((2-甲基-1-氧代-1-(4-(3-(三氟甲基)苄基)哌嗪-1-基)丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-色烯(化合物17)参照实施例5的方法制得化合物17。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.12(d，j＝8.5hz，1h)，7.96-7.86(m，2h)，7.60-7.49(m，5h)，7.43-7.33(m，2h)，6.92(d，j＝8.9hz，2h)，6.78(s，1h)，3.89-3.75(m，4h)，3.40(s，2h)，2.35(s，2h)，2.11(s，2h)，1.74(s，6h).esi-ms：m/z573.2[m+na]+.实施例182-((4-(2-甲基-2-((4-氧代-2-苯基-4h-色烯-7-基)氧基)丙酰基)哌嗪-1-基)甲基)苯甲腈(化合物18)参照实施例5的方法制得化合物18：1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.11(d，j＝9.0hz，1h)，7.96-7.86(m，2h)，7.59(d，j＝7.6hz，1h)，7.56-7.52(m，3h)，7.50-7.43(m，1h)，7.37-7.29(m，2h)，3.87-3.69(m，4h)，3.57(s，2h)，2.42(s，2h)，2.22(s，2h)，1.73(s，6h).esi-ms：m/z530.2[m+na]+.实施例197-((1-(4-(2-氯-4-氟苄基)哌嗪-1-基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-色烯-4-酮(化合物19)参照实施例5的方法制得化合物19。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.12(d，j＝9.3hz，1h)，7.91(dd，j＝6.5，3.1hz，2h)，7.59-7.48(m，3h)，7.29(d，j＝8.3hz，1h)，7.03(dd，j＝8.5，2.5hz，1h)，6.96-6.89(m，2h)，6.86(dd，j＝8.3，2.6hz，1h)，6.78(s，1h)，3.86-3.59(m，4h)，3.43(s，2h)，2.40(s，2h)，2.16(s，2h)，1.73(s，6h).esi-ms：m/z535.2[m+h]+.实施例207-((1-(4-(3，5-双(三氟甲基)苄基)哌嗪-1-基)-2-甲基-1-氧代丙-2-基)氧基)-2-苯基-4h-苯并吡喃-4-酮(化合物20)参照实施例5的方法制得化合物20。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.13(d，j＝8.7hz，1h)，7.94-7.90(m，2h)，7.74-7.69(m，3h)，7.57-7.52(m，3h)，6.99-6.87(m，2h)，6.79(s，1h)，3.88-3.57(m，4h)，3.45(s，2h)，2.37(s，2h)，2.13(s，2h)，1.75(s，6h).esi-ms：m/z619.2[m+h]+.实施例212-(4-(2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代乙氧基)苯基)-4h-色烯-4-酮(化合物21)取邻羟基苯乙酮(1.00g，7.34mmol)溶于无水四氢呋喃(20ml)中，加入60％钠氢(0.73g，18.36mmol)，滴加对甲氧基苯甲醛(1.00g，7.34mmol)，室温搅拌过夜。反应混合物以1n盐酸调节ph至酸性，分出有机相，水相用乙酸乙酯(15ml×3)萃取。合并的有机相以饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得淡黄色液体。粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝20∶1)纯化，得化合物iii-3(黄色固体，1.47g)。取化合物iii-3(1.47g，1mmol)溶于dmso(40ml)中，加入碘(140mg)，加热回流2小时，冷却至室温。反应液以水(50ml)淬灭反应，转移至分液漏斗中，以乙酸乙酯萃取(50ml×3)，5％硫酸氢钠水溶液(50ml)洗涤，有机相以饱和食盐水(10ml×2)洗涤，无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩，所得黄色粗品经硅胶柱层析(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝4∶1)纯化，得化合物iii-4(白色固体，1.30g)。取化合物iii-4(249mg，0.99mmol)溶于无水二氯甲烷(15ml)中，氩气保护和-70℃条件下滴加三溴化硼溶液(1mol/l，3ml)，滴毕，反应恢复至室温，室温条件下搅拌过夜。将反应液倒入冰水(30ml)中，抽滤并收集析出的黄色固体，干燥。所得固体再以石油醚打浆，过滤，干燥，得化合物iii-5(淡黄色固体，144mg)。参照实施例1的方法制得化合物21。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.23(d，j＝7.9hz，1h)，7.88(d，j＝8.9hz，2h)，7.71-7.67(m，1h)，7.55(d，j＝8.4hz，1h)，7.41(t，j＝7.5hz，1h)，7.30(d，j＝5.7hz，4h)，7.07(d，j＝8.9hz，2h)，6.74(s，1h)，4.78(s，2h)，3.78-3.56(m，4h)，3.52(s，2h)，2.49-2.40(m，4h).esi-ms：m/z455.2[m+h]+.实施例22n-(1-(4-氰基苄基)哌啶-4-基)-2-(4-(4-氧代-4h-色烯-2-基)苯氧基)乙酰胺(化合物22)参照实施例21的方法制得化合物22。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.23(d，j＝7.7hz，1h)，7.91(d，j＝8.6hz，2h)，7.70(t，j＝7.4hz，1h)，7.61-7.50(m，3h)，7.46-7.38(m，3h)，7.06(d，j＝8.7hz，2h)，6.75(s，1h)，6.43(d，j＝7.8hz，1h)，4.55(s，2h)，4.05-3.85(m，1h)，3.54(s，2h)，2.85-2.71(m，2h)，2.29-2.09(m，2h)，1.99-1.90(m，2h)，1.69-1.47(m，2h).esi-ms：m/z494.2[m+h]+.实施例23n-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)-2-(4-(4-氧代-4h-色烯-2-基)苯氧基)乙酰胺(化合物23)参照实施例21的方法制得化合物23。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.22(d，j＝7.6hz，1h)，7.91(d，j＝8.7hz，2h)，7.69(t，j＝7.3hz，1h)，7.55(d，j＝8.3hz，1h)，7.41(t，j＝7.4hz，1h)，7.20(d，j＝8.3hz，2h)，7.04(d，j＝8.7hz，2h)，6.84(d，j＝8.3hz，2h)，6.74(s，1h)，6.41(d，j＝7.9hz，1h)，4.54(s，2h)，4.00-3.84(m，1h)，3.79(s，3h)，3.43(s，2h)，2.91-2.77(m，2h)，2.23-2.03(m，2h)，1.97-1.89(m，2h)，1.66-1.49(m，2h).esi-ms：m/z499.2[m+h]+.实施例24n-(1-苯甲酰哌啶-4-基)-2-(4-(4-氧代-4h-色烯-2-基)苯氧基)乙酰胺(化合物24)参照实施例21的方法制得化合物24。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.22(d，j＝6.8hz，1h)，7.90(d，j＝8.8hz，2h)，7.81-7.69(m，1h)，7.55(d，j＝8.2hz，1h)，7.46-7.40(m，2h)，7.39(s，4h)，7.04(d，j＝8.8hz，2h)，6.73(s，1h)，6.60(d，j＝7.9hz，1h)，4.59(s，1h)，4.55(s，2h)，4.26-4.10(m，1h)，3.80(s，1h)，3.06(s，2h)，2.02(s，2h)，1.50(s，2h).esi-ms：m/z483.2[m+h]+.实施例25n-(1-(4-甲氧基苄基)哌啶-4-基)-2-甲基-2-(4-(4-氧代-4h-色烯-2-基)苯氧基)丙酰胺参照实施例21的方法制得化合物25。1hnmr(300mhz，cdcl3)δ8.23(d，j＝7.7hz，1h)，7.85(d，j＝8.6hz，2h)，7.69(t，j＝7.4hz，1h)，7.56(d，j＝8.3hz，1h)，7.42(t，j＝7.4hz，1h)，7.17(d，j＝8.3hz，2h)，7.01(d，j＝8.6hz，2h)，6.81(d，j＝8.3hz，2h)，6.75(s，1h)，6.33(d，j＝8.0hz，1h)，3.88-3.81(m，1h)，3.77(s，3h)，3.40(s，2h)，2.77-2.73(m，2h)，2.13-2.07(m，2h)，1.91-1.87(m，2h)，1.59(s，6h)，1.46-1.35(m，2h).esi-ms：m/z527.2[m+h]+.实施例26化合物的抗肿瘤活性测试将肿瘤细胞(肝癌细胞hepg2，肺癌细胞系：a549)接种到96孔板上，每孔约2000个细胞，放入含5％的co2培养箱培养24h。将受试化合物溶于dmso配成母液，再用完全培养基稀释成9个浓度点。complexi抑制剂r419(plosone，2013，8(12)：e81870)作为对照参考。将配好的化合物溶液加入上述96孔板，继续放入含5％的co2培养箱培养72h后，采用mtt细胞活力检测试剂盒检测肿瘤细胞活力。测试结果如表2所示。表2、部分化合物对肿瘤细胞系的抑制活性(ic50值)化合物肿瘤细胞系ic50值(μm)r419hepg25.25r419a54924.315hepg29.346hepg27.168hepg28.6922hepg26.6723hepg26.7525hepg22.8425a54938.15实验结果表明，本发明化合物具有一定的抗肿瘤活性。实施例27化合物促进hepg2细胞ampk(thr172)磷酸化激活能力的测试将hepg2细胞铺板于12孔板中，24h后给药。将受试化合物(10μm)添加于12孔板中，0.1％dmso组设为阴性对照，r419(10μm)组设为阳性对照。给药24h后，丢弃培养基，以预冷的pbs洗涤2次，每孔加入100μl的裂解液，收集裂解液。采用westernblot技术检测ampk磷酸化情况，然后进行灰度扫描。将阴性对照组pampk/ampk的比值定义为1，受试化合物pampk/ampk的比值为阴性对照组的相对比值。pampk/ampk的比值反映化合物促进ampk磷酸化激活的能力。实验结果如表3所示。表3、化合物促进hepg2细胞ampk磷酸化激动的活性化合物编号pampk/ampk化合物编号pampk/ampkdmso1.0081.33r4191.82221.7851.57231.7561.65251.91实验结果(表3)表明，本发明的化合物具有显著的ampk激动活性。例如，化合物6，22，23，25显著增强ampk的磷酸化水平。这表明本发明的化合物是明确的ampk激动剂。实施例28化合物对线粒体复合物complexi抑制活性测试采用商用mitocheckcomplexiactivityassaykit(cayman，700930)试剂盒。配置a液(910μlcomplexiactivityassaybuffer+20μlkcn(100mm)+50μlff-bsaassay+20μlbovineheartmitochondriaassay)，配置b液(625μlcomplexiactivityassaybuffer+30μlnadhassay+20μlubiquinoneassay)。取96孔板，每孔加入50μla液。再向每孔加入20μl化合物溶液(双复孔)，以鱼藤酮(10μm)作为阳性对照药物，dmso作为阴性对照。然后，每孔再加入b液30μl。将96孔板立即置于酶标仪中，在340nm下进行读数，每30秒测试一次，持续15分钟。取吸光度为纵坐标，时间为横坐标，绘制各孔线性曲线，各曲线斜率反应nadh氧化速率。待测化合物各浓度下complexi活性(％)＝待测化合物斜率/阴性对照斜率×100％。实验结果如表4所示。表4、化合物对线粒体复合物complexi的抑制活性化合物浓度(μm)抑制率(％)r4191-3.6r4191048.2r4195081.82510.9251023.6255046.3实施例29片剂将实施例25中制得的化合物25(50g)、羟丙甲基纤维素e(150g)、淀粉(200g)、聚维酮k30适量和硬脂酸镁(1g)混合，制粒，压片。当前第1页12